JPH10501807A

JPH10501807A - 新規なオピオイドペプチドアンタゴニスト

Info

Publication number: JPH10501807A
Application number: JP8502047A
Authority: JP
Inventors: シラー，ピーター
Original assignee: アストラ・アクチエボラーグ
Priority date: 1994-06-20
Filing date: 1995-06-14
Publication date: 1998-02-17
Also published as: WO1995035316A1; US5733881A; NZ288775A; NO965457L; NO965457D0; FI965116A7; AU691630B2; FI965116L; CA2192484A1; IL114046A0; AU2811495A; FI965116A0

Abstract

(57)【要約】

Description

【発明の詳細な説明】新規なオピオイドペプチドアンタゴニスト発明の分野本発明はδオピオイド受容体アンタゴニストである新規な級のオピオイドペプチド類似体、それらの合成並びに鎮痛性化合物および免疫抑制化合物としてのそれらの使用に関する。背景および従来技術知られている非ペプチドδオピオイドアンタゴニストはナルトリンドール（na ltrindole）であり、それはP.S．Portoghese等、J．Med．Chem．31，281-282（1 988）に記載されている。ナルトリンドールは本発明化合物と同様のδアンタゴニスト効力を有するが、δ選択性が非常に小さい。さらにまたナルトリンドールは受容体結合アッセイで非常に高いμオピオイド受容体親和性(K_i ^μ＝12nM)を有し、モルモット回腸(GPI)アッセイで強力なμアンタゴニストの性質（K_e＝29nM ）を有する（P.S．Portoghese，J．Med．Chem．34，1757-1762（1991）参照）。別の知られたδ-アンタゴニストはR．Cotton等、Eur．J．Pharmacol．97，331 -332（1984）に記載されているエンケファリン類似体のN,N-ジアリル-Tyr-Aib-A ib-Phe-Leu-OH（ICI 174864）である。本出願に記載のδアンタゴニストと比較してICI 174864はδ選択性が遥かに低いし、MVDアッセイではアンタゴニスト効力が遥かに小さい（効力は40〜1000倍小さい）。 H-Tyr-Tic-Aaa-配列(Tic＝1,2,3,4-テトラヒドロイソキノリン-３-カルボン酸、Aaa＝芳香族アミノ酸残基)をＮ-末端に含有していて、非常に強力で高い選択性を有するアンタゴニストが最近P.W．Sehiller 等、FASEB J．6（No.4）Ａ1575(1992)、国際麻薬研 Sweden，７月10〜15日（1993）開催）、第２回日本ペプチド化学シンポジウム（静岡、11月９〜13日（1992）開催）、第22回ヨーロッパペプチドシンポジウム（ Interlaken、スイス、９月13〜19日（1992）開催）、Proc．Notl．Acad．Sci．U SA 89，11871-11875（1992）およびJ．Med．Chem．36，3182-3187（1993）において開示されている。すなわち本発明の課題は、高いδアンタゴニスト効力と高いδ選択性の両者を有するδオピオイドを見出すことにある。本発明本発明によれば、Ｎ-末端にH-Tyr-Tic-ジペプチドセグメントおよびペプチド配列の３-位に非芳族性アミノ酸残基を含有する下記式Ｉで定義されるペプチドが、δアンタゴニストとしての並はずれた効力およびδ受容体に対する高い選択性を有し、そしてμアンタゴニスト性質は全く欠除していることが見出された。本発明化合物は一般式Ｉ〔式中、たは-CH₂-CH=CH₂であり； R₃、R₄、R₅およびR₆は全てＨであるか、または R₄およびR₅は両者ともＨでありそしてR₃およびR₆はそれぞれC₁〜C₆アルキル基であるか、または R₃、R₅およびR₆は全てＨでありそしてR₄はＦ、Cl、Br、OH、NH₂またはNO₂であり； R₇はＣ＝ＯまたはCH₂であり； R₈はＨまたはC₁〜C₆アルキル基であり； R₉は下記の基から選択され、Ｆ、Cl、BrまたはＩであり、ｑは０〜３であり、 R₁₂はCOOH、CONH₂、CH₂OHまたはいずれかの追加のアミノ酸もしくはペプチドセグメントである）であるか、または R₁₀はである〕を有する。特に好ましい本発明化合物は式ＩにおいてR₁がＨまたはCH₃から選択され、R₂ がＨまたはCH₃から選択され、R₃がＨまたはCH₃から選択され、R₄がＨであり、R₅ がＨであり、R₆がＨまたはCH₃から選択され、R₇がCOまたはCH₂から選択され、R₈ がＨまたはCH₃から選択さ BrまたはＩであり、ｑは１〜３でありそしてR₁₂はCOOHである)から選択される化合物である。本発明のさらに好ましい化合物は式ＩにおいてR₁がＨまたはCH₃から選択され、R₂がＨまたはCH₃から選択され、R₃がCH₃であり、R₄がＨであり、R₅がＨであり、R₆がCH₃であり、R₇がCH₂であり、R₈がりそしてR₁₂はCOOHである）である化合物である。る化合物(ペプチド配列の３-位にシクロヘキシルアラニン〔Cha〕残基を含有する)である。この３-位のChaの置換が有意にδアンタゴニスト効力を高める。さらに好ましい本発明化合物は式ＩにおいてR₄およびR₅が水素でありそしてR₃ およびR₆が両者ともメチル基である化合物である。本発明による好ましい化合物はまた式ＩにおいてR₇が還元されたペプチド結合の一部分である化合物である。現在知られている本発明実施の最良の方法は、実施例１、２、５、11、12および15の化合物を用いることにある。合成ペプチド合成で使用する大抵のBoc-アミノ酸誘導体は商業的に入手し得る。2, 6-ジメチル-チロシン（Dmt）はJ.H Dygos等、Synthesis，No．8（August）pp.74 1-743（1992）に記載のようにして製造した。全てのペプチドは固相法で製造した。遊離Ｃ-末端カルボキシル基を有するペプチドの固相合成では通常のポリスチレン／ジビニルベンゼン樹脂を使用したが、一方ペプチドアミドはｐ-メチルベンズヒドリルアミン樹脂を使用することにより合成した。全てのペプチドの製造においてはアミノ基のBoc保護を用いた。合成は発明者の実験室で広く使用されてきたプロトコルに従って実施した（P.W Schiller等，Biochemistry 16，1831-1832（1977）参照）。カップリングはCH₂C l₂、DMFまたはそれらの混合物中でN,N′-ジシクロヘキシルカルボジイミド／１- ヒドロキシベンゾトリアゾール(DCC／HOBt)、N,N′-ジイソプロピルカルボジイミド／１-ヒドロキシベンゾトリアゾール、ベンゾトリアゾリルオキシトリス-（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェートまたはいずれか他の適当なカップリング剤を用いて遂行した。各カップリング工程の後にニンヒドリン着色試験によりカップリングの完了を慎重に調べた。十分に組み立てられたペプチド鎖を樹脂から開裂させ、スカベンジャーとしてのアニソールの存在下０℃ において液体HFで処理することにより完全に脱保護した（60〜90分間）。固相ペプチド合成から得た粗生成物は種々のクロマトグラフィー手法または他の方法による大規模な精製を必要とした。HF分裂および樹脂の抽出に続いてSeph adex（G-15またはG-25）でのゲル濾過を常套手段で遂行した。その後の種々の精製工程はSephadex G-25での分配クロマトグラフィー（ブタノール-酢酸-ピリジン-水の種々の２相系）、イオン交換クロマトグラフィー（DEAE-Sephadex、SP-SephadexおよびCM-セルロース）および１％トリフルオロ酢酸中におけるメタノールの一次勾配を用いるオクタデカシリル-シリカカラムでの逆相クロマトグラフィー（低圧）を包含した。必要により、均質性にするための最終精製は半調製HPLCにより遂行した。分離課題に左右されるが、１回の実施につき２〜20mgのペプチド物質の精製を可能ならしめる半調製μ-Bondapak C-18カラム(Waters社製；0.7×25cm)を使用した。ある種の高感度、高効率の分析手法を用いて、製造したペプチドの均質性を証明しそしてそれらの構造を同定した。少なくとも２種の相異なる溶媒系での薄層クロマトグラフィーを用いて純度を確認した。さらに、２種または３種の相異なる溶媒系での分析用HPLCを高感度の純度試験として実験室で常套的に用いた。ペプチド構造の証明は主としてアミノ酸分析および高速原子衝撃質量スペクトロメトリー（FAB-MS ）に基づいた。アミノ酸分析の場合には、ペプチドを脱気管中において110℃で2 4時間少量のフェノール含有６Ｎ HCl中で加水分解した（ある場合にはアミノ酸の減成を考慮して、12時間および48時間継続の加水分解をも実施した）。加水分解物は、システムAAコンピューティングインテグレータを具備したBeckman Mode l 121Ｃアミノ酸分析器で分析した。FAB質量スペクトロメトリーを用いてペプチドの正確な分子量を確認した。本発明の詳述以下に本発明を実施例により詳述する。実施例１H-Tyr-Tic-Cha-Phe-OH の製造 Boc-Phe-O-樹脂（１ｇ，0.61ミリモルBoc-Phe／ｇ樹脂；Peninsula，Belmont ，CA）を次の順序の各試薬：CH₂Cl₂(３×１分)、CH₂Cl₂中の50％(ｖ／ｖ)TFA（3 0分）、CH₂Cl₂(５×１分)、CH₂Cl₂中の10％（ｖ／ｖ）DIEA（２×５分）、CH₂Cl₂ （５×１分）で洗浄した。次いでBoc-Cha-OH（412mg，1.52ミリモル）をCH₂Cl₂ ／DMF(３：１，ｖ／ｖ)中でHOBt(205mg，1.52ミリモル)およびDCC（313mg，1.52 ミリモル）を用いて17時間カップリングさせた。次に樹脂をCH₂Cl₂（３×１分）、EtOH（１分）、CH₂Cl₂（３×１分）で洗浄した。各洗浄液および各反応の上記順序を以下の変形の下でそれぞれの残基の添加に対して繰り返した。 Boc-Tic-OHのカップリング後に樹脂をCH₂Cl₂／DMF(３：１，ｖ／ｖ)で洗浄し、同一量のBoc-Tic-OH、HOBtおよび、CH₂Cl₂／DMF(３：１，ｖ／ｖ)中のDCCを用いるリカップリング工程をさらに17時間遂行した。同一のリカップリング工程をさらに遂行してBoc-Tyr(Boc)-OHをカップリングさせた。CH₂Cl₂中の50％（ｖ／ｖ）TFA（30分）による最後の脱保護の後に樹脂をCH₂Cl₂（３×１分）およびEtO H（３×１分）で洗浄し次いでデシケータ中で乾燥した。乾燥樹脂を20mlのHFおよび１mlのアニソール（樹脂のグラム当たり）で、最初は０℃で90分間次に室温で15分間処理した。HFの蒸発後に樹脂をEt₂Oで３回続いて７％AcOHで３回抽出した。粗ペプチドは、合一した酢酸抽出物の凍結乾燥によって固形形態で得られた。このペプチドは0.5Ｎ AcOH中のSephadex-G-25カラムでのゲル濾過、次いで１％TFA中で０〜80％MeOHの一次勾配を有するオクタデカシルシリカカラムでの逆相クロマトグラフィーにより精製した。溶媒蒸発後に純粋なペプチドを濃AcOH中に溶解しそして凍結乾燥により固形形態で得た。収量：45mg FAB-MS：MH⁺＝640 TLC（シリカ） Rf 0.75 n-BuOH/AcOh/H₂O (4/1/5，有機相) Rf 0.70 n-BuOH/ピリジン/AcOH/H₂O (15/10/3/12) アミノ酸分析：Tyr 0.96，Phe 1.00 実施例２H-Tyr-Tic ψ〔CH₂-NH〕Cha-Phe-OHの製造このペプチドの合成は、Tic²とCha残基との間の還元されたペプチド結合の導入が、Boc-Ticアルデヒドと樹脂結合のH-Cha-Pheジペプチドのアミノ基との還元アルキル化反応を必要とした以外は、同一樹脂を用いて実施例１の場合のようにして遂行された。Ｎ-ｔ-ブトキシカルボニル-Ｌ-1,2,3,4-テトラヒドロイソキノリン-３-Ｎ-メトキシ，Ｎ-メチルアミドを経由するＮ-ｔ-ブトキシカルボニル-Ｌ-1,2,3,4-テトラヒドロイソキノリン-３-アルデヒド（Boc-Ticアルデヒド）の製造 CH₂Cl₂に溶解したBoc-Tic-OH(2.8g，10ミリモル)およびトリエチルアミン（1. 33ml，10ミリモル）の撹拌溶液にBOP(ベンゾトリアゾール-１-イル-オキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート)（3.48g，10ミリモル）を加えた。５分後に、この溶液にＮ-ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩(1.2 ｇ，12ミリモル)およびトリエチルアミン(1.68ml，12ミリモル)を加えた。反応を17時間行った。次いで反応混合物をジクロロメタンで希釈し、３Ｎ HCl、飽和 NaHCO₃水溶液および飽和NaCl水溶液で洗浄した。有機溶液をMgSO₄で乾燥し、溶媒を蒸発させた。生成する粗生成物のＮ-ｔ-ブトキシカルボニル-Ｌ-1,2,3,4-テトラヒドロイソキノリン-３-Ｎ-メトキシ、Ｎ-メチルアミドをEtOAc／ヘキサン( １：２，ｖ／ｖ)中のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィーにより精製した。収量：2.1ｇ（65％），油状物 TLC（シリカ） Rf 0.57 EtOAc/ヘキサン(1/1) Rf 0.30 EtOAc/ヘキサン(1/2) NMR(CDCl₃)δ 1.45(9H，t-ブチル)，3.00(2H，H-4)，3.18(3H，NCH₃)，3.8(3H ，OCH₃)，4.42-4.90(3H，2H-1および1H-3)，7.17(4H，ar) エーテル30ml中に溶解したＮ-ｔ-ブトキシカルボニル-Ｌ-1,2,3,4-テトラヒドロイソキノリン-３-Ｎ-メトキシ、Ｎ-メチルアミド(1.2ｇ，４ミリモル)の撹拌溶液に水素化アルミニウムリチウム190mg（５ミリモル）を加えた。還元反応を１時間遂行し、次いで反応混合物を水（20ml）中のKHSO₄（954mg，７ミリモル）の溶液で加水分解した。次いで水性相を分離し、50mlずつのエーテルで３回抽出した。４つの有機相を合一し、３Ｎ HCl、飽和NaHCO₃水溶液および飽和NaCl水溶液で洗浄し、最後にMgSO₄で乾燥した。溶媒の蒸発後にアルデヒドが油状物として純粋な形態で得られた。収量：635mg（60％），油状物 TLC（シリカ） Rf 0.84 EtOAc/ヘキサン(1/1) Rf 0.57 EtOAc/ヘキサン(1/2) NMR(CDCl₃)δ 1.5(9H，t-ブチル)，3.0-3.27(2H，H-4)，4.4-4.8(3H，1H-3および2H-1)，7.0-7.2(4H，ar)，9.43(1H，CHO)Boc-Tic アルデヒドとH-Cha-Phe-O樹脂との間の還元アルキル化反応樹脂をDMF（２×１分）で洗浄し、次いで１％AcOH含有のDMF中におけるBoc-Ti cアルデヒド（392mg，1.52ミリモル）をこの樹脂に加えた。次にナトリウムシアノボロヒドリド(115mg，1.83ミリモル)を40分かけて滴加し、反応を３時間継続させた。Ｎ-末端チロシン残基のカップリングおよび脱保護の後に、ペプチドを実施例１に記載のように樹脂から開裂させ、精製しそして凍結乾燥した。収量：285mg FAB-MS：MH⁺＝627 TLC（シリカ） Rf 0.73 n-BuOH/AcOH/H₂O(4/1/5，有機相) Rf 0.85 n-BuOH/ピリジン/AcOH/H₂O(15/10/3/12) 実施例３〜14の化合物は前記実施例１に記載のようにして合成し、実施例15の化合物は前記実施例２に記載のようにして合成した。表１に記載の本発明化合物がδアンタゴニストとして合成され、試験された。 δオピオイドアンタゴニストの試験管内薬理試験マウス輸精管（MVD）およびモルモット回腸（GPI）の電気的に誘発された収縮の阻害に基づくバイオアッセイを実施した。GPIアッセイにおいては、オピオイド作用は主としてμオピオイド受容体によって仲介されるが、MVDアッセイにおいては収縮の阻害は殆どδオピオイド受容体との相互作用による。これらのアッセイにおけるアンタゴニスト効力は、いわゆるK_e-値〔H.W．Kosterlitz & A.J． Watt，Br．J．Pharmacol．33，266-276(1968)〕として表示される。アゴニスト効力は、IC₅₀値（電気的に誘発された収縮の50％阻害を生ずるアゴニストの濃度）として表示される。単離された器官標本を使用したバイオアッセイ GPIおよびMVDの各バイアッセイはP.W．Schiller等〔Biochem．Biophys．Res． Commun 85，1332-1338(1978)〕およびJ.DiMaio等〔J．Med．Chem．25，1432-143 8(1982)〕によって報告されているように実施した。log用量-反応曲線は、それぞれ回腸および血管標本に対する標準として〔Leu⁵〕エンケファリンを使用して測定した。そして試験する化合物のIC₅₀値は、A.A．Waterfield等〔Eur．J.Pham acol．58，11-18(1979)〕によってノルマライズ(normalized)した。δオピオイドアンタゴニストに対するK_e値は、固定されたアンタゴニスト濃度（ａ）の存在下および不存在下で得られたIC₅₀値の比（DR）から測定した(K_e＝ａ／(DR-1))〔 H.W．Kosterlitz & A.J．Watt，Br.J．Phamacol．33，266-276(1968)〕。これらの測定は２種の異なるδ-選択性アゴニストのDPDPEおよび〔D-Ala²〕デルトルフィンＩを用いて、MVDアッセイで行った。結論 -化合物は全て大きなδアンタゴニスト性質を示す。 -ペプチド配列の３-位にシクロヘキシルアラニン(Cha)残基を含有するペプチドは３-位に芳香族アミノ酸を有する対応するペプチドよりも強いδアンタゴニストである。 -化合物の全ては10μＭ程度の濃度でGPIアッセイにおいてμアンタゴニスト活性を全く示さなかった。 -GPIアッセイにおいて大部分の化合物は極めて弱い部分的なμアゴニスト活性を示した（電気的に誘発された収縮の最大阻害は20％〜53％であった）。オピオイド受容体結合アッセイ化合物のμおよびδオピオイド受容体結合定数（K_i ^μ，K_i ^δ）をラットの脳膜標本の結合部位からの相対的選択性μ-およびδ-放射リガンドの置換によって測定した〔ChengおよびPrusoffの式（Y.C．ChengおよびW.H．Prusoff， Biochem．Pharmacol．22，3099-3102(1973)）を基にして測定したIC₅₀値から計算した〕。オピオイド受容体結合研究全ての新規類似体のμ-、δ-およびκ-オピオイド受容体親和性を、ラットの脳膜結合部位からのμ-、δ-およびκ-選択性放射リガンドの置換を基にした結合アッセイで測定した。κ-リガンドの場合においては、κ-結合部位の相対的割合はラットの脳におけるよりもモルモットの脳において高いので、モルモットの脳ホモジネートを使用した。本発明者等の実験室において使用されている実験操作はPasternak等〔Mol．Pharmacol．11，340-351(1975)〕により記載されている結合アッセイの変形型を示す。カナダの飼育実験室からの雄性スプラグ-ダウレー(Sprague-Dawley)ラット(300〜350ｇ)を断首し、小脳の除去後に脳を氷冷標準緩衝液(50mMトリス-HCl，pH7.7)30容量中でホモジナイズした。30,000×ｇ、４ ℃で30分間遠心分離後に膜を標準緩衝液の最初の容量中で再構成し次いで37℃で 30分間インキュベートした（結合した内因性リガンドを放出するために）。次の遠心分離および新鮮な標準緩衝液の初期の容量中のペレットの再懸濁によって、最終膜懸濁液を得た。この膜標本の一部（２ml）を、試験するペプチドおよび以下に示す放射リガンドの１種を以下に示す最終濃度で含有する標準緩衝液１mlを使用して25℃で１〜２時間インキュベートした。〔³H〕DAMGO，μ-選択性，0.7n M；〔³H〕DSLET，〔³H〕DPDPE，または〔³H〕TIPP，δ-選択性，1.0nM; および〔³H〕Ｕ69,563，κ-選択性，0.5nM_oインキュベーションは４℃の真空下におけるWhatman GF／Ｂフィルターを通した濾過により終了した。氷冷標準緩衝液５mlずつで２回洗浄した後にフィルターをシンチレーションバイアルに移し、そしてProtosol(New England Nuclear社製)１mlで3 0分処理し次いで酢酸0.5mlおよびAquasol(New England Nuclear社製)10mlを加えた。30分振盪した後にバイアルを40〜45％の効率でカウントした。実験は全て二重に遂行し、少なくとも３回反復した。３種の放射リガンドのそれぞれの特異的結合は１ミクロモルの濃度のそれぞれ冷DAMGO、DSLETおよびＵ69.563の存在下においてインキュベーションを遂行することによって定義した。特異的結合の半- 最大阻害（IC₅₀）の値は半対数のプロットからグラフ的に得た。それから、測定したIC₅₀値から結合阻害定数（K_i）をChengおよびPrusoffの式〔Biochem．Pharm acol．22，3099-3102(1973)〕を基にして計算した。μ-、δ-およびκ-代表的結合アッセイにおけるK_i-値の比は調査下における化合物の受容体選択性の測定値である（例えばK_i ^μK_i ^δはδ-受容体対μ-受容体の選択性を示す）。本発明による化合物はκ-受容体に対して有意な親和性を全く有していなかった。可能な用途 E.E．Abdelhamid等〔J．Pharmacol．Exp．Ther．258，299-303(1991)〕の結果によって示唆されるように、δアンタゴニストはμアゴニスト型（例えばモルフィン）と組み合わせて用いることにより耐性および依存性の発生を防止し得る。また本発明によるδアンタゴニストは免疫抑制剤として治療上有用であることもある。δ-選択性がより低く、純度もより低いδアンタゴニストのナルトリンドールの免疫抑制作用は、K．Arakawa等， Transplantation Proc．24，696-697(1992); Transplantation 53，951-953（19 92）に記載されている。略記 Aib＝α-アミノイソ酪酸 Boc＝tert-ブトキシカルボニル Cha＝シクロヘキシルアラニン DAMGO＝H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe(N^αMe)-Gly-オール DCC＝ジシクロヘキシルカルボジイミド DIEA＝ジイソプロピルエチルアミン Dmt＝2′,6′-ジメチルチロシン DPDPE＝〔D-Pen²,D-Pen⁵〕エンケファリン DSLET＝H-Tyr-D-Ser-Gly-Phe-Leu-The-OH FAB-MS＝高速原子衝撃質量スペクトロメトリー GPI＝モルモット回腸 HOBt＝１-ヒドロキシベンゾトリアゾール MVD＝マウス輸精管 Tic＝1,2,3,4-テトラヒドロイソキノリン-３-カルボン酸 TIPP＝H-Tyr-Tic-Phe-Phe-OH Ｕ69,593＝(5α,7α,8β)-(−)-Ｎ-メチル-〔７-（１-ピロリジニル）-１-オキサスピロ〔4,5〕デカ-８-イル〕ベンゼンアセトアミド

【手続補正書】特許法第１８４条の８【提出日】１９９６年７月５日【補正内容】〔式中、たは-CH₂-CH=CH₂であり； R₃、R₄、R₅およびR₆は全てＨであるか、または R₄およびR₅は両者ともＨでありそしてR₃およびR₆はそれぞれC₁〜C₆アルキル基であるか、または R₃、R₅およびR₆は全てＨでありそしてR₄はＦ、Cl、Br、Ｉ、OH、NH₂またはNO₂ であり； R₇はＣ＝ＯまたはCH₂であり； R₈はＨまたはC₁〜C₆アルキル基であり； R₉は下記の基請求の範囲１．式〔式中、たは-CH₂-CH=CH₂であり； R₃、R₄、R₅およびR₆は全てＨであるか、または R₄およびR₅は両者ともＨでありそしてR₃およびR₆はそれぞれC₁〜C₆アルキル基であるか、または R₃、R₅およびR₆は全てＨでありそしてR₄はＦ、Cl、Br、Ｉ、OH、NH₂またはN O₂であり； R₇はＣ＝ＯまたはCH₂であり； R₈はＨまたはC₁〜C₆アルキル基であり； R₉は下記の基から選択され、Ｆ、Cl、BrまたはＩであり、ｑは０〜３であり、 R₁₂はCOOH、CONH₂、CH₂OHまたはいずれかの追加のアミノ酸もしくはペプチドセグメントである）であるか、または R₁₀はである〕で表される化合物。２．R₁がＨまたはCH₃から選択され、R₂がＨまたはCH₃から選択され、R₃がＨまたはCH₃から選択され、R₄がＨであり、R₅がＨであり、R₆がＨまたはCH₃から選択され、R₇がCOまたはCH₂から選択され、 (ここでR₁₁はＨ、NO₂、Ｆ、Cl、BrまたはＩであり、ｑは１〜３でありそしてR₁₂ はCOOHである)から選択される請求項１記載の化合物。３．Ｒ₁がＨまたはCH₃から選択され、Ｒ₂がＨまたはCH₃から選択され、R₃がCH₃ であり、R₄がＨであり、R₅がＨであり、R₆がCH₃であり、R₇がCH₂であり、R₈がＨまたはCH₃から選択され、R₉が R₁₂はCOOHである）である請求項１記載の式Ｉの化合物。４．R₇が還元されたペプチド結合の一部分である請求項１記載の式Ｉの化合物。５．R₄およびR₅が水素でありそしてR₃およびR₆が両者ともメチル基である請求項１記載の式Ｉの化合物。７．H-Tyr-Tic-Cha-Phe-OH； H-Tyr-Ticψ〔CH₂-N〕Cha-Phe-OH； H-Tyr-Tic-Cha-Pha-NH₂； H-Tyr-Tic-Leu-Phe-OH； H-Tyr-Tic-Val-Phe-OH； H-Tyr-Tic-Nva-Phe-OH； H-Tyr-Tic-Nle-Phe-OH； H-Tyr-Tic-Ile-Phe-OH； H-Tyr-Tic-Thr-Phe-OH； H-Tyr-Tic-Met-Phe-OH； H-Dmt-Tic-Cha-Phe-OH； H-D-Dmt-Tic-Cha-Phe-OH； H-Dmt-Tic-Cha-Phe-NH₂； H-Tyr(3′-I)-Tic-Cha-Phe-OH；または H-Dmt-Ticψ〔CH₂-NH〕Cha-Phe-OH である請求項１記載の化合物。８．H-Tyr-Tic-Cha-Phe-OH； H-Tyr-Ticψ〔CH₂-NH〕Cha-Phe-OH； H-Tyr-Tic-Val-Phe-OH； H-Dmt-Tic-Cha-Phe-OH； H-D-Dmt-Tic-Cha-Phe-OH；および H-Dmt-Ticψ〔CH₂-NH〕Cha-Phe-OH である請求項７記載の化合物。９．治療に使用するための請求項１記載の化合物。 10．鎮痛剤として使用するための請求項１記載の化合物。 11．免疫抑制剤として使用するための請求項１記載の化合物。 12．カップリング工程を不活性溶媒中で適当なカップリング剤を用いて遂行する、固相合成による請求項１記載の式Ｉのペプチドの製造方法。 13．不活性溶媒がCH₂Cl₂、DMFまたはCH₂Cl₂／DMF(３：１ｖ／ｖ)の混合物であり、カップリング剤がN,N′-ジシクロヘキシルカルボジイミド／１-ヒドロキシベンゾトリアゾール、N,N′-ジイソプロピルカルボジイミド／１-ヒドロキシベンゾトリアゾールまたはベンゾトリアゾリルオキシトリス-（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェートである請求項12記載の方法。 14．ジペプチド樹脂のBoc-Tic-OH残基の付加のための追加工程(リカップリング工程)およびペプチド樹脂へのBoc-Tyr(Boc)-OH残基の付着のための追加工程（リカップリング工程）を遂行する請求項13記載の方法。 15．Boc-Ticアルデヒドと樹脂結合ペプチドのアミノ基との反応が、酸性化したD MF中でナトリウムシアノボロヒドリドを用いる還元アルキル化をベースとする、 Tic²残基と３-位残基との間に１個の還元されたペプチド結合（-CH₂-NH-）を含有する請求項１記載の式Ｉのペプチドの製造方法。 16．Tic²残基と３-位残基との間に１個の還元されたペプチド(-CH₂-NH-)を有する請求項12記載のペプチドを製造するのに用いるＮ-ｔ-ブトキシカルボニル-Ｌ- 1,2,3,4-テトラヒドロイソキノリン-３-アルデヒド(Boc-Ticアルデヒド)の製造方法。 17．１種以上の製薬担体と一緒に請求項１記載の化合物の有効量を含有する製剤。 18．鎮痛剤として使用する医薬の製造における請求項１記載の式Ｉの化合物の使用。 19．免疫抑制剤として使用する医薬の製造における請求項１記載の式Ｉの化合物の使用。 20．請求項１記載の式Ｉの化合物の有効量を、治療を必要とする患者に投与することからなる疼痛の治療方法。 21．請求項１記載の式Ｉの化合物の有効量を、治療を必要とする患者に投与することからなる免疫抑制作用を得る方法。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ

Claims

【特許請求の範囲】１．式〔式中、たは-CH₂-CH=CH₂であり； R₃、R₄、R₅およびR₆は全てＨであるか、または R₄およびR₅は両者ともＨでありそしてR₃およびR₆はそれぞれC₁〜C₆アルキル基であるか、または R₃、R₅およびR₆は全てＨでありそしてR₄はＦ、Cl、Br、OH、NH₂またはNO₂であり； R₇はＣ＝ＯまたはCH₂であり； R₈はＨまたはC₁〜C₆アルキル基であり； R₉は下記の基から選択され、Ｆ、Cl、BrまたはＩであり、ｑは０〜３であり、 R₁₂はCOOH、CONH₂、CH₂OH₂またはいずれかの追加のアミノ酸もしくはペプチドセグメントである）であるか、または R₁₀はである〕で表される化合物。２．R₁がＨまたはCH₃から選択され、R₂がＨまたはCH₃から選択され、R₃がＨまたはCH₃から選択され、R₄がＨであり、R₅がＨであり、R₆がＨまたはCH₃から選択され、R₇がCOまたはCH₂から選択され、 (ここでR₁₁はＨ、NH₂、Ｆ、Cl、BrまたはＩであり、ｑは１〜３でありそしてR₁₂ はCOOHである)から選択される請求項１記載の化合物。３．R₁がＨまたはCH₃から選択され、R₂がＨまたはCH₃から選択され、R₃がCH₃であり、R₄がＨであり、R₅がＨであり、R₆がCH₃であり、R₇がCH₂であり、R₈がＨまたはCH₃から選択され、R₉が R₁₂はCOOHである）である請求項１記載の式Ｉの化合物。４．R₇が還元されたペプチド結合の一部分である請求項１記載の式Ｉの化合物。５．R₄およびR₅が水素でありそしてR₃およびR₆が両者ともメチル基である請求項１記載の式Ｉの化合物。７．H-Tyr-Tic-Cha-Phe-OH； H-Tyr-Ticψ〔CH₂-NH〕Cha-Phe-OH； H-Tyr-Tic-Cha-Pha-NH₂； H-Tyr-Tic-Leu-Phe-OH； H-Tyr-Tic-Val-Phe-OH； H-Tyr-Tic-Nva-Phe-OH； H-Tyr-Tic-Nle-Phe-OH； H-Tyr-Tic-Ile-Phe-OH； H-Tyr-Tic-Thr-Phe-OH； H-Tyr-Tic-Met-Phe-OH； H-Dmt-Tic-Cha-Phe-OH； H-D-Dmt-Tic-Cha-Phe-OH； H-Dmt-Tic-Cha-Phe-NH₂； H-Tyr(3′-I)-Tic-Cha-Phe-OH；または H-Dmt-Ticψ〔CH₂-NH〕Cha-Phe-OH である請求項１記載の化合物。８．H-Tyr-Tic-Cha-Phe-OH； H-Tyr-Ticψ〔CH₂-NH］Cha-Phe-OH； H-Tyr-Tic-Val-Phe-OH； H-Dmt-Tic-Cha-Phe-OH； H-D-Dmt-Tic-Cha-Phe-OH；および H-Dmt-Ticψ〔CH₂-NH〕Cha-Phe-OH である請求項７記載の化合物。９．治療に使用するための請求項１記載の化合物。 10．鎮痛剤として使用するための請求項１記載の化合物。 11．免疫抑制剤として使用するための請求項１記載の化合物。 12．カップリング工程を不活性溶媒中で適当なカップリング剤を用いて遂行する、固相合成による請求項１記載の式Ｉのペプチドの製造方法。 13．不活性溶媒がCH₂Cl₂、DMFまたはCH₂Cl₂／DMF(３：１ｖ／ｖ)の混合物であり、カップリング剤がN,N′-ジシクロヘキシルカルボジイミド／１-ヒドロキシベンゾトリアゾール、N,N′-ジイソプロピルカルボジイミド／１-ヒドロキシベンゾトリアゾールまたはベンゾトリアゾリルオキシトリス-(ジメチルアミノ)ホスホニウムヘキサフルオロホスフェートである請求項12記載の方法。 14．ジペプチド樹脂のBoc-Tic-OH残基の付加のための追加工程(リカップリング工程)およびペプチド樹脂へのBoc-Tyr(Boc)-OH残基の付着のための追加工程（リカップリング工程）を遂行する請求項13記載の方法。 15．Boc-Ticアルデヒドと樹脂結合ペプチドのアミノ基との反応が、酸性化したD MF中でナトリウムシアノボロヒドリドを用いる還元アルキル化をベースとする、 Tic²残基と３-位残基との間に１個の還元されたペプチド結合（-CH₂-NH-）を含有する請求項１記載の式Ｉのペプチドの製造方法。 16．Tic²残基と３-位残基との間に１個の還元されたペプチド(-CH₂-NH-)を有する請求項12記載のペプチドを製造するのに用いるＮ-ｔ-ブトキシカルボニル-Ｌ- 1,2,3,4-テトラヒドロイソキノリン-３-アルデヒド(Boc-Ticアルデヒド)の製造方法。 17．１種以上の製薬担体と一緒に請求項１記載の化合物の有効量を含有する製剤。 18．鎮痛剤として使用する医薬の製造における請求項１記載の式Ｉの化合物の使用。 19．免疫抑制剤として使用する医薬の製造における請求項１記載の式Ｉの化合物の使用。 20．請求項１記載の式Ｉの化合物の有効量を、治療を必要とする患者に投与することからなる疼痛の治療方法。 21．請求項１記載の式Ｉの化合物の有効量を、治療を必要とする患者に投与することからなる免疫抑制作用を得る方法。