JPH10502072A - 中国薬草抽出物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 アトピー性疾患、非アトピー性湿疹または乾癬の処置に適した物質で、これは、

Description

【発明の詳細な説明】 中国薬草抽出物 本発明は、伝統的な中国薬草およびそれを含有する医薬組成物に関し、この組 成物は、アトピー性疾患の処置、特にアトピー湿疹、および非アトピー性湿疹お よび乾癬などの他の皮膚疾患の処置に有用である。 中国薬草なる用語は、伝統的医術を行っている者が用いるいかなる薬草をも意 味し、中国産に限られるものでないと理解されるべきである。 伝統的中国医師は、欧米とまったく異なる解剖および診断系を用いて、疾患を 処置する。処方される療法は常に複数の中国薬草からなっており、それは服用の ために伝統的な煎じる方法、すなわち水で薬草を煮る事により製造される。薬草 は取り除かれ、液が患者に適切に経口、非経口または局所投与すべく用いられる 。 この種の療法でなされる処方には、十種以上の薬草を要することがあり、伝統 的中国医術では、このすべての薬草がバランスのとれた処方をつくるために必要 とされている。処方は、疾患の種々の証および症状を処置する際に様々な機能を もたらす薬草のヒエラルキーからなるバランスのとれた全体であるとみられる。 特定のヒトの疾患に受け入れられる臨床効果を有し、同時に毒性が低い薬草の 検証は長年、観察と試行錯誤でなされてきた。ある症例においては、伝統的な中 国薬草の処方は、西洋医学が適切に対処できなかった疾患を効果的に治療できる 。 複数の中国薬草の使用に適応するとみられる疾患は、あいまいで複雑な病変が ある疾患である。典型例はアトピー性湿疹であり、多くの種々のメディエータ、 そのいくつかのみが知られている、により引き起こされ、維持される皮膚の慢性 炎症が存在する。あるものは、抗原−抗体反応に関する。他の多くは疑われてい るが、はっきりしていない。単一の治療剤、例えば、プロスタグランジンなどの 特別の炎症メディエータと相互作用を起こす非ステロイド抗炎症剤は、重いアト ピー性湿疹に効かない。他方、コルチコステロイドは、多様な薬力学的作用を有 し、湿疹に有効である。それ故に、重いアトピー性湿疹の治療の処置は、おそら く細胞および体液内で免疫過程に関係するであろう多くの病理的変化を同時に攻 撃することを要する。コルチコステロイドおよびいくつかの免疫抑制剤は、かか る攻撃に要する広い活性領域を有しているが、その毒性のために使用は限られて いる。湿疹の治療に知られている伝統的中国薬草療法は、コルチコステロイドと 免疫抑制剤の必要とする活性を有し、毒性がない。 下記の薬草およびそのピンイン（Ｐin yin）等価物またはその薬物学に名称が 委陵菜(Ｈerba Ｐotentilla Ｃhinensis)、川木通(Ｃaulis Ｃlematis armandii )、懐慶地黄(Ｒadix Ｒehmannia)、甘草(Ｒadix Ｇlycyrrhiza)、赤芍(Ｒadix Ｐaeonia rubra)、白鮮皮(Ｃortex Ｄictamni radicis)、淡竹葉(Ｈerba Ｌopat heri)および荊芥穂(Ｓpika Ｓchizonepetae)のいずれかより選択された一つとの 中国薬草の処方は、アトピー性湿疹および乾癬を効果的に処置するのに用いられ て来た。アトピー性湿疹の小児におけるかかる処方の臨床効果は、シーハン等(S heehan et al)によりBritish Journal of Dermatorogy（1992）126 pp179-184に 、成人についてもシーハン等がThe Lancet（1992）July 4th pp13-17に、記載し ている。アトピー性湿疹および他の皮膚炎症疾患に使用するこれら１０種の薬草 の抽出物の特定の製法は、ＧＢ−Ａ−２２５４７８３に記載されている。 上記の１０種の薬草の煎じ汁は有効であることが知られているが、複数の薬草 を含む複合処方の使用は高価であり、それゆえに、もし効力および安全性を損な わないのであれば、処方を単純化することが望まれる。また、処方を、中国から 輸入するよりイギリスまたはヨーロッパで産する薬草に限るのが、望ましい。伝 統的な中国医学の処方における活性原理を確認するため、多くの試みがなされて いる。しかし、湿疹の場合、薬草からつくられた分画または純物質における臨床 効力を確認するために用いることのできる有益な動物またはin vitroモデルがな いので、困難である。 しかし、ここにおいて、アトピー性湿疹および他のアトピー性疾患の臨床効力 を予測できるようなin vitro検定法が開発され、それにより本発明者らは、上記 の１０種の薬草の凍結乾燥煎じ汁（以下、ＰＳＥ２２２という）中の活性成分を 検出することができた。 伝統的な中国の学識は、複数の薬草を必要とすることを述べているが、このin vitro法の使用およびin vivo臨床試験による確認は、望ましい臨床作用がこの１ ０種の薬草のサブセットおよびその中での個々の成分により再現されることを示 している。さらに、この方法により、ＰＳＥ２２２の中でアトピーの状態を悪化 せしめることがあり、薬学的使用の抽出物から除かれるのが望ましい成分を確認 できる。 効力に関するin vitro試験は、アトピー性疾患および特にアトピー性湿疹にお いて、皮膚細胞およびヒト末梢血からの単核球が細胞表面マーカー抗体ＣＤ２３ を発現すること、およびＣＤ２３の発現は湿疹の成功的な処置においては阻害さ れるか、減少していることに基づいている。(参照Takigawa et al，Clin．Exp． Immunol.（1991）84 pp275-282)。ＣＤ２３発現もサイトカイン インターロイ キン４（ＩＬ４）にさらされることによりヒト単核球におけるin vitroで誘発さ れ得、そして上記Takigawa記載のin vitroの状態と平行して、この誘発がアトピ ー性疾患に有用と知られている化合物により阻害される。したがって、これらの 観察は簡単なin vitro検定の基礎を提供し、そこではヒト末梢血からつくられた 単核球がＩＬ４および試験対象の活性薬剤と同時に接触するようにされる。ＣＤ ２３発現の量は、ＣＤ２３に対する標識モノクローナル抗体を用いて測定され、 いかなる作用も試験物質を生理食塩水または薬草のプラセボ製剤で置き換えた対 照と比較したＣＤ２３発現の阻害率として示される。このin vitro試験における ＣＤ２３の有意な阻害が臨床効力の予測になるということは、アトピー性湿疹に 対し成功裡に臨床的に用いられている上記１０種の薬草から製造された抽出物Ｐ ＳＥ２２２が検定ＣＤ２３発現の５０から６０％の阻害を示すという事実により 明らかにされる。 上記の検定を用い、本発明者らは、一般的にアトピー性疾患に、および非アト ピー性湿疹および乾癬などの特定の皮膚疾患の処置に対する臨床使用に適したＰ ＳＥ２２２中の成分を確定した。 本発明の第一点では、アトピー性疾患、非アトピー性湿疹または乾癬の処置に 適した物質を提供し、これは、下記中国薬草を含む混合物の凍結乾燥煎じ汁から 抽出される。 防風 委陵菜 川木通 懐慶地黄 甘草 赤芍 白鮮皮 淡竹葉 荊芥穂 この物質は、この凍結乾燥煎じ汁を水に溶かし、ブタノール、エタノールおよ び水の４：１：１比率の溶媒混合物を用いて、１０時間、Whatman 2cm x 55cm x 3mmセルロースストリップのクロマトグラフィーに、かけると、Ｒｆ値が0.00 - 0.100、0.167 - 0.300、0.400 - 0.533、0.700 - 0.833または0.900 - 0.967の 範囲にある１またはそれ以上の成分を含む。 望ましい物質は、Ｒｆ値が0.00 - 0.100にある凍結乾燥煎じ汁に存在する１ま たはそれ以上の成分を含む。 溶媒先端が大体３０ｃｍに達した後にセルローズストリップを水で抽出すると 、上記範囲のＲｆを大略有する水抽出成分は、ＩＬ４でin vitro処理したヒト単 核球に対するＣＤ２３の有意な減少をもたらす。セルロースストリップをその後 エタノールで抽出すると、0.700 - 0.833または0.900 - 0.967の範囲のＲｆ値を 大略有する成分のメタノール抽出物がin vitroでのＣＤ２３の有意な減少をもた らす。 さらに、そして驚くべきことに、セルロースストリップの水抽出および続くメ タノール抽出の後に、Ｒｆ値が0.067 - 0.333および0.533 - 0.700の範囲にある 成分のメタノール抽出物は、ＣＤ２３検定において対照に比してＣＤ２３抗原の 発現を増進あるいは増加する。アトピー性または非アトピー性湿疹または他のア トピー性疾患に対する製剤における”増進”効力の存在は明らかに望ましく なく、増進される臨床効果はその除去において期待される。有意な量の”増進” 効果がヘキサンなどの非極性溶媒で処理したＰＳＥ２２２の抽出物または上記１ ０種の薬草の他の製剤により除去され得る。 従って、本発明の第二の点として、アトピー性湿疹、非アトピー性湿疹または 乾癬の処置のための物質が提供され、それは、ヘキサンまたは他の非極性溶媒で 抽出され得る成分が除去された上記１０種の中国薬草を含む煎じ汁すなわち抽出 混合物からなる。このように処理された煎じ汁すなわち抽出物は、その潜在的臨 床効力の指標である、上記in vitro検定におけるヒト単核球のＣＤ２３発現を有 意に阻害することを示す。 上記１０種からの個々の薬草の煎じ汁について、in vitroＣＤ２３発現を阻害 するその効力が試験され、そしてこれは優れた臨床効力を有すると予測される薬 草のサブセットを示唆する。 本発明の第三点では、アトピー性疾患、非アトピー性湿疹または乾癬の処置の ための、中国薬草の下記組み合わせの１またはそれ以上の煎じ汁すなわち抽出物 からなる物質を提供する。 (ａ) 赤芍 甘草 懐慶地黄 (ｂ) 白鮮皮 赤芍 甘草 懐慶地黄 防風 または (ｃ) 赤芍 甘草 荊芥穂 これらは、実質的に他の中国薬草を含まない。望ましくは、この煎じ汁すなわち 抽出物はヘキサンまたは他の非極性溶媒で抽出される成分が除去されるように処 理される。上記（ａ）および（ｂ）で特定される薬草の組み合わせは、このすべ ての薬草がヨーロッパで生育可能であるという利点を有する。 本発明の第四点では、アトピー性疾患、非アトピー性湿疹または乾癬の処置の ための、白鮮皮、赤芍、懐慶地黄、甘草または荊芥穂の１またはそれ以上の煎じ 汁すなわち抽出物からなり、実質的に他の中国薬草を含まない物質を提供する。 さらに、望ましくは、これらの抽出物すなわち煎じ汁は、ヘキサンのどの非極性 溶媒での抽出の対象である。 商業的規模でのＰＳＥ２２２の活性成分の生産は、凍結乾燥煎じ汁を繊維性セ ルロースに接触さすことによりなされ、市販使用に適した品質については、上記 ブタノール／エタノール／水の混合物またはブタノール／ＩＭＳ／水の比率４： １：１の混合物などの適当な溶媒と混合して、バルクおよび不活性物質が除かれ る。混合物の遠心分離で沈殿が得られ、これを乾燥および水と混合する前に数回 、上記溶媒混合物で再抽出し、医薬製剤の製造のための活性成分を抽出する。本 発明の第一、第二、第三および第四点の物質は、上記商業的方法で製造しようが 、しなかろうが、適当な薬学的基材または希釈剤、その大部分は既知のものであ るが、と混合することにより医薬組成物として適切に製造される。一般的にはア トピー性疾患、特定的にはアトピー性湿疹または非アトピー性湿疹または乾癬の 処置に適した組成物は、経口、局所、非経口投与のために製剤され得る。経口用 製剤は、単位用量形態、例えば、錠剤、粉末または顆粒としてつくられ、飲用す る液剤でもあり得る。 上記in vitro検定は、アトピー性湿疹および地理的または植物学的起源に関係 のない皮膚炎に対して臨床的に有効であろう化合物または製剤の指標として用い 得ることが評価されるであろう。 本発明の第五点では、アトピー性湿疹または皮膚炎に対する化合物または製剤 の臨床効力を示唆する方法を提供する。それは次の工程を含む。 （ａ） 末梢血単核球をin vitroで、インターロイキン４（ＩＬ４）および効 力試験をする化合物または製剤を同時にあるいは順次に添加し、これらと共にイ ンキュベートし、 （ｂ） この単核球における細胞表面マーカーＣＤ２３の発現を測定し、 （ｃ） 試験化合物または製剤の存在または不存在における単核球のＩＬ４誘 導ＣＤ２３発現の程度を比較して、工程（ｂ）で得た測定値をアトピー性湿疹ま たは皮膚炎に対する該化合物または製剤の潜在的臨床効力の指標として用いる。 ２５％以上のＣＤ２３の阻害は、統計学的に有意であり、臨床的に有用であろ う化合物および製剤を示す。 下記の実施例および図面を引用して、本発明を説明する。 図１ａは、アトピー性湿疹の患者からの単核球を用いて、ＰＳＥ２２２の検定 に使用する試験物質（●）およびプラセボ薬草の混合物（○）の濃度に対するＣ Ｄ１４＋２３＋単核球の百分率のスポットである。 図１ｂは、図１ａと同じデータを示し、ＣＤ２３発現の阻害百分率をヒストグ ラムとしてｙ軸方向に示す。斜線棒グラフはＰＳＥ２２２を、白棒グラフはプラ セボ対照を示す。 図１ｃは、正常人からの単核球のCD23発現におけるPSE222の効果を示す、図１ ａと同様のプロットである、 図１ｄは、図１ｃと同じデータを、図１ｂと同様のヒストグラムで示す、 図２は、水でセルロースクロマトグラフィーストリップから抽出した３０フラ クションのそれぞれのヒト単核球におけるin vitroでのＣＤ２３発現の阻害パー セントを示す、 図３は、メタノールでセルロースクロマトグラフィーストリップから抽出した ３０フラクションのそれぞれのヒト単核球におけるin vitroでのＣＤ２３発現の 阻害パーセントを示す、および 図４は、PSE222のヘキサン抽出物のin vitroでのＣＤ２３発現における効果を 示す。実施例１ 以下の薬草の全重量３８.８ｇを、水３００ml中で１時間半煎じた：− 防風 委陵菜 川木通 懐慶地黄 甘草 赤芍 白鮮皮 淡竹葉 荊芥穂 薬草を除去し、煎じ汁を沸騰させることにより最終量５０mlまで濃縮し、次い で凍結乾燥した。凍結乾燥抽出物PSE222中に、約５ｇの薬草から抽出した１ｇの 乾燥抽出物が水中に含まれる。 アトピー性湿疹に対する既知の効果がない“プラセボ”薬草の煎じ汁を、上記 と同じ方法で製造した。 PSE222およびプラセボ煎じ汁の活性を、下記のように行ったＣＤ２３阻害検定 で試験した。 血液をボランティアから採血し、ヘパリン処理し、フィコール勾配で分離し、 末梢血単核細胞(単核球)を単離した。次いで、単核球を一晩、ＩＬ４添加ＲＰＭ Ｉで、PSE222またはプラセボ製剤存在下または非存在下に一晩培養した。その後 、単核球を洗浄し、単核球抗原ＣＤ１４およびＣＤ２３に対するフルオレッセイ ン標識モノクローナル抗体を使用して２重染色した。存在する場合、単核球の存 在を確認するＣＤ１４は有用なマーカーである。フルオレッセインのレベルを、F ACScan分析を使用して測定し、単核球によるＣＤ２３発現のレベルの示唆を得た 。 結果は図１ａからｄに示す。図１ａおよび１ｃに見られるように、PSE222阻害 ＩＬ４は、アトピー性湿疹患者(１ａ)および正常人(１ｃ)の単核球の両方でＣＤ ２３発現を誘発する。更に、効果は用量依存的であり、PSE222およびプラセボ処 置の間に統計的に有意な差異(Ｐ＜０.００１)があった。図１ｂおよび１ｄは、 約２５から３０％の統計的に有意なＣＤ２３の阻害が、アトピー性湿疹の患者由 来の単核球で、０.１２５mg／mlほど低いPSE222濃度で起こることを確認する。 正常患者由来の単核球の場合、PSE222濃度が０.２５mg／mlになるまで統計的に 有意な阻害は起こらなかった。 上記結果を基本にして、２５から３０％の間のＣＤ２３発現の阻害パーセント を、別の試験製剤の臨床的活性を評価および予測する基準として使用する。 重症アトピー性湿疹の患者で行った臨床試験において、PSE222製剤では、２／ ３から３／４の患者で湿疹の重症度が減少したが、プラセボでは減少しなかった 。この結果は統計的に有意である(Ｐ＝０.０１)。実施例２ 表１に列記した個々の薬草の煎じ汁を実施例１の記載の方法により製造し、乾 燥抽出物を各薬草について製造した。各抽出物の１mg量(５mgの生薬草と同等お よびPSE222製剤と同等の濃度まで希釈)を、また、実施例１の記載のようにin vi troでのＣＤ２３発現阻害について試験した。結果を下記表１に示し、示した各 値は５回の実験の平均である。 表Ｉに列記の薬草(ｃ)から(１)のあるサブセットについての臨床効果を試験し 、結果を表IIに示す。 薬草(ｅ)、甘草について、成分は、局所投与した場合にある臨床活性があるこ とが知られているが、ステロイド様副作用のため(例えば、それは電解質障害物 である)、単独で、経口で多量を投与できない。 表Ｉおよび表IIに記載の結果は、in vitroでのＣＤ２３阻害は、アトピー性湿 疹における臨床効果を非常に予測することを確認する。実施例３ PSE222 ７５mgをＲＰＭＩ１６４０インキュベーション培地に添加し、最終量 １０mlにし、３７℃で時々撹拌しながらインキュベートし、遠心して細かい物お よび他の破片を除去した。得られた溶液の１：１０希釈５００μlをＷhatman ３ mm×２cm×５５cmセルロースストリップに掛けた。ストリップの充填末端を、４ ：４：１の比率のブタノール／エタノール／水の中に置き、溶媒を毛細管現象に より１０時間動かし、その時間の後、溶媒先端は約３０cm動いた。ストリップ を一晩乾燥させ、次いで２×１cm片に切った。これらの切片を、各々２０μl／c m²の水で溶出し、溶出液を蒸発乾固し、ＲＰＭＩ１６４０インキュベーション培 地５００μlに再懸濁し、ＣＤ２３検定を試験した。全２９フラクションを製造 し、図２は、各および完全PSE222およびプラセボ薬草のＣＤ２３阻害活性を示す 。溶媒先端に対応するストリップ３０をＣＤ２３発現の内部対照として使用した 。 図２から見ることができるように、阻害活性のピークは、特にフラクションＡ ０(基点)および、次いでフラクション１、３、６、７、８、１４、１５、２１、 ２５および２９で見られた(フラクション番号は基点からのcmに対応)。これらの フラクションは、Ｒｆ値０.００、０.０３３、０.１００、０.２００、０.２３ ３、０.２６７、０.４６７、０.５００、０.９００、０.８３３および０.９６７ にそれぞれ対応する。 上記のように２×１cm片を水で抽出し溶出液を試験後、切片を乾燥させ、次い で２０μl／cm²のメタノールで溶出した。溶出物を再び蒸発乾固し、ＣＤ２３検 定のためにＲＰＭＩ１６４０インキュベーション培地５００μlに再懸濁した。 メタノール抽出に続く各フラクションＣＤ２３阻害活性のレベルを図３に示す。 Ｒｆ値０.８３３、０.９００および０.９６７に対応する２５、２７および２９ に阻害活性の明白なピークが見られた。 図２および３に示す活性フラクションの組成は、アトピー性湿疹および他のア トピー性疾患および乾癬の処置のための医薬組成物への使用に好適である。 興味深いことに、上記のように、水および続くメタノール抽出後、Ｒｆ範囲そ れぞれ０.０６７から０.３００および０.５３３から０.７００に対応するフラク ション２から９および１６から２１は、ＣＤ２３検定で試験した場合、阻害より むしろ著しくＣＤ２３発現を促進した。実施例４ 実施例１に記載のように製造したPSE222の溶液をヘキサンで抽出した。ヘキサ ンでフラクションを上記のように蒸発乾固し、再懸濁し、ＣＤ２３検定で試験し た。ヘキサン抽出物は、著しくＣＤ２３発現を対照よりも増加させた。しかしな がら、ヘキサン抽出PSE222の続く水抽出は、ＣＤ２３発現の予期された阻害を示 した。結果を図４に示す。 本実施例は、可能な医薬組成物から望ましくない成分を除去するために非極性 溶媒でのPSE222の１０種の薬草の抽出が有用であることを確認する。実施例５ 実施例１に記載のような最終粉末凍結乾燥抽出物１ｇを、繊維状セルロース１ ０ｇとよく混合した。シグマセルロース＃６６６３が好適なグレードである。４ ：４：１の割合のブタノール：工業用メチレン化スピリット：水(ＢＩＷ)の混合 物７０mlをセルロース混合物に添加し、１０分撹拌した。混合物を遠心した(５ 分、６,０００rpm)。沈殿をＢＩＷ３０mlに再懸濁し、再遠心した。この操作を 繰り返し、沈殿を真空オーブンで６０−７０℃で乾燥した。 次いで、乾燥セルロース混合物を蒸留水に再懸濁し、１０分撹拌し、遠心した 。次いで、沈殿を更に３用量の水で洗浄し、遠心し、上清をプールした。合わせ た上清を蒸発乾固し、茶色固体約２０mgを得た。 この物質は、賦形剤と調剤し、カプセルに満たし、錠剤に成形するかまたは薬 学的に許容可能な溶媒に溶解した場合、重症アトピー性湿疹の患者の処置に好適 である。上記実施例は、商業的規模でのPSE222の活性成分の薬学的製剤の製造法 を提供する。

【手続補正書】特許法第１８４条の８ 【提出日】１９９６年８月５日 【補正内容】 請求の範囲 １．以下の中国薬草： 防風 委陵菜 川木通 懐慶地黄 甘草 赤芍 白鮮皮 淡竹葉 荊芥穂 を含む混合物の凍結乾燥煎じ汁から抽出でき、凍結乾燥煎じ汁を水性溶液で希釈 し、ブタノール、エタノールおよび水の４：１：１比率の溶媒混合物を用いて、 １０時間、Ｗhatman ２cm×５５cm×３mmセルロースストリップのクロマトグラ フィーにかけた場合、Ｒｆ値が０.００から０.１００、０.１６７から０.３００ ０.４００から０.５３３、０.７００から０.８３３または０.９００から０.９６ ７の範囲にある凍結乾燥煎じ汁に存在する１種またはそれ以上の成分を含む物質 である、アトピー性疾患、非アトピー性湿疹または乾癬の処置に好適な物質。 ２．Ｒｆ値が０.００から０.１００の範囲にある凍結乾燥煎じ汁に存在する１ 種またはそれ以上の成分を含む、請求項１記載の物質。 ３．クロマトグラフィーストリップから水で抽出され得るＲｆ値が０.００か ら０.１００、０.１６７から０.３００、０.４００から０.５３３、０.７００か ら０.８３３または０.９００から０.９６７の範囲である１種またはそれ以上の 成分を含む、請求項１記載の物質。 ４．クロマトグラフィーストリップから水で抽出され得るＲｆ値が０.７００ から０.８３３または０.９００から０.９６７の範囲である１種またはそれ以上 の成分を含む、請求項１または３に記載の物質。 ５．凍結乾燥煎じ汁が、ヘキサンまたは他の非極性溶媒で抽出可能な成分を除 去したものである、請求項１から４のいずれかに記載の物質。 ６．クロマトグラフィーストリップからＲｆ値０.００から０.１００、０.１ ６７から０.３００、０.４００から０.５３３、０.７００から０.８３３または ０.９００から０.９６７の範囲である成分がインターロイキン４で刺激したヒト 単核球上のＣＤ２３抗原のin vitro発現を阻害する、請求項１から５のいずれか に記載の物質。 ７．物質がアトピー性または非アトピー性湿疹の処置に好適である、請求項１ から６のいずれかに記載の物質。 ８．アトピー性疾患、非アトピー性湿疹または乾癬の処置用医薬を製造するた めの請求項１から７のいずれかに記載の物質の使用。 ９．医薬がアトピー性または非アトピー性湿疹の処置用である、請求項８記載 の使用。 １０．請求項１から７のいずれかに記載の物質および薬学的に許容可能な担体 または希釈剤を含む、アトピー性疾患、非アトピー性湿疹または乾癬の処置のた めの医薬組成物。 １１．経口、非経口または局所投与のために調剤された、請求項１０記載の医 薬組成物。 １２．中国薬草： 防風 委陵菜 川木通 懐慶地黄 甘草 赤芍 白鮮皮 淡竹葉 荊芥穂 の混合物の煎じ汁または抽出物を含み、ヘキサンまたは他の非極性溶媒で抽出可 能な成分を除去したものである、アトピー性湿疹、非アトピー性湿疹または乾癬 の処置用物質。 １３．実質的に他の中国薬草不存在下で、中国薬草： 白鮮皮 赤芍 懐慶地黄 荊芥穂 甘草 の１種またはそれ以上の煎じ汁または抽出物を含む、アトピー性疾患、非アトピ ー性湿疹または乾癬の処置用物質。 １４．実質的に他の中国薬草不存在下で、中国薬草： (ａ) 赤芍 甘草 懐慶地黄 (ｂ) 白鮮皮 赤芍 甘草 懐慶地黄 防風 または (ｃ) 赤芍 甘草 荊芥穂 の１種またはそれ以上の煎じ汁または抽出物を含み、ヘキサンまたは他の非極性 溶媒で抽出可能な成分を除去したものである、アトピー性疾患、非アトピー性湿 疹または乾癬の処置用物質。 １５．実質的に他の中国薬草不存在下で、中国薬草： 白鮮皮 赤芍 懐慶地黄 荊芥穂 甘草 の１種の煎じ汁または抽出物を含む、アトピー性疾患、非アトピー性湿疹または 乾癬の処置用物質。 １６．１種の中国薬草が赤芍である、請求工１５記載の物質。 １７．アトピー性疾患、非アトピー性湿疹または乾癬の処置用医薬を製造する ための請求項１２から１６のいずれかに記載の物質の使用。 １８．請求項１２から１６のいずれかに記載の物質および薬学的に許容可能な 担体または希釈剤を含む、アトピー性疾患、非アトピー性湿疹または乾癬の処置 のための医薬組成物。 １９．経口、非経口または局所投与のために調剤された、請求項１８記載の医 薬組成物。 ２０．(ａ)末梢血単核球の、in vitroでの、インターロイキン４(ＩＬ４)およ びその活性を試験すべき化合物または製剤の同時または連続した添加およびそれ と共にインキュベート、 (ｂ)単核球の細胞表面マーカーＣＤ２３の発現の測定、および (ｃ)化合物または製剤の存在下または非存在下での単核球のＩＬ−４ ＣＤ２３ 発現レベルと比較した、工程(ｂ)で得られた測定値の、化合物または製剤のアト ピー性湿疹または皮膚炎に対する潜在的臨床効力の指標としての使用 の工程を含む、アトピー性湿疹または皮膚炎に対する化合物または製剤の臨床活 性を示唆する方法。 ２１．単核球のＣＤ２３発現レベルを、ＣＤ２３に対する標識モノクローナル 抗体を使用して測定する、請求項２０記載の方法。 ２２．細胞表面マーカーＣＤ１４の発現をまたはＣＤ１４に対する標識モノク ローナル抗体を使用して測定する、請求項２０または２１のいずれかに記載の方 法。 ２３．末梢血単核球がヒトのものである、請求項２０から２２のいずれかに記 載の方法。 ２４．ＣＤ２３発現阻害の２５％またはそれ以上を、アトピー性湿疹または皮 膚炎に対する化合物または製剤の臨床的活性の指標として取る、請求項２０から ２３のいずれかに記載の方法。 ２５．請求項２０から２４のいずれかに記載の方法で臨床的に活性であると測 定された化合物または製剤および薬学的に許容可能な担体または希釈剤を含む、 アトピー性湿疹または皮膚炎の処置用医薬組成物。 ２６．(ａ)凍結乾燥煎じ汁を繊維状セルロースと接触させ、本混合物を、無機 溶媒および２５％以下の水を含む溶媒混合物で、望ましくは１回以上抽出する (ｂ)凍結乾燥煎じ汁／繊維状セルロース混合物を水で抽出する (ｃ)水抽出物を、医薬組成物に成形するために蒸発乾固する 工程を含む、請求項１記載のアトピー性疾患、非アトピー性湿疹または乾癬の処 置に好適な物質の製造方法。 ２７．工程(ｂ)の前に凍結乾燥煎じ汁／繊維状セルロース混合物をヘキサンで 抽出する、請求項２６記載の方法。 ２８．溶媒混合物がブタノール、ＩＭＳおよび水を４：１：１の比で含む、請 求項２６または２７のいずれかに記載の方法。 ２９．工程(ａ)において、抽出溶媒添加後に、混合物を遠心し、沈殿を更なる 抽出のために単離する、請求項２６から２８のいずれかに記載の方法。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，Ｍ Ｃ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ， ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)， ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，Ｃ Ｈ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ， ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，Ｍ Ｎ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＴ， ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．以下の中国薬草： 防風 委陵菜 川木通 懐慶地黄 甘草 赤芍 白鮮皮 淡竹葉 荊芥穂 を含む混合物の凍結乾燥煎じ汁から抽出でき、凍結乾燥煎じ汁を水性溶液で希釈 し、ブタノール、エタノールおよび水の４：１：１比率の溶媒混合物を用いて、 １０時間、Ｗhatman ２cm×５５cm×３mmセルロースストリップのクロマトグラ フィーにかけた場合、Ｒｆ値が０.００から０.１００、０.１６７から０.３００ ０.４００から０.５３３、０.７００から０.８３３または０.９００から０.９６ ７の範囲にある凍結乾燥煎じ汁に存在する１種またはそれ以上の成分を含む物質 である、アトピー性疾患、非アトピー性湿疹または乾癬の処置に好適な物質。 ２．Ｒｆ値が０.００から０.１００の範囲にある凍結乾燥煎じ汁に存在する１ 種またはそれ以上の成分を含む、請求項１記載の物質。 ３．クロマトグラフィーストリップから水で抽出され得るＲｆ値が０.００か ら０.１００、０.１６７から０.３００、０.４００から０.５３３、０.７００か ら０.８３３または０.９００から０.９６７の範囲である１種またはそれ以上の 成分を含む、請求項１記載の物質。 ４．クロマトグラフィーストリップから水で抽出され得るＲｆ値が０.７００ から０.８３３または０.９００から０.９６７の範囲である１種またはそれ以上 の成分を含む、請求項１または３に記載の物質。 ５．凍結乾燥煎じ汁が、ヘキサンまたは他の非極性溶媒で抽出可能な成分を除 去したものである、請求項１から４のいずれかに記載の物質。 ６．クロマトグラフィーストリップからＲｆ値０.００から０.１００、０.１ ６７から０.３００、０.４００から０.５３３、０.７００から０.８３３または ０.９００から０.９６７の範囲である成分がインターロイキン４で刺激したヒト 単核球上のＣＤ２３抗原のin vitro発現を阻害する、請求項１から５のいずれか に記載の物質。 ７．物質がアトピー性または非アトピー性湿疹の処置に好適である、請求項１ から６のいずれかに記載の物質。 ８．アトピー性疾患、非アトピー性湿疹または乾癬の処置用医薬を製造するた めの請求項１から７のいずれかに記載の物質の使用。 ９．医薬がアトピー性または非アトピー性湿疹の処置用である、請求項８記載 の使用。 １０．請求項１から７のいずれかに記載の物質および薬学的に許容可能な担体 または希釈剤を含む、アトピー性疾患、非アトピー性湿疹または乾癬の処置のた めの医薬組成物。 １１．経口、非経口または局所投与のために調剤された、請求項１０記載の医 薬組成物。 １２．中国薬草： 防風 委陵菜 川木通 懐慶地黄 甘草 赤芍 白鮮皮 淡竹葉 荊芥穂 の混合物の煎じ汁または抽出物を含み、ヘキサンまたは他の非極性溶媒で抽出可 能な成分を除去したものである、アトピー性湿疹、非アトピー性湿疹または乾癬 の処置用物質。 １３．実質的に他の中国薬草不存在下で、中国薬草： 白鮮皮 赤芍 懐慶地黄 荊芥穂 甘草 の１種またはそれ以上の煎じ汁または抽出物を含む、アトピー性疾患、非アトピ ー性湿疹または乾癬の処置用物質。 １４．実質的に他の中国薬草不存在下で、中国薬草： (ａ) 赤芍 甘草 懐慶地黄 (ｂ) 白鮮皮 赤芍 甘草 懐慶地黄 防風 または (ｃ) 赤芍 甘草 荊芥穂 の１種またはそれ以上の煎じ汁または抽出物を含む、アトピー性疾患、非アトピ ー性湿疹または乾癬の処置用物質。 １５．ヘキサンまたは他の非極性溶媒で抽出可能な成分を除去したものである 、請求項１３または１４のいずれかに記載の物質。 １６．インターロイキン４で刺激したヒト単核球上のＣＤ２３抗原のin vitro 発現を阻害する、請求項１３から１５のいずれかに記載の物質。 １７．アトピー性疾患、非アトピー性湿疹または乾癬の処置用医薬を製造する ための請求項１２から１６のいずれかに記載の物質の使用。 １８．請求項１２から１６のいずれかに記載の物質および薬学的に許容可能な 担体または希釈剤を含む、アトピー性疾患、非アトピー性湿疹または乾癬の処置 のための医薬組成物。 １９．経口、非経口または局所投与のために調剤された、請求項１８記載の医 薬組成物。 ２０．(ａ)末梢血単核球の、in vitroでの、インターロイキン４(ＩＬ４)およ びその活性を試験すべき化合物または製剤の同時または連続した添加およびそれ と共にインキュベート、 (ｂ)単核球の細胞表面マーカーＣＤ２３の発現の測定、および (ｃ)化合物または製剤の存在下または非存在下での単核球のＩＬ−４ ＣＤ２３ 発現レベルと比較した、工程(ｂ)で得られた測定値の、化合物または製剤のアト ピー性湿疹または皮膚炎に対する潜在的臨床効力の指標としての使用 の工程を含む、アトピー性湿疹または皮膚炎に対する化合物または製剤の臨床活 性を示唆する方法。 ２１．単核球のＣＤ２３発現レベルを、ＣＤ２３に対する標識モノクローナル 抗体を使用して測定する、請求項２０記載の方法。 ２２．細胞表面マーカーＣＤ１４の発現をまたはＣＤ１４に対する標識モノク ローナル抗体を使用して測定する、請求項２０または２１のいずれかに記載の方 法。 ２３．末梢血単核球がヒトのものである、請求項２０から２２のいずれかに記 載の方法。 ２４．ＣＤ２３発現阻害の２５％またはそれ以上を、アトピー性湿疹または皮 膚炎に対する化合物または製剤の臨床的活性の指標として取る、請求項２０から ２３のいずれかに記載の方法。 ２５．請求項２０から２４のいずれかに記載の方法で臨床的に活性であると測 定された化合物または製剤および薬学的に許容可能な担体または希釈剤を含む、 アトピー性湿疹または皮膚炎の処置用医薬組成物。 ２６．(ａ)凍結乾燥煎じ汁を繊維状セルロースと接触させ、本混合物を、無機 溶媒および２５％以下の水を含む溶媒混合物で、望ましくは１回以上抽出する (ｂ)凍結乾燥煎じ汁／繊維状セルロース混合物を水で抽出する (ｃ)水抽出物を、医薬組成物に成形するために蒸発乾固する 工程を含む、請求項１記載のアトピー性疾患、非アトピー性湿疹または乾癬の処 置に好適な物質の製造方法。 ２７．工程(ｂ)の前に凍結乾燥煎じ汁／繊維状セルロース混合物をヘキサンで 抽出する、請求項２６記載の方法。 ２８．溶媒混合物がブタノール、ＩＭＳおよび水を４：１：１の比で含む、請 求項２６または２７のいずれかに記載の方法。 ２９．工程(ａ)において、抽出溶媒添加後に、混合物を遠心し、沈殿を更なる 抽出のために単離する、請求項２６から２８のいずれかに記載の方法。