JPH0285211A - 新規フェネチルアルコール配糖体および免疫抑制剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は、ブラック形成細胞（以下ＰＦＣと称する）抑
制作用、マクロファージ（以下Ｍφと称する）ｔＬ食能
能増強作用何し、臓器移植時の免疫抑制、自己免疫疾患
などの治療に有用な新規フェネチルアルコール誘導体お
よび免疫抑制剤に関するものである。

［従来の技術および課題］ 免疫抑制剤は、臨床上移植臓器の生着のため使われるほ
か、全身性エリトマト−デス、慢性関節リウマチなどの
膠原病、糸球体腎炎、多発性筋症、自己免疫性溶血性貧
血などいわゆる自己免疫疾患の治療に用いられている。

これまで臨床的に使用されている免疫抑制剤としては、
ハイドロコーヂゾンなどのステロイド類、アザチオプリ
ンなどのプリン誘導体、サイクロフォスフアミドなどの
アルキル化剤があるが、白血球数、血小板数減少など骨
髄機能抑制、胃腸障害、無精子症など生殖機能障害など
が副作用として報告されている。最近真菌から抽出され
た抗生物質であるサイクロスポリンＡが臨床応用され、
極めて高い移植臓器生着率を示し注目されている。また
各種の自己免疫関連疾患に使用する試みがなされている
が、急性尿細管壊死、腎線維症など重篤な腎毒性の報告
がある。

そこで副作用のない、あるいは既存薬剤と併用して副作
用を軽減させるような免疫抑制剤の開発が望まれていた
。

［課題を解決するための手段］ 発明者等は、漢方処方に繁用されている生薬である地黄
［カイケイジオウ　Ｒｅｈｍａｎｎｉａ　ｇｌｕｔｉｎ
ｏｓａＬｉｂｏｓｃｈ、ｖａｒ、ｈｕｅｉｃｈｉｎｇｅ
ｎｓｉｓ　Ｃｈａｏ　ｅｔ　５ｃｈｉｈまたはその他同
属植物（Ｓｃｒｏｐｈｕｌａｒｉａｃｅａｅ）の根で、
そのまままたは蒸したものが補血、強壮などの目的に使
用される。］に注目し、主として抗体産生抑制作用を指
標に活性成分の探究を行った結果、新規化合物を含むい
くつかの活性物質を見い出し本発明を完成させた。すな
わち、本発明は下記に示す如くである。

（１）下記式Ｉ （３）下記式ｍ （式中、Ｒはホルミル基またはカルポキ／ル居を酢味す
る。） で表される化合物をａ効成分とする免疫抑制剤。

（２）下記式Ｉ１ Ｉ で表される化合物をａ効成分とする免疫抑制剤。

（式中、Ｒは水素原子またはβ−Ｄ−ガラクトピラノー
スを意味する。）で表される化合物を４丁効成分とする
免疫抑制剤。

（１）下記式１ｖ （５ン下記弐■ （式中、Ｒは水素原子またはメチル基を色味する。）で
表される新規フエネヂルアルコール配置体。

（式中、Ｒは水素原子またはメチル基を意味する。）で
表される新規フエネヂルアルコール配糖体を打効成分と
する免疫抑制剤。

以下、式１〜■の化合物をまとめて式の化合物と称する
。

式の化合物を得るには例えば、次のような方法が挙げら
れる。

カイケイジオウあるいはその他同属植物を水、アルコー
ル類、水とアルコール類の混合溶媒または水とアセトン
の混合溶媒で抽出し、該抽出液から溶媒を除去した残渣
をそのまま、または必要に応じて水に溶解し、石油エー
テル、エーテル、クロロポルムなどの有機溶媒で抽出し
、得られた有機溶媒に移行する脂溶性成分を除去しｆコ
後、ｎブタノールで抽出し、抽出液から溶媒を除去して
得た残渣を水、メタノール、エタノール、酢酸、クロロ
ホルム、酢酸エチル、ｎ−ヘキサン、アセトン、ベンゼ
ンから選ばれる少なくともひとつを溶出溶媒としてダイ
ヤイオン　ＨＰ−２０、ＭＣエチル　ＣＨＰ　２０　Ｐ
等のポーラスポリマー　セファデックスＬＨ−２０等の
セファデックス、逆相系シリカゲル、シリカゲル、ポリ
アミド、活性炭まタハー１？ルロース等を担体に用いた
カラムクロマトグラフィーに数回付し、薄層クロマトグ
ラフィーで目的成分を確認しなから分画することにより
得ることができる。場合によりメタノール、エタノール
等の適当な溶媒を用いて再結晶することにより精製して
もよい。

また、式ＩにおいてＲがホルミル基である化合物は、グ
ルコース、フルクトース等の糖類を加熱して得ることら
でき、式１においてＲがカルボキシル基である化合物は
、式■においてＲがホルミル基である化合物を硝酸銀、
二酸化マンガンまｆこは過マンガン酸カリウム等の適当
な酸化剤を用いて酸化することにより得ることもできる
。さらに、式■の化合物はアミノ酸のグルタミン酸を脱
水閉環しても得ることができる。

式Ｉの化合物の製造例を示すと次の如くである。

製造例１ カイケイジオウ（熟地黄）１００＆９を５０％エタノー
ル−水５００１２で抽出し、抽出液から溶媒を減圧下留
去し５０％エタノール−水工キスを得た。

この５０％エタノール−水工キスを水に溶解し、ダイヤ
イオンＨＰ−２０（三菱化成製）カラムクロマトグラフ
ィーに付して水１０（Ｎ！で溶出しｆこ。

この水溶出部を活性炭（和光純薬製）カラムクロマトグ
ラフィーに付し、水＋００ρ、メタノール５０ｅおよび
アセトン３０Ｑで溶出した。アセトン溶出部から溶媒を
減圧下留去して得た残、査を逆相系シリカゲル（ＬｉＣ
ｈｒｏｐｒｅｐ　ＲＰ−８，メルク社製）のカラムクロ
マトグラフィーに付し、水で溶出し、溶媒を除去して析
出しｆコ結晶をメタノール−酢酸エチルから再結晶して
無色針状品２００　Ｍ９を得た。

この化合物の理化学的性質は以下に示す如くであり、こ
れらのデータより５−ヒドロキシフロイックアンラドと
同定した。

融　　点　　：　ｌ　６５〜１６７８ＣＦＤ−ＭＳ　：
　Ｉ　４２（Ｍ”） プロトン核磁気共鳴スペクトル （δ　ｐｐｍ　ｉｎ　ＣＤｔＯＤ）： ４．５８（２１４，ｓ）。

６．４７　（Ｉ　Ｉ−（、ｄ　、Ｊ　＝　２．８　Ｈ２
）。

７．１　６（Ｉ　　Ｈ，ｄ、２．８１１ｚ）Ｉ３Ｃ−核
磁気共鳴スペクトル （δ　ｐｐｍ　ｉｎ　ＣＤ３０Ｄ）： ５７．９（ｔ）、ｌ　Ｉ　０．６（ｄ）。

１２０．４（ｄ）、＋　４６．１（Ｓ）。

１６０．９（ｓ）、１６２．２（ｓ） 製造例２ 製造例１のダイヤイオン　ＬＩＰ−２０を用いたカラム
クロマトグラフィーにおいて、水で溶出しｒこ後、続け
て５０％メタノール−水２５＆を用いて溶出し、得られ
た５０％メタノール−水溶出部をセファデックス　ＬＨ
−２０（ファルマシア製）カラムクロマトグラフィーに
付し水＋１２で溶出した。得られた水溶山部をＭ　Ｃエ
チル　ＣＨＰ　２０１）　（三菱化成製）を用いたカラ
ムクロマトグラフィーに付して水で溶出し、次いでセフ
ァデックスＬ　Ｈ２０カラムクロマトグラフィーに付し
てクロロホルム−エタノール（３：Ｉ）で溶出し目的化
合物令含む分画を得た。この両分をさらにシリカゲル（
メルク社製）カラムクロマトグラフィーに付しベンゼン
−アセトン（９：ｌ）で溶出し、溶媒を除去して無色油
状物質１５３Ｍ９を得た。この化合物は、標品（アルド
リッチ社製、５−ヒドロキノメチルフルフラール）の赤
外線吸収スペクトル、核磁気共鳴スペクトル、質量スペ
クトルおよび薄層クロマトグラフィーの比較により５−
ヒドロキシメチルフルフラールすなわち式Ｉの化合物と
同定した。

式Ｈの化合物の製造例を示すと次の如くである。

製造例３ 製造例１のメタノール溶出部から溶媒を減圧下留去して
得た残渣をノリ力ゲル力ラムクロマ１、グラフィーに付
し、クロロホルムから順次メタノール含Ｍを増やして溶
出し、３０％メタノール−クロロポルムで溶出した両分
から再結晶して無色粒状品１００　Ｎを得た。この化合
物は、標品（アルドリッチ社製、５−オキソプロリン）
と赤外線吸収スペクトル、核磁気共鳴スペクトルおよび
質噴スペクトルの比較により、５−オキソプロリンすな
わち式ＩＪの化合物と同定した。

製造例４ カイケイノオウ（熟地黄）Ｉｏｏｋｙを５０％エタノー
ル−水５００Ｑで抽出し、抽出液から溶媒を減圧下留去
し５０％エタノール−水工キスを得た。

この５０％エタノール−水工キスを水に溶解し、順次エ
ーテル、酢酸エチル、ｎ−ブタノールで抽出した。得ら
れたｎ−ブタノールエキスをダイヤイオンＨＰ−２０カ
ラムクロマトグラフィーに付して水１０（Ｈ！、水−メ
タノール（１：１）５０ρおよびメタノール３０（で溶
出した。水−メタノール（ｌ：１）溶出部から溶媒を減
圧下留去して得た残渣をセファデックスＬＨ−２０を用
いたカラムクロマトグラフィーに付し、水から順次メタ
ノール含量を増やして溶出し、５０％メタノール−水溶
出画分を得た。この両分をざらに逆相系ノリ力ゲルであ
るフッゲル（０１）ＳＧａ型、水戸化学技術研究新製）
を用いたカラムクロマトグラフィーに付して水から順次
メタノール含量を増やして溶出し、４０％メタノール−
水溶山部から溶媒を除去してＲｆｖｉｏ、４５［薄層フ
レート：キーセルケル６０Ｆｒｓい展開溶媒：酢酸エチ
ル−メタノール−水（２０３・２）、発色試薬：塩化第
二鉄（暗緑色）］の白色無晶形粉末７１０ｍ９を得た。

この化合物の理化学的性質は文献［Ｈ，Ｋｏｂａｙａｓ
ｈｉ　ｅｔ　ａｌ、　Ｃｈｅｍ、Ｐｈａｒｍ。

Ｂｕｌｌ、、３２．３００９（１９８４）］記載のアク
テオンドの性質と一致した。

製造例５ 製造例４のセファデックスＬＨ−２０カラムクロマトグ
ラフィーにおいて１０％メタノール水により溶出し１こ
両分をＭＣＩケル　ＣＨＩ）　２０　Ｐのカラムクロマ
トグラフィーに付して水から順次メタノール含量を増や
して溶出し、３０〜４０％メタノール−水で溶出した両
分を得た。この両分をさらにフッケルのカラムクロマト
グラフィーに付し、水から順次メタノール食散を増やし
て溶出し、３０％メタノール−水溶山部から溶媒を除去
してＲｆ（直０．１８［薄層プレートニキーゼルゲル６
０Ｆｔｓ＋、展開溶媒酢酸エチル−メタノール−水（２
０：３　：２）、発色試薬：塩化第二鉄（暗緑色）］の
白色無晶形粉末２００　ｍｆｌを得た。この化合物の理
化学的性質は文献［Ｙ、Ｓｈｏｙａｍａ　ｅｔ　ａｌ。

Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、　２　（３，３２２５
（１９８７）］記載のプルプレアットＣの性質と一致し
た。

弐■によりおいて、Ｒが水素原子である化合物の製造例
を示すと次の如くである。

製造例６ 市販のカイケイノオウ（熟地黄）４０ｋｙをメタノール
１００Ｑで抽出し抽出液から溶媒を減圧下留去しメタノ
ールエキスを得た。このメタノールエキスを水に溶解し
ダイヤイオンＩ（Ｐ−２０カラムクロマトグラフイーに
付し、水＋００ｃ次いでメタノール２５（で溶出した。

メタノール溶出部から溶媒を減圧下留去した後、水３Ｑ
に溶解し、クロロホルム３ｅで２回抽出して脂溶性成分
を除去し、水層から溶媒を留去して水性エキス１３５９
を得た。この水性エキスをセファデックスＬ　ｌ−１２
０カラムクロマトグラフイーに付し、水ｌＯＱ。

次いで５％メタノール−水１０ρで溶出した。得られた
５％メタノール−水溶山部をＭＣＩゲルＣＨＰカラムク
ロマトグラフィーに付し、最初は水、逐次メタノール含
量を増やして溶出し、フラクションＡ１Ｂ、Ｃ，Ｄとし
た。

フラクションＢをさらにマイクロボンダパックＣ、、（
ウォーターズ社製）カラムクロマトグラフィーに付し水
−メタノール（６５：３５）で溶出し、続すでセファデ
ックスＬＨ−２０カラムクロマトグラフイーに付しエタ
ノールで溶出し、白色無晶形粉末０．５ｇを得た。この
白色無晶形粉末の理化学的性質は以下の如くであり、こ
れらのデータより弐■においてＲが水素原子である化合
物と構造を決定した。

比旋光度［α］をへニー５９．８゜ （ｃ−＝０．３８、ＭｅＯＩｌ） Ｆ　Ｄ−ＭＳ　　ｍ／ｚ　：　　８００（Ｍ”）赤外線
吸収スペクトル　ν　：：Ｓ、、−１゜３４０４．１６
９６，１６３２．１６００プロトン核磁気共鳴スペクト
ル （δ　ｐｐｍ　ｉｎ　ＣＤ３０Ｄ）： １．０９　（３Ｈ、ｄ　、Ｊ　＝　６．４１−（ｚ）。

２．７９（２Ｈ，ｔ、Ｊ＝７．３）。

３．２〜４．１（１７Ｈ，ｍ）、３．８９（３Ｈ，ｓ）
。

４．２Ｇ（ｌ）Ｉ、ｄ、Ｊ＝７．４ｌ−１ｚ）。

４．３８　（Ｉ　Ｈ、ｄ　、Ｊ　＝　７．８１（ｚ）。

５．００（ＩＩ−１，ｔ、Ｊ　＝９．３１−［ｚ）。

５．１９（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝１．４ｌ−（ｚ）。

６．３８（ＩＩｌ、ｄ、Ｊ＝ｌ　　５．９ｌ−１ｚ）６
．５　７（ｌ　　Ｉ（、ｄｄ、Ｊ　　＝８．１／２．０
Ｌ（ｚ）６．６９（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）０．７
　２　（Ｉ　　ｔｌ　、ｄ　、Ｊ　　＝　２．０　Ｈｚ
）６．８　１（ｌ　　ｔ（ｄ、Ｊ＝８．１Ｉ−１ｚ）。

７．０　９　（Ｉ　　Ｎ、ｄｄ、Ｊ　　＝　８．１　／
２．０１−１ｚ）。

７．１　９（ｌ　　Ｉ−１，ｄ、Ｊ　　＝２．０Ｈｚ）
７、（３７（Ｉｔｌ、ｄ、Ｊ　　＝Ｉ　　５．９Ｈｚ）
Ｉ３０−核磁気共鳴スペクトル （δ　ｐｐｍ　ｉｎ　ＣＤ３０Ｄ） １８．５（ｑ）、３６．６（ｔ）、５６．５（ｑ）６２
．５（ｔ）、６９．２（ｔ）、７０．３（ｄ）７０．４
（ｄ）、７０．５（ｄ）、７２．１（ａ）。

７２．４（２Ｃ，ｄ　　ａｎｄ　ｔ）、７２．６（ｄ）
。

７３．８（ｄ）、７５．０（２Ｃ，ｄ）７６．２（ｄ）
、７６．６（ｄ）、８１．６（ｃｌ）。

１０３．０（ｄ）、１０４．Ｉ（ｄ）。

１０５．３（ｄ）、、ｌ　Ｉ　１．９（ｄ）。

１１５．１（ｄ）、１１６．４（ｄ） １１６．６（ｄ）、１１７．２（ｄ） １　２　１．４（ｄ）、１　２４．４（ｄ）。

１　２　７．７（ｓ）、１　３　１．６（ｓ）ｌ　　４
４．６（ｓ）、１　４　６．１　（ｓ）。

１　４　８．１（ｄ）、１　４　９．４（ｓ）、１　５
０．８（ｓ）、ｌ　　Ｇ　８　４（ｓ）製造例７ 製造例６の〜ＩＣＩゲルＣＨＰ　２０　Ｐカラムクロマ
トグラフィーで得ｆこフラクノヨン１３をさらにマイク
ロボンダパックＣｌ８（つを−ターズ社製）カラムクロ
マトグラフィーに付し水−メタノール（６５：３５）で
溶出し、続けてセファデックスＬ　Ｈ２０カラムクロマ
トグラフィーに付しエタノールで溶出し、白色無晶形粉
末７５ｍ９を得た。この白色無晶形粉末の理化学的性質
は以下の如くであり、これらのデータより式１ｖにおい
てＲが水素原子である化合物と構造を決定した。

比旋光度［α］易　−・１０．３゜ （ｃ　＝　０　、３６．５ＩｅＯＩｌ）Ｆ　Ｄ−ＭＳ　
　ｍ／ｚ　：　　８２３　（Ｍ”÷Ｎａ）赤外線吸収ス
ペクトル　ν　七−俯 ３４１６．１７１２．１６２８゜ ＋６０２　１５１６ プロトン核磁気ノ（鳴スベクＩ・ル （δ　ｐｐｍ　ｉｎ　ＣＤ３０Ｄ） １．１５（３１１，ｃｌ、Ｊ＝６．１Ｈｚ）２．７８（
２Ｈ，ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ）３．２〜４．１（１７１−
（、ｍ） ３．９０　（３１−１，ｓ　） ４．２４（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝７．３１（ｚ）４．３６　（
ｌ　Ｈ、ｄ　、Ｊ　＝　７．８　Ｈｚ）。

４．９２（ＩＩ−１，ｔ、Ｊ＝９．３Ｈｚ）５　、　ｌ
　６　（１１１ｂｒ、ｓ　）。

５．８１．６．９４ （ｅａｃｈ　Ｉ　＋（、ｄ　、Ｊ　＝　１２．９　Ｈｚ
）。

６．５７（１＋Ｉ、ｄｄ、Ｊ　＝８．ｌ／１．７＋１ｚ
）。

６．６９（１１（、ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）。

６．７２　（ｌ　Ｈ、ｄ　、Ｊ　＝　１．７１−１ｚ）
。

６　．７　８　　（＋　　夏−ｒ、ｄ　　、Ｊ　　＝　
　８　．３　１（ｚ）。

７．１７　（Ｉ　ＩＩ　、ｄｄ、Ｊ　＝　８．３　／Ｉ
　、９．１−ｒｚ）。

７　．８　７　（ｌ　　Ｈ，ｄ　　、Ｊ　　＝　　１　
．９　Ｈｚ）１３０−核磁気共鳴スペクトル （δ　ｐｐｍ　ｉ　ｎ　ＣＤ３０Ｄ）　：１８．２（ｑ
）、３６．５（ｔ）、５６．７（ｑ）６２．４（ｔ）、
６９．１　（ｔ） ７０．２，７０．４（２Ｃｅａｃｈ　ｄ）７２．２，７
２．３（２Ｃ，ｅａｃｈ　ｄ）７２．３（ｔ）、７２．
６（ｄ）、７３．８（ｄ）。

７４．７（ｄ）、７５．０（ｄ）、７６．０（ｄ）７６
．５（ｄ）、８１．９（ｄ）、１０３．１（ｄ）１０４
．０（ｄ）、ｌ　Ｏ５，２（ｄ）。

１１５．５（ｄ）、１１５．６（ｄ） １１５．７（ｄ）、＋　１６．４（ｄ）＋　１７．２（
ｄ）、１２１．４（ｄ）。

２７　４ｉ（ｄ）、！　２８．０（ｓ）］　３１．６（
ｓ）、１４４．．６（ｓ）ｌ　４　Ｇ、０（ｓ）、１４
７．８（ｄ）１４８．２（ｄ）、１４９．７（ｓ）。

１６８．４（ｓ） プロトン核磁気共鳴スペクトル （δ　ｐｐｍ　ｉｎ　ＣＤ３０１）） １．１０（３１（、ｄ、Ｊ＝６．１Ｈｚ）２．８２（２
Ｈ，Ｌ　、Ｊ　＝７．ｌ　Ｈｚ）３．２〜４．１（１７
１（、ｍ）。

３　８１　３．８８　（ｅａｃｈ　３１（、ｓ　）１．
２７　（１１１，ｄ　、Ｊ　＝　８．１１１ｚ）４．３
８　（Ｉ　Ｉ−１，ｄ　、Ｊ　＝　７．６１−１ｚ）。

７．９６（ｌＨ，ｔ、　　、　Ｊ＝９．８Ｈｚ）５．２
０　（Ｉ　ｆ（、ｄ　９．Ｊ　＝　１．４　ｆｉｚ）６
．３　８（Ｉ　　　Ｈ，ｃｌ、Ｊ　　＝　　１　　６．
０ｌ−１ｚ）６．６９（Ｉ　Ｈ，ｄｄ、Ｊ　＝８．０／
２．０ＩＩｚ）６．７６　（ｌ　Ｈ，ｄ　、Ｊ　＝　２
．０　Ｈｚ）６．７８　（Ｉ　Ｈ，ｄ　、Ｊ　＝　８．
０　Ｈｚ）。

６．８２　（Ｉ　ｔ−１ｄ、Ｊ　＝　８．０　Ｈｚ）。

７．０８（Ｉ　Ｈｌｄｄ、Ｊ　＝８．０／１．８Ｈｚ）
。

７．１９（Ｉｔ（、ｄ、Ｊ＝１．８ｔ（ｚ）７、（ｉ７
（ＩＩ−１，ｄ、、Ｊ−１６，０！４ｚ）次に弐■にお
いて、Ｉｚかメチル基である化合物の製造例を示すと次
の如くである。

製造例８ 製造例６のＭＣＩゲルＣＨＰ　２　ＯＰカラムクロマト
グラフィーで得たフラクションＣをさらにマイクロボン
ダパックＣＩＩのカラムクロマトグラフィーに付し、水
−メタノール（６０：４０）で溶出し、続けてセファデ
ックスＬＨ−２０カラムクロマトグラフィーに付し、エ
タノールで溶出し、白色イ■（（晶形粉末１．５ｇを得
た。この白色無晶形粉末の理化学的性質およびスペクト
ルデータより式■においてＲがメチル基である化合物と
（１カ造を決定し几。

比旋光度［α］”２．ニー６２．８゜ （ｃ　＝　０　、３１　、Ｍｅｏｌｌ）ＦＤ−ＭＳ　　
ｍ／ｚ　：　８１４　（Ｍ’）赤外線吸収スペクトル　
ν　ユ＝フα ３４０８．１７００．１６３２ １５９６．１５１６，８１２，７６０ １３Ｃ−核磁気ノ（鳴スペクトル （δ　ｐｐｍ　ｉｎ　ＣＤ３０Ｄ） １　８．５（ｑ）、３　６．５（し　）５６．６（２Ｃ
，ｑ）、６２．５（ｔ）６９．２（ｔ）、７０．３（ｄ
） ７０．４（ｄ）、７０．５（（＋） ７　２．２（２Ｃ、ｄ　　　ａｎｄ　　　ｔ）７２．３
（ｄ）、７２．６（ｄ） ７３．８（ｄ）、７４．８（ｄ） ７５．０（ｄ）、７６．１（ｄ）。

７６．６（ｄ）、８１．６（ｄ） １０３．０（ｄ）、＋　０４．１（ｄ）１０５．３（ｄ
）、ｌ　１２．０（ｄ）１１３．０（ｄ）、１１５．１
（ｄ） １１６．６（ｄ）、１１７．１　（ｄ）１２１．３（ｓ
）、ｌ　２４．４（ｄ）１２７．７（ｓ）、１３３．０
（ｓ） １４７．３（ｓ）、１４７．５（ｓ） １４８．１　（ｄ）、Ｉ　４９．４（ｓ）１５０．８（
ｓ）、１６８．４（ｓ） 製造例９ 製造例６のＭＣＩゲルＣＨＰ　２　ＯＰカラムクロマト
グラフィーで得たフラクションＣをさらにマイクロボン
ダパックＣ＋ｓのカラムクロマトグラフィーに付し、水
−メタノール（６０：４０）で溶出し、続けてセファデ
ックスＬＨ−２０カラムクａマドグラフィーに付し、エ
タノールで溶出し、白色無晶形粉末２０■を得た。この
白色無晶形粉末の理化学的性質およびスペクトルデータ
より式■においてＲかメチル居である化合物と構造を決
定した。

比旋光度［α］ｔらニー４２．５゜ （ｃ　＝　０．３４　、ＭｅＯＩｌ） ＦＤ−ＭＳ　　ｍ／ｚ　：　８１４（Ｍ”）赤外線吸収
スペクトル　ν　１互ぼ ３４２０．１７１４．＋　６２６．１５９４゜プロトン
核磁気共鳴スペクトル （δ　ｐｐｍ　ｉｎ　ＣＤ３０Ｄ）： １．１６（３１−１，ｄ、Ｊ＝６．１ｌ−１ｚ）。

２．８１（２Ｈ，ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ）。

３．３〜４．１（１７Ｈ，ｍ）。

３．７　９．３．８　９　（ｅａｃｈ　　３　　Ｉ−（
、ｓ　）。

４　．２　５　（Ｉ　　Ｈ、ｄ　、Ｊ　　＝　７．６　
Ｈｚ）。

４　．３　６　（ｌ　　Ｈ、ｄ　　、Ｊ　＝　７．８　
Ｈｚ）。

４．９３（ＩＨ，ｔ、Ｊ＝９．４Ｈｚ）。

５．１　７　（Ｉ　　Ｈ，ｄ　、Ｊ　＝　　１　．２　
Ｈｚ）。

５．８　１，６．９　３ （ｅａｃｈ　　ｌ　　Ｈ、ｄ　、Ｊ　＝　１　３．０　
Ｈｚ）。

６．６　９　（Ｉ　　Ｈ，ｄｄ、Ｊ　＝　８．１　／２
．０　Ｈｚ）。

６．７７（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝２．０ｌ−１ｚ）６．７９（
ＩＨ，ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）。

６．８　１（ｌ　　Ｈ，ｄ、Ｊ＝８．３ｌ−１ｚ）。

７．１　８（厘　Ｈ，ｄｄ、Ｊ＝８．３／１．７Ｈｚ）
。

７．８６（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ）”ｃ−核磁気共
鳴スペクトル （δ　ｐｐｍ＋　ｉｎ　ＣＤ３０Ｄ）：１８．２（Ｑ）
、３６．４（ｔ）。

５６．６　（２Ｃ、ｅａｃｈ　ｑ、）、６２．３　（ｔ
　）。

６９．１（ｔ）。

７０．１．７０．３（２Ｃ，ｅａｃｈ　ｄ）。

７２　、１　（２Ｃ，ｅａｃｈ　　　ｄ）、７　２．１
．（ｔ）。

７２．５（ｄ）、７３．７（ｄ）、７４．７（ｄ）７５
．０（ｄ）、７５．９（ｄ）、７６．４（ｄ）。

８　１．９（ｄ）、１　０３．１　（ｃｌ）、１　０４
．０（ｄ）。

１　０　５．２（ｄ）、Ｉ　　１　２．９（ｄ）。

１　１　５．５（ｄ）、Ｉ　　１　５．６（ｄ）１　１
　５．７（ｄ）、ｌ　　Ｉ　　７．１（ｄ）。

１　２　１．２（ｄ）、１　２　７．４（ｄ）。

１　２７．９（ｓ）、１　３　２．９（ｓ）。

１　４　７．２（ｓ）、１　４　７．４（ｓ）。

１　４　７．８（ｄ）、１　４　８．２（ｓ）。

１　４　９．７（ｓ）、１　６　６．９（ｓ）これらの
式の化合物には抗体産生抑制活性が認められ、免疫抑制
剤あるいは自己免疫疾患の治療剤として有用である。こ
のことについて実験例を挙げて説明する。

実験例！ 市販の羊保存血液（日本生物材料センター）に生理食塩
水２０ｄを加え１８０Ｏｒｐｍ、１０分間遠心し上清を
捨てた。さらに生理食塩水２０ｄを加え撹拌した後３０
００ｒｐｍ、　５分間遠心し上清を捨てた。この操作を
３回繰り返して洗浄した羊赤血球（以下５ＲＢＣと称す
る）を抗原として用いた。

マウス（ＢＡＬＢ／ｃ系、雌、７〜ｌＯ週齢）尾静脈よ
り０．１ｄの５ＲＢＣ（５Ｘ　ｌ　Ｏ”〜ｌ　ｘ　１６
７”／、ｄ）を注射し免疫した。その直後から製造例１
〜９で得た化合物をそれぞれ経口投与した。また、蒸留
水を投与したものをコントロール群とした。５Ｉコ目に
マウスを層殺し十分脱血した後、牌臓を取り出してステ
ンレススチールメツシュ（２００ｍｅｓｈ）上で細切し
、ＲＰＭＩ−１６４０培養液４滅を入れたシャーレ中に
細胞を押し出した。適宜培養液を加えて洗い、得られた
細胞浮遊液を試験管に゛移しＩ　５００ｒｐｍ、　５分
間遠心して上清を捨てさらに５ｄの培養液を加え再浮遊
させた。これを１０倍に希釈して１００Ａ１１を試験管
に取り、市販のモルモット補体原液：２０％５ＲＢＣ（
１：Ｉ）混液２５ＡＩＩｌを加え撹拌した後、カニンガ
ム（Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ）チェンバーに入れパラフィ
ンで封じ、３７℃、１時間静地して反応させて実体顕微
鏡下ＰＦＣ数をした。

その結果を第１表に示す。

第１表 ニワトリの赤血球０．Ｉｄを加えて３７℃で３０分間培
養した。反応終了後ギムザ染色し、実体顕微鏡下Ｍφ食
食能を算定した。その結果を第２表に示す。

第２表 実験例２ 製造例、１で得た化合物９　Ｍ９７ｋｇ／ｄａｙ（経口
）をマウス（１３ＡＬＢ／ｃ、雄、７−１０週齢）に５
日間連続投与した。池に薬物非投与群をコントロールと
した。

６日ｌ］に開腹し、ハンクス液を用いて腹腔内Ｍφを採
取しカバーグラスに付着させた。これをＲＰＭｌ川６４
用培徨液３ｄを含む試験管に入れ、以上の結果から、式
の化合物は抗体産生抑制作用を育し、特に製造例４で得
た化合物についてはＭφ活性化作用をら併仕持つことか
認められ、生体の防御機構全般を非特異的に抑制するの
ではなく免疫系のある特定の応答を抑制する新規な免疫
抑制剤として期待される。

また、式の化合物の投与による副作用の発現ら認められ
なかった。

次に、製造例１〜７で得た化合物の急性毒性試験をマウ
ス（ｄｄＹ系、雄）およびラット（Ｗｉｓｔａｒ系、雄
）を用いて行ったところ２９／に９の経口投与で死亡例
がみらイ１なかった。

このように式の化合物は極めて毒性か低く安全性の高い
らのである。

次に、式の化合物の投与供および製剤化について１説明
する。

式の化合物はそのまま、あるいは慣用の製剤担体と共に
動物および人に投与することができる。

投与ＩＦｇ　態としては、特に限定がなく、必要に応じ
適宜選択して使用され、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細
粒剤、散剤等の経口剤、注射剤、小開等の非経しコ剤が
挙げられる。

経口剤として所期の効果を発揮するためには、小者の年
令、体重、疾患の程度により異なるが、通常成人で式の
化合物の重信として３０〜１００（１９を、１日数回に
分けての服用が適当と思われる。

経口剤は、例えばデンプン、乳糖、白糖、マンニット、
カルホキジメチルセルロース、コントロール、無機塩類
等を用いて常法に従って製造される。

この種の製剤には、適宜ｊｒｊ記賦形剤の池に、結合剤
、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、流動性促進剤、矯味剤
、着色剤、香料等を使用することができる。それぞれの
具体例は以下に示す如くである。

［結合剤］ デンプン、デキストリン、アラビアゴム末、ゼラチン、
ヒドロキンプロピルスターチ、メチルセルロース、カル
ホキツメチルセルロースカルシウム、ヒドロキンプロピ
ルセルロース、結晶セルロース、エチルセルロース、ポ
リビニルピロリトノ、マクロゴール。

［崩壊剤コ デンプン、ヒドロキシプロピルスターチ、カルボキシメ
チルセルロースナトリウム、カルホキツメチルセルロー
スカルシウム、カルボキンメチルセルロース、低置換ヒ
ドロキンプロピルセルロース。

［界面活性剤］ ラウリル硫酸ナトリウム、大豆レシチン、ンヨ糖脂肪酸
エステル、ポリソルベート　８０゜［滑沢剤］ タルク、ロウ類、水素添加植物油、ショ糖脂肪酸エステ
ル、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウ
ム、ステアリン酸アルミニウム、ポリエチレングリコー
ル。

［流動性促進剤］ 軽質無水ケイ酸、乾燥水酸化アルミニウムゲル、合成ケ
イ酸アルミニウム、ケイ酸マグネシウム。

また、式の化合物は、懸濁液、エマルジョン剤、ノロツ
ブ剤、エリキシル剤としても投与することができ、これ
らの各種剤形には、矯味矯臭剤、着色剤を含有してもよ
い。

非経口剤として所期の効果を発揮するためには、憬者の
年令、体重、疾患の程度により異なるが、通常成人で式
の化合物の重量として夏日１〜３００　ｍ９までの静注
、点滴静注、皮下注射、筋肉注射が適当と思われる。

この非経口剤は常法に従って製造され、希釈剤として一
般に注射用蒸留水、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、注射
用植物油、ゴマ油、ラッカセイ油、ダイズ油、トウモロ
コシ油、プロピレングリコール、ポリエチレングリコー
ル等を用いることができる。さらに必要に応じて、殺菌
剤、防腐剤、安定剤を加えてもよい。また、この非経口
剤は安定性の点から、バイアル等に充填後冷凍し、通常
の凍結乾燥技術により水分を除去し、使用直前に凍結乾
燥物から液剤を再調製することらできる。さらに、必要
に応じて適宜、等張化剤、安定剤、防腐剤、無痛化剤等
を加えても良い。

その他の非経口剤としては、外用液剤、軟膏等の塗布剤
、直腸内投与のための小開等が挙げられ、常法に従って
製造される。

以下に、用例を示して本発明を、さらに詳しく説明する
が、これにより本発明は同等制限されない。

用例１ ■コーンスターチ　　　　　　　４４９■結晶セルロー
ス　　　　　　４０９ ■カルボキンメチル セルロースカルシウム　　　５ｇ ■軽質無水ケイ酸　　　　　　０．５９■ステアリン酸
マグネシウム　０，５ｇ■製造例１で得ｆこ化合物　　
　１０ｇ計　　　　　１００９ 上記の処方に従って■〜■を均一に混合し、打鍵機にて
圧縮成型して一部２００　ｍ９の錠剤を得た。

この錠剤−錠には、製造例Ｉで得た化合物２０ｍｇが含
有されており、成人１日２〜２０錠を数回にわけて服用
する。

用例２ ■結晶セルロース　　　　　８４．５９■ステアリン酸
マグネシウム　０．５９■カルボキシメチル セルロースカルシウム　　　　５９ ■製造例２で得た化合物　　　１０９ 計　　　　　　１００９ 上記の処方に従って■、■および■の一部を均一に混合
し、圧縮成型した後、粉砕し、■および■の残量を加え
て混合し、打錠機にて圧縮成型して一部２００　ｔｔｒ
ｇの錠剤を得た。

この錠剤−錠には、製造例２で得た化合物２０句が含有
されており、成人１日２〜２０錠を数回にわけて服用す
る。

用例３ 用例４ ■結晶セルロース　　　　　３４．５ｇ■１０％ヒドロ
キシプロピル セルロースエタノール溶液　５０ｙ ■カルボキンメチル セルロースカルシウム　　　５９ ■ステアリン酸マグネノウム　０５９ ■製造例３で得た化合物　　　１０ｙ 計　　　　　　１００　ｇ 上記の処方に従って■、■および■を均一に混合し、常
法によりねつ和し、押し出し造粒後により造粒し、乾燥
・解砕した後、■および■を混合し、打鍵機にて圧縮成
型して一部２００　Ｑの錠剤を得ｆこ。

この錠剤−錠には、製造例３で得た化合物２０ｍ９が含
有されており、成人１日２〜２０錠を数回にイつけて服
用する。

■コーンスターチ　　　　　８３．１１Ｆ■ステアリン
酸マグネンウム　　１ｇ ■カルボキンメチル セルロースカルシウム　　　５９ ■軽質無水ケイ酸　　　　　　０．５９■製造例４で得
た化合物　　　１０９ 計　　　　　１００９ 上記の処方に従って■〜■を均一に混合し、圧縮成型機
にて圧縮成型後、破砕機により粉砕し、篩別して顆粒剤
を得た。

この顆粒剤１９には、製造例４で得た化合物１００　ｆ
ｆ９が含有されており、成人１日２〜ＩＯｙを数回にわ
けて服用する。

用例５ ■結晶セルロース　　　　　　４０９ ■１０％ヒドロキンプロピル セルロースエタノール溶液５０９ ■製造例６で得た化合物　　　１０９ 計　　　　　１００９ 上記の処方に従って■〜■を均一に混合し、ねつ和し１
こ。押し出・し造粒後に上り造粒後、乾燥し、篩別して
顆粒剤を得た。

この顆粒剤１９には、製造例６で得た化合物＋００ｉ＠
が含有されており、成人１日２〜１０ｇを数回にわけて
服用する。

用例６ ■コーンスターチ　　　　　８９．５９■軽質無水ケイ
酸　　　　　　０．５９■製造例７で得た化合物　　　
ｌｏｇ 計　　　　　　１００ｇ 上記の処方に従って■〜■を均一に混合し、２００　ｍ
ｇを２号カプセルに充填しｆこ。

このカプセル剤１カプセルには、製造例７で得た化合物
２０１Ｒ９が含有されており、成人１日２〜２０９を数
回にわけて服用する。

用例７ ■注射用蒸留水　　　　　　　　適量 ■ブドウ糖　　　　　　　　２００屑り注射用蒸留水に
■および■を溶解させた後、５ｄのアンプルに注入し、
１２　＋　’Ｃで１５分間加圧滅菌を行って注射剤を得
た。

Claims (5)

【特許請求の範囲】
1. （１）下記式 I ▲数式、化学式、表等があります▼ I （式中、Ｒはホルミル基またはカルボキシル基を意味す
   る。） で表される化合物を有効成分とする免疫抑制剤。
2. （２）下記式II ▲数式、化学式、表等があります▼II で表される化合物を有効成分とする免疫抑制剤。
3. （３）下記式III ▲数式、化学式、表等があります▼III （式中、Ｒは水素原子またはβ−Ｄ−ガラクトピラノー
   スを意味する。） で表される化合物を有効成分とする免疫抑制剤。
4. （４）下記式IV ▲数式、化学式、表等があります▼IV （式中、Ｒは水素原子またはメチル基を意味する。）で
   表される新規フェネチルアルコール配糖体。
5. （５）下記式IV ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒは水素原子またはメチル基を意味する。）で
   表される新規フェネチルアルコール配糖体を有効成分と
   する免疫抑制剤。