JPH10507446A

JPH10507446A - ビス−２−アミノピリジン類、その製造方法及び寄生虫感染を制御するためのその用途

Info

Publication number: JPH10507446A
Application number: JP8512998A
Authority: JP
Inventors: アンリヴィアル; ミシェルカラス; ジャン−ジャックブールギニオン; マリー−ロールアンスラン; ルイジラル
Original assignee: ヴィルバク
Priority date: 1994-10-14
Filing date: 1995-10-13
Publication date: 1998-07-21
Anticipated expiration: 2015-10-13
Also published as: EP0785924A1; EP0785924B1; ES2148570T3; AU3749195A; US5834491A; WO1996011910A1; ATE192438T1; FR2725718A1; DE69516706T2; JP3873173B2; DE69516706D1; FR2725718B1

Abstract

(57)【要約】一般式（Ｉ）〔式中：Ｑは、Ｃ₆−Ｃ₂₀アルキル基、置換されていてもよいアリール基又はシクロアルキル基であって、２つのピリジン環の間に全部で６〜３４個の炭素原子を有する炭化水素結合を形成する；ｎは、０〜７の数である；Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃及びＲ₄は、同一又は異なって、水素原子、置換されていてもよい直鎖状又は分岐状のＣ₁−Ｃ₆アルキル基、１個又はそれ以上のハロゲン原子又はＣ₁−Ｃ₆アルキル若しくはＣ₁−Ｃ₆アルコキシラジカルで置換されていてもよいアリール基、ベンジル基、チエニル基、フリル基、ハロゲン原子、アルコキシ又はベンジルオキシ基を表す。但し、Ｑが、ｍが６〜２０である（ＣＨ₂）_m鎖を表す場合に、ラジカルＲ₁、Ｒ₂、Ｒ₃及びＲ₄の少なくとも１つが水素原子でないことを条件とする；）で表される置換されたビス−２−アミノピリジン類及びその付加塩。前記置換又は非置換のビス−２−アミノピリジン類の製造方法、及び薬物として、特に赤血球細胞内の寄生虫性感染、例えば、マラリア又はバベシア症（若しくはピロプラスマ症）を制御する活性薬物としてのその用途も記載されている。

Description

【発明の詳細な説明】ビス−２−アミノピリジン類、その製造方法及び寄生虫感染を制御するためのその用途本発明は、置換されたビス（２−アミノピリジン）類、その製造方法、及び置換又は非置換のビス（２−アミノピリジン）類の医薬品としての応用、特にマラリア又はバベシア症（若しくはピロプラスマ症）といった赤血球内の寄生虫症に対して有効な医薬品としての応用に関する。抗マラリア性及び抗バベシア症活性とは、赤血球内の寄生虫の生育及び／又は赤血球の侵襲を防ぎ、また当初存在していた寄生虫の死を引き起こす能力を意味すると理解されている。マラリア(Malaria)又はパルジズム(Paludism)は、相変わらず熱帯地方に蔓延っている最も重大な寄生性の疾患である。世界保健機関は、世界中で350,000,00 0人もの患者が存在し、その９０％がアフリカに存在し、年間1,500,000〜2,700, 000人の死を招いていると見ている。１９ド/ピリメタミン）のような合成葉酸拮抗剤及びニバキン患と闘うために用いられた。しかし、１９６０年代以後、耐性が現れ、新しい活性分子、中でもラリアム（Lariam）儀なくされた；それにもかかわらず、これらの新規分子もまた、新しい種類の耐性、つまり交差耐性の他にその種に特有な耐性の発生を招いた。東南アジア及びラテンアメリカにおける熱帯熱マラリア原虫（Plasmodium falciparum）のクロロキン耐性系統の発生並びにこれら薬剤の耐性現象の全般的な拡大は、効果的なマラリア治療を制限する。さらに、新規化合物であるメフロキン及びハロファントリンの各々に対する耐性も無視できないものであり、またこの耐性はこれら２つの物質間において交差耐性を生じさせる。アルテミシニン（artemisinine）及びその誘導体〔アルテムエーテル（arteme ther）、アルトエーテル（artether）、アルテスネート（artesunate）及びジヒドロアルテミシニン（dihydroartemisinine）〕といった他の物質もまた、中国及び東南アジアにおいて用いられている。しかし、これら物質は、半減期が短く、水への溶解度が低いという欠点がある。ピロプラスマ症としても知られているバベシア症は、マラリアのように、ダニにかまれることにより伝播される赤血球内の寄生虫症であり、多数の家畜及び野生動物種を侵し、その病原体はバベシア（babesla）属の原生動物である。このため、ウシバベシア（Babesia bovis）、バベシア・ビゲミナ（Babesia bigemina）、バベシア・メジャー（Babesia major）及びバベシア・ディバーゲンズ（Babesia divergens）により引き起こされるウシのバベシア症があり、これは、特に開発途上国での畜牛飼育業においてかなりの損失の原因となっている。イヌバベシア（Babesia canis）及びバベシア・ギブソニ（B abesia gibsoni）によるイヌのバベシア症、ウマバベシア及びカバリ（Babesia equi and cabalii）によるウマのバベシア症、並びに稀ではあるが深刻な、バベシア・ディバーゲンズ（Babesia divergens）及びバベシア・ミクロチ（Babesia microti）によるヒトのバベシア症もまた見つかっている。バベシアに対して有効な物質はほとんどなく、それらは通常毒性である〔イミドカルブ（imidocarb）及びアミカルバライド（amicarbalide）〕。ツベルシジン（tubercidin）、テトラサイクリン又はモノクトン（monoctone）のような他の製品は、インビトロでは活性を示すが、インビボでは良い結果を示さない。早くも１９８４年に、McColm（Ann．Trop．Med．Parasitol.，78，(4)，345）は、チロシン（tylosin）、リファマイシン（rifamycin）及びグラミシジンＤ（ gramicidin D）のような古典的な抗菌剤に対してバベシアの耐性が増したことを強調した。従って本発明者の目的は、赤血球内の寄生虫に対して有効な新規生成物を提供することである。本発明の主題は、一般式（Ｉ）〔式中：Ｑは： − Ｃ₆−Ｃ₂₀アルキル基 − 置換されていてもよいアリール基又は − シクロアルキル基を表し、且つ２つのピリジン環の間に全部で６〜３４個の炭素原子を有する炭化水素結合を形成する。ｎは、０〜７の数であり、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃及びＲ₄は、同一又は異なって： − 水素原子、 − 置換されていてもよい直鎖状又は分岐状のＣ₁−Ｃ₆アルキル基、 − １個又はそれ以上のハロゲン原子又はＣ₁− Ｃ₆アルキル若しくはＣ₁−Ｃ₆アルコキシラジカルで置換されていてもよいアリール基、 − ベンジル基、 − チエニル基、好ましくは２−チエニル、 − フリル基、好ましくは２−フリル、 − ハロゲン原子、 − アルコキシ又はベンジルオキシ基、を表す。但し、Ｑが、ｍが６〜２０である（ＣＨ₂）_m結合を示す場合に、ラジカルＲ₁、Ｒ₂、Ｒ₃及びＲ₄の少なくとも１つが水素原子でないことを条件とする。〕で表される置換されたビス（２−アミノピリジン）類並びにそれらの付加塩である。酸との付加塩としては、塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸若しくはリン酸のような無機酸又は酢酸、プロピオン酸、マレイン酸、安息香酸、コハク酸、メタンスルホン酸、パラ−トルエンスルホン酸、フマル酸及びヒドロキシエタンスルホン酸のような有機酸と形成される塩が挙げられる。Ｃ₆−Ｃ₂₀アルキルとは、飽和又は不飽和の直鎖状又は分岐状のアルキル基を意味する。アリールとは、例えば、１個又はそれ以上のフッ素，塩素若しくは臭素原子又はアルキル若しくはアルコキシラジカルで置換されていてもよいフェニルラジカルを意味する。シクロアルキルとは、例えば、シクロプロピル，シクロブチル，シクロペンチル又はシクロヘキシルラジカルを意味し得る。Ｃ₁−Ｃ₆アルキルとは、例えば、メチル，エチル，プロピル，ブチル，イソプロピル，イソブチル，ｓｅｃ−ブチル，ｔｅｒｔ−ブチル，ペンチル，ヘキシル，トリフルオロメチル，ビニル及びアリル基といった、飽和又は不飽和の、直鎖状又は分岐状のアルキル基を示す。アルコキシとは、メトキシ，エトキシ，プロポキシ及びブトキシ基のようなＣ₁ −Ｃ₆アルコキシ基を意味する。ハロゲンとは、フッ素，塩素，臭素原子を意味する。他のビス（アミノピリジン）類としては、デンタルプラーク（dental plaque ）の処置に有効なビス（４−アミノピリジン）類〔米国特許4 206 215及びジャーナル・オブ・メディシナル・ケミストリー（J．Med．Chem.）1984，27，1457- 1464〕、又はヨウ素化触媒活性を有する、ピリジン環が置換されていないビス（２−アミノピリジン）類〔INOKUMA，Yakagaku，1982，31，(8)，515-19〕が述べられてきたが、本発明者は、驚くべきことに、上記に定義されたような、非置換のビス（２−アミノピリジン）類及び少なくとも１つの置換基を有するビス（２−アミノピリジン）類の両者が、駆虫活性（antiparasitic activity）並びに特に極めて有利で且つ予期できない抗マラリア及び抗バベシア症活性を有することを見出した；置換されたビス（２−アミノピリジン）類は、特に有利な活性を示す。実際、上記で定義された式Ｉの生成物、並びにＲ₁、Ｒ₂、Ｒ₃及びＲ₄が水素原子を示す式Ｉの生成物、並びにそれらの酸付加塩は、有利な薬理学的性質を示す。それらは、特に、赤血球内の寄生虫症に対して非常に良好な活性を有している。予期せぬことに、これらの生成物は、寄生虫の赤血球での増殖をブロックする。事実、これらの生成物は、細胞膜の成分であって寄生虫の増殖に必要なホスファチジルコリンの必須前駆体であるコリンの輸送をブロックすることにより寄生虫の代謝を妨げる。該増殖は、細胞膜の生合成（biogenesis）に必要であるリン脂質の相当量のデノボ（de novo）合成を伴うものである。本発明の化合物は、種々の方法で化学療法抵抗性である系統（strains）又はアイソレート（isolates）に対してインビトロで非常に強い活性を示す。該活性は、主として、成熟赤血球期（ma ture erythrocytic stage）、リン脂質合成が最も強い段階に対して発揮される。特に、プラスモディウム・チャバウディ（Plasmodium chabaudi）又はプラスモディウム・ペッテリ（Plasmodium petteri）に感染したネズミ組織（murine s ystems）において、本発明の化合物は寄生虫血症を完全に根絶する。本発明は、より好ましくは、式（Ｉ）中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃又はＲ₄が、３，４及び／又は５位においてメチル、クロロ若しくはフェニル基であり、ＱがＣ₆−Ｃ₂ ₀ のアルキル基であって、２つのピリジン環の間の炭化水素結合がドデカン，ヘキサデカン，オクタン又はデカンを構成することを特徴とする上記の生成物を提供する。本発明によると、上記式Ｉの生成物及びそれらの塩は、式（II）Ｈａｌ−（ＣＨ₂）_n−Ｑ−（ＣＨ₂）_n−Ｈａｌ（式中、Ｈａｌは、ハロゲン原子を表し、ｎ及びＱは、上記した一般的な意味を有する。）の誘導体を、式（III）：（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃及びＲ₄は、上記と同じ意味を有する。）の化合物と溶液中で反応させて、一般式（Ｉ）の生成物を対応するジハライドの状態で取得し、所望により、該ジハライドをアルカリ化し、別の酸塩に転換することを特徴とする方法により調製することができる。本発明の好適な実施条件によれば、上記の方法は、以下の手順により行われる：式IIの化合物と式IIIの化合物との反応は、１：２の割合、好ましくは化合物I Iがわずかに過剰な存在下で行われ、これによりアミノピリジン類（式IIIの誘導体）が全量転換される：・使用される反応物に対して不活性な溶媒又は溶媒の混合物の存在下で〔なお、溶媒はアセトニトリル、芳香族炭化水素類（トルエン、キシレン類）、プロパノン，ブタノン及び３−メチル−２−ブタノンのような脂肪族ケトン類、アルコール類（メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール）、ジメチルホルムアミド、並びに、例えばジオキサン，モノグリム及びジグリムといった一般のエーテル類から選択される〕、・室温下又は加熱状態で（特に、溶媒の沸点）、・数（few）時間から数（several）日間。該反応は、反応物の一つが反応温度で液体であり他の反応物を溶解する場合は、溶媒を加えないで行うこともできる。本発明の方法の有利な点は、所望のビス（アミノピリジン）類のジハイドロハライド（一般に、ハイドロブロマイド及びハイドロクロライド）が反応の最後に直接得られること、及び溶媒中において純粋な状態で直接結晶化することである。しかしながら、ハイドロハライドイオンを、例えば、イオン交換樹脂を用いて若しくはハロゲン化銀を沈殿させることにより置換し、それを薬学的に許容し得る無機酸若しくは有機酸の別の塩に転換することによって対応する塩基を得ることも可能である。式（Ｉ）の集合的生成物及びそれらの薬学的見地から許容され得る酸塩は、医薬品として薬学的組成物の形態でヒト又は動物に投与することができる。当該薬学的組成物は、有効成分として式（Ｉ）で表される生成物又はそのような化合物の酸付加塩の少なくとも１つを有効量含有し、加えて一般的に調剤に用いられる賦形剤及び添加剤を含有する。これらの組成物は、経口的，非経口的又は直腸に投与されてもよく、特に錠剤，糖衣剤，カプセル，溶液，シロップ，エマルジョン又は懸濁液の形態で、有効物質の放出を調節する薬学的投薬形態により投与されてもよい。このような組成物は、一般的に０．５〜５０ｍｇ／ｋｇの投与量にて投与される。本発明は、前記のアレンジメントに加えて、以下の記載から明らかになり本発明の主題である方法の具体的な実施例に関する他のアレンジメントをも包含する。しかしながら、これらの実施例は、本発明の主題を説明するための手段を提供するのみであって、何ら後者のものに限定されるものでないことは明確に理解されるべきである。合成された全誘導体は、元素分析に供され、得られた結果は、計算値と比較して、最大公差０．３％であった。プロトン核磁気共鳴スペクトルは、ＣＤＣｌ₃＋ＴＭＳ又はＤＭＳＯ−ｄ₆の溶液中でブルッカー(Brucker)WP200機器により記録された。適当な場合には、最も特徴的なケミカルシフトを実施例に示す。特に言及する場合を除いて、全ての生成物はハイドロブロマイドの状態で単離した。実施例１：１，１’−（１，１２−ドデカンジイル）ビス（４−メチル−２（１Ｈ）−ピリジンイミン）ジヒドロブロマイド。市販の１，１２−ジブロモドデカン０．１モルをメチルエチルケトン５００ミリリットルに溶解し、メチルエチルケトンに溶解させた４−メチル−２−アミノピリジン０．１５モルをアルゴン下で加え、該混合物を還流温度で反応の完了まで攪拌し続ける。反応の完了は薄層クロマトグラフィーによりモニターすることができ、最も一般的には４８時間を要する。沈殿物を濾去及び洗浄した後、粗生成物がそのハイドロブロマイドの形態で得られる。該生成物はイソプロパノール／メタノール（９：１）混合液中で再結晶させてもよい。その結果、きれいな白色結晶（融点２０６℃）が純生成物６６％の収率で得られる。別の態様として、該生成物は次のようにして調製される：４−メチル−２−アミノピリジン０．３６ｇ（３．３ｍｍｏｌ）をｎ−ＢｕＯＨ５ｍｌに溶解し、アルゴン下で、４８時間、１，１２−ジブロモドデカン０．５０ｇ（１．５２ｍｍｏｌ）の存在下で還流させる。反応媒体の冷却の後、生成物は結晶化する。それを濾過により回収し、少量のイソプロパノール、次いでエーテルで洗浄した後、乾燥させる。０．３０ｇの塩が得られる（収率４７％）。経験的な化学式：Ｃ₂₄Ｈ₄₀Ｎ₄Ｂｒ₂；分子量：４３６．２８；¹ＨＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ₆）：８．２７（ブロードｓ，４Ｈ，２×−ＮＨ₂ ，交換可能（exchangeable）；７．９８−７．９６（ＡＢシステムのパートＡ，２Ｈ，１２×Ｈ₆）；６．８１（ｍ，４Ｈ，２×（Ｈ₃＋Ｈ₅）），４．０８−４．０５（ｍ，４Ｈ，２×＞Ｎ−ＣＨ₂−）；２．３１（ｓ，６Ｈ，２×−ＣＨ₃）；１．２３−１．６３（ｍ，２０Ｈ，１０×−ＣＨ₂−）。実施例２：１，１’−（１，１２−ドデカンジイル）ビス（３−メチル−２（１Ｈ）−ピリジンイミン）ジヒドロブロマイド。市販の１，１２−ジブロモドデカン０．１モルをメチルエチルケトン５００ミリリットルに溶解し、メチルエチルケトンに溶解させた３−メチル−２−アミノピリジン０．１５モルをアルゴン下で加え、該混合物を還流温度で反応が完了するまで攪拌し続ける。反応の完了は薄層クロマトグラフィーによりモニターすることができ、最も一般的には４８時間を要する。沈殿物を濾去及び洗浄した後、粗生成物がそのハイドロブロマイドの形態で得られる。該生成物はイソプロパノール／メタノール（９：１）混合液中で再結晶させてもよい。そうすることにより、きれいな白色結晶（融点２２９℃）が純生成物３８％の収率で得られる。経験的な化学式：Ｃ₂₄Ｈ₄₀Ｎ₄Ｂｒ₂；分子量：５４４．４２，¹ＨＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ₆）：８．０８（ブロードｓ，４Ｈ，２×−ＮＨ₂ ，交換可能）；８．００（ＡＢシステムのパートＡ，２Ｈ，２×Ｈ₆）；７．７７（ｍ，２Ｈ，２×Ｈ５）；６．８８−６．８５（ＡＢシステムのパートＢ，２Ｈ，２×Ｈ₄）；４．２１（ｍ，４Ｈ，２×＞Ｎ−ＣＨ₂−）；２．２２（ｓ，６Ｈ，２×−ＣＨ₃）；１．２３−１．６３（ｍ，２０Ｈ，１０×−ＣＨ₂−）。実施例３：１，１’−（１，１２−ドデカンジイル）ビス（５−メチル−２（１Ｈ）−ピリジンイミン）ジヒドロブロマイド。市販の１，１２−ジブロモドデカン０．１モルをメチルエチルケトン５００ミリリットルに溶解し、メチルエチルケトンに溶解させた５−メチル−２−アミノピリジン０．１５モルをアルゴン下で加え、該混合物を還流温度で反応が完了するまで攪拌し続ける。反応の完了は薄層クロマトグラフィーによりモニターすることができる。沈殿物を濾去及び洗浄した後、粗生成物がそのハイドロブロマイドの形態で得られる。該生成物はイソプロパノール／メタノール（９：１）混合液中で再結晶させてもよい。２２１℃の融点を有する標題の誘導体が４０％の収率で得られる。経験的な化学式：Ｃ₂₄Ｈ₄₀Ｎ₄Ｂｒ₂；分子量：５４４．４２；¹ＨＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ₆）：８．０８（ブロードｓ，４Ｈ，２×−ＮＨ₂，交換可能）；８．００（ｍ，２Ｈ，２×Ｈ₆）；７．７０（ＡＢシステムのパートＡ，２Ｈ，２×Ｈ₃）；６．８０（ＡＢシステムのパートＢ，２Ｈ，２×Ｈ，）；４．２０（ｍ，４Ｈ，２×＞Ｎ−ＣＨ₂−）；１．２−１．６３（ｍ，２０Ｈ，１０×−ＣＨ₂−）。実施例４：１，１’−（１，１２−ドデカンジイル）ビス（６−メチル−２（１Ｈ）−ピリジンイミン）ジヒドロブロマイド。反応は、６−メチル−２−アミノ−ピリジンから出発して上記の条件下で行う。生成物をイソプロパノール中で再結晶させることにより精製する。標題の誘導体（融点２０５℃）が２３％の収率で得られる。実施例５：１，１’−（１，１２−ドデカンジイル）ビス（５−フェニル−２（１Ｈ）−ピリジンイミン）ジヒドロブロマイド。ジブロモドデカン及び２−アミノ−５−フェニルピリジンを用い、手順は前記と同様である。得られる生成物をメタノール中で再結晶させることにより精製する。その融点＝１８５℃。実施例６：１，１’−（１，１２−ドデカンジイル）ビス（３−フェニルメトキシ−２（１Ｈ）−ピリジンイミン）ジヒドロブロマイド。手順は上記と同様であり、ジブロモドデカン及びリュヅコウスキーアール．（Rydzkowski R.）の方法〔テトラヘドロンレターズ（Tetrahedron Letters） 26（1985）2571-1574〕で合成される２−アミノ−３−（フェニルメトキシ）ピリジンを用いる。実施例７：１，１’−（１，１２−ドデカンジイル）ビス（４−（４−メチル −フェニル）−２（１Ｈ）−ピリジンイミン）ジヒドロブロマイド。手順は上記と同様であり、ジブロモドデカン及びチャンブロンジェイ．シーエル．（Chambron J.Cl）ストラスボーグテトラッハ．（Strasbourg Tetrah. ）1987 43（5）895/905に従って合成される２−アミノ−４−パラ−トリルピリジンを用いる。得られる生成物を塩基状態でシリカカラムにおいてベンゼン／エチルアセテート混合液を用いて精製する。それをエーテルと臭化水素のイソプロパノール溶液との混合液でハイドロブロマイドに再転換する。それは次いで再結晶することができる。実施例８：１，１’−（１，１２−ドデカンジイル）ビス（３−ｎ−ブチル− ２（１Ｈ）−ピリジンイミン）ジヒドロブロマイド。ガッスマン（Gassman）の方法〔ジャーナル・オブ・アメリカン・ケミカル・ソサイエティ（J.Amer.Chem.Soc.）95（1973）4453〕に従って２−アミノ−３− ｎ−ブチルピリジンを調製し、対応するジブロモドデカンを用いて上記のように縮合させる。所望の生成物（融点１９２℃）が得られる。実施例９：１，１’−（１，１２−ドデカンジイル）ビス（５−クロロ−２（１Ｈ）−ピリジンイミン）ジヒドロブロマイド。反応は、メチルエチルケトン中の２−アミノ−５−クロロピリジンを用いて実施例１の条件下で行う。イソプロパノール／メタノール（９：１）混合液中で再結晶させた後、標題の誘導体（融点２３９℃）が１８％の収率で得られる。この生成物は次の経験的な化学式を有する：Ｃ₂₂Ｈ₃₄Ｎ₄Ｂｒ₂Ｃｌ₂。分子量：５８５．２６。 ¹ＨＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ₆）：８．６７（ブロードｓ，４Ｈ，２×−ＮＨ₂＋交換可能）；８．４６（ｍ，２Ｈ，２×Ｈ₆）；７．９９（ＡＢシステムのパートＡ，２Ｈ，２×Ｈ₃）；７．０５（ＡＢシステムのパートＢ，２Ｈ，２×Ｈ₄）；４．０９（ｍ，４Ｈ，２×＞Ｎ− ＣＨ₂−）；１．２−１．６６（ｍ，２０Ｈ，１０×−ＣＨ₂−）。実施例１０：１，１’−（１，１２−ドデカンジイル）ビス（４−ブロモ−２（１Ｈ）−ピリジンイミン）ジヒドロブロマイド。２−アミノ−４−ブロモピリジン〔ラーセン（Larsen）、スコット（Scott）W O93/25553による〕を用い、方法は前記と同様であり、所望の誘導体（融点２３０℃）が得られる。実施例１１：１，１’−（１，１２−ドデカンジイル）ビス（３−クロロ−５ −トリフルオロメチル−２（１Ｈ）−ピリジンイミン）ジヒドロブロマイド。ハガタカヒロ（Haga Takahiro）の方法〔ヘテロサイクルズ(Heterocycles) ，22（1984）1，117-124〕に従って合成される２−アミノ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルピリジンを用いる。先の方法に従って処理することにより、当該誘導体（融点１８５℃）が得られる。実施例１２：１，１’−（１，８−オクタンジイル）ビス（３−メチル−２（１Ｈ）−ピリジンイミン）ジヒドロブロマイド。市販の１，８−ジブロモオクタン０．１モルをメチルエチルケトン５００ミリリットルに溶解し、メチルエチルケトンに溶解させた５−メチル−２−アミノピリジン０．１５モルをアルゴン下で加え、該混合物を還流温度で反応が完了するまで攪拌し続ける。反応の完了は薄層クロマトグラフィーによりモニターすることができ、最も一般的には４８時間を要する。沈殿物を濾去及び洗浄した後、粗生成物がそのハイドロブロマイドの形態で得られる。該生成物はイソプロパノール／メタノール（９：１）混合液中で再結晶させてもよい。２４１℃の融点を有する標題の誘導体が４０％の収率で得られる。実施例１３：１，１’−（１，８−オクタンジイル）ビス（４−メチル−２（１Ｈ）−ピリジンイミン。市販の１，８−ジブロモオクタン０．１モルをメチルエチルケトン５００ミリリットルに溶解し、メチルエチルケトンに溶解させた４−メチル−２−アミノピリジン０．１５モルをアルゴン下で加え、該混合物を還流温度で反応が完了するまで攪拌し続ける。反応の完了はＴＬＣによりモニターすることができる。沈殿物を濾去及び洗浄した後、粗生成物がそのハイドロブロマイドの形態で得られる。生成物はイソプロパノール／メタノール（９：１）混合液中で再結晶させてもよい。その結果、きれいな白色結晶（融点２４８℃）が純生成物４７％の収率で得られる。別の態様としては、この生成物は以下のようにして調製される：２−アミノ−４−メチルピリジン２ｇ（１８．５ｍｍｏｌ、３当量）及びブタノン５０ｍｌ中の１，８−ジブロモオクタン６．１６ｍｍｏｌ（１．７ｍｌ）をコンデンサー及びマグネチックスターラーを備えた１００ｍｌ容量のグラウンドネック・エルレンマイヤー（ground-necked Erlenmeyer）に入れる。混合物を加熱して３６時間還流した後、４℃で終夜放置する。沈殿物を濾去し、メタノール／イソプロパノール／エーテル混合液中で再結晶させる（４８時間、４℃）。その結果、きれいな白色結晶（融点２４７〜２５０℃）が純生成物５２％の収率で得られる。 ¹ＨＮＭＲＤＭＳＯ−ｄ₆中（δ ｐｐｍで）：１．２５（ｍ，８Ｈ），１．６５（ｍ，４Ｈ）；２．３（ｓ，６Ｈ）；４．１（ｔ，４Ｈ）；６．８５（ｍ，４Ｈ）；８．００（ｄ，２Ｈ），８．４５（ｓ，４Ｈ）。実施例１４：１，１’−（１，６−ヘキサンジイル）ビス（４−メチル−２（１Ｈ）−ピリジンイミン）ジヒドロブロマイド。反応は、上記の条件下で１，６−ジブロモヘキサンを用いて行われる。イソプロパノール中で再結晶させた後、標題の誘導体（融点２５３℃）が得られる。実施例１５：１，１’−（１，１６−ヘキサデカンジイル）ビス（４−メチル −２（１Ｈ）−ピリジンイミン）ジヒドロブロマイド。通常の条件下で１，１６−ジブロモヘキサデカンを用いて反応を実施し、イソプロパノール／メタノール混合液中で再結晶させた後、標題の誘導体（融点１６７−１７０℃）が得られる。別の態様として、この生成物は以下のようにして調製される：２−アミノ−４−メチルピリジン２．１１ｇ（３当量）及びブタノン５ｍｌ中の１，１６−ジブロモドデカン２４９ｍｇ（０．６５ｍｍｏｌ）を、コンデンサー及びマグネチックスターラーを備えた１００ｍｌ容量グラウンドネック・エルレンマイヤーに入れる。該混合物を加熱して３６時間還流し；溶媒を蒸発除去し、イソプロパノールを添加し、その後、エーテルを混合物が濁るまで添加する。該溶液を４℃で２日間放置する。得られる沈殿物を濾去し、デシケーター中で乾燥させる。その結果、生成物が３９％の収率で得られる。 ¹ＨＮＭＲＤＭＳＯ−ｄ₆中（δ ｐｐｍで）：１．２（ｍ，２４Ｈ），１．６５（ｍ，４Ｈ）；２．３（ｓ，６Ｈ）；４．１（ｔ，４Ｈ）；６．８（ｍ，４Ｈ），７．９５（ｄ，２Ｈ），８．３（ｓ，４Ｈ）。実施例１６：１，１’−（１，１６−ヘキサデカンジイル）ビス（６−エチル −２（１Ｈ）−ピリジンイミン）ジヒドロブロマイド。ハンシュ（Hansch）により記載されている４−エチル−２−アミノピリジン及び１，１６−ジブロモヘキサデカンから出発して、標題の誘導体（融点１０５／１１０℃）を得る。実施例１の方法を用いて、また文献〔ドーナウ（Dornow），ローヘ（Rohe），ケミッシェベリヒテ（Chem.Ber.），93，1960，1093/1097；ウェントラプ（We ntrup），メイヨフ（Mayov），ジャーナル・オブ・アメリカン・ケミカル・ソサイエティ（J.Amer.Chem.Soc.）,97，1975，7468/7477；ラオヴェンカテスバルル（Rao Venkateswarlu），ジャーナル・オブ・ヘテロサイクリック・ケミストリー（J.Heterocycl.Chem.），12，1975，731/732〕に従って合成された種々のジメチル−２−アミノピリジン類から出発して、次のような１，１’−（１，１２−ドデカンジイル）ビス（ジメチル−置換２（１Ｈ）−ピリジン−イミン）類をジヒドロブロマイドの形態で得る：実施例１７：１，１’−（１，１２−ドデカンジイル）ビス（３，４−ジメチル−２（１Ｈ）−ピリジンイミン）。実施例１８：１，１’−（１，１２−ドデカンジイル）ビス（３，５−ジメチル−２（１Ｈ）−ピリジンイミン）。実施例１９：１，１’−（１，１２−ドデカンジイル）ビス（３，６−ジメチル−２（１Ｈ）−ピリジンイミン）。実施例２０：１，１’−（１，１２−ドデカンジイル）ビス（４，５−ジメチル−２（１Ｈ）−ピリジンイミン）。実施例２１：１，１’−（１，１２−ドデカンジイル）ビス（４，６−ジメチル−２（１Ｈ）−ピリジンイミン）。実施例２２：１，１’−（１，１２−ドデカンジイル）ビス（５，６−ジメチル−２（１Ｈ）−ピリジンイミン）。同じ方法を用いて、文献〔例えば、ロビソン（Robison），ジャーナル・オブ・アメリカン・ケミカル・ソサイエティ（J.Amer.Chem.Soc.），79，1957，2573 /2576；ハンシュ（Hansch），ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（J.Org.Chem.），23，1958，1924 ;チルドレス（Childress），ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（J.Org.Chem.），23，1958，67；ヤコントフ（Yakhontov），ケミ．ヘテロサイクリック・コンパウンド（Chem.Heterocycl.Compd.），3，1967，8 29/830〕の方法に従って合成されたエチル−２−アミノピリジン類から出発して１，１’−（１，１２−ドデカンジイル）ビス（アルキル−置換２（１Ｈ）−ピリジンイミン）類を得る。実施例２３：１，１’−（１，１２−ドデカンジイル）ビス（３−エチル−２（１Ｈ）−ピリジンイミン）。実施例２４：１，１’−（１，１２−ドデカンジイル）ビス（４−エチル−２（１Ｈ）−ピリジンイミン）。実施例２５：１，１’−（１，１２−ドデカンジイル）ビス（５−エチル−２（１Ｈ）−ピリジンイミン）。実施例２６：１，１’−（１，１２−ドデカンジイル）ビス（６−エチル−２（１Ｈ）−ピリジンイミン）。薬理試験： −熱帯熱マラリア原虫（Plasmodium falciparum）に対するインビトロでの抗マラリア活性：インビトロでの抗マラリア活性の評価をデスジャーディンズ（DESJARDINS）、カンフィールド（CANFIELD）、ハトネス（HATNES）及びチューライ（CHULAY）の方法〔アンチミクロビアル・エイジェンツ・ケモセラピー（Antimicrob.Agents Chemother.）1979，16，710-718〕に従って実施する。本発明の化合物を熱帯熱マラリア原虫に感染したヒト赤血球と約４８時間接触させる。放射性核酸前駆体としてヒポキサンチンを該調製物に添加すると、マラリア原虫に感染し該化合物によって影響を受けない赤血球だけがこの前駆体を取り込む。従って、該前駆体を取り込む能力又は不能力は、マラリア感染細胞の生存能力を反映する。結果を下記の表１に、ＩＣ₅₀（又はＥＤ₅₀）（インビトロで寄生虫の成長を５０％まで抑制することができる化合物の濃度）の形式で示す。上記実施例の誘導体を三つの濃度（１００、３３及び１０ナノモル）で試験する。作用機構の確認は、本発明の種々の誘導体について、放射性ラベルした前駆体（［³Ｈ］ヒポキサンチン（上記参照）、［³Ｈ］イソロイシン及び［³Ｈ］コリン）の取り込みに基づいて、リン脂質生合成との特異的な干渉を研究し、また異なる生体分子、核酸、タンパク質及びリン脂質の生合成を測定することにより行われる。リン脂質代謝の正確な領域での特異性は、［³Ｈ］エタノールアミンのホスファリジルエタノールアミンへの取り込みにおける影響と比較することにより決定される〔アンセリンエム．エル．（Ancelin M.L.），ビアレッテスエフ．（Vialettes F.）及びビアルエッチ．ジェイ．（Vial H.J.），1991，アナリティカル・バイオケミストリー（Anal．Biochem.），199，203-2 09〕。これらの条件下において、上に記載した全誘導体の中で、実施例１の化合物が、他の高分子（核酸、タンパク質、他のリン脂質）の生合成に関して、フォスファチジルコリンの生合成に対して最大の活性特異性を有するものであることが判明した。 −インビボでの抗マラリア活性及び毒性この活性はペターズダブリュ．（PETERS W.）によって記載された試験〔ケモセラピー・アンド・ドラッグ・レジスタンス・イン・マラリア（Chemotherapy and Drug resistance in Malaria）,1970〕に従って測定される。本発明の化合物を、連続して４日間、事前にプラスモジウム・ビンケイ（Plasmodium vinckei ）、ペッテリ（petteri）又はチャバウディ（Chabaudi）を用いてマラリアに感染させたマウスに投与する。当該化合物を０．９％ＮａＣｌ水溶液、又は適切な場合には１０％アラビアゴム水溶液に溶解する。該調製物を、事前にプラスモジウム・ペッテレイ（Plasmo dium petterei）又はプラスモジウム・チャバウディ（１０⁶感染細胞）で静脈注射によって感染させた平均体重３０〜４０ｇの雄性スイスマウス（Swiss mice）に腹膜腔内又は皮下に投与する。化合物を毎日２回連続４日間投与する。最初の注射は感染後２時間に、２回目は感染後１０時間に実施する。処理が完了した翌日に、寄生虫血（parasitaemia）を塗沫(smear)手法により決定する。結果を表IIに、ＥＤ₅₀（インビボで寄生体の成長を５０％阻害することができる投与化合物の用量）の形式でまとめる。この表IIにはまた、同じ方法に従って、つまり上記試験に用いられた投与条件下で毎日２回の注射を４日間受けた動物について測定した毒性（半慢性毒性（semi-chronic toxicity）も示す；結果はＬＤ₅₀（５０％の動物の死を引き起こす化合物の用量）の形で表す。 −インビトロでの抗バベシア活性：一連の抗マラリアに使用された、［³Ｈ］ヒポキサンチンの寄生虫への取り込みに基づくスクリーニング方法は、そのような化合物のウシバベシアに対する代謝拮抗薬物活性を試験するために用いることができる。標準測定での［³Ｈ］ヒポキサンチンの取り込みと顕微鏡試験により決定される寄生細胞の割合との間に密接な関連が見出される。［³Ｈ］ヒポキサンチンの取り込みを５０％阻害する化合物の濃度（ＩＤ₅₀）を下記の表Ｉにまとめる。以上より明らかなように、本発明は、現により明確に記載される具体例及び用途の態様及び応用に何ら限定されるものではない；それどころか、本発明の範囲又は領域から外れることなく当業者が行うであろうあらゆる変形をも包含するものである。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】１９９６年７月３０日【補正内容】請求の範囲１．一般式（Ｉ）〔式中：Ｑは： − Ｃ₆−Ｃ₂₀アルキル基 − 置換されていてもよいアリール基又は − シクロアルキル基、を表し、かつ２つのピリジン環の間に、（ＣＨ₂）_nと共に全部で６〜３４個の炭素原子を有する炭化水素結合を形成する。ｎは、０〜７の数であり、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃及びＲ₄は、同一又は異なって： − 水素原子、 − 置換されていてもよい直鎖状又は分岐状のＣ₁−Ｃ₆アルキル基、 − １個又はそれ以上のハロゲン原子又はＣ₁− Ｃ₆アルキル若しくはＣ₁−Ｃ₆アルコキシラジカルで置換されていてもよいアリール基、 − ベンジル基、 − チエニル基、 − フリル基、 − ハロゲン原子、 − アルコキシ又はベンジルオキシ基、を表す。但し、Ｑが、ｍが６〜２０である（ＣＨ₂）_m結合を表す場合に、ラジカルＲ₁、Ｒ₂、Ｒ₃及びＲ₄の少なくとも１つが水素原子でないことを条件とする。〕で表されるビス（２−アミノピリジン）並びにそれらの付加塩。２．Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃又はＲ₄が、３，４及び／又は５位においてメチル，クロロ若しくはフェニル基を表し、ＱがＣ₆−Ｃ₂₀のアルキル基を表し、２つのピリジン環の間の炭化水素結合がドデカン，ヘキサデカン，オクタン又はデカンを構成することを特徴とする請求の範囲第１項に記載のビス（２−アミノピリジン）。３．式（II）Ｈａｌ−（ＣＨ₂）_n−Ｑ−（ＣＨ₂）_n−Ｈａｌ（式中、Ｈａｌはハロゲン原子を表し、ｎ及びＱは上記の一般的な意味を有する。）の誘導体を、式（III）：（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃及びＲ₄は上記と同じ意味を有する）の化合物と溶液中で反応させ、一般式（Ｉ）の生成物を、対応するジハライドの状態で得て、所望により、該ジハライドをアルカリ化し、別の酸塩に転換することを特徴とする請求の範囲第１項又は第２項に記載の一般式（Ｉ）のビス（２− アミノピリジン）の製造方法。４．式IIの化合物及び式IIIの化合物が、１：２の割合、好ましくは化合物11 がわずかに多く存在することを特徴とする請求の範囲第３項に記載の方法。５．請求の範囲第１項又は第２項に記載のビス（２−アミノピリジン）を少なくとも一種含有することを特徴とする医薬品。６．有効成分として、請求の範囲第１項又は第２項に記載の式（Ｉ）で表される生成物又はそのような化合物の酸付加塩の少なくとも一種を有効用量含有し、さらに、適当な賦形剤及び添加剤を含む薬学的組成物。７．Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃及びＲ₄が水素原子を表し、ＱがＣ₆−Ｃ₂₀アルキル基を表す、医薬品としての請求の範囲第１項に記載の一般式（Ｉ）で表されるビス（２ −アミノピリジン）。８．有効物質として、請求の範囲第７項に記載の化合物を有効量含有することを特徴とする、赤血球内の寄生虫症を治療（combat）するための薬学的組成物。９．請求の範囲第１項又は第２項に記載の化合物の少なくとも一種を有効量含有することを特徴とする赤血球内の寄生虫症を治療（combat）するための薬学的組成物。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＡＭ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＥＥ，ＦＩ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者ブールギニオンジャン−ジャックフランス国エフ−67150 イプスアイムリュドブルリー 14 (72)発明者アンスランマリー−ロールフランス国エフ−34270 サン−ジャン −ド−キュキュルシュマンデシャルチエ（以下番地なし) (72)発明者ジラルルイフランス国エフ−34000 モンペリエアベニュドゥペール−スーラレドゥルイソー 1526

Claims

【特許請求の範囲】１．一般式（Ｉ）〔式中：Ｑは： − Ｃ₆−Ｃ₂₀アルキル基 − 置換されていてもよいアリール基又は − シクロアルキル基を表し、かつ２つのピリジン環の間に全部で６〜３４個の炭素原子を有する炭化水素結合を形成する。ｎは、０〜７の数であり、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃及びＲ₄は、同一又は異なって： − 水素原子、 − 置換されていてもよい直鎖状又は分岐状のＣ₁−Ｃ₆アルキル基、 − １個又はそれ以上のハロゲン原子又はＣ₁− Ｃ₆アルキル若しくはＣ₁−Ｃ₆アルコキシラジカルで置換されていてもよいアリール基、 − ベンジル基、 − チエニル基、 − フリル基、 − ハロゲン原子、 − アルコキシ又はベンジルオキシ基、を表す。但し、Ｑが、ｍが６〜２０である（ＣＨ₂）_m結合を表す場合に、ラジカルＲ₁、Ｒ₂、Ｒ₃及びＲ₄の少なくとも１つが水素原子でないことを条件とする。〕で表されるビス（２−アミノピリジン）並びにそれらの付加塩。２．Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃又はＲ₄が、３，４及び／又は５位においてメチル，クロロ若しくはフェニル基を表し、ＱがＣ₆−Ｃ₂₀のアルキル基を表し、２つのピリジン環の間の炭化水素結合が、ドデカン，ヘキサデカン，オクタン又はデカンを構成することを特徴とする請求の範囲第１項に記載のビス（２−アミノピリジン）。３．式（II）Ｈａｌ−（ＣＨ₂）_n−Ｑ−（ＣＨ₂）_n−Ｈａｌ（式中、Ｈａｌは、ハロゲン原子を表し、ｎ及びＱは、上記した一般的な意味を有する。）の誘導体を、式（III）：（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃及びＲ₄は、上記と同じ意味を有する）の化合物と溶液中で反応させ、一般式（Ｉ）の生成物を、対応するジハライドの状態で取得し、所望により、該ジハライドをアルカリ化して別の酸塩に転換することを特徴とする請求の範囲第１項又は第２項に記載の一般式（Ｉ）のビス（２ −アミノピリジン）の製造方法。４．式IIの化合物及び式IIIの化合物が、１：２の割合、好ましくは化合物II がわずかに多く存在することを特徴とする請求の範囲第３項に記載の方法。５．請求の範囲第１項又は第２項に記載のビス（２−アミノピリジン）を少なくとも１種含有することを特徴とする医薬品。６．有効成分として、請求の範囲第１項又は第２項に記載の式（Ｉ）で表される生成物又はそのような化合物の酸付加塩の少なくとも１種を有効用量含有し、さらに、適当な賦形剤及び添加剤を含む薬学的組成物。７．Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃及びＲ₄が水素原子を表し、Ｑが、Ｃ₆−Ｃ₂₀アルキル基を表す、医薬品としての請求の範囲第１項に記載の一般式（Ｉ）で表されるビス（２−アミノピリジン）。８．有効物質として、請求の範囲第７項に記載の化合物を有効量含有することを特徴とする、赤血球内の寄生虫症を治療（combat）するための薬学的組成物。９．請求の範囲第１項又は第２項に記載の化合物の少なくとも１種を有効量含有することを特徴とする赤血球内の寄生虫症を治療（combat）するための薬学的組成物。