JPH10511673A

JPH10511673A - スクラレオリドを用いる細胞過度増殖を特徴とする病気の処置法

Info

Publication number: JPH10511673A
Application number: JP8520787A
Authority: JP
Inventors: ブラケ，ピエール; ビツグ，デニス
Original assignee: ソシエテドコンセイユドルシエルシエエダアツプリカーシヨンシヤンテイフイツク（エス．セー．エール．アー．エス）
Priority date: 1995-01-04
Filing date: 1996-01-04
Publication date: 1998-11-10
Also published as: GB9500024D0; EP0793492A1; DE69627298D1; EP0793492B1; ATE236630T1; WO1996020704A1; AU4530796A; CA2209276A1; US5906993A

Abstract

(57)【要約】治療上有効な量の(+)スクラレオリドを患者に投与することからなる、患者の細胞過度増殖を特徴とする病気の処置法。

Description

【発明の詳細な説明】スクラレオリドを用いる細胞過度増殖を特徴とする病気の処置法 (+)スクラレオリド(sclareolide)、[3aR-(3aα,5aβ,9aα,9bα)]-デカヒドロ -3a,6,6,9a-テトラメチルナフト[2,1-b]フラン-2(IH)-オンは、例えばタバコ中に見出だされる天然の二環式テルペノイドである。Kaneko,H.,Agr.Biol.Chem.35 (9):1461(1971)。(+)スクラレオリドは下記の構造を有する： (+)スクラレオリドが食料品官能検査の特性を向上又は発現させることは公知である。例えば米国特許第4,917,913号,4,960,603号,4,966,783号，4,988,527号及び4,999,207号参照。この化合物は紙巻タバコ用香料として(日本国特許第60/1 23483号)またコーヒーの苦味を除くための添加物として(米国特許第4988532号) 用いられている。しかしながら、本出願人の知る限りでは、従来、(+)スクラレオリドが医薬として有効な化合物として使用され或いは提供されてはいない。本発明は治療上有効な量の(+)スクラレオリドを患者に投与することからなる、患者(例えばヒトのごとき哺乳類)の細胞過度増殖を特徴とする病気を抑制する方法に関する。ある状態において、患者は良性の（即ち悪性ではない）細胞過度増殖と関連した病気に罹病している。この種の病気の例は繊維症、良性前立腺肥大、動脈硬化症、回帰狭窄症、糸球体硬化症、ケロイド、乾癬その他の皮膚病及び悪性ではない腫瘍症である。別の状態においては、患者は悪性の細胞過度増殖に関連した病気（例えば癌）に罹病している。この種の病気の例は腺腫、癌腫、前立腺、肺、肝臓、すい臓、脳、乳房及び皮膚の癌ならびに白血病である。治療上有効な量は、処置される症状及び選択される投薬経路並びに使用される成分の固有の活性に依存し、処置する医師又は獣医師により最終的に決定される。(+)スクラレオリドは患者の体重1kg当り、0.1〜500mg(例えば患者の体重1kg当り1〜100mg)の量で投与される。 (+)スクラレオリドは純粋な又は実質的に純粋な化合物の形で投与することができ、また製剤、調剤又は医薬組成物の形で提供し得る。本発明においてヒトにも動物にも使用される製剤は(+)スクラレオリドを、その薬理学的に許容される担体の１種又それ以上と組合されており、また場合により他の治療成分を含むこともできる。担体は“許容される”、即ち、製剤の有効成分（単数又は複数）と両立性でありかつ処置される患者にとって有害でないものでなくてはならない。これらの製剤は単位投与薬の形で好都合に提供することができ、また、医薬の分野で周知の任意の方法により調製できる。これらの方法はいずれも、(+)スクラレオリドを担体と組合わせる工程を包含する；この担体は二次的な成分の１種又はそれ以上を含むことができる。一般に、錠剤（例えば経口投与用の）又は粉末製造用組成物は、(+)スクラレオリドと微粉砕した固体担体とを均質にかつ緊密に混合しついで、錠剤の場合のように、必要ならば所望の寸法及び形状とするために材料を成形することにより調製される。非経口投与（例えば皮下、脈管内又は筋肉内投与）に適した組成物は、更に、 (+)スクラレオリドが溶解可能な滅菌水溶液を含んでいることが好都合である。これらの溶液は処置すべき患者の血液と等圧であることが望ましい。これらの組成物は(+)スクラレオリドをこの種の水溶液に溶解させることにより好都合に調製でき、引き続いて該溶液を滅菌する。この組成物は単一投与量又は数倍量の容器、たとえばアンプル又は密封ガラス瓶内に封入しておくことができる。従って、本発明は、更に、薬学的に許容される担体の１種又はそれ以上と組合わせた(+)スクラレオリドを有効成分として含有する医薬組成物にも関する。本発明の別の対象は、細胞過度増殖を特徴とする病気の処置用医薬の調製のための(+)スクラレオリドの使用を特許請求することである。この種の病気の例は繊維症、良性前立腺肥大、動脈硬化症、再帰狭窄症、糸球体硬化症、ケロイド、乾癬その他の皮膚病及び悪性でない腫瘍症、腺腫、癌腫、前立腺、肺、肝臓、すい臓、脳、乳房及び皮膚の癌ならびに白血病である。特に本発明は病気の処置法における医薬としての(+)スクラレオリドの使用に関する。本発明のその他の特徴及び利点は本発明の詳細な記述及び請求の範囲において明らかとなる。当業者であれば本明細書に基づいて本発明を全体的に利用し得ると考えられる。従って下記の個々の態様は、単なる例示であり、いかなる場合においても開示の残部を除外すると解すべきではない。別の定義がない限り、ここで使用する科学技術用語は、全て、本発明の属する技術分野の当業者が通常に理解するものと同じ意味のものである。同様に本明細書で言及されている刊行物、特許明細書及びその他の文献は全て、参照として包含される。 (+)スクラレオリド (+)スクラレオリドは幾つかの発売元、例えば、ミズーリ州、セントルイス市所在、アルドリッチ・ケミカル社から市販されている。また(+)スクラレオリドは、例えば、(-)スクラレオール（アルドリッチ・ケミカル社）又はホモファルネシル酸から合成により調製することもできる。例えば、Coste-Maniere及び共同研究者、Tetrahedron Letters,29(9):1017(1988)Mantres及び共同研究者、Tet rahedron Letters,34(4):629(1993)；ドイツ特許第4,301,555号及び3,942,358号；及びPCT出願 WO 93/21174号参照。良性前立腺肥大(HPB)の増殖抑止 (+)スクラレオリド溶液をジメチルスルホシド(DMSO)(0.5％)を用いて希釈して調製する。使用する培地は血清を全く含まない最小必須培地(MEM,Gibco,Taisley ,Royaume-Uni)であるが、L-グルタミン(0.6mg/ml ,Gibco)、ゲンタマイシン(40 μg/ml ,Gibco)、ペニシリン(100IV/ml ,Gibco)及びストレプトマイシン(100μg /ml ,Gibco)が添加されている。トリチウム化チミジン(thymidine tritiatee)(dThd;spec.act.,48Ci/mmol)はAmersham(Little Chalf ont,Royaume-Uni)から購入した。温置培地へ添加すべき溶液は応急にMEMで適宜希釈して調製した。HPBの組織は解放の、恥骨後方での前立腺切除を受けた、以前未処置の前立腺のある患者10人（年令の幅：56-80；平均年令±標準偏差：68 ±12）から得られた。試料はMEM中、冷間で手術室から引き取られ、Launoit Y, 及び共同研究者,The Prostate,13:143(1988)に詳細に記載されている器官培養のために処置する前に１〜３時間の間、４℃に保持する。各HPB試料について各実験条件を、MEM培地2.5/ml を含有するペトリ皿（直径3cm、Gibco）内に置かれた組織片(0.5-1mm³)10個のシリーズにより測定した。これらの培養を、対照媒体中、又は上皮増殖因子(FCE)10nM又は塩基性、繊維芽細胞増殖因子(FCFb)10nMを添加した、10^-4M（最終濃度）の(+)スクラレオリドを含むか又は含まない媒体中に温置した。FCE又はFCFbは培養の初めに添加した。(+)スクラレオリドはFCE又はF CFbより２４時間後に添加した。培養開始後72時間目、即ち、(+)スクラレオリド添加後48時間目に培養物をEFA定着液（96°エタノール70容積％、中性フォルモル25容積％、酢酸５容積％）中に浸した。トリチウム化チミジン(2μCi/ml MEM) を培地へ４回、即ち、定着前36時間、24時間、12時間及び１時間に添加した。トリチウム化チミジンを用いる標識法はチミジン標識指数(IMT)の推算ができる。IMTは細胞のサイクルのS 相に取り込まれた細胞の百分率を表す。従ってこの指数は所与の組織中の増殖速度の間接推算を表す。ここで用いる方法はLaunoi t Y及び共同研究者,The Prostate,13:143(1988)に詳細に記載されているものと同じである。IMTは次ぎのようにして測定した。各々のHPB試料から２片を切り取った。IMTは各々のHPBの間質及び上皮区分内で個別に測定した。この目的で、IM Tの計算はHPB切片ごとに間質細胞300-800個及び上皮細胞300-800個について実施した。かくして，HPB試料ごとに合計で間質細胞600-1600個及び上皮細胞600-160 0個また実験条件ごとに合計で間質細胞6000-16000個及び上皮細胞6000-16000個について計算した。核の標識は、平均値が他のものより10倍高い複数の銀粒子により核が被われたとき正とみなされた。 (+)スクラレオリドは、濃度10⁴Mについて、FCFbにより剌激されたHPB の器官に典型的な細胞の増殖を70％に、また上皮増殖因子により剌激されたHPB細胞増殖を60％に抑制することが確認された。繊維芽細胞増殖の抑制繊維芽細胞のDNA中に［³H］メチルチミジンを合体させて繊維芽細胞増殖を測定するのに適したマウスのはい胎細胞(CES)の培養物が用いられた。CESをドウルベッコ(Dulbecco)の改質必須媒体(DMEN;Gibco)中に懸濁させた。この実験ではDM EMはグルコース１g/l 、ペニシリン100μg/ml 、ストレプトマイシン100μg/ml 及びウシ胎児血清10％を含んでいた。24個の凹みを有する培養板に懸濁液500μl を満たし（凹み１個あたり細胞70000個）、37℃、CO₂５％のインキュベータ内に24時間保持した。翌日各凹み内の培地を、細胞再生速度を下げて細胞を定常位相に保つ目的で、ウシ胎児血清を0.5％含有するDMEM500μl で置換した。翌日、培地を置換し（各凹みあたり１μl ）、種々の濃度の(+)スクラレオリド溶液を含むか又は含まないFCFbを用いて細胞を剌激した。(+)スクラレオリド溶液はDMSO水溶液で希釈して調製した。翌日、［³H］メチルチミジン(1μCi/ml )を添加し、培養板を37℃ に４時間保持した。引き続いて温置媒体を除き，冷却した10％トリクロロ酢酸（ ATC,シグマ・ケミカル社）１ml を添加した。30分後に４℃においてATCを除き、培養板を水で濯ぎ、各凹みにNaOH(0.3m)500μl を添加した。培養板を１夜間4℃ に保持した。翌日各凹みの培養をシンチレーション用ガラス瓶へ移した。NaOHを HCl(0.3N)500μl で中和し、シンチレーション用ガラス瓶の放射能をベックマン・シンチレーション計数器(＃L56000SG型)により測定した。 (+)スクラレオリドはFCFbにより刺激された繊維芽細胞の増殖を濃度 10^-7Mについては50％に、また濃度10^-5Mについては70％に抑制することが確認された。本発明を詳細に記述したが、以上の記述は請求の範囲により定義される本発明の応用範囲を説明することを目的としこれを限定するものではない。その他の面、利点及び改変は請求の範囲において明かとなる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＡ６１Ｋ 31/365 ＡＤＶＡ６１Ｋ 31/365 ＡＤＶ // Ｃ０７Ｄ 307/92 Ｃ０７Ｄ 307/92 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ

Claims

【特許請求の範囲】１．治療上有効な量の(+)スクラレオリドを患者に投与することからなる、患者の細胞過度増殖を特徴とする病気の処置法。２．前記細胞増殖は良性である請求項１に記載の方法。３．前記病気は繊維症である請求項１に記載の方法。４．前記病気は良性前立腺肥大である請求項１に記載の方法。５．(+)スクラレオリドを非経口投与する請求項１に記載の方法。６．(+)スクラレオリドを皮下経由で投与する請求項５に記載の方法。７．(+)スクラレオリドを経口投与する請求項１に記載の方法。８．(+)スクラレオリドを非経口投与する請求項２に記載の方法。９．(+)スクラレオリドを皮下経由で投与する請求項８に記載の方法。 10．(+)スクラレオリドを経口投与する請求項２に記載の方法。 11．(+)スクラレオリドを非経口投与する請求項３に記載の方法。 12．(+)スクラレオリドを皮下経由で投与す請求項11に記載の方法。 13．(+)スクラレオリドを経口投与する請求項３に記載の方法。 14．(+)スクラレオリドを非経口投与する請求項４に記載の方法。 15．(+)スクラレオリドを皮下経由で投与する請求項14に記載の方法。 16．(+)スクラレオリドを経口投与する請求項４に記載の方法。 17．(+)スクラレオリドを薬学的に許容される担体の１種又はそれ以上と組み合わせて含有する医薬組成物。 18．繊維症、良性前立腺肥大、動脈硬化症、回帰狭窄症、糸球体硬化症、ケロイド、乾癬その他の皮膚病及び悪性でない腫瘍症、腺腫、癌腫、前立腺、肺、肝臓、すい臓、脳、乳房及び皮膚の癌ならびに白血病のごとき細胞過度増殖を特徴とする病気の処置のための医薬の調製のための(+)スクラレオリドの使用。 19．良性前立腺肥大又は繊維症の処置用の医薬調製のための，請求項18に記載の(+)スクラレオリドの使用。