JPH1057086A - 高濃度ドコサヘキサエン酸モノグリセリドの製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）モノグリセリ
ドを、従来にない高い含有率で含有した油脂を効率良く
製造する方法を提供する。 【解決手段】 ２価陽イオンと水溶性高分子の水溶液に
ＤＨＡを含有した油脂を分散させ、これにリパーゼを作
用させた後、分子蒸留により高濃度ＤＨＡモノグリセリ
ド画分と高濃度ＤＨＡジおよびトリグリセリド画分を採
取し、低濃度ＤＨＡモノグリセリドと遊離脂肪酸を含む
画分を再度リパーゼ反応にリサイクルすることによりＤ
ＨＡ純度を上昇させる。 【効果】 得られた高濃度ＤＨＡモノグリセリド画分の
モノグリセリド含有率は９０％以上、ＤＨＡ純度は６０
％以上であり、健康食品、栄養強化食品、および医薬品
原料等としてきわめて有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、ドコサヘキサエン
酸を含有する油脂を原料としてリパーゼを作用させ、ド
コサヘキサエン酸を原料油脂よりも高濃度に含有するド
コサヘキサエン酸モノグリセリド含有油脂の製造方法に
関するものである。

【０００２】

【従来の技術】ドコサヘキサエン酸（以下、ＤＨＡと略
称することがある）は、ω−３系多価不飽和脂肪酸の一
種で魚油等に多く含まれていることが知られている。Ｄ
ＨＡには血小板凝集抑制作用、血中中性脂肪低下作用、
血中コレステロール低下作用、制癌作用、脳機能向上効
果等の種々の生理活性機能があることが知られている。
魚油中のＤＨＡの形態は通常トリグリセリドであり、Ｄ
ＨＡの含有率は構成脂肪酸中多くても２０〜３０％であ
り、ＤＨＡ以外にパルミチン酸、ステアリン酸等の飽和
脂肪酸やリノール酸に代表されるω−６系多価不飽和脂
肪酸のような過剰摂取が問題になっている成分が大量に
含まれているため、魚油そのものを健康食品や医薬品と
して使用することは不都合である。

【０００３】一方、ドコサヘキサエン酸のエチルエステ
ルの形態としては高純度の物が市販されているが、エチ
ルエステルはグリセリドに比較してヒトの消化器官での
吸収が劣ることが知られている（Ｌａｒｒｙ Ｄ．ｅｔ
ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｐｈ
ｙｓｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａ
ｔｉｏｎｓ Ｖｏｌ．１５２，ＮＯ１，Ｐａｇｅ３２８
−３３５（１９８８））。さらに、ＤＨＡトリグリセリ
ドは消化器官内で膵臓リパーゼの作用により、モノグリ
セリドと遊離脂肪酸に加水分解されて吸収されることか
ら（原健次著、生理活性脂質ＥＰＡ・ＤＨＡの生化学と
応用、Ｐａｇｅ１２４，幸書房（１９９６））、モノグ
リセリド態のＤＨＡを直接摂取した方が消化吸収の面か
ら有利である。

【０００４】本発明者らは以上の点に着目し、既に油脂
の構成脂肪酸のうちＤＨＡを６０％以上含有し、グリセ
リド中モノおよびジグリセリドが８０％以上である油脂
を発明している（特開平８−６０１８１号公報）。ま
た、リパーゼを触媒として魚油のエタノリシスを行いＤ
ＨＡ以外の脂肪酸をエチルエステルとして除去し、ＤＨ
Ａモノグリセリドを製造する方法が報告されている（Ｄ
ＨＡ高度精製抽出技術開発事業研究報告書（平成４−６
年度）、Ｐａｇｅ１８５−２００、ＤＨＡ高度精製抽出
技術研究組合、平成７年１１月）。

【０００５】上記の特開平８−６０１８１号公報に記載
の方法は、２価陽イオンと水溶性高分子化合物を溶解し
た水溶液にＤＨＡを含有する油脂を分散し、キャンディ
ダ属由来のリパーゼを作用させてＤＨＡを６０％以上含
有するモノ、ジ、トリグリセリドの混合物に関するもの
であり、モノグリセリドを主要成分として含有する油脂
の製造法については触れていない。またエタノリシスに
よる方法は、反応物から液々抽出法と分子蒸留法を用い
てモノグリセリドを取得する方法であるが、そのＤＨＡ
含有率は５０％程度であり、ＤＨＡ以外のモノグリセリ
ドがＤＨＡモノグリセリドとほぼ等量含有されているこ
とになり、いまだ満足すべき純度ではない。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、ＤＨＡモノ
グリセリドを従来にない高い含有率で含有した油脂を効
率良く製造する方法を提供することを目的とする。

【０００７】

【課題を解決するための手段】本発明者らは上記の課題
を達成せんとして鋭意検討した結果、特開平８−６０１
８１号公報に記載の方法に用いたリパーゼ反応を基本技
術として調製された混合グリセリドから、分子蒸留によ
りモノグリセリドを分画する方法をとることによりＤＨ
Ａモノグリセリドを従来にない高濃度で含有する油脂の
製造方法を完成するにいたった。

【０００８】即ち、本発明は下記の通りである。 ２価陽イオンと水溶性高分子化合物を溶解した水溶液
にドコサヘキサエン酸を含有する油脂を分散させ、これ
にリパーゼを作用させた後、分子蒸留により高濃度ドコ
サヘキサエン酸ジおよびトリグリセリドを含有する画分
１、高濃度ドコサヘキサエン酸モノグリセリドを含有す
る画分２、遊離脂肪酸と低濃度ドコサヘキサエン酸モノ
グリセリドを含有する画分３に分離し、画分２を目的画
分として回収した後、画分３を再度前記リパーゼ反応に
リサイクルすることを特徴とするドコサヘキサエン酸モ
ノグリセリド高含有油脂の製造方法。 目的画分として回収する画分２のグリセリド中のモノ
グリセリド含有率が９０％以上であり、ドコサヘキサエ
ン酸含有率が６０％以上である上記に記載のドコサヘ
キサエン酸モノグリセリド高含有油脂の製造方法。

【０００９】本発明の製造方法のブロックフローシート
の例を図１に示す。以下、この図に添って本発明を詳細
に説明する。 （１）２価陽イオン、水溶性高分子化合物を水に溶解
し、苛性ソーダ水溶液を用いてリパーゼ反応の至適ｐＨ
に調整する。このときｐＨ緩衝剤を添加しても良い。 （２）上記水溶液を反応の至適温度にコントロールし、
撹拌しながらＤＨＡを含有した油脂および分子蒸留画分
３を添加し、微細油滴として分散させる。 （３）リパーゼを添加し、加水分解反応を開始する。加
水分解で生成する遊離脂肪酸を中和し反応の至適ｐＨを
維持するために苛性ソーダ水溶液を添加する。 （４）反応の進行に伴い原料油脂、生成油脂、遊離脂肪
酸の２価陽イオン塩および水が混在したフロックが形成
され、反応液中を浮遊する。 （５）反応終了後、フロックを公知の濾過方法により反
応液から分離し、水分を含有した湿ケークを得る。 （６）湿ケークに有機溶剤を添加混合し、脂肪酸２価陽
イオン塩を沈澱（抽出残さ）として分離し、モノ、ジ、
トリグリセリドおよび遊離脂肪酸を有機溶剤へ抽出す
る。 （７）有機溶剤抽出液を冷却し、（６）で未析出の脂肪
酸２価陽イオン塩および鑞分（冷却残さ）を析出分離す
る。２価陽イオンは、後述する高温分子蒸留でモノグリ
セリドをジ、およびトリグリセリドへ変化させる触媒と
なり、モノグリセリドの収率低下の原因となるので、本
工程で極力除去しておくことが望ましい。また冷却操作
を（６）で実施し、脂肪酸２価陽イオン塩と鑞分をまと
めて除去しても良いが、一旦抽出残さを分離してから冷
却操作を行った方が沈澱は分離しやすく、沈澱への目的
成分のロスが少なくなる。 （８）２価陽イオン塩を除去した抽出液（あるいは冷却
分別液と呼称しても良い）から有機溶剤を蒸留により回
収する。蒸留残液には微量の有機溶剤を含んだ水相と微
量の有機溶剤を含んだ油相が存在するので、両者を重力
沈降または遠心沈降により分離する。 （９）微量の有機溶剤を含んだ油相から減圧蒸留により
有機溶剤を除去し、さらに残存する極微量の有機溶剤、
水、空気等を真空下で除去する脱ガス操作を行う。 （１０）脱ガス油を高温分子蒸留に供し、モノグリセリ
ドと遊離脂肪酸を留分へ、ジおよびトリグリセリドを残
分へ回収する。残分を分子蒸留画分１（画分１ともい
う）と呼称する。この際、脱ガス油に存在する大部分の
ジグリセリドはエステル交換反応によりトリグリセリド
となる。またＤＨＡを含有するグリセリドはＤＨＡを含
有しないグリセリドより沸点が高いために、分子蒸留画
分１のＤＨＡ含有率は脱ガス油のＤＨＡ含有率より高く
なる。一方、留分のＤＨＡ含有率は脱ガス油よりも低く
なる。 （１１）（１０）の留分を低温分子蒸留に供し、沸点の
差を利用してＤＨＡ以外の脂肪酸からなるモノグリセリ
ド（以下、非ＤＨＡモノグリセリドと呼称することがあ
る）と遊離脂肪酸を留分へ、ＤＨＡモノグリセリドを残
分へ回収する。残分を分子蒸留画分２（画分２ともい
う）、留分を分子蒸留画分３（画分３ともいう）と呼称
する。画分２および画分３をさらに繰り返し分子蒸留す
ることにより理論上はＤＨＡ純度とＤＨＡ回収率を上げ
ることも可能であるが、より現実的には画分３に移行す
るＤＨＡモノグリセリドと非ＤＨＡモノグリセリドおよ
び遊離脂肪酸は再度リパーゼ反応工程にリサイクルして
分離することが好ましい。 （１２）画分３は原料油脂と混合してからリパーゼ反応
系に添加しても良いし、原料油脂とは別々に添加しても
良い。あるいは画分３だけを単独にリパーゼ反応を行っ
ても良い。画分３に含有される遊離脂肪酸は直接２価陽
イオン塩となり、非ＤＨＡモノグリセリドはリパーゼに
より加水分解されてから２価陽イオン塩となる。ＤＨＡ
モノグリセリドはリパーゼの作用を受けにくくそのまま
の形でフロックに取り込まれる。

【００１０】本発明で用いられる２価陽イオンは水溶性
であり、遊離脂肪酸と塩を形成し、その塩が有機溶剤に
不溶性のものであれば特に限定されないが、好ましい例
としてはカルシウムイオンやマグネシウムイオンを挙げ
ることができる。実際に使用する形態としては、それら
の塩化物や乳酸、酢酸、クエン酸、コハク酸等の有機酸
塩を用いると良い。２価陽イオンの濃度は、原料油脂の
ＤＨＡ濃度、仕込濃度から予想される生成遊離脂肪酸を
中和するに必要な理論量に対して過剰量を使用すれば良
い。

【００１１】本発明で用いられる水溶性高分子化合物
は、リパーゼの作用を阻害しないものであれば、天然由
来でも合成物でも良いが、反応で生成したグリセリドを
食品として使用する場合は可食性の高分子化合物を用い
ると良い。そのような物質の例として、可溶性澱粉、デ
キストリン、デキストラン、ペクチン、アラビアガム、
キサンタンガム、大豆多糖体等の天然高分子糖類化合
物、ゼラチン、コーン蛋白由来ペプチド等のアミノ酸高
分子化合物、カルボキシメチルセルロース等のセルロー
ス誘導体を挙げることができる。反応系に添加するこれ
らの水溶性高分子化合物の濃度は原料油脂の仕込濃度に
よっても変化するが、通常、０．５〜２０重量％の範囲
で使用することができる。

【００１２】本発明で原料として用いられるＤＨＡを含
有する油脂としては、構成脂肪酸の少なくとも一つがＤ
ＨＡからなるグリセリドを含有したものであればその起
源は特に限定されるものではないが、通常、簡便に利用
し得る油脂は、海産動物油脂、例えばイカ油、オキアミ
油、カツオ油、サバ油、サンマ油、タラ肝油、マグロ油
等に由来するものが例示される。また、その精製の程度
についても特に限定されるものではないが、本発明によ
る製造工程およびその後に続く精製工程の負荷を減少さ
せるためにはできるだけ精製された物を使用することが
好ましく、それはプロセス全体を考慮した経済的側面か
ら決定される。例えば、本発明による方法では色素成分
は大部分分子蒸留画分１に移行し、目的とする分子蒸留
画分２にはほとんど移行しないので原料油の脱色は重要
ではない。一方、臭気成分をモノグリセリドから分離す
るのは簡単ではないので、トリグリセリドとして存在す
る原料油の段階で分子蒸留や水蒸気蒸留を行っておいた
方が好ましく、特にリパーゼ反応を窒素ガス等の不活性
ガスシール下で実施したり、抗酸化剤の添加をして実施
すると分子蒸留画分２の脱臭操作を省略することもでき
より好ましい。

【００１３】原料油の仕込濃度は原料油単独、分子蒸留
画分３単独、両者の混合物で使用するどの場合でも水に
対して１〜１００重量％の範囲であり、好ましくは５〜
３０重量％、特に好ましくは８〜１５重量％である。本
発明で用いるリパーゼは、ＤＨＡに対してできるだけ基
質特異性の低い酵素が好ましい。特に好ましくはキャン
ディダ属由来のリパーゼであり、市販の物を使用するこ
ともできるが、キャンディダ・リポリティカ（ＡＴＣＣ
３４０８８株）を培養し、培養液から部分精製したリパ
ーゼを用いることもできる。その調製方法の例を図２に
示す。

【００１４】リパーゼの使用量は原料油脂１ｇあたり１
０〜１０００ユニット（Ｕ）の範囲であり、好ましくは
５０〜３００ユニット（Ｕ）である。反応温度はリパー
ゼが失活しない範囲で適宜選ぶことができるが、例えば
キャンディダ・リポリティカ由来のリパーゼの場合は０
〜４０℃の範囲が好ましく、特に好ましくは１０〜３０
℃、さらに好ましくは１５〜２５℃である。

【００１５】反応の至適ｐＨは例えば７〜９の範囲であ
り、好ましくはｐＨ７．５〜８．５である。ｐＨの変動
を小さくするために、ｐＨ緩衝剤を添加しても良い。ｐ
Ｈ緩衝剤の種類としては２価陽イオンと不溶性物質を形
成しない物であれば、特に限定されるものではないが、
トリス塩酸塩が好ましい例として挙げられる。また、製
品油脂を食品として使用する場合には食品添加物に指定
されているアミノ酸類を使用することが好ましい。例え
ば、通常調味料として使用されるＬ−アスパラギン酸ナ
トリウム、ＤＬ−アラニン、Ｌ−アルギニンＬ−グルタ
ミン酸塩、グリシン、Ｌ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミ
ン酸ナトリウム、通常強化剤として使用されるＬ−イソ
ロイシン、ＤＬ−スレオニン、Ｌ−スレオニン、ＤＬ−
トリプトファン、Ｌ−トリプトファン、Ｌ−バリン、Ｌ
−ヒスチジン塩酸塩、Ｌ−フェニルアラニン、ＤＬ−メ
チオニン、Ｌ−メチオニン、Ｌ−リジンＬ−アウパラギ
ン酸塩、Ｌ−リジン塩酸塩、Ｌ−リジンＬ−グルタミン
酸塩の１種以上を使用しても良い。

【００１６】反応の終点は、ｐＨのコントロールに使用
する苛性ソーダ水溶液の消費量により決定することがで
きる。例えば精製ＤＨＡ２０Ｇ（日本化学飼料株式会社
製ＤＨＡ２４．１％、ＥＰＡ５．９％を含有）を原料油
脂として使用し、ＤＨＡ濃度６５％の脱ガス油を取得し
たいときの２Ｎ苛性ソーダ水溶液の所要消費量は１．１
２ｍｌ／ｇ原料油であることが、多くの実験データから
分かっている。

【００１７】湿ケークと反応濾液の分離方法は特に限定
されるものではないが、重力濾過、遠心濾過、圧搾濾
過、吸引濾過等の濾過法を用い、湿ケークへの水分およ
び水分に溶解している２価陽イオンの同伴を極力減少す
ることが好ましい。前述の如く、２価陽イオンは高温分
子蒸留でモノグリセリドをジおよびトリグリセリドへ変
化させる触媒となるので、湿ケークを水洗して付着２価
陽イオンを除去することも有効な手段として用いること
ができる。

【００１８】本発明で用いられる有機溶剤は、脂肪酸２
価陽イオン塩の溶解度が小さく、グリセリドの溶解度が
大きい性質の物であれば、特に限定されるものではない
が、製品油脂を食品として使用する場合にはエタノー
ル、ヘキサン、アセトンの中から選ばれる有機溶剤を使
用すれば良く、特にアセトンが好ましい例として挙げら
れる。有機溶剤の使用量は、湿ケークの水分によっても
変化するが、通常は湿ケーク１重量部に対して５容量部
以上すれば十分目的は達成される。抽出温度は特に限定
されるものでなく、例えば室温のまま成りゆきでもかま
わない。抽出時の撹拌は抽出残さが完全に浮遊した状態
を１時間続行すれば良い。抽出残さと抽出液の分離は重
力沈降でも良いが、デカンター等の遠心沈降分離機の使
用がより好ましい。抽出残さに残存しているグリセリド
を回収するために抽出を２段以上に分けて実施しても良
い。

【００１９】本発明における冷却分離の目的を達成する
ための温度と時間の条件は、例えば、温度０〜５℃であ
れば２４時間、温度が−１０℃程度であれば５時間、−
２０℃であれば２時間、−３５℃以下であれば瞬間的で
良い。所定の冷却温度に達するまでは撹拌を行った方が
良いが、所定の冷却温度に到達してからは撹拌を続行し
ても停止しても良い。冷却残さの分離は特に限定される
ものではないが、真空濾過、圧搾濾過を用いることが好
ましい。

【００２０】本発明における有機溶剤回収は、通常は単
蒸留法により有機溶剤の沸点以上の温度に加熱して行わ
れる。蒸留圧力は大気圧でも真空でも良い。本発明にお
ける脱ガスは、次の分子蒸留工程において高真空度を達
成する際の阻害要因となる有機溶剤、水、空気等を除去
することを目的とし、それが達成されればその方法につ
いては特に限定されるものではない。例を挙げるとすれ
ば、０．１ｔｏｒｒで９０℃で分子蒸留装置を通せば良
い。

【００２１】本発明で用いられる分子蒸留装置として
は、遠心薄膜式分子蒸留装置、回転薄膜式分子蒸留装
置、流下膜式分子蒸留装置等を挙げることができる。蒸
留機内の真空度は圧力表示で少なくとも０．０５ｔｏｒ
ｒ以下、好ましくは０．０１ｔｏｒｒ以下、特に好まし
くは０．００１ｔｏｒｒ以下で実施する。本発明におけ
る高温分子蒸留は、上記の真空度において、分子蒸留装
置の蒸発面の温度を１９０〜２４０℃、好ましくは ２
２０〜２３５℃にコントロールし、残分（分子蒸留画分
１）の遊離脂肪酸とモノグリセリドが、ほぼ０になるま
で残分をリサイクルすることによって実施することがで
きる。

【００２２】本発明における低温分子蒸留は上記の真空
度において、分子蒸留装置の蒸発面の温度を１５０〜１
８５℃、好ましくは１７０〜１８０℃にコントロール
し、残分（分子蒸留画分２）の遊離脂肪酸がほぼ０にな
るまで残分をリサイクルすることによって実施すること
ができる。かくして得られた分子蒸留画分２は、グリセ
リド中のモノグリセリドの含有率は少なくとも９０％
（通常は９５％以上）、ＤＨＡ含有率は少なくとも６０
％（通常は７５％以上）であり、従来にない高濃度のＤ
ＨＡモノグリセリドを含有する油脂である。このものは
そのままでも健康食品用用途として使用することもでき
るが、さらに高いＤＨＡ純度が要求される医薬品を製造
する際の原料として用いることもできる。一方、分子蒸
留画分１は、グリセリド中のトリグリセリドの含有率が
少なくとも９０％、ＤＨＡ含有率は少なくとも７０％あ
るので、アルカリ精製、脱色等の精製を行うことにより
高濃度ＤＨＡトリグリセリドとして一般食品、健康食品
用途に利用することができる。

【００２３】

【発明の実施の形態】以下に実施例を挙げて本発明をさ
らに詳細に説明するが、本発明は、これによってなんら
限定されるものではない。なお、油脂中のＤＨＡ濃度の
定量は以下のようにして行った。１２５ｍｇの試料を５
０ｍｌのナス型フラスコにとり０．５Ｎメタノール性水
酸化ナトリウム４ｍｌを添加し、冷却器を付けて水浴上
で均一な溶液になるまで加熱（５〜１０分）してケン化
した。冷却器上部より三フッ化ホウ素錯体メタノール溶
液を５ｍｌ添加し２分加熱してメチルエステル化した。
次いでヘキサン４ｍｌを添加し１分加熱後冷却し、飽和
食塩水を加えてメチルエステルをヘキサン層へ抽出し
た。上層のヘキサン層の１．０μｌをガスクロマトグラ
フィーに供し、面積百分率法により全脂肪酸ピーク面積
に対するＤＨＡピーク面積の比率をもってＤＨＡ濃度と
した。

【００２４】ガスクロマトグラフィーの条件は以下のと
おりである。 〔機器〕島津製作所製：ＧＣ−１２Ａ、〔カラムサイ
ズ〕内径３ｍｍ、長さ２ｍ、〔充填剤〕液相（ジエチレ
ングリコールサクシネート１０％）；担体（Ｃｈｒｏｍ
ｏｓｏｒｂ Ｗ・ＡＷ・ＤＭＣＳ ６０・８０ｍｅｓ
ｈ）、〔キャリヤーガス〕窒素：流量３０ｍｌ／分、
〔検出器〕ＦＩＤ、〔カラム温度〕２００℃、〔注入部
温度〕２５０℃、〔検出部温度〕２５０℃ 脂質組成の定量は、ＴＬＣ−ＦＩＤアナライザーを用い
て以下の条件で行った。

【００２５】トリグリセリド、ジグリセリド、モノグリ
セリド、遊離脂肪酸およびその他（ＴＬＣ原点と先端付
近のピーク）のピーク面積の合計に対する各成分のピー
ク面積の百分率をもって組成を表示した。 〔機器〕ヤトロン社製：イアトロスキャンＭＫ−５、
〔固定相〕クロマロッド−Ｓ３、〔移動相〕１段目：ク
ロロホルム／メタノール＝６０／５；展開時間２．５
分、２段目：ベンゼン／クロロホルム／酢酸＝６０／１
０／１；展開時間２８分、３段目：ベンゼン／ｎ−ヘキ
サン＝３５／３５；展開時間３３分

【００２６】

【実施例１】内容量２５０リットル、内径０．５８ｍの
円筒型のジャケット付きステンレス製反応槽（２枚羽根
傾斜パドル、翼長０．３５２ｍ，翼幅０．０４２ｍの撹
拌翼を有す）にイオン交換水１５０リットルを張り込
み、トリス−塩酸塩緩衝液（ｐＨ＝８．２）を５ｍＭに
なるように溶解した。次いで、塩化カルシウム２水塩を
３．３ｋｇ、アラビアガム９．０ｋｇを添加し撹拌して
溶解し、２Ｎ ＮａＯＨにてｐＨを８．２になるよう調
整した。さらにジャケットには１７℃にコントロールし
た冷却水を循環し、液温を１７℃に調整した。

【００２７】この液に脱臭済み、未脱色の魚油ＤＨＡ３
５Ｇ（日本化学飼料株式会社提供、ＤＨＡ３５．７％、
ＥＰＡ８．２％含有）を１２ｋｇ添加して２４０ｒｐｍ
で撹拌し、魚油を分散させた。次いで、図２の方法によ
って調整したリパーゼ粉末（４０００Ｕ／ｇ）１５０ｇ
を少量の水に分散させて添加し、反応を開始した。反応
中ｐＨは２Ｎ ＮａＯＨにより８．２にコントロール
し、温度は１７℃にコントロールして、撹拌速度２４０
ｒｐｍで１０ｈｒ反応を実施した。このときの２Ｎ Ｎ
ａＯＨ使用量は１０．２リットルであった。反応液を舟
形濾過機で反応濾液と湿ケークに分離し、３３．２ｋｇ
の湿ケークを得た。

【００２８】あらかじめ１６６リットルのアセトンを張
り込んだ内容量４００リットルの撹拌槽に上記湿ケーク
を投入し、１時間撹拌を行った。撹拌を停止してから、
１時間静置し、上清１１０リットルをポンプで抜き取っ
て別の容器に回収した。沈降残さにさらに１００リット
ルのアセトンを添加し、再度１時間撹拌を行った後、真
空濾過により固液分離を行い、抽出残さ３１．２ｋｇ，
抽出濾液１５５リットルを得た。１回目と２回目のアセ
トン抽出液を合わせ、内容量４００リットルのジャケッ
ト付き撹拌槽に入れ、ジャケットに−１０℃のブライン
を循環して抽出液を−１０℃に冷却し、−１０℃に達し
てからその温度を維持して５時間撹拌を続行した。冷却
液はポンプで密閉型のフィルターに圧送し、沈澱物を除
去した。沈澱物の発生量は１．４ｋｇであった。濾液を
再度、内容量４００リットルのジャケット付き撹拌槽に
入れ、ジャケットに６０℃の温水を循環して常圧でアセ
トンを蒸発し、コンデンサーで凝縮させてアセトンを回
収した。約１０リットルの蒸留残液が得られ、これから
水相を重力沈降で分離した。油相をロータリーエバポレ
ーターにて７０℃で真空蒸発させ、水分とアセトンを除
去した。

【００２９】これを遠心薄膜式分子蒸留装置ＣＥＨ−３
００Ｂ（日本真空技術株式会社製）に真空度０．１ｔｏ
ｒｒ、蒸留温度９０℃の条件で３サイクル通すことによ
り、脱ガスを行った。得られた脱ガス油の重量は５．８
３ｋｇ、ＤＨＡ純度は６４．８％、モノグリセリド含有
率は６６．０％であった。脱ガス油製造までの条件と結
果を表１に示した。

【００３０】次いで、脱ガス油を上記の遠心薄膜式分子
蒸留装置に真空度０．００７ｔｏｒｒ、蒸留温度２３０
℃、供給速度１０ｋｇ／ｈｒの条件で１０サイクル通す
ことにより、４．１８ｋｇの留分と１．６５ｋｇの残分
を得た。その組成を表２に示した。これよりモノグリセ
リドと遊離脂肪酸の全てが留分の方へ移行したことが分
かる。

【００３１】次に、上記留分を同じ遠心薄膜式分子蒸留
装置に真空度０．００７ｔｏｒｒ、蒸留温度１８０℃、
供給速度１０ｋｇ／ｈｒの条件で６サイクル通すことに
より、２．１０ｋｇの留分と２．０７ｋｇの残分を得
た。その組成を表３に示した。これより遊離脂肪酸の全
てが留分に移行し、残分のＤＨＡ純度は７７．１％、モ
ノグリセリド含有率は９６．１％に達していることが分
かる。

【００３２】

【実施例２】実施例１の低温分子蒸留で得た留分（分子
蒸留画分３）２．１０ｋｇと、実施例１で使用した物と
同一の未脱色ＤＨＡ３５Ｇ９．９０ｋｇを混合して酵素
反応原料油とした。これを用いて実施例１と同様の方法
で酵素反応、アセトン抽出、冷却分離、アセトン回収、
脱ガスを実施し、ＤＨＡ純度６７．０％の脱ガス油５．
２６ｋｇを得た。酵素反応から脱ガス油製造までの原料
仕込量と主たる結果を表１に示した。

【００３３】次いで、脱ガス油を実施例１と同様の条件
で高温分子蒸留に供し、留分３．９０ｋｇとＤＨＡ純度
７４．０％の残分（画分１）１．３６ｋｇを得た。留分
と残分の組成を表２に示した。さらに上記留分を実施例
１と同様の条件で低温分子蒸留に供し、留分（画分３）
１．７５ｋｇと残分（画分２）２．１５ｋｇを得た。留
分と画分の組成を表３に示した。これによれば画分２の
ＤＨＡ純度は７６．５％、モノグリセリド含有率は９
７．３％であった。

【００３４】

【実施例３】実施例２の低温分子蒸留で得た留分（分子
蒸留画分３）１．７５ｋｇと、実施例１で使用した物と
同一の未脱色ＤＨＡ３５Ｇ１０．２５ｋｇを混合して酵
素反応原料油とした。これを用いて実施例１と同様の方
法で酵素反応、アセトン抽出、冷却分離、アセトン回
収、脱ガスを実施し、ＤＨＡ純度６６．５％の脱ガス油
５．３８ｋｇを得た。酵素反応から脱ガス油製造までの
原料仕込量と主たる結果を表１に示した。

【００３５】次いで、脱ガス油を実施例１と同様の条件
で高温分子蒸留に供し、留分４．０９ｋｇとＤＨＡ純度
７３．４％の残分（画分１）１．２９ｋｇを得た。留分
と残分の組成を表２に示した。さらに上記留分を実施例
１と同様の条件で低温分子蒸留に供し、留分（画分３）
１．９０ｋｇと残分（画分２）２．１６ｋｇを得た。留
分と画分の組成を表３に示した。これによれば画分２の
ＤＨＡ純度は７７．８％、モノグリセリド含有率は９
６．０％であった。

【００３６】

【実施例４】実施例３の低温分子蒸留で得た留分（分子
蒸留画分３）１．９０ｋｇと、実施例１で使用した物と
同一の未脱色ＤＨＡ３５Ｇ１０．１０ｋｇを混合して酵
素反応原料油とした。これを用いて実施例１と同様の方
法で酵素反応、アセトン抽出、冷却分離、アセトン回
収、脱ガスを実施し、ＤＨＡ純度６７．０％の脱ガス油
５．４３ｋｇを得た。酵素反応から脱ガス油製造までの
原料仕込量と主たる結果を表１に示した。

【００３７】次いで、脱ガス油を実施例１と同様の条件
で高温分子蒸留に供し、留分４．０４ｋｇとＤＨＡ純度
７４．５％の残分（画分１）１．３９ｋｇを得た。留分
と残分の組成を表２に示した。さらに上記留分を実施例
１と同様の条件で低温分子蒸留に供し、留分（画分３）
１．７４ｋｇと残分（画分２）２．３０ｋｇを得た。留
分と画分の組成を表３に示した。これによれば画分２の
ＤＨＡ純度は７７．２％、モノグリセリド含有率は９
７．０％であった。

【００３８】（ＤＨＡ収率の比較）実施例１から４の脱
臭済み、未脱色ＤＨＡ３５Ｇに対する製品のＤＨＡ収率
を表４に比較して示した。尚、本発明で用いた分析方法
によるＤＨＡ純度は油脂に含有されるグリセリドを１０
０％としたときのＤＨＡ含有率に等しいと仮定して収率
計算を実施した。

【００３９】これによれば、画分３を酵素反応に回収し
ていない実施例１の画分２のＤＨＡ収率は３７．１２％
であるのに対し、画分３を酵素反応に回収した実施例
２、３、４のＤＨＡ収率はそれぞれ４６．７０％、４
５．３０％、４９．１６％であり平均すれば約１０％Ｄ
ＨＡ収率が向上したことが分かる。また画分１と画分２
を加えたＤＨＡ収率は、実施例２、３、４でそれぞれ７
４．４９％、７０．４４％、７７．２５％であり、平均
すれば７４％の高収率であった。

【００４０】

【実施例５】実施例１から４の低温分子蒸留における各
サイクルごとの残分のＤＨＡ純度と、モノグリセリドお
よび遊離脂肪酸の含有率を表５に示した。これによれ
ば、分子蒸留サイクル数の増加に伴いＤＨＡ純度とモノ
グリセリド含有率が増加し、遊離脂肪酸は減少すること
が分かる。どの実施例においても６サイクル目において
は遊離脂肪酸は０％であった。

【００４１】

【表１】

【００４２】

【表２】

【００４３】

【表３】

【００４４】

【表４】

【００４５】

【表５】

【００４６】

【発明の効果】本発明の製造法によれば、過剰摂取が問
題となっている脂肪酸が減少し、有用な生理活性を有し
かつ高い消化吸収性が期待されるＤＨＡモノグリセリド
を、従来にない高濃度で含有した油脂を高収率で製造す
ることができる。本発明の製造法によるＤＨＡモノグリ
セリドを高濃度に含有した油脂は、健康食品、栄養強化
食品としてまた医薬品原料として有用である。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明による製造法の一例のブロックフローシ
ートである。

【図２】本発明で使用するリパーゼの調製方法の例示で
ある。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｒ 1:73）

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ２価陽イオンと水溶性高分子化合物を溶
   解した水溶液にドコサヘキサエン酸を含有する油脂を分
   散させ、これにリパーゼを作用させた後、分子蒸留によ
   り高濃度ドコサヘキサエン酸ジおよびトリグリセリドを
   含有する画分１、高濃度ドコサヘキサエン酸モノグリセ
   リドを含有する画分２、遊離脂肪酸と低濃度ドコサヘキ
   サエン酸モノグリセリドを含有する画分３に分離し、画
   分２を目的画分として回収した後、画分３を再度前記リ
   パーゼ反応にリサイクルすることを特徴とするドコサヘ
   キサエン酸モノグリセリド高含有油脂の製造方法。
2. 【請求項２】 目的画分として回収する画分２のグリセ
   リド中のモノグリセリド含有率が９０％以上であり、ド
   コサヘキサエン酸含有率が６０％以上である請求項１に
   記載のドコサヘキサエン酸モノグリセリド高含有油脂の
   製造方法。