JPH1090270A - ２−メチルイソボルネオールの検出方法 - Google Patents
２−メチルイソボルネオールの検出方法Info
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- JPH1090270A JPH1090270A JP8247476A JP24747696A JPH1090270A JP H1090270 A JPH1090270 A JP H1090270A JP 8247476 A JP8247476 A JP 8247476A JP 24747696 A JP24747696 A JP 24747696A JP H1090270 A JPH1090270 A JP H1090270A
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Abstract
(57)【要約】
【課題】パ−ジ・トラップＧＣ質量分析法および固相抽
出ＧＣ／ＭＳ法は高精度の測定ができるが、装置が高
価、長測定時間、正確な分析には熟練が必要等の問題点
があり、短時間で容易に高感度に２−メチルイソボルネ
オール（２−ＭＩＢ）を検出できる測定法の開発が要望
されていた。 【解決手段】２−ＭＩＢに構造の類似したカンファ−・
蛋白質複合体を固定化したトランスデューサを、抗２−
ＭＩＢ抗体が一定濃度となるように調製した被測定溶液
中に浸せきし、被測定溶液中に含まれる未知濃度の２−
ＭＩＢと、水晶振動子または弾性表面波素子を使ったト
ランスデューサ上に固定化したカンファ−・蛋白質複合
体とを、競合的に抗２−ＭＩＢ抗体と反応させ、結果的
にカンファ−・蛋白質複合体と結合した抗２−ＭＩＢ抗
体によるトランスデュ−サの出力変化により、被測定溶
液中の２−ＭＩＢ濃度を定量する方法を発明した。
出ＧＣ／ＭＳ法は高精度の測定ができるが、装置が高
価、長測定時間、正確な分析には熟練が必要等の問題点
があり、短時間で容易に高感度に２−メチルイソボルネ
オール（２−ＭＩＢ）を検出できる測定法の開発が要望
されていた。 【解決手段】２−ＭＩＢに構造の類似したカンファ−・
蛋白質複合体を固定化したトランスデューサを、抗２−
ＭＩＢ抗体が一定濃度となるように調製した被測定溶液
中に浸せきし、被測定溶液中に含まれる未知濃度の２−
ＭＩＢと、水晶振動子または弾性表面波素子を使ったト
ランスデューサ上に固定化したカンファ−・蛋白質複合
体とを、競合的に抗２−ＭＩＢ抗体と反応させ、結果的
にカンファ−・蛋白質複合体と結合した抗２−ＭＩＢ抗
体によるトランスデュ−サの出力変化により、被測定溶
液中の２−ＭＩＢ濃度を定量する方法を発明した。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、水中に含まれるカ
ビ臭物質である２−ＭＩＢを免疫反応により検出する方
法に関する。
ビ臭物質である２−ＭＩＢを免疫反応により検出する方
法に関する。
【０００２】
【従来の技術】水道の異臭味についての苦情や被害は年
々増加の傾向にある。この異臭味は、水源の汚染や湖沼
などの富栄養化による藻類の大量発生で生成される、２
−メチルイソボルネオール（２−ｍｅｔｙｌｉｓｏｂｏ
ｒｎｅｏｌ：２−ＭＩＢ）やジェオスミンなどのカビ臭
物質が原因である。このため、近年、水道水に対して安
全でおいしい水の供給への要望が国民の間で高まってき
ており、この要望を受けて、より質の高い水道水の安定
供給を目指すために、水道水質基準を補完する項目とし
てカビ臭物質を含む「快適水質基準項目」が設定されて
いる。この基準達成のためには、においにかかわるセン
サや高度浄水処理システムの開発が重要である。
々増加の傾向にある。この異臭味は、水源の汚染や湖沼
などの富栄養化による藻類の大量発生で生成される、２
−メチルイソボルネオール（２−ｍｅｔｙｌｉｓｏｂｏ
ｒｎｅｏｌ：２−ＭＩＢ）やジェオスミンなどのカビ臭
物質が原因である。このため、近年、水道水に対して安
全でおいしい水の供給への要望が国民の間で高まってき
ており、この要望を受けて、より質の高い水道水の安定
供給を目指すために、水道水質基準を補完する項目とし
てカビ臭物質を含む「快適水質基準項目」が設定されて
いる。この基準達成のためには、においにかかわるセン
サや高度浄水処理システムの開発が重要である。
【０００３】現在、浄水の水質管理では、人間が鼻で一
定時間ごとににおいを嗅いで監視を行っている。また、
カビ臭の分析手段としては、公定法としてパ−ジ・トラ
ップガスクロマトグラフ質量分析法及び固相抽出ＧＣ／
ＭＳ法が採用されている。しかしこれらの分析手段は、
水質の常時監視という観点からは幾つかの問題点があ
り、簡便かつ迅速で個人差のない測定方法や装置の開発
が要望されている。
定時間ごとににおいを嗅いで監視を行っている。また、
カビ臭の分析手段としては、公定法としてパ−ジ・トラ
ップガスクロマトグラフ質量分析法及び固相抽出ＧＣ／
ＭＳ法が採用されている。しかしこれらの分析手段は、
水質の常時監視という観点からは幾つかの問題点があ
り、簡便かつ迅速で個人差のない測定方法や装置の開発
が要望されている。
【０００４】一方、食品工業や化学薬品の品質管理分野
では、においについての測定器として、人間の鼻に近い
閾値を持つ『においセンサ』が開発され、数社から市販
されている。代表的な商品の測定原理には、におい物質
を、１）抵抗値の変化で検出する金属酸化物半導体セン
サ、２）伝導率変化で検出するコンダクティングポリマ
−、３）重量変化で検出する脂質被覆水晶振動子を用い
たセンサなどがある。
では、においについての測定器として、人間の鼻に近い
閾値を持つ『においセンサ』が開発され、数社から市販
されている。代表的な商品の測定原理には、におい物質
を、１）抵抗値の変化で検出する金属酸化物半導体セン
サ、２）伝導率変化で検出するコンダクティングポリマ
−、３）重量変化で検出する脂質被覆水晶振動子を用い
たセンサなどがある。
【０００５】また、研究開発段階では、カビ臭物質の発
光遺伝子による定量法なども報告されているが（石橋良
信ほか、土木学会第50回年次学術講演会講演概要集、ｐ
１３０２〜１３０３、１９９５）、定量可能な２−ＭＩ
Ｂの最低濃度は０．１ｍｇ／Ｌである。
光遺伝子による定量法なども報告されているが（石橋良
信ほか、土木学会第50回年次学術講演会講演概要集、ｐ
１３０２〜１３０３、１９９５）、定量可能な２−ＭＩ
Ｂの最低濃度は０．１ｍｇ／Ｌである。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】上記の公定法は、高精
度の測定を行うことができるが、１）装置が高価であ
る、２）試料の濃縮も含め１回の測定時間が約５時間と
長い、３）操作が煩雑で正確に分析するには熟練を要す
るため、ル−チン分析には難しい面がある、などの問題
点がある。
度の測定を行うことができるが、１）装置が高価であ
る、２）試料の濃縮も含め１回の測定時間が約５時間と
長い、３）操作が煩雑で正確に分析するには熟練を要す
るため、ル−チン分析には難しい面がある、などの問題
点がある。
【０００７】また、市販のにおいセンサについては、
１）感度不足や人間の感覚との相関性に欠ける、２）あ
るにおいに対して数種のセンサ応答のパタ−ン比較によ
りにおいの判別を行うため、特定のにおいに対する選択
性がなく、統計処理による計測デ−タの解析を必要とす
る、３）定量測定が困難である。従って、市販のにおい
センサを浄水の臭気物質監視へ適用するためには、感
度、選択性、定量性など問題を解決する必要がある、な
どの問題がある。
１）感度不足や人間の感覚との相関性に欠ける、２）あ
るにおいに対して数種のセンサ応答のパタ−ン比較によ
りにおいの判別を行うため、特定のにおいに対する選択
性がなく、統計処理による計測デ−タの解析を必要とす
る、３）定量測定が困難である。従って、市販のにおい
センサを浄水の臭気物質監視へ適用するためには、感
度、選択性、定量性など問題を解決する必要がある、な
どの問題がある。
【０００８】この発明は、上記の問題点を解決し、短時
間に容易にそして高感度に２−ＭＩＢを検出することが
可能な測定法を提供することを目的としている。
間に容易にそして高感度に２−ＭＩＢを検出することが
可能な測定法を提供することを目的としている。
【０００９】
【課題を解決するための手段】この目的を達成するた
め、本発明では、カビ臭原因物質である２−ＭＩＢと類
似の構造を有するカンファー（Ｃａｍｐｈｏｒ）を利用
し、特異性（高選択性）と高感度を抗原抗体反応により
達成する。
め、本発明では、カビ臭原因物質である２−ＭＩＢと類
似の構造を有するカンファー（Ｃａｍｐｈｏｒ）を利用
し、特異性（高選択性）と高感度を抗原抗体反応により
達成する。
【００１０】
【化１】
【００１１】
【化２】
【００１２】具体的には、上記のカビ臭原因物質である
２−ＭＩＢと類似の構造を有するカンファーと蛋白質の
複合体抗原を固定化したトランスデューサを、２−ＭＩ
Ｂに特異的（選択的）に結合する抗２−ＭＩＢ抗体を一
定濃度含む被測定溶液中に浸せきし、溶液中に存在して
いる未知濃度の２−ＭＩＢとこのカンファー・蛋白質複
合体抗原とを競合的に反応させ、結果的にトランスデュ
ーサ上に固定化したカンファ−・蛋白質複合体抗原に結
合した抗２−ＭＩＢ抗体量をトランスデューサの出力変
化により求め、２−ＭＩＢが存在した場合の結合抗体量
からの差分として、被測定溶液中の２−ＭＩＢ濃度を定
量することを特徴とする。
２−ＭＩＢと類似の構造を有するカンファーと蛋白質の
複合体抗原を固定化したトランスデューサを、２−ＭＩ
Ｂに特異的（選択的）に結合する抗２−ＭＩＢ抗体を一
定濃度含む被測定溶液中に浸せきし、溶液中に存在して
いる未知濃度の２−ＭＩＢとこのカンファー・蛋白質複
合体抗原とを競合的に反応させ、結果的にトランスデュ
ーサ上に固定化したカンファ−・蛋白質複合体抗原に結
合した抗２−ＭＩＢ抗体量をトランスデューサの出力変
化により求め、２−ＭＩＢが存在した場合の結合抗体量
からの差分として、被測定溶液中の２−ＭＩＢ濃度を定
量することを特徴とする。
【００１３】また、本発明は、抗２−ＭＩＢ抗体を作製
するにあたり、カンファーと牛血清アルブミン（Ｂｏｖ
ｉｎｅ Ｓｅｒｕｍ Ａｌｂｕｍｉｎ：以下ＢＳＡと記
載）の複合体（以下カンファー・ＢＳＡ複合体と記載）
を抗原とすることを特徴とする。従って、１）水に難溶
で扱いにくい２−ＭＩＢに代わり水溶性のカンファーを
用いることで抗体の作製が容易になる、２）カンファー
は低分子であり単独では抗原性を示さないため、ＢＳＡ
と結合させることで抗原性をもたせることが可能にな
る、とういう利点が生じる。
するにあたり、カンファーと牛血清アルブミン（Ｂｏｖ
ｉｎｅ Ｓｅｒｕｍ Ａｌｂｕｍｉｎ：以下ＢＳＡと記
載）の複合体（以下カンファー・ＢＳＡ複合体と記載）
を抗原とすることを特徴とする。従って、１）水に難溶
で扱いにくい２−ＭＩＢに代わり水溶性のカンファーを
用いることで抗体の作製が容易になる、２）カンファー
は低分子であり単独では抗原性を示さないため、ＢＳＡ
と結合させることで抗原性をもたせることが可能にな
る、とういう利点が生じる。
【００１４】また、２−ＭＩＢの競合反応に用いる複合
体をカンファーと卵白アルブミン（Ｏｖａｌｂｕｍｉ
ｎ：以下Ｏｖａと記載）の複合体（以下カンファ−・Ｏ
ｖａ複合体と記載）することによって、カンファ−・Ｂ
ＳＡ複合体を抗原として作製した抗２−ＭＩＢ抗体が、
カンファ−・Ｏｖａ複合体との反応の際、カンファーの
みを認識して結合することができる。
体をカンファーと卵白アルブミン（Ｏｖａｌｂｕｍｉ
ｎ：以下Ｏｖａと記載）の複合体（以下カンファ−・Ｏ
ｖａ複合体と記載）することによって、カンファ−・Ｂ
ＳＡ複合体を抗原として作製した抗２−ＭＩＢ抗体が、
カンファ−・Ｏｖａ複合体との反応の際、カンファーの
みを認識して結合することができる。
【００１５】また、本発明は、トランスデューサに水晶
振動子または弾性表面波素子（ＳＡＷ素子）を用いて、
反応前後の周波数化から抗２−ＭＩＢ抗体の結合量を重
量変化として検出し、上述の方法で２−ＭＩＢを定量で
きる。
振動子または弾性表面波素子（ＳＡＷ素子）を用いて、
反応前後の周波数化から抗２−ＭＩＢ抗体の結合量を重
量変化として検出し、上述の方法で２−ＭＩＢを定量で
きる。
【００１６】
［実施例１］以下、この発明でトランスデューサが水晶
振動子（ＡＴカット、１０ＭＨｚ）の場合について、
トランスデューサに固定化するカンファ−・Ｏｖａ複合
体の作製、被測定溶液中に入れる抗２−ＭＩＢ抗体の
作製、抗２−ＭＩＢ抗体の特異性試験と結果、水晶
振動子利用２−ＭＩＢの検出装置と２−ＭＩＢ検出用セ
ンサの作製、競合反応を利用した２−ＭＩＢの検出
法、既知濃度の２−ＭＩＢによる検量線の作成、の順
に説明する。
振動子（ＡＴカット、１０ＭＨｚ）の場合について、
トランスデューサに固定化するカンファ−・Ｏｖａ複合
体の作製、被測定溶液中に入れる抗２−ＭＩＢ抗体の
作製、抗２−ＭＩＢ抗体の特異性試験と結果、水晶
振動子利用２−ＭＩＢの検出装置と２−ＭＩＢ検出用セ
ンサの作製、競合反応を利用した２−ＭＩＢの検出
法、既知濃度の２−ＭＩＢによる検量線の作成、の順
に説明する。
【００１７】．トランスデューサに固定化するカンフ
ァ−・Ｏｖａ複合体の作製：カンファー１ｇとオルソカ
ルボキシメトキシルアミン・ヘミ（Ｏ−Ｃａｒｂｏｘｙ
ｍｅｔｈｏｘｙｌａｍｉｎｅ ｈｅｍｉ）塩酸塩２．８
４ｇに１４ｍＬのエタノ−ルと１６．５ｍＬの２規定の
水酸化ナトリウムを加え、６時間還流し、２５℃で一晩
放置した。これに２００ｍＬの純水を加え、２ｍｏｌ／
ｍ3 の水酸化ナトリウムを用いてｐＨ９．５に調製し、
これを３０ｍＬの酢酸エチルで３回抽出後、水層を１規
定の塩酸でｐＨ３に調製した。これを０℃で一晩静置
し、生じた沈殿を遠心分離（３０００回転／分で５分）
によって集め、５００ｍＬの純水で洗浄後、硫酸カルシ
ウムの存在下で減圧乾燥することでカンファーカルボキ
シメチルオキシム（Ｃａｍｐｈｏｒ−ｃａｒｂｏｘｙ
ｍｅｔｈｙｌｏｘｉｍｅ、以下ＣＭＯと記載）を得た。
ァ−・Ｏｖａ複合体の作製：カンファー１ｇとオルソカ
ルボキシメトキシルアミン・ヘミ（Ｏ−Ｃａｒｂｏｘｙ
ｍｅｔｈｏｘｙｌａｍｉｎｅ ｈｅｍｉ）塩酸塩２．８
４ｇに１４ｍＬのエタノ−ルと１６．５ｍＬの２規定の
水酸化ナトリウムを加え、６時間還流し、２５℃で一晩
放置した。これに２００ｍＬの純水を加え、２ｍｏｌ／
ｍ3 の水酸化ナトリウムを用いてｐＨ９．５に調製し、
これを３０ｍＬの酢酸エチルで３回抽出後、水層を１規
定の塩酸でｐＨ３に調製した。これを０℃で一晩静置
し、生じた沈殿を遠心分離（３０００回転／分で５分）
によって集め、５００ｍＬの純水で洗浄後、硫酸カルシ
ウムの存在下で減圧乾燥することでカンファーカルボキ
シメチルオキシム（Ｃａｍｐｈｏｒ−ｃａｒｂｏｘｙ
ｍｅｔｈｙｌｏｘｉｍｅ、以下ＣＭＯと記載）を得た。
【００１８】次に１８．９ｍｇのＣＭＯと１２μＬのト
リエチルアミン（Ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）に１ｍ
Ｌのテトラヒドロフラン（ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｕｒ
ａｎ）を加えて−５℃で冷却後、１２μＬのイソブチル
クロロフォルメート（Ｉｓｏｂｕｔｙｌ ｃｈｌｏｒｏ
ｆｏｒｍａｔｅ）を加えて−５℃で３０分間振とうし
た。この反応液を冷却した２０ｍｇ／ｍＬのＯｖａ溶液
５ｍＬ中に滴下し、４℃で一晩振とうした。これを純水
で透析し、カンファ−・Ｏｖａ複合体を得た。保存は、
−２０℃で凍結保存を行った。
リエチルアミン（Ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）に１ｍ
Ｌのテトラヒドロフラン（ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｕｒ
ａｎ）を加えて−５℃で冷却後、１２μＬのイソブチル
クロロフォルメート（Ｉｓｏｂｕｔｙｌ ｃｈｌｏｒｏ
ｆｏｒｍａｔｅ）を加えて−５℃で３０分間振とうし
た。この反応液を冷却した２０ｍｇ／ｍＬのＯｖａ溶液
５ｍＬ中に滴下し、４℃で一晩振とうした。これを純水
で透析し、カンファ−・Ｏｖａ複合体を得た。保存は、
−２０℃で凍結保存を行った。
【００１９】．被測定溶液中に入れる抗２−ＭＩＢ抗
体の作製：抗原としての２−ＭＩＢは水に難溶で取り扱
いが困難であるため、抗体の作製には２−ＭＩＢに類似
の構造を有するカンファーを利用した。ただし、カンフ
ァーは低分子量で抗原性をもたないため、蛋白質などの
高分子を結合させて抗原とすることが必要である。この
蛋白質としては、強い抗原性をもつＯｖａより、比較的
抗原性の弱いＢＳＡが適当である。そこで、に述べた
カンファ−・Ｏｖａ複合体と同様の方法でカンファ−・
ＢＳＡ複合体抗原を作製した。
体の作製：抗原としての２−ＭＩＢは水に難溶で取り扱
いが困難であるため、抗体の作製には２−ＭＩＢに類似
の構造を有するカンファーを利用した。ただし、カンフ
ァーは低分子量で抗原性をもたないため、蛋白質などの
高分子を結合させて抗原とすることが必要である。この
蛋白質としては、強い抗原性をもつＯｖａより、比較的
抗原性の弱いＢＳＡが適当である。そこで、に述べた
カンファ−・Ｏｖａ複合体と同様の方法でカンファ−・
ＢＳＡ複合体抗原を作製した。
【００２０】次に、抗２−ＭＩＢ抗体の作製には本抗原
をＰＢＳ（Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ Ｂｕｆｆｅｒｅｄ Ｓ
ａｌｉｎｅ）で希釈し、この希釈液３００μＬと「ナカ
ライテスク（株）」製のフロイト完全アジュバンド（Ｆ
ｒｅｕｎｄ Ｃｏｍｐｌｅｔｅ Ａｊｕｖａｎｔ）の３
００μＬを用いて免疫用のエマルジョンを作製した。こ
れを５週令オスの「成和実験動物」ＢＡＬＢ／Ｃマウス
に腹腔内注射を行い免疫した。免疫したマウスの脾臓か
らリンパ球を取り出し、遠心分離後（２００〜４００×
ｇ、５分）１０ｍＬのＥ−ＲＤＦに懸濁して、約１×１
０8 個のリンパ球を得た。この懸濁液と２×１０7 個の
ミエロ−マ懸濁液を調製後、速やかに細胞融合を行っ
た。この細胞懸濁液を９６穴マイクロプレ−トのウェル
でＨＡＴ培地などで培養し、ハイブリド−マが増殖した
ウェルについては酵素標識免疫吸着法（Ｅｎｚｙｍｅ−
Ｌｉｎｋｅｄ ＩｍｍｕｎｏＳｏｒｂｅｎｔ Ａｓｓａ
ｙ、以下ＥＬＩＳＡ法と記載）によるスクリ−ニングを
行った後、抗体を含む無血清培地を遠心分離とろ過後、
抗体を含む画分を回収して１０ｍＭのトリス（Ｔｒｉ
ｓ）−塩酸緩衝液（ｐＨ７．４）で透析後、凍結乾燥し
て抗２−ＭＩＢ抗体を得て、−２０℃で凍結保存を行っ
た。
をＰＢＳ（Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ Ｂｕｆｆｅｒｅｄ Ｓ
ａｌｉｎｅ）で希釈し、この希釈液３００μＬと「ナカ
ライテスク（株）」製のフロイト完全アジュバンド（Ｆ
ｒｅｕｎｄ Ｃｏｍｐｌｅｔｅ Ａｊｕｖａｎｔ）の３
００μＬを用いて免疫用のエマルジョンを作製した。こ
れを５週令オスの「成和実験動物」ＢＡＬＢ／Ｃマウス
に腹腔内注射を行い免疫した。免疫したマウスの脾臓か
らリンパ球を取り出し、遠心分離後（２００〜４００×
ｇ、５分）１０ｍＬのＥ−ＲＤＦに懸濁して、約１×１
０8 個のリンパ球を得た。この懸濁液と２×１０7 個の
ミエロ−マ懸濁液を調製後、速やかに細胞融合を行っ
た。この細胞懸濁液を９６穴マイクロプレ−トのウェル
でＨＡＴ培地などで培養し、ハイブリド−マが増殖した
ウェルについては酵素標識免疫吸着法（Ｅｎｚｙｍｅ−
Ｌｉｎｋｅｄ ＩｍｍｕｎｏＳｏｒｂｅｎｔ Ａｓｓａ
ｙ、以下ＥＬＩＳＡ法と記載）によるスクリ−ニングを
行った後、抗体を含む無血清培地を遠心分離とろ過後、
抗体を含む画分を回収して１０ｍＭのトリス（Ｔｒｉ
ｓ）−塩酸緩衝液（ｐＨ７．４）で透析後、凍結乾燥し
て抗２−ＭＩＢ抗体を得て、−２０℃で凍結保存を行っ
た。
【００２１】．抗２−ＭＩＢ抗体の特異性試験と結
果：得られた抗２−ＭＩＢ抗体について無血清培養上清
を用い、２−ＭＩＢとこれ以外の類似化合物を遊離抗原
として競合ＥＬＩＳＡ法による反応性を測定することに
より、２−ＭＩＢに特異的なモノクロ−ナル抗体の選択
を行った。抗２−ＭＩＢ抗体はカンファ−・ＢＳＡ複合
体を抗原として作製したため、カンファーとＢＳＡの両
方に対して特異性を示す。このため、本試験では、固定
化抗原にはカンファ−・Ｏｖａ複合体を用いた。この複
合体を用いることで、カンファーまたは２−ＭＩＢ特異
的な抗体のスクリーニングが可能となる。まず、固定化
抗原としてカンファ−・Ｏｖａ複合体を９６穴の酵素免
疫定量法（Ｅｎｚｙｍｅ Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ）で
使用するＥＩＡプレ−トにコ−トし、ブロッキングし
た。同時に、化学式を以下に示す２−ＭＩＢと類似の７
種の化合物、即ち、カンファー（Ｃａｍｐｈｏｒ）、カ
ンファーキノン（Ｃａｍｐｈｏｒｑｕｉｎｏｎｅ）、ノ
ルカンファー（Ｎｏｒｃａｍｐｈｏｒ）、ボルネオール
（Ｂｏｒｎｅｏｌ）、イソボルネオール（Ｉｓｏｂｏｒ
ｎｅｏｌ）、ノルボルナン（Ｎｏｒｂｏｒｎａｎｅ）、
ノルボルネオール（Ｎｏｒｂｏｒｎｅｏｌ）を１０％エ
タノール−ツイン（ｅｔｈａｎｏｌ−Ｔｗｅｅｎ）２０
−ＰＢＳで１０倍希釈列（１０００〜０．０１μｇ／ｍ
Ｌ）を作った。これらとそれぞれの抗体を含む無血清培
地を等量混合し、３０分間インキュベ−トした。この反
応液を抗体サンプルとして特異性試験を行ったところ、
ノルボルネオール、ノルカンファー、ノルボルナンに対
してほとんど反応性を持たず、従って本発明による抗２
−ＭＩＢ抗体は、２−ＭＩＢに対し非常に高い特異性を
持つことが確認できた。
果：得られた抗２−ＭＩＢ抗体について無血清培養上清
を用い、２−ＭＩＢとこれ以外の類似化合物を遊離抗原
として競合ＥＬＩＳＡ法による反応性を測定することに
より、２−ＭＩＢに特異的なモノクロ−ナル抗体の選択
を行った。抗２−ＭＩＢ抗体はカンファ−・ＢＳＡ複合
体を抗原として作製したため、カンファーとＢＳＡの両
方に対して特異性を示す。このため、本試験では、固定
化抗原にはカンファ−・Ｏｖａ複合体を用いた。この複
合体を用いることで、カンファーまたは２−ＭＩＢ特異
的な抗体のスクリーニングが可能となる。まず、固定化
抗原としてカンファ−・Ｏｖａ複合体を９６穴の酵素免
疫定量法（Ｅｎｚｙｍｅ Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ）で
使用するＥＩＡプレ−トにコ−トし、ブロッキングし
た。同時に、化学式を以下に示す２−ＭＩＢと類似の７
種の化合物、即ち、カンファー（Ｃａｍｐｈｏｒ）、カ
ンファーキノン（Ｃａｍｐｈｏｒｑｕｉｎｏｎｅ）、ノ
ルカンファー（Ｎｏｒｃａｍｐｈｏｒ）、ボルネオール
（Ｂｏｒｎｅｏｌ）、イソボルネオール（Ｉｓｏｂｏｒ
ｎｅｏｌ）、ノルボルナン（Ｎｏｒｂｏｒｎａｎｅ）、
ノルボルネオール（Ｎｏｒｂｏｒｎｅｏｌ）を１０％エ
タノール−ツイン（ｅｔｈａｎｏｌ−Ｔｗｅｅｎ）２０
−ＰＢＳで１０倍希釈列（１０００〜０．０１μｇ／ｍ
Ｌ）を作った。これらとそれぞれの抗体を含む無血清培
地を等量混合し、３０分間インキュベ−トした。この反
応液を抗体サンプルとして特異性試験を行ったところ、
ノルボルネオール、ノルカンファー、ノルボルナンに対
してほとんど反応性を持たず、従って本発明による抗２
−ＭＩＢ抗体は、２−ＭＩＢに対し非常に高い特異性を
持つことが確認できた。
【００２２】
【化３】
【００２３】
【化４】
【００２４】
【化５】
【００２５】
【化６】
【００２６】
【化７】
【００２７】
【化８】
【００２８】
【化９】
【００２９】 水晶振動子利用２−ＭＩＢの検出装置
と２−ＭＩＢ検出用センサの作製： １）水晶振動子利用２−ＭＩＢの検出装置：図１は水晶
振動子の周波数測定を利用した２−ＭＩＢの検出装置の
ブロック図である。水晶振動子に金電極をつけ、カンフ
ァ−・Ｏｖａ複合体抗原を固定化し金電極の未被覆部分
にＢＳＡでブロッキングした２−ＭＩＢ検出用センサ１
は、発振回路２、周波数カウンタ３、パソコン４と接続
され、カンファ−・Ｏｖａ複合体抗原に２−ＭＩＢが付
着すると、周波数の変化として重量が測定できる。２−
ＭＩＢ検出センサ１は容量１５０ｍＬの測定セル５の中
にセットされ、一定の測定環境を維持するために、活性
炭６を通した空気をエアポンプにより１２０ｍＬ／分の
割合で送られている。
と２−ＭＩＢ検出用センサの作製： １）水晶振動子利用２−ＭＩＢの検出装置：図１は水晶
振動子の周波数測定を利用した２−ＭＩＢの検出装置の
ブロック図である。水晶振動子に金電極をつけ、カンフ
ァ−・Ｏｖａ複合体抗原を固定化し金電極の未被覆部分
にＢＳＡでブロッキングした２−ＭＩＢ検出用センサ１
は、発振回路２、周波数カウンタ３、パソコン４と接続
され、カンファ−・Ｏｖａ複合体抗原に２−ＭＩＢが付
着すると、周波数の変化として重量が測定できる。２−
ＭＩＢ検出センサ１は容量１５０ｍＬの測定セル５の中
にセットされ、一定の測定環境を維持するために、活性
炭６を通した空気をエアポンプにより１２０ｍＬ／分の
割合で送られている。
【００３０】２−ＭＩＢ検出用センサ１は次に述べる
２）３）の方法で作製される。 ２）水晶振動子の電極上へのカンファ−・Ｏｖａ複合体
の固定化：図２は、２−ＭＩＢ検出用センサおよびその
作製方法を示すフロー図である。各図では、それぞれの
物質を模式的に示している。まず、金電極１２をつけた
水晶振動子１１の浸せき用として、２ｍＬ用マイクロチ
ュ−ブの上部を切断して約５００μＬ容量の容器を準備
した。そこへ濃度０．５ｍｇ／ｍＬのカンファ−・Ｏｖ
ａ複合体溶液を調製し、温度２５℃で１７時間、金電極
１２をつけた水晶振動子１１を浸せきし、図２（ｂ）の
ように金電極１２上にカンファ−・Ｏｖａ複合体１３を
固定化した。さらに、未固定化物質除去のために純水で
３５分洗浄を行い、１時間乾燥後、図１の２−ＭＩＢの
検出装置により周波数を測定し、初期値からの周波数変
化から固定化カンファ−・Ｏｖａ複合体重量を算出し
た。
２）３）の方法で作製される。 ２）水晶振動子の電極上へのカンファ−・Ｏｖａ複合体
の固定化：図２は、２−ＭＩＢ検出用センサおよびその
作製方法を示すフロー図である。各図では、それぞれの
物質を模式的に示している。まず、金電極１２をつけた
水晶振動子１１の浸せき用として、２ｍＬ用マイクロチ
ュ−ブの上部を切断して約５００μＬ容量の容器を準備
した。そこへ濃度０．５ｍｇ／ｍＬのカンファ−・Ｏｖ
ａ複合体溶液を調製し、温度２５℃で１７時間、金電極
１２をつけた水晶振動子１１を浸せきし、図２（ｂ）の
ように金電極１２上にカンファ−・Ｏｖａ複合体１３を
固定化した。さらに、未固定化物質除去のために純水で
３５分洗浄を行い、１時間乾燥後、図１の２−ＭＩＢの
検出装置により周波数を測定し、初期値からの周波数変
化から固定化カンファ−・Ｏｖａ複合体重量を算出し
た。
【００３１】２）カンファ−・Ｏｖａ複合体のＢＳＡに
よるブロッキング：濃度０．５ｍｇ／ｍＬのＢＳＡ溶液
に、温度２５℃，湿度５５％で１７時間、カンファ−・
Ｏｖａ複合体を固定化した金電極付き水晶振動子１４を
浸せきし、図２（ｃ）のように水晶振動子の電極の未被
覆部分１５をＢＳＡ１６でブロッキング処理を行った。
さらに、純水で５５分洗浄，１時間乾燥後、図１の２−
ＭＩＢの検出装置により周波数を測定し初期値からの周
波数変化により、固定化ＢＳＡ重量を求めた。
よるブロッキング：濃度０．５ｍｇ／ｍＬのＢＳＡ溶液
に、温度２５℃，湿度５５％で１７時間、カンファ−・
Ｏｖａ複合体を固定化した金電極付き水晶振動子１４を
浸せきし、図２（ｃ）のように水晶振動子の電極の未被
覆部分１５をＢＳＡ１６でブロッキング処理を行った。
さらに、純水で５５分洗浄，１時間乾燥後、図１の２−
ＭＩＢの検出装置により周波数を測定し初期値からの周
波数変化により、固定化ＢＳＡ重量を求めた。
【００３２】上記の工程を経て、水晶振動子１１の金電
極１２の上にカンファ−・Ｏｖａ複合体１３を固定化し
て２−ＭＩＢ検出用センサ１を作製した。次に、本セン
サを用いて２−ＭＩＢを検出する方法について説明す
る。 ．競合反応を利用した２−ＭＩＢの検出法：図３は競
合反応を利用した２−ＭＩＢの検出法の概念図を示す。
極１２の上にカンファ−・Ｏｖａ複合体１３を固定化し
て２−ＭＩＢ検出用センサ１を作製した。次に、本セン
サを用いて２−ＭＩＢを検出する方法について説明す
る。 ．競合反応を利用した２−ＭＩＢの検出法：図３は競
合反応を利用した２−ＭＩＢの検出法の概念図を示す。
【００３３】まず、既知濃度ＣM の２−ＭＩＢ１７と既
知重量ＷA （＝既知濃度ＣA ×体積Ｖ）の抗２−ＭＩＢ
抗体１８の混合溶液を反応させた。この反応溶液に上述
の２−ＭＩＢ検出用センサ１を浸せきし、温度３０℃で
静置して競合反応を行った。次に純水で洗浄し１時間乾
燥後、図１の２−ＭＩＢの検出装置により周波数を測定
した。この測定と初期の測定とから周波数の変化量が分
かり、２−ＭＩＢ検出用センサ１上のカンファ−・Ｏｖ
ａ複合体１３と結合した抗２−ＭＩＢ抗体１９の重量Ｗ
B が求められる。この結果から既知濃度ＣM の２−ＭＩ
Ｂ１７と反応した抗２−ＭＩＢ抗体の重量ＷC はＷC ＝
ＷA −ＷB として求められる。
知重量ＷA （＝既知濃度ＣA ×体積Ｖ）の抗２−ＭＩＢ
抗体１８の混合溶液を反応させた。この反応溶液に上述
の２−ＭＩＢ検出用センサ１を浸せきし、温度３０℃で
静置して競合反応を行った。次に純水で洗浄し１時間乾
燥後、図１の２−ＭＩＢの検出装置により周波数を測定
した。この測定と初期の測定とから周波数の変化量が分
かり、２−ＭＩＢ検出用センサ１上のカンファ−・Ｏｖ
ａ複合体１３と結合した抗２−ＭＩＢ抗体１９の重量Ｗ
B が求められる。この結果から既知濃度ＣM の２−ＭＩ
Ｂ１７と反応した抗２−ＭＩＢ抗体の重量ＷC はＷC ＝
ＷA −ＷB として求められる。
【００３４】．既知濃度の２−ＭＩＢによる検量線の
作成：図４には、水晶振動子の周波数測定結果から作製
した、競合反応によって既知濃度ＣM の２−ＭＩＢと結
合した抗２−ＭＩＢ抗体の重量ＷC との関係を示した。
溶液中の抗２−ＭＩＢ抗体濃度ＣA は０．０４ｍｇ／ｍ
Ｌ一定である。図４から明らかな様に、既知２−ＭＩＢ
濃度ＣM を０．００５〜５ｍｇ／Ｌと変えることによっ
て、２−ＭＩＢと結合した抗２−ＭＩＢ抗体量ＷC が比
例して変化していくことが分かる。このことから、この
検量線をもとに抗２−ＭＩＢ抗体中の結合抗体量ＷC か
ら未知の２−ＭＩＢ濃度を定量することが可能であるこ
とが分かった。
作成：図４には、水晶振動子の周波数測定結果から作製
した、競合反応によって既知濃度ＣM の２−ＭＩＢと結
合した抗２−ＭＩＢ抗体の重量ＷC との関係を示した。
溶液中の抗２−ＭＩＢ抗体濃度ＣA は０．０４ｍｇ／ｍ
Ｌ一定である。図４から明らかな様に、既知２−ＭＩＢ
濃度ＣM を０．００５〜５ｍｇ／Ｌと変えることによっ
て、２−ＭＩＢと結合した抗２−ＭＩＢ抗体量ＷC が比
例して変化していくことが分かる。このことから、この
検量線をもとに抗２−ＭＩＢ抗体中の結合抗体量ＷC か
ら未知の２−ＭＩＢ濃度を定量することが可能であるこ
とが分かった。
【００３５】［実施例２］次にこの発明の２−ＭＩＢ検
出法の実施の形態についてトランスデューサが弾性表面
波素子（ＳＡＷ素子）である場合について図５、６を参
照して説明する。図５はＳＡＷ素子を利用した２−ＭＩ
Ｂの測定系を示した回路図である。この図に示すように
ＳＡＷ素子は圧電基板２１、金属薄膜２２、表面弾性波
の伝搬面２３、増幅器２４、混合器２５から構成され
る。実施例１と同様の方法を用いて、ＳＡＷ素子（例え
ば１６０ＭＨｚ）の伝搬面２３上にカンファ−・Ｏｖａ
複合体を固定化し、実施例１と同条件で競合反応を行っ
た。
出法の実施の形態についてトランスデューサが弾性表面
波素子（ＳＡＷ素子）である場合について図５、６を参
照して説明する。図５はＳＡＷ素子を利用した２−ＭＩ
Ｂの測定系を示した回路図である。この図に示すように
ＳＡＷ素子は圧電基板２１、金属薄膜２２、表面弾性波
の伝搬面２３、増幅器２４、混合器２５から構成され
る。実施例１と同様の方法を用いて、ＳＡＷ素子（例え
ば１６０ＭＨｚ）の伝搬面２３上にカンファ−・Ｏｖａ
複合体を固定化し、実施例１と同条件で競合反応を行っ
た。
【００３６】その結果得られたＳＡＷ素子の周波数測定
による既知２−ＭＩＢ濃度と２−ＭＩＢと結合した抗２
−ＭＩＢ抗体量との関係を図６に示す。この図は水晶振
動子を利用した図４と同様の結果で、この検量線をもと
に結合抗体量から未知の２−ＭＩＢ濃度を定量すること
が可能であることが分かった。さらに、２−ＭＩＢ以外
の臭気物質、例えばジェオスミンについても同様の方法
を用いて定量できることは容易に類推できる。
による既知２−ＭＩＢ濃度と２−ＭＩＢと結合した抗２
−ＭＩＢ抗体量との関係を図６に示す。この図は水晶振
動子を利用した図４と同様の結果で、この検量線をもと
に結合抗体量から未知の２−ＭＩＢ濃度を定量すること
が可能であることが分かった。さらに、２−ＭＩＢ以外
の臭気物質、例えばジェオスミンについても同様の方法
を用いて定量できることは容易に類推できる。
【００３７】なお、以上の２つの実施例で用いた使用材
料の量、処理時間、処理温度などの数値的条件は一例に
すぎず、従ってこの発明は、これら条件に限定されるも
のではない。
料の量、処理時間、処理温度などの数値的条件は一例に
すぎず、従ってこの発明は、これら条件に限定されるも
のではない。
【００３８】
【発明の効果】この発明によれば、カンファ−・蛋白質
複合体を固定化したトランスデューサを抗２−ＭＩＢ抗
体を一定濃度含む被測定溶液に浸せきし、被測定溶液中
に含まれる未知濃度の２−ＭＩＢと，トランスデュ−サ
上のカンファ−・蛋白質複合体とを競合的に抗２−ＭＩ
Ｂ抗体と反応させ、トランスデューサ上の複合体に結合
した抗体量をトランスデューサの出力変化により求め
る。既知の２−ＭＩＢ濃度と結合抗体量による検量線を
作製しておくことで、被測定溶液中の未知２−ＭＩＢ量
を定量することができる。この反応は、抗原抗体反応を
利用しているため、従来の定量方法と比較して、１）低
濃度の２−ＭＩＢでも濃縮の必要がなく高感度に検出で
きる。また、２）抗体の特異性により、２−ＭＩＢを選
択的に検出でき、統計処理による複数デ−タの解析操作
がいらない。また、３）容易な操作で定量することがで
きる、等の長所を有する。
複合体を固定化したトランスデューサを抗２−ＭＩＢ抗
体を一定濃度含む被測定溶液に浸せきし、被測定溶液中
に含まれる未知濃度の２−ＭＩＢと，トランスデュ−サ
上のカンファ−・蛋白質複合体とを競合的に抗２−ＭＩ
Ｂ抗体と反応させ、トランスデューサ上の複合体に結合
した抗体量をトランスデューサの出力変化により求め
る。既知の２−ＭＩＢ濃度と結合抗体量による検量線を
作製しておくことで、被測定溶液中の未知２−ＭＩＢ量
を定量することができる。この反応は、抗原抗体反応を
利用しているため、従来の定量方法と比較して、１）低
濃度の２−ＭＩＢでも濃縮の必要がなく高感度に検出で
きる。また、２）抗体の特異性により、２−ＭＩＢを選
択的に検出でき、統計処理による複数デ−タの解析操作
がいらない。また、３）容易な操作で定量することがで
きる、等の長所を有する。
【図１】水晶振動子の周波数測定を利用した２−ＭＩＢ
の検出装置のブロック図
の検出装置のブロック図
【図２】２−ＭＩＢ検出用センサおよびその作製方法を
示すフロー図
示すフロー図
【図３】競合反応を利用した２−ＭＩＢの検出法の概念
図
図
【図４】水晶振動子の周波数測定による既知２−ＭＩＢ
濃度と２−ＭＩＢと結合した抗２−ＭＩＢ抗体量との関
係図
濃度と２−ＭＩＢと結合した抗２−ＭＩＢ抗体量との関
係図
【図５】ＳＡＷ素子を利用した２−ＭＩＢの測定系を示
した回路図
した回路図
【図６】ＳＡＷ素子の周波数測定による既知２−ＭＩＢ
濃度と２−ＭＩＢと結合した抗２−ＭＩＢ抗体量との関
係図
濃度と２−ＭＩＢと結合した抗２−ＭＩＢ抗体量との関
係図
１：ジメチルイソボルネオール（２−ＭＩＢ）検出用セ
ンサ ２：発振回路 ３：周波数カウンタ ４：パソコン ５：測定セル ６：活性炭 ７：エアーポンプ １１：水晶振動子 １２：金電極 １３：カンファ−・オボアルブミン（Ｏｖａ）複合体 １４：複合体固定化水晶振動子 １５：金電極の未被覆部分 １６：牛血清アルブミン（ＢＳＡ） １７：２−ＭＩＢ １８：抗２−ＭＩＢ抗体 １９：カンファ−・Ｏｖａ複合体との結合抗体 ２１：圧電基板 ２２：金属薄膜 ２３：伝搬面 ２４：増幅器 ２５：混合器
ンサ ２：発振回路 ３：周波数カウンタ ４：パソコン ５：測定セル ６：活性炭 ７：エアーポンプ １１：水晶振動子 １２：金電極 １３：カンファ−・オボアルブミン（Ｏｖａ）複合体 １４：複合体固定化水晶振動子 １５：金電極の未被覆部分 １６：牛血清アルブミン（ＢＳＡ） １７：２−ＭＩＢ １８：抗２−ＭＩＢ抗体 １９：カンファ−・Ｏｖａ複合体との結合抗体 ２１：圧電基板 ２２：金属薄膜 ２３：伝搬面 ２４：増幅器 ２５：混合器
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 宮本 敬久 福岡県福岡市早良区百道浜３丁目５番５− 901 (72)発明者 川田 志加子 神奈川県横須賀市長坂２丁目２番１号 株 式会社富士電機総合研究所内 (72)発明者 田中 良春 神奈川県横須賀市長坂２丁目２番１号 株 式会社富士電機総合研究所内 (72)発明者 大戸 時喜雄 神奈川県横須賀市長坂２丁目２番１号 株 式会社富士電機総合研究所内
Claims (5)
- 【請求項１】２−メチルイソボルネオール（以下２−Ｍ
ＩＢと記載）に構造の類似したカンファ−と蛋白質の複
合体を使って作製した抗２−ＭＩＢ抗体と、測定対象の
２−ＭＩＢとカンファ−・蛋白質複合体抗原との、抗原
抗体反応を利用した２−ＭＩＢの検出方法。 - 【請求項２】２−ＭＩＢに構造の類似したカンファ−・
蛋白質複合体抗原を固定化したトランスデューサを、抗
２−ＭＩＢ抗体が一定濃度となるように調製した被測定
溶液中に浸せきし、被測定溶液中に含まれる未知濃度の
２−ＭＩＢと、トランスデューサ上に固定化したカンフ
ァ−・蛋白質複合体抗原とを、競合的に抗２−ＭＩＢ抗
体と反応させ、結果的にカンファ−・蛋白質複合体抗原
と結合した抗２−ＭＩＢ抗体によるトランスデュ−サの
出力変化により、被測定溶液中の２−ＭＩＢ濃度を定量
する２−ＭＩＢの検出方法。 - 【請求項３】請求項１および２に記載の抗２−ＭＩＢ抗
体は、カンファーと牛血清アルブミンの複合体を用いて
作製することを特徴とする２−ＭＩＢの検出方法。 - 【請求項４】請求項１および２に記載のカンファ−・蛋
白質複合体抗原は、蛋白質が卵白アルブミンであること
を特徴とする２−ＭＩＢの検出方法。 - 【請求項５】請求項２に記載のトランスデューサは、水
晶振動子または弾性表面波素子（ＳＡＷ素子) であるこ
とを特徴とする２−ＭＩＢの検出方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8247476A JPH1090270A (ja) | 1996-09-19 | 1996-09-19 | ２−メチルイソボルネオールの検出方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8247476A JPH1090270A (ja) | 1996-09-19 | 1996-09-19 | ２−メチルイソボルネオールの検出方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH1090270A true JPH1090270A (ja) | 1998-04-10 |
Family
ID=17164031
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8247476A Pending JPH1090270A (ja) | 1996-09-19 | 1996-09-19 | ２−メチルイソボルネオールの検出方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH1090270A (ja) |
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005043150A1 (ja) * | 2003-10-31 | 2005-05-12 | Murata Manufacturing Co., Ltd. | 弾性表面波センサー内蔵発振回路及びバイオセンサー装置 |
| JP2007517225A (ja) * | 2003-12-30 | 2007-06-28 | スリーエム イノベイティブ プロパティズ カンパニー | 音響機械的検出装置および使用法 |
| US7389673B2 (en) * | 2004-09-10 | 2008-06-24 | Murata Manufacturing Co., Ltd. | Sensor for detecting analyte in liquid and device for detecting analyte in liquid using the same |
| US7437907B2 (en) | 2004-09-10 | 2008-10-21 | Murata Manufacturing Co., Ltd. | Sensor for detecting substance in liquid and apparatus for detecting substance in liquid using the same |
| US7816837B2 (en) | 2003-07-04 | 2010-10-19 | Murata Manufacturing Co., Ltd. | Surface acoustic wave sensor |
| CN101893530A (zh) * | 2010-07-08 | 2010-11-24 | 天津市双星香精香料有限公司 | 香精在热脱附气相色谱质谱联用检测的前处理方法 |
| JP2012516439A (ja) * | 2009-01-30 | 2012-07-19 | バイオセンサー、アプリケーションズ、スエーデン、アクチボラグ | 液体サンプル中の各種標的抗原の分析 |
| WO2015046577A1 (ja) * | 2013-09-30 | 2015-04-02 | 京セラ株式会社 | センサ、検出方法、検出システム及び検出装置 |
| CN109655517A (zh) * | 2019-01-29 | 2019-04-19 | 杭州电子科技大学 | 一种水产品中2-甲基异茨醇的检测方式 |
| JP2023524007A (ja) * | 2020-04-28 | 2023-06-08 | アヴィアーナ モレキュラー テクノロジーズ，エルエルシー | 感染性疾患を同定するための組成物および表面弾性波をベースとする方法 |
-
1996
- 1996-09-19 JP JP8247476A patent/JPH1090270A/ja active Pending
Cited By (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7816837B2 (en) | 2003-07-04 | 2010-10-19 | Murata Manufacturing Co., Ltd. | Surface acoustic wave sensor |
| WO2005043150A1 (ja) * | 2003-10-31 | 2005-05-12 | Murata Manufacturing Co., Ltd. | 弾性表面波センサー内蔵発振回路及びバイオセンサー装置 |
| US7394180B2 (en) | 2003-10-31 | 2008-07-01 | Murata Manufacturing Co., Ltd. | Oscillator circuit including surface acoustic wave sensor and biosensor apparatus |
| JP2007517225A (ja) * | 2003-12-30 | 2007-06-28 | スリーエム イノベイティブ プロパティズ カンパニー | 音響機械的検出装置および使用法 |
| US7389673B2 (en) * | 2004-09-10 | 2008-06-24 | Murata Manufacturing Co., Ltd. | Sensor for detecting analyte in liquid and device for detecting analyte in liquid using the same |
| US7437907B2 (en) | 2004-09-10 | 2008-10-21 | Murata Manufacturing Co., Ltd. | Sensor for detecting substance in liquid and apparatus for detecting substance in liquid using the same |
| JP2012516439A (ja) * | 2009-01-30 | 2012-07-19 | バイオセンサー、アプリケーションズ、スエーデン、アクチボラグ | 液体サンプル中の各種標的抗原の分析 |
| CN101893530A (zh) * | 2010-07-08 | 2010-11-24 | 天津市双星香精香料有限公司 | 香精在热脱附气相色谱质谱联用检测的前处理方法 |
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| CN109655517A (zh) * | 2019-01-29 | 2019-04-19 | 杭州电子科技大学 | 一种水产品中2-甲基异茨醇的检测方式 |
| CN109655517B (zh) * | 2019-01-29 | 2020-12-18 | 杭州电子科技大学 | 一种水产品中2-甲基异茨醇的检测方式 |
| JP2023524007A (ja) * | 2020-04-28 | 2023-06-08 | アヴィアーナ モレキュラー テクノロジーズ，エルエルシー | 感染性疾患を同定するための組成物および表面弾性波をベースとする方法 |
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