JPH11209295A

JPH11209295A - 抗アレルギー剤

Info

Publication number: JPH11209295A
Application number: JP10025220A
Authority: JP
Inventors: Kenji Mizutani; 健二水谷; Toshimitsu Kanbara; 敏光神原; Tatsuo Nakahara; 達雄中原; Enyou Shiyuu; 艶陽周; Shigetaka Matsumoto; 重剛松本
Original assignee: MARUZEN SEIYAKU KK
Current assignee: MARUZEN SEIYAKU KK
Priority date: 1998-01-23
Filing date: 1998-01-23
Publication date: 1999-08-03

Abstract

(57)【要約】【課題】化粧品、飲食物等の分野で利用するのに適し
た抗アレルギー剤を提供する。【解決手段】ベルゲニア・クラッシフォリア、ベルゲ
ニア・パープラセンス等のヒマラヤユキノシタ属植物を
水、親水性有機溶媒またはそれらの混合物で抽出処理し
て得られる抽出物が抗アレルギー作用を有することを利
用する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、化粧品、飲食物、
愛玩動物用食品等の分野で利用するのに適した抗アレル
ギー剤に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】従来、抗アレルギー剤としてはヒスタミ
ンに対する競合拮抗物質たとえばマレイン酸クロルフェ
ニラミン、ジフェンヒドラミン等が提案され、使われて
きた。また、近年はＩ型アレルギー反応にともなって起
こる肥満細胞からのヒスタミン、セロトニンなどの起炎
物質の遊離を阻害するものとして、トラニラスト、クロ
モグリク酸ナトリウム、バイカレイン等が報告されてい
る。

【０００３】これらの抗アレルギー剤は、作用部位に選
択的に働いて優れた効果を示すが、副作用を伴うことが
多く、用途や使用条件が厳しく制限されるという問題点
があった。

【０００４】植物由来の物質で抗アレルギー作用を示す
物質として従来知られていたものには、ウコン、タンジ
ン（特開平８−４０９２２）、甜茶（炎症，Vol.15(2),
167,1995），西洋ボダイジュ、ローズマリー（J.Soc.Co
smet.Chem.Japan Vol.25(4),246,1992）などがあった。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、安全
性の高い天然物由来の物質の中から抗アレルギー性物質
を見いだし、飲食物や化粧品にも安心して配合できる新
規抗アレルギー剤を提供することにある。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、ベルゲニ
ア・クラッシフォリア（Bergenia crassifolia；和名：
ナガバユキノシタ）、ベルゲニア・パープラセンス（Be
rgenia purpurascens）等、ヒマラヤユキノシタ属ユキ
ノシタ科に属する植物が強い抗アレルギー性成分を含有
することを見いだした。

【０００７】本発明は上記知見に基づくものであって、
ヒマラヤユキノシタ属ユキノシタ科の植物が含有する抗
アレルギー性成分を有効成分とすることを特徴とする抗
アレルギー剤を提供するものである。

【０００８】

【発明の実施の形態】ベルゲニア・クラッシフォリアは
厚叶岩白菜の名で、またベルゲニア・パープラセンスは
岩白菜の名で、いずれも中国において古来生薬として利
用されてきたものである。薬効については虚弱体質、吐
血、喀血、炎症性腫脹などに有効とされており、全草を
利用する。その他、お茶として利用する地方もある（平
凡社・世界有用植物辞典）。しかしながら、この植物に
抗アレルギー作用を有する物質が含まれていることは知
られていなかった。

【０００９】抗アレルギー作用を有する物質は、前記ヒ
マラヤユキノシタ属植物の根の部分に多く含まれてい
る。有効成分の抽出は乾燥物について行うことが望まし
く、新鮮なものは抽出効率が悪い。抽出溶媒としては、
水、親水性有機溶媒またはそれらの混合物を使用するこ
とができ、親水性有機溶媒としてはメタノール、エタノ
ール等の低級脂肪族アルコールが好適である。疎水性有
機溶媒を用いたのでは、抽出物収率が著しく低いばかり
か抽出物の抗アレルギー作用も弱い。

【００１０】抗アレルギー性成分は同じユキノシタ科に
属する植物たとえばベルゲニア・シリアータ、ベルゲニ
ア・コルディフォリア、ベルゲニア・リグラータ等にも
含まれているが、原料植物としての重要度は低い。

【００１１】抽出方法には制限がなく、室温ないし還流
加熱下に任意の装置を用いて抽出することができる。簡
単には、抽出溶媒を満たした処理槽に抽出原料を投入
し、ときどき撹拌しながら可溶性成分を溶出させる。得
られた抽出液を濃縮、乾燥すると、抗アレルギー作用を
有する抽出物が得られる。

【００１２】この抽出物はそのまま抗アレルギー剤とし
て使用することができるが、必要ならば、その活性向上
や着色、不快臭、異味等除去に有効な精製処理を施した
り、任意の助剤と共に散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル
剤、シロップ剤、腸溶化剤、トローチ、チュアブル等、
任意の形態に製剤化して利用に供することができる。

【００１３】本発明の抗アレルギー剤は、原料のヒマラ
ヤユキノシタ属植物が前述のように古来薬用等に利用さ
れてきたものであってその安全性は確認されている。ま
た、原料植物の抽出物のままでも着色は少なく、異味・
異臭もないから、一般的な飲食品、たとえば調味料、和
洋菓子、氷菓、清涼飲料、茶、スプレッド、ペースト、
漬物、畜肉加工品、水産加工品、乳製品、卵加工品、野
菜果実加工品、穀物加工品等に対して、これらを製造す
るに当たり通常用いられる補助的な原料や添加物、たと
えばブドウ糖、果糖、ショ糖、マルトース、ソルビトー
ル、ステビオサイド、ルブソサイド、コーンシロップ、
乳糖、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸、乳酸、
L-アスコルビン酸、dl-α-トコフェロール、エリソルビ
ン酸ナトリウム、グリセリン、プロピレングリコール、
グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エス
テル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステ
ル、アラビアガム、カラギーナン、カゼイン、ゼラチ
ン、ペクチン、寒天、ビタミンＢ類、ニコチン酸アミ
ド、パントテン酸カルシウム、アミノ酸類、カルシウム
塩類、色素、香料、保存剤等と共に添加することができ
る。

【００１４】好適添加水準は品質や添加対象物によって
も異なるが、標準的なヒマラヤユキノシタ属抽出物を用
いる場合で通常０.０１〜１０重量％である。

【００１５】化粧品に配合する場合も、化粧品の製造に
通常使用される諸材料たとえば植物油などの油脂類、ラ
ウリン、ミツロウ等のロウ類、炭化水素類、脂肪酸、高
級アルコール類、エステル類、種々の界面活性剤、色
素、香料、ビタミン類、植物・動物抽出成分、紫外線吸
収剤、抗酸化剤、防腐・殺菌剤等と共に自由に組み合わ
せて使用することができる。

【００１６】

【実施例】以下、実施例を示して本発明を説明する。

【００１７】製造実施例１ベルゲニア・クラッシフォリアの根の乾燥物１００ｇを
抽出溶媒５００ml中に入れ、１時間、還流下に加熱して
抗アレルギー性成分を抽出する処理を２回行う。得られ
た抽出液を合わせて減圧下に濃縮し、さらに乾燥して、
抽出物を得る。６種類の抽出溶媒により上記抽出実験を
行なった結果、および、ベルゲニア・パープラセンスに
ついて同様の抽出を行なった結果を、まとめて表１に示
す。

【００１８】

【表１】抽出物収率（重量％）抽出溶媒Ｂ・クラッシフォリア抽出物Ｂ・パープラセンス抽出物水１６.８１７.３５０％メタノール２１.５２０.８エタノール２８.０２７.１酢酸エチル８.６９.５アセトン５.３６.５ n-ヘキサン３.２３.８

【００１９】水、５０％メタノールまたはエタノールを
抽出溶媒として得られた抽出物の抗アレルギー作用は後
記実施例１〜３により確認された（一般に、植物体抽出
物は組成が複雑であるから、それが抗アレルギー作用を
示す場合における抗アレルギー性成分は単一ではないこ
とが多く、また、個々の有効成分によって作用部位が異
なることが多い。したがって、天然物系物質の抗アレル
ギー作用を評価するに当たっては単一の評価法による試
験だけでなくさまざまな観点からの総合評価を行うこと
が望ましいとされる。通常、抗アレルギー作用の指標と
されている作用は、肥満細胞からヒスタミン等起炎物質
が遊離するのを抑制する作用、ヒアルロニダーゼ阻害作
用、ＳＯＤ様作用などである。製造実施例１による各抽
出物が示す抗アレルギー作用も上記各作用の有無および
強さを総合的に検討することにより確認された。）。

【００２０】実施例１下記の方法によりヒスタミン遊離抑制作用を調べた（細
胞内のヒスタミンが遊離されると同時にヘキソサミニダ
ーゼも遊離されることから、ヘキソサミニダーゼ遊離を
指標にヒスタミン遊離抑制作用を評価する方法であ
る。）。

【００２１】試験法：２５mlのフラスコに入れた１５％
ＦＢＳ添加ＭＥＭ培地にＲＢＬ-２Ｈ３細胞１.０×10⁶
個を播種し、５％ＣＯ₂下、３７℃で４日間培養する。
その後トリプシン処理および遠心処理（1000rpm，２分
間）を行なって細胞を沈殿物として得る。これを上記培
地と同じ培地に４.０×10⁵cell/ml懸濁させ、そこにマ
ウスモノクロナール抗ジニトロフェニル基ＩgＥ（ＤＮ
Ｐ-specific ＩgＥ）を５μl添加し、濃度を０.５μg/m
lとする。得られた細胞浮遊液を９６穴プレートに８０
μl播種し、５％ＣＯ₂下３７℃で２４時間培養する。培
養終了後、各穴中の培地を除去し、シリガリアン緩衝液
で洗浄する。次に上記緩衝液３０μlおよび試料溶液１
０μlを加え、３７℃で１０分間インキュベートする。
次にジニトロフェニル化ウシ血清アルブミン（ＤＮＰ−
ＢＳＡ）１０μlを加え、さらに３７℃で１５分間イン
キュベートする。その後、氷冷下で上清液１０μlを新
たな９６穴プレートに移し替え、これに１mＭ p-ニトロ
フェニル-Ｎ-アセチル-β-Ｄ-グルコサミド溶液１０μl
を加え、３７℃で１時間インキュベートする。反応終了
後、0.1ＭＮa₂ＣＯ₃・ＮaＨＣＯ₃溶液２５０μlを加
え、マイクロプレートリーダーにて４１５nmにおける吸
光度Ａを測定する。試料溶液を添加しない細胞浮遊液に
ついても同様の処理と吸光度測定を行う（このとき測定
される吸光度をＢとする）。また、細胞浮遊液のかわり
に上記緩衝液を用いて同様の処理と吸光度測定を行う
（このとき測定される吸光度をＣとする）。そして、次
式によりヘキソサミニダーゼ遊離抑制率を算出する。

【００２２】ヘキソサミニダーゼ遊離抑制率（％）＝
〔１−(Ａ−Ｃ)／(Ｂ−Ｃ)〕×１００

【００２３】試料溶液の濃度を段階的に変更して上記方
法により抑制率を測定し、抑制率が５０％になる試料溶
液の濃度ＩＣ₅₀を内挿法により求める。３種類の抽出物
について上記試験を行なった結果は表２のとおりであっ
た。

【００２４】

【表２】ＩＣ₅₀（ppm）Ｂ・クラッシフォリア抽出物Ｂ・パープラセンス抽出物水抽出物１６５.１１７０.０ 50％メタノール抽出物１１８.７１３２.１エタノール抽出物１６６.０１５８.５

【００２５】実施例２下記の方法によりヒアルロニダーゼ阻害活性を評価し
た。試験法：試料溶液２０μl、緩衝液０.１８ml、およびヒ
アルロニダーゼ溶液０.１mlを混合し、３７℃で２０分
間インキュベートする。これにヒアルロン酸カリウム溶
液０.５mlを加えて３７℃で４０分間インキュベートし
た後、０.４Ｎ水酸化ナトリウム溶液０.２mlを加えて反
応を停止させる。氷中で冷却した後、反応液にホウ酸溶
液０.２mlを加え、３分間煮沸したのち冷却する。次い
でp-ＤＡＢＡ試薬６mlを加えて３７℃で２０分間インキ
ュベートした後、５８５nmにおける吸光度Ａを測定す
る。

【００２６】別に、酵素溶液を添加しないほかは上記と
同様にして吸光度Ｂを測定し、試料溶解に用いた溶媒に
ついても上記と同様に操作して吸光度Ｃを測定し、さら
に、試料溶解に用いた溶媒について酵素溶液を添加しな
いほかは同様に操作して吸光度Ｄを測定する。測定され
た吸光度Ａ〜Ｄから、次式によりヒアルロニダーゼ阻害
率を求める。

【００２７】ヒアルロニダーゼ阻害率（％）＝〔（Ｃ−
Ｄ）−（Ａ−Ｂ）〕×１００／（Ｃ−Ｄ）

【００２８】試料溶液の濃度を段階的に変更して上記阻
害率を測定し、阻害率が５０％になる試料濃度ＩＣ₅₀を
内挿法により求める。３種類の抽出物について上記試験
を行なった結果は表３のとおりであった。

【００２９】

【表３】ＩＣ₅₀（単位：ppm）Ｂ・クラッシフォリア抽出物Ｂ・パープラセンス抽出物水抽出物３８.５４０.１ 50％メタノール抽出物２６.８２５.４エタノール抽出物３５.５３３.３

【００３０】実施例３下記ＮＢＴ法によりＳＯＤ様活性を測定した。ＮＢＴ法：試験管に０.０５Ｍ炭酸二ソーダ緩衝液（pＨ
１０.２）、３mＭキサンチン、３mＭＥＤＴＡ、ＢＳＡ
溶液および０.７５mＭＮＢＴ（ニトロブルーテトラゾ
リウム）を加え、これに試料溶液０.１mlを添加し、２
５℃で１０分間放置する。次いで、キサンチン酸化酵素
溶液を加えて素早く撹拌し、２５℃で２０分間放置す
る。その後、６mＭ塩化銅を加えて反応を停止させ、５
６０nmにおける吸光度を測定する。空試験は、試料溶液
の代わりに蒸留水を用いる。

【００３１】測定値から、下記の式によりスーパーオキ
サイド抑制率を算出する。抑制率（％）＝〔１−（Ａ−Ｂ）／（Ｃ−Ｄ）〕×１０
０但しＡ：試料溶液の酵素反応後の吸光度Ｂ：試料溶液の酵素無添加時の吸光度Ｃ：空試験溶液の酵素反応後の吸光度Ｄ：空試験溶液の酵素無添加時の吸光度

【００３２】試料溶液の濃度を段階的に変更して上記方
法により抑制率を測定し、抑制率が５０％になる試料溶
液の濃度ＩＣ₅₀を内挿法により求める。３種類の抽出物
について上記試験を行なった結果は表４のとおりであっ
た。

【００３３】

【表４】ＩＣ₅₀（単位：ppm）Ｂ・クラッシフォリア抽出物Ｂ・パープラセンス抽出物水抽出物７.４８.８ 50％メタノール抽出物１.５２.５エタノール抽出物４.０５.１

【００３４】使用例１以下の原料を均一に混合し、抗アレルギー作用を有する
クリームを製造した。Ｂ・クラッシフォリア５０％メタノール抽出物０.１ｇセトステアリルアルコール３.５スクワラン４０ミツロウ３還元ラノリル５ポリオキシエチレン２ステアリン酸モノグリセリド２ 1,3-ブチレングリコール５グリセリン５香料００.０３精製水残部（全量を１００mlとする）

【００３５】使用例２以下の原料を混合し、抗アレルギー作用を有するローシ
ョンを製造した。Ｂ・パープラセンスエタノール抽出物０.１ｇグリセリン４ 1,3-ブチレングリコール４エタノール７ポリオキシエチレンオレイルアルコール０.５メチルパラベン０.０５クエン酸０.０１クエン酸ソーダ０.１香料０.０５精製水残部（全量を１００mlとする）

【００３６】使用例３以下の原料を混合し、抗アレルギー作用を有する清涼飲
料を製造した。Ｂ・クラッシフォリアエタノール抽出物０.１ｇ液糖２０クエン酸０.１ｇ香料０.０５ｇ色素０.０１水残部（全量を１００mlとする）

【００３７】使用例４以下の原料を混合し、抗アレルギー作用を有するクッキ
ーを製造した。Ｂ・パープラセンス５０％エタノール抽出物０.１ｇ薄力粉１００マーガリン５０砂糖４０卵２５食塩０.５

【００３８】

【発明の効果】上述のように、本発明の抗アレルギー剤
は抗アレルギー作用において優れているだけでなく、古
来薬用に利用されてきた植物から得られるものであるか
ら安全性が高く、飲食品、化粧品等にも広く配合して利
用することができる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＡ６１Ｋ 7/00 Ａ６１Ｋ 7/00 Ｗ 7/48 7/48 Ａ２３Ｌ 2/00 Ｆ (72)発明者周艶陽広島県尾道市向東町14703−10丸善製薬株式会社内 (72)発明者松本重剛広島県尾道市久保３−14−22

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】ヒマラヤユキノシタ属植物より抽出され
る抗アレルギー性成分を有効成分とすることを特徴とす
る抗アレルギー剤。
【請求項２】ヒマラヤユキノシタ属植物がベルゲニア
・クラッシフォリアまたはベルゲニア・パープラセンス
である請求項１記載の抗アレルギー剤。
【請求項３】抗アレルギー性成分が水、低級脂肪族ア
ルコールまたはこれらの混合物により抽出されたもので
ある請求項１または請求項２に記載の抗アレルギー剤。