JPH11221092A - エリスリトールの製造方法 - Google Patents
エリスリトールの製造方法Info
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- JPH11221092A JPH11221092A JP34523698A JP34523698A JPH11221092A JP H11221092 A JPH11221092 A JP H11221092A JP 34523698 A JP34523698 A JP 34523698A JP 34523698 A JP34523698 A JP 34523698A JP H11221092 A JPH11221092 A JP H11221092A
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Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 エリスリトールを工業的発酵生産に適した培
地を用いて効率的に製造する方法を提供する。 【解決手段】 エリスリトール生産能を有する微生物を
カルシウムを含有する培地で培養してエリスリトールを
生成させ、その培養物からエリスリトールを採取するこ
とによりエリスリトールを製造する。
地を用いて効率的に製造する方法を提供する。 【解決手段】 エリスリトール生産能を有する微生物を
カルシウムを含有する培地で培養してエリスリトールを
生成させ、その培養物からエリスリトールを採取するこ
とによりエリスリトールを製造する。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明はエリスリトールの製
造方法に関し、更に詳しくは、培地中にカルシウムを含
有させることにより、発酵法により工業的に有利にエリ
スリトールを製造する方法に関する。
造方法に関し、更に詳しくは、培地中にカルシウムを含
有させることにより、発酵法により工業的に有利にエリ
スリトールを製造する方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】エリスリトールの製造方法としては、ト
リゴノプシス属（Trigonopsis）、キャンジダ属（Candi
da）の酵母を、グリセロールを炭素源とし、カゼイン加
水分解物を窒素源とする培地に培養して製造する方法
（特公昭４７−４１５４９号公報）、キャンジダ属（Ca
ndida）、トルロプシス属（Torulopsis）、ハンゼヌラ
属（Hansenula）の酵母を炭化水素などを炭素源とし、
酵母エキス、尿素を窒素源とする培地に培養して製造す
る方法（特公昭５１−２１０７２号公報）が知られてい
る。しかしながら、これらの方法は、炭素源として使用
される原料が実際の工業生産において適当でないため、
未だ工業化されてない。
リゴノプシス属（Trigonopsis）、キャンジダ属（Candi
da）の酵母を、グリセロールを炭素源とし、カゼイン加
水分解物を窒素源とする培地に培養して製造する方法
（特公昭４７−４１５４９号公報）、キャンジダ属（Ca
ndida）、トルロプシス属（Torulopsis）、ハンゼヌラ
属（Hansenula）の酵母を炭化水素などを炭素源とし、
酵母エキス、尿素を窒素源とする培地に培養して製造す
る方法（特公昭５１−２１０７２号公報）が知られてい
る。しかしながら、これらの方法は、炭素源として使用
される原料が実際の工業生産において適当でないため、
未だ工業化されてない。
【０００３】また、モニリエラ・トメントサ・バール・
ポリニス（Moniliella tomentosa var.pollinis）をグ
ルコースなどの糖質を炭素源とし、コーンステープリカ
ー、尿素、酵母エキスを窒素源とする培地に培養して製
造する方法（特開昭６０−１１０２９５号公報など）、
エリスリトール生産菌を酵母エキス、コーンステープリ
カーを窒素源とする培地に培養して製造する方法（特開
平１−１９９５８４号公報）も知られている。
ポリニス（Moniliella tomentosa var.pollinis）をグ
ルコースなどの糖質を炭素源とし、コーンステープリカ
ー、尿素、酵母エキスを窒素源とする培地に培養して製
造する方法（特開昭６０−１１０２９５号公報など）、
エリスリトール生産菌を酵母エキス、コーンステープリ
カーを窒素源とする培地に培養して製造する方法（特開
平１−１９９５８４号公報）も知られている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】エリスリトールの製造
方法としては上記の様な種々のものが知られている。し
かしながら、それらの方法においては、グリセリンが大
量に副生したり発酵の終了（グルコースの消失）に時間
がかかる等、製造工程に負荷がかかり、また経済的にも
不利である。
方法としては上記の様な種々のものが知られている。し
かしながら、それらの方法においては、グリセリンが大
量に副生したり発酵の終了（グルコースの消失）に時間
がかかる等、製造工程に負荷がかかり、また経済的にも
不利である。
【０００５】本発明は、上記観点からなされたものであ
り、エリスリトールを、工業的発酵生産に適した培地を
用いて効率的に製造する方法を提供することを課題とす
る。
り、エリスリトールを、工業的発酵生産に適した培地を
用いて効率的に製造する方法を提供することを課題とす
る。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記の課
題を解決すべく研究を重ねた結果、発酵培地中にカルシ
ウムを含有させることにより、安価な培地を用いてエリ
スリトールを効率よく製造できることを見いだし、本発
明を完成するに至った。
題を解決すべく研究を重ねた結果、発酵培地中にカルシ
ウムを含有させることにより、安価な培地を用いてエリ
スリトールを効率よく製造できることを見いだし、本発
明を完成するに至った。
【０００７】即ち、本発明の要旨は、エリスリトール生
産能を有する微生物をカルシウムを含有する培地で培養
してエリスリトールを生成させ、その培養物からエリス
リトールを採取することによりなるエリスリトールの製
造方法に存する。
産能を有する微生物をカルシウムを含有する培地で培養
してエリスリトールを生成させ、その培養物からエリス
リトールを採取することによりなるエリスリトールの製
造方法に存する。
【０００８】本発明により、上記方法の好ましい態様と
して、前記培地が、５ｐｐｍ以上の濃度のカルシウムを
含有する培地である上記方法、及び前記微生物が、モニ
リエラ属又はトリコスポロノイデス属に属する微生物か
ら選ばれる微生物である上記方法、を提供する。
して、前記培地が、５ｐｐｍ以上の濃度のカルシウムを
含有する培地である上記方法、及び前記微生物が、モニ
リエラ属又はトリコスポロノイデス属に属する微生物か
ら選ばれる微生物である上記方法、を提供する。
【０００９】
【発明の実施の形態】以下、本発明を更に詳細に説明す
る。
る。
【００１０】本発明で用いる微生物としては、発酵性糖
質からエリスリトールを産生する能力を有するものであ
れば、特に制限されない。具体的には、モニリエラ属
（Moniliella）又はトリコスポロノイデス属（Trichosp
oronoides）に属する微生物が挙げられる。
質からエリスリトールを産生する能力を有するものであ
れば、特に制限されない。具体的には、モニリエラ属
（Moniliella）又はトリコスポロノイデス属（Trichosp
oronoides）に属する微生物が挙げられる。
【００１１】モニリエラ（Moniliella）属に属する微生
物としては、例えばモニリエラ・ポリニス（Moniliella
polinis）、モニリエラ・アセトアブテンス（Moniliel
la acetoabutens）、及びモニリエラ・スアベオレンス
（Moniliella suaveolens）が挙げられる。
物としては、例えばモニリエラ・ポリニス（Moniliella
polinis）、モニリエラ・アセトアブテンス（Moniliel
la acetoabutens）、及びモニリエラ・スアベオレンス
（Moniliella suaveolens）が挙げられる。
【００１２】これらの中で好ましい菌株としては、モニ
リエラ・ポリニス（Moniliella polinis）ＣＢＳ４６
１．６７、モニリエラ・ポリニス（Moniliella polini
s）ＭＣＩ３５５４（FERM BP-6170）、モニリエラ・ポ
リニス（Moniliella polinis）ＭＣＩ３３７１（FERM B
P-6173）、モニリエラ・アセトアブテンス（Moniliella
acetoabutens）ＣＢＳ１７０．６６、モニリエラ・ス
アベオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolen
s var. nigra）ＣＢＳ２２３．３２、モニリエラ・スア
ベオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens
var. nigra）ＣＢＳ３８２．３６、モニリエラ・スアベ
オレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens va
r. nigra）ＣＢＳ２２３．７９等を挙げることができ
る。
リエラ・ポリニス（Moniliella polinis）ＣＢＳ４６
１．６７、モニリエラ・ポリニス（Moniliella polini
s）ＭＣＩ３５５４（FERM BP-6170）、モニリエラ・ポ
リニス（Moniliella polinis）ＭＣＩ３３７１（FERM B
P-6173）、モニリエラ・アセトアブテンス（Moniliella
acetoabutens）ＣＢＳ１７０．６６、モニリエラ・ス
アベオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolen
s var. nigra）ＣＢＳ２２３．３２、モニリエラ・スア
ベオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens
var. nigra）ＣＢＳ３８２．３６、モニリエラ・スアベ
オレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveolens va
r. nigra）ＣＢＳ２２３．７９等を挙げることができ
る。
【００１３】またトリコスポロノイデス（Trichosporon
oides）属に属する微生物としては、例えば、トリコス
ポロノイデス・エドセファリス（Trichosporonoides oe
docephalis）、トリコスポロノイデス・メガチリエンシ
ス（Trichosporonoides megachiliensis）、トリコスポ
ロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathu
lata）、トリコスポロノイデス・ニグレッセンス（Tric
hosporonoides nigrescens）、及びトリコスポロノイデ
ス・マジダ（Trichosporonoides madida）が挙げられ
る。
oides）属に属する微生物としては、例えば、トリコス
ポロノイデス・エドセファリス（Trichosporonoides oe
docephalis）、トリコスポロノイデス・メガチリエンシ
ス（Trichosporonoides megachiliensis）、トリコスポ
ロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spathu
lata）、トリコスポロノイデス・ニグレッセンス（Tric
hosporonoides nigrescens）、及びトリコスポロノイデ
ス・マジダ（Trichosporonoides madida）が挙げられ
る。
【００１４】これらの中で好ましい菌株としては、例え
ば、トリコスポロノイデス・エドセファリス（Trichosp
oronoides oedocephalis）ＣＢＳ６４９．６６、トリコ
スポロノイデス・エドセファリス（Trichosporonoides
oedocephalis）ＣＢＳ５６８．８５、トリコスポロノイ
デス・メガチリエンシス（Trichosporonoides megachil
iensis）ＣＢＳ５６７．８５、トリコスポロノイデス・
メガチリエンシス（Trichosporonoides megachiliensi
s）ＡＴＣＣ７６７１８、トリコスポロノイデス・メガ
チリエンシス（Trichosporonoides megachiliensis）SN
-r96（FERM BP-1431）、トリコスポロノイデス・メガチ
リエンシス（Trichosporonoides megachiliensis）ＭＣ
Ｉ３３６９（FERM BP-6172）、トリコスポロノイデス・
マジダ（Trichosporonoides madida）ＣＢＳ２４０．７
９、トリコスポロノイデス・ニグレッセンス（Trichosp
oronoides nigrescens）ＣＢＳ２６８．８１、トリコス
ポロノイデス・ニグレッセンス（Trichosporonoides ni
grescens）ＣＢＳ２６９．８１、トリコスポロノイデス
・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）ＣＢ
Ｓ２４１．７９、トリコスポロノイデス・スパスラータ
（Trichosporonoidesspathulata）ＣＢＳ２４１．８
１、トリコスポロノイデス・スパスラータ（Trichospor
onoides spathulata）ＣＢＳ２４２．７９Ａ、トリコス
ポロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spat
hulata）ＣＢＳ２４２．７９Ｂ等を挙げることができ
る。
ば、トリコスポロノイデス・エドセファリス（Trichosp
oronoides oedocephalis）ＣＢＳ６４９．６６、トリコ
スポロノイデス・エドセファリス（Trichosporonoides
oedocephalis）ＣＢＳ５６８．８５、トリコスポロノイ
デス・メガチリエンシス（Trichosporonoides megachil
iensis）ＣＢＳ５６７．８５、トリコスポロノイデス・
メガチリエンシス（Trichosporonoides megachiliensi
s）ＡＴＣＣ７６７１８、トリコスポロノイデス・メガ
チリエンシス（Trichosporonoides megachiliensis）SN
-r96（FERM BP-1431）、トリコスポロノイデス・メガチ
リエンシス（Trichosporonoides megachiliensis）ＭＣ
Ｉ３３６９（FERM BP-6172）、トリコスポロノイデス・
マジダ（Trichosporonoides madida）ＣＢＳ２４０．７
９、トリコスポロノイデス・ニグレッセンス（Trichosp
oronoides nigrescens）ＣＢＳ２６８．８１、トリコス
ポロノイデス・ニグレッセンス（Trichosporonoides ni
grescens）ＣＢＳ２６９．８１、トリコスポロノイデス
・スパスラータ（Trichosporonoides spathulata）ＣＢ
Ｓ２４１．７９、トリコスポロノイデス・スパスラータ
（Trichosporonoidesspathulata）ＣＢＳ２４１．８
１、トリコスポロノイデス・スパスラータ（Trichospor
onoides spathulata）ＣＢＳ２４２．７９Ａ、トリコス
ポロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spat
hulata）ＣＢＳ２４２．７９Ｂ等を挙げることができ
る。
【００１５】これらの菌株は、いずれも国際寄託機関で
あるオランダ国の Centraal Bureauvoor Schimmelcultu
res（ＣＢＳ）、アメリカ合衆国の American Type Cult
ureCollection（ＡＴＣＣ）、日本国の工業技術院生命
工学工業技術研究所に国際寄託されている菌株であり、
当業者に容易に入手可能なものである。
あるオランダ国の Centraal Bureauvoor Schimmelcultu
res（ＣＢＳ）、アメリカ合衆国の American Type Cult
ureCollection（ＡＴＣＣ）、日本国の工業技術院生命
工学工業技術研究所に国際寄託されている菌株であり、
当業者に容易に入手可能なものである。
【００１６】また、本発明には、これらの微生物から、
自然変異や紫外線照射や変異剤による変異処理により得
られる変異株も同様に使用することができる。変異処理
は、紫外線照射、Ｘ線照射、放射線照射、Ｎ−メチル−
Ｎ'−ニトロ−ニトロソグアニジン（ＮＴＧ）等の変異
誘起剤処理、遺伝子組み替え、細胞融合等の人為的変異
処理等のそれ自体既知の通常用いられる方法を用いて行
えばよい。
自然変異や紫外線照射や変異剤による変異処理により得
られる変異株も同様に使用することができる。変異処理
は、紫外線照射、Ｘ線照射、放射線照射、Ｎ−メチル−
Ｎ'−ニトロ−ニトロソグアニジン（ＮＴＧ）等の変異
誘起剤処理、遺伝子組み替え、細胞融合等の人為的変異
処理等のそれ自体既知の通常用いられる方法を用いて行
えばよい。
【００１７】本発明に好ましく用いられる上記菌株のう
ちでも更に好ましい菌株として、モニリエラ・ポリニス
ＭＣＩ３３７１株、及びトリコスポロノイデス・メガチ
リエンシスＭＣＩ３３６９株等を挙げることができる。
ちでも更に好ましい菌株として、モニリエラ・ポリニス
ＭＣＩ３３７１株、及びトリコスポロノイデス・メガチ
リエンシスＭＣＩ３３６９株等を挙げることができる。
【００１８】上記菌株の中で、ＭＣＩ３３６９株は、セ
ントラル ビューロー フォー シュメルカルチャーズ
（Centraal Bureau voor Schimmelcultures）にトリコ
スポロノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoide
s megachiliensis）ＣＢＳ５６７．８５として寄託され
ている菌株を、グルコース３０％、酵母エキス１．５％
の培地にて３０℃で２日間培養し、菌を集め生理食塩水
にて２度洗浄し、ついでＮＴＧ（Ｎ−メチル−Ｎ’−ニ
トロ−Ｎ−ニトロソグアニジン）５００〜１０００μｇ
／ｍｌを含む生理食塩水にて３０℃にて６０分間変異処
理を行い、その後菌体を集め、培地に懸濁し、３０℃に
て浸透して変異の安定化を行い、この菌体を同一組成上
の寒天培地に広げコロニーを形成させ、その中から泡の
出ないコロニーを選択することにより得た変異株であ
る。
ントラル ビューロー フォー シュメルカルチャーズ
（Centraal Bureau voor Schimmelcultures）にトリコ
スポロノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoide
s megachiliensis）ＣＢＳ５６７．８５として寄託され
ている菌株を、グルコース３０％、酵母エキス１．５％
の培地にて３０℃で２日間培養し、菌を集め生理食塩水
にて２度洗浄し、ついでＮＴＧ（Ｎ−メチル−Ｎ’−ニ
トロ−Ｎ−ニトロソグアニジン）５００〜１０００μｇ
／ｍｌを含む生理食塩水にて３０℃にて６０分間変異処
理を行い、その後菌体を集め、培地に懸濁し、３０℃に
て浸透して変異の安定化を行い、この菌体を同一組成上
の寒天培地に広げコロニーを形成させ、その中から泡の
出ないコロニーを選択することにより得た変異株であ
る。
【００１９】また、ＭＣＩ３３７１株は、セントラル
ビューロー フォー シュメルカルチャーズ（Centraal
Bureau voor Schimmelcultures）にモニリエラ・ポリ
ニス（Moniliella polinis）ＣＢＳ４６１．６７として
寄託されている菌株を、上記と同様な変異処理して得ら
れた変異株である。
ビューロー フォー シュメルカルチャーズ（Centraal
Bureau voor Schimmelcultures）にモニリエラ・ポリ
ニス（Moniliella polinis）ＣＢＳ４６１．６７として
寄託されている菌株を、上記と同様な変異処理して得ら
れた変異株である。
【００２０】ＭＣＩ３３６９株およびＭＣＩ３３７１株
はそれぞれ工業技術院生命工学工業技術研究所にＦＥＲ
Ｍ ＢＰ−６１７２およびＦＥＲＭ ＢＰ−６１７３と
して寄託されている。ＭＣＩ３３６９株およびＭＣＩ３
３７１株の菌学的性状は以下の通りである。
はそれぞれ工業技術院生命工学工業技術研究所にＦＥＲ
Ｍ ＢＰ−６１７２およびＦＥＲＭ ＢＰ−６１７３と
して寄託されている。ＭＣＩ３３６９株およびＭＣＩ３
３７１株の菌学的性状は以下の通りである。
【００２１】〔ＭＣＩ３３６９株〕ＭＣＩ３３６９株は
ＰＤＡ（potato dextrose agar）上、２４℃培養ではじ
め白色、後にオリーブがかった灰色、２週間以上の古い
培養ではオリーブ褐色に変色する。菌の生育は速く、酵
母様の出芽により増殖する。酵母様の細胞は、はじめ無
色、後にはオリーブがかった褐色を呈する。栄養菌糸は
よく発達し、隔壁を有し分枝する、幅２〜３．８μｍ、
はじめ無色、後に若干厚膜化し褐色に変色する。気中菌
糸の発達は旺盛で、気中菌糸の側面より出芽型分生子を
形成する。栄養菌糸、気中菌糸は断片状に切れて分節型
の分生子となる。分節型分生子は円筒形〜樽形、３．６
〜２５μｍ×２．２〜４．３μｍ、はじめ無色、後に淡
褐色になる。出芽型分生子は単一または３〜４個の連鎖
となる。分生子は細長い楕円形、大きさは３．４〜７．
５μｍ×１．９〜４．１μｍ（平均６．５±１．２μｍ
×３．８±０．６μｍ）、はじめ無色、後にオリーブが
かった褐色を呈する。
ＰＤＡ（potato dextrose agar）上、２４℃培養ではじ
め白色、後にオリーブがかった灰色、２週間以上の古い
培養ではオリーブ褐色に変色する。菌の生育は速く、酵
母様の出芽により増殖する。酵母様の細胞は、はじめ無
色、後にはオリーブがかった褐色を呈する。栄養菌糸は
よく発達し、隔壁を有し分枝する、幅２〜３．８μｍ、
はじめ無色、後に若干厚膜化し褐色に変色する。気中菌
糸の発達は旺盛で、気中菌糸の側面より出芽型分生子を
形成する。栄養菌糸、気中菌糸は断片状に切れて分節型
の分生子となる。分節型分生子は円筒形〜樽形、３．６
〜２５μｍ×２．２〜４．３μｍ、はじめ無色、後に淡
褐色になる。出芽型分生子は単一または３〜４個の連鎖
となる。分生子は細長い楕円形、大きさは３．４〜７．
５μｍ×１．９〜４．１μｍ（平均６．５±１．２μｍ
×３．８±０．６μｍ）、はじめ無色、後にオリーブが
かった褐色を呈する。
【００２２】本菌株（ＭＣＩ３３６９）の形態学的性状
は親株であるトリコスポロノイデス・メガチリエンシス
（Trichosporonoides megachiliensis) ＣＢＳ５６７．
８５の基準株の特徴によく一致した。従って、本菌株は
トリコスポロノイデス・メガチリエンシス（Trichospor
onoides megachiliensis) と同定した。
は親株であるトリコスポロノイデス・メガチリエンシス
（Trichosporonoides megachiliensis) ＣＢＳ５６７．
８５の基準株の特徴によく一致した。従って、本菌株は
トリコスポロノイデス・メガチリエンシス（Trichospor
onoides megachiliensis) と同定した。
【００２３】〔ＭＣＩ３３７１株〕ＭＣＩ３３７１株は
ＰＤＡ上、２４℃培養で始め白色〜黄味白色、培地一週
間後ににぶ黄色、さらに古い培養では黒褐色に変色す
る。菌の生育は速く、酵母様の出芽により増殖する。出
芽細胞は、はじめ薄膜でオリーブがかった褐色を呈し、
後に厚膜化して着色する。酵母様の出芽と同時に栄養菌
糸が伸長する。栄養菌糸は隔壁を有し、分枝する。幅２
〜４．５μｍ、はじめ無色、後に褐色になる。菌糸は断
片状に切れて分節型の分生子となる、または菌糸の側面
あるいは先端部より出芽型の分生子を形成する。分節型
分生子は円筒形〜樽形、６〜３５μｍ×２．５〜５．０
μｍ、はじめ無色、後に褐色になる。出芽型分生子は単
一または２〜３個の連鎖となって形成される、卵形〜楕
円形、あるいは亜球形、大きさは４．７〜９．４μｍ×
３．１〜５．６μｍ（平均６．８±１．３μｍ×４．５
±０．６μｍ）、はじめ無色、後にオリーブがかった褐
色となる。
ＰＤＡ上、２４℃培養で始め白色〜黄味白色、培地一週
間後ににぶ黄色、さらに古い培養では黒褐色に変色す
る。菌の生育は速く、酵母様の出芽により増殖する。出
芽細胞は、はじめ薄膜でオリーブがかった褐色を呈し、
後に厚膜化して着色する。酵母様の出芽と同時に栄養菌
糸が伸長する。栄養菌糸は隔壁を有し、分枝する。幅２
〜４．５μｍ、はじめ無色、後に褐色になる。菌糸は断
片状に切れて分節型の分生子となる、または菌糸の側面
あるいは先端部より出芽型の分生子を形成する。分節型
分生子は円筒形〜樽形、６〜３５μｍ×２．５〜５．０
μｍ、はじめ無色、後に褐色になる。出芽型分生子は単
一または２〜３個の連鎖となって形成される、卵形〜楕
円形、あるいは亜球形、大きさは４．７〜９．４μｍ×
３．１〜５．６μｍ（平均６．８±１．３μｍ×４．５
±０．６μｍ）、はじめ無色、後にオリーブがかった褐
色となる。
【００２４】本菌株（ＭＣＩ３３７１）は分節型分生子
と出芽型分生子の二形性を有し、出芽型分生子は求頂的
に形成され同調的に形成されない特徴を有する。これら
の特徴に基づいてDe Hoog & Hermanides-Nijhof (1977)
のモノグラフに従って属の検索を行ったところ、本菌株
はモニリエラ（Moniliella) 属に帰属することが判明し
た。De Hoog (1979)の“The Black yeasts, II：Monili
ella and Allied Genera”Studies in Mycology No.19,
1〜90によれば、モニリエラ（Moniliella）属にはモニ
リエラ・スアベオレンス・バール・スアベオレンス（Mo
niliella suaveolens var. suaveolens)、モニリエラ・
スアベオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveol
ens var. nigra）、モニリエラ・アセトアブテンス（Mo
niliellaacetoabutens）およびモニリエラ・ポリニス(M
oniliella pollinis）の３種２変種が知られている。こ
れらの種や変種は主として出芽型分生子あるいは分節型
分生子の形態学的特徴によって区別されている。本菌株
の形態学的性状を精査した結果、本菌はモニリエラ・ポ
リニス(Moniliella pollinis）の記載によく合致した。
従って本菌株はモニリエラ・ポリニス(Moniliella poll
inis）と同定した。
と出芽型分生子の二形性を有し、出芽型分生子は求頂的
に形成され同調的に形成されない特徴を有する。これら
の特徴に基づいてDe Hoog & Hermanides-Nijhof (1977)
のモノグラフに従って属の検索を行ったところ、本菌株
はモニリエラ（Moniliella) 属に帰属することが判明し
た。De Hoog (1979)の“The Black yeasts, II：Monili
ella and Allied Genera”Studies in Mycology No.19,
1〜90によれば、モニリエラ（Moniliella）属にはモニ
リエラ・スアベオレンス・バール・スアベオレンス（Mo
niliella suaveolens var. suaveolens)、モニリエラ・
スアベオレンス・バール・ニグラ（Moniliella suaveol
ens var. nigra）、モニリエラ・アセトアブテンス（Mo
niliellaacetoabutens）およびモニリエラ・ポリニス(M
oniliella pollinis）の３種２変種が知られている。こ
れらの種や変種は主として出芽型分生子あるいは分節型
分生子の形態学的特徴によって区別されている。本菌株
の形態学的性状を精査した結果、本菌はモニリエラ・ポ
リニス(Moniliella pollinis）の記載によく合致した。
従って本菌株はモニリエラ・ポリニス(Moniliella poll
inis）と同定した。
【００２５】本発明において、発酵性糖質からエリスリ
トールを産生する能力を有する微生物を培養するには、
カルシウムを含む培地を用いる。カルシウム以外の成分
については、使用する微生物に応じて適宜選択される
が、通常用いられる主な成分を以下に示す。
トールを産生する能力を有する微生物を培養するには、
カルシウムを含む培地を用いる。カルシウム以外の成分
については、使用する微生物に応じて適宜選択される
が、通常用いられる主な成分を以下に示す。
【００２６】主炭素源としては、グルコース、フルクト
ース、グリセロール等の発酵性糖質が利用される。これ
らは単独でも組み合わせでも使用できる。使用濃度は特
に限定されないが、エリスリトールの生産を阻害しない
範囲で使用できる。好ましい濃度は２０％〜６０％（Ｗ
/Ｖ）の範囲である。
ース、グリセロール等の発酵性糖質が利用される。これ
らは単独でも組み合わせでも使用できる。使用濃度は特
に限定されないが、エリスリトールの生産を阻害しない
範囲で使用できる。好ましい濃度は２０％〜６０％（Ｗ
/Ｖ）の範囲である。
【００２７】培地の窒素源としてはアンモニア塩、尿
素、コーンステープリカー等の各種の有機、無機の窒素
化合物が用いられる。無機塩としては各種リン酸塩、硫
酸塩、マグネシウム、カリウム、マンガン、亜鉛等の金
属塩が用いられる。また、ビタミン、ヌクレオチド、ア
ミノ酸等の微生物の生育を促進する因子を必要に応じて
添加することができる。また、培養中の発泡を押さえる
ために市販の消泡剤を添加することもできる。
素、コーンステープリカー等の各種の有機、無機の窒素
化合物が用いられる。無機塩としては各種リン酸塩、硫
酸塩、マグネシウム、カリウム、マンガン、亜鉛等の金
属塩が用いられる。また、ビタミン、ヌクレオチド、ア
ミノ酸等の微生物の生育を促進する因子を必要に応じて
添加することができる。また、培養中の発泡を押さえる
ために市販の消泡剤を添加することもできる。
【００２８】培地に添加するカルシウム源は、カルシウ
ム化合物であれば特に制限されるものではなく、例え
ば、塩化カルシウム（ＣａＣｌ2）、水酸化カルシウム
（Ｃａ（ＯＨ）2）、硫酸カルシウム（ＣａＳＯ4）等が
挙げられる。
ム化合物であれば特に制限されるものではなく、例え
ば、塩化カルシウム（ＣａＣｌ2）、水酸化カルシウム
（Ｃａ（ＯＨ）2）、硫酸カルシウム（ＣａＳＯ4）等が
挙げられる。
【００２９】また、カルシウム源としては、培地調製時
に使用する水に含まれるカルシウムであってもよく、具
体的にはカルシウムを含有する上水を培地調製に用いて
もよい。
に使用する水に含まれるカルシウムであってもよく、具
体的にはカルシウムを含有する上水を培地調製に用いて
もよい。
【００３０】本発明においては、カルシウム源の種類に
関わらず、本発明に用いる微生物を培養する際に培地に
一定濃度以上のカルシウムが含まれていればよい。カル
シウムの濃度は、５ｐｐｍ以上が好ましく、３０ｐｐｍ
以上がより好ましい。カルシウム濃度の上限は特に制限
されないが、通常、一定濃度以上になるとエリスリトー
ルの産生量が頭打ちとなるので、それ以上加える必要は
ない。エリスリトールの産生量が頭打ちとなるカルシウ
ム濃度、あるいは好ましいカルシウムの濃度は、カルシ
ウム濃度が異なる培地を複数用意し、それらの培地でエ
リスリトール産生能を有する微生物を培養し、生成する
エリスリトールの量を測定することによって決定するこ
とができる。
関わらず、本発明に用いる微生物を培養する際に培地に
一定濃度以上のカルシウムが含まれていればよい。カル
シウムの濃度は、５ｐｐｍ以上が好ましく、３０ｐｐｍ
以上がより好ましい。カルシウム濃度の上限は特に制限
されないが、通常、一定濃度以上になるとエリスリトー
ルの産生量が頭打ちとなるので、それ以上加える必要は
ない。エリスリトールの産生量が頭打ちとなるカルシウ
ム濃度、あるいは好ましいカルシウムの濃度は、カルシ
ウム濃度が異なる培地を複数用意し、それらの培地でエ
リスリトール産生能を有する微生物を培養し、生成する
エリスリトールの量を測定することによって決定するこ
とができる。
【００３１】培養に際しては、斜面培養から直接菌体を
培地に接種しても構わないが、液体培地にて予め１日〜
４日の培養で得られる前培養物を培地に接種するのが望
ましい。
培地に接種しても構わないが、液体培地にて予め１日〜
４日の培養で得られる前培養物を培地に接種するのが望
ましい。
【００３２】培養条件は、用いる微生物に応じて適宜設
定することができるが、モニリエラ属又はトリコスポロ
ノイデス属に属する微生物を用いる場合には、例えば以
下に示す条件が挙げられる。
定することができるが、モニリエラ属又はトリコスポロ
ノイデス属に属する微生物を用いる場合には、例えば以
下に示す条件が挙げられる。
【００３３】培地のｐＨは、培養の初めは３〜７、好ま
しくは３〜４.５に調整する。ｐＨを制御可能な培養に
おいては、培養中に、酸またはアルカリにて３〜４.５
に調整することが望ましい。培養温度は２５℃〜３７
℃、好ましくは２７℃〜３７℃が適当である。また培養
は、通気攪拌、振とう等の好気的条件で行うのが望まし
い。
しくは３〜４.５に調整する。ｐＨを制御可能な培養に
おいては、培養中に、酸またはアルカリにて３〜４.５
に調整することが望ましい。培養温度は２５℃〜３７
℃、好ましくは２７℃〜３７℃が適当である。また培養
は、通気攪拌、振とう等の好気的条件で行うのが望まし
い。
【００３４】培養時間は、主炭素源が消費されるまで行
うのが望ましく、通常は３日〜８日間行われる。
うのが望ましく、通常は３日〜８日間行われる。
【００３５】培養液中のエリスリトール生成量は、ガス
クロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー等の
方法で測定できる。
クロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー等の
方法で測定できる。
【００３６】上記の様にして培養液中に蓄積したエリス
リトールは、常法に従って培養物より分離・精製され
る。具体的には、遠心分離、濾過等により固形物を除去
した後、活性炭、イオン交換樹脂により脱色・脱塩し、
その溶液から結晶化することによりエリスリトールを分
離・精製することができる。
リトールは、常法に従って培養物より分離・精製され
る。具体的には、遠心分離、濾過等により固形物を除去
した後、活性炭、イオン交換樹脂により脱色・脱塩し、
その溶液から結晶化することによりエリスリトールを分
離・精製することができる。
【００３７】
【実施例】以下に、実施例により本発明を更に具体的に
説明するが、本発明は、以下に記載する方法に限定され
るものではない。
説明するが、本発明は、以下に記載する方法に限定され
るものではない。
【００３８】なお、以下の実施例及び比較例に用いた培
地の組成は、下記表１又は表２のとおりである。
地の組成は、下記表１又は表２のとおりである。
【００３９】
【表１】
【００４０】
【表２】
【００４１】
【実施例１】グルコース３０％（Ｗ／Ｖ）、酵母エキス
（アサヒビール社製）１％を含む液体培地２０ｍｌを綿
栓した２００ｍｌの三角フラスコに入れ、１２０℃、２
０分間滅菌したものに、常法により斜面培養したモニリ
エラ・ポリニス(Moniliellapollinis）ＭＣＩ３３７１
株（FERM BP-6173）を１白金耳植菌し、３５℃で３日間
振とう培養した。
（アサヒビール社製）１％を含む液体培地２０ｍｌを綿
栓した２００ｍｌの三角フラスコに入れ、１２０℃、２
０分間滅菌したものに、常法により斜面培養したモニリ
エラ・ポリニス(Moniliellapollinis）ＭＣＩ３３７１
株（FERM BP-6173）を１白金耳植菌し、３５℃で３日間
振とう培養した。
【００４２】上記表１に示す組成の培地２０ｍｌを入れ
た２００ｍｌのバッフル付きフラスコに塩化カルシウム
２水塩（ＣａＣｌ2・２Ｈ2Ｏ））をカルシウム濃度とし
て５ｐｐｍ、１５ｐｐｍ、３０ｐｐｍ、６０ｐｐｍ、１
２０ｐｐｍになるように添加して上記の種培養液を０.
５ｍｌ接種し、温度３５℃、回転数２４０ｒｐｍにて４
日間振とう培養した。比較実験としてカルシウムを添加
しない培地にても同様に培養した。培養液中のエリスリ
トール（以下これを「ＥＲＴ」と略記することがある）
とグリセリン（以下これを「ＧＬＹ」と略記することが
ある）の濃度を高速液体クロマトグラフィーにて測定し
た。その結果を表３に示す。
た２００ｍｌのバッフル付きフラスコに塩化カルシウム
２水塩（ＣａＣｌ2・２Ｈ2Ｏ））をカルシウム濃度とし
て５ｐｐｍ、１５ｐｐｍ、３０ｐｐｍ、６０ｐｐｍ、１
２０ｐｐｍになるように添加して上記の種培養液を０.
５ｍｌ接種し、温度３５℃、回転数２４０ｒｐｍにて４
日間振とう培養した。比較実験としてカルシウムを添加
しない培地にても同様に培養した。培養液中のエリスリ
トール（以下これを「ＥＲＴ」と略記することがある）
とグリセリン（以下これを「ＧＬＹ」と略記することが
ある）の濃度を高速液体クロマトグラフィーにて測定し
た。その結果を表３に示す。
【００４３】
【表３】 表３ ───────────────────────────────── カルシウム濃度（ｐｐｍ） ＥＲＴ（ｇ/ｌ） ＧＬＹ（ｇ/ｌ） ───────────────────────────────── ０ １２３.７ ２４.５ ５ １３７.０ １６.３ １５ １３２.５ １２.１ ３０ １３５.５ １１.４ ６０ １４７.０ ７.７ １２０ １３７.５ １４.０ ─────────────────────────────────
【００４４】
【実施例２】塩化カルシウム２水塩の代わりに水酸化カ
ルシウム（Ｃａ（ＯＨ）2）を同様の濃度にて添加した
以外は、実施例１と同様にして培養し、培養液中のＥＲ
ＴとＧＬＹの濃度を測定した。その結果を表４に示す。
ルシウム（Ｃａ（ＯＨ）2）を同様の濃度にて添加した
以外は、実施例１と同様にして培養し、培養液中のＥＲ
ＴとＧＬＹの濃度を測定した。その結果を表４に示す。
【００４５】
【表４】 表４ ───────────────────────────────── カルシウム濃度（ｐｐｍ） ＥＲＴ（ｇ/ｌ） ＧＬＹ（ｇ/ｌ） ───────────────────────────────── ０ １２３.７ ２４.５ ５ １３６.０ １４.２ １５ １３６.０ １７.７ ３０ １２８.０ １１.０ ６０ １３１.５ １０.５ １２０ １４３.０ ８.７ ─────────────────────────────────
【００４６】
【実施例３】グルコース３０％（Ｗ/Ｖ）、酵母エキス
（アサヒビール社製）１％を含む液体培地２０ｍｌを綿
栓した２００ｍｌの三角フラスコに入れ、１２０℃、２
０分間滅菌したものに、常法により斜面培養したトリコ
スポロノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoide
s megachiliensis)ＭＣＩ３３６９株（FERM BP-6172）
を１白金耳植菌し、３５℃で３日間振とう培養した。
（アサヒビール社製）１％を含む液体培地２０ｍｌを綿
栓した２００ｍｌの三角フラスコに入れ、１２０℃、２
０分間滅菌したものに、常法により斜面培養したトリコ
スポロノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoide
s megachiliensis)ＭＣＩ３３６９株（FERM BP-6172）
を１白金耳植菌し、３５℃で３日間振とう培養した。
【００４７】上記表１に示す組成の培地２０ｍｌを入れ
た２００ｍｌのバッフル付きフラスコに塩化カルシウム
２水塩（ＣａＣｌ2・２Ｈ2Ｏ）をカルシウム濃度として
５ｐｐｍ、１５ｐｐｍ、３０ｐｐｍ、６０ｐｐｍ、１２
０ｐｐｍになるように添加して上記の培養液を０.５ｍ
ｌ接種し、温度３５℃、回転数２４０ｒｐｍにて４日間
振とう培養した。比較実験としてカルシウムを添加しな
い培地にても同様の条件にて培養を行った。培養液中の
ＥＲＴとＧＬＹの濃度を高速液体クロマトグラフィーに
て測定した。その結果を表５に示す。
た２００ｍｌのバッフル付きフラスコに塩化カルシウム
２水塩（ＣａＣｌ2・２Ｈ2Ｏ）をカルシウム濃度として
５ｐｐｍ、１５ｐｐｍ、３０ｐｐｍ、６０ｐｐｍ、１２
０ｐｐｍになるように添加して上記の培養液を０.５ｍ
ｌ接種し、温度３５℃、回転数２４０ｒｐｍにて４日間
振とう培養した。比較実験としてカルシウムを添加しな
い培地にても同様の条件にて培養を行った。培養液中の
ＥＲＴとＧＬＹの濃度を高速液体クロマトグラフィーに
て測定した。その結果を表５に示す。
【００４８】
【表５】 表５ ───────────────────────────────── カルシウム濃度（ｐｐｍ） ＥＲＴ（ｇ/ｌ） ＧＬＹ（ｇ/ｌ） ───────────────────────────────── ０ ９０.９ ５８.４ ５ １０４.０ ３３.９ １５ １０９.５ ２８.５ ３０ １１５.０ １１.５ ６０ １０７.５ ２２.１ １２０ １１１.５ １０.９ ─────────────────────────────────
【００４９】
【実施例４】塩化カルシウム２水塩の代わりに水酸化カ
ルシウム（Ｃａ（ＯＨ）2）を同様の濃度にて添加した
以外は、実施例３と同様にして培養し、培養液中のＥＲ
ＴとＧＬＹの濃度を測定した。その結果を表６に示す。
ルシウム（Ｃａ（ＯＨ）2）を同様の濃度にて添加した
以外は、実施例３と同様にして培養し、培養液中のＥＲ
ＴとＧＬＹの濃度を測定した。その結果を表６に示す。
【００５０】
【表６】 表６ ───────────────────────────────── カルシウム濃度（ｐｐｍ） ＥＲＴ（ｇ/ｌ） ＧＬＹ（ｇ/ｌ） ───────────────────────────────── ０ ９０.９ ５８.４ ５ １０６.０ ２９.６ １５ １１１.０ ２６.８ ３０ １１３.５ １１.１ ６０ １１６.０ ４.８ １２０ １０６.０ １１.２ ─────────────────────────────────
【００５１】
【実施例５】グルコース２０％（Ｗ/Ｖ）、酵母エキス
（アサヒビール社製）１％を含む液体培地２０ｍｌを綿
栓した２００ｍｌの三角フラスコに入れ、１２０℃、２
０分間滅菌したものに、常法により斜面培養したトリコ
スポロノイデス・エドセファリス（Trichosporonoides
oedocephalis）ＣＢＳ６４９.６６株を１白金耳植菌
し、３０℃で３日間振とう培養した。表１に示す組成の
培地２０ｍｌを入れた２００ｍｌのフラスコに塩化カル
シウム２水塩（ＣａＣｌ2・２Ｈ2Ｏ）をカルシウム濃度
として１５ｐｐｍ、３０ｐｐｍになるように添加して上
記の種培養液を０.５ｍｌ接種し、温度３０℃、回転数
１６０ｒｐｍにて４日間振とう培養した。比較実験とし
てカルシウムを添加しないものも同様の条件にて培養し
た。培養液中のＥＲＴとＧＬＹの濃度を高速液体クロマ
トグラフィーにて測定した。その結果を表７に示す。
（アサヒビール社製）１％を含む液体培地２０ｍｌを綿
栓した２００ｍｌの三角フラスコに入れ、１２０℃、２
０分間滅菌したものに、常法により斜面培養したトリコ
スポロノイデス・エドセファリス（Trichosporonoides
oedocephalis）ＣＢＳ６４９.６６株を１白金耳植菌
し、３０℃で３日間振とう培養した。表１に示す組成の
培地２０ｍｌを入れた２００ｍｌのフラスコに塩化カル
シウム２水塩（ＣａＣｌ2・２Ｈ2Ｏ）をカルシウム濃度
として１５ｐｐｍ、３０ｐｐｍになるように添加して上
記の種培養液を０.５ｍｌ接種し、温度３０℃、回転数
１６０ｒｐｍにて４日間振とう培養した。比較実験とし
てカルシウムを添加しないものも同様の条件にて培養し
た。培養液中のＥＲＴとＧＬＹの濃度を高速液体クロマ
トグラフィーにて測定した。その結果を表７に示す。
【００５２】
【表７】 表７ ───────────────────────────────── カルシウム濃度（ｐｐｍ） ＥＲＴ（ｇ/ｌ） ＧＬＹ（ｇ/ｌ） ───────────────────────────────── ０ １７.１ ５.９ １５ ２２.０ １.２ ３０ ２２.２ ０ ─────────────────────────────────
【００５３】
【実施例６】菌株としてＣＢＳ６４９.６６の代わりに
トリコスポロノイデス・メガチリエンシス（Trichospor
onoides megachiliensis)ＣＢＳ５６７.８５を用いた以
外は実施例５と同様の条件にて培養し、培養液中のＥＲ
ＴとＧＬＹの濃度を測定した。その結果を表８に示す。
トリコスポロノイデス・メガチリエンシス（Trichospor
onoides megachiliensis)ＣＢＳ５６７.８５を用いた以
外は実施例５と同様の条件にて培養し、培養液中のＥＲ
ＴとＧＬＹの濃度を測定した。その結果を表８に示す。
【００５４】
【表８】 表８ ───────────────────────────────── カルシウム濃度（ｐｐｍ） ＥＲＴ（ｇ/ｌ） ＧＬＹ（ｇ/ｌ） ───────────────────────────────── ０ ２１.８ ４.５ １５ ２５.２ ０ ３０ ２３.９ ０ ─────────────────────────────────
【００５５】
【実施例７】菌株としてＣＢＳ６４９.６６の代わりに
トリコスポロノイデス・ニグレッセンス（Trichosporon
oides nigrescens）ＣＢＳ２６８.８１を用いた以外は
実施例５と同様の条件にて培養し、培養液中のＥＲＴと
ＧＬＹの濃度を測定した。その結果を表９に示す。
トリコスポロノイデス・ニグレッセンス（Trichosporon
oides nigrescens）ＣＢＳ２６８.８１を用いた以外は
実施例５と同様の条件にて培養し、培養液中のＥＲＴと
ＧＬＹの濃度を測定した。その結果を表９に示す。
【００５６】
【表９】 表９ ───────────────────────────────── カルシウム濃度（ｐｐｍ） ＥＲＴ（ｇ/ｌ） ＧＬＹ（ｇ/ｌ） ───────────────────────────────── ０ ４４.２ １８.３ １５ ５３.８ １.７ ３０ ５２.９ ２.９ ─────────────────────────────────
【００５７】
【実施例８】グルコース３０％（Ｗ/Ｖ）、酵母エキス
（アサヒビール社製）１％を含む液体培地２０ｍｌを綿
栓した２００ｍｌの三角フラスコに入れ、１２０℃、２
０分間滅菌したものに、常法により斜面培養したトリコ
スポロノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoide
s megachiliensis)ＭＣＩ３３６９株（FERM BP-6172）
を１白金耳植菌し、３５℃にて３日間振とう培養した。
表１に示す組成の培地を脱イオン水と上水（カルシウム
を１８ｐｐｍ含む）にてそれぞれ調製し、２０ｍｌづつ
２００ｍｌのバッフル付きフラスコに分注して、上記の
種培養液を０.５ｍｌ接種し、温度３５℃、回転数２４
０ｒｐｍにて４日間振とう培養した。培養液中のＥＲＴ
とＧＬＹの濃度を高速液体クロマトグラフィーにて測定
した。その結果を表１０に示す。
（アサヒビール社製）１％を含む液体培地２０ｍｌを綿
栓した２００ｍｌの三角フラスコに入れ、１２０℃、２
０分間滅菌したものに、常法により斜面培養したトリコ
スポロノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoide
s megachiliensis)ＭＣＩ３３６９株（FERM BP-6172）
を１白金耳植菌し、３５℃にて３日間振とう培養した。
表１に示す組成の培地を脱イオン水と上水（カルシウム
を１８ｐｐｍ含む）にてそれぞれ調製し、２０ｍｌづつ
２００ｍｌのバッフル付きフラスコに分注して、上記の
種培養液を０.５ｍｌ接種し、温度３５℃、回転数２４
０ｒｐｍにて４日間振とう培養した。培養液中のＥＲＴ
とＧＬＹの濃度を高速液体クロマトグラフィーにて測定
した。その結果を表１０に示す。
【００５８】
【表１０】 表１０ ───────────────────────────────── 培 地 ＥＲＴ（ｇ/ｌ） ＧＬＹ（ｇ/ｌ） ───────────────────────────────── 脱イオン水調製培地 ５８.５ ５７.５ 上水調製培地 ７１.８ ３６.２ ─────────────────────────────────
【００５９】
【実施例９】グルコース３０％（Ｗ/Ｖ）、酵母エキス
（アサヒビール社製）１％を含む液体培地２０ｍｌを綿
栓した２００ｍｌの三角フラスコに入れ、１２０℃、２
０分間滅菌したものに、常法により斜面培養したモニリ
エラ・ポリニス(Moniliellapollinis）ＭＣＩ３３７１
株（FERM BP-6173）を１白金耳植菌し、３５℃で３日間
振とう培養した。ついで表２に示す組成の培地にカルシ
ウム濃度が３０ｐｐｍになるように塩化カルシウム２水
塩（ＣａＣｌ2・２Ｈ2Ｏ）を添加し、その６００ｍｌを
１リットル容の発酵槽に入れた。上記培養物を１０ｍｌ
発酵槽に植菌し、温度３５℃、通気量０.５ｖｖｍ、回
転数８００ｒｐｍの条件で４日間培養した。培養中はｐ
Ｈを３.８〜４.０に５Ｎの水酸化ナトリウム（ＮａＯ
Ｈ）にて制御した。培養液中のグルコース（以下これを
「ＧＬＵ」と略記することがある）、ＥＲＴ、ＧＬＹの
濃度は高速液体クロマトグラフィーにて測定した。その
結果を表１１に示す。
（アサヒビール社製）１％を含む液体培地２０ｍｌを綿
栓した２００ｍｌの三角フラスコに入れ、１２０℃、２
０分間滅菌したものに、常法により斜面培養したモニリ
エラ・ポリニス(Moniliellapollinis）ＭＣＩ３３７１
株（FERM BP-6173）を１白金耳植菌し、３５℃で３日間
振とう培養した。ついで表２に示す組成の培地にカルシ
ウム濃度が３０ｐｐｍになるように塩化カルシウム２水
塩（ＣａＣｌ2・２Ｈ2Ｏ）を添加し、その６００ｍｌを
１リットル容の発酵槽に入れた。上記培養物を１０ｍｌ
発酵槽に植菌し、温度３５℃、通気量０.５ｖｖｍ、回
転数８００ｒｐｍの条件で４日間培養した。培養中はｐ
Ｈを３.８〜４.０に５Ｎの水酸化ナトリウム（ＮａＯ
Ｈ）にて制御した。培養液中のグルコース（以下これを
「ＧＬＵ」と略記することがある）、ＥＲＴ、ＧＬＹの
濃度は高速液体クロマトグラフィーにて測定した。その
結果を表１１に示す。
【００６０】
【表１１】 表１１ ─────────────────────────────────── 培養時間（Ｈｒ）ＧＬＵ（ｇ/ｌ） ＥＲＴ（ｇ/ｌ） ＧＬＹ（ｇ/ｌ） ─────────────────────────────────── ９３ ０ １８０.８ １８.６ ───────────────────────────────────
【００６１】
【比較例１】培地中にカルシウムを添加しない以外は実
施例９と同様の条件にて培養し、培養液中のＧＬＵ、Ｅ
ＲＴおよびＧＬＹの濃度を測定した。その結果を表１２
に示す。
施例９と同様の条件にて培養し、培養液中のＧＬＵ、Ｅ
ＲＴおよびＧＬＹの濃度を測定した。その結果を表１２
に示す。
【００６２】
【表１２】 表１２ ─────────────────────────────────── 培養時間（Ｈｒ）ＧＬＵ（ｇ/ｌ） ＥＲＴ（ｇ/ｌ） ＧＬＹ（ｇ/ｌ） ─────────────────────────────────── ９３ ３５.３ １３２.７ ６１.７ ───────────────────────────────────
【００６３】
【実施例１０】グルコース３０％（Ｗ/Ｖ）、酵母エキ
ス（アサヒビール社製）１％を含む液体培地２０ｍｌを
綿栓した２００ｍｌの三角フラスコに入れ、１２０℃、
２０分間滅菌したものに、常法により斜面培養したトリ
コスポロノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoi
des megachiliensis)ＣＢＳ５６７.８５株を１白金耳植
菌し、３５℃で３日間振とう培養した。ついで表２に示
す組成の培地を上水（カルシウムを１８ｐｐｍ含む）で
調製し、その６００ｍｌを１リットル容の発酵槽に入れ
た。上記培養物を１０ｍｌ発酵槽に植菌し、温度３５
℃、通気量０.５ｖｖｍ、回転数８００ｒｐｍの条件で
４日間培養した。培養中はｐＨを３.８〜４.０に５Ｎの
水酸化ナトリウム（ＮａＯＨ）にて制御した。培養中の
ＧＬＵ、ＥＲＴ、ＧＬＹの濃度は高速液体クロマトグラ
フィーにて測定した。その結果を表１３に示す。
ス（アサヒビール社製）１％を含む液体培地２０ｍｌを
綿栓した２００ｍｌの三角フラスコに入れ、１２０℃、
２０分間滅菌したものに、常法により斜面培養したトリ
コスポロノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoi
des megachiliensis)ＣＢＳ５６７.８５株を１白金耳植
菌し、３５℃で３日間振とう培養した。ついで表２に示
す組成の培地を上水（カルシウムを１８ｐｐｍ含む）で
調製し、その６００ｍｌを１リットル容の発酵槽に入れ
た。上記培養物を１０ｍｌ発酵槽に植菌し、温度３５
℃、通気量０.５ｖｖｍ、回転数８００ｒｐｍの条件で
４日間培養した。培養中はｐＨを３.８〜４.０に５Ｎの
水酸化ナトリウム（ＮａＯＨ）にて制御した。培養中の
ＧＬＵ、ＥＲＴ、ＧＬＹの濃度は高速液体クロマトグラ
フィーにて測定した。その結果を表１３に示す。
【００６４】
【表１３】 表１３ ─────────────────────────────────── 培養時間（Ｈｒ）ＧＬＵ（ｇ/ｌ） ＥＲＴ（ｇ/ｌ） ＧＬＹ（ｇ/ｌ） ─────────────────────────────────── ９２ ０ １５０.５ ６３.４ ───────────────────────────────────
【００６５】
【比較例２】培地の調製に上水の代わりに脱イオン水を
用いた以外は実施例１０と同様の条件にて培養し、培養
液中のＧＬＵ、ＥＲＴおよびＧＬＹの濃度を測定した。
その結果を表１４に示す。
用いた以外は実施例１０と同様の条件にて培養し、培養
液中のＧＬＵ、ＥＲＴおよびＧＬＹの濃度を測定した。
その結果を表１４に示す。
【００６６】
【表１４】 表１４ ─────────────────────────────────── 培養時間（Ｈｒ）ＧＬＵ（ｇ/ｌ） ＥＲＴ（ｇ/ｌ） ＧＬＹ（ｇ/ｌ） ─────────────────────────────────── ９２ １２.７ １３６.０ ７６.８ ───────────────────────────────────
【００６７】
【実施例１１】実施例５において、菌株としてトリコス
ポロノイデス・マジダ（Trichosporonoides madida）Ｃ
ＢＳ２４０．７９を用いた以外は同様の条件にて培養
し、培養液中のＥＲＴとＧＬＹの濃度を測定した。その
結果を表１５に示す。
ポロノイデス・マジダ（Trichosporonoides madida）Ｃ
ＢＳ２４０．７９を用いた以外は同様の条件にて培養
し、培養液中のＥＲＴとＧＬＹの濃度を測定した。その
結果を表１５に示す。
【００６８】
【表１５】 表１５ ───────────────────────────────── カルシウム濃度（ｐｐｍ） ＥＲＴ（ｇ/ｌ） ＧＬＹ（ｇ/ｌ） ───────────────────────────────── ０ １８.３ ４３.２ １５ １１.２ ０ ３０ １２.４ ０ ─────────────────────────────────
【００６９】
【実施例１２】実施例５において、菌株としてモニリエ
ラ・スアベオレンス・バール・ニグラ（Moniliella sua
veolens var. nigra）ＣＢＳ２２３．７９を用い、表１
に示す組成の培地のグルコースを２０％（Ｗ／Ｖ）にし
た以外は同様の条件で培養し、培養液中のＥＲＴとＧＬ
Ｙの濃度を測定した。その結果を表１６に示す。
ラ・スアベオレンス・バール・ニグラ（Moniliella sua
veolens var. nigra）ＣＢＳ２２３．７９を用い、表１
に示す組成の培地のグルコースを２０％（Ｗ／Ｖ）にし
た以外は同様の条件で培養し、培養液中のＥＲＴとＧＬ
Ｙの濃度を測定した。その結果を表１６に示す。
【００７０】
【表１６】 表１６ ───────────────────────────────── カルシウム濃度（ｐｐｍ） ＥＲＴ（ｇ/ｌ） ＧＬＹ（ｇ/ｌ） ───────────────────────────────── ０ ４.２ ５.１ １５ ５.８ ０ ３０ ６.４ ０ ─────────────────────────────────
【００７１】
【実施例１３】実施例５において、菌株としてトリコス
ポロノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoides
megachiliensis）SN-r96（FERM BP-1431）を用い、表１
に示す組成の培地のグルコースを２０％（Ｗ／Ｖ）にし
た以外は同様の条件で培養し、培養液中のＥＲＴとＧＬ
Ｙの濃度を測定した。その結果を表１７に示す。
ポロノイデス・メガチリエンシス（Trichosporonoides
megachiliensis）SN-r96（FERM BP-1431）を用い、表１
に示す組成の培地のグルコースを２０％（Ｗ／Ｖ）にし
た以外は同様の条件で培養し、培養液中のＥＲＴとＧＬ
Ｙの濃度を測定した。その結果を表１７に示す。
【００７２】
【表１７】 表１７ ───────────────────────────────── カルシウム濃度（ｐｐｍ） ＥＲＴ（ｇ/ｌ） ＧＬＹ（ｇ/ｌ） ───────────────────────────────── ０ ６７.５ ５.６ １５ ６８.５ ３.３ ３０ ６７.８ １.０ ─────────────────────────────────
【００７３】
【実施例１４】実施例５において、菌株としてトリコス
ポロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spat
hulata）ＣＢＳ２４１．８１を用いた以外は同様の条件
にて培養し、培養液中のＥＲＴとＧＬＹの濃度を測定し
た。その結果を表１８に示す。
ポロノイデス・スパスラータ（Trichosporonoides spat
hulata）ＣＢＳ２４１．８１を用いた以外は同様の条件
にて培養し、培養液中のＥＲＴとＧＬＹの濃度を測定し
た。その結果を表１８に示す。
【００７４】
【表１８】 表１８ ───────────────────────────────── カルシウム濃度（ｐｐｍ） ＥＲＴ（ｇ/ｌ） ＧＬＹ（ｇ/ｌ） ───────────────────────────────── ０ ２１.２ ３.９ １５ ２３.４ １.６ ３０ ２４.０ １.６ ─────────────────────────────────
【００７５】
【実施例１５】実施例５において、菌株としてモニリエ
ラ・アセトアブテンス（Moniliella acetoabutens）Ｃ
ＢＳ１７０．６６を用いた以外は同様の条件にて培養
し、培養液中のＥＲＴとＧＬＹの濃度を測定した。その
結果を表１９に示す。
ラ・アセトアブテンス（Moniliella acetoabutens）Ｃ
ＢＳ１７０．６６を用いた以外は同様の条件にて培養
し、培養液中のＥＲＴとＧＬＹの濃度を測定した。その
結果を表１９に示す。
【００７６】
【表１９】 表１９ ───────────────────────────────── カルシウム濃度（ｐｐｍ） ＥＲＴ（ｇ/ｌ） ＧＬＹ（ｇ/ｌ） ───────────────────────────────── ０ １.２ １９.５ １５ １０.２ １０.６ ３０ １１.１ １０.３ ─────────────────────────────────
【００７７】
【発明の効果】本発明の方法によれば、カルシウムまた
は上水という安価な原料を用いて、効率良くエリスリト
ールを製造できるばかりでなく、グリセリン等の副産物
の低減による精製コストの削減、さらに培養時間の短縮
という工業的に有利なプロセスを構築できる。
は上水という安価な原料を用いて、効率良くエリスリト
ールを製造できるばかりでなく、グリセリン等の副産物
の低減による精製コストの削減、さらに培養時間の短縮
という工業的に有利なプロセスを構築できる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 森岡 聰 神奈川県横浜市青葉区鴨志田町1000番地三 菱化学株式会社横浜総合研究所内
Claims (5)
- 【請求項１】 エリスリトール生産能を有する微生物
を、カルシウムを含有する培地で培養してエリスリトー
ルを生成させ、その培養物からエリスリトールを採取す
ることによりなるエリスリトールの製造方法。 - 【請求項２】 カルシウムを含有する培地が、５ｐｐｍ
以上の濃度のカルシウムを含有する培地である請求項１
に記載の製造方法。 - 【請求項３】 微生物が、モニリエラ属又はトリコスポ
ロノイデス属に属する微生物から選ばれる微生物である
請求項１または２に記載の製造方法。 - 【請求項４】 モニリエラ属に属する微生物が、モニリ
エラ・ポリニス、モニリエラ・アセトアブテンス又はモ
ニリエラ・スアベオレンスから選ばれる微生物である請
求項３に記載の製造方法。 - 【請求項５】 トリコスポロノイデス属に属する微生物
が、トリコスポロノイデス・エドセファリス、トリコス
ポロノイデス・メガチリエンシス、トリコスポロノイデ
ス・スパスラータ、トリコスポロノイデス・ニグレッセ
ンス又はトリコスポロノイデス・マジダから選ばれる微
生物である請求項３に記載の製造方法。
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| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP34523698A JP4194152B2 (ja) | 1997-12-04 | 1998-12-04 | エリスリトールの製造方法 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9-334655 | 1997-12-04 | ||
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| Publication Number | Publication Date |
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| JP4194152B2 JP4194152B2 (ja) | 2008-12-10 |
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ID=26574897
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP34523698A Expired - Lifetime JP4194152B2 (ja) | 1997-12-04 | 1998-12-04 | エリスリトールの製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP4194152B2 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002238546A (ja) * | 2001-01-31 | 2002-08-27 | Food Industry Res & Dev Inst | エリスリトール産生モニリエラ株 |
| US7247468B2 (en) | 2004-04-30 | 2007-07-24 | Daiso Co., Ltd. | Method for producing optically active 1,2-diols by microorganism culturing |
Families Citing this family (1)
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|---|---|---|---|---|
| MY169799A (en) * | 2011-12-22 | 2019-05-16 | Xyleco Inc | Processing biomass for use in fuel cells related applications |
-
1998
- 1998-12-04 JP JP34523698A patent/JP4194152B2/ja not_active Expired - Lifetime
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|---|---|---|---|---|
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| JP4194152B2 (ja) | 2008-12-10 |
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