JPH11255792A - イソフラボン配糖体の取得方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 安価な原料からイソフラボン配糖
体を取得する。 【解決手段】 オカラを水抽出し、この水抽出液
を吸着剤に接触させて抽出液中のイソフラボン配糖体を
吸着させ、次いでアルコール水溶液を用いてイソフラボ
ン配糖体を取得する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明はオカラを水抽出してイソ
フラボン配糖体を取得する方法に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】従来、大豆にはイソフラボン化合物とし
てダイジン、グリシチン、ゲニスチン、アセチルダイジ
ン及びアセチルゲニスチンあるいはこれらのアグリコン
としてダイゼイン、グリシテイン、ゲニステインが含有
され、そしてこれらにはエストロゲン作用、抗菌作用、
抗酸化作用、制ガン作用をはじめとして多くの薬理効果
があることが確認されている。一方最近になって大豆中
には

【０００３】

【化１】

【０００４】

【化２】 に示すマロニルダイジン及びマロニルゲニスチン等のマ
ロニルイソフラボン配糖体の存在が確認され、これらが
大豆中のイソフラボン化合物の主成分であることが判っ
てきた。このマロニルイソフラボン配糖体は水に溶け易
く、またそれ自身抗酸化作用があり、またその構造の類
似性から上記したような薬理効果が期待され、また入浴
剤の有効成分としての利用も期待されるものである。

【０００５】このようなことから、本発明者等は先に大
豆を水抽出し、この水抽出液を吸着剤に接触させてマロ
ニルイソフラボン配糖体を吸着させ、これをアルコール
水溶液で溶出させることによりマロニルイソフラボン配
糖体を取得することができることを見出し特許出願した
（特開平8-283283号）。また、飼料等に利用されている
大豆胚軸はイソフラボン化合物含量が多く、これを原料
としてマロニルイソフラボン配糖体を得ることも可能で
ある。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】本発明の課題は、安価
な原料を用いてマロニルダイジン、マロニルゲニスチ
ン、ダイジン、ゲニスチン（以下、これらを総称してイ
ソフラボン配糖体という）を取得することであり、その
原料として豆腐や豆乳製造の副産物であるオカラを用い
ることに特徴を有する。腐敗しやすく、そのほとんどが
廃棄処分され、せいぜい家畜の飼料としてしか用いられ
ることのないオカラからイソフラボン配糖体を取得する
方法は本発明が初めてである。

【０００７】

【課題を解決するための手段】本発明者らはオカラの有
効利用という観点から種々検討したところ、驚くべきこ
とにオカラ中に大量のイソフラボン配糖体が存在するこ
と、これを水抽出し、抽出液を吸着剤に吸着させ、アル
コールで溶出することにより、イソフラボン配糖体を取
得することができるという知見を得て本発明を完成し
た。

【０００８】以下に本発明を詳細に説明する。イソフラ
ボン配糖体を得るための原料としてのオカラは、豆腐、
油揚げや豆乳製造の副産物として得られる通常のオカラ
であり、更には分離大豆蛋白質の製造過程で生ずる残滓
である。このようなオカラを水抽出するのであるが、抽
出に用いられる水の温度は限定されない。すなわち常温
水、温水、熱水のいずれでもよい。

【０００９】また抽出に用いる水を、塩酸、リン酸、酢
酸、乳酸等によりpH４〜５の希酸溶液とすることによ
り、抽出されるイソフラボン配糖体を安定化すると同時
に、抽出後のおからのpHが酸性となるので、微生物によ
る腐敗の進行を抑制する効果がある。また抽出に用いる
水を、可性ソーダ、水酸化カリ等によりpH8〜10の希ア
ルカリ溶液とすることにより、イソフラボン配糖体の抽
出率を向上させることができる。

【００１０】このような抽出水を用いてオカラを抽出す
るには、オカラに１〜１０倍量（ｗ／ｗ）の抽出水を加
えて十分攪拌混合し、この混合液を常法の固液分離装
置、例えばフィルター式濾過機、スクリューデカンター
等により固液分離する。得られた抽出液はそのまま、あ
るいは必要により限外濾過膜を用いて蛋白質を除いた濾
液、若しくは塩酸でpH４．０〜５．０程度に調整して蛋
白質を沈澱させ、その上澄液を吸着剤と接触させる。

【００１１】上記抽出液又は濾液若しくは上澄液は、そ
のまま吸着剤と接触させる方法と、カセイソーダでpH
８．０程度に調整した後、接触させる方法とがある。前
者の場合は吸着剤に対する吸着量が増大し、後者の場合
はマロニルイソフラボン配糖体と混在するダイジン、ゲ
ニスチンの分離が容易であるという利点がある。いずれ
の場合でも、使用する吸着剤は、例えば合成吸着剤、活
性炭、アルミナ等であり、具体的にはダイヤイオンHP-2
0（三菱化学製）、精製白鷺活性炭（武田薬品工業
製）、活性アルミナ（和光純薬製）等を挙げることがで
きる。接触はバッチ法、カラム法等一般的方法でよく、
例えば、吸着剤を充填したカラムに抽出液を通過させる
ことにより行うことができ、こうすることにより抽出液
中のイソフラボン配糖体の殆どが吸着剤に吸着される。

【００１２】次いで吸着剤に吸着したイソフラボン配糖
体をアルコール水溶液又はアルカリ性アルコール水溶液
を用いて、イソフラボン配糖体を溶出させる。得られた
溶液は減圧濃縮し、あるいは減圧濃縮後、凍結乾燥して
イソフラボン配糖体の、濃縮液や乾燥粉末を得る。

【００１３】上記濃縮液あるいは乾燥粉末はダイジン、
ゲニスチン、マロニルダイジン及びマロニルゲニスチン
の混合物である。

【００１４】なお、マロニルダイジン及びマロニルゲニ
スチンを効率よく得るためには以下の方法によることが
好ましい。すなわちオカラの抽出液を吸着剤と接触させ
るまでは上記と同様であるが、溶出をアルコール水溶液
の濃度を変えて順次行い、大まかにマロニルダイジン、
マロニルゲニスチンあるいはダイジン、ゲニスチンを分
別し、これらの溶出液をＯＤＳカラムで精製するのであ
る。本発明はこのようにしてオカラの抽出液より簡単に
マロニルダイジン、マロニルゲニスチンあるいはダイジ
ン、ゲニスチンを分別して得ることができる。また、こ
れらを原料として酸やアルカリ処理等によりマロニルダ
イジン、マロニルゲニスチンをダイジン、ゲニスチンに
変換することができ、さらにはダイジン、ゲニスチンか
らアグリコンであるダイゼイン、ゲニステインを得るこ
とができる。

【００１５】例えばマロニルダイジン、マロニルゲニス
チンを溶解した溶液をアンモニア、カセイソーダ、炭酸
ソーダ等でpH８〜１３にして０．５時間以上放置するこ
とにより、ダイジン、ゲニスチンに変換する。アルカリ
処理はpHが高いほど変換率は高くなる。またマロニルダ
イジン、マロニルゲニスチンを溶解した溶液を７０〜１
５０℃で０．５〜１２時間加熱することにより、これら
マロニル体をダイジン、ゲニスチンに変換される。加熱
温度が高く、加熱時間が長いほど変換速度は早くなる。
また溶液のpHと加熱温度を組み合わせることにより更に
変換速度を早めることができる。こうして変換されたダ
イジン、ゲニスチンはＯＤＳ樹脂に吸着させたのち、ア
ルコール水溶液で溶出し、これを減圧濃縮、凍結乾燥す
ることにより精製ダイジン、ゲニスチンとして得ること
ができる。

【００１６】上記の様にして得られたダイジン、ゲニス
チンは、更に酸処理あるいは酵素処理によりダイゼイ
ン、ゲニステイン（イソフラボンアグリコン）とするこ
とができる。例えば酸処理の場合、ダイジン、ゲニスチ
ンを、濃塩酸１に対してメタノール４．５の割合で混合
した溶液で、７０℃以上で６時間程度還流し、冷却後、
水を加えて析出物を得る。これを濾過、水洗後、熱エタ
ノールに溶解し、このエタノール溶液６に対し温水４を
加え、室温にて放冷し、イソフラボンアグリコンを析出
させる。なおこの場合の酸処理では、原料がマロニルダ
イジン、マロニルゲニスチンであっても同様にイソフラ
ボンアグリコンが得られる。

【００１７】また酵素処理の場合、１／１０Ｍリン酸塩
緩衝液（pH５．０）に溶解した大豆由来のβ−グルコシ
ダーゼ溶液にダイジン、ゲニスチンを分散させ、５０℃
で６時間程度反応させ、この反応液を分画分子量１０，
０００の限外濾過膜で濾過し、濾液をＯＤＳ樹脂カラム
に吸着させたのち、アルコール水溶液で溶出し、これを
減圧濃縮、凍結乾燥することにより精製イソフラボンア
グリコンを得る。

【００１８】

【発明の効果】本発明によりオカラの水抽出液から簡単
に、効率よくイソフラボン配糖体を得ることができ、ま
たこれらを酸、アルカリ処理することにより種々のイソ
フラボン化合物を得ることができる。

【００１９】

【実施例】以下実施例により本発明を具体的に説明する 実施例１ 市販の米国大豆（ＩＯＭ）1,000kgを水道水で洗浄後、
５倍量の水道水に１６時間浸漬、膨潤させた。この膨潤
大豆に水道水を加えながら磨砕し、得られた呉を９５
℃、３分間の加熱をしたのち８５℃まで冷却し、スクリ
ューデカンターで固液分離を行い、オカラ1,540kgを得
た。このオカラに、２倍量の0.05N塩酸溶液を加えて混
合、攪拌したのちスクリューデカンターで固液分離し、
抽出液2,800Lを得た。

【００２０】この抽出液を合成吸着剤ダイアイオンHP-2
0（三菱化学製）を充填したカラム（30×100cm、25L）
に70L/hrの流速で通液し、イソフラボン配糖体を吸着さ
せた後、蒸留水100Lで洗浄した。次いで５％エタノール
水溶液100L、２０％エタノール水溶液200L及び３０％エ
タノール水溶液150Lで溶出した区分（Ａ）、４０％エタ
ノール水溶液200Lで溶出した区分（Ｂ）を減圧濃縮し、
濃縮液各６Lを得た。区分（Ａ）、（Ｂ）にはそれぞ
れ、マロニルダイジン28.9g、12.3g、マロニルゲニスチ
ン7.1g、54.1g、ダイジン11.2g、0g、ゲニスチン7.6g、
12.5gを含有しており、区分（Ａ）をマロニルダイジン
濃縮液、区分（Ｂ）をマロニルゲニスチン濃縮液とし
た。

【００２１】＜マロニルダイジンの精製＞次に上記マロ
ニルダイジン含有濃縮液（区分Ａ）を2N-NaOHでpH８．
０に調整し、これを合成樹脂ＯＤＳ樹脂充填カラム（１
０×６０cm、４L）に５０ml／min.の流速で通液した
後、蒸留水１０Lで洗浄した。次いで５％エタノール水
溶液２０Lで溶出を行い、目的物を含む画分を集め、濃
縮後、凍結乾燥してマロニルダイジン、ダイジンをナト
リウム塩として、前者を２０．７７g、後者を6.4g得
た。

【００２２】＜マロニルゲニスチンの精製＞また上記マ
ロニルゲニスチン含有濃縮液（区分Ｂ）を2N-NaOHでpH
８．０に調整し、これを上記と同様にＯＤＳ樹脂充填カ
ラムに通液した後、蒸留水１０Lで洗浄した。次いで１
０％エタノール水溶液１０Lで溶出を行い、目的物を含
む画分を集め、濃縮後、凍結乾燥してマロニルゲニスチ
ン、ゲニスチンをナトリウム塩として前者を４１．８０
g、後者を6.8g得た。

【００２３】こうして得られたマロニルダイジン、マロ
ニルゲニスチン及びダイジン、ゲニスチンの1Ｈ及び13
Ｃ−ＮＭＲは、文献｛Agric.Biol.Chem.,55,(9)2227(19
91)｝記載の数値と一致した。また、原料として用いた
オカラをWangらの方法｛J.Agric.Food Chem.,42,1666(1
994)｝に従ってイソフラボン化合物を分析した。すなわ
ち、原料オカラ（水分含量７８％）の凍結乾燥粉末試料
（水分含量２％）２．０gにアセトニトリル１００mlと
0.1N-塩酸溶液２０mlを加え、室温で２時間撹拌後、こ
れを東洋濾紙NO.2で濾過し、ロータリーエバポレーター
で３０℃以下で濃縮乾固した。これを８０％メタノール
１０mlで溶解後、メンブランフィルターで濾過してその
２０μlをHPLCに供した。３回の分析の平均値は、原料
オカラ１００g当たりマロニルダイジン１２．９mg、マ
ロニルゲニスチンは１３．３mg、ダイジン４．６mg、ゲ
ニスチン５．３mg、ダイゼイン１．８mg、ゲニステイン
２．５mgであった。以上のことから実施例１におけるマ
ロニルダイジン、マロニルゲニスチン、ダイジン、ゲニ
スチンの収率はそれぞれ１０％、２０％、９％、８％で
あった。なお通常の場合、オカラは常温で腐敗するが本
抽出処理後のオカラは、常温で２日間放置後も腐敗は認
められなかった。

【００２４】実施例２ 実施例１と同様の方法でオカラを、抽出に用いる水道水
を可性ソーダでpH８．０で調整した以外は実施例１と同
様の方法で抽出、吸着、溶出を行い、マロニルダイジン
５２．１g、マロニルゲニスチン７５．７g、ダイジン２
７．９ｇ、ゲニスチン３３．０ｇを含有する各濃縮液を
得た。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 オカラからイソフラボン配糖体を水抽出
   し、この水抽出液を吸着剤に接触させて抽出液中のイソ
   フラボン配糖体を吸着させ、次いでアルコール水溶液を
   用いて溶出させることを特徴とするイソフラボン配糖体
   の取得方法。
2. 【請求項２】 水抽出に用いる水が希酸又は希アルカリ
   溶液である請求項１記載のイソフラボン配糖体の取得方
   法。