JPH11269094A - 徐放性組成物、その製造法および用途 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】生理活性物質を高含量で含有し、かつその放出
速度を制御できる新規組成物を提供する。 【解決手段】生理活性物質またはその塩、ヒドロキシナ
フトエ酸またはその塩、および生体内分解性ポリマーま
たはその塩を含有する徐放性組成物、その製造法および
該徐放性組成物を含有する医薬。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明が属する技術分野】本発明は、生理活性物質の徐
放性製剤、その製造法および医薬などとしての用途に関
する。

【０００２】

【従来の技術】特開平７−９７３３４号公報には、生理
活性ペプチドまたはその塩と末端に遊離のカルボキシル
基を有する生体内分解性ポリマーとからなる徐放性製剤
およびその製造法が開示されている。ＧＢ２２０９９３
７号、ＧＢ２２３４１６９号、ＧＢ２２３４８９６号、
ＧＢ２２５７９０９号公報およびＥＰ６２６１７０Ａ２
号公報には、別途調製したペプチド、タンパク質のパモ
酸塩等の水不溶性塩を含んでなる生体内分解性ポリマー
を基剤とした組成物またはその製造法が開示されてい
る。ＷＯ９５／１５７６７号公報には、cetrorelix（LH
−RHアンタゴニスト）のエンボン酸塩（パモ酸塩）およ
びその製造法が開示されていると同時に、このパモ酸塩
を生体内分解性ポリマーに封入してもそのペプチドの放
出性はパモ酸塩単独での場合と同様であることが記述さ
れている。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】生理活性物質を高含量
で含有し、かつその初期過剰放出を抑制して長期にわた
る安定した放出速度を実現できる新規組成物を提供す
る。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記の問
題点を解決するために鋭意研究の結果、組成物を形成さ
せる際に生理活性物質とヒドロキシナフトエ酸を共存さ
せることにより生理活性物質を高含量で組成物中に取り
込み、さらに生体内分解性ポリマー中に両者を封入した
場合は、生体内分解性ポリマーが存在しない条件下で調
製した生理活性物質とヒドロキシナフトエ酸から形成さ
れる組成物からの生理活性物質の放出速度とは異なる速
度で生理活性物質が放出され、その放出速度が生体内分
解性ポリマーの特性やヒドロキシナフトエ酸の添加量に
よって制御可能であり、高含量においても確実に初期過
剰放出を抑制して、非常な長期にわたる持続放出を実現
させることができ、さらに研究を重ねた結果、本発明を
完成するに至った。

【０００５】すなわち、本発明は、（１）生理活性物質
またはその塩、ヒドロキシナフトエ酸またはその塩およ
び生体内分解性ポリマーまたはその塩を含有してなる徐
放性組成物、（２）生理活性物質が生理活性ペプチドで
ある第（１）項記載の徐放性組成物、（３）生理活性物
質がLH-RH誘導体である第（２）項記載の徐放性組成
物、（４）ヒドロキシナフトエ酸が３−ヒドロキシ−２
−ナフトエ酸である第（１）項記載の徐放性組成物、
（５）生体内分解性ポリマーがα−ヒドロキシカルボン
酸重合体である第（１）項記載の徐放性組成物、（６）
α−ヒドロキシカルボン酸重合体が乳酸−グリコール酸
重合体である第（５）項記載の徐放性組成物、（７）乳
酸とグリコール酸の組成モル％が１００／０〜４０／６
０である第（６）項記載の徐放性組成物、（８）乳酸と
グリコール酸の組成モル％が１００／０である第（７）
項記載の徐放性組成物、（９）重合体の重量平均分子量
が約３，０００〜約１００，０００である第（６）項記
載の徐放性組成物、（１０）重量平均分子量が約２０，
０００〜５０，０００である第（９）項記載の徐放性組
成物、（１１）LH-RH誘導体が式 5-oxo-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-Y-Leu-Arg-Pro-Z [式中、YはDLeu、DAla、DTrp、DSer(tBu)、D2Nalまたは
DHis(ImBzl)を示し、ZはNH-C₂H₅またはGly-NH₂を示
す。]で表されるペプチドである第（３）項記載の徐放
性組成物、（１２）重合体の末端のカルボキシル基量が
重合体の単位質量（グラム）あたり５０ー９０マイクロ
モルである第（６）項記載の徐放性組成物、（１３）ヒ
ドロキシナフトエ酸またはその塩とLH-RH誘導体または
その塩のモル比が３対４ないし４対３である第（３）項
記載の徐放性組成物、（１４）徐放性組成物中、LH-RH
誘導体またはその塩が１４％(w/w)から２４％(w/w)含有
される第（１３）項記載の徐放性組成物、（１５）生理
活性物質またはその塩が微水溶性または水溶性である第
（１）項記載の徐放性組成物、（１６）注射用である第
（１）項記載の徐放性組成物、（１７）生理活性物質ま
たはその塩、生体内分解性ポリマーまたはその塩および
ヒドロキシナフトエ酸またはその塩の混合液から溶媒を
除去することを特徴とする第（１）項記載の徐放性組成
物の製造法、（１８）生体内分解性ポリマーまたはその
塩およびヒドロキシナフトエ酸またはその塩を含有する
有機溶媒溶液に生理活性物質またはその塩を混合、分散
し、次いで有機溶媒を除去することを特徴とする第（１
７）項記載の徐放性組成物の製造法、（１９）生理活性
物質またはその塩が生理活性物質またはその塩を含有す
る水溶液である第（１８）項記載の徐放性組成物の製造
法、（２０）生理活性物質の塩が遊離塩基または酸との
塩である第（１７）項記載の製造法、（２１）第（１）
項記載の徐放性組成物を含有してなる医薬、（２２）第
（３）項記載の徐放性組成物を含有してなる前立腺癌、
前立腺肥大症、子宮内膜症、子宮筋腫、子宮線維腫、思
春期早発症、月経困難症もしくは乳癌の予防、治療剤ま
たは避妊剤、（２３）生理活性物質のヒドロキシナフト
エ酸塩および生体内分解性ポリマーまたはその塩を含有
してなる徐放性組成物、（２４）ヒドロキシナフトエ酸
またはその塩を用いることを特徴とする徐放性組成物か
らの生理活性物質の初期過剰放出を抑制する方法、（２
５）ヒドロキシナフトエ酸またはその塩を用いることを
特徴とする徐放性組成物への生理活性物質の封入効率を
向上する方法、（２６）生理活性ペプチドのヒドロキシ
ナフトエ酸塩、（２７）水溶性または微水溶性である第
（２６）項記載の生理活性ペプチドのヒドロキシナフト
エ酸塩、および（２８）生理活性ペプチドのヒドロキシ
ナフトエ酸塩を含有してなる徐放性組成物などを提供す
る。

【０００６】さらに、本発明は、（２９）ヒドロキシナ
フトエ酸またはその塩の配合量が生理活性ペプチドまた
はその塩１モルに対して約１〜約７モル、好ましくは約
１〜約２モルである第（２８）項記載の徐放性組成物、
（３０）生理活性物質またはその塩を含む液を内水相と
し、生体内分解性ポリマーおよびヒドロキシナフトエ酸
またはその塩を含む溶液を油相とするＷ／Ｏ型乳化物を
製造し、次いで溶媒を除去することを特徴とする第（１
７）項記載の徐放性組成物の製造法、（３１）ヒドロキ
シナフトエ酸またはその塩を含む液を内水相とし、生理
活性物質またはその塩および生体内分解性ポリマーまた
はその塩を含む溶液を油相とするＷ／Ｏ型乳化物を製造
し、次いで溶媒を除去することを特徴とする第（１７）
項記載の徐放性組成物の製造法、（３２）生理活性ペプ
チドまたはその塩およびヒドロキシナフトエ酸またはそ
の塩を混合、溶解し、次いで溶媒を除去することを特徴
とする第（２８）項記載の徐放性組成物の製造法、およ
び（３３）溶媒の除去法が水中乾燥法である第（３０）
項〜第（３２）項のいずれかに記載の徐放性組成物の製
造法などを提供する。

【０００７】本発明で用いられる生理活性物質は、薬理
学的に有用なものであれば特に限定を受けないが、非ペ
プチド化合物でもペプチド化合物でもよい。非ペプチド
化合物としては、アゴニスト、アンタゴニスト、酵素阻
害作用を有する化合物などがあげられる。また、ペプチ
ド化合物としては、例えば、生理活性ペプチドが好まし
く、分子量約３００〜約４０，０００、好ましくは約４
００〜約３０，０００、さらに好ましくは約５００〜約
２０，０００の生理活性ペプチドなどが好適である 該生理活性ペプチドとしては、例えば、黄体形成ホルモ
ン放出ホルモン（ＬＨ−ＲＨ）、インスリン、ソマトス
タチン、成長ホルモン、成長ホルモン放出ホルモン(Ｇ
Ｈ−ＲＨ）、プロラクチン、エリスロポイエチン、副腎
皮質ホルモン、メラノサイト刺激ホルモン、甲状腺ホル
モン放出ホルモン、甲状腺刺激ホルモン、黄体形成ホル
モン、卵胞刺激ホルモン、バソプレシン、オキシトシ
ン、カルシトニン、ガストリン、セクレチン、パンクレ
オザイミン、コレシストキニン、アンジオテンシン、ヒ
ト胎盤ラクトーゲン、ヒト絨毛性ゴナドトロピン、エン
ケファリン、エンドルフィン、キョウトルフィン、タフ
トシン、サイモポイエチン、サイモシン、サイモチムリ
ン、胸腺液性因子、血中胸腺因子、腫瘍壊死因子、コロ
ニー誘導因子、モチリン、デイノルフィン、ボンベシ
ン、ニューロテンシン、セルレイン、ブラジキニン、心
房性ナトリウム排泄増加因子、神経成長因子、細胞増殖
因子、神経栄養因子、エンドセリン拮抗作用を有するペ
プチド類などおよびその誘導体、さらにはこれらのフラ
グメントまたはフラグメントの誘導体などが挙げられ
る。本発明で用いられる生理活性物質はそれ自身であっ
ても、薬理学的に許容される塩であってもよい。このよ
うな塩としては、該生理活性物質がアミノ基等の塩基性
基を有する場合、無機酸（無機の遊離酸とも称する）
（例、炭酸、重炭酸、塩酸、硫酸、硝酸、ホウ酸等）、
有機酸（有機の遊離酸とも称する）（例、コハク酸、酢
酸、プロピオン酸、トリフルオロ酢酸等）などとの塩が
挙げられる。生理活性物質がカルボキシル基等の酸性基
を有する場合、無機塩基（無機の遊離塩基とも称する）
（例、ナトリウム、カリウム等のアルカリ金属、カルシ
ウム、マグネシウム等のアルカリ土類金属など）や有機
塩基（有機の遊離塩基とも称する）（例、トリエチルア
ミン等の有機アミン類、アルギニン等の塩基性アミノ酸
類等）などとの塩が挙げられる。また、生理活性ペプチ
ドは金属錯体化合物（例、銅錯体、亜鉛錯体等）を形成
していてもよい。

【０００８】該生理活性ペプチドの好ましい例として
は、ＬＨ−ＲＨ誘導体であって、ホルモン依存性疾患、
特に性ホルモン依存性癌（例、前立腺癌、子宮癌、乳
癌、下垂体腫瘍など）、前立腺肥大症、子宮内膜症、子
宮筋腫、思春期早発症、月経困難症、無月経症、月経前
症候群、多房性卵巣症候群等の性ホルモン依存性の疾患
および避妊（もしくは、その休薬後のリバウンド効果を
利用した場合には、不妊症）に有効なＬＨ−ＲＨ誘導体
またはその塩が挙げられる。さらに性ホルモン非依存性
であるがＬＨ−ＲＨ感受性である良性または悪性腫瘍な
どに有効なＬＨ−ＲＨ誘導体またはその塩も挙げられ
る。ＬＨ−ＲＨ誘導体またはその塩の具体例としては、
例えば、トリートメントウイズ ＧｎＲＨ アナログ：
コントラバーシス アンド パースペクテイブ（Treatm
ent with GnRH analogs: Controversies and perspecti
ves）［パルテノン バブリッシング グループ（株）
(The Parthenon Publishing Group Ltd.)発行1996
年］、特表平３−５０３１６５号公報、特開平３−１０
１６９５号、同７−９７３３４号および同８−２５９４
６０号公報などに記載されているペプチド類が挙げられ
る。

【０００９】ＬＨ−ＲＨ誘導体としては、ＬＨ−ＲＨア
ゴニストまたはＬＨ−ＲＨアンタゴニストが挙げられる
が、ＬＨ−ＲＨアンタゴニストとしては、例えば、一般
式〔Ｉ〕 X-D2Nal-D4ClPhe-D3Pal-Ser-A-B-Leu-C-Pro-DAlaNH₂ 〔式中、ＸはN(4H₂-furoyl)GlyまたはNAcを、ＡはNMeTy
r、Tyr、Aph(Atz)、NMeAph(Atz)から選ばれる残基を、
ＢはDLys(Nic)、DCit、DLys(AzaglyNic)、DLys(AzaglyF
ur)、DhArg(Et₂)、DAph(Atz)およびDhCi から選ばれる
残基を、ＣはLys(Nisp)、ArgまたはhArg(Et₂)をそれぞ
れ示す〕で表わされる生理活性ペプチドまたはその塩な
どが用いられる。ＬＨ−ＲＨアゴニストとしては、例え
ば、一般式〔II〕 5-oxo-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-Y-Leu-Arg-Pro-Z 〔式中、ＹはDLeu、DAla、DTrp、DSer(tBu)、D2Nalおよ
びDHis(ImBzl)から選ばれる残基を、ＺはNH-C₂H₅または
Gly-NH₂をそれぞれ示す〕で表わされる生理活性ペプチ
ドまたはその塩などが用いられる。特に、ＹがDLeuで、
ＺがNH-C₂H₅であるペプチド（即ち、5-oxo-Pro-His-Trp
-Ser-Tyr-DLeu-Leu-Arg-Pro-NH-C₂H₅で表されるペプチ
ド）が好適である。これらのペプチドは、前記文献ある
いは公報記載の方法あるいはこれに準じる方法で製造す
ることができる。

【００１０】本明細書中で使用される略号の意味は次の
とおりである。 略号 名称 N(4H₂-furoyl)Gly： N-テトラヒドロフロイルグリシン残基 NAc： N-アセチル基 D2Nal： D-3-(2-ナフチル）アラニン残基 D4ClPhe： D-3-(4-クロロ）フェニルアラニン残基 D3Pal： D-3-(3-ピリジル）アラニン残基 NMeTyr： N-メチルチロシン残基 Aph(Atz)： N-[5'-(3'-アミノ-1'H-1',2',4'-トリアゾリル)]フェニルアラニ ン残基 NMeAph(Atz)： N-メチル-[5'-(3'-アミノ-1'H-1',2',4'-トリアゾリル)]フェニ ルアラニン残基 DLys(Nic)： D-(e-N-ニコチノイル）リシン残基 Dcit： D-シトルリン残基 DLys(AzaglyNic)： D-(アザグリシルニコチノイル）リシン残基 DLys(AzaglyFur)： D-(アザグリシルフラニル）リシン残基 DhArg(Et₂)： D-(N,N'-ジエチル)ホモアルギニン残基 DAph(Atz)： D-N-[5'-(3'-アミノ-1'H-1',2',4'-トリアゾリル)] フェニルアラニン残基 DhCi： D-ホモシトルリン残基 Lys(Nisp)： (e-N-イソプロピル）リシン残基 hArg(Et₂)： (N,N'-ジエチル)ホモアルギニン残基 その他アミノ酸に関し、略号で表示する場合、IUPAC-IU
Bコミッション・オブ・バイオケミカル・ノーメンクレ
ーチュアー(Commission on Biochemical Nomenclature)
（ヨーロピアン・ジャーナル・オブ・バイオケミスト
リー(European Journal of Biochemistry)第138巻、９
〜３７頁（1984年））による略号または該当分野におけ
る慣用略号に基づくものとし、また、アミノ酸に関して
光学異性体がありうる場合は、特に明示しなければＬ体
を示すものとする。

【００１１】本発明に用いられるヒドロキシナフトエ酸
は、ナフタレンの異なる炭素に１つの水酸基と１つのカ
ルボキシル基が結合したものである。従って、カルボキ
シル基の位置がナフタレン環の１位と２位であるそれぞ
れに対して水酸基の位置が異なる合計１４種の異性体が
存在する。そしてこの中の任意の異性体を用いてよく、
またこれらの任意の割合の混合物を用いてもよい。後述
するが、酸解離定数の大きなものが好ましく、あるいは
ｐＫａ（ｐＫａ＝−ｌｏｇ₁₀Ｋａ、Ｋａは酸解離定数を
表す）の小さいものが好ましい。そして微水溶性のもの
が好ましい。また、アルコール類（例えば、エタノー
ル、メタノール等）に可溶であるものが好ましい。「ア
ルコール類に可溶」とは例えばメタノールに対して１０
ｇ／Ｌ以上であることを意味する。上記のヒドロキシナ
フトエ酸異性体のｐＫａとしては、３−ヒドロキシ−２
−ナフトエ酸の値（ ｐＫａ＝２．７０８、化学便覧
基礎編 II、日本化学会、昭和４４年９月２５日発行）
のみが知られているが、ヒドロキシ安息香酸の３種の異
性体のｐＫａを比較することによって有用な知見が得ら
れる。すなわちｍ−ヒドロキシ安息香酸とｐ−ヒドロキ
シ安息香酸のｐＫａが４以上であるのに対してｏ−ヒド
ロキシ安息香酸（サリチル酸）のｐＫａ（＝２．７５
４）は極端に小さい。従って、上記１４種の異性体のな
かでも、ナフタレン環の隣接する炭素原子にカルボキシ
ル基と水酸基が結合した、３−ヒドロキシ−２−ナフト
エ酸、１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸および２−ヒド
ロキシ−１−ナフトエ酸が好ましい。さらには、ナフタ
レンの３位の炭素に水酸基が、２位の炭素にカルボキシ
ル基が結合した３−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸が好適
である。ヒドロキシナフトエ酸は塩であってもよい。塩
としては、例えば、無機塩基（例、ナトリウム、カリウ
ム等のアルカリ金属、カルシウム、マグネシウム等のア
ルカリ土類金属など）や有機塩基（例、トリエチルアミ
ン等の有機アミン類、アルギニン等の塩基性アミノ酸類
等）などとの塩、または遷移金属（例，亜鉛，鉄，銅な
ど）との塩および錯塩などが挙げられる。

【００１２】以下に、本発明の生理活性物質のヒドロキ
シナフトエ酸塩の調製方法を例示する。 （１）ヒドロキシナフトエ酸の含水有機溶媒溶液を弱塩
基性イオン交換カラムに通して吸着させ、そして飽和さ
せる。次いで含水有機溶媒を通して過剰のヒドロキシナ
フトエ酸を除去した後に生理活性物質またはその塩の含
水有機溶媒溶液を通してイオン交換を行わせて、得られ
た流出液から溶媒を除去すればよい。該含水有機溶媒中
の有機溶媒としては、アルコール類（例、メタノール、
エタノール等）、アセトニトリル、テトラヒドロフラ
ン、ジメチルホルムアミドなどが用いられる。塩を析出
させるための溶媒を除去する方法は、自体公知の方法あ
るいはそれに準じる方法が用いられる。例えば、ロータ
リーエヴァポレーターなどを用いて真空度を調節しなが
ら溶媒を蒸発させる方法などが挙げられる。 （２）予め、強塩基性イオン交換カラムの交換イオンを
水酸化物イオンに交換しておき、これに生理活性物質ま
たはその塩の含水有機溶媒溶液を通してそれらの塩基性
基を水酸化型に換える。回収した流出液に当量以下のヒ
ドロキシナフトエ酸を加えて溶解し、次いで濃縮して析
出した塩を、必要な場合には水洗して、乾燥すればよ
い。

【００１３】生理活性物質のヒドロキシナフトエ酸塩
は、用いる生理活性物質にもよるが、微水溶性であるた
め、特に生理活性ペプチドの該塩自身が徐放能を発揮し
て生理活性物質の徐放性製剤に用いることができるし、
また、さらに徐放性組成物を製造することもできる。本
発明に用いられる生体内分解性ポリマーとしては、例え
ば、α−ヒドロキシモノカルボン酸類（例、グリコール
酸、乳酸等）、α−ヒドロキシジカルボン酸類（例、リ
ンゴ酸）、α−ヒドロキシトリカルボン酸（例、クエン
酸）等のα−ヒドロキシカルボン酸類の1種以上から合
成され、遊離のカルボキシル基を有する重合体、共重合
体、またはこれらの混合物；ポリ（α−シアノアクリル
酸エステル）；ポリアミノ酸（例、ポリ（γ−ベンジル
−L−グルタミン酸）等）；無水マレイン酸系共重合体
（例、スチレン−マレイン酸共重合体等）などが用いら
れる。

【００１４】モノマーの結合様式としては、ランダム、
ブロック、グラフトのいずれでもよい。また、上記α−
ヒドロキシモノカルボン酸類、α−ヒドロキシジカルボ
ン酸類、α−ヒドロキシトリカルボン酸類が分子内に光
学活性中心を有する場合、Ｄ−、Ｌ−、ＤＬ−体のいず
れを用いてもよい。これらの中でも、乳酸−グリコール
酸重合体（以下、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリ
ド）、ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）あるいは乳酸
−グリコール酸共重合体と称することもあり、特に明示
しない限り、乳酸、グリコール酸のホモポリマー（重合
体）及びコポリマー（共重合体）を総称する。また乳酸
ホモポリマーは乳酸重合体、ポリ乳酸、ポリラクチドな
どと、またグリコール酸ホモポリマーはグリコール酸重
合体、ポリグリコール酸、ポリグリコリドなどと称され
る場合がある）、ポリ（α−シアノアクリル酸エステ
ル）などが好ましい。さらに好ましくは、乳酸−グリコ
ール酸重合体であり、より好ましくは、末端に遊離のカ
ルボキシル基を有する乳酸−グリコール酸重合体であ
る。生体内分解性ポリマーは塩であってもよい。塩とし
ては、例えば、無機塩基（例、ナトリウム、カリウム等
のアルカリ金属、カルシウム、マグネシウム等のアルカ
リ土類金属など）や有機塩基（例、トリエチルアミン等
の有機アミン類、アルギニン等の塩基性アミノ酸類等）
などとの塩、または遷移金属（例，亜鉛，鉄，銅など）
との塩および錯塩などが挙げられる。生体内分解性ポリ
マーとして乳酸−グリコール酸重合体を用いる場合、そ
の組成比（モル％）は約１００／０〜約４０／６０が好
ましく、約１００／０〜約５０／５０がより好ましい。
また、組成比が１００／０である乳酸ホモポリマーも好
ましく用いられる。

【００１５】該「乳酸−グリコール酸重合体」の最小繰
り返し単位の一つである乳酸の光学異性体比は、Ｄ−体
／Ｌ−体（モル／モル％）が約７５／２５〜約２５／７
５の範囲のものが好ましい。このＤ−体／Ｌ−体（モル
／モル％）は、特に約６０／４０〜約３０／７０の範囲
のものが汎用される。該「乳酸−グリコール酸重合体」
の重量平均分子量は、通常、約３，０００〜約１００，
０００、好ましくは約３，０００〜約６０，０００、さ
らに好ましくは約３，０００〜約５０，０００、特に好
ましくは約２０，０００〜約５０，０００のものが用い
られる。また、分散度（重量平均分子量／数平均分子
量）は、通常約１．２〜約４．０が好ましく、さらには
約１．５〜３．５が特に好ましい。該「乳酸−グリコー
ル酸重合体」の遊離のカルボキシル基量は、重合体の単
位質量（グラム）あたり通常約２０〜約１０００μmol
（マイクロモル）が好ましく、さらには約４０〜約１０
００μmol（マイクロモル）が特に好ましい。本明細書
における重量平均分子量、数平均分子量および分散度と
は、重量平均分子量が１，１１０，０００、７０７，０
００、４５５，６４５、３５４，０００、１８９，００
０、１５６，０５５、９８，９００、６６，４３７、３
７，２００、１７，１００、９，８３０、５，８７０、
２，５００、１，３０３、５０４の１５種類の単分散ポ
リスチレンを基準物質としてゲルパーミエーションクロ
マトグラフィー（ＧＰＣ）で測定したポリスチレン換算
の分子量および算出した分散度をいう。測定は、高速Ｇ
ＰＣ装置（東ソー製、ＨＬＣ−８１２０ＧＰＣ、検出方
式は示差屈折率による）、ＧＰＣカラムＫＦ８０４Ｌ×
２（昭和電工製）を使用し、移動相としてクロロホルム
を用いる。流速は１ｍｌ／ｍｉｎでおこなう。

【００１６】本明細書における遊離のカルボキシル基量
とはラベル化法により求めたもの（以下、「ラベル化法
によるカルボキシル基量」と称する）をいう。具体的に
ポリ乳酸の場合について述べると、ポリ乳酸 Ｗｍｇを
５Ｎ塩酸／アセトニトリル（ｖ／ｖ＝４／９６）混液２
ｍｌに溶解し、０．０１Ｍ ｏ−ニトロフェニルヒドラ
ジン塩酸塩（ＯＮＰＨ）溶液（５Ｎ塩酸／アセトニトリ
ル／エタノール＝１．０２／３５／１５）２ｍｌと０．
１５Ｍ １−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピ
ル）−カルボジイミド塩酸塩溶液（ピリジン／エタノー
ル＝４ｖ／９６ｖ）２ｍｌを加えて４０℃で３０分反応
させた後溶媒を留去する。残滓を水洗（４回）した後、
アセトニトリル２ｍｌで溶解し、０．５ｍｏｌ／ｌのエ
タノール性水酸化カリウム溶液１ｍｌを加えて６０℃で
３０分反応させる。反応液を１．５Ｎ水酸化ナトリウム
水溶液で希釈してＹｍｌとし、１．５Ｎ水酸化ナトリウ
ム水溶液を対象として５４４ｎｍ吸光度Ａ（／ｃｍ）を
測定する。一方、ＤＬ−乳酸水溶液を基準物質として、
その遊離カルボキシル基量 Ｃｍｏｌ／Ｌをアルカリ滴
定で求め、またＯＮＰＨラベル化法でＤＬ−乳酸ヒドラ
ジドとしたときの５４４ｎｍ吸光度を Ｂ（／ｃｍ）と
するとき、重合体の単位質量（グラム）あたりの遊離の
カルボキシル基のモル量は以下の数式で求められる。 ［ＣＯＯＨ］（ｍｏｌ／ｇ）＝（ＡＹＣ）／（ＷＢ）

【００１７】また、該「カルボキシル基量」は生体内分
解性ポリマーをトルエン−アセトン−メタノール混合溶
媒に溶解し、フェノールフタレインを指示薬としてこの
溶液をアルコール性水酸化カリウム溶液でカルボキシル
基を滴定して求めることもできる（以下、この方法によ
って求めた値を「アルカリ滴定法によるカルボキシル基
量」と称する）が、滴定中にポリエステル主鎖の加水分
解反応を競合する結果、滴定終点が不明確になる可能性
があり上記ラベル化法で定量するのが望ましい。生体内
分解性ポリマーの分解・消失速度は共重合組成、分子量
あるいは遊離カルボキシル基量によって大きく変化する
が、乳酸-グリコール酸重合体の場合、一般的にはグリ
コール酸分率が低いほど分解・消失が遅いため、グリコ
ール酸分率を低くするかあるいは分子量を大きくし、か
つ遊離カルボキシル基量を少なくすることによって放出
期間を長くすることができる。しかし、遊離カルボキシ
ル基量は生理活性物質の製剤への取り込み率に影響する
ので一定値以上必要である。この故に、長期間（例え
ば、６カ月以上）型徐放性製剤用の生体内分解性ポリマ
ーとするには、乳酸-グリコール酸重合体の場合、上記
の重量平均分子量が約２０，０００〜約５０，０００
で、かつ遊離カルボキシル基量が約３０〜約９５μｍｏ
ｌ／ｇ、好ましくは約４０〜約９５μｍｏｌ／ｇ、より
好ましくは約５０〜約９０μｍｏｌ／ｇであるポリ乳酸
（例、Ｄ−乳酸、Ｌ−乳酸、ＤＬ−乳酸など、特にＤＬ
−乳酸などが好ましい）が好ましい。

【００１８】該「乳酸−グリコール酸重合体」は、例え
ば、乳酸とグリコール酸からの無触媒脱水重縮合（特開
昭６１−２８５２１号）あるいはラクチドとグリコリド
等の環状ジエステル化合物からの触媒を用いた開環重合
（Encyclopedic Handbook ofBiomaterials and Bioengi
neering Part A: Materials, Volume 2, Marcel Dekke
r, Inc. 1995年)で製造できる。上記の公知の開環重合
方法によって得られる重合体は、得られる重合体の末端
に遊離のカルボキシル基を有しているとは限らないが、
例えば、ＥＰ−Ａ−０８３９５２５号に記載の加水分解
反応に付すことにより、単位質量当たりにある程度のカ
ルボキシル基量を有する重合体に改変することができ、
これを用いることもできる。

【００１９】上記の「末端に遊離のカルボキシル基を有
する乳酸−グリコール酸重合体」は公知の製造法（例え
ば無触媒脱水重縮合法、特開昭６１−２８５２１号公報
参照）で問題なく製造でき、あるいは、下記の方法によ
っても製造できる。 （１）まず、カルボキシル基が保護されたヒドロキシモ
ノカルボン酸誘導体（例、Ｄ−乳酸tert-ブチル、Ｌ−
乳酸ベンジルなど）またはカルボキシル基が保護された
ヒドロキシジカルボン酸誘導体（例、タルトロン酸ジベ
ンジル、２−ヒドロキシエチルマロン酸ジtert-ブチル
など）の存在下、重合触媒を用いて環状エステル化合物
を重合反応に付す。上記の「カルボキシル基が保護され
たヒドロキシモノカルボン酸誘導体」または「カルボキ
シル基が保護されたヒドロキシジカルボン酸誘導体」と
は、例えば、カルボキシル基（−ＣＯＯＨ）がアミド
（−ＣＯＮＨ₂）化またはエステル（−ＣＯＯＲ）化さ
れているヒドロキシカルボン酸誘導体などがあげられる
が、なかでも、カルボキシル基（−ＣＯＯＨ）がエステ
ル（−ＣＯＯＲ）化されているヒドロキシカルボン酸誘
導体などが好ましい。

【００２０】ここでエステルにおけるＲとしては、例え
ば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ
−ブチル、tert−ブチルなどのＣ_1-6アルキル基、例え
ば、シクロペンチル、シクロヘキシルなどのＣ_3-8シク
ロアルキル基、例えば、フェニル、α−ナフチルなどの
Ｃ_6-12アリール基、例えば、ベンジル、フェネチルなど
のフェニル−Ｃ_1-2アルキル基もしくはα−ナフチルメ
チルなどのα−ナフチル−Ｃ_1-2アルキル基などのＣ
_7-14アラルキル基などがあげられる。なかでも、tert−
ブチル基、ベンジル基などが好ましい。該「環状エステ
ル化合物」とは、例えば環内に少なくとも１つのエステ
ル結合を有する環状化合物をいう。具体的には、環状モ
ノエステル化合物（ラクトン類）または環状ジエステル
化合物（ラクチド類）などがあげられる。該「環状モノ
エステル化合物」としては、例えば、４員環ラクトン
（β−プロピオラクトン、β−ブチロラクトン、β−イ
ソバレロラクトン、β−カプロラクトン、β−イソカプ
ロラクトン、β−メチル−β−バレロラクトンなど）、
５員環ラクトン（γ−ブチロラクトン、γ−バレロラク
トンなど）、６員環ラクトン（δ−バレロラクトンな
ど）、７員環ラクトン（ε−カプロラクトンなど）、p-
ジオキサノン、1,5-ジオキセパン−２−オンなどがあげ
られる。

【００２１】該「環状ジエステル化合物」としては、例
えば、式

【化１】 （式中、Ｒ¹およびＲ²はそれぞれ同一または異なって、
水素原子またはメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプ
ロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチルなどのＣ_1-6アルキル
基を示す）で表される化合物などがあげられ、なかで
も、Ｒ¹が水素原子でＲ²がメチル基、Ｒ¹およびＲ²がそ
れぞれ水素原子であるラクチドなどが好ましい。具体的
には、たとえばグリコリド、L-ラクチド、D-ラクチド、
DL-ラクチド、meso-ラクチド、3-メチル-1,4-ジオキサ
ン-2,5-ジオン（光学活性体も含む）などがあげられ
る。該「重合触媒」としては、例えば有機スズ系触媒
（例、オクチル酸スズ、ジラウリル酸ジ−ｎ−ブチルス
ズ、テトラフェニルスズなど）、アルミ系触媒（例、ト
リエチルアルミニウムなど）、亜鉛系触媒（例、ジエチ
ル亜鉛など）などがあげられる。反応後の除去の容易さ
の観点からは、アルミ系触媒、亜鉛系触媒が好ましく、
さらには、残存した場合の安全性の観点からは亜鉛系触
媒が好ましい。重合触媒の溶媒としては、ベンゼン、ヘ
キサン、トルエンなどが用いられ、中でもヘキサン、ト
ルエンなどが好ましい。

【００２２】「重合方法」は、反応物を融解状態にして
行う塊状重合法または反応物を適当な溶媒（例えば、ベ
ンゼン、トルエン、キシレン、デカリン、ジメチルホル
ムアミドなど）に溶解して行う溶液重合法を用いればよ
い。溶媒としては、トルエン、キシレンなどが好まし
い。重合温度は特に限定されるものではないが、塊状重
合の場合、反応開始時に反応物を融解状態に至らしめる
温度以上、通常１００〜３００℃であり、溶液重合の場
合、通常室温〜１５０℃であり、反応温度が反応溶液の
沸点を越えるときは、凝縮器を付けて還流するか、また
は耐圧容器内で反応させればよい。重合時間は重合温
度、そのほかの反応条件や目的とする重合体の物性など
を考慮して適宜定められるが、例えば１０分〜７２時間
である。反応後は、必要であれば反応混合物を適当な溶
媒（例えば、アセトン、ジクロロメタン、クロロホルム
など）に溶解し、酸（例えば、塩酸、無水酢酸、トリフ
ルオロ酢酸など）で重合を停止させた後、常法によりこ
れを目的物を溶解しない溶媒（例えば、アルコール、
水、エーテル、イソプロピルエーテルなど）中に混合す
るなどして析出させ、ω端に保護されたカルボキシル基
を有するポリマーを単離すればよい。本願の重合方法
は、従来のメタノールなどのいわゆるプロトン性連鎖移
動剤の代わりにカルボキシル基が保護されたヒドロキシ
カルボン酸誘導体（例、Ｄ−乳酸tert-ブチル、Ｌ−乳
酸ベンジルなど）またはカルボキシル基が保護されたヒ
ドロキシジカルボン酸誘導体（例、タルトロン酸ジベン
ジル、２−ヒドロキシエチルマロン酸ジtert-ブチルな
ど）などが用いられる。

【００２３】このようにカルボキシル基が保護されたヒ
ドロキシカルボン酸誘導体（例、Ｄ−乳酸tert-ブチ
ル、Ｌ−乳酸ベンジルなど）またはカルボキシル基が保
護されたヒドロキシジカルボン酸誘導体（例、タルトロ
ン酸ジベンジル、２−ヒドロキシエチルマロン酸ジtert
-ブチルなど）などをプロトン性連鎖移動剤に用いるこ
とによって、分子量を仕込み組成によって制御でき、
重合後に脱保護反応に付すことによって、得られる生
体内分解性ポリマーのω端にカルボキシル基を遊離させ
ることができる。

【００２４】（２）次に、上記（１）の重合反応によっ
て得られたω端に保護されたカルボキシル基を有するポ
リマーを脱保護反応に付すことにより目的とするω端に
遊離のカルボキシル基を有する生体内分解性ポリマーを
得ることができる。該保護基は自体公知の方法により脱
離できる。このような方法としては、ポリ（ヒドロキシ
カルボン酸）のエステル結合に影響を与えずに保護基を
除去することが可能な方法であればいずれを用いてもよ
いが、具体的には、例えば還元、酸分解などの方法が挙
げられる。該還元方法としては、例えば触媒（例、パラ
ジウム炭素、パラジウム黒、酸化白金など）を用いる接
触還元、液体アンモニウム中でのナトリウムによる還
元、ジチオスレイトールによる還元などが挙げられる。
例えば、ω端にベンジル基で保護されたカルボキシル基
を有するポリマーを接触還元する場合、具体的にはポリ
マーを酢酸エチル、ジクロロメタン、クロロホルムなど
に溶解したものにパラジウム炭素を添加し、激しく攪拌
しながら室温で水素を約２０分〜約４時間通気すること
で脱保護できる。酸分解方法としては、例えば無機酸
（例、フッ化水素、臭化水素、塩化水素など）あるいは
有機酸（例、トリフルオロ酢酸、メタンスルホン酸、ト
リフルオロメタンスルホン酸など）またはこれらの混合
物などによる酸分解などが挙げられる。また、必要に応
じて、酸分解の際、カチオン・スカベンジャー（例、ア
ニソール、フェノール、チオアニソールなど）を適宜添
加してもよい。例えば、ω端にtert-ブチル基で保護さ
れたカルボキシル基を有するポリマーを酸分解する場
合、具体的にはポリマーをジクロロメタン、キシレン、
トルエンなどに溶解したものにトリフルオロ酢酸を適当
量加えて、あるいはポリマーをトリフルオロ酢酸で溶解
して室温で約１時間攪拌することで脱保護できる。好ま
しくは、該酸分解法は重合反応直後に行ってもよく、そ
の場合は重合停止反応を兼ねることができる。さらに必
要に応じて、上記の脱保護反応によって得られたポリマ
ーを酸加水分解反応に付すことにより、該ポリマーの重
量平均分子量、数平均分子量あるいは末端カルボキシル
基量を目的に応じて調節することができる。具体的に
は、例えば、ＥＰ−Ａ−０８３９５２５号に記載の方法
またはそれに準じた方法によって行うことができる。

【００２５】前記のようにして得られた生体内分解性ポ
リマーは、徐放性製剤を製造するための基剤として用い
ることができる。さらには末端に特定されない遊離のカ
ルボキシル基を有する重合体は公知の製造法（例えば、
ＷＯ９４／１５５８７号公報参照）で製造できる。ま
た、開環重合後の化学的処理によって末端を遊離のカル
ボキシル基にした乳酸−グリコール酸重合体は例えばベ
ーリンガー インゲルハイム（Boehringer Ingelheim K
G）から市販されているものを用いてもよい。生体内分
解性ポリマーは塩（生体内分解性ポリマーの塩としては
例えば前述の塩などがあげられる）であってもよく、そ
の製造方法としては、例えば、（ａ）上記のカルボキシ
ル基を有する生体内分解性ポリマーを有機溶媒に溶解し
たものと無機塩基（例、ナトリウム、カリウム等のアル
カリ金属、カルシウム、マグネシウム等のアルカリ土類
金属など）や有機塩基（例、トリエチルアミン等の有機
アミン類、アルギニン等の塩基性アミノ酸類等）のイオ
ンを含む水溶液を混合してイオン交換反応を行わせた後
に、塩となったポリマーを単離する、（ｂ）上記のカル
ボキシル基を有する生体内分解性ポリマーを有機溶媒に
溶解したものに上記（ａ）で列挙した塩基の弱酸塩（例
えば、酢酸塩、グリコール酸塩）を溶解した後に、塩と
なったポリマーを単離する、（ｃ）上記のカルボキシル
基を有する生体内分解性ポリマーを有機溶媒に溶解した
ものに遷移金属（例，亜鉛，鉄，銅など）の弱酸塩（例
えば、酢酸塩、グリコール酸塩）もしくは酸化物を混合
した後に塩となったポリマーを単離する、などが挙げら
れる。長期間（例えば、６カ月以上）型徐放性製剤用の
生体内分解性ポリマーとしては、上記の方法で製造した
「末端に遊離のカルボキシル基を有する乳酸−グリコー
ル酸重合体」が好適である。

【００２６】本発明の組成物における生理活性物質の重
量比は、 生理活性物質の種類、所望の薬理効果および
効果の持続期間などによって異なるが、生理活性物質ま
たはその塩とヒドロキシナフトエ酸またはその塩と生体
内分解性ポリマーまたはその塩の三者を含有する徐放性
組成物の場合、その三者の和に対して、例えば生理活性
ペプチドまたはその塩の場合、約０．００１〜約５０重
量％、好ましくは約０．０２〜約４０重量％、より好ま
しくは約０．１〜３０重量％、最も好ましくは約１４〜
２４重量％であり、非ペプチド性生理活性物質またはそ
の塩の場合、約０．０１〜８０重量％、好ましくは約
０．１〜５０重量％である。生理活性物質のヒドロキシ
ナフトエ酸塩を含む場合でも同様な重量比である。生理
活性ペプチド（仮に（Ａ）と称する）とヒドロキシナフ
トエ酸（仮に（Ｂ）と称する）との塩を含有してなる徐
放性組成物の場合、（Ａ）と（Ｂ）との塩の和に対し
て、（Ａ）の重量比は通常約５〜約９０重量％、好まし
くは約１０〜約８５重量％、より好ましくは約１５〜約
８０重量％、特に好ましくは約３０〜約８０重量％であ
る。生理活性物質またはその塩とヒドロキシナフトエ酸
またはその塩と生体内分解性ポリマーまたはその塩の三
者を含有する徐放性組成物の場合、ヒドロキシナフトエ
酸またはその塩の配合量は、好ましくは、生理活性物質
またはその塩１モルに対して、ヒドロキシナフトエ酸ま
たはその塩が約１／２〜約２モル、約３／４〜約４／３
モル、特に好ましくは約４／５〜約６／５モルである。

【００２７】本発明の組成物の設計を、生理活性物質、
ヒドロキシナフトエ酸および生体内分解性ポリマーの三
者を含有する徐放性組成物について、生理活性物質が塩
基性である場合を例に用いて以下に述べる。この場合、
組成物中には塩基として生理活性物質が、酸としてヒド
ロキシナフトエ酸が共存しており、それらが遊離体ある
いは塩として組成物中に配合された場合のいずれにおい
ても、組成物製造時のある時点において含水状態あるい
は微量の水の存在下でおのおの解離平衡が成り立ってい
る。微水溶性のヒドロキシナフトエ酸が生理活性物質と
形成する塩は、該生理活性物質の特性にもよるが微水溶
性と考えられるため、解離平衡はこのような微水溶性塩
形成の側に傾く。塩基性の生理活性物質を高含量に含む
組成物を製造するには、上記解離平衡から考えて、生理
活性物質のほとんどをプロトン化して上記微水溶性塩に
することが望ましい。このためには、少なくとも生理活
性物質またはその塩と当量に近いヒドロキシナフトエ酸
またはその塩を配合するのが望ましい。次に、組成物中
に包含された生理活性物質の徐放機構を以下に述べる。
生理活性物質は上記の配合組成ではほとんどがプロトン
化されて、対イオンを伴った状態で存在している。対イ
オンは、主にヒドロキシナフトエ酸（好ましくはヒドロ
キシナフトエ酸）である。組成物が生体中に投与された
後は、生体内分解性ポリマーの分解によって経時的にそ
のオリゴマーおよびモノマーが生成し始めるが、該ポリ
マーが乳酸−グリコール酸重合体である場合は、生成す
るオリゴマー（乳酸−グリコール酸オリゴマー）および
モノマー（乳酸またはグリコール酸）は必ず１個のカル
ボキシル基を有しており、これらも生理活性物質の対イ
オンになり得る。生理活性物質の放出は電荷の移動を伴
わない、すなわち対イオンを伴った塩として行われる
が、移動可能な対イオン種としては上述のようにヒドロ
キシナフトエ酸、乳酸−グリコール酸オリゴマー（移動
可能な程度の分子量の）およびモノマー（乳酸またはグ
リコール酸）があげられる。複数の酸が共存する場合に
は、その組成比にもよるが一般的に強酸の塩が優先的に
生ずる。ヒドロキシナフトエ酸のｐＫａは、例えば、３
−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸のそれは２．７０８（化
学便覧 基礎編 II、日本化学会、昭和４４年９月２５
日発行）である。一方、乳酸−グリコール酸オリゴマー
のカルボキシル基のそれは知られていないが、乳酸また
はグリコール酸のｐＫａ(=3.86または3.83)を基礎に、
「置換基導入による自由エネルギー変化は加成則で近似
可能」との原理に従って計算できる。解離定数に対する
置換基の寄与は求められており利用することができる
（Table 4.1 in "pKa Prediction for Organic Acid an
dBases", D.D.Perrin, B.Dempsey and E.P.Serjeant, 1
981）。ヒドロキシル基とエステル結合に対してはそれ
ぞれ、 ΔｐＫａ（ＯＨ）＝−０．９０ ΔｐＫａ（エステル結合）＝−１．７ なので、乳酸−グリコール酸オリゴマーのカルボキシル
基のｐＫａは、解離基に最も近いエステル結合の寄与を
考慮して、ｐＫａ = ｐＫａ(乳酸またはグリコール酸)
−ΔｐＫａ(OH)＋ΔｐＫａ(エステル結合）＝３．０６
または３．０３と求められる。従って、ヒドロキシナフ
トエ酸は乳酸（ｐＫａ＝３．８６）、グリコール酸（ｐ
Ｋａ＝３．８３）、さらには乳酸−グリコール酸オリゴ
マーよりも強い酸であるから、上記組成物中ではヒドロ
キシナフトエ酸と生理活性物質との塩が優先的に生成し
ていると考えられ、その塩の特性が、組成物中からの生
理活性物質の徐放特性を支配的に決定すると考えられ
る。該生理活性物質としては上述の生理活性物質などが
あげられる。ここにおいて、ヒドロキシナフトエ酸が生
理活性物質と形成する塩が微水溶性であって水不溶性で
ないことが徐放機構に好影響をあたえる。すなわち、上
記酸解離定数の考察で明らかにしたように移動可能な生
理活性物質の塩としては、放出の初期には上記乳酸−グ
リコール酸オリゴマーおよびモノマーよりも強酸である
ヒドロキシナフトエ酸の塩が優勢に存在する結果、その
塩の溶解性、体組織への分配性が、生理活性物質の放出
速度の決定因子となるため、ヒドロキシナフトエ酸の配
合量で薬物の初期放出パターンを調節し得る。その後、
ヒドロキシナフトエ酸の減少および生体内分解性ポリマ
ーの加水分解によって生ずるオリゴマーおよびモノマー
の増大に伴い、オリゴマーおよびモノマーを対イオンと
する生理活性物質の放出機構が徐々に優勢となり、ヒド
ロキシナフトエ酸が事実上該「組成物」から消失した場
合でも安定な生理活性物質の放出が保たれる。また、徐
放性組成物の製造時の生理活性物質の取り込み効率をあ
げること、および取り込まれた生理活性物質の投与後の
初期過剰放出を抑制しうることも説明できる。生理活性
ペプチドのヒドロキシナフトエ酸塩を含む徐放性組成物
におけるヒドロキシナフトエ酸の役割も前記の機構によ
り説明可能である。

【００２８】本明細書における「水不溶性」とは、該物
質を４０℃以下の温度で、蒸留水中で４時間攪拌したと
きに、その溶液１Ｌ中に溶解する物質の質量が２５ｍｇ
以下の場合をいう。本明細書における「微水溶性」と
は、上記質量が２５ｍｇより大きく、５ｇ以下の場合を
いう。該物質が生理活性物質の塩である場合は、上記操
作において溶解する生理活性物質の質量をもって上記定
義を適用する。本明細書における徐放性組成物の形態は
特に限定されないが、微粒子の形態が好ましく、マイク
ロスフェア（生体内分解性ポリマーを含む徐放性組成物
の場合はマイクロカプセルとも称する）の形態が特に好
ましい。また、本明細書におけるマイクロスフェアと
は、溶液に分散させることができる注射可能な球状の微
粒子のことをいう。その形態の確認は、例えば、走査型
電子顕微鏡による観察で行うことができる。

【００２９】

【発明の実施の形態】本発明の生理活性物質またはその
塩、ヒドロキシナフトエ酸またはその塩および生体内分
解性ポリマーまたはその塩を含有する徐放性組成物、例
えば、マイクロカプセルの製造法を例示する。 （Ｉ）水中乾燥法 （ｉ）Ｏ／Ｗ法 本方法においては、まずヒドロキシナフトエ酸またはそ
の塩および生体内分解性ポリマーまたはその塩の有機溶
媒溶液を作製する。本発明の徐放性製剤の製造の際に使
用する有機溶媒は、沸点が１２０℃以下であることが好
ましい。該有機溶媒としては、例えば、ハロゲン化炭化
水素（例、ジクロロメタン、クロロホルム、ジクロロエ
タン、トリクロロエタン、四塩化炭素等）、エーテル類
（例、エチルエーテル、イソプロピルエーテル等）、脂
肪酸エステル(例、酢酸エチル、酢酸ブチル等）、芳香
族炭化水素（例、ベンゼン、トルエン、キシレン等）、
アルコール類（例えば、エタノール、メタノール等）、
アセトニトリルなどが用いられる。生体内分解性ポリマ
ーまたはその塩の有機溶媒としてはなかでもジクロロメ
タンが好ましい。ヒドロキシナフトエ酸またはその塩の
有機溶媒としてはアルコール類が好ましい。それぞれ別
個に溶解した後に混合してもよいし、これらは適宜の割
合で混合された有機溶媒中に２者を溶解して用いてもよ
い。なかでも、ハロゲン化炭化水素とアルコール類との
混液が好ましく、特にジクロロメタンとエタノールとの
混液が好適である。ジクロロメタンとの混有機溶媒とし
てエタノールを用いた場合におけるジクロロメタンとエ
タノールとの混有機溶媒中のエタノールの含有率は，一
般的には約０.０１〜約５０％(v/v)、より好ましくは約
０.０５〜約４０％(v/v) 、特に好ましくは約０.１〜約
３０％(v/v)から選ばれる。生体内分解性ポリマーの有
機溶媒溶液中の濃度は、生体内分解性ポリマーの分子
量、有機溶媒の種類によって異なるが、例えば、ジクロ
ロメタンを有機溶媒として用いた場合、一般的には約
０.５〜約７０重量％ 、より好ましくは約１〜約６０重
量％ 、特に好ましくは約２〜約５０重量％から選ばれ
る。ヒドロキシナフトエ酸またはその塩の有機溶媒中の
濃度は、例えばジクロロメタンとエタノールの混液を有
機溶媒として用いた場合、一般的には約０.０１〜約１
０重量％、より好ましくは約０．１〜約５重量％、特に
好ましくは約０．５〜約３重量％から選ばれる。このよ
うにして得られたヒドロキシナフトエ酸またはその塩お
よび生体内分解性ポリマーの有機溶媒溶液中に、生理活
性物質またはその塩を添加し、溶解あるいは分散させ
る。次いで，得られた生理活性物質またはその塩、ヒド
ロキシナフトエ酸またはその塩および生体内分解性ポリ
マーまたはその塩から成る組成物を含む有機溶媒溶液を
水相中に加え、Ｏ（油相）／Ｗ（水相）エマルションを
形成させた後、油相中の溶媒を揮散ないしは水相中に拡
散させ、マイクロカプセルを調製する。この際の水相体
積は、一般的には油相体積の約１倍〜約１０，０００
倍、より好ましくは約５倍〜約５０，０００倍、特に好
ましくは約１０倍〜約２，０００倍から選ばれる。上記
の外水相中には乳化剤を加えてもよい。該乳化剤は、一
般に安定なＯ／Ｗエマルションを形成できるものであれ
ばいずれでもよい。具体的には、例えば、アニオン性界
面活性剤（オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリ
ウム、ラウリル硫酸ナトリウムなど）、非イオン性界面
活性剤（ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル
〔ツイーン(Tween)80、ツイーン(Tween)60、アトラスパ
ウダー社〕、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体〔HCO
−60、HCO−50、日光ケミカルズ〕など）、ポリビニル
ピロリドン、ポリビニルアルコール、カルボキシメチル
セルロース、レシチン、ゼラチン、ヒアルロン酸などが
用いられる。これらの中の１種類か、いくつかを組み合
わせて使用してもよい。使用の際の濃度は、好ましくは
約０．０１〜１０重量％の範囲で、さらに好ましくは約
０．０５〜約５重量％の範囲で用いられる。上記の外水
相中には浸透圧調節剤を加えてもよい。該浸透圧調節剤
としては、水溶液とした場合に浸透圧を示すものであれ
ばよい。該浸透圧調節剤としては、例えば、多価アルコ
ール類、一価アルコール類、単糖類、二糖類、オリゴ糖
およびアミノ酸類またはそれらの誘導体などが挙げられ
る。上記の多価アルコール類としては、例えば、グリセ
リン等の三価アルコール類、アラビトール，キシリトー
ル，アドニトール等の五価アルコール類、マンニトー
ル，ソルビトール，ズルシトール等の六価アルコール類
などが用いられる。なかでも、六価アルコール類が好ま
しく、特にマンニトールが好適である。上記の一価アル
コール類としては、例えば、メタノール、エタノール、
イソプロピルアルコールなどが挙げられ、このうちエタ
ノールが好ましい。上記の単糖類としては、例えば、ア
ラビノース，キシロース，リボース，２ーデオキシリボ
ース等の五炭糖類、ブドウ糖，果糖，ガラクトース，マ
ンオース，ソルボース，ラムノース，フコース等の六炭
糖類が用いられ、このうち六炭糖類が好ましい。上記の
オリゴ糖としては、例えば、マルトトリオース，ラフィ
ノース糖等の三糖類、スタキオース等の四糖類などが用
いられ、このうち三糖類が好ましい。上記の単糖類、二
糖類およびオリゴ糖の誘導体としては、例えば、グルコ
サミン、ガラクトサミン、グルクロン酸、ガラクツロン
酸などが用いられる。上記のアミノ酸類としては、Ｌ−
体のものであればいずれも用いることができ、例えば、
グリシン、ロイシン、アルギニンなどが挙げられる。こ
のうちＬ−アルギニンが好ましい。これらの浸透圧調節
剤は単独で使用しても、混合して使用してもよい。これ
らの浸透圧調節剤は、外水相の浸透圧が生理食塩水の浸
透圧の約１／５０〜約５倍、好ましくは約１／２５〜約
３倍となる濃度で用いられる。有機溶媒を除去する方法
としては、自体公知の方法あるいはそれに準じる方法が
用いられる。例えば、プロペラ型撹拌機またはマグネチ
ックスターラーや超音波発生装置などで撹拌しながら常
圧もしくは徐々に減圧にして有機溶媒を蒸発させる方
法、ロータリーエヴァポレーターなどを用いて真空度を
調節しながら有機溶媒を蒸発させる方法、透析膜を用い
て徐々に有機溶媒を除去する方法などが挙げられる。こ
のようにして得られたマイクロカプセルは遠心分離また
は濾過して分取した後、マイクロカプセルの表面に付着
している遊離の生理活性物質またはその塩、ヒドロキシ
ナフトエ酸またはその塩、薬物保持物質、乳化剤などを
蒸留水で数回繰り返し洗浄し、再び蒸留水などに分散し
て凍結乾燥する。製造工程中、粒子同士の凝集を防ぐた
めに凝集防止剤を加えてもよい。該凝集防止剤として
は、例えば、マンニトール，ラクトース，ブドウ糖，デ
ンプン類（例、コーンスターチ等）などの水溶性多糖、
グリシンなどのアミノ酸、フィブリン，コラーゲンなど
のタンパク質などが用いられる。なかでも、マンニトー
ルが好適である。また、凍結乾燥後、必要であれば、減
圧下マイクロカプセルが同士が融着しない条件内で加温
してマイクロカプセル中の水分および有機溶媒の除去を
行ってもよい。好ましくは、毎分１０〜２０℃の昇温速
度の条件下で示差走査熱量計で求めた生体内分解性ポリ
マーの中間点ガラス転移温度よりも若干高い温度で加温
する。より好ましくは生体内分解性ポリマーの中間点ガ
ラス転移温度からこれより約３０℃高い温度範囲内で加
温する。とりわけ，生体内分解性ポリマーとして乳酸−
グリコール酸重合体を用いる場合には好ましくはその中
間点ガラス転移温度以上中間点ガラス転移温度より１０
℃高い温度範囲，さらに好ましくは、中間点ガラス転移
温度以上中間点ガラス転移温度より５℃高い温度範囲で
加温する。加温時間はマイクロカプセルの量などによっ
て異なるものの、一般的にはマイクロカプセル自体が所
定の温度に達した後、約１２時間〜約１６８時間、好ま
しくは約２４時間〜約１２０時間、特に好ましくは約４
８時間〜約９６時間である。加温方法は、マイクロカプ
セルの集合が均一に加温できる方法であれば特に限定さ
れない。該加温乾燥方法としては、例えば、恒温槽、流
動槽、移動槽またはキルン中で加温乾燥する方法、マイ
クロ波で加温乾燥する方法などが用いられる。このなか
で恒温槽中で加温乾燥する方法が好ましい。

【００３０】（ii）Ｗ／Ｏ／Ｗ法（１） まず、生体内分解性ポリマーまたはその塩の有機溶媒溶
液を調製する。該有機溶媒ならびに生体内分解性ポリマ
ーまたはその塩の有機溶媒溶液中の濃度は、前記（Ｉ）
（ｉ）項に記載と同様である。また混有機溶媒を用いる
場合には、その両者の比率は、前記（Ｉ）（ｉ）項に記
載と同様である。このようにして得られた生体内分解性
ポリマーまたはその塩の有機溶媒溶液中に、生理活性物
質またはその塩を添加し、溶解あるいは分散させる。次
いで、得られた生理活性物質またはその塩と生体内分解
性ポリマーまたはその塩からなる組成物を含む有機溶媒
溶液（油相）にヒドロキシナフトエ酸またはその塩の溶
液〔該溶媒としては、水、アルコール類（例、メタノー
ル、エタノール等）の水溶液、ピリジン水溶液、ジメチ
ルアセトアミド水溶液等）〕を添加する。この混合物を
ホモジナイザーまたは超音波等の公知の方法で乳化し、
Ｗ／Ｏエマルションを形成させる。次いで，得られた生
理活性物質またはその塩、ヒドロキシナフトエ酸または
その塩および生体内分解性ポリマーまたはその塩から成
るＷ／Ｏエマルションを水相中に加え、Ｗ（内水相）/
Ｏ（油相）/ Ｗ（外水相）エマルションを形成させた
後、油相中の溶媒を揮散させ、マイクロカプセルを調製
する。この際の外水相体積は一般的には油相体積の約１
倍〜約１０，０００倍、より好ましくは約５倍〜約５，
０００倍、特に好ましくは約１０倍〜約２，０００倍か
ら選ばれる。上記の外水相中に加えてもよい乳化剤や浸
透圧調節剤、およびその後の調製法は前記（Ｉ）（ｉ）
項に記載と同様である。

【００３１】（iii）Ｗ／Ｏ／Ｗ法（２） まず、ヒドロキシナフトエ酸またはその塩と生体内分解
性ポリマーまたはその塩の有機溶媒溶液を作成し、そう
して得られた有機溶媒溶液を油相と称する。該作成法
は、前記（Ｉ）（ｉ）項に記載と同様である。あるい
は、ヒドロキシナフトエ酸またはその塩と生体内分解性
ポリマーをそれぞれ別々に有機溶媒溶液として作成し、
その後に混合してもよい。生体内分解性ポリマーの有機
溶媒溶液中の濃度は、生体内分解性ポリマーの分子量、
有機溶媒の種類によって異なるが、例えば、ジクロロメ
タンを有機溶媒として用いた場合、一般的には約０.５
〜約７０重量％ 、より好ましくは約１〜約６０重量％
、特に好ましくは約２〜約５０重量％から選ばれる。
次に生理活性物質またはその塩の溶液または分散液〔該
溶媒としては、水、水とアルコール類（例、メタノー
ル、エタノール等）などとの混液〕を作成する。生理活
性物質またはその塩の添加濃度は一般的には０．００１
ｍｇ／ｍｌ〜１０ｇ／ｍｌ、より好ましくは０．１ｍｇ
／ｍｌ〜５ｇ／ｍｌで更に好ましくは１０ｍｇ／ｍｌ〜
３ｇ／ｍｌである。溶解補助剤、安定化剤として公知の
ものを用いてもよい。生理活性物質や添加剤の溶解ある
いは分散には活性が失われない程度に加熱、振とう、撹
拌などを行ってもよく、そうして得られた水溶液を内水
相と称する。上記により得られた内水相と油相とをホモ
ジナイザーまたは超音波等の公知の方法で乳化し、Ｗ／
Ｏエマルションを形成させる。混合する油相の体積は内
水相の体積に対し、約１〜約１０００倍、好ましくは約
２〜１００倍、より好ましくは約３〜１０倍である。得
られたＷ／Ｏエマルションの粘度範囲は一般的には約１
５〜２０℃で、約１０〜１０，０００ｃｐで、好ましく
は約１００〜５，０００ｃｐである。さらに好ましくは
約５００〜２,０００ｃｐである。次いで，得られた生
理活性物質またはその塩、ヒドロキシナフトエ酸または
その塩および生体内分解性ポリマーまたはその塩から成
るＷ／Ｏエマルションを水相中に加え、Ｗ（内水相）/
Ｏ（油相）/ Ｗ（外水相）エマルションを形成させた
後、油相中の溶媒を揮散ないしは外水相中に拡散させ、
マイクロカプセルを調製する。この際の外水相体積は一
般的には油相体積の約１倍〜約１０，０００倍、より好
ましくは約５倍〜約５０，０００倍、特に好ましくは約
１０倍〜約２，０００倍から選ばれる。上記の外水相中
に加えてもよい乳化剤や浸透圧調節剤、およびその後の
調製法は前記（Ｉ）（ｉ）項に記載と同様である。

【００３２】（II）相分離法 本法によってマイクロカプセルを製造する場合には，前
記（Ｉ）の水中乾燥法に記載した生理活性物質またはそ
の塩、ヒドロキシナフトエ酸またはその塩および生体内
分解性ポリマーまたはその塩の３者から成る組成物を含
む有機溶媒溶液にコアセルベーション剤を撹拌下徐々に
加えてマイクロカプセルを析出，固化させる。該コアセ
ルベーション剤は油相体積の約０．０１〜１，０００
倍、好ましくは約０．０５〜５００倍、特に好ましくは
約０．１〜２００倍から選ばれる。コアセルベーション
剤としては、有機溶媒と混和する高分子系，鉱物油系ま
たは植物油系の化合物等で生理活性物質またはその塩の
ヒドロキシナフトエ酸またはその塩および生体内分解性
ポリマーまたはその塩の複合体を溶解しないものであれ
ば特に限定はされない。具体的には、例えば、シリコン
油，ゴマ油，大豆油，コーン油，綿実油，ココナッツ
油，アマニ油，鉱物油，n−ヘキサン，n−ヘプタンなど
が用いられる。これらは２種類以上混合して使用しても
よい。このようにして得られたマイクロカプセルを分取
した後、ヘプタン等で繰り返し洗浄して生理活性物質ま
たはその塩、ヒドロキシナフトエ酸またはその塩および
生体内分解性ポリマーまたはその塩からなる組成物以外
のコアセルベーション剤等を除去し、減圧乾燥する。も
しくは、前記（Ｉ）（ｉ）の水中乾燥法で記載と同様の
方法で洗浄を行った後に凍結乾燥、さらには加温乾燥す
る。

【００３３】（III）噴霧乾燥法 本法によってマイクロカプセルを製造する場合には，前
記（Ｉ）の水中乾燥法に記載した生理活性物質またはそ
の塩、ヒドロキシナフトエ酸またはその塩および生体内
分解性ポリマーまたはその塩の３者を含有する有機溶媒
溶液をノズルを用いてスプレードライヤー（噴霧乾燥
器）の乾燥室内に噴霧し、極めて短時間内に微粒化液滴
内の有機溶媒を揮発させ、マイクロカプセルを調製す
る。該ノズルとしては、例えば、二流体ノズル型，圧力
ノズル型，回転ディスク型等がある。この後、必要であ
れば、前記（Ｉ）の水中乾燥法で記載と同様の方法で洗
浄を行った後に凍結乾燥、さらには加温乾燥してもよ
い。上述のマイクロカプセル以外の剤形としてマイクロ
カプセルの製造法（Ｉ）の水中乾燥法に記載した生理活
性物質またはその塩、ヒドロキシナフトエ酸またはその
塩および生体内分解性ポリマーまたはその塩を含む有機
溶媒溶液を例えばロータリーエヴァポレーターなどを用
いて真空度を調節しながら有機溶媒および水を蒸発させ
て乾固した後、ジェットミルなどで粉砕して微粉末（マ
イクロパーティクルとも称する）としてもよい。さらに
は、粉砕した微粉末をマイクロカプセルの製造法（Ｉ）
の水中乾燥法で記載と同様の方法で洗浄を行った後に凍
結乾燥、さらには加温乾燥してもよい。ここで得られる
マイクロカプセルまたは微粉末は使用する生体内分解性
ポリマーまたは乳酸−グリコール酸重合体の分解速度に
対応した薬物放出が達成できる。次に、本発明の生理活
性物質のヒドロキシナフトエ酸塩を含む徐放性組成物の
製造法について例示する。 本製造法においては生理活
性物質として、生理活性ペプチドが好ましく用いられ
る。

【００３４】（ＩＶ）２ステップ法 生理活性物質またはその塩を上述の生理活性物質の配合
量の定義で示した重量比率になるようにヒドロキシナフ
トエ酸またはその塩の有機溶媒溶液に加え、生理活性物
質のヒドロキシナフトエ酸塩を含有する有機溶媒溶液を
作る。 該有機溶媒としては、前記（Ｉ）（ｉ）に記載
と同様である。また混有機溶媒を用いる場合には、その
両者の比率は、前記（Ｉ）（ｉ）項に記載と同様であ
る。生理活性物質のヒドロキシナフトエ酸塩を含有する
組成物を析出させるための有機溶媒を除去する方法は、
自体公知の方法あるいはそれに準じる方法が用いられ
る。例えば、ロータリーエヴァポレーターなどを用いて
真空度を調節しながら有機溶媒を蒸発させる方法などが
挙げられる。このようにして得られた生理活性物質のヒ
ドロキシナフトエ酸塩を含有する組成物の有機溶媒溶液
を再度作り、徐放性組成物（マイクロスフェアまたは微
粒子）を作製することができる。該有機溶媒としては、
例えば、ハロゲン化炭化水素（例、ジクロロメタン、ク
ロロホルム、ジクロロエタン、トリクロロエタン、四塩
化炭素等）、エーテル類（例、エチルエーテル、イソプ
ロピルエーテル等）、脂肪酸エステル(例、酢酸エチ
ル、酢酸ブチル等）、芳香族炭化水素（例、ベンゼン、
トルエン、キシレン等）などが用いられる。これらは適
宜の割合で混合して用いてもよい。なかでも、ハロゲン
化炭化水素が好ましく、特にジクロロメタンが好適であ
る。次いで，得られた生理活性物質のヒドロキシナフト
エ酸塩を含有する組成物を含む有機溶媒溶液を水相中に
加え、Ｏ（油相）／Ｗ（水相）エマルションを形成させ
た後、油相中の溶媒を蒸発させ、マイクロスフェアを調
製する。この際の水相体積は、一般的には、油相体積の
約１倍〜約１０，０００倍、より好ましくは約５倍〜約
５，０００倍、特に好ましくは約１０倍〜約２，０００
倍から選ばれる。上記の外水相中に加えてもよい乳化剤
や浸透圧調節剤、およびその後の調製法は前記（Ｉ）
（ｉ）項に記載と同様である。有機溶媒を除去する方法
としては、自体公知の方法あるいはそれに準じる方法が
用いられる。例えば、プロペラ型撹拌機またはマグネチ
ックスターラーなどで撹拌しながら、常圧もしくは徐々
に減圧にして有機溶媒を蒸発させる方法、ロータリーエ
ヴァポレーターなどを用いて真空度を調節しながら有機
溶媒を蒸発させる方法などが挙げられる。このようにし
て得られたマイクロスフェアは遠心分離または濾過して
分取した後、マイクロスフェアの表面に付着している遊
離の生理活性物質、ヒドロキシナフトエ酸、乳化剤など
を蒸留水で数回繰り返し洗浄し、再び蒸留水などに分散
して凍結乾燥する。製造工程中、粒子同士の凝集を防ぐ
ために凝集防止剤を加えてもよい。該凝集防止剤として
は、例えば、マンニトール，ラクトース，ブドウ糖，デ
ンプン類（例、コーンスターチ等）などの水溶性多糖、
グリシンなどのアミノ酸、フィブリン，コラーゲンなど
のタンパク質などが挙げられる。なかでも、マンニトー
ルが好ましい。また、凍結乾燥後、必要であれば、減圧
下マイクロスフェアが同士が融着しない条件内で加温し
てマイクロスフェア中の水分および有機溶媒の除去をさ
らに行ってもよい。加温時間はマイクロスフェアの量な
どによって異なるものの、一般的にはマイクロスフェア
自体が所定の温度に達した後、約１２時間〜約１６８時
間、好ましくは約２４時間〜約１２０時間、特に好まし
くは約４８時間〜約９６時間である。加温方法は、マイ
クロスフェアの集合が均一に加温できる方法であれば特
に限定されない。該加温乾燥方法としては、例えば、恒
温槽、流動槽、移動槽またはキルン中で加温乾燥する方
法、マイクロ波で加温乾燥する方法などが用いられる。
このなかで恒温槽中で加温乾燥する方法が好ましい。得
られたマイクロスフェアは比較的均一な球状の形態をし
ており、注射投与時の抵抗が少なく、針つまりを起こし
にくい。また、細い注射針を使うことができるため、注
射時の患者の苦痛が軽減される。

【００３５】（Ｖ）１ステップ法 生理活性物質またはその塩を上述の生理活性物質の配合
量の定義で示した重量比率になるようにヒドロキシナフ
トエ酸またはその塩の有機溶媒溶液に加え、生理活性物
質のヒドロキシナフトエ酸塩を含有する有機溶媒溶液を
作り、徐放性製剤（マイクロスフェアまたは微粒子）を
作製する。該有機溶媒としては、前記（Ｉ）（ｉ）に記
載と同様である。また混有機溶媒を用いる場合には、そ
の両者の比率は、前記（Ｉ）（ｉ）項に記載と同様であ
る。次いで，生理活性物質のヒドロキシナフトエ酸塩を
含有する有機溶媒溶液を水相中に加え、Ｏ（油相）／Ｗ
（水相）エマルションを形成させた後、油相中の溶媒を
蒸発させ、マイクロスフェアを調製する。この際の水相
体積は、一般的には油相体積の約１倍〜約１０，０００
倍、より好ましくは約５倍〜約５，０００倍、特に好ま
しくは約１０倍〜約２，０００倍から選ばれる。上記の
外水相中に加えてもよい乳化剤や浸透圧調節剤、および
その後の調製法は前記(IＶ)項に記載と同様である。本
発明の徐放性組成物は、マイクロスフェア、マイクロカ
プセル、微粉末（マイクロパーティクル）など何れの形
態であってもよいが、生理活性物質とヒドロキシナフト
エ酸との２者から成る場合はマイクロスフェアが、生理
活性物質とヒドロキシナフトエ酸と生体内分解性ポリマ
ーとの３者から成る場合はマイクロカプセルが好適であ
る。本発明の徐放性組成物は、そのまままたはこれらを
原料物質として種々の剤形に製剤化し、筋肉内、皮下、
臓器などへの注射剤または埋め込み剤、鼻腔、直腸、子
宮などへの経粘膜剤、経口剤（例、カプセル剤（例、硬
カプセル剤、軟カプセル剤等）、顆粒剤、散剤等の固形
製剤、シロップ剤、乳剤、懸濁剤等の液剤等）などとし
て投与することができる。例えば、本発明の徐放性組成
物を注射剤とするには、これらを分散剤（例、ツイーン
（Tween）80，HCO−60等の界面活性剤、ヒアルロン酸ナ
トリウム，カルボキシメチルセルロース，アルギン酸ナ
トリウム等の多糖類など）、保存剤（例、メチルパラベ
ン、プロピルパラベンなど）、等張化剤（例、塩化ナト
リウム，マンニトール，ソルビトール，ブドウ糖，プロ
リンなど）等と共に水性懸濁剤とするか、ゴマ油、コー
ン油などの植物油と共に分散して油性懸濁剤として実際
に使用できる徐放性注射剤とすることができる。

【００３６】本発明の徐放性組成物の粒子径は、懸濁注
射剤として使用する場合には、その分散度、通針性を満
足する範囲であればよく、例えば、平均粒子径として約
０．１〜３００μｍ、好ましくは約０．５〜１５０μｍ
の範囲、さらに好ましくは約１から１００μｍの範囲で
ある。本発明の徐放性組成物を無菌製剤にするには、製
造全工程を無菌にする方法、ガンマ線で滅菌する方法、
防腐剤を添加する方法等が挙げられるが、特に限定され
ない。本発明の徐放性組成物は、低毒性であるので、哺
乳動物（例、ヒト、牛、豚、犬、ネコ、マウス、ラッ
ト、ウサギ等）に対して安全な医薬などとして用いるこ
とができる。本発明の徐放性組成物の投与量は、主薬で
ある生理活性物質の種類と含量、剤形、生理活性物質放
出の持続時間、対象疾病、対象動物などによって種々異
なるが、生理活性物質の有効量であればよい。主薬であ
る生理活性物質の1回当たりの投与量としては、例え
ば、徐放性製剤が６カ月製剤である場合、好ましくは、
成人1人当たり約０．０１ｍｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ体重の
範囲，さらに好ましくは約０．０５ｍｇ〜５ｍｇ／ｋｇ
体重の範囲から適宜選ぶことができる。1回当たりの徐
放性組成物の投与量は、成人1人当たり好ましくは、約
０．０５ｍｇ〜５０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲、さらに好ま
しくは約０．１ｍｇ〜３０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲から適
宜選ぶことができる。投与回数は、数週間に1回、1か月
に1回、または数か月（例、３ヵ月、４ヵ月、６ヵ月な
ど）に1回等、主薬である生理活性物質の種類と含量、
剤形、生理活性物質放出の持続時間、対象疾病、対象動
物などによって適宜選ぶことができる。本発明の徐放性
組成物は、含有する生理活性物質の種類に応じて、種々
の疾患などの予防・治療剤として用いることができる
が、例えば、生理活性物質が、ＬＨ−ＲＨ誘導体である
場合には、ホルモン依存性疾患、特に性ホルモン依存性
癌（例、前立腺癌、子宮癌、乳癌、下垂体腫瘍など）、
前立腺肥大症、子宮内膜症、子宮筋腫、思春期早発症、
月経困難症、無月経症、月経前症候群、多房性卵巣症候
群等の性ホルモン依存性の疾患の予防・治療剤、および
避妊（もしくは、その休薬後のリバウンド効果を利用し
た場合には、不妊症の予防・治療）剤などとして用いる
ことができる。さらに、性ホルモン非依存性であるがＬ
Ｈ−ＲＨ感受性である良性または悪性腫瘍などの予防・
治療剤としても用いることができる。

【００３７】

【実施例】以下に実施例、実験例および比較例をあげて
本発明をさらに具体的に説明するが、これらは本発明を
限定するものではない。 実施例１ N-(S)-Tetrahydrofur-2-oyl-Gly-D2Nal-D4ClPhe-D3Pal-
Ser-NMeTyr-DLys(Nic)-Leu-Lys(Nisp)-Pro-DAlaNH₂
（以下ペプチドＡと略記する）の酢酸塩（ＴＡＰ社製）
3429.6mおよび３−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸（和光
純薬工業製）685.2mgをエタノール15mlに溶解した。 （ペプチドＡの構造式）

【化２】 この溶液をロータリーエヴァポレーターを用いて徐々に
減圧にし、有機溶媒を蒸発させた。この残留物をジクロ
ロメタン5.5mlに再溶解し、予め18℃に調節しておいた
0.1%(w/w)ポリビニルアルコール（EG−40、日本合成化
学製）水溶液400ml中に注入し、タービン型ホモミキサ
ーを用いて8,000rpmで攪拌しＯ／Ｗエマルションとし
た。このＯ／Ｗエマルションを室温で３時間撹拌してジ
クロロメタンを揮散させ、油相を固化させた後、７５μ
ｍの目開きの篩いを用いて篩過し、遠心分離機（05PR−
22、日立製作所）を用いて2,000rpm、5分間の条件でマ
イクロスフェアを沈降させて捕集した。これを再び蒸留
水に分散後、さらに遠心分離を行い、遊離薬物等を洗浄
し、マイクロスフェアを捕集した。捕集されたマイクロ
スフェアは少量の蒸留水を加えて再分散後、凍結乾燥し
て粉末として得られた。マイクロスフェアの質量回収率
は６５％で、マイクロスフェア中のペプチドＡ含量およ
び３−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸／ペプチドＡモル比
はそれぞれ７５．４％、１．９４であった。

【００３８】実施例２ ペプチドＡの酢酸塩1785.1mgおよび３−ヒドロキシ−２
−ナフトエ酸1370.4mgをエタノール15mlに溶解した。こ
の溶液をロータリーエヴァポレーターを用いて徐々に減
圧にし、有機溶媒を蒸発させた。この残留物をジクロロ
メタン10mlに再溶解し、予め18℃に調節しておいた0.1%
(w/w)ポリビニルアルコール水溶液 1000ml中に注入し、
タービン型ホモミキサーを用いて8,000rpmで攪拌しＯ／
Ｗエマルションとした。その後の操作は実施例１に記載
と同様にしてマイクロスフェアを得た。マイクロスフェ
アの質量回収率は５８％で、マイクロスフェア中のペプ
チドＡ含量および３−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸／ペ
プチドＡモル比はそれぞれ５４．３％、６．１５であっ
た。

【００３９】実施例３ ペプチドＡの酢酸塩1800mg、３−ヒドロキシ−２−ナフ
トエ酸173mgおよび乳酸−グリコール酸共重合体（乳酸
／グリコール酸=50/50（モル%）、重量平均分子量10,10
0、数平均分子量5,670、アルカリ滴定によるカルボキシ
ル基量 ２６８．８μmol/g、和光純薬工業製）2gをジ
クロロメタン6mlおよびエタノール0.2mlの混有機溶媒に
溶解し、予め18℃に調節しておいた5%マンニトール含有
0.1%(w/w)ポリビニルアルコール水溶液900ml中に注入
し，タービン型ホモミキサーを用いて7,000rpmで攪拌し
Ｏ／Ｗエマルションとした。このＯ／Ｗエマルションを
室温で３時間撹拌してジクロロメタンおよびエタノール
を揮散あるいは水相中に拡散させ、油相を固化させた
後、７５μｍの目開きの篩いを用いて篩過し、遠心分離
機を用いて2,000rpm、5分間の条件でマイクロカプセル
を沈降させて捕集した。これを再び蒸留水に分散後、さ
らに遠心分離を行い、遊離薬物等を洗浄し、マイクロカ
プセルを捕集した。捕集されたマイクロカプセルは250m
gのマンニトールと少量の蒸留水を加えて再分散後、凍
結乾燥して粉末として得られた。添加したマンニトール
を計算で除外して求めたマイクロカプセルの質量回収率
は７６％、マイクロカプセル中のペプチドＡ含量および
３−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸／ペプチドＡモル比は
それぞれ３４．７％、１．１９であった。そしてこの実
現含量を仕込み含量で除して求めた封入効率は、８４．
６％であった。

【００４０】実施例４ ペプチドＡの酢酸塩1900mg、３−ヒドロキシ−２−ナフ
トエ酸182mgおよび乳酸−グリコール酸共重合体（実施
例３に同じ）1.9gをジクロロメタン6mlおよびエタノー
ル0.2mlの混有機溶媒に溶解し、予め18℃に調節してお
いた5%マンニトールと0.05% L−アルギニン含有0.1%(w/
w)ポリビニルアルコール水溶液900ml中に注入し、タービ
ン型ホモミキサーを用い、7,000rpmで攪拌してＯ／Ｗエ
マルションとした。その後の操作は実施例３に記載と同
様にしてマイクロカプセルを得た。添加したマンニトー
ルを計算で除外して求めたマイクロカプセルの質量回収
率は８５％、マイクロカプセル中のペプチドＡ含量およ
び３−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸／ペプチドＡモル比
はそれぞれ３８．６％、０．８３であった。そしてこの
実現含量を仕込み含量で除して求めた封入効率は、８
８．９％であった。

【００４１】実施例５ 実施例４に記載の乳酸−グリコール酸共重合体を乳酸／
グリコール酸=75/25（モル%）、重量平均分子量10,70
0、数平均分子量6,100、アルカリ滴定によるカルボキシ
ル基量 ２６５．３μmol/gの乳酸−グリコール酸共重
合体に変更し、ジクロロメタン量を6.5mlに変更した以
外は、実施例４に記載と同様にしてマイクロカプセルを
得た。添加したマンニトールを計算で除外して求めたマ
イクロカプセルの質量回収率は８７％、マイクロカプセ
ル中のペプチドＡ含量および３−ヒドロキシ−２−ナフ
トエ酸／ペプチドＡモル比はそれぞれ３８．３％、０．
９２であった。そしてこの実現含量を仕込み含量で除し
て求めた封入効率は、８８．３％であった。

【００４２】実施例６ ペプチドＡの酢酸塩1800mgおよび乳酸−グリコール酸共
重合体（乳酸／グリコール酸=50/50（モル%）、重量平
均分子量12,700、数平均分子量7,090、アルカリ滴定に
よるカルボキシル基量 ２０９．２μmol/g、和光純薬
工業製）1.8gをジクロロメタン7.2mlに溶解した溶液
に、３−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸ナトリウム塩196m
gを水2.3mlに溶解した溶液を加えホモジナイザーで乳化
しＷ／Ｏエマルションを調製した。このエマルションを
予め18℃に調節しておいた5%マンニトール含有0.1%(w/
w)ポリビニルアルコール水溶液800ml中に注入し，ター
ビン型ホモミキサーを用いて7,000rpmで攪拌しＷ／Ｏ／
Ｗエマルションとした。このＷ／Ｏ／Ｗエマルションを
室温で３時間撹拌してジクロロメタンおよびエタノール
を揮散あるいは水相中に拡散させ、油相を固化させた
後、７５μｍの目開きの篩いを用いて篩過し、遠心分離
機を用いて2,000rpm、5分間の条件でマイクロカプセル
を沈降させて捕集した。これを再び蒸留水に分散後、さ
らに遠心分離を行い、遊離薬物等を洗浄し、マイクロカ
プセルを捕集した。捕集されたマイクロカプセルは250m
gのマンニトールと少量の蒸留水を加えて再分散後、凍
結乾燥して粉末として得られた。添加したマンニトール
を計算で除外して求めたマイクロカプセルの質量回収率
は７９％、マイクロカプセル中のペプチドＡ含量および
３−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸／ペプチドＡモル比は
それぞれ３２．８％、０．９１であった。そしてこの実
現含量を仕込み含量で除して求めた封入効率は、８１．
２％であった。

【００４３】実験例１ 実施例１、２で得られた各マイクロスフェア約４０ｍ
ｇ、または実施例３〜５で得られた各マイクロカプセル
約６０ｍｇを０．５ｍｌの分散媒（０．２５ｍｇのカル
ボキシメチルセルロース，０．５ｍｇのポリソルベート
８０，２５ｍｇのマンニトールを溶解した蒸留水）に分
散して８〜１０週齢雄性ＳＤラットの背部皮下に２２Ｇ
注射針で投与した。投与から所定時間後にラットを屠殺
して投与部位に残存するマイクロスフェアまたはマイク
ロカプセルを取り出し、この中のペプチドＡを定量して
それぞれの初期含量で除して求めた残存率を表１に示
す。

【表1】 実施例１および２の実験結果より、ペプチドＡと３−ヒ
ドロキシ−２−ナフトエ酸の２者からなるマイクロスフ
ェアからのペプチドＡの放出は、両者の比率の違いによ
り異なり、３−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸の割合が多
いほうがペプチドＡの放出が速やかであった。また、実
施例３、４および５の実験結果より、乳酸−グリコール
酸共重合体を加えた３者からなるマイクロカプセルで
は、２者のみからなるマイクロスフェアからのペプチド
Ａの放出性とは異なる結果が得られ、さらには乳酸−グ
リコール酸共重合体の組成、重量平均分子量および末端
カルボキシル基量の異なるものを組み合わせることによ
りその放出挙動を制御できることが明らかとなった。

【００４４】実施例７ 5-oxo-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-DLeu-Leu-Arg-Pro-NH-C₂H₅
（以下、ペプチドＢと略記する。武田薬品製）の酢酸塩
0.8gを0.8mlの蒸留水に溶解した溶液を、DL-乳酸重合体
（重量平均分子量36,000、数平均分子量18,000、ラベル
化定量法によるカルボキシル基量70.4μmol/g）3.08gお
よび３−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸0.12gをジクロロ
メタン5mlおよびエタノール0.3mlの混有機溶媒で溶解し
た溶液と混合してホモジナイザーで乳化し、 Ｗ／Ｏエ
マルションを形成した。次いでこのＷ／Ｏエマルション
を、予め15℃に調節しておいた0.1% (w/w)ポリビニルア
ルコール（EG-40、日本合成化学製）水溶液800ml中に注
入し、タービン型ホモミキサーを用いて7,000rpmで攪拌
しＷ／Ｏ／Ｗエマルションとした。このＷ／Ｏ／Ｗエマ
ルションを室温で3時間撹拌してジクロロメタンおよび
エタノールを揮散ないしは外水相中に拡散させ、油相を
固化させた後、75μmの目開きの篩いを用いて篩過し、
次いで遠心分離機（05PR-22、日立製作所）を用いて2,0
00rpm、5分間の条件でマイクロカプセルを沈降させて捕
集した。これを再び蒸留水に分散後、さらに遠心分離を
行い、遊離薬物等を洗浄し、マイクロカプセルを捕集し
た。捕集されたマイクロカプセルは少量の蒸留水を加え
て再分散後、凍結乾燥して粉末として得られた。マイク
ロカプセルの質量回収率は46%、マイクロカプセル中の
ペプチドＢ含量は21.3%、３−ヒドロキシ−２−ナフト
エ酸含量は2.96%であった。そしてこれらの実現含量を
仕込み含量で除して求めた封入効率は、ペプチドＢにお
いて106.6%、３−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸において
98.6%であった。

【００４５】実施例８ ペプチドＢの酢酸塩1.2gを1.2mlの蒸留水に溶解した溶
液を、DL-乳酸重合体（重量平均分子量25,200、数平均
分子量12,800、ラベル化定量法によるカルボキシル基量
62.5μmol/g）4.62gおよび３−ヒドロキシ−２−ナフト
エ酸0.18gをジクロロメタン7.5mlおよびエタノール0.45
mlの混有機溶媒で溶解した溶液と混合してホモジナイザ
ーで乳化し、 Ｗ／Ｏエマルションを形成した。次いで
このＷ／Ｏエマルションを、予め15℃に調節しておいた
0.1% (w/w)ポリビニルアルコール（EG-40、日本合成化
学製）水溶液1200ml中に注入し、タービン型ホモミキサ
ーを用いて7,000rpmで攪拌しＷ／Ｏ／Ｗエマルションと
した。このＷ／Ｏ／Ｗエマルションを室温で3時間撹拌
してジクロロメタンおよびエタノールを揮散ないしは外
水相中に拡散させ、油相を固化させた後、75μmの目開
きの篩いを用いて篩過し、次いで遠心分離機（05PR-2
2、日立製作所）を用いて2,000rpm、5分間の条件でマイ
クロカプセルを沈降させて捕集した。これを再び蒸留水
に分散後、さらに遠心分離を行い、遊離薬物等を洗浄
し、マイクロカプセルを捕集した。捕集されたマイクロ
カプセルは少量の蒸留水に再分散し、マンニトール0.3g
を添加して溶解した後凍結乾燥して粉末として得られ
た。添加したマンニトールを計算で除外して求めたマイ
クロカプセルの質量回収率は55.2%、マイクロカプセル
中のペプチドＢ含量は21.3%、３−ヒドロキシ−２−ナ
フトエ酸含量は2.96%であった。そしてこれらの実現含
量を仕込み含量で除して求めた封入効率は、ペプチドＢ
において99.7%、３−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸にお
いて102.2%であった。

【００４６】実施例９ 実施例８に記載のＤＬ−乳酸重合体を、ＤＬ−乳酸重合
体（重量平均分子量28,800、数平均分子量14,500、ラベ
ル化定量法によるカルボキシル基量78.1μmol/g）とし
た以外は実施例８に記載と同様にしてマイクロカプセル
粉末を得た。添加したマンニトールを計算で除外して求
めたマイクロカプセルの質量回収率は５０．２%、マイ
クロカプセル中のペプチドＢ含量は２０．８%、３−ヒ
ドロキシ−２−ナフトエ酸含量は２．７８%であった。
そしてこれらの実現含量を仕込み含量で除して求めた封
入効率は、ペプチドＢにおいて１０３．４ %、３−ヒド
ロキシ−２−ナフトエ酸において９２．７%であった。

【００４７】比較例１ ペプチドＢの酢酸塩1.2gを1.2mlの蒸留水に溶解した溶
液を、実施例９と同じDL-乳酸重合体4.8gをジクロロメ
タン7.8mlで溶解した溶液と混合してホモジナイザーで
乳化し、 Ｗ／Ｏエマルションを形成した。次いでこの
Ｗ／Ｏエマルションを、予め15℃に調節しておいた0.1%
(w/w)ポリビニルアルコール（EG-40、日本合成化学
製）水溶液1200ml中に注入し、タービン型ホモミキサー
を用い、7,000rpmでＷ／Ｏ／Ｗエマルションとした。以
下実施例８と同様に操作してマイクロカプセル粉末を得
た。添加したマンニトールを計算で除外して求めたマイ
クロカプセルの質量回収率は53.6%、マイクロカプセル
中のペプチドＢ含量は12.1%、であった。そしてこの実
現含量を仕込み含量で除して求めたペプチドＢの封入率
は60.6%であって、実施例９に比べてはるかに低い。従
って３−ヒドロキシ２−ナフトエ酸の添加によりペプチ
ドＢの封入効率が上昇したことは明らかである。

【００４８】実施例１０ ペプチドＢの酢酸塩1.00gを1.00mlの蒸留水に溶解した
溶液を、DL-乳酸重合体（重量平均分子量49,500、数平
均分子量17,500、ラベル化定量法によるカルボキシル基
量45.9μmol/g）3.85gおよび３−ヒドロキシ−２−ナフ
トエ酸0.15gをジクロロメタン7.5mlおよびエタノール0.
4mlの混有機溶媒で溶解した溶液と混合してホモジナイ
ザーで乳化し、 Ｗ／Ｏエマルションを形成した。以下
0.1% (w/w)ポリビニルアルコール水溶液の液量を1000m
l、マンニトールの添加量を0.257gとした以外は実施例
８に記載と同様にしてマイクロカプセル粉末を得た。添
加したマンニトールを計算で除外して求めたマイクロカ
プセルの質量回収率は53.8%、マイクロカプセル中のペ
プチドＢ含量は18.02%、３−ヒドロキシ−２−ナフトエ
酸含量は2.70%であった。そしてこれらの実現含量を仕
込み含量で除して求めた封入効率は、ペプチドＢにおい
て90.1 %、３−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸において9
0.1%であった。

【００４９】実施例１１ ペプチドＢの酢酸塩1.202gを1.20mlの蒸留水に溶解した
溶液を、DL-乳酸重合体（重量平均分子量19,900、数平
均分子量10,700、ラベル化定量法によるカルボキシル基
量104.6μmol/g）4.619および３−ヒドロキシ−２−ナ
フトエ酸0.179gをジクロロメタン7.5mlおよびエタノー
ル0.45mlの混有機溶媒で溶解した溶液と混合してホモジ
ナイザーで乳化し、 Ｗ／Ｏエマルションを形成した。
以下マンニトールの添加量を0.303gとした以外は実施例
８に記載と同様にしてマイクロカプセル粉末を得た。添
加したマンニトールを計算で除外して求めたマイクロカ
プセルの質量回収率は61.4%、マイクロカプセル中のペ
プチドＢ含量は15.88%、３−ヒドロキシ−２−ナフトエ
酸含量は2.23%であった。そしてこれらの実現含量を仕
込み含量で除して求めた封入効率は、ペプチドＢにおい
て77.75%、３−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸において7
5.05%であった。

【００５０】実施例１２ ペプチドＢの酢酸塩1.00gを1.00mlの蒸留水に溶解した
溶液を、DL-乳酸重合体（重量平均分子量25,900、数平
均分子量7,100、末端カルボキシル基量98.2μmol/g）3.
85gおよび３−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸0.15gをジク
ロロメタン5.5mlおよびエタノール0.35mlの混有機溶媒
で溶解した溶液と混合してホモジナイザーで乳化し、
Ｗ／Ｏエマルションを形成した。その後の操作は実施例
７に記載と同様にしてマイクロカプセル粉末を得た。マ
イクロカプセルの質量回収率は48.8%、マイクロカプセ
ル中のペプチドＢ含量は21.31%、３−ヒドロキシ−２−
ナフトエ酸含量は2.96%であった。そしてこれらの実現
含量を仕込み含量で除して求めた封入効率は、ペプチド
Ｂにおいて106.5%、３−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸に
おいて98.7%であった。

【００５１】比較例２ ペプチドＢの酢酸塩1.00gを1.00mlの蒸留水に溶解した
溶液を、実施例１２と同じDL-乳酸重合体4.00gをジクロ
ロメタン5mlで溶解した溶液と混合してホモジナイザー
で乳化し、 Ｗ／Ｏエマルションを形成した。その後の
操作は実施例７に記載と同様にしてマイクロカプセル粉
末を得た。マイクロカプセルの質量回収率は48.7%、マ
イクロカプセル中のペプチドＢ含量は11.41%であった。
そしてこの実現含量を仕込み含量で除して求めたペプチ
ドＢの封入率は57.1%であって、実施例１２に比べては
るかに低い。従って３−ヒドロキシ２−ナフトエ酸の添
加によりペプチドＢの封入効率が上昇したことは明らか
である。

【００５２】実施例１３ DL-乳酸重合体（重量平均分子量30,600、数平均分子量1
4,400、ラベル化定量法によるカルボキシル基量63.0μm
ol/g）89.2gをジクロロメタン115.3gで溶解した溶液
と、３−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸3.45gをジクロロ
メタン38.8gおよびエタノール6.27gの混有機溶媒で溶解
した溶液を混合して28.5℃に調節した。この有機溶媒溶
液から224gを量り取り、ペプチドＢの酢酸塩22.3gを20m
lの蒸留水に溶解して44.9℃に加温した水溶液と混合し
て5分間撹拌して粗乳化した後ホモジナイザーを用い、1
0,000rpm、5分間の条件にて乳化しＷ／Ｏエマルション
を形成した。次いでこのＷ／Ｏエマルションを16.3℃に
冷却後に、予め15℃に調節しておいた0.1% (w/w)ポリビ
ニルアルコール（EG-40、日本合成化学製）水溶液20リ
ットル中に５分間で注入し、 HOMOMIC LINE FLOW（特殊
機化製）を用いて7,000rpmで攪拌しＷ／Ｏ／Ｗエマルシ
ョンとした。このＷ／Ｏ／Ｗエマルションを15℃で3時
間撹拌してジクロロメタンおよびエタノールを揮散ない
しは外水相中に拡散させ、油相を固化させた後、75μm
の目開きの篩いを用いて篩過し、次いで遠心機（H-600
S, 国産遠心器製）を用いて2,000rpmで連続的にマイク
ロカプセルを沈降させて捕集した。捕集されたマイクロ
カプセルは少量の蒸留水に再分散し、90μmの目開きの
篩いを用いて篩過した後マンニトール9.98gを添加して
溶解した後凍結乾燥して粉末として得られた。添加した
マンニトールを計算で除外して求めたマイクロカプセル
の質量回収率は66.5%、マイクロカプセル中のペプチド
Ｂ含量は22.3%、３−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸含量
は2.99%であった。そしてこれら実現含量を仕込み含量
で除して求めた封入率は、ペプチドＢにおいて104.5%、
３−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸において102.1%であっ
た。

【００５３】実験例２ 実施例８に記載のマイクロカプセル約45mgを0.3mlの分
散媒（0.15 mgのカルボキシメチルセルロース，0.3mgの
ポリソルベート80，15mgのマンニトールを溶解した蒸留
水）に分散して7週齢雄性SDラットの背部皮下に22G注射
針で投与した。投与から所定時間後にラットを屠殺して
投与部位に残存するマイクロカプセルを取り出し、この
中のペプチドＢおよび３−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸
を定量してそれぞれの初期含量で除して求めた残存率お
よび使用したＤＬ−乳酸重合体の特性を表２に示す。

【表２】 表２から明らかなように、実施例８に記載のマイクロカ
プセルは生理活性物質を高含量に含んでいるのにも関わ
らず、投与後一日おける生理活性物質の残存率は９０％
以上と飛躍的に高い。従って、３−ヒドロキシ−２−ナ
フトエ酸は徐放性製剤中に生理活性物質を高含量で取り
込ませる効果だけでなく、生理活性物質の初期の過剰放
出を非常によく抑止する効果を併せ持つのは明白であ
る。そして、このマイクロカプセルは非常に長期にわた
って生理活性物質を一定速度で放出させることを実現し
ている。また１２週以降、３−ヒドロキシ−２−ナフト
エ酸はマイクロカプセルから完全に消失しているが、生
理活性物質の放出はそれまでと同じ一定速度を持続して
いて、徐放性製剤として有効である。

【００５４】実験例３ 実施例７、９〜１２および比較例１で得られた各マイク
ロカプセルを実験例２に記載と同様に投与ならびに回収
したのち、この中のペプチドＢを定量してそれぞれの初
期含量で除して求めた残存率および使用したＤＬ−乳酸
重合体の特性を表３に示す。

【表３】 表２および表３から明らかなように、実施例７〜１２に
記載のマイクロカプセルの、投与後一日おける残存率は
すべて約９０％ないしはそれ以上であり、比較例１のそ
れに比較して飛躍的に高い。従って、３−ヒドロキシ−
２−ナフトエ酸は徐放性製剤中に生理活性物質を高含量
で取り込ませる効果だけでなく、生理活性物質の初期の
過剰放出を非常によく抑止する効果も併せ持つのは明白
である。なかでも実施例７〜９に記載のマイクロカプセ
ルを用いた実験例より、生体内分解性ポリマーとして重
量平均分子量が約２０，０００〜約５０，０００でかつ
ラベル化定量法によるカルボキシル基量が約５０〜９０
μｍｏｌ／ｇであるＤＬ−乳酸を用いた場合には、非常
に長期にわたり生理活性物質を一定した速さで放出させ
ることができる。

【００５５】実験例４ 実施例７で得られたマイクロカプセルを実験例２に記載
の方法でラットに皮下投与した後、採血して得られた血
清中のペプチドＢの濃度とテストステロン濃度を測定し
た結果を表４に示す。

【表４】 表４から明らかなように生理活性物質の血中濃度は２８
週後まで一定の値に維持されており、これはマイクロカ
プセルから生理活性物質が２８週にわたって持続的に放
出されたことを意味している。そして、その期間中、薬
効を示すテストステロン濃度は常に正常値レベル以下に
抑制されており、製剤中に３−ヒドロキシ−２−ナフト
エ酸を含有しても生理活性物質は、その活性を損なうこ
となく、長期にわたってマイクロカプセル中に安定に存
在し、徐放されていることが明らかとなった。

【００５６】実施例１４ 強塩基性イオン交換カラム（SeP-Pak Plus QMAカートリ
ッジ、ウォーターズ社製）に０．５Ｎ水酸化ナトリウム
水溶液／メタノールの混液（v/v=1/5）を通して塩化物
イオンを排出した。流出液が、硝酸酸性下で硝酸銀溶液
を添加しても白濁しなくなった後、水／メタノールの混
液（v/v=1/5）を通して過剰のアルカリを排出した。流
出液が中性であることを確認した後、ペプチドＢの酢酸
塩18.8mgを水／メタノールの混液（v/v=1/5）2mlに溶解
して、上記前処理を施したカラムを通過させた。この流
出液と、この後さらに混液のみを６ｍｌ通過させたもの
とを併せ、これに３−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸５．
９１mgを水／メタノールの混液（v/v=1/5）１mlに溶解
したものを混合して、ロータリーエヴァポレーターで濃
縮した。混合液に白濁を生じたら水２ｍｌを加えて攪拌
し、遠心（３０００ｒｐｍ、２０℃、１５分）して上澄
みを除去、さらに数回水洗を繰り返した後に沈殿を真空
乾燥（４０℃、一夜）して、ペプチドＢの３−ヒドロキ
シ−２−ナフトエ酸塩４．０９ｍｇを得た。この塩に水
０．５ｍｌを加えて室温で４時間攪拌した後、液を０．
２μｍフィルターで濾過してＨＰＬＣで定量した。ペプ
チドＢおよび３−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸の濃度は
それぞれ２．３７ｇ／Ｌ、０．７５１ｇ／Ｌであった。
攪拌後も塩の一部は溶け残っており上記値はペプチドＢ
の３−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩の水溶解度と考え
られ、ペプチドＢの酢酸塩の水溶解度が１０００ｇ／Ｌ
以上であるのに比較して１００分の１以下に低下してい
る。このことは、ペプチドＢの３−ヒドロキシ−２−ナ
フトエ酸塩がペプチドＢの徐放性製剤として利用できる
ことを示している。

【００５７】

【発明の効果】本発明の徐放性組成物は生理活性物質を
高含量で含有し、かつその初期過剰放出を抑制し長期に
わたる安定した放出速度を実現することができる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 31/00 ６３５ Ａ６１Ｋ 31/00 ６３５ 31/19 ６０２ 31/19 ６０２ 38/22 37/24 (72)発明者 山本 一路 奈良県奈良市あやめ池南１丁目７番10− 116号

Claims (28)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】生理活性物質またはその塩、ヒドロキシナ
   フトエ酸またはその塩および生体内分解性ポリマーまた
   はその塩を含有してなる徐放性組成物。
2. 【請求項２】生理活性物質が生理活性ペプチドである請
   求項１記載の徐放性組成物。
3. 【請求項３】生理活性物質がLH-RH誘導体である請求項
   ２記載の徐放性組成物。
4. 【請求項４】ヒドロキシナフトエ酸が３−ヒドロキシ−
   ２−ナフトエ酸である請求項１記載の徐放性組成物。
5. 【請求項５】生体内分解性ポリマーがα−ヒドロキシカ
   ルボン酸重合体である請求項１記載の徐放性組成物。
6. 【請求項６】α−ヒドロキシカルボン酸重合体が乳酸−
   グリコール酸重合体である請求項５記載の徐放性組成
   物。
7. 【請求項７】乳酸とグリコール酸の組成モル％が１００
   ／０〜４０／６０である請求項６記載の徐放性組成物。
8. 【請求項８】乳酸とグリコール酸の組成モル％が１００
   ／０である請求項７記載の徐放性組成物。
9. 【請求項９】重合体の重量平均分子量が約３，０００〜
   約１００，０００である請求項６記載の徐放性組成物。
10. 【請求項１０】重量平均分子量が約２０，０００〜５
    ０，０００である請求項９記載の徐放性組成物。
11. 【請求項１１】LH-RH誘導体が式 5-oxo-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-Y-Leu-Arg-Pro-Z [式中、YはDLeu、DAla、DTrp、DSer(tBu)、D2Nalまたは
    DHis(ImBzl)を示し、ZはNH-C₂H₅またはGly-NH₂を示
    す。]で表されるペプチドである請求項３記載の徐放性
    組成物。
12. 【請求項１２】重合体の末端のカルボキシル基量が重合
    体の単位質量（グラム）あたり５０−９０マイクロモル
    である請求項６記載の徐放性組成物。
13. 【請求項１３】ヒドロキシナフトエ酸またはその塩とLH
    -RH誘導体またはその塩のモル比が３対４ないし４対３
    である請求項３記載の徐放性組成物。
14. 【請求項１４】徐放性組成物中、LH-RH誘導体またはそ
    の塩が１４％(w/w)から２４％(w/w)含有される請求項１
    ３記載の徐放性組成物。
15. 【請求項１５】生理活性物質またはその塩が微水溶性ま
    たは水溶性である請求項１記載の徐放性組成物。
16. 【請求項１６】注射用である請求項１記載の徐放性組成
    物。
17. 【請求項１７】生理活性物質またはその塩、生体内分解
    性ポリマーまたはその塩およびヒドロキシナフトエ酸ま
    たはその塩の混合液から溶媒を除去することを特徴とす
    る請求項１記載の徐放性組成物の製造法。
18. 【請求項１８】生体内分解性ポリマーまたはその塩およ
    びヒドロキシナフトエ酸またはその塩を含有する有機溶
    媒溶液に生理活性物質またはその塩を混合、分散し、次
    いで有機溶媒を除去することを特徴とする請求項１７記
    載の徐放性組成物の製造法。
19. 【請求項１９】生理活性物質またはその塩が生理活性物
    質またはその塩を含有する水溶液である請求項１８記載
    の徐放性組成物の製造法。
20. 【請求項２０】生理活性物質の塩が遊離塩基または酸と
    の塩である請求項１７項の製造法。
21. 【請求項２１】請求項１記載の徐放性組成物を含有して
    なる医薬。
22. 【請求項２２】請求項３記載の徐放性組成物を含有して
    なる前立腺癌、前立腺肥大症、子宮内膜症、子宮筋腫、
    子宮線維腫、思春期早発症、月経困難症もしくは乳癌の
    予防、治療剤または避妊剤。
23. 【請求項２３】生理活性物質のヒドロキシナフトエ酸塩
    および生体内分解性ポリマーまたはその塩を含有してな
    る徐放性組成物。
24. 【請求項２４】ヒドロキシナフトエ酸またはその塩を用
    いることを特徴とする徐放性組成物からの生理活性物質
    の初期過剰放出を抑制する方法。
25. 【請求項２５】ヒドロキシナフトエ酸またはその塩を用
    いることを特徴とする徐放性組成物への生理活性物質の
    封入効率を向上する方法。
26. 【請求項２６】生理活性ペプチドのヒドロキシナフトエ
    酸塩。
27. 【請求項２７】水溶性または微水溶性である請求項２６
    項記載の生理活性ペプチドのヒドロキシナフトエ酸塩。
28. 【請求項２８】生理活性ペプチドのヒドロキシナフトエ
    酸塩を含有してなる徐放性組成物。