JPH11318472A

JPH11318472A - Ｍｐｒｏｔ１５ポリペプチドおよびｍｐｒｏｔ１５ポリヌクレオチド

Info

Publication number: JPH11318472A
Application number: JP11014949A
Authority: JP
Inventors: Christopher D Southan; ディーサザンクリストファー; Barges Nicola; バーゲスニコラ
Original assignee: SmithKline Beecham Ltd
Current assignee: SmithKline Beecham Ltd
Priority date: 1998-05-13
Filing date: 1999-01-22
Publication date: 1999-11-24
Also published as: DE69832053T2; EP0974664B1; CA2248987A1; EP0974664A2; DE69832053D1; EP0974664A3

Abstract

(57)【要約】【課題】 MPROT15ポリペプチドおよびポリヌクレオチ
ドを提供する。【解決手段】配列番号２のアミノ酸配列に対して少な
くとも７０％の同一性を有するアミノ酸配列を含んでな
るMPROT15ポリペプチド、および配列番号１のヌクレオ
チド配列に対して少なくとも７０％の同一性を有するヌ
クレオチド配列を含んでなるMPROT15ポリヌクレオチド
を得る。【効果】 MPROT15ポリペプチドおよびポリヌクレオチ
ドは高血圧、心筋症、卒中、心臓病、神経変性、アルツ
ハイマー病およびペプチドホルモンまたはサイトカイン
のプロセシングに関連した疾患を含む機能障害または疾
病の治療と、このような疾病の診断アッセイに有用であ
る。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、新たに同定された
ポリペプチド、該ポリペプチドをコードするポリヌクレ
オチド、該ポリペプチドおよびポリヌクレオチドの治療
の際のまたは治療に有効でありうるアゴニスト、アンタ
ゴニストおよび／またはインヒビターである化合物を同
定する際の使用、並びに該ポリペプチドおよびポリヌク
レオチドの生産方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】薬物探索プロセスには目下根本的な大変
化が生じている。というのは、それが「機能性遺伝子科
学」(functional genomics)、すなわちハイスループッ
ト（高効率）のゲノムまたは遺伝子ベースの生物学に及
んでいるからである。遺伝子および遺伝子産物を治療の
標的として同定するための手段としてのこのアプローチ
は「ポジショナルクローニング」に基づいた比較的初期
のアプローチに急速に取って代わりつつある。表現型、
つまり生物学的機能または遺伝病、が同定され、続いて
その遺伝子地図の位置を手がかりとして病因遺伝子が突
き止められるだろう。機能性遺伝子科学は、ハイスルー
プットＤＮＡ配列決定技術および現在入手できる多くの
分子生物学データベースから興味のもてそうな遺伝子配
列を同定するための生物情報科学(bioinformatics)の様
々なツールに大きく依存している。依然として、まだ未
解明の遺伝子およびその関連ポリペプチド／タンパク質
を薬物探索の標的として同定し特性づける必要性が存在
している。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、MPROT15、
特にMPROT15ポリペプチドおよびMPROT15ポリヌクレオチ
ド、組換え物質、並びにその生産方法に関する。もう一
つの態様において、本発明は、高血圧、心筋症、卒中、
心臓病、神経変性、アルツハイマー病およびペプチドホ
ルモンまたはサイトカインのプロセシングに関連した疾
患（以後まとめて「前記疾患」という）の治療をはじめ
とする、前記ポリペプチドおよびポリヌクレオチドの使
用方法に関する。他の態様では、本発明は、本発明によ
り提供される物質を用いてアゴニストおよびアンタゴニ
スト／インヒビターを同定する方法、並びに同定された
化合物を用いてMPROT15平衡異常と関連した症状を治療
することに関する。さらに他の態様において、本発明は
不適当なMPROT15活性またはMPROT15レベルと関連した疾
病を検出するための診断アッセイに関する。

【０００４】

【課題を解決するための手段】一つの態様において、本
発明はMPROT15ポリペプチドに関する。この種のペプチ
ドには、配列番号２の全長にわたる配列番号２のアミノ
酸配列に対して少なくとも７０％の同一性、好ましくは
少なくとも８０％の同一性、より好ましくは少なくとも
９０％の同一性、さらに好ましくは少なくとも９５％の
同一性、最も好ましくは少なくとも９７〜９９％の同一
性を有するアミノ酸配列を含んでなる単離されたポリペ
プチドが含まれる。こうしたポリペプチドとしては配列
番号２のアミノ酸配列を含むものがある。

【０００５】本発明の他のペプチドには、そのアミノ酸
配列が配列番号２の全長にわたる配列番号２のアミノ酸
配列に対して少なくとも７０％の同一性、好ましくは少
なくとも８０％の同一性、より好ましくは少なくとも９
０％の同一性、さらに好ましくは少なくとも９５％の同
一性、最も好ましくは少なくとも９７〜９９％の同一性
を有する単離されたポリペプチドが含まれる。こうした
ポリペプチドとしては配列番号２のアミノ酸配列からな
るポリペプチドがある。本発明の更なるペプチドには、
配列番号１に含まれるヌクレオチド配列を含んでなるポ
リヌクレオチドによりコードされる単離されたポリペプ
チドが含まれる。

【０００６】本発明のポリペプチドはメタロプロテアー
ゼファミリーのメンバーであると考えられる。それゆ
え、それらには興味がもてる。なぜなら、メタロプロテ
アーゼは疾患病理学において重要な役割を果たしている
からである。したがって、選択的なプロテアーゼアンタ
ゴニストまたはアゴニストを設計またはスクリーニング
することは新規薬剤の開発につながりうる(Seife,C., S
cience 277,1602-1603)。これらの特性を以後「MPROT15
活性」または「MPROT15ポリペプチド活性」または「MPR
OT15の生物学的活性」という。これらの活性の中には、
前記MPROT15ポリペプチドの抗原性および免疫原性活
性、特に配列番号２のポリペプチドの抗原性および免疫
原性活性も含まれる。本発明のポリペプチドはMPROT15
の少なくとも１つの生物学的活性を示すことが好まし
い。

【０００７】本発明のポリペプチドは「成熟」タンパク
質の形であっても、前駆体または融合タンパク質のよう
な、より大きいタンパク質の一部であってもよい。しば
しば、追加のアミノ酸配列を含めることが有利であり、
このようなアミノ酸配列としては、分泌すなわちリーダ
ー配列、プロ配列、多重ヒスチジン残基のような精製に
役立つ配列、または組換え生産の間の安定性を確保する
付加的配列などがある。

【０００８】また、前記ポリペプチドの変異体、すなわ
ち同類アミノ酸置換（ある残基が性質の似ている他の残
基により置換される）により基準ポリペプチドと相違し
ているポリペプチドも本発明に含まれる。典型的なこう
した置換は、Ala, Val, Leuおよび Ileの間；Ser とThr
の間；酸性残基 AspとGlu の間；Asn とGln の間；塩
基性残基 LysとArg の間；または芳香族残基 PheとTyr
の間で起こる。特に、数個、５〜１０個、１〜５個、１
〜３個、１〜２個または１個のアミノ酸が任意の組合せ
で置換、欠失または付加されている変異体が好適であ
る。

【０００９】本発明のポリペプチドは任意の適当な方法
で製造することができる。このようなポリペプチドに
は、単離された天然のポリペプチド、組換え的に生産さ
れたポリペプチド、合成的に製造されたポリペプチド、
またはこれらの方法の組合せにより製造されたポリペプ
チドが含まれる。こうしたポリペプチドを製造するため
の手段は当業界でよく理解されている。

【００１０】本発明の更なる態様において、本発明は、
MPROT15ポリヌクレオチドに関する。このようなポリヌ
クレオチドには、配列番号２の全長にわたる配列番号２
のアミノ酸配列に対して少なくとも７０％の同一性、好
ましくは少なくとも８０％の同一性、より好ましくは少
なくとも９０％の同一性、さらに好ましくは少なくとも
９５％の同一性を有するポリペプチドをコードするヌク
レオチド配列を含んでなる単離されたポリヌクレオチド
が含まれる。これに関して、少なくとも９７％の同一性
を有するポリペプチドが一層好ましいが、少なくとも９
８〜９９％の同一性を有するものがより一層好ましく、
少なくとも９９％の同一性を有するポリペプチドが最も
好ましいものである。かかるポリヌクレオチドとして、
配列番号２のポリペプチドをコードする配列番号１に含
まれるヌクレオチド配列を含んでなるポリヌクレオチド
が挙げられる。

【００１１】本発明の更なるポリヌクレオチドには、配
列番号２のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列
に対して、その全コード領域にわたって、少なくとも７
０％の同一性、好ましくは少なくとも８０％の同一性、
より好ましくは少なくとも９０％の同一性、さらに好ま
しくは少なくとも９５％の同一性を有するヌクレオチド
配列を含んでなる単離されたポリヌクレオチドが含まれ
る。これに関して、少なくとも９７％の同一性を有する
ポリヌクレオチドが一層好ましいが、少なくとも９８〜
９９％の同一性を有するものがより一層好ましく、少な
くとも９９％の同一性を有するポリヌクレオチドが最も
好ましいものである。

【００１２】本発明の更なるポリヌクレオチドには、配
列番号１の全長にわたる配列番号１のポリヌクレオチド
に対して少なくとも７０％の同一性、好ましくは少なく
とも８０％の同一性、より好ましくは少なくとも９０％
の同一性、さらに好ましくは少なくとも９５％の同一性
を有するヌクレオチド配列を含んでなる単離されたポリ
ヌクレオチドが含まれる。これに関して、少なくとも９
７％の同一性を有するポリヌクレオチドが一層好ましい
が、少なくとも９８〜９９％の同一性を有するものがよ
り一層好ましく、少なくとも９９％の同一性を有するポ
リヌクレオチドが最も好ましいものである。かかるポリ
ヌクレオチドとして、配列番号１のポリヌクレオチドを
含んでなるポリヌクレオチドおよび配列番号１のポリヌ
クレオチドが挙げられる。本発明はまた、上記の全ての
ポリヌクレオチドに対して相補的なポリヌクレオチドを
提供する。

【００１３】配列番号１のヌクレオチド配列はマウス精
巣特異的アンギオテンシン変換酵素(Howardら、Mol.Cel
l.Biol.,10,4294-302,1990)との相同性を示す。配列番
号１のヌクレオチド配列はｃＤＮＡ配列であり、配列番
号２のポリペプチドである805個のアミノ酸のポリペプ
チドをコードするポリペプチドコード配列(ヌクレオチ
ド番号1〜2413)を含む。配列番号２のポリペプチドをコ
ードするヌクレオチド配列は、配列番号１に含まれるポ
リペプチドコード配列と同一であっても、遺伝子コード
の重複性（縮重）のため、やはり配列番号２のポリペプ
チドをコードする、配列番号１に含まれる配列以外の配
列であってもよい。配列番号２のポリペプチドはメタロ
プロテアーゼファミリーの他のタンパク質と構造的に関
連しており、ヒト精巣特異的アンギオテンシン変換酵素
(Ehlersら、Proc.Natl.Acad.Sci.,86(20)7741-7745,198
9)との相同性および／または構造類似性を有する。

【００１４】本発明の好適なポリペプチドおよびポリヌ
クレオチドは、とりわけ、それと相同なポリペプチドお
よびポリヌクレオチドと同様の生物学的機能／性質をも
つことが期待される。さらに、本発明の好ましいポリペ
プチドおよびポリヌクレオチドは少なくとも１つのMPRO
T15活性を有する。

【００１５】また、本発明は、配列番号１および配列番
号２の対応する全長配列の決定に先立って最初に同定さ
れた部分的なまたは他のポリヌクレオチドおよびポリペ
プチドに関する。したがって、更なる態様において、本
発明は、(a) 配列番号３の全長にわたる配列番号３のヌ
クレオチド配列に対して少なくとも７０％の同一性、好
ましくは少なくとも８０％の同一性、より好ましくは少
なくとも９０％の同一性、さらに好ましくは少なくとも
９５％の同一性、最も好ましくは９７〜９９％の同一性
を有するヌクレオチド配列を含んでなるポリヌクレオチ
ド、(b) 配列番号３の全長にわたる配列番号３のヌクレ
オチド配列に対して少なくとも７０％の同一性、好まし
くは少なくとも８０％の同一性、より好ましくは少なく
とも９０％の同一性、さらに好ましくは少なくとも９５
％の同一性、最も好ましくは９７〜９９％の同一性を有
するヌクレオチド配列を有するポリヌクレオチド、(c)
配列番号３のヌクレオチド配列からなるポリヌクレオチ
ド、または(d) 配列番号４の全長にわたる配列番号４の
アミノ酸配列に対して少なくとも７０％の同一性、好ま
しくは少なくとも８０％の同一性、より好ましくは少な
くとも９０％の同一性、さらに好ましくは少なくとも９
５％の同一性、最も好ましくは９７〜９９％の同一性を
有するアミノ酸配列からなるポリペプチドをコードする
ヌクレオチド配列からなるポリヌクレオチド、を提供す
る。

【００１６】さらに、本発明は、(a) 配列番号４の全長
にわたる配列番号４のアミノ酸配列に対して少なくとも
７０％の同一性、好ましくは少なくとも８０％の同一
性、より好ましくは少なくとも９０％の同一性、さらに
好ましくは少なくとも９５％の同一性、最も好ましくは
９７〜９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含んでな
るポリペプチド、(b) 配列番号４の全長にわたる配列番
号４のアミノ酸配列に対して少なくとも７０％の同一
性、好ましくは少なくとも８０％の同一性、より好まし
くは少なくとも９０％の同一性、さらに好ましくは少な
くとも９５％の同一性、最も好ましくは９７〜９９％の
同一性を有するアミノ酸配列を有するポリペプチド、
(c) 配列番号４のアミノ酸配列を含んでなるポリペプチ
ド、または(d) 配列番号４のアミノ酸配列からなるポリ
ペプチド、並びに配列番号３に含まれるヌクレオチド配
列を含んでなるポリヌクレオチドによりコードされるポ
リペプチド、を提供する。

【００１７】配列番号３のヌクレオチド配列およびそれ
によりコードされるペプチド配列はエクスプレスド・シ
ーケンス・タグ（Expressed Sequence Tag：ＥＳＴ）配
列から誘導される。当業者であれば、ＥＳＴ配列中に若
干のヌクレオチド配列読み取り誤差が必然的に存在する
ことを理解するであろう（Adams, M.D.ら, Nature 377
(supp)3, 1995を参照のこと）。したがって、配列番号
３のヌクレオチド配列およびそれによりコードされるペ
プチド配列は配列精度において同一の固有の限界を受け
る。さらに、配列番号３によりコードされるペプチド配
列は、最も相同性または構造類似性が高いタンパク質と
同一の領域、または高い相同性および／または構造類似
性（例えば、同類アミノ酸の差異）の領域を含んでい
る。

【００１８】本発明のポリヌクレオチドは、標準的なク
ローニングおよびスクリーニングにより、ヒト皮膚の細
胞中のｍＲＮＡから誘導されたｃＤＮＡライブラリーか
ら、ＥＳＴ分析（Adams, M.D.ら, Science (1991) 252:
1651-1656; Adams, M.D.ら,Nature (1992) 355:632-63
4; Adams, M.D.ら, Nature (1995) 377 Supp:3-174）を
用いて得ることができる。また、本発明のポリヌクレオ
チドはゲノムＤＮＡライブラリーのような天然源から得
ることができ、商業的に入手可能な公知の技法を用いて
合成することもできる。

【００１９】本発明のポリヌクレオチドを本発明のポリ
ペプチドの組換え体生産のために用いる場合、そのポリ
ヌクレオチドには、成熟ポリペプチドのコード配列単
独、または他のコード配列（例えば、リーダーもしくは
分泌配列、プレ−、プロ−もしくはプレプロ−タンパク
質配列、または他の融合ペプチド部分をコードするも
の）と同じリーディングフレーム内にある成熟ポリペプ
チドのコード配列が含まれる。例えば、融合ポリペプチ
ドの精製を容易にするマーカー配列がコードされ得る。
本発明のこの態様の好ましい具体例として、マーカー配
列は、ｐＱＥベクター(Qiagen, Inc.)により提供されか
つ Gentzら, Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1989) 86:8
21-824に記載されるような、ヘキサ−ヒスチジンペプチ
ド、またはＨＡタグである。また、このポリヌクレオチ
ドは5'および3'非コード配列、例えば、転写されるが翻
訳されない配列、スプライシングおよびポリアデニル化
シグナル、リボソーム結合部位、およびｍＲＮＡ安定化
配列を含んでいてもよい。

【００２０】本発明の更なる具体例としては、数個、例
えば５〜１０個、１〜５個、１〜３個、１〜２個、また
は１個のアミノ酸残基が任意の組合せで置換、欠失また
は付加されている、配列番号２のアミノ酸配列を含んで
なるポリペプチド変異体をコードするポリヌクレオチド
がある。

【００２１】配列番号１に含まれるヌクレオチド配列と
同一であるか十分に同一であるポリヌクレオチドは、本
発明のポリペプチドをコードする全長ｃＤＮＡおよびゲ
ノムクローンを単離するために、また、配列番号１に対
して高い配列類似性を有する他の遺伝子（ヒト起源由来
のパラログ体(paralogs)ならびにヒト以外の種に由来す
るオーソログ体(ortholog)およびパラログ体をコードす
る遺伝子を含む）のｃＤＮＡおよびゲノムクローンを単
離するために、ｃＤＮＡおよびゲノムＤＮＡ用のハイブ
リダイゼーションプローブとして、または核酸増幅（Ｐ
ＣＲ）反応用のプライマーとして用いることができる。
一般的に、これらのヌクレオチド配列は基準のヌクレオ
チド配列と７０％、好ましくは８０％、より好ましくは
９０％、最も好ましくは９５％同一である。プローブま
たはプライマーはたいてい１５個以上のヌクレオチドを
含み、好ましくは３０個以上を含み、５０個以上のヌク
レオチドを有していてもよい。特に好ましいプローブは
３０〜５０個の範囲のヌクレオチドを有するものであ
る。特に好ましいプライマーは２０〜２５個の範囲のヌ
クレオチドを有するものである。

【００２２】本発明のポリペプチド（ヒト以外の種に由
来する相同体を含む）をコードするポリヌクレオチド
は、配列番号１のヌクレオチド配列またはその断片を有
する標識プローブを用いて、ストリンジェントなハイブ
リダイゼーション条件下で適当なライブラリーをスクリ
ーニングし、該ポリヌクレオチド配列を含む全長ｃＤＮ
Ａおよびゲノムクローンを単離する各工程を含んでなる
方法により得られる。このようなハイブリダイゼーショ
ン技法は当業者に公知である。好ましいストリンジェン
トなハイブリダイゼーション条件は、50% ホルムアミ
ド、５×SSC (150mMNaCl, 15mM クエン酸三ナトリウム)
、50mMリン酸ナトリウム (pH7.6)、５×Denhardt溶
液、10% デキストラン硫酸および20μg/mlの変性し剪断
したサケ精子ＤＮＡを含有する溶液中４２℃で一夜イン
キュベートし、次いでフィルターを 0.1×SSC 中約６５
℃で洗浄することを含む。かくして、本発明は、配列番
号１のヌクレオチド配列またはその断片を有する標識プ
ローブを用いて、ストリンジェントなハイブリダイゼー
ション条件下で適当なライブラリーをスクリーニングす
ることにより得られるポリヌクレオチドをも包含する。

【００２３】当業者には理解されるように、多くの場
合、ポリペプチドをコードする領域がそのｃＤＮＡの5'
末端で短く切断されることから、単離されたｃＤＮＡ配
列は不完全であるだろう。それは逆転写酵素のためであ
り、この酵素はもともと「プロセシビティ」（processi
vity：重合反応中に鋳型に結合した状態でいる該酵素の
能力の尺度）が低く、第一鎖ｃＤＮＡ合成の間にｍＲＮ
Ａ鋳型のＤＮＡコピーを完成させることができない。

【００２４】全長ｃＤＮＡを得るための、または短鎖ｃ
ＤＮＡを伸長させるための、当業者に公知で利用可能な
方法がいくつかあり、例えば、ｃＤＮＡ末端高速増幅法
（ＲＡＣＥ）に基づいた方法がある（例えば、Frohman
ら, PNAS USA 85, 8998-9002,1988を参照のこと）。例
えばMarathon^TM技術(Clontech Laboratories Inc.)によ
り示されるような、上記技法の最近の改良により、より
長いｃＤＮＡの検索が大いに簡便化された。Marathon^TM
技術では、所定の組織より抽出されたｍＲＮＡからｃＤ
ＮＡを作製し、各末端に「アダプター」配列を連結す
る。続いて、遺伝子特異的およびアダプター特異的なオ
リゴヌクレオチドプライマーの組合せを用いて核酸増幅
（ＰＣＲ）を行い、ｃＤＮＡの「欠失」5'末端を増幅す
る。次に、「nested」プライマー、すなわち増幅産物の
内部にアニールするように設計されたプライマー（典型
的には、アダプター配列のさらに3'側にアニールするア
ダプター特異的プライマーおよび既知遺伝子配列のさら
に5'側にアニールする遺伝子特異的プライマー）を用い
てＰＣＲ反応を繰り返す。その後、この反応の産物をＤ
ＮＡ塩基配列決定により解析し、この産物を既存のｃＤ
ＮＡに直接結合するか、または5'プライマー設計用の新
たな配列情報を用いて別の全長ＰＣＲを行うことによ
り、全長ｃＤＮＡを構築することができる。

【００２５】本発明の組換え体ポリペプチドは、当業界
で公知の方法を用いて、発現系を含有する遺伝子操作宿
主細胞から生産することができる。したがって、更なる
態様において、本発明は、本発明の１以上のポリヌクレ
オチドを含有する発現系、該発現系により遺伝子操作さ
れた宿主細胞、および組換え法による本発明ポリペプチ
ドの生産に関する。本発明のＤＮＡ構築物から誘導され
たＲＮＡを用いてこの種のタンパク質を生産するため
に、無細胞翻訳系を使用することもできる。

【００２６】組換え体生産に関しては、本発明のポリヌ
クレオチドの発現系またはその一部を組み込むために宿
主細胞を遺伝子操作する。宿主細胞へのポリヌクレオチ
ドの導入は、Davisら, Basic Methods in Molecular Bi
ology (1986) および Sambrookら, Molecular Cloning:
A Laboratory Manual, 2nd Ed., Cold Spring Harbor
Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1989)
などの多くの標準的な実験室マニュアルに記載された方
法により行うことができる。好適なこうした方法とし
て、例えば、リン酸カルシウムトランスフェクション、
ＤＥＡＥ−デキストラン媒介トランスフェクション、ト
ランスベクション(transvection)、マイクロインジェク
ション、カチオン性脂質媒介トランスフェクション、エ
レクトロポレーション、形質導入、スクレープローディ
ング(scrape loading)、弾丸導入(ballistic introduct
ion)または感染などがある。

【００２７】適当な宿主の代表的な例として、細菌細胞
（例：ストレプトコッカス、スタフィロコッカス、大腸
菌、ストレプトミセス、枯草菌）、真菌細胞（例：酵
母、アスペルギルス）、昆虫細胞（例：ドロソフィラＳ
２、スポドプテラＳｆ９）、動物細胞（例：ＣＨＯ、Ｃ
ＯＳ、ＨｅＬａ、Ｃ 127、３Ｔ３、ＢＨＫ、ＨＥＫ 29
3、Bowes メラノーマ細胞）および植物細胞が挙げられ
る。

【００２８】多種多様な発現系を使用することができ
る。こうした発現系として、特に、染色体、エピソーム
およびウイルス由来の系、例えば、細菌プラスミド由
来、バクテリオファージ由来、トランスポゾン由来、酵
母エピソーム由来、挿入因子由来、酵母染色体エレメン
ト由来、ウイルス（例：バキュロウイルス、ＳＶ４０の
ようなパポバウイルス、ワクシニアウイルス、アデノウ
イルス、鶏痘ウイルス、仮性狂犬病ウイルス、レトロウ
イルス）由来のベクター、およびこれらの組合せに由来
するベクター、例えば、コスミドやファージミドのよう
なプラスミドとバクテリオファージの遺伝的要素に由来
するものがある。これらの発現系は発現を起こさせるだ
けでなく発現を調節する制御配列を含んでいてもよい。
一般的に、宿主内でのポリペプチドの産生のためにポリ
ヌクレオチドを維持し、増やし、発現することができる
系またはベクターはどれも使用しうる。Sambrookら, Mo
lecular Cloning: A Laboratory Manual (前掲) に記載
されるような、日常的に用いられる公知の技法のいずれ
かにより、適当なヌクレオチド配列を発現系に挿入する
ことができる。翻訳されたタンパク質を小胞体の内腔
に、細胞周辺腔に、または細胞外の環境に分泌させるた
めに、適当な分泌シグナルを目的のポリペプチドに組み
込むことができる。これらのシグナルは目的のポリペプ
チドに対して内因性であっても、異種シグナルであって
もよい。

【００２９】スクリーニングアッセイで使用するため本
発明のポリペプチドを発現させようとする場合、一般に
そのポリペプチドを細胞の表面に産生させることが好適
である。その場合は、スクリーニングアッセイでの使用
に先立って細胞を回収する。該ポリペプチドが培地に分
泌される場合は、そのポリペプチドを回収し精製するた
めに培地を回収する。細胞内に産生される場合は、その
細胞をまず溶解し、その後にポリペプチドを回収する必
要がある。

【００３０】組換え細胞培養物から本発明のポリペプチ
ドを回収し精製するには、硫酸アンモニウムまたはエタ
ノール沈殿、酸抽出、アニオンまたはカチオン交換クロ
マトグラフィー、ホスホセルロースクロマトグラフィ
ー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、アフィニティ
ークロマトグラフィー、ヒドロキシルアパタイトクロマ
トグラフィーおよびレクチンクロマトグラフィーを含め
た公知の方法を用いることができる。最も好ましくは、
高性能液体クロマトグラフィーが精製に用いられる。ポ
リペプチドが細胞内合成、細胞内合成、単離および／ま
たは精製中に変性されるときは、タンパク質を再生させ
るための公知の技法を用いて、活性のあるコンフォメー
ションを復元することが可能である。

【００３１】本発明はまた、診断薬としての本発明のポ
リヌクレオチドの使用に関する。機能障害と関連した、
配列番号１のポリヌクレオチドにより特徴づけられる遺
伝子の変異型の検出は、該遺伝子の過少発現、過剰発現
または空間的もしくは時間的に変化した発現により生ず
る疾病またはその疾病への罹りやすさの診断に追加しう
る、またはその診断を下しうる診断用ツールを提供する
だろう。該遺伝子に突然変異がある個体を、さまざまな
技法によりＤＮＡレベルで見つけ出すことができる。

【００３２】診断用の核酸は、被験者の細胞、例えば血
液、尿、唾液、組織の生検または剖検材料由来の細胞か
ら得ることができる。検出のためにゲノムＤＮＡを直接
使用してもよいし、分析前にＰＣＲまたは他の増幅法を
使ってゲノムＤＮＡを酵素的に増幅してもよい。同様の
方法でＲＮＡまたはｃＤＮＡを使用することもできる。
欠失および挿入突然変異は、正常な遺伝子型と比較した
ときの増幅産物のサイズの変化により検出できる。点突
然変異は増幅ＤＮＡを標識MPROT15ヌクレオチド配列と
ハイブリダイズさせることで同定できる。完全にマッチ
した配列とミスマッチの二重鎖とはＲＮアーゼ消化によ
り、または融解温度の差異により区別できる。また、Ｄ
ＮＡ配列の差異は、変性剤を含むもしくは含まないゲル
でのＤＮＡ断片の電気泳動の移動度の変化により、また
は直接ＤＮＡ塩基配列決定によっても検出できる（例え
ば、Myersら, Science (1985) 230:1242 を参照のこ
と）。特定位置での配列変化はヌクレアーゼプロテクシ
ョンアッセイ（例えば、ＲＮアーゼおよびＳ１プロテク
ション）または化学的開裂法によっても確認できる（Co
ttonら, Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1985) 85:4397-
4401を参照のこと）。別の実施態様では、例えば、遺伝
子変異の効率のよいスクリーニングを行うため、MPROT1
5ヌクレオチド配列またはその断片を含むオリゴヌクレ
オチドプローブのアレイ(array)を構築することができ
る。アレイ技法は公知で、一般的な適用可能性を有し、
遺伝子発現、遺伝的連鎖および遺伝的変異性を含めた分
子遺伝学のさまざまな問題を解きあかすために用いられ
ている（例えば、M. Cheeら, Science, Vol.274, pp.61
0-613 (1996) を参照のこと）。

【００３３】診断アッセイは、前記の方法によりMPROT1
5遺伝子の変異を検出することで、前記疾患への罹りや
すさを診断または判定する方法を提供する。さらに、被
験者から得られたサンプルからポリペプチドまたはｍＲ
ＮＡのレベルの異常な低下または増加を測定する方法に
より、前記疾患の診断を下すことができる。発現の低下
または増加は、当業界で公知のポリヌクレオチドの定量
法、例えば核酸増幅（例：ＰＣＲ、ＲＴ−ＰＣＲ）、Ｒ
Ｎアーゼプロテクション、ノーザンブロッティング、そ
の他のハイブリダイゼーション法のいずれかによりＲＮ
Ａレベルで測定することができる。宿主から得られたサ
ンプル中の本発明ポリペプチドのようなタンパク質のレ
ベルを測定するアッセイ法は当業者によく知られてい
る。こうしたアッセイ法として、ラジオイムノアッセ
イ、競合結合アッセイ、ウエスタンブロット分析、ＥＬ
ＩＳＡアッセイなどがある。

【００３４】かくして、もう一つの態様において、本発
明は、(a) 本発明のポリヌクレオチド（好ましくは、配
列番号１のヌクレオチド配列）もしくはその断片、(b)
(a) のヌクレオチド配列に相補的なヌクレオチド配列、
(c) 本発明のポリペプチド（好ましくは、配列番号２の
ポリペプチド）もしくはその断片、または(d) 本発明の
ポリペプチド（好ましくは、配列番号２のポリペプチ
ド）に対する抗体、を含んでなる診断用キットに関す
る。このようなキットにおいて、(a) 、(b) 、(c) また
は (d)が実質的な構成成分であることが理解されよう。
かかるキットは疾患または疾患への罹りやすさ、特に高
血圧、心筋症、卒中、心臓病、神経変性、アルツハイマ
ー病およびペプチドホルモンまたはサイトカインのプロ
セシングに関連した疾患を診断するうえで有用である。

【００３５】また、本発明のヌクレオチド配列は染色体
の位置決定にも有用である。この配列は個々のヒト染色
体上の特定の位置をターゲッティングし、その特定位置
とハイブリダイズすることができる。本発明に従って関
連配列の染色体地図を作成することは、これらの配列と
遺伝子関連疾患とを相関させるうえで重要な第一段階で
ある。ひとたび配列が正確な染色体位置にマップされた
ら、その染色体上のその配列の物理的位置を遺伝地図デ
ータと相関させることができる。この種のデータは、例
えば、V. McKusick, Mendelian Inheritance in Man (J
ohns Hopkins University Welch Medical Library から
オンラインで入手可能) 中に見いだせる。その後、同一
の染色体領域にマップされた遺伝子と疾患との関係を連
鎖解析（物理的に隣接した遺伝子の共遺伝）により確認
する。

【００３６】罹患個体と非罹患個体とのｃＤＮＡまたは
ゲノム配列の差異も調べることができる。罹患個体の一
部または全部に突然変異が観察されるが、どの正常個体
にも観察されない場合は、その突然変異が疾患の原因で
ある可能性がある。本発明の遺伝子はヒト染色体ヒト染
色体Xp22にマップされる。

【００３７】また、本発明のヌクレオチド配列は、組織
の位置決定にも有用である。こうした技術によって、組
織におけるヒトMPROT15ポリペプチドの発現パターン
を、これらをコードするｍＲＮＡを検出することで決定
することができる。これらの技術には、in situのハイ
ブリダイゼーション技術、およびヌクレオチド増幅技術
(例えばＰＣＲ)が挙げられる。こうした技術は当該技術
分野で周知である。これらの研究の結果から、生物にお
けるポリペプチドの正常な機能の指標が得られる。さら
に、ヒトMPROT15ｍＲＮＡの標準的な発現パターンとヒ
トMPROT15遺伝子によってコードされるｍＲＮＡの発現
パターンとの比較検討により、疾患状態における突然変
異体ヒトMPROT15ポリペプチドの役割、あるいは正常な
ヒトMPROT15ポリペプチドの不適切な発現の役割につい
ての有益な知見が得られる。そうした不適切な発現は、
時間的、空間的または単に量的な性質のものでもあり得
る。

【００３８】本発明のポリペプチド、その断片もしくは
類似体、またはそれらを発現する細胞は、本発明のポリ
ペプチドに免疫特異的な抗体を生産するための免疫原と
しても使用することができる。「免疫特異的」とは、そ
の抗体が従来技術における他の関連ポリペプチドに対す
るその親和性よりも本発明のポリペプチドに対して実質
的に高い親和性を示すことを意味する。

【００３９】本発明のポリペプチドに対する抗体は、慣
用のプロトコールを用いて、動物（好ましくはヒト以外
の動物）に該ポリペプチドまたはエピトープを含む断
片、類似体もしくは細胞を投与することにより得られ
る。モノクローナル抗体の調製には、連続細胞系の培養
物から抗体を産生させる任意の技法を用いることができ
る。例を挙げると、ハイブリドーマ法 (Kohler, G.およ
びMilstein, C., Nature (1975) 256:495-497)、トリオ
ーマ法、ヒトＢ細胞ハイブリドーマ法 (Kozborら,Immun
ology Today (1983) 4:72) およびＥＢＶ−ハイブリド
ーマ法 (Coleら, Monoclonal Antibodies and Cancer T
herapy, pp.77-96, Alan R. Liss, Inc., 1985) などが
ある。

【００４０】本発明のポリペプチドに対する一本鎖抗体
をつくるために、米国特許第4,946,778号に記載される
ような一本鎖抗体の調製法を適応させることができる。
また、ヒト化抗体を発現させるために、トランスジェニ
ックマウスまたは他の哺乳動物を含む他の生物を利用す
ることができる。前記の抗体を用いて、そのポリペプチ
ドを発現するクローンを単離・同定したり、アフィニテ
ィークロマトグラフィーでそのポリペプチドを精製する
こともできる。本発明のポリペプチドに対する抗体は、
とりわけ、前記疾患の治療に使用できる可能性がある。

【００４１】本発明の更なる態様において、本発明は、
本発明のポリペプチドまたはその断片と、各種サブクラ
ス（ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＥ）の免疫グロブリ
ンのＨ鎖またはＬ鎖の定常領域の様々な部分と、を含ん
でなる遺伝子工学的に作製された可溶性融合タンパク質
に関する。免疫グロブリンとしてはヒトＩｇＧ、特にＩ
ｇＧ１のＨ鎖の定常部が好ましく、その場合は融合がヒ
ンジ領域で起こる。特定例では、血液凝固因子Ｘａで開
裂され得る開裂配列を組み込むことで、Ｆｃ部分を簡単
に除去できる。さらに、本発明は、これら融合タンパク
質の遺伝子工学的作製方法、並びに薬物スクリーニン
グ、診断および治療におけるそれらの使用に関する。ま
た、本発明の更なる態様はこのような融合タンパク質を
コードするポリヌクレオチドに関する。融合タンパク質
技術の例は国際特許出願 WO94/29458 およびWO94/22914
に見いだせる。

【００４２】本発明の更なる態様は哺乳動物において免
疫学的応答を引き出す方法に関し、この方法は、特に前
記疾患から該動物を防御するための抗体および／または
Ｔ細胞免疫応答を生ずるのに十分な本発明のポリペプチ
ドを哺乳動物に接種することを含んでなる。本発明のさ
らに別の態様は、哺乳動物を前記疾患から防御する抗体
を産生させるような免疫学的応答を引き出すために、in
vivo で本発明のポリペプチドをコードするポリヌクレ
オチドの発現を指令するベクターを介して該ポリペプチ
ドを供給することを含んでなる、哺乳動物において免疫
学的応答を引き出す方法に関する。

【００４３】本発明の更なる態様は、哺乳動物宿主に導
入したとき、その哺乳動物において本発明のポリペプチ
ドに対する免疫学的応答を引き出す免疫学的／ワクチン
製剤（組成物）に関し、この組成物は本発明のポリペプ
チドまたはポリヌクレオチドを含有する。ワクチン製剤
は適当な担体をさらに含んでいてもよい。ポリペプチド
は胃の中で分解される可能性があるので、非経口的に
（例えば、皮下、筋肉内、静脈内または皮内注射によ
り）投与することが好ましい。非経口投与に適した製剤
としては、酸化防止剤、緩衝剤、静菌剤およびこの製剤
を受容者の血液と等張にする溶質を含みうる水性および
非水性の無菌注射液、並びに懸濁化剤または増粘剤を含
みうる水性および非水性の無菌懸濁液がある。こうした
製剤は１回量容器または数回量容器（例えば、密閉アン
プルおよびバイアル）で提供することができ、また、使
用直前に無菌の液状担体を添加するだけでよい凍結乾燥
状態で保管することもできる。ワクチン製剤はこの製剤
の免疫原性を増強するためのアジュバント系、例えば水
中油型のアジュバント系や当業界で公知の他のアジュバ
ント系を含んでいてもよい。投与量はワクチンの比活性
により変化するが、ルーチンな実験操作により簡単に決
定できる。

【００４４】本発明のポリペプチドは、１以上の病的状
態、特に前記疾患を含めて、１以上の生物学的機能に関
与している。それゆえ、このポリペプチドの機能を刺激
または抑制する化合物を同定するスクリーニング法を開
発することが望ましい。したがって、更なる態様におい
て、本発明は、このポリペプチドの機能を刺激または抑
制する化合物を同定するための化合物のスクリーニング
法を提供する。一般的には、前記疾患の治療および予防
目的のためにアゴニストまたはアンタゴニストが使用さ
れる。種々の供給源、例えば、細胞、無細胞調製物、化
学物質ライブラリーおよび天然産物の混合物から化合物
を同定することができる。このように同定されたアゴニ
スト、アンタゴニストまたはインヒビターは、場合によ
り、該ポリペプチドの天然のまたは修飾された基質、リ
ガンド、受容体、酵素などであってよく、また、その構
造的または機能的なミメティックであってもよい（Coli
ganら, Current Protocols in Immunology 1(2): Chapt
er 5 (1991)を参照のこと）。

【００４５】スクリーニング法では、本発明のポリペプ
チド、または該ポリペプチドを担持する細胞もしくは
膜、またはその融合タンパク質への候補化合物の結合
を、候補化合物に直接または間接的に結合された標識を
用いて簡単に測定できる。あるいはまた、スクリーニン
グ法では標識した競合物質との競合を用いることもあ
る。さらに、こうしたスクリーニング法では、候補化合
物がポリペプチドの活性化または抑制により生ずるシグ
ナルを結果的にもたらすか否かを、該ポリペプチドを担
持する細胞に適した検出系を用いて試験することができ
る。一般的には、既知のアゴニストの存在下で活性化の
インヒビターをアッセイして、アゴニストによる活性化
に候補化合物の存在が与える影響を調べる。アゴニスト
またはインヒビターの不在下で、候補化合物がポリペプ
チドの活性化を抑制するか否かを調べることによる逆ア
ゴニストまたはインヒビターのスクリーニング法では、
構成的に活性のあるポリペプチドが用いられる。さら
に、これらのスクリーニング法は、候補化合物と本発明
のポリペプチドを含む溶液とを混ぜ合わせて混合物をつ
くり、この混合物中のMPROT15活性を測定し、そしてこ
の混合物のMPROT15活性をスタンダードと比較する各ス
テップを単に含むだけでよい。本発明のポリペプチドの
アンタゴニストを同定するハイスループットスクリーニ
ングアッセイでは、上記のようなＦｃ部分とMPROT15ポ
リペプチドから作製されるような融合タンパク質も使用
することができる(D. Bennettら, J. Mol. Recognitio
n, 8:52-58 (1995)およびK. Johansonら, J. Biol. Che
m., 270(16):9459-9471 (1995)を参照のこと）。

【００４６】また、本発明のポリヌクレオチド、ポリペ
プチドまたは該ポリペプチドに対する抗体を用いて、細
胞内でのｍＲＮＡまたはポリペプチドの産生に及ぼす添
加化合物の作用を検出するためのスクリーニング法を組
み立てることができる。例えば、当業界で公知の標準方
法によりモノクローナルまたはポリクローナル抗体を用
いて、ポリペプチドの分泌レベルまたは細胞結合レベル
を測定するためのＥＬＩＳＡアッセイを構築することが
でき、これは適切に操作された細胞または組織からのポ
リペプチドの産生を抑制または増強する物質（それぞれ
アンタゴニストまたはアゴニストともいう）の探索に用
いることができる。

【００４７】膜に結合した受容体または可溶性の受容体
が存在するのであれば、当業界で公知の標準的な受容体
結合法によりこの種の受容体を同定するために本発明の
ポリペプチドを用いることができる。こうした受容体結
合法には、限定するものではないが、リガンド結合アッ
セイおよび架橋アッセイがあり、これらのアッセイで
は、ポリペプチドを放射性アイソトープ（例：¹²⁵I）で
標識するか、化学的に修飾（例：ビオチン化）するか、
または検出や精製に適したペプチド配列に融合させ、そ
して推定上の受容体源（細胞、細胞膜、細胞上清、組織
抽出物、体液など）とインキュベートする。その他の方
法としては、表面プラズモン共鳴および分光学のような
生物物理的方法がある。これらのスクリーニング法は、
該ポリペプチドまたは（存在するのであれば）その受容
体への結合と競合する該ポリペプチドのアゴニストまた
はアンタゴニストを同定するために用いることもでき
る。スクリーニングアッセイを行うための標準的な方法
は当業界でよく理解されている。

【００４８】本発明のポリペプチドの潜在的なアンタゴ
ニストの例としては、抗体、ある場合には、該ポリペプ
チドのリガンド、基質、受容体、酵素などと密接な関係
があるオリゴヌクレオチドもしくはタンパク質（例え
ば、リガンド、基質、受容体、酵素などの断片）、また
は本発明のポリペプチドと結合するが応答を誘導しない
（それゆえ該ポリペプチドの活性を妨げる）小分子など
がある。

【００４９】かくして、他の態様において、本発明は、
本発明のポリペプチドのアゴニスト、アンタゴニスト、
リガンド、受容体、基質、酵素など、またはこの種のポ
リペプチドの産生を低下または増加させる化合物を同定
するためのスクリーニングキットに関し、このキット
は、(a) 本発明のポリペプチド、(b) 本発明のポリペプ
チドを発現している組換え細胞、(c) 本発明のポリペプ
チドを発現している細胞膜、または(d) 本発明のポリペ
プチドに対する抗体、を含んでなり、前記ポリペプチド
は好ましくは配列番号２のポリペプチドである。このよ
うなキットにおいて、(a) 、(b) 、(c) または (d)が実
質的な構成成分であることが理解されよう。

【００５０】当業者であれば、本発明のポリペプチド
は、その構造に基づいて該ポリペプチドのアゴニスト、
アンタゴニストまたはインヒビターを設計する方法にも
使用できることが容易に理解されよう。この方法は、
(a) 最初に該ポリペプチドの三次元構造を解析し、(b)
アゴニスト、アンタゴニストまたはインヒビターの確実
と思われる反応部位または結合部位の三次元構造を想定
し、(c) 想定された反応部位または結合部位と結合また
は反応すると予想される候補化合物を合成し、そして
(d) その候補化合物が実際にアゴニスト、アンタゴニス
トまたはインヒビターであるか否かを調べる、ことを含
んでなる。これは通常反復プロセスであることがさらに
理解されよう。

【００５１】更なる態様において、本発明は、MPROT15
ポリペプチド活性の過剰量と不足量のいずれかに関係し
た、例えば高血圧、心筋症、卒中、心臓病、神経変性、
アルツハイマー病およびペプチドホルモンまたはサイト
カインのプロセシングに関連した疾患などの異常な状態
の治療法を提供する。

【００５２】該ポリペプチドの活性が過剰である場合
は、いくつかのアプローチが利用可能である。一つのア
プローチは、例えば、リガンド、基質、受容体、酵素な
どの結合をブロックすることにより、または第２のシグ
ナルを抑制することで異常な状態を軽減することによ
り、該ポリペプチドの機能を抑制するのに有効な量で、
上記のインヒビター化合物（アンタゴニスト）を製剤学
上許容される担体とともに患者に投与することを含んで
なる。もう一つのアプローチでは、内因性のポリペプチ
ドとの競合状態でリガンド、基質、酵素、受容体などと
結合する能力がまだある可溶性形態のポリペプチドを投
与することができる。このような競合物質の典型的な例
はMPROT15ポリペプチドの断片である。

【００５３】さらに別のアプローチでは、発現阻止法を
使って内因性MPROT15ポリペプチドをコードする遺伝子
の発現を抑制することができる。こうした公知技術は、
体内で産生されるか体外から投与されるアンチセンス配
列の使用を必要とする（例えば、Oligodeoxynucleotide
s as Antisense Inhibitors of Gene Expression (遺伝
子発現のアンチセンスインヒビターとしてのオリゴデオ
キシヌクレオチド), CRC Press, Boca Raton, FL (198
8) 中のO'Connor, J. Neurochem (1991) 56:560を参照
のこと）。あるいはまた、この遺伝子と共に三重らせん
(トリプレックス)を形成するオリゴヌクレオチドを供給
することもできる（例えば、Leeら, Nucleic Acids Res
(1979) 6:3073; Cooneyら, Science (1988) 241:456;
Dervanら,Science (1991) 251:1360 を参照のこと）。
これらのオリゴマーはそれ自体を投与することもできる
し、関連オリゴマーをin vivo で発現させることもでき
る。合成アンチセンスまたはトリプレックスオリゴヌク
レオチドは修飾塩基または修飾骨格を含みうる。後者の
例にはメチルホスホネート、ホスホロチオエートまたは
ペプチド核酸骨格が含まれる。そうした骨格はアンチセ
ンスまたはトリプレックスオリゴヌクレオチド中に取り
込まれてヌクレアーゼによる分解からの防御を提供して
おり、当分野で公知である。これらの、または他の修飾
骨格を用いて合成されたアンチセンスおよびトリプレッ
クス分子も本発明の一部を構成する。

【００５４】さらに、ヒトMPROT15ポリペプチドの発現
は、ヒトMPROT15ｍＲＮＡ配列に特異的なリボザイムを
用いることにより阻止することができる。リボザイムは
触媒的に活性なＲＮＡであり、天然のものでも合成され
たものでも良い(例えば、Usman, Nら、Curr. Opin. Str
uct. Biol. (1996)6(4), 527-33を参照されたい)。合成
リボザイムは、選択した部位でヒトMPROT15ｍＲＮＡを
特異的に切断するように設計することができ、それによ
りヒトMPROT15ｍＲＮＡから機能性ポリペプチドへの翻
訳が阻止される。通常ＲＮＡ分子に見られるような天然
のリボースリン酸骨格および天然の塩基を用いてリボザ
イムを合成することもできる。また、リボヌクレアーゼ
分解からの防御を提供するために非天然骨格を用いてリ
ボザイム、例えば、2'-Ｏ-メチルＲＮＡを合成すること
も可能で、該リボザイムは修飾塩基を含みうる。

【００５５】MPROT15およびその活性の過少発現に関係
した異常な状態を治療する場合も、いくつかのアプロー
チを取ることができる。一つのアプローチは、治療に有
効な量の本発明ポリペプチドを活性化する化合物（すな
わち、前記アゴニスト）を製剤学上許容される担体とと
もに患者に投与して、異常な状態を緩和することを含ん
でなる。別法として、患者の関連細胞においてMPROT15
を内因的に産生させるために遺伝子治療を用いることが
できる。例えば、上で述べたような複製欠損レトロウイ
ルスベクターによる発現のために本発明のポリヌクレオ
チドを遺伝子操作する。次にレトロウイルス発現構築物
を単離し、本発明のポリペプチドをコードするＲＮＡを
含有するレトロウイルスプラスミドベクターで形質導入
されたパッケージング細胞に導入する。その結果、パッ
ケージング細胞は対象の遺伝子を含有する感染性のウイ
ルス粒子を産生するようになる。in vivo 細胞操作およ
びinvivo ポリペプチド発現のために、これらのプロデ
ューサー細胞を患者に投与する。遺伝子治療の概論に関
しては、Human Molecular Genetics, T Strachan andA
P Read, BIOS Scientific Publishers Ltd (1996)中のC
hapter 20, Gene Therapy and other Molecular Geneti
c-based Therapeutic Approaches(およびその中の引用
文献) を参照のこと。もう一つのアプローチは治療量の
本発明のポリペプチドを適当な製剤学上の担体とともに
投与することである。

【００５６】更なる態様において、本発明は、治療に有
効な量のポリペプチド（例えば、可溶性形態の本発明ポ
リペプチド）、アゴニストもしくはアンタゴニストペプ
チド、または小分子化合物を製剤学上許容される担体ま
たは賦形剤と共に含有する医薬組成物を提供する。この
種の担体としては、食塩水、生理食塩水、デキストロー
ス、水、グリセロール、エタノール、およびこれらの組
合せがあるが、これらに限らない。本発明はさらに、上
記の本発明組成物の１以上の成分を充填した１以上の容
器を含んでなる医薬パックおよびキットに関する。本発
明のポリペプチドおよび他の化合物は単独で使用して
も、他の化合物、例えば治療用化合物と一緒に使用して
もよい。

【００５７】医薬組成物は投与経路、例えば全身または
経口による投与経路に適合させることができる。全身投
与に適した形態は、注入（注射）、典型的には静注であ
る。皮下、筋肉内または腹腔内のような他の注入経路も
使用できる。全身投与の別の手段には、胆汁酸塩、フシ
ジン酸、その他の界面活性剤などの浸透剤を用いた経粘
膜および経皮投与がある。さらに、本発明のポリペプチ
ドまたは他の化合物を腸溶剤またはカプセル剤として製
剤化し得るのであれば、経口投与も可能である。これら
の化合物を軟膏、ペースト、ゲルなどの剤形で局所に投
与しても、かつ／または局在化させてもよい。

【００５８】必要な投与量範囲は、本発明のペプチドま
たは他の化合物の選択、投与経路、製剤の性質、患者の
状態、そして医師の判断に左右される。しかし、適当な
投与量は患者の体重１kgあたり0.1〜100μgの範囲であ
る。入手可能な化合物が多様であること、投与経路の効
率が異なることを考慮すれば、必要とされる投与量は広
範に変動することが予測される。例えば、経口投与は静
注による投与よりも高い投与量を必要とすると予想され
よう。こうした投与量レベルの変動は、当業界でよく理
解されているような、標準的経験的な最適化手順を用い
て調整することができる。

【００５９】治療に用いるポリペプチドは、上述したよ
うな「遺伝子治療」と称する治療法において、患者の体
内で産生させることもできる。例えば、患者由来の細胞
を、ポリペプチドをコードするＤＮＡまたはＲＮＡのよ
うなポリヌクレオチドにより、例えばレトロウイルスプ
ラスミドベクターを用いて、ex vivo で遺伝子工学的に
操作する。その後、これらの細胞を患者に導入する。

【００６０】ポリヌクレオチドおよびポリペプチドの配
列は、類似の相同性を有する別の配列を同定する際の価
値ある情報源を提供する。これは、こうした配列をコン
ピュータ読み取り可能媒体中に保存し、次に保存したデ
ータを用いてＧＣＧおよびLasergeneソフトウェアパッ
ケージのような公知の検索ツールにより配列データベー
スを検索することで最大限促進される。したがって、更
なる態様において、本発明は、配列番号１の配列を含ん
でなるポリヌクレオチドおよび／またはそれによりコー
ドされるポリペプチドを保存したコンピュータ読み取り
可能媒体を提供する。

【００６１】以下の定義は上記の説明中でしばしば用い
られた用語を理解しやすくするためのものである。本明
細書中で用いる「抗体」には、ポリクローナルおよびモ
ノクローナル抗体、キメラ抗体、一本鎖抗体、ヒト化抗
体、さらにＦａｂまたは他の免疫グロブリン発現ライブ
ラリーの産物を含むＦａｂフラグメントが含まれる。
「単離された」とは、天然の状態から「人間の手によっ
て」改変されたことを意味する。「単離された」組成物
または物質が天然に存在するのであれば、それはそのも
との環境から変化しているか分離されており、またはそ
の両方である。例えば、生存している動物の体内に自然
界で存在するポリヌクレオチドまたはポリペプチドは
「単離された」ものではないが、その天然状態の共存物
質から分離されたポリヌクレオチドまたはポリペプチド
は、本明細書中で用いられるように、「単離された」も
のである。

【００６２】「ポリヌクレオチド」とは、一般に任意の
ポリリボヌクレオチドまたはポリデオキシリボヌクレオ
チドをさし、これは修飾されていないＲＮＡもしくはＤ
ＮＡ、または修飾されたＲＮＡもしくはＤＮＡであり得
る。「ポリヌクレオチド」には、制限するものではない
が、一本鎖および二本鎖ＤＮＡ、一本鎖領域と二本鎖領
域が混じり合ったＤＮＡ、一本鎖および二本鎖ＲＮＡ、
一本鎖領域と二本鎖領域が混じり合ったＲＮＡ、ＤＮＡ
とＲＮＡを含むハイブリッド分子（一本鎖でも、または
より典型的には二本鎖でもよく、一本鎖領域と二本鎖領
域が混じり合ったものでもよい）が含まれる。加えて、
「ポリヌクレオチド」はＲＮＡまたはＤＮＡまたはＲＮ
ＡとＤＮＡの両方からなる三重鎖領域を意味する。「ポ
リヌクレオチド」という用語はまた、１個以上の修飾塩
基を含有するＤＮＡまたはＲＮＡ、および安定性または
他の理由のために修飾された骨格を有するＤＮＡまたは
ＲＮＡも含む。「修飾」塩基としては、例えば、トリチ
ル化された塩基およびイノシンのような特殊な塩基があ
る。ＤＮＡおよびＲＮＡに対してさまざまな修飾を行う
ことができる。こうして、「ポリヌクレオチド」は、自
然界に一般的に存在するポリヌクレオチドの化学的、酵
素的または代謝的に修飾された形態、並びにウイルスお
よび細胞に特徴的なＤＮＡおよびＲＮＡの化学的形態を
包含する。また、「ポリヌクレオチド」は、しばしばオ
リゴヌクレオチドと称される比較的短いポリヌクレオチ
ドも包含する。

【００６３】「ポリペプチド」とは、ペプチド結合また
は修飾されたペプチド結合（すなわち、ペプチドアイソ
スター）により連結された２個以上のアミノ酸を含むペ
プチドまたはタンパク質を意味する。「ポリペプチド」
は短鎖（通常はペプチド、オリゴペプチドまたはオリゴ
マーという）と長鎖（一般的にはタンパク質という）の
両方をさす。ポリペプチドは２０種類の遺伝子コード化
アミノ酸以外のアミノ酸を含んでもよい。「ポリペプチ
ド」は、翻訳後プロセシングのような天然のプロセス
で、または当業界で公知の化学的修飾法のいずれかで修
飾されたアミノ酸配列を含む。このような修飾は基本的
な教科書、より詳細な学術論文および研究文献に詳述さ
れている。修飾はペプチド骨格、アミノ酸側鎖、アミノ
またはカルボキシル末端を含めてポリペプチドのどこで
も行うことができる。同じタイプの修飾が所定のポリペ
プチドのいくつかの部位に同程度でまたはさまざまに異
なる程度で存在してもよい。また、所定のポリペプチド
が多くのタイプの修飾を含んでいてもよい。ポリペプチ
ドはユビキチン化のために分枝していても、分枝のある
又はない環状であってもよい。環状の、分枝した、また
は分枝した環状のポリペプチドは翻訳後の天然プロセス
から生じることがあり、また、合成法によって製造する
こともできる。修飾としては、アセチル化、アシル化、
ＡＤＰ−リボシル化、アミド化、ビオチン化、フラビン
の共有結合、ヘム部分の共有結合、ヌクレオチドまたは
ヌクレオチド誘導体の共有結合、脂質または脂質誘導体
の共有結合、ホスファチジルイノシトールの共有結合、
架橋、環化、ジスルフィド結合の形成、脱メチル化、共
有結合架橋の形成、シスチンの形成、ピログルタメート
の形成、ホルミル化、γ−カルボキシル化、グリコシル
化、ＧＰＩアンカー形成、ヒドロキシル化、ヨウ素化、
メチル化、ミリストイル化、酸化、タンパク質分解プロ
セシング、リン酸化、プレニル化、ラセミ化、セレノイ
ル化、硫酸化、アルギニル化のようなタンパク質へのア
ミノ酸の転移ＲＮＡ媒介付加、ユビキチン化などがある
（例えば、Proteins - Structure and Molecular Prope
rties, 2nd Ed., T.E. Creighton, W.H. Freeman and C
ompany, New York, 1993; Post-translational Covalen
t Modification of Proteins, B.C. Johnson編, Academ
ic Press, New York, 1983中のWold, F., Post-transla
tional Protein Modifications: Perspectives and Pro
spects, pgs. 1-12; Seifterら, “Analysis for prote
in modifications and nonprotein cofactors", Meth E
nzymol (1990) 182:626-646;および Rattanら, “Prote
in Synthesis: Post-translational Modifications and
Aging", Ann NY Acad Sci (1992) 663:48-62を参照の
こと）。

【００６４】本明細書中で用いる「変異体」とは、基準
のポリヌクレオチドまたはポリペプチドと異なるが、不
可欠な性質を保持しているポリヌクレオチドまたはポリ
ペプチドのことである。典型的なポリヌクレオチドの変
異体は基準ポリヌクレオチドとヌクレオチド配列の点で
相違する。この変異体のヌクレオチド配列の変化は、基
準ポリヌクレオチドによってコードされるポリペプチド
のアミノ酸配列を変更しても、しなくてもよい。ヌクレ
オチドの変化は、以下で述べるように、基準配列により
コードされるポリペプチドのアミノ酸の置換、欠失、付
加、融合および末端切断（トランケーション）をもたら
しうる。典型的なポリペプチドの変異体は基準ポリペプ
チドとアミノ酸配列の点で相違する。一般的には、基準
ポリペプチドの配列と変異体の配列が全般的によく類似
しており、多くの領域で同一となるような相違に限られ
る。変異体と基準ポリペプチドは任意に組み合わせた１
以上の置換、欠失、付加によりアミノ酸配列が相違して
いてよい。置換または付加されるアミノ酸残基は遺伝子
コードによりコードされるものであっても、なくてもよ
い。ポリヌクレオチドまたはポリペプチドの変異体はア
レル変異体のように天然に存在するものでも、天然に存
在することが知られていない変異体であってもよい。ポ
リヌクレオチドおよびポリペプチドの天然に存在しない
変異体は、突然変異誘発法または直接合成により作製す
ることができる。

【００６５】当技術分野で知られた「同一性」とは、ポ
リペプチド配列またはポリヌクレオチド配列の比較によ
り決定された、２以上のかかる配列間の関連性のことで
ある。当技術分野ではまた、「同一性」はポリペプチド
配列またはポリヌクレオチド配列の鎖間のマッチ(matc
h)により決定された、このような配列間の配列関連性の
程度を意味する。「同一性」および「類似性」は公知の
方法により難なく算出することができ、こうした方法と
して、例えば Computational Molecular Biology, Les
k, A.M.編, Oxford University Press, New York, 198
8; Biocomputing:Informatics and Genome Projects, S
mith, D.W. 編, Academic Press, New York, 1993; Com
puter Analysis of Sequence Data, Part I, Griffin,
A.M. andGriffin, H.G. 編, Humana Press, New Jerse
y, 1994; Sequence Analysis in Molecular Biology, v
on Heinje, G., Academic Press, 1987; Sequence Anal
ysis Primer, Gribskov, M. and Devereux, J. 編, M S
tockton Press, New York,1991; および Carillo, H. a
nd Lipman, D., SIAM J. Applied Math., 48: 1073(198
8) に記載された方法があるが、これらに限らない。同
一性を決定するための好ましい方法は、検討する配列間
で最大級のマッチが得られるように設計される。さら
に、同一性および類似性を決定する方法は一般に入手可
能なコンピュータプログラムに編集されている。２配列
間の同一性および類似性を決定する好適なコンピュータ
プログラム法としては、ＧＣＧプログラムパッケージ
(Devereux, J.ら, Nucleic Acids Research 12(1):387
(1984))、ＢＬＡＳＴＰ、ＢＬＡＳＴＮおよびＦＡＳＴ
Ａ (Atschul, S.F.ら, J. Molec. Biol. 215:403-410
(1990)) があるが、これらに限らない。ＢＬＡＳＴＸプ
ログラムはＮＣＢＩおよび他のソースから一般に入手可
能である (BLAST Manual, Altschul, S.ら, NCBI NLMNI
H Bethesda, MD 20894; Altschul, S.ら, J. Mol. Bio
l. 215: 403-410 (1990))。公知のSmith Watermanアル
ゴリズムも同一性の決定に使用することができる。

【００６６】ポリペプチド配列を比較するための好適な
パラメーターは次のものを含む：１）アルゴリズム：Needleman & Wunsch, J. Mol. Bio
l. 48: 443-453 (1970)；比較マトリックス：BLOSSUM62
、Hentikoff and Hentikoff, Proc. Natl. Acad. Sci.
USA, 89: 10915-10919 (1992) ギャップペナルティー：12 ギャップ長ペナルティー：４これらのパラメーターと共に役に立つプログラムは Gen
etics Computer Group(Madison WI)から「ｇａｐ」プロ
グラムとして一般に入手可能である。前記のパラメータ
ーはペプチド比較のためのデフォルトパラメーター(def
ault parameter) である（末端ギャップのペナルティー
は無し）。

【００６７】ポリヌクレオチド配列を比較するための好
適なパラメーターは次のものを含む：１）アルゴリズム：Needleman & Wunsch, J. Mol. Bio
l. 48: 443-453 (1970)；比較マトリックス：マッチ＝＋10、ミスマッチ＝０ギャップペナルティー：50 ギャップ長ペナルティー：３これらのパラメーターと共に役に立つプログラムは Gen
etics Computer Group(Madison WI)から「ｇａｐ」プロ
グラムとして入手可能である。前記のパラメーターはポ
リヌクレオチド比較のためのデフォルトパラメーターで
ある。

【００６８】例として、本発明のポリヌクレオチド配列
は配列番号１の基準配列と同一、すなわち100％同一で
あっても、該基準配列に対して、ある整数個までのヌク
レオチド変異を含んでいてもよい。前記変異は少なくと
も１個のヌクレオチドの欠失、置換（トランジションお
よびトランスバージョンを含む）または付加よりなる群
から選択され、こうした変異は基準ヌクレオチド配列の
5'もしくは3'末端位置、またはこれらの末端位置の間の
どこに存在してもよく、基準配列中のヌクレオチドの間
に個々に、または基準配列内に１以上の連続するグルー
プとして介在することができる。ヌクレオチド変異の数
は、配列番号１のヌクレオチドの総数に、それぞれの
（100で割った）同一性％値を掛け、その積を配列番号
１のヌクレオチドの総数から差し引くことにより、すな
わち、次式：ｎ_n≦ｘ_n−（ｘ_n・ｙ）により求めることができる。式中、ｎ_nはヌクレオチド
変異の数であり、ｘ_nは配列番号１のヌクレオチドの総
数であり、ｙは例えば70％については0.70、80％につい
ては0.80、85％については0.85、90％については0.90、
95％については0.95などであり、ｘ_nとｙの非整数の積
は、その積をｘ_nから引く前に、最も近似する整数に切
り下げる。配列番号２のポリペプチドをコードするポリ
ヌクレオチド配列の改変は、そのコード配列にナンセン
ス、ミスセンスまたはフレームシフト突然変異を生じさ
せ、それにより、こうした変異後に該ポリヌクレオチド
によりコードされたポリペプチドを改変させることがで
きる。

【００６９】同様に、本発明のポリペプチド配列は配列
番号２の基準配列と同一、すなわち100％の同一性であ
っても、該基準配列に対して、ある整数個までのアミノ
酸変異を含んで同一性％が100％未満であってもよい。
前記変異は少なくとも１個のアミノ酸の欠失、置換（同
類および非同類アミノ酸置換を含む）または付加よりな
る群から選択され、こうした変異は基準ポリペプチド配
列のアミノもしくはカルボキシ末端位置、またはこれら
の末端位置の間のいずれに存在してもよく、基準配列中
のアミノ酸の間に個々に、または基準配列内に１以上の
連続するグループとして介在することができる。所定の
同一性％についてのアミノ酸変異の数は、配列番号２の
アミノ酸の総数に、それぞれの（100で割った）同一性
％値を掛け、その積を配列番号２のアミノ酸の総数から
差し引くことにより、すなわち、次式：ｎ_a≦ｘ_a−（ｘ_a・ｙ）により求めることができる。式中、ｎ_aはアミノ酸変異
の数であり、ｘ_aは配列番号２中のアミノ酸の総数であ
り、ｙは例えば70％については0.70、80％については0.
80、85％については0.85などであり、ｘ_aとｙの非整数
の積は、その積をｘ_aから引く前に、最も近似する整数
に切り下げる。

【００７０】「相同体」とは、対象の配列に対して高度
の配列関連性を有するポリヌクレオチドまたはポリペプ
チド配列を示すための当技術分野で使用される一般的な
用語である。こうした関連性は、上記のような比較すべ
き配列間の同一性および／または類似性の程度を決定す
ることにより定量化できる。別の種におけるポリヌクレ
オチドまたはポリペプチドの機能的等価物であるポリヌ
クレオチドまたはポリペプチドを意味する「オーソログ
体」(ortholog)、および同一の種内で考えるときに機能
的に類似した配列を意味する「パラログ体」(paralog)
という用語はこの一般的な用語に含まれる。

【００７１】「融合タンパク質」とは、２つの、しばし
ば無関係の、融合された遺伝子またはその断片によりコ
ードされるタンパク質のことである。一例として、EP-A
-0 464には、免疫グロブリン分子の定常領域の様々な部
分と他のヒトタンパク質またはその一部とを含んでなる
融合タンパク質が記載されている。多くの場合、治療お
よび診断における使用には、融合タンパク質の一部とし
て免疫グロブリンＦｃ領域を使用することが有利であ
り、これにより例えば薬物速度論的性質が向上する（例
えば、EP-A- 0232 262を参照のこと）。一方、いくつか
の使用にとっては、その融合タンパク質を発現させ、検
出し、精製した後でＦｃ部分を除去することが望ましい
だろう。

【００７２】本明細書中に引用された、特許および特許
出願明細書を含めた全ての刊行物は、あたかも各刊行物
が明確にかつ個々に示されているかのように、その全体
を参考としてここに組み入れるものとする。

【００７３】配列情報配列番号１ ATGTCAAGCTCTTCCTGGCTCCTTCTCAGCCTTGTTGCTGTAACTGCTGC
TCAGTCCACCATTGAGGAACAGGCCAAGACATTTTTGGACAAGTTTAACC
ACGAAGCCGAAGACCTGTTCTATCAAAGTTCACTTGCTTCTTGGAATTAT
AACACCAATATTACTGAAGAGAATGTCCAAAACATGAATAATGCTGGGGA
CAAATGGTCTGCCTTTTTAAAGGAACAGTCCACACTTGCCCAAATGTATC
CACTACAAGAAATTCAGAATCTCACAGTCAAGCTTCAGCTGCAGGCTCTT
CAGCAAAATGGGTCTTCAGTGCTCTCAGAAGACAAGAGCAAACGGTTGAA
CACAATTCTAAATACAATGAGCACCATCTACAGTACTGGAAAAGTTTGTA
ACCCAGATAATCCACAAGAATGCTTATTACTTGAACCAGGTTTGAATGAA
ATAATGGCAAACAGTTTAGACTACAATGAGAGGCTCTGGGCTTGGGAAAG
CTGGAGATCTGAGGTCGGCAAGCAGCTGAGGCCATTATATGAAGAGTATG
TGGTCTTGAAAAATGAGATGGCAAGAGCAAATCATTATGAGGACTATGGG
GATTATTGGAGAGGAGACTATGAAGTAAATGGGGTAGATGGCTATGACTA
CAGCCGCGGCCAGTTGATTGAAGATGTGGAACATACCTTTGAAGAGATTA
AACCATTATATGAACATCTTCATGCCTATGTGAGGGCAAAGTTGATGAAT
GCCTATCCTTCCTATATCAGTCCAATTGGATGCCTCCCTGCTCATTTGCT
TGGTGATATGTGGGGTAGATTTTGGACAAATCTGTACTCTTTGACAGTTC
CCTTTGGACAGAAACCAAACATAGATGTTACTGATGCAATGGTGGACCAG
GCCTGGGATGCACAGAGAATATTCAAGGAGGCCGAGAAGTTCTTTGTATC
TGTTGGTCTTCCTAATATGACTCAAGGATTCTGGGAAAATTCCATGCTAA
CGGACCCAGGAAATGTTCAGAAAGCAGTCTGCCATCCCACAGCTTGGGAC
CTGGGGAAGGGCGACTTCAGGATCCTTATGTGCACAAAGGTGACAATGGA
CGACTTCCTGACAGCTCATCATGAGATGGGGCATATCCAGTATGATATGG
CATATGCTGCACAACCTTTTCTGCTAAGAAATGGAGCTAATGAAGGATTC
CATGAAGCTGTTGGGGAAATCATGTCACTTTCTGCAGCCACACCTAAGCA
TTTAAAATCCATTGGTCTTCTGTCACCCGATTTTCAAGAAGACAATGAAA
CAGAAATAAACTTCCTGCTCAAACAAGCACTCACGATTGTTGGGACTCTG
CCATTTACTTACATGTTAGAGAAGTGGAGGTGGATGGTCTTTAAAGGGGA
AATTCCCAAAGACCAGTGGATGAAAAAGTGGTGGGAGATGAAGCGAGAGA
TAGTTGGGGTGGTGGAACCTGTGCCCCATGATGAAACATACTGTGACCCC
GCATCTCTGTTCCATGTTTCTAATGATTACTCATTCATTCGATATTACAC
AAGGACCCTTTACCAATTCCAGTTTCAAGAAGCACTTTGTCAAGCAGCTA
AACATGAAGGCCCTCTGCACAAATGTGACATCTCAAACTCTACAGAAGCT
GGACAGAAACTGTTCAATATGCTGAGGCTTGGAAAATCAGAACCCTGGAC
CCTAGCATTGGAAAATGTTGTAGGAGCAAAGAACATGAATGTAAGGCCAC
TGCTCAACTACTTTGAGCCCTTATTTACCTGGCTGAAAGACCAGAACAAG
AATTCTTTTGTGGGATGGAGTACCGACTGGAGTCCATATGCAGACCAAAG
CATCAAAGTGAGGATAAGCCTAAAATCAGCTCTTGGAGATAAAGCATATG
AATGGAACGACAATGAAATGTACCTGTTCCGATCATCTGTTGCATATGCT
ATGAGGCAGTACTTTTTAAAAGTAAAAAATCAGATGATTCTTTTTGGGGA
GGAGGATGTGCGAGTGGCTAATTTGAAACCAAGAATCTCCTTTAATTTCT
TTGTCACTGCACCTAAAAATGTGTCTGATATCATTCCTAGAACTGAAGTT
GAAAAGGCCATCAGGATGTCCCGGAGCCGTATCAATGATGCTTTCCGTCT
GAATGACAACAGCCTAGAGTTTCTGGGGATACAGCCAACACTTGGACCTC
CTAACCAGCCCCCTGTTTCCATATGGCTGATTGTTTTTGGAGTTGTGATG
GGAGTGATAGTGGTTGGCATTGTCATCCTGATCTTCACTGGGATCAGAGA
TCGGAAGAAGAAAAATAAAGCAAGAAGTGGAGAAAATCCTTATGCCTCCA
TCGATATTAGCAAAGGAGAAAATAATCCAGGATTCCAAAACACTGATGAT
GTTCAGACCTCCTTTTAG 配列番号２配列番号３ ATGAGATTTGATGAGGACACAGGTCCAGATGATATCAGTAGTCCTCCAAA
TGATCACAGTATCCTTGTTGCTGTAACTGCTGCTCAGTCCACCATTGAGG
AACAGGCCAAGACATTTTTGGACAAGTTTAACCACGAAGCCGAAGACCTG
TTCTATCAAAGTTCACTTGCTTCTTGGAATTATAACACCAATATTACTGA
AGAGAATGTCCAAAACATGAATAATGCTGGGGACAAATGGTCTGCCTTTT
TAAAGGAACAGTCCACACTTGCCCAAATGTATCCACTACAAGAAATTCAG
AATCTCACAGTCAAGCTTCAGCTGCAGGCTCTTCAGCAAAATGGGTCTTC
AGTGCTCTCAGAAGACAAGAGCAAACGGTTGAACACAATTCTAAATACAA
TGAGCACCATCTACAGTACTGGAAAAGTTTGTAACCCAGATAATCCACAA
GAATGCTTATTACTTGAACCAGGTTTGAATGAAATAATGGCAAACAGTTT
AGACTACAATGAGAGGCTCTGGGCTTGGGAAAGCTGGAGATCTGAGGTCG
GCAAGCAGCTGAGGCCATTATATGAAGAGTATGTGGTCTTGAAAAATGAG
ATGGCAAGAGCAAATCATTATGAGGACTATGGGGATTATTGGAGAGGAGA
CTATGAAGTAAATGGGGTAGATGGCTATGACTACAGCCGCGGCCAGTTGA
TTGAAGATGTGGAACATACCTTTGAAGAGATTAAACCATTATATGAACAT
CTTCATGCCTATGTGAGGGCAAAGTTGATGAATGCCTATCCTTCCTATAT
CAGTCCAATTGGATGCCTCCCTGCTCATTTGCTTGGTGATATGTGGGGTA
GATTTTGGACAAATCTGTACTCTTTGACAGTTCCCTTTGGACAGAAACCA
AACATAGATGTTACTGATGCAATGGTGGACCAGGCCTGGGATGCACAGAG
AATATTCAAGGAGGCCGAGAAGTTCTTTGTATCTGTTGGTCTTCCTAATA
TGACTCAAGGATTCTGGGAAAATTCCATGCTAACGGACCCAGGAAATGTT
CAGAAAGCAGTCTGCCATCCCACAGCTTGGGACCTGGGGAAGGGCGACTT
CAGGATCCTTATGTGCACAAAGGTGACAATGGACGACTTCCTGACAGCTC
ATCATGAGATGGGGCATATCCAGTATGATATGGCATATGCTGCACAACCT
TTTCTGCTAAGAAATGGAGCTAATGAAGGATTCCATGAAGCTGTTGGGGA
AATCATGTCACTTTCTGCAGCCACACCTAAGCATTTAAAATCCATTGGTC
TTCTGTCACCCGATTTTCAAGAAGACAATGAAACAGAAATAAACTTCCTG
CTCAAACAAGCACTCACGATTGTTGGGACTCTGCCATTTACTTACATGTT
AGAGAAGTGGAGGTGGATGGTCTTTAAAGGGGAAATTCCCAAAGACCAGT
GGATGAAAAAGTGGTGGGAGATGAAATATTACACAAGGACCCTTTACCAA
TTCCAGTTTCAAGAAGCACTTTGTCAAGCAGCTAAACATGAAGGCCCTCT
GCACAAATGTGACATCTCAAACTCTACAGAAGCTGGACAGAAACTGTTCA
ATATGCTGAGGCTTGGAAAATCAGAACCCTGGACCCTAGCATTGGAAAAT
GTTGTAGGAGCAAAGAACATGAATGTAAGGCCACTGCTCAACTACTTTGA
GCCCTTATTTACCTGGCTGAAAGACCAGAACAAGAATTCTTTTGTGGGAT
GGAGTACCGACTGGAGTCCATGGGAAGTCTTCATTCTCTTGATTGTGTCC
TCTGTGCCACAAGTGAAGATGTTTGTTTTGTTTCTCTACAGGGAGGAGGA
TGTGCGAGTGGCTAATTTGAAACCAAGAATCTCCTTTAATTTCTTTGTCA
CTGCACCTAAAAATGTGTCTGATATCATTCCTAGAACTGAAGTTGAAAAG
GCCATCAGGATGTCCCGGAGCCGTATCAATGATGCTTTCCGTCTGAATGA
CAACAGCCTAGAGTTTCTGGGGATACAGCCAACACTTGGACCTCCTAACC
AGCCCCCTGTTTCCATATGGCTGATTGTTTTTGGAGTTGTGATGGGAGTG
ATAGTGGTTGGCATTGTCATCCTGATCTTCACTGGGATCAGAGATCGGAA
GAAGAAAAATAAAGCAAGAAGTGGAGAAAATCCTTATGCCTCCATCGATA
TTAGCAAAGGAGAAAATAATCCAGGATTCCAAAACACTGATGATGTTCAG
ACCTCCTTTTAG 配列番号４配列番号４は、「Query」と名付けたアミノ酸配列をい
う。

【００７４】

【配列表】 SEQUENCE LISTING <110> SmithKline Beecham plc <120> MPROT15 Polypeptides and MPROT15 Polynucleotides <130> PA98-390 <150> UK application 9810373.2 <151> 1998-5-13 <150> UK appliction 9818009.4 <151> 1998-8-18 <160> 4 <170> FastSEQ for Windows Version 3.0 <210> 1 <211> 2418 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 1 atgtcaagct cttcctggct ccttctcagc cttgttgctg taactgctgc tcagtccacc 60 attgaggaac aggccaagac atttttggac aagtttaacc acgaagccga agacctgttc 120 tatcaaagtt cacttgcttc ttggaattat aacaccaata ttactgaaga gaatgtccaa 180 aacatgaata atgctgggga caaatggtct gcctttttaa aggaacagtc cacacttgcc 240 caaatgtatc cactacaaga aattcagaat ctcacagtca agcttcagct gcaggctctt 300 cagcaaaatg ggtcttcagt gctctcagaa gacaagagca aacggttgaa cacaattcta 360 aatacaatga gcaccatcta cagtactgga aaagtttgta acccagataa tccacaagaa 420 tgcttattac ttgaaccagg tttgaatgaa ataatggcaa acagtttaga ctacaatgag 480 aggctctggg cttgggaaag ctggagatct gaggtcggca agcagctgag gccattatat 540 gaagagtatg tggtcttgaa aaatgagatg gcaagagcaa atcattatga ggactatggg 600 gattattgga gaggagacta tgaagtaaat ggggtagatg gctatgacta cagccgcggc 660 cagttgattg aagatgtgga acataccttt gaagagatta aaccattata tgaacatctt 720 catgcctatg tgagggcaaa gttgatgaat gcctatcctt cctatatcag tccaattgga 780 tgcctccctg ctcatttgct tggtgatatg tggggtagat tttggacaaa tctgtactct 840 ttgacagttc cctttggaca gaaaccaaac atagatgtta ctgatgcaat ggtggaccag 900 gcctgggatg cacagagaat attcaaggag gccgagaagt tctttgtatc tgttggtctt 960 cctaatatga ctcaaggatt ctgggaaaat tccatgctaa cggacccagg aaatgttcag 1020 aaagcagtct gccatcccac agcttgggac ctggggaagg gcgacttcag gatccttatg 1080 tgcacaaagg tgacaatgga cgacttcctg acagctcatc atgagatggg gcatatccag 1140 tatgatatgg catatgctgc acaacctttt ctgctaagaa atggagctaa tgaaggattc 1200 catgaagctg ttggggaaat catgtcactt tctgcagcca cacctaagca tttaaaatcc 1260 attggtcttc tgtcacccga ttttcaagaa gacaatgaaa cagaaataaa cttcctgctc 1320 aaacaagcac tcacgattgt tgggactctg ccatttactt acatgttaga gaagtggagg 1380 tggatggtct ttaaagggga aattcccaaa gaccagtgga tgaaaaagtg gtgggagatg 1440 aagcgagaga tagttggggt ggtggaacct gtgccccatg atgaaacata ctgtgacccc 1500 gcatctctgt tccatgtttc taatgattac tcattcattc gatattacac aaggaccctt 1560 taccaattcc agtttcaaga agcactttgt caagcagcta aacatgaagg ccctctgcac 1620 aaatgtgaca tctcaaactc tacagaagct ggacagaaac tgttcaatat gctgaggctt 1680 ggaaaatcag aaccctggac cctagcattg gaaaatgttg taggagcaaa gaacatgaat 1740 gtaaggccac tgctcaacta ctttgagccc ttatttacct ggctgaaaga ccagaacaag 1800 aattcttttg tgggatggag taccgactgg agtccatatg cagaccaaag catcaaagtg 1860 aggataagcc taaaatcagc tcttggagat aaagcatatg aatggaacga caatgaaatg 1920 tacctgttcc gatcatctgt tgcatatgct atgaggcagt actttttaaa agtaaaaaat 1980 cagatgattc tttttgggga ggaggatgtg cgagtggcta atttgaaacc aagaatctcc 2040 tttaatttct ttgtcactgc acctaaaaat gtgtctgata tcattcctag aactgaagtt 2100 gaaaaggcca tcaggatgtc ccggagccgt atcaatgatg ctttccgtct gaatgacaac 2160 agcctagagt ttctggggat acagccaaca cttggacctc ctaaccagcc ccctgtttcc 2220 atatggctga ttgtttttgg agttgtgatg ggagtgatag tggttggcat tgtcatcctg 2280 atcttcactg ggatcagaga tcggaagaag aaaaataaag caagaagtgg agaaaatcct 2340 tatgcctcca tcgatattag caaaggagaa aataatccag gattccaaaa cactgatgat 2400 gttcagacct ccttttag 2418 <210> 2 <211> 805 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 2 Met Ser Ser Ser Ser Trp Leu Leu Leu Ser Leu Val Ala Val Thr Ala 1 5 10 15 Ala Gln Ser Thr Ile Glu Glu Gln Ala Lys Thr Phe Leu Asp Lys Phe 20 25 30 Asn His Glu Ala Glu Asp Leu Phe Tyr Gln Ser Ser Leu Ala Ser Trp 35 40 45 Asn Tyr Asn Thr Asn Ile Thr Glu Glu Asn Val Gln Asn Met Asn Asn 50 55 60 Ala Gly Asp Lys Trp Ser Ala Phe Leu Lys Glu Gln Ser Thr Leu Ala 65 70 75 80 Gln Met Tyr Pro Leu Gln Glu Ile Gln Asn Leu Thr Val Lys Leu Gln 85 90 95 Leu Gln Ala Leu Gln Gln Asn Gly Ser Ser Val Leu Ser Glu Asp Lys 100 105 110 Ser Lys Arg Leu Asn Thr Ile Leu Asn Thr Met Ser Thr Ile Tyr Ser 115 120 125 Thr Gly Lys Val Cys Asn Pro Asp Asn Pro Gln Glu Cys Leu Leu Leu 130 135 140 Glu Pro Gly Leu Asn Glu Ile Met Ala Asn Ser Leu Asp Tyr Asn Glu 145 150 155 160 Arg Leu Trp Ala Trp Glu Ser Trp Arg Ser Glu Val Gly Lys Gln Leu 165 170 175 Arg Pro Leu Tyr Glu Glu Tyr Val Val Leu Lys Asn Glu Met Ala Arg 180 185 190 Ala Asn His Tyr Glu Asp Tyr Gly Asp Tyr Trp Arg Gly Asp Tyr Glu 195 200 205 Val Asn Gly Val Asp Gly Tyr Asp Tyr Ser Arg Gly Gln Leu Ile Glu 210 215 220 Asp Val Glu His Thr Phe Glu Glu Ile Lys Pro Leu Tyr Glu His Leu 225 230 235 240 His Ala Tyr Val Arg Ala Lys Leu Met Asn Ala Tyr Pro Ser Tyr Ile 245 250 255 Ser Pro Ile Gly Cys Leu Pro Ala His Leu Leu Gly Asp Met Trp Gly 260 265 270 Arg Phe Trp Thr Asn Leu Tyr Ser Leu Thr Val Pro Phe Gly Gln Lys 275 280 285 Pro Asn Ile Asp Val Thr Asp Ala Met Val Asp Gln Ala Trp Asp Ala 290 295 300 Gln Arg Ile Phe Lys Glu Ala Glu Lys Phe Phe Val Ser Val Gly Leu 305 310 315 320 Pro Asn Met Thr Gln Gly Phe Trp Glu Asn Ser Met Leu Thr Asp Pro 325 330 335 Gly Asn Val Gln Lys Ala Val Cys His Pro Thr Ala Trp Asp Leu Gly 340 345 350 Lys Gly Asp Phe Arg Ile Leu Met Cys Thr Lys Val Thr Met Asp Asp 355 360 365 Phe Leu Thr Ala His His Glu Met Gly His Ile Gln Tyr Asp Met Ala 370 375 380 Tyr Ala Ala Gln Pro Phe Leu Leu Arg Asn Gly Ala Asn Glu Gly Phe 385 390 395 400 His Glu Ala Val Gly Glu Ile Met Ser Leu Ser Ala Ala Thr Pro Lys 405 410 415 His Leu Lys Ser Ile Gly Leu Leu Ser Pro Asp Phe Gln Glu Asp Asn 420 425 430 Glu Thr Glu Ile Asn Phe Leu Leu Lys Gln Ala Leu Thr Ile Val Gly 435 440 445 Thr Leu Pro Phe Thr Tyr Met Leu Glu Lys Trp Arg Trp Met Val Phe 450 455 460 Lys Gly Glu Ile Pro Lys Asp Gln Trp Met Lys Lys Trp Trp Glu Met 465 470 475 480 Lys Arg Glu Ile Val Gly Val Val Glu Pro Val Pro His Asp Glu Thr 485 490 495 Tyr Cys Asp Pro Ala Ser Leu Phe His Val Ser Asn Asp Tyr Ser Phe 500 505 510 Ile Arg Tyr Tyr Thr Arg Thr Leu Tyr Gln Phe Gln Phe Gln Glu Ala 515 520 525 Leu Cys Gln Ala Ala Lys His Glu Gly Pro Leu His Lys Cys Asp Ile 530 535 540 Ser Asn Ser Thr Glu Ala Gly Gln Lys Leu Phe Asn Met Leu Arg Leu 545 550 555 560 Gly Lys Ser Glu Pro Trp Thr Leu Ala Leu Glu Asn Val Val Gly Ala 565 570 575 Lys Asn Met Asn Val Arg Pro Leu Leu Asn Tyr Phe Glu Pro Leu Phe 580 585 590 Thr Trp Leu Lys Asp Gln Asn Lys Asn Ser Phe Val Gly Trp Ser Thr 595 600 605 Asp Trp Ser Pro Tyr Ala Asp Gln Ser Ile Lys Val Arg Ile Ser Leu 610 615 620 Lys Ser Ala Leu Gly Asp Lys Ala Tyr Glu Trp Asn Asp Asn Glu Met 625 630 635 640 Tyr Leu Phe Arg Ser Ser Val Ala Tyr Ala Met Arg Gln Tyr Phe Leu 645 650 655 Lys Val Lys Asn Gln Met Ile Leu Phe Gly Glu Glu Asp Val Arg Val 660 665 670 Ala Asn Leu Lys Pro Arg Ile Ser Phe Asn Phe Phe Val Thr Ala Pro 675 680 685 Lys Asn Val Ser Asp Ile Ile Pro Arg Thr Glu Val Glu Lys Ala Ile 690 695 700 Arg Met Ser Arg Ser Arg Ile Asn Asp Ala Phe Arg Leu Asn Asp Asn 705 710 715 720 Ser Leu Glu Phe Leu Gly Ile Gln Pro Thr Leu Gly Pro Pro Asn Gln 725 730 735 Pro Pro Val Ser Ile Trp Leu Ile Val Phe Gly Val Val Met Gly Val 740 745 750 Ile Val Val Gly Ile Val Ile Leu Ile Phe Thr Gly Ile Arg Asp Arg 755 760 765 Lys Lys Lys Asn Lys Ala Arg Ser Gly Glu Asn Pro Tyr Ala Ser Ile 770 775 780 Asp Ile Ser Lys Gly Glu Asn Asn Pro Gly Phe Gln Asn Thr Asp Asp 785 790 795 800 Val Gln Thr Ser Phe 805 <210> 3 <211> 2262 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 3 atgagatttg atgaggacac aggtccagat gatatcagta gtcctccaaa tgatcacagt 60 atccttgttg ctgtaactgc tgctcagtcc accattgagg aacaggccaa gacatttttg 120 gacaagttta accacgaagc cgaagacctg ttctatcaaa gttcacttgc ttcttggaat 180 tataacacca atattactga agagaatgtc caaaacatga ataatgctgg ggacaaatgg 240 tctgcctttt taaaggaaca gtccacactt gcccaaatgt atccactaca agaaattcag 300 aatctcacag tcaagcttca gctgcaggct cttcagcaaa atgggtcttc agtgctctca 360 gaagacaaga gcaaacggtt gaacacaatt ctaaatacaa tgagcaccat ctacagtact 420 ggaaaagttt gtaacccaga taatccacaa gaatgcttat tacttgaacc aggtttgaat 480 gaaataatgg caaacagttt agactacaat gagaggctct gggcttggga aagctggaga 540 tctgaggtcg gcaagcagct gaggccatta tatgaagagt atgtggtctt gaaaaatgag 600 atggcaagag caaatcatta tgaggactat ggggattatt ggagaggaga ctatgaagta 660 aatggggtag atggctatga ctacagccgc ggccagttga ttgaagatgt ggaacatacc 720 tttgaagaga ttaaaccatt atatgaacat cttcatgcct atgtgagggc aaagttgatg 780 aatgcctatc cttcctatat cagtccaatt ggatgcctcc ctgctcattt gcttggtgat 840 atgtggggta gattttggac aaatctgtac tctttgacag ttccctttgg acagaaacca 900 aacatagatg ttactgatgc aatggtggac caggcctggg atgcacagag aatattcaag 960 gaggccgaga agttctttgt atctgttggt cttcctaata tgactcaagg attctgggaa 1020 aattccatgc taacggaccc aggaaatgtt cagaaagcag tctgccatcc cacagcttgg 1080 gacctgggga agggcgactt caggatcctt atgtgcacaa aggtgacaat ggacgacttc 1140 ctgacagctc atcatgagat ggggcatatc cagtatgata tggcatatgc tgcacaacct 1200 tttctgctaa gaaatggagc taatgaagga ttccatgaag ctgttgggga aatcatgtca 1260 ctttctgcag ccacacctaa gcatttaaaa tccattggtc ttctgtcacc cgattttcaa 1320 gaagacaatg aaacagaaat aaacttcctg ctcaaacaag cactcacgat tgttgggact 1380 ctgccattta cttacatgtt agagaagtgg aggtggatgg tctttaaagg ggaaattccc 1440 aaagaccagt ggatgaaaaa gtggtgggag atgaaatatt acacaaggac cctttaccaa 1500 ttccagtttc aagaagcact ttgtcaagca gctaaacatg aaggccctct gcacaaatgt 1560 gacatctcaa actctacaga agctggacag aaactgttca atatgctgag gcttggaaaa 1620 tcagaaccct ggaccctagc attggaaaat gttgtaggag caaagaacat gaatgtaagg 1680 ccactgctca actactttga gcccttattt acctggctga aagaccagaa caagaattct 1740 tttgtgggat ggagtaccga ctggagtcca tgggaagtct tcattctctt gattgtgtcc 1800 tctgtgccac aagtgaagat gtttgttttg tttctctaca gggaggagga tgtgcgagtg 1860 gctaatttga aaccaagaat ctcctttaat ttctttgtca ctgcacctaa aaatgtgtct 1920 gatatcattc ctagaactga agttgaaaag gccatcagga tgtcccggag ccgtatcaat 1980 gatgctttcc gtctgaatga caacagccta gagtttctgg ggatacagcc aacacttgga 2040 cctcctaacc agccccctgt ttccatatgg ctgattgttt ttggagttgt gatgggagtg 2100 atagtggttg gcattgtcat cctgatcttc actgggatca gagatcggaa gaagaaaaat 2160 aaagcaagaa gtggagaaaa tccttatgcc tccatcgata ttagcaaagg agaaaataat 2220 ccaggattcc aaaacactga tgatgttcag acctcctttt ag 2262 <210> 4 <211> 480 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 4 Ser Ser Pro Pro Asn Asp His Ser Ile Leu Val Ala Val Thr Ala Ala 1 5 10 15 Gln Ser Thr Ile Glu Glu Gln Ala Lys Thr Phe Leu Asp Lys Phe Asn 20 25 30 His Glu Ala Glu Asp Leu Phe Tyr Gln Ser Ser Leu Ala Ser Trp Asn 35 40 45 Tyr Asn Thr Asn Ile Thr Glu Glu Asn Val Gln Asn Met Asn Asn Ala 50 55 60 Gly Asp Lys Trp Ser Ala Phe Leu Lys Glu Gln Ser Thr Leu Ala Gln 65 70 75 80 Met Tyr Pro Leu Gln Glu Ile Gln Asn Leu Thr Val Lys Leu Gln Leu 85 90 95 Gln Ala Leu Gln Gln Asn Gly Ser Ser Val Leu Ser Glu Asp Lys Ser 100 105 110 Lys Arg Leu Asn Thr Ile Leu Asn Thr Met Ser Thr Ile Tyr Ser Thr 115 120 125 Gly Lys Val Cys Asn Pro Asp Asn Pro Gln Glu Cys Leu Leu Leu Glu 130 135 140 Pro Gly Leu Asn Glu Ile Met Ala Asn Ser Leu Asp Tyr Asn Glu Arg 145 150 155 160 Leu Trp Ala Trp Glu Ser Trp Arg Ser Glu Val Gly Lys Gln Leu Arg 165 170 175 Pro Leu Tyr Glu Glu Tyr Val Val Leu Lys Asn Glu Met Ala Arg Ala 180 185 190 Asn His Tyr Glu Asp Tyr Gly Asp Tyr Trp Arg Gly Asp Tyr Glu Val 195 200 205 Asn Gly Val Asp Gly Tyr Asp Tyr Ser Arg Gly Gln Leu Ile Glu Asp 210 215 220 Val Glu His Thr Phe Glu Glu Ile Lys Pro Leu Tyr Glu His Leu His 225 230 235 240 Ala Tyr Val Arg Ala Lys Leu Met Asn Ala Tyr Pro Ser Tyr Ile Ser 245 250 255 Pro Ile Gly Cys Leu Pro Ala His Leu Leu Gly Asp Met Trp Gly Arg 260 265 270 Phe Trp Thr Asn Leu Tyr Ser Leu Thr Val Pro Phe Gly Gln Lys Pro 275 280 285 Asn Ile Asp Val Thr Asp Ala Met Val Asp Gln Ala Trp Asp Ala Gln 290 295 300 Arg Ile Phe Lys Glu Ala Glu Lys Phe Phe Val Ser Val Gly Leu Pro 305 310 315 320 Asn Met Thr Gln Gly Phe Trp Glu Asn Ser Met Leu Thr Asp Pro Gly 325 330 335 Asn Val Gln Lys Ala Val Cys His Pro Thr Ala Trp Asp Leu Gly Lys 340 345 350 Gly Asp Phe Arg Ile Leu Met Cys Thr Lys Val Thr Met Asp Asp Phe 355 360 365 Leu Thr Ala His His Glu Met Gly His Ile Gln Tyr Asp Met Ala Tyr 370 375 380 Ala Ala Gln Pro Phe Leu Leu Arg Asn Gly Ala Asn Glu Gly Phe His 385 390 395 400 Glu Ala Val Gly Glu Ile Met Ser Leu Ser Ala Ala Thr Pro Lys His 405 410 415 Leu Lys Ser Ile Gly Leu Leu Ser Pro Asp Phe Gln Glu Asp Asn Glu 420 425 430 Thr Glu Ile Asn Phe Leu Leu Lys Gln Ala Leu Thr Ile Val Gly Thr 435 440 445 Leu Pro Phe Thr Tyr Met Leu Glu Lys Trp Arg Trp Met Val Phe Lys 450 455 460 Gly Glu Ile Pro Lys Asp Gln Trp Met Lys Lys Trp Trp Glu Met Lys 465 470 475 480

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＡ６１Ｋ 31/70 Ａ６１Ｋ 31/70 38/00 39/395 Ｄ 39/395 45/00 45/00 48/00 48/00 Ｃ０７Ｋ 14/47 Ｃ０７Ｋ 14/47 Ｃ１２Ｐ 21/02 ＣＣ１２Ｐ 21/02 Ｃ１２Ｑ 1/68 ＡＣ１２Ｑ 1/68 Ｇ０１Ｎ 33/15 ＺＧ０１Ｎ 33/15 33/50 Ｔ 33/50 Ｐ 33/566 33/566 33/68 33/68 Ａ６１Ｋ 37/02 //(Ｃ１２Ｐ 21/02 Ｃ１２Ｒ 1:91） (72)発明者ニコラバーゲスイギリス国シーエム19 ５エーディーエセックス，ハーロー，ザピナクルズ, コールドハーバーロード，スミスクラインビーチャムファーマシューティカルズ

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】配列番号２の全長にわたる配列番号２の
アミノ酸配列に対して少なくとも７０％の同一性を有す
るアミノ酸配列を含んでなる、単離されたポリペプチ
ド。
【請求項２】アミノ酸配列が少なくとも９５％の同一
性を有する、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３】配列番号２のアミノ酸配列を含んでな
る、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項４】配列番号２のアミノ酸配列からなる、単
離されたポリペプチド。
【請求項５】配列番号２の全長にわたる配列番号２の
アミノ酸配列に対して少なくとも７０％の同一性を有す
るポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含んで
なる単離されたポリヌクレオチド、または該ポリヌクレ
オチドに相補的なヌクレオチド配列からなるポリヌクレ
オチド。
【請求項６】配列番号２のアミノ酸配列からなるポリ
ペプチドをコードするヌクレオチド配列に対して少なく
とも７０％の同一性を有するヌクレオチド配列を含んで
なる単離されたポリヌクレオチド、または該ポリヌクレ
オチドに相補的なヌクレオチド配列からなるポリヌクレ
オチド。
【請求項７】配列番号１の全長にわたる配列番号１の
ヌクレオチド配列に対して少なくとも７０％の同一性を
有するヌクレオチド配列を含んでなる単離されたポリヌ
クレオチド、または該ポリヌクレオチドに相補的なヌク
レオチド配列からなるポリヌクレオチド。
【請求項８】前記の同一性が少なくとも９５％であ
る、請求項５〜７のいずれか１項に記載のポリヌクレオ
チド。
【請求項９】以下の(a)〜(c)から選択される単離され
たポリヌクレオチド、または該ポリヌクレオチドに相補
的なヌクレオチド配列からなるポリヌクレオチド： (a) 配列番号２のアミノ酸配列からなるポリペプチドを
コードするヌクレオチド配列を含んでなるポリヌクレオ
チド、 (b) 配列番号１のヌクレオチド配列からなるポリヌクレ
オチド、および (c) 適当なライブラリーを、ストリンジェントなハイブ
リダイゼーション条件下で、配列番号１のヌクレオチド
配列またはその断片を有する標識プローブを用いてスク
リーニングすることにより得られるポリヌクレオチド。
【請求項１０】下記発現系が適合性の宿主細胞内に存
在するとき請求項１に記載のポリペプチドを産生し得る
ポリヌクレオチドを含有する発現系。
【請求項１１】請求項１０に記載の発現系を含有する
宿主細胞、または請求項１に記載のポリペプチドを発現
しているその膜。
【請求項１２】請求項１に記載のポリペプチドを産生
させるのに十分な条件下で請求項１１に記載の宿主細胞
を培養し、この培養培地から該ポリペプチドを回収する
ことを含んでなる、請求項１に記載のポリペプチドの生
産方法。
【請求項１３】請求項１に記載のポリペプチドに対し
て免疫特異的な抗体。
【請求項１４】請求項１に記載のポリペプチドの機能
を刺激または抑制する化合物を同定するためのスクリー
ニング法であって、 (a) 候補化合物と、該ポリペプチド（または該ポリペプ
チドを担持している細胞もしくはその膜）またはその融
合タンパク質と、の結合を、該候補化合物に直接または
間接的に結合させた標識により測定すること、 (b) 候補化合物と、該ポリペプチド（または該ポリペプ
チドを担持している細胞もしくはその膜）またはその融
合タンパク質と、の結合を、標識競合物質の存在下で測
定すること、 (c) 候補化合物が該ポリペプチドの活性化または抑制に
より生ずるシグナルをもたらすか否かを、該ポリペプチ
ドを担持している細胞または細胞膜に適した検出系を用
いて調べること、 (d) 候補化合物と、請求項１に記載のポリペプチドを含
有する溶液と、を一緒にして混合物を調製し、該混合物
中の該ポリペプチドの活性を測定し、該混合物の活性を
スタンダードと比較すること、および (e) 候補化合物が細胞における該ポリペプチドをコード
するｍＲＮＡおよび該ポリペプチドの産生に及ぼす効果
を検出すること、よりなる群から選択される方法を含ん
でなるスクリーニング法。
【請求項１５】請求項１〜４のいずれか１項に記載の
ポリペプチドに対するアゴニストまたはアンタゴニス
ト。
【請求項１６】治療に用いるための以下の(a)〜(c)か
ら選択される化合物： (a) 請求項１〜４のいずれか１項に記載のポリペプチド
に対するアゴニストまたはアンタゴニスト、 (b) 請求項５〜９のいずれか１項に記載のポリヌクレオ
チド、および (c) 請求項１に記載のポリペプチドをコードするヌクレ
オチド配列の発現をモジュレートする核酸分子。
【請求項１７】被験者における請求項１に記載のポリ
ペプチドの発現または活性に関連した疾病または該疾病
への罹りやすさを検査する方法であって、 (a) 該被験者のゲノム内の該ポリペプチドをコードする
ヌクレオチド配列に突然変異があるか否かを調べるこ
と、および／または(b) 該被験者から得られたサンプル
における該ポリペプチド発現の存在または量を分析する
こと、を含んでなる方法。
【請求項１８】以下の(a)〜(d)から選択される単離さ
れたポリヌクレオチド： (a) 配列番号３の全長にわたる配列番号３のヌクレオチ
ド配列に対して少なくとも７０％の同一性を有するヌク
レオチド配列を含んでなるポリヌクレオチド、 (b) 配列番号３のヌクレオチド配列を含んでなるポリヌ
クレオチド、 (c) 配列番号３のヌクレオチド配列からなるポリヌクレ
オチド、および (d) 配列番号４の全長にわたる配列番号４のアミノ酸配
列に対して少なくとも７０％の同一性を有するアミノ酸
配列からなるポリペプチドをコードするヌクレオチド配
列を含んでなるポリヌクレオチド。
【請求項１９】以下の(a)〜(e)から選択される単離さ
れたポリペプチド： (a) 配列番号４の全長にわたる配列番号４のアミノ酸配
列に対して少なくとも７０％の同一性を有するアミノ酸
配列を含んでなるポリペプチド、 (b) アミノ酸配列が配列番号４の全長にわたる配列番号
４のアミノ酸配列に対して少なくとも７０％の同一性を
有するポリペプチド、 (c) 配列番号４のアミノ酸配列を含んでなるポリペプチ
ド、 (d) 配列番号４のアミノ酸配列からなるポリペプチド、
および (e) 配列番号３に含まれるヌクレオチド配列を含んでな
るポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド。
【請求項２０】以下の(a)または(b)の単離されたポリ
ペプチド： (a) 配列番号２のアミノ酸配列からなるポリペプチド、
または(b) 配列番号２のアミノ酸配列において、少なく
とも１個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたア
ミノ酸配列からなり、かつMPROT15活性を有するポリペ
プチド。
【請求項２１】請求項２０に記載のポリペプチドをコ
ードするポリヌクレオチド。
【請求項２２】以下の(a)または(b)の単離されたポリ
ヌクレオチド： (a) 配列番号１のヌクレオチド配列からなるポリヌクレ
オチド、または(b) (a) のポリヌクレオチドとストリン
ジェントな条件下でハイブリダイズしかつMPROT15活性
を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド。