JPH11318475A

JPH11318475A - マラリア特異性ｄｎａ配列物、それらの発現産物およびそれらの使用

Info

Publication number: JPH11318475A
Application number: JP11072817A
Authority: JP
Inventors: Bernhard Knapp; クナツプベルンハルト; Erika Hundt; フントエリカ; Burkhard Enders; エンデルスブルクハルト; Hans Kuepper; キユツペルハンス
Original assignee: Chiron Behring GmbH and Co KG
Current assignee: GSK Vaccines GmbH
Priority date: 1987-12-30
Filing date: 1999-03-17
Publication date: 1999-11-24
Also published as: FI99144C; FI886001L; EP0322712A3; IL88818A; AU2761988A; IL88818A0; AU625315B2; FI99144B; DE3831351A1; PT89363B; ES2045075T3; PT89363A; EP0322712A2; JPH022356A; YU48126B; DK727688A; EP0322712B1; DK727688D0; GR3007126T3; DE3876227D1

Abstract

(57)【要約】【課題】プラスモジウム・ファルシパルム感染に防御
的な抗原をコードする配列物、およびそれらの発現産
物、ならびにそれらの使用を提供すること。【解決手段】表１〜１８に示したアミノ酸配列を有す
るプラスモジウム・ファルシパルム（Ｐｌａｓｍｏｄｉ
ｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）のタンパク質、および抗
原活性を有するその部分配列物。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、マラリア特異性Ｄ
ＮＡ配列物、それらの発現産物およびそれらの使用に関
する。

【０００２】

【従来の技術】マラリアに対するワクチンの開発に向け
ての重要なステップは、防御的抗原（ｐｒｏｔｅｃｔｉ
ｖｅａｎｔｉｇｅｎｓ）の同定である。一般に、防御
的と分類される抗原とは、動物モデル、例えばサイミリ
（Ｓａｉｍｉｒｉ）またはアオタス（Ａｏｔｕｓ）モン
キーなどを用いたインビボ実験において静注投与してプ
ラスモジウム・ファルシパルム（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ
ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）感染からの防御を可能とする
ものをいう。これまでのところヒトについては不満足な
防御実験しか報告されていないが、動物実験においては
プラスモジウム・ファルシパルムのいくつかの単離タン
パク質による完全なまたは部分的な防御効果が示されて
いる。これは、ゲル電気泳動にて精製された７５ｋＤお
よび１００ｋＤのタンパク質区分ならびにゲル電気泳動
にて精製された分子量２００ｋＤ、１４０ｋＤおよび４
１ｋＤのタンパク質バンドの双方に該当する［Ｌ．Ｈ．
Ｐｅｒｒｉｎら：（１９８４）、Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉ
ｍｍｕｎｏｌ．５６、６７−７２、Ｌ．Ｈ．Ｐｅｒｒｉ
ｎら：（１９８５）、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．７
５、１７１８−１７２１、Ｗ．Ａ．Ｓｉｄｄｉｑｕｉ
ら：（１９８７）、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓ
ｃｉ．、ＵＳＡ８４、３０１４−３０１８］。メロゾ
イト（ｍｅｒｏｚｏｉｔｅ）に特異的であって、かつ今
日までにバイオテクノロジー的手法で調製されてきたタ
ンパク質のうちで、サイミリまたはアオタスモンキーを
用いた免疫実験における部分的防御効果は、いわゆるＲ
ＥＳＡ１５５ｋＤメロゾイトタンパク質といわれる５’
反復領域（ｒｅｐｅａｔｒｅｇｉｏｎ）の組換え発現
タンパク質によって、さらに、２００ｋＤのメロゾイト
表面前駆タンパク質の合成オリゴペプチドによって、お
よび分子量３５ｋＤ、５５ｋＤおよび２００ｋＤのタン
パク質の合成オリゴペプチドの組合せによって、示され
ている。遺伝子操作によって調製され、モンキーを用い
るインビボ実験において防御的効果を示す、上記の抗原
の細換えタンパク質は、マラリアワクチンのための有力
な可能性を有している。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、上記問題点
の解決を意図するものであり、プラスモジウム・ファル
シパルム感染に防御的な抗原をコードする配列物、およ
びそれらの発現産物、ならびにそれらの使用を提供する
ことを目的とする。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明は、表１〜１８に
示したアミノ酸配列を有するプラスモジウム・ファルシ
パルム（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕ
ｍ）のタンパク質、および抗原活性を有するその部分配
列物を提供する。

【０００５】

【発明の実施の形態】本発明の目的は、Ｌ．Ｐｅｒｒｉ
ｎ（１９８５、前出）によって記述された防御的な４１
ｋＤ抗原バンドをコードする配列物を単離すること、そ
れらの配列物の発現を行うこと、および発現産物の制御
効果をモンキーモデルにおいて試験することであった。

【０００６】４１ｋＤ抗原バンドに対する特異的抗血清
を用いてゲノム発現バンクから１５個のクローンを単離
して、これらの挿入物（ｉｎｓｅｒｔｉｏｎｓ）の構造
を明らかにした。クローン４１−１〜４１−１０および
４１−１２〜４１−１５、さらに４１−１７の配列を表
１〜１５に示す。きわめて強い免疫学的反応を示す二つ
のクローン（４１−２および４１−１７）を用いて、ス
クリーニングに用いる血清から単一特異性抗体を単離し
た。これら抗体は、ウエスタンブロットにおいて４１ｋ
Ｄのメロゾイト抗原と特異的に反応する。

【０００７】サザンブロットにおいて、３．０ｋｂＥ
ｃｏＲＩフラグメントおよび２．０ｋｂＳａｕ３Ａフ
ラグメントを、クローン４１−２の挿入ＤＮＡとハイブ
リダイゼーションさせた。両方のＤＮＡフラグメントを
単離して配列決定した。

【０００８】Ｓａｕ３Ａフラグメントは、４１−２遺伝
子の完全なコード領域を含んでいる。この領域はイント
ロンを含まず、その分子量は２１５１２ダルトンであっ
て、１８４個のアミノ酸をコードする。この４１−２タ
ンパク質は、一つのシグナル配列および二つのさらに疎
水性の部分を有している。反復配列は全く存在しない。
コード領域の７０％を含む発現産物に対して調製された
ウサギ抗血清を用いるシゾント（ｓｃｈｉｚｏｎｔ）タ
ンパク質のウエスタンブロット分析によって、２９ｋＤ
のバンドが得られた。さらに、１．６ｋｂのｍＲＮＡを
ノーザンブロット分析によって検出した。

【０００９】他方、クローン４１−７の挿入ＤＮＡは、
４１ｋＤのタンパク質をコードする。４１−７の融合タ
ンパク質に対して調製されたウサギ抗血清は、ウエスタ
ンブロットにおいて４１ｋＤバンドを明確に認識する。
クローン４１−７の挿入ＤＮＡを用いてゲノムλｇｔ１
１ＥｃｏＲ１＊遺伝子バンクをスクリーニングすること
によって、２．３ｋｂのマラリア特異性挿入物（ｉｎｓ
ｅｒｔ）を含むクローンを同定することが可能であっ
た。これを単離して配列決定した。これは、４１ｋＤタ
ンパク質の完全なコード領域を含む。遺伝子はシグナル
配列はコードせず、イントロンも反復部分も含まない。
プラスモジウム・ファルシパルムからの４１ｋＤタンパ
ク質の対応アミノ酸配列は、哺乳動物の筋肉および肝臓
からのアルドラーゼおよびトリパノゾーマ・ブルセイ
（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａｂｒｕｃｅｉ）からのアル
ドラーゼと高い相同性（６０％以上）を示す。哺乳動物
のゲノムと対照的に、プラスモジウム・ファルシパルム
のサザンブロット分析では、ゲノム当り唯一つのアルド
ラーゼ遺伝子しか見出されなかった。

【００１０】クロ−ン４１−１、２、３、４、５、６、
７、８、９、１０、１２、１３、１４、１５および１７
を、４１ｋＤタンパク質バンドに対する抗血清との交差
反応性に基づいて検出した。これらはワクチンの製造に
適している。クローン４１−１〜４１−５および４１−
７、４１−１０および４１−１４の挿入ＤＮＡの発現を
ベクターｐＥＸ−３１において行い、得られた融合タン
パク質を精製した。三つの発現産物（４１−１、４１−
２および４１−３）の免疫学的有効量を組合せて用いる
ことによって、アオタスモンキーをプラスモジウム・フ
ァルシパルム感染から防御することができる。

【００１１】したがって、本発明は、ａ）クローン４１−１〜４１−１０、４１−１２〜４１
−１５および４１−７、さらに４１−２ｇｅｎおよび４
１−７ｇｅｎ、のＤＮＡ配列の精製単離物、ならびにそ
れらの転写産物、ｂ）これら配列の全部または部分を含む、ＤＮＡ構造物
およびベクター、ｃ）そのようなＤＮＡで形質変換させた原核細胞または
真核細胞、ｄ）形質変換されたこれら細胞によって発現されたポリ
ペプチドまたはその部分、ｅ）それらのアミノ酸配列、ｆ）上記（ｄ）のポリペプチドに対する抗体、ならび
に、能動免疫のため、診断のため、および該ポリペプチ
ドの精製のための、該抗体の使用、ｇ）上記（ｅ）からのアミノ酸配列物を単独でまたは組
合せで含む、マラリアに対するワクチン、ｈ）（ｄ）に詳述したポリペプチドまたはその部分を遺
伝子操作によって調製する方法、およびｉ）診断のための該アミノ酸配列物の使用、に関する。

【００１２】本発明のさらなる態様は、以下の諸例およ
びそれに続く諸表ならびに特許請求の範囲に詳細に説明
される通りである。

【００１３】

【実施例】例１：単一特異性抗４１ｋＤ血清を用いるλ
ｇｔ１１発現バンクのスクリーニング１０⁶ＰＦＵ（プラーク形成単位）のゲノムλｇｔ１１
発現バンク（プラスモジウム・ファルシパルムＴ９９６
株のＤＮＡから調製）を、プラスモジウム・ファルシパ
ルムＳＧＥ２株からの４１ｋＤ抗原バンド［Ｌ．Ｈ．Ｐ
ｅｒｒｉｎら：（１９８５）、前出］に対する抗血清を
用いて既知の方法［Ｌ．Ｓ．Ｏｚａｋｉ（１９８６）、
Ｊ．Ｉｍｍｕｎ．Ｍｅｔｈｏｄ．８９、２１３−２１
９、ＰｒｏｍｅｇａＢｉｏｔｅｃ（１９８６）、Ｐｒ
ｏｔｏＢｌｏｔＩｍｍｕｎｏｓｃｒｅｅｎｉｎｇ
Ｓｙｓｔｅｍ、ＴｅｃｈｎｉｃａｌＭａｎｕａｌ］に
てスクリーニングした。このために用いた検出系（ｓｙ
ｓｔｅｍ）は、抗ウサギＩｇＧ／アルカリホスファター
ゼ複合物（Ｐｒｏｍｅｇａ社製、注文番号Ｐ３７３１）
であった。

【００１４】４１ｋＤタンパク質バンドに対する抗血清
を用いてゲノムλｇｔ１１遺伝子バンクをスクリーニン
グすることによって、きわめて強く反応する二つのクロ
ーン（４１−２および４１−７）およびより弱く反応す
る１３個の他のクローン（４１−１、４１−３、４１−
４、４１−５、４１−６、４１−８、４１−９、４１−
１０、４１−１２、４１−１３、４１−１４、４１−１
５および４１−１７）およびきわめて弱く反応する約４
０個の他のクローンを同定することができた。１５個の
クローンの挿入ＤＮＡ（１４０ｂｐ〜６５０ｂｐからな
る）をＥｃｏＲＩで切り出して、ベクターｐＵＣ８のＥ
ｃｏＲＩ部位にクローニングして、さらに特徴づけをし
た。

【００１５】例２：クローン４１−１〜４１−１０、４
１−１２〜４１−１５および４１−１７の挿入フラグメ
ントの配列決定挿入ＤＮＡの配列決定を、プライマーおよび逆（ｒｅｖ
ｅｒｓｅ）プライマーを用いるジデオキシ法によってｐ
ＵＣ８プラスミドから直接に行った［Ｅ．Ｙ．Ｃｈｅｎ
およびＰ．Ｈ．Ｓｅｅｂｕｒｇ：（１９８５）、ＤＮＡ
４、１６５−１７０］。表１〜１５に、クローン４１
−１、４１−２、４１−３、４１−４、４１−５、４１
−６、４１−７、４１−８、４１−９、４１−１０、４
１−１２、４１−１３、４１−１４、４１−１５および
４１−１７の可能な転写解読枠（ｏｐｅｎｒｅａｄｉ
ｎｇｆｒａｍｅ）のみにおけるマラリア特異性ＤＮＡ
配列（それぞれ、配列番号１、３、５、７、９、１１、
１３、１５、１７、１９、２１、２３、２５、２７、お
よび２９）およびそれに対応するアミノ酸配列（それぞ
れ、配列番号２、４、６、８、１０、１２、１４、１
６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、および３
０）が示されている。これら１５個の配列部分には、重
複や相同性は全く認められない。ＵＷＧＣＧ（Ｕｎｉｖ
ｅｒｓｉｔｙｏｆＷｉｓｃｏｎｓｉｎ，Ｇｅｎｅｔ
ｉｃＣｏｍｐｕｔｅｒＧｒｏｕｐ）プログラムを用
いて、これら１５個の配列を、ＥＭＢＬデータバンク内
における相同的配列部分について調べた。これら１５個
の部分配列または比較的大きい相同的部分のいずれにつ
いても今までに記載されたことはない。特許出願ＤＥ−
Ｐ第３，７４１，０５７号明細書に示唆されているよう
に、クローン４１−１０の配列のヌクレオチド１〜１３
４と１４０ｋＤタンパク質遺伝子のヌクレオチド２１４
４から２２７４までの部分配列の相同性はわずか７４％
である。クローン４１−１０の配列はまた、プラスモジ
ウム・ファルシパルムタンパク質に典型的な反復配列
（ｒｅｐｅｔｉｔｉｖｅｓｅｑｕｅｎｃｅ）部分を含
む唯一のものである。このクローンのアミノ酸配列は、
三つのテトラペプチド配列Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｓ
ｅｒを含んでおり、二番目の反復配列の二番目のセリン
残基はアスパラギン残基によって置換されている。これ
は、Ｇ−Ａ転移によって起きたものである。さらに、ク
ローン４１−７の配列のヌクレオチド５０〜１６３は、
ラットのアルドラーゼｍＲＮＡのヌクレオチド２１８〜
３３１と５６％の相同性を有する［Ｔ．Ｍｕｃａｉ
ら：（１９８６）、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６１、
３３４７−３３５４］。

【００１６】例３：発現クローン４１−２および４１−
７に対する特異性抗体を用いての４１ｋＤ抗原の検出Ｌ．Ｓ．Ｏｚａｋｉ（１９８６、前出）の方法を用い
て、４１ｋＤタンパク質バンドに対する抗血清から、発
現クローン４１−１、４１−２、４１−３、４１−７、
４１−８およびλｇｔ１１（対照）の産生物に特異性を
示す抗体を単離した。シゾントを得るために、プラスモ
ジウム・ファルシパルムをヒト赤血球で培養し［Ｗ．Ｔ
ｒａｇｅｒおよびＪ．Ｂ．Ｊｅｎｓｅｎ：（１９７
６）、Ｓｃｉｅｎｃｅ１９３、６７３−６７５］、ソ
ルビトール処理によって同調（ｓｙｎｃｈｒｏｎｉｚｅ
ｄ）させた［Ｃ．ＬａｍｂｒｏｓおよびＪ．Ｐ．Ｖａｎ
ｄｅｒｂｅｒｇ：（１９７９）、Ｊ．Ｐａｒａｓｉｔｏ
ｌ．６５、４１８−４２０］。シゾントを、Ｇｅｌａｆ
ｕｎｄｉｎ^R（ブラウンメルズンゲン社製）［Ｇ．Ｐａ
ｓｖｏｌら：（１９７８）、Ａｎｎ．Ｔｒｏｐ．Ｍｅ
ｄ．Ｐａｒａｓｉｔｏｌ．７２、８７−８８と同様］に
浮遊させることによって約９０％までに濃厚にした。シ
ゾントを遠心分離し、洗浄し、ＳＤＳ試料緩衝液で１０
０℃で５分間加熱し、超音波処理して、等量づつに分け
て凍結した。

【００１７】シゾント溶解液を上記の特異性抗体のウエ
スタンブロット分析に用いた［Ｄ．Ａ．Ｊｏｈｎｓｏｎ
ら：（１９８４）、ＧｅｎｅＡｎａｌ．Ｔｅｃｈ．
１、３−８］。ここで、発現クローン４１−２および４
１−７を用いて単離した抗体は、シゾントからの４１ｋ
Ｄ抗原バンドときわめて強く反応した。

【００１８】例４：クローン４１−２の遺伝子情報を含
むＤＮＡフラグメントのクローニングシゾント培養液を溶解して、エチジウムブロミド／Ｃｓ
Ｃｌ遠心分離して、プラスモジウム・ファルシパルムＦ
ＣＢＲ株からのゲノムＤＮＡを得ておいた［Ｐ．Ｏｑｕ
ｅｎｄｏら：（１９８６）、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒａｎ
ｄＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌＰａｒａｓｉｔｏｌｏｇ
ｙ１８、８９−１０１］。このＤＮＡの１５μｇを、
制限酵素ＥｃｏＲＩにて消化して、遺伝子スクリーン膜
（デュポン社製）に製造者の指示に従ってブロッティン
グして、次いで１０⁷〜１０⁸ｄｐｍ／μｇの比活性（ｓ
ｐｅｃｉｆｉｃａｃｔｉｖｉｔｙ）を有するクローン
４１−２のニックトランスレーションされた（ｎｉｃｋ
−ｔｒａｎｓｌａｔｅｄ）挿入ＤＮＡとハイブリダイゼ
ーションさせた。フィルターを０．３×ＳＳＣ（１×Ｓ
ＳＣ＝０．１５ＭＮａＣｌ、０．０１５Ｍクエン酸ナ
トリウム）および１％ＳＤＳ（ソジウムドデシルサルフ
ェート）にて６５℃で１時間洗浄した後、フィルターを
オートラジオグラフィーで分析した。このサザンブロッ
ト実験法を用いて、クローン４１−２の挿入ＤＮＡとハ
イブリダイズする約３ｋｂの大きさのゲノムＥＣＯＲＩ
フラグメントを同定した。プラスモジウム・ファルシパ
ルムＦＣＢＲ株のＤＮＡを制限酵素ＥｃｏＲＩで切断し
て、その６０μｇを調製ゲルで分画して、２．８ｋｂか
ら３．２ｋｂの領域を切りだして電気溶出した［Ｂ．Ｐ
ｅｒｂａｌ：（１９８４）、ＡＰｒａｃｔｉｃａｌ
ＧｕｉｄｅｔｏＭｏｌｅｃｕｌａｒＣｌｏｎｉｎ
ｇ］。このＤＮＡをＴ．Ｖ．Ｈｕｙｎｈらの方法［ＤＮ
ＡＣｌｏｎｉｎｇＶｏｌ．１，Ｄ．Ｍ．Ｇｌｏｖｅ
ｒ編集（１０８５）、４９−８８］にてベクターλｇｔ
１０にクローニングした。１０⁵ＰＦＵの得られた遺伝
子バンクを、クローン４１−２のニックトランスレーシ
ョンされた挿入ＤＮＡにて既知の方法［Ｔ．Ｍａｎｉａ
ｔｉｓら：（１９８２）、ＭｏｌｅｃｕｌａｒＣｌｏ
ｎｉｎｇ、ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ］
でスクリーニングした。その結果、クローン４１−２の
挿入ＤＮＡとハイブリダイズするいくつかのファージク
ローンが得られた。これらクローンの一つのファージＤ
ＮＡを単離して［Ｒ．Ｗ．Ｄａｖｉｓら：（１９８
０）、ＡＭａｎｕａｌｆｏｒＧｅｎｅｔｉｃＥｎ
ｇｉｎｅｅｒｉｎｇ、ＡｄｖａｎｃｅｄＢａｃｔｅｒ
ｉａｌＧｅｎｅｔｉｃｓ］、制限酵素ＥｃｏＲＩで消
化した。３．０ｋｂの大きさのＤＮＡフラグメントをゲ
ル電気泳動によって精製して、ベクターｐＵＣ１８のＥ
ｃｏＲＩ制限部位にサブクローニングした（プラスミド
ｐＵＣ４１−２ｇｅｎ）。次いでサザンブロット分析
（Ｔ．Ｍａｎｉａｔｉｓら：前出）を行って、このｐＵ
Ｃ４１−２ｇｅｎの３．０ｋｂＥｃｏＲＩＤＮＡフ
ラグメントをクローン４１−２の挿入ＤＮＡとハイブリ
ダイゼーションさせた。

【００１９】例５：クローンｐＵＣ４１−２ｇｅｎの配
列分析プラスミドＤＮＡｐＵＣ４１−２ｇｅｎの配列決定を、
プライマーおよび逆プライマーを用いてＥｃｏＲＩ末端
部位から行った［Ｅ．Ｙ．ＣｈｅｎおよびＰ．Ｈ．Ｓｅ
ｅｂｕｒｇ：（１９８５）、前出］。これによって、
３．０ｋｂＥｃｏＲＩフラグメントのそれぞれの末端
からの約２５０個の塩基の配列決定が可能であった。こ
れら末端の一つの配列は、クローン４１−２の挿入ＤＮ
Ａと同一である。制限酵素地図を作出するために、単離
された３．０ｋｂＥｃｏＲＩＤＮＡフラグメントの
試料の０．５μｇを種々の制限酵素とインキュベートし
て、ゲル電気泳動にて分画して、ニトロセルロース上に
ブロッティングして、ニックトランスレーションされた
クローン４１−２の挿入ＤＮＡと既知の方法でハイブリ
ダイズさせた（Ｔ．Ｍａｎｉａｔｉｓ：前出）。ハイブ
リダイズされた制限酵素フラグメントの大きさによっ
て、種々の制限酵素切断部位のＥｃｏＲＩ切断部位から
の距離を推定することができた。これは、二つのクロー
ン４１−２およびｐＵＣ４１−２ｇｅｎに共通してい
る。このようにして作出された制限酵素地図に基づい
て、クローンｐＵＣ４１−２ｇｅｎの制限フラグメント
を単離して、配列決定のためにファージベクターＭ１３
ｍｐ１８およびＭ１３ｍｐ１９にサブクローニングした
［Ｆ．Ｓａｎｇｅｒら：（１９７７）、Ｐｒｏｃ．Ｎａ
ｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、７４、５４６３−５
４６７］。これによって、遺伝子に属するＥｃｏＲＩ制
限部位から遺伝子の５’末端に向かってＤｒａＩ制限酵
素切断部位までの配列が決定された。表１６は、クロー
ンｐＵＣ４１−２ｇｅｎの１２３０ｂｐからなるこのＤ
ｒａＩ−ＥｃｏＲＩＤＮＡフラグメントのＤＮＡ配列
（配列番号３１）および対応するアミノ酸配列（配列番
号３２）を示したものである。塩基位置１０３６から１
２２８までの配列は、４１−２の挿入ＤＮＡと同一であ
る。クローン４１−２の配列およびクローンｐＵＣ４１
−２ｇｅｎのゲノム配列は異なるプラスモジウム・ファ
ルシパルム株（タイからのＴ９９６株およびコロンビア
からのＦＣＢＲ株）に由来することから、少なくともこ
の遺伝子部分はきわめて恒久性が高いとみられる。この
配列の転写解読枠は、塩基位置７８４においてＡＴＧ開
始コドンで始まり、遺伝子内のＥｃｏＲＩ制限酵素切断
部位に属するＴＴＣコドンで終結する。この部分は、タ
ンパク質の１４９個のＮ−末端アミノ酸をコードする。
この遺伝子の部分配列は、反復配列部分を全く有しな
い。対応するアミノ酸配列は、１８個のアミノ酸の配列
部分に始まり、そのうちの４個は酸性であり、５個は塩
基性である。この配列部分の後に、酸性アミノ酸残基を
両側に有する１１残基からなる疎水性部分が続く。この
疎水性の領域は、シグナル配列として機能するものかも
しれない。この推定されるシグナル配列の前方の塩基性
および酸性アミノ酸を有する領域は、比較的に長い。し
かし、同様の長さの領域は、他のプラスモジウム・ファ
ルシパルムタンパク質についても記載されていた［Ｔ．
Ｔｒｉｇｌｉａら：（１９８７）、ＴｈｅＥＭＢＯＪ
ｏｕｒｎａｌ６、１４１３−１４１９］。対応するア
ミノ酸配列を、ＵＷＧＣＧプログラムを用いて、親水性
領域および表面領域、さらに免疫原性エピトープである
可能性を示す領域について調べた。その結果、ヌクレオ
チド配列の位置第８９０〜９０７、１０７９〜１０９３
および１１５１〜１１６８によってコードされるタンパ
ク質の三つの親水性領域が明らかになった。

【００２０】他のプラスモジウム・ファルシパルム遺伝
子についても記載されているように［Ｊ．Ｌ．Ｗｅｂｅ
ｒ（１９８７）、Ｇｅｎｅ５２、１０３−１０９］、
この遺伝子の５’非コード領域はきわめてＡＴに富んで
いる（ＡＴ含有量：８８．８％）。また、この領域は、
それぞれの場合に、三つの解読枠のそれぞれに１５個以
上の終始コドンを有する。さらに、可能なＣＡＡＴボッ
クスが位置２７４に存在しており、可能なＴＡＴＡボッ
クスがここからヌクレオチド６４個分の下流に位置して
いる。これらの構造は、この遺伝子の可能なプロモータ
ー領域を特定するものかもしれない。

【００２１】例６：４１−２の完全な遺伝子の単離クローンｐＵＣ４１−２ｇｅｎの配列分析によって、Ｅ
ｃｏＲＩ切断部位から９４７ｂｐ離れているＳａｕ３Ａ
切断部位が判明した。ゲノムのサザンブロット分析によ
って、クローン４１−２の挿入ＤＮＡとハイブリダイズ
する２．０ｋｂの大きさのＳａｕ３Ａフラグメントを同
定した（例４を参照されたい）。したがって、このＳａ
ｕ３Ａフラグメントは、ＥｃｏＲＩ部位から３’方向に
向かっての４１−２遺伝子の約１０５０ｂｐの遺伝子情
報を有するものと考えられる。ＦＣＢＲ株からのＤＮＡ
を制限酵素Ｓａｕ３Ａで切断しておいて、このＤＮＡの
６０μｇを調製ゲル中で分画して、１．８ｋｂ〜２．２
ｋｂのＤＮＡフラグメントを単離した。このＤＮＡを製
造者（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ社）の指示にしたがってべ
クターλＺＡＰのＸｈｏＩ部位にクローニングさせた。
１０⁵ＰＦＵのこの遺伝子バンクを、ニックトランスレ
ーションしたクローン４１−２の挿入ＤＮＡでスクリー
ニングして、約４０個のファージクローンを同定した
（例４を参照されたい）。Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ法を用
いる自動切り出しによって、これらファージクローンの
一つからブルースクリプト（ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ）ベ
クター（ｐＳＫ^-４１−２ｇｅｎ）を単離した。このプ
ラスミドＤＮＡを制限酵素ＫｐｎＩおよびＥｃｏＲＩで
切断して、９５０ｂｐおよび１０５０ｂｐの二つのＤＮ
Ａフラグメントを単離した。このうち９５０ｂｐのフラ
グメントをサザンブロットにてクローン４１−２の挿入
ＤＮＡとハイブリタイゼーションさせた。プラスミドｐ
ＳＫ^-４１−２ＤＮＡの配列を、プライマーおよび逆プ
ライマーを用いて決定した（Ｅ．Ｙ．Ｃｈｅｎおよび
Ｐ．Ｈ．Ｓｅｅｂｕｒｇ：（１９８５）、前出）。プラ
イマーを用いて決定した配列は、Ｓａｕ３Ａ部位からの
３’方向のプラスミドｐＵＣ４１−２ｇｅｎの挿入ＤＮ
Ａの配列と同一である。プラスミドｐＳＫ^-４１−２ｇ
ｅｎの１０５０ｂｐのＥｃｏＲＩＤＮＡフラグメント
を、ベクターｐＫＳ⁺のＥｃｏＲＩ部位にサブクローニ
ングした（Ｔ．Ｍａｎｉａｔｉｓら：前出）。このＤＮ
Ａフラグメントの制限酵素地図を作出した。この地図に
基づいて、制限フラグメントをブルースクリプトベクタ
ーにサブクローニングして、ｓｓＤＮＡ調製の後に配列
決定した（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ社説明書）。すなわ
ち、４１−２遺伝子のＥｃｏＲＩ制限部位からＳａｕ３
Ａ部位までを３’方向に完全に配列決定した。表１６の
続きである表１７は、クローンｐＳＫ^-４１−２ｇｅｎ
のこのＥｃｏＲＩ−Ｓａｕ３ＡＤＮＡフラグメントの
ＤＮＡ配列（配列番号３３）および対応アミノ酸配列
（配列番号３４）を示しており、これは１０５０ｂｐか
らなる。この遺伝子部分は、ＴＡＧ終止コドンが現れる
までのわずか３５個の追加のアミノ酸をコードする。遺
伝子の３’非コード領域はきわめてＡＴに富んでおり
（ＡＴ含有量＝８４．７％）、三つの各解読枠において
１１個以上の終止コドンを含んでいる。Ｓ１マッピング
法（Ｆ．Ｍ．Ａｕｓｕｂｅｌら：（１９８７）、Ｃｕｒ
ｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌ
ａｒＢｉｏｌｏｇｙ，ＨａｒｖａｒｄＭｅｄｉｃａ
ｌＳｃｈｏｏｌ、Ｂｏｓｔｏｎ）によって、この遺伝
子のいかなるイントロン−エクソン構造の立証も得られ
なかった。最後に、ノーザンブロット分析（Ｔ．Ｍａｎ
ｉａｔｉｓら：前出）によって、１．６ｋｂの大きさの
シゾント段階のｍＲＮＡを検出した。したがって、４１
−２遺伝子は５５２ｂｐ（ＡＴ含有量＝７３％）の単一
のコード部分のみを有すると仮定することが必要であ
る。後者は、２１５１２ダルトンの抗原をコードし、こ
れは、シグナル配列を有する（例５を参照されたい）
が、反復部分を有しない。シグナル配列の他に、この抗
原は、さらに二つの疎水性部分をアミノ酸位置７３〜８
５および１３０〜１４７に有しており、これらは膜アン
カーとして機能するかもしれない。

【００２２】例７：ベクターｐＥＸ３１におけるクロー
ン４１−１〜４１−５ならびに４１−７、４１−１０お
よび４１−１４の挿入物の発現クローン４１−１〜４１−５、４１−７、４１−１０お
よび４１−１４の挿入フラグメントを制限酵素ＥｃｏＲ
Ｉで切断した後、ゲル電気泳動によって単離し、制限酵
素ＥｃｏＲＩで消化して脱燐酸しておいたベクターｐＥ
Ｘ３１ｂに連結させて［Ｋ．Ｓｔｒｅｂｅｌら：（１９
８６）、ＪｏｕｒｎａｌｏｆＶｉｒｏｌｏｇｙ５
７、９８３−９９１］、プラスミドｐＣＩ８５７を含む
コンピテントにしたＣ６００細菌を形質転換させた
［Ｆ．Ｒｅｍａｕｔら：（１９８１）、Ｇｅｎｅ１
５、８１−９３］。それぞれのコロニーを、ＭＳ２ポリ
メラーゼ融合タンパク質としてのプラスモジウム特異性
ＤＮＡ配列の発現についてＳＤＳ−ＰＡＧＥによって調
べた。誘導はＨ．Ｋｕｅｐｐｅｒらの方法［Ｙ．Ｉｋｅ
ｄａおよびＴ．Ｂｅｐｐｕ（編集）：（１９８２）、Ｐ
ｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓｏｆｔｈｅＦｏｕｒｔｈ
ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＳｙｍｐｏｓｉｕｍｏｎ
ＧｅｎｅｔｉｃｓｏｆＩｎｄｕｓｔｒｉａｌＭ
ｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ（１９８２）、Ｋｙｏｔ
ｏ、ＫｏｄａｎｓｈａＬｔｄ．、Ｔｏｋｙｏ］にて温
度を上昇させることによって行った。８個のフラグメン
トの全ての発現が高収率で可能であった。

【００２３】例８：発現産物の精製形質転換させた細菌の培養物を、５０μｇ／ｍｌのアン
ピシリンおよび２５μｇ／ｍｌのカナマイシンを含むＬ
Ｂ培地１リットル中で２８℃で２０時間それぞれ激しく
振とうした。４２℃に加温しておいたＬＢ培地の４リッ
トルを加えて、４２℃でさらに４時間振とうした。細菌
を遠心分離して、２００ｍｌの燐酸緩衝生理食塩水（Ｐ
ＢＳ）に再懸濁させて、機械的に破砕した。可溶性のタ
ンパク質を遠心分離によって除去して、発現産物を含む
沈殿物をＰＢＳで２回洗浄し、次いで融合タンパク質が
溶解するまで尿素濃度を上げながら（ｌＭから約５Ｍま
で）繰り返し洗浄した。次いで、尿素濃度が発現産物の
可溶性を保持するに十分な濃度になるまで尿素濃度を下
げながら透析を行った。この工程によって、純度６０〜
８０％が得られた。

【００２４】例９：４１−２ｇｅｎによってコードされ
た抗原の検出クローン４１−２の発現産物に対するウサギ抗血清を使
用して、シゾントタンパク質を用いるウエスタンブロッ
トによってマラリア抗原を明確に検出することは可能で
はなかった。したがって、遺伝子４１−２のより大きい
ＤＮＡフラグメントを発現させることを試みた。この目
的のために、制限酵素ＡｌｕＩおよびＥｃｏＲＩを用い
て、コード領域の７０％を含む４１−２遺伝子の３８８
ｂｐのフラグメントを単離した。このフラグメントをプ
ラスミドｐＵＣ１８のＳｍａＩおよびＥｃｏＲＩ部位に
サブクローニングした。制限酵素ＥｃｏＲＩを用いて、
このプラスミドから４０１ｂｐのフラグメントを単離し
て、これをベクターｐＥＸ３１ｂのＥｃｏＲＩ部位にク
ローニングした。形質転換の後、２６ｋＤの融合タンパ
ク質を発現する細菌コロニーを同定することが可能であ
った（例７を参照されたい）。これを精製して（例８を
参照されたい）、ウサギの免疫に用いた。シゾントタン
パク質を用いるウエスタンブロットによって、抗血清は
４１−２遺伝子によってコードされる２９ｋＤの抗原を
認識した。計算によって得られた分子量の２２ｋＤとＳ
ＤＳポリアクリルアミトゲルで得られた分子量の２９ｋ
Ｄの違いは、二次的修飾によって説明できる。すなわ
ち、タンパク質は位置１６６のアスパラギン残基にＮ−
グリコシレーション部位を有している。

【００２５】クローン４１−２がきわめて小さい抗原を
コードすることがノーザンブロット分析によって確認さ
れる。したがって、プラスモジウム・ファルシパルムの
シゾント段階において、クローン４１−２の挿入ＤＮＡ
とハイブリダイズする１．６ｋｂのｍＲＮＡが検出され
た。ノーザンブロット分析は既知の方法で行われた
［Ｔ．Ｍａｎｉａｔｉｓら：前出］。

【００２６】例１０：他のクローンの抗原の対応クローン４１−１、４１−３、４１−４、４１−５、４
１−７および４１−１０の精製された融合タンパク質に
対する抗血清を用いて、シゾントタンパク質を用いるウ
エスタンブロット分析によって対応する抗原を同定し
た。その結果、クローン４１−１、４１−３および４１
−４の融合タンパク質に対する抗血清では、明確な同定
ができなかった。クローン４１−５の挿入ＤＮＡは、９
６ｋＤの抗原に対応させることができる。プラスモジウ
ム・ファルシパルムの三つの９６ｋＤ抗原群について
は、過去に記載がある［Ｈ．Ｊｏｕｉｎら：（１９８
７）、Ｉｎｆ．Ｉｍｍ．５５、１３８７−１３９２］。
クローン４１−１０の発現産物に対する抗血清は、１１
３ｋＤおよび１４０ｋＤの二つの抗原を認識する。１１
３ｋＤ抗原との反応は、防御的抗原と同一であるＳＥＲ
ＰＩ抗原（例２を参照されたい）との交差反応として認
識された。このように、４１−１０は、プラスモジウム
・ファルシパルムの１４０ｋＤタンパク質をコードす
る。

【００２７】遺伝子によってコードされる抗原またはそ
の部分と防御作用を有する４１ｋＤタンパク質バンドに
対する血清とが反応することは、これらすべての遺伝子
に共通である。クローン４１−７のみが、クローン４１
−２とともに４１ｋＤタンパク質バンドに対する抗血清
と最強の反応性を有し、明確に４１ｋＤタンパク質と明
確に推定される。

【００２８】シゾントタンパク質を用いるウエスタンブ
ロットによって、クローン４１−７の融合タンパク質に
対する抗血清は、４１ｋＤタンパク質バンドを明らかに
認識する。これはまた、出発血清によっても認識されて
いる。このように、このクローンは、４１ｋＤ抗原のサ
ブフラグメントをコードするようである。調べたクロー
ンが種々の遺伝子の部分配列中に位置していることを、
クローン４１−１、４１−２、４１−３、４１−７、４
１−１０、４１−１４、および４１−１５のサザンブロ
ット分析によってさらに確認した。

【００２９】例１１：ゲノムλｇｔ１１遺伝子バンクの
調製プラスモジウム・ファルシパルムＦＣＢＲ株からのＤＮ
Ａの２μｇを、１０ｍＭトリス−塩酸（ｐＨ７．５）、
１０ｍＭＭｇＣｌ₂、１ｍＭジチオスレイトールおよ
び４０％グリセロール中の１４ユニットの制限酵素Ｅｃ
ｏＲＩとともに３７℃で一晩培養して、ゲル電気泳動に
て分画した。このような条件で、制限酵素はＥｃｏＲＩ
＊（ａｓｔｅｒｉｓｋ）活性を示し、その結果、約５０
ｂｐから１０ｋｂのＤＮＡフラグメントを形成する。５
００ｂｐから７ｋｂのＤＮＡ領域を電気溶出して、Ｔ．
Ｖ．Ｈｕｙｎｈらの方法（１９８５、ＤＮＡＣｌｏｎ
ｉｎｇＶｏｌ．１、ＡＰｒａｃｔｉｃａｌＡｐｐ
ｒｏａｃｈ、Ｄ．Ｍ．Ｇｌｏｖｅｒ編集］にてベクター
λｇｔ１１にクローニングした。５×１０⁵個の組換え
ファージクローンの遺伝子バンクを調製して、増やし
た。

【００３０】例１２：４１−７遺伝子の単離および配列
決定クローン４１−７は４１ｋＤタンパク質のサブフラグメ
ント（例１０を参照されたい）を実際にコードするの
で、完全な遺伝子を単離することを目的とする。この目
的のために、ゲノムλｇｔ１１ＥｃｏＲＩ＊遺伝子バ
ンク（例１１を参照されたい）を、既知の方法（Ｔ．Ｍ
ａｎｉａｔｉｓら：前出）にてクローン４１−７のニッ
クトランスレーションさせた挿入ＤＮＡを用いてスクリ
ーニングした。その結果、制限酵素ＥｃｏＲＩおよびＳ
ａｌＩを用いて３．３ｋｂの大きさの挿入物をそれから
それぞれ単離できる三つのλｇｔ１１クローンが得られ
た。挿入物のマラリア特異性の部分は、２．３ｋｂを占
める。このＤＮＡフラグメントの制限酵素地図を作出し
た。これに基づいて、サブフラグメントを、配列決定の
ためにブルースクリプトベクター（Ｓｔｒａｔａｇｅｎ
ｅ社製）にクローニングした。２．３ｋｂの大きさのこ
のマラリア特異性フラグメントの完全なＤＮＡ配列を明
らかにすることが可能であった。表１８は、４１−７遺
伝子のＤＮＡ配列（配列番号３５）およびそれに対応す
るアミノ酸配列（配列番号３６）を示したものである。
遺伝子はイントロンを有しない。５’非コード領域の５
２５塩基対が確認され（ＡＴ含有量＝８４．２％）、同
様に３’非コード領域の７７２塩基対も確認された（Ａ
Ｔ含有量＝８４．２％）。中心部分は、１０８６塩基対
からなり（ＡＴ含有量；６４．４％）、３６２個のアミ
ノ酸をコードする。この遺伝子の計算による分子量３９
３１４Ｄは、ゲル電気泳動によって決定された分子量４
１ｋＤとよく一致している。この遺伝子を２．４ｋｂの
大きさのｍＲＮＡに転写し、これを既知の方法（Ｔ．Ｍ
ａｎｉａｔｉｓら：前出）によるノーザンブロット分析
によって確認した。各プラスモジウム・ファルシバルム
ゲノムにはこの遺伝子のコピーが一つだけ存在すること
を、サザンブロット分析（例４を参照されたい）によっ
て推定することが可能であった。さらに、この遺伝子は
種々のプラスモジウム・ファルシパルム株（コロンビア
からのＦＣＢＲ、ウガンダからのＰａｌｏＡｌｔｏ、
ザイールからのＳＧＥ２、ブラジルからのＩｔＧ₂Ｇ₁お
よびベトナムからのＦＶＯＲ）に保持されていることが
明らかになった。さらに、クローン４１−７（タイから
のＴ９９６株）のマラリア特異性ＤＮＡ配列は、ＦＣＢ
Ｒ株から単離された遺伝子の位置４６４から７２９まで
の部分配列と同一である。このように、クローン４１−
７は、４１ｋＤタンパク質の８８個のＮ−末端アミノ酸
をコ−ドする。

【００３１】対応するアミノ酸配列から、４１ｋＤタン
パク質はいかなるシグナル配列も反復配列も含まないこ
とが明らかである。ＵＷＧＣＧ（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
ｏｆＷｉｓｃｏｎｓｉｎ、ＧｅｎｅｔｉｃＣｏｍ
ｐｕｔｅｒＧｒｏｕｐ）プログラムを用いて、このア
ミノ酸配列とＮＢＲＦタンパク質データバンク中のタン
パク質との相同性を調べた。その結果、４１ｋＤタンパ
ク質は、ヒト肝臓アルドラーゼ［Ｍ．Ｍｕｋａｉら：
（１９８５）、ＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄＲｅｓ．１
３、５０５５−５０６９］と６６％の相同性を、ラット
肝臓アルドラーゼ［Ｋ．Ｔｓｕｔｓａｍｉら：（１９８
４）、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５９、１４５７２−
１４５７５］と６６％の相同性を、ウサギ筋肉アルドラ
ーゼ［Ｄ．Ｒ．Ｔｏｌａｎら：（１９８４）、Ｊ．Ｂｉ
ｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５９、１１２７−１１３１］と６８
％の相同性を、およびトリパノゾーマ・ブルセイ［Ｃ．
Ｅ．Ｃｌａｙｔｏｎ：（１９８５）、ＥＭＢＯＪ．
４、２９９７−３００３］と６１％の相同性を、それぞ
れ有することが明らかになった。このように、４１ｋＤ
タンパク質は、プラスモジウム・ファルシパルムアルド
ラーゼと思われる。

【００３２】例１３：動物モデルにおける実験的防御−
アオタス・レムリナス・グリセイメンブラ（Ａｏｔｕｓ
ｌｅｍｕｒｉｎｕｓｇｒｉｓｅｉｍｅｍｂｒａ）
（核型ＶＩ）の免疫この実験は、記述した発現産物の有効性をプラスモジウ
ム・ファルシパルム感受性モンキーにおける防御的免疫
の誘起に関して試験するために行った。本実験に用いた
ワクチンは、免疫学的に強い反応性を示すクローン４１
−１、４１−２および４１−３の発現産物の組み合わせ
であった。

【００３３】１．実験内容６匹の上記した種のアオタス・モンキー（Ｂｅｈｒｉｎ
ｇｗｅｒｋｅＡＧによって育種された体重１０００〜
１５００ｇの雄および雌）を無差別に３匹ずつの二つの
グループに分けた。

【００３４】クローン４１−１、４１−２および４１−
３の融合タンパク質を３Ｍ尿素ＰＢＳ溶液に溶解して、
１：１：１の比で混合した（最終タンパク質濃度：３０
０μｇ／ｍｌ）。３匹を、３週間間隔で各回１ｍｌの混
合した融合タンパク質で３回皮下に免疫した。５０％Ａ
ｌ（ＯＨ）₃／４５％レシチン／５％サポニンからなる
混合物をアジュバントとして１０％濃度で抗原に加え
た。

【００３５】同様に、感染対照グループの３匹には、上
記の要領で、抗原成分を含まない３Ｍ尿素ＰＢＳ＋アジ
ュバントをそれぞれ注射した。

【００３６】動物の実験的プラスモジウム・ファルシパ
ルム感染をできるだけ同じ程度にするために、最終免疫
の８日後に全モンキーに脾臓摘出を施した（感受性を高
める）。

【００３７】初回ワクチンから６７日後、全６匹の動物
を５×１０⁶個の寄生虫感染赤血球で静注にて感染させ
た。選択したチャレンジ株はアオタス赤血球にインビト
ロで適応させておいたプラスモジウム・ファルシパルム
ＰａｌｏＡｌｔｏ（ウガンダ）で、これを脾臓摘出供
与動物［４％寄生虫血症（ｐａｒａｓｉｔｅｍｉａ）］
から直接に実験動物に移した。この株は他のプラスモジ
ウム・ファルシパルム分離株とはその高い感染性で異な
っている。また、この株は免疫抗原の調製に用いたＴ９
９６株（タイ）とは起源および血清型の点で異種である
ことも注目される。

【００３８】生理学的、寄生虫学的、血清学的および臨
床化学的パラメーターを全観察期間を通して定期的に調
べた（免疫前後およびチャレンジ後）。

【００３９】２．結果全免疫期間を通して、検査した生理学的（臨床症状、体
温、体重）または臨床化学的（赤血球数、ヘマトクリッ
ト、ＥＳＲ、血清酵素ＧＰＴおよびＧＯＴ）なパラメー
ターのいずれにも病理学的な変化は認められなかった。
さらに、薬剤安全試験（欧州薬局方の規定に基づく、マ
ウスにおける急性皮下毒性およびモンキーにおける局部
的寛容性試験）の結果は、使用したワクチン調製物の安
全性および寛容性が適当であることを示した。

【００４０】２．１寄生虫血症誘起される防御効果を評価する主な手段は、実験動物の
末梢血の寄生虫感染赤血球の顕微鏡による検出である。

【００４１】感染から７〜１０日の早い時期に、僅少
（１０００個当り１個以下）の寄生虫感染した赤血球
を、非免疫動物からの血液のギムザ染色塗抹物で検出し
た。免疫した動物では、寄生虫の出現は感染後１０〜１
５日と遅く、寄生虫血症は最高レベルで１〜２％であ
り、感染は自然排除された。実験途中で動物の１匹が肺
炎によって死んだ。

【００４２】非免疫群の動物の１匹では寄生虫血症を最
高レベル４．５％に抑制することが可能であったが、他
の２匹では感染死を防ぐために寄生虫血症が＞１０％に
達した後にメフロキン（ｍｅｆｌｏｑｕｉｎｅ、Ｈｏｆ
ｆｍａｎＬａＲｏｃｈｅ社製）による治療が必要で
あった。前の感染実験において、チャレンジに用いたＰ
ａｌｏＡｌｔｏ株はクロロキノン耐性であることが証
明されていた。

【００４３】図１左は、クローン４１−１、４１−２お
よび４１−３の融合タンパク質からなる混合ワクチンで
免疫した後のアオタスモンキーにおける寄生虫血症の経
過を示し、図１右は、その対照（非免疫動物）を示す。

【００４４】

【表１】

【００４５】

【表２】

【００４６】

【表３】

【００４７】

【表４】

【００４８】

【表５】

【００４９】

【表６】

【００５０】

【表７】

【００５１】

【表８】

【００５２】

【表９】

【００５３】

【表１０】

【００５４】

【表１１】

【００５５】

【表１２】

【００５６】

【表１３】

【００５７】

【表１４】

【００５８】

【表１５】

【００５９】

【表１６】

【００６０】

【００６１】

【表１７】

【００６２】

【００６３】

【表１８】

【００６４】

【００６５】

【００６６】

【発明の効果】本発明により、クローン４１−１〜４１
−１０、４１−１２から４１−１５および４１−７、さ
らに４１−２ｇｅｎおよび４１−７ｇｅｎのＤＮＡ配列
の精製単離物ならびにそれらの転写産物が提供される。
これらの配列の全部または部分を含むＤＮＡ構造物およ
びベクター、そのようなＤＮＡで形質転換された原核細
胞または真核細胞、それらの形質転換細胞から発現され
るポリペプチドまたはその部分、そのようなポリペプチ
ドに対する抗体もまた提供される。このようなポリペプ
チドは、アオタスモンキーをプラスモジウム・ファルシ
パルム感染から防御し得る。

【００６７】

【配列表】 SEQUENCE LISTING <110> Behringwerke Aktiengesellschaft <120> Malaria-specific DNA sequences, expression products thereof, and the use thereod <130> F1-99811440 <140> <141> <150> DE P3744495.6 <151> 1987-12-30 <160> 36 <170> PatentIn Ver. 2.0 <210> 1 <211> 370 <212> DNA <213> Plasmodium falciparum <220> <221> CDS <222> (3)..(368) <400> 1 ta aaa tct tta tgt att ttt aaa caa aga aat aaa aag gta agg tca 47 Lys Ser Leu Cys Ile Phe Lys Gln Arg Asn Lys Lys Val Arg Ser 1 5 10 15 tca aat aat tca tct ttc tta att gat ttt aga aac tca cat acg aat 95 Ser Asn Asn Ser Ser Phe Leu Ile Asp Phe Arg Asn Ser His Thr Asn 20 25 30 aat atc aat atg tta aca gaa aat caa aag ttt aat aat gta tta ttg 143 Asn Ile Asn Met Leu Thr Glu Asn Gln Lys Phe Asn Asn Val Leu Leu 35 40 45 aat aaa gaa att cag atg gat gaa aat cag gaa cgt gaa ttt tca att 191 Asn Lys Glu Ile Gln Met Asp Glu Asn Gln Glu Arg Glu Phe Ser Ile 50 55 60 gat gat tgt tta atg aac tgc ctg aaa cat aat gca tct aat tta aaa 239 Asp Asp Cys Leu Met Asn Cys Leu Lys His Asn Ala Ser Asn Leu Lys 65 70 75 acc aat gaa gat tat gaa aga tat tgt aat gaa gac aaa ata ttg aat 287 Thr Asn Glu Asp Tyr Glu Arg Tyr Cys Asn Glu Asp Lys Ile Leu Asn 80 85 90 95 cca gat tat aag cct tca gaa tct aga aaa ctg gga gaa aaa ttt ttg 335 Pro Asp Tyr Lys Pro Ser Glu Ser Arg Lys Leu Gly Glu Lys Phe Leu 100 105 110 caa aaa agt caa aag gaa tta tat tat tct tat gc 370 Gln Lys Ser Gln Lys Glu Leu Tyr Tyr Ser Tyr 115 120 <210> 2 <211> 122 <212> PRT <213> Plasmodium falciparum <400> 2 Lys Ser Leu Cys Ile Phe Lys Gln Arg Asn Lys Lys Val Arg Ser Ser 1 5 10 15 Asn Asn Ser Ser Phe Leu Ile Asp Phe Arg Asn Ser His Thr Asn Asn 20 25 30 Ile Asn Met Leu Thr Glu Asn Gln Lys Phe Asn Asn Val Leu Leu Asn 35 40 45 Lys Glu Ile Gln Met Asp Glu Asn Gln Glu Arg Glu Phe Ser Ile Asp 50 55 60 Asp Cys Leu Met Asn Cys Leu Lys His Asn Ala Ser Asn Leu Lys Thr 65 70 75 80 Asn Glu Asp Tyr Glu Arg Tyr Cys Asn Glu Asp Lys Ile Leu Asn Pro 85 90 95 Asp Tyr Lys Pro Ser Glu Ser Arg Lys Leu Gly Glu Lys Phe Leu Gln 100 105 110 Lys Ser Gln Lys Glu Leu Tyr Tyr Ser Tyr 115 120 <210> 3 <211> 194 <212> DNA <213> Plasmodium falciparum <220> <221> CDS <222> (3)..(194) <400> 3 aa cat gtg tgg aaa tat tta ttt cag cat tca tct gat tta ctt aaa 47 His Val Trp Lys Tyr Leu Phe Gln His Ser Ser Asp Leu Leu Lys 1 5 10 15 tct caa gat agt att tat gag tat atg ata tgt gat aaa aat att tta 95 Ser Gln Asp Ser Ile Tyr Glu Tyr Met Ile Cys Asp Lys Asn Ile Leu 20 25 30 tta aat aaa ttt ata aat gta cca aaa gat tat gga aat ata aat tgt 143 Leu Asn Lys Phe Ile Asn Val Pro Lys Asp Tyr Gly Asn Ile Asn Cys 35 40 45 gct gcc ttt gca gca ggt att gtt gaa ggc ttc ctc tgt agt tct gaa 191 Ala Ala Phe Ala Ala Gly Ile Val Glu Gly Phe Leu Cys Ser Ser Glu 50 55 60 ttc 194 Phe <210> 4 <211> 64 <212> PRT <213> Plasmodium falciparum <400> 4 His Val Trp Lys Tyr Leu Phe Gln His Ser Ser Asp Leu Leu Lys Ser 1 5 10 15 Gln Asp Ser Ile Tyr Glu Tyr Met Ile Cys Asp Lys Asn Ile Leu Leu 20 25 30 Asn Lys Phe Ile Asn Val Pro Lys Asp Tyr Gly Asn Ile Asn Cys Ala 35 40 45 Ala Phe Ala Ala Gly Ile Val Glu Gly Phe Leu Cys Ser Ser Glu Phe 50 55 60 <210> 5 <211> 136 <212> DNA <213> Plasmodium falciparum <220> <221> CDS <222> (3)..(134) <400> 5 ca gta aaa att tta aaa aaa aag aaa aat tta aga aaa ata aag gaa 47 Val Lys Ile Leu Lys Lys Lys Lys Asn Leu Arg Lys Ile Lys Glu 1 5 10 15 acc act gat gaa gag aaa act tca gat aat gtt tct caa atg tat gaa 95 Thr Thr Asp Glu Glu Lys Thr Ser Asp Asn Val Ser Gln Met Tyr Glu 20 25 30 aga aaa ggt gga cca tta cca cca ccc gaa ctt aga aaa ca 136 Arg Lys Gly Gly Pro Leu Pro Pro Pro Glu Leu Arg Lys 35 40 <210> 6 <211> 44 <212> PRT <213> Plasmodium falciparum <400> 6 Val Lys Ile Leu Lys Lys Lys Lys Asn Leu Arg Lys Ile Lys Glu Thr 1 5 10 15 Thr Asp Glu Glu Lys Thr Ser Asp Asn Val Ser Gln Met Tyr Glu Arg 20 25 30 Lys Gly Gly Pro Leu Pro Pro Pro Glu Leu Arg Lys 35 40 <210> 7 <211> 166 <212> DNA <213> Plasmodium falciparum <220> <221> CDS <222> (3)..(164) <400> 7 gt ata cct gaa ttt tta gga caa tat cat aat gtt ccc cat gta ttc 47 Ile Pro Glu Phe Leu Gly Gln Tyr His Asn Val Pro His Val Phe 1 5 10 15 aaa gat tat atg agt tcc aat gat ttt ata agt ggt ata aat aat ata 95 Lys Asp Tyr Met Ser Ser Asn Asp Phe Ile Ser Gly Ile Asn Asn Ile 20 25 30 aat gaa tca gat gct ctt ttt aat aac ata caa tat ata aac caa gcg 143 Asn Glu Ser Asp Ala Leu Phe Asn Asn Ile Gln Tyr Ile Asn Gln Ala 35 40 45 aat gac caa gaa gaa aac aaa tt 166 Asn Asp Gln Glu Glu Asn Lys 50 <210> 8 <211> 54 <212> PRT <213> Plasmodium falciparum <400> 8 Ile Pro Glu Phe Leu Gly Gln Tyr His Asn Val Pro His Val Phe Lys 1 5 10 15 Asp Tyr Met Ser Ser Asn Asp Phe Ile Ser Gly Ile Asn Asn Ile Asn 20 25 30 Glu Ser Asp Ala Leu Phe Asn Asn Ile Gln Tyr Ile Asn Gln Ala Asn 35 40 45 Asp Gln Glu Glu Asn Lys 50 <210> 9 <211> 205 <212> DNA <213> Plasmodium falciparum <220> <221> CDS <222> (3)..(203) <400> 9 tg ttt gat aat agt gat ttt att aaa tca ata atg gat tct aat aaa 47 Phe Asp Asn Ser Asp Phe Ile Lys Ser Ile Met Asp Ser Asn Lys 1 5 10 15 caa tta aaa aag tta aga gaa caa aat tct gat tta aat cat att tta 95 Gln Leu Lys Lys Leu Arg Glu Gln Asn Ser Asp Leu Asn His Ile Leu 20 25 30 aat gat tct cag act tta aaa caa tct ttt gaa atg att aag aat cca 143 Asn Asp Ser Gln Thr Leu Lys Gln Ser Phe Glu Met Ile Lys Asn Pro 35 40 45 tct ttg atg aaa gaa tta atg aaa aat act gat aga gct att agt aat 191 Ser Leu Met Lys Glu Leu Met Lys Asn Thr Asp Arg Ala Ile Ser Asn 50 55 60 att gaa gcc ata cc 205 Ile Glu Ala Ile 65 <210> 10 <211> 67 <212> PRT <213> Plasmodium falciparum <400> 10 Phe Asp Asn Ser Asp Phe Ile Lys Ser Ile Met Asp Ser Asn Lys Gln 1 5 10 15 Leu Lys Lys Leu Arg Glu Gln Asn Ser Asp Leu Asn His Ile Leu Asn 20 25 30 Asp Ser Gln Thr Leu Lys Gln Ser Phe Glu Met Ile Lys Asn Pro Ser 35 40 45 Leu Met Lys Glu Leu Met Lys Asn Thr Asp Arg Ala Ile Ser Asn Ile 50 55 60 Glu Ala Ile 65 <210> 11 <211> 150 <212> DNA <213> Plasmodium falciparum <220> <221> CDS <222> (3)..(149) <400> 11 tc gtt gtc ctt tcc ttt ggt gat aaa cgc aat gag ata aaa caa aaa 47 Val Val Leu Ser Phe Gly Asp Lys Arg Asn Glu Ile Lys Gln Lys 1 5 10 15 att gac acg ttt tgt ggt gta agt aat gaa gaa aag gag aaa cta aag 95 Ile Asp Thr Phe Cys Gly Val Ser Asn Glu Glu Lys Glu Lys Leu Lys 20 25 30 gaa caa tgg aaa tgc tat gaa gct aaa tat gta aag gaa gat aat aaa 143 Glu Gln Trp Lys Cys Tyr Glu Ala Lys Tyr Val Lys Glu Asp Asn Lys 35 40 45 agt aaa g 150 Ser Lys <210> 12 <211> 49 <212> PRT <213> Plasmodium falciparum <400> 12 Val Val Leu Ser Phe Gly Asp Lys Arg Asn Glu Ile Lys Gln Lys Ile 1 5 10 15 Asp Thr Phe Cys Gly Val Ser Asn Glu Glu Lys Glu Lys Leu Lys Glu 20 25 30 Gln Trp Lys Cys Tyr Glu Ala Lys Tyr Val Lys Glu Asp Asn Lys Ser 35 40 45 Lys <210> 13 <211> 266 <212> DNA <213> Plasmodium falciparum <220> <221> CDS <222> (3)..(266) <400> 13 tg aat gcc cca aaa aaa tta cca gca gat gtt gcc gaa gaa tta gca 47 Asn Ala Pro Lys Lys Leu Pro Ala Asp Val Ala Glu Glu Leu Ala 1 5 10 15 acc acc gcc caa aag ctt gtt caa gct gga aag gga att tta gct gct 95 Thr Thr Ala Gln Lys Leu Val Gln Ala Gly Lys Gly Ile Leu Ala Ala 20 25 30 gat gaa tca aca caa acc att aag aaa aga ttc gac aac atc aaa tta 143 Asp Glu Ser Thr Gln Thr Ile Lys Lys Arg Phe Asp Asn Ile Lys Leu 35 40 45 gag aac aca ata gaa aac aga gct agc tac aga gat tta tta ttt gga 191 Glu Asn Thr Ile Glu Asn Arg Ala Ser Tyr Arg Asp Leu Leu Phe Gly 50 55 60 act aaa gga tta gga aaa ttc att tca gga gca att tta ttt gaa gaa 239 Thr Lys Gly Leu Gly Lys Phe Ile Ser Gly Ala Ile Leu Phe Glu Glu 65 70 75 aca tta ttt caa aag aat gaa gcc ggt 266 Thr Leu Phe Gln Lys Asn Glu Ala Gly 80 85 <210> 14 <211> 88 <212> PRT <213> Plasmodium falciparum <400> 14 Asn Ala Pro Lys Lys Leu Pro Ala Asp Val Ala Glu Glu Leu Ala Thr 1 5 10 15 Thr Ala Gln Lys Leu Val Gln Ala Gly Lys Gly Ile Leu Ala Ala Asp 20 25 30 Glu Ser Thr Gln Thr Ile Lys Lys Arg Phe Asp Asn Ile Lys Leu Glu 35 40 45 Asn Thr Ile Glu Asn Arg Ala Ser Tyr Arg Asp Leu Leu Phe Gly Thr 50 55 60 Lys Gly Leu Gly Lys Phe Ile Ser Gly Ala Ile Leu Phe Glu Glu Thr 65 70 75 80 Leu Phe Gln Lys Asn Glu Ala Gly 85 <210> 15 <211> 238 <212> DNA <213> Plasmodium falciparum <220> <221> CDS <222> (3)..(236) <400> 15 ta aca ttt tct gta gat aca aaa caa aat tta aat gca tct tat tct 47 Thr Phe Ser Val Asp Thr Lys Gln Asn Leu Asn Ala Ser Tyr Ser 1 5 10 15 agt gga caa gaa aat aaa caa aat gaa tct gat gga aaa gaa aat gaa 95 Ser Gly Gln Glu Asn Lys Gln Asn Glu Ser Asp Gly Lys Glu Asn Glu 20 25 30 gaa gat gaa gaa aat aag gta tat gat tta ata ctg gaa aat ata gaa 143 Glu Asp Glu Glu Asn Lys Val Tyr Asp Leu Ile Leu Glu Asn Ile Glu 35 40 45 cct aac aaa aaa ata ccc atc ata aaa atc gtt aaa gaa ata aaa aaa 191 Pro Asn Lys Lys Ile Pro Ile Ile Lys Ile Val Lys Glu Ile Lys Lys 50 55 60 gat ctt aat tta aaa caa gca aag gat tta gtt gat aat ttg cca ca 238 Asp Leu Asn Leu Lys Gln Ala Lys Asp Leu Val Asp Asn Leu Pro 65 70 75 <210> 16 <211> 78 <212> PRT <213> Plasmodium falciparum <400> 16 Thr Phe Ser Val Asp Thr Lys Gln Asn Leu Asn Ala Ser Tyr Ser Ser 1 5 10 15 Gly Gln Glu Asn Lys Gln Asn Glu Ser Asp Gly Lys Glu Asn Glu Glu 20 25 30 Asp Glu Glu Asn Lys Val Tyr Asp Leu Ile Leu Glu Asn Ile Glu Pro 35 40 45 Asn Lys Lys Ile Pro Ile Ile Lys Ile Val Lys Glu Ile Lys Lys Asp 50 55 60 Leu Asn Leu Lys Gln Ala Lys Asp Leu Val Asp Asn Leu Pro 65 70 75 <210> 17 <211> 397 <212> DNA <213> Plasmodium falciparum <220> <221> CDS <222> (3)..(395) <400> 17 aa aat aaa aat tat aca ggt aat tct cca agt gaa aat aat aag aaa 47 Asn Lys Asn Tyr Thr Gly Asn Ser Pro Ser Glu Asn Asn Lys Lys 1 5 10 15 gtt aac gaa gct tta aaa tct tac gaa aat ttt ctc cca gaa gca aaa 95 Val Asn Glu Ala Leu Lys Ser Tyr Glu Asn Phe Leu Pro Glu Ala Lys 20 25 30 gtt aca aca gtt gta act cca cct caa cca gat gta act cca tct cca 143 Val Thr Thr Val Val Thr Pro Pro Gln Pro Asp Val Thr Pro Ser Pro 35 40 45 tta tct gta agg gta agt ggt agt tca gga tcc aca aaa gaa gaa aca 191 Leu Ser Val Arg Val Ser Gly Ser Ser Gly Ser Thr Lys Glu Glu Thr 50 55 60 caa ata cca act tca ggc tct tta tta aca gaa tta caa caa gta gta 239 Gln Ile Pro Thr Ser Gly Ser Leu Leu Thr Glu Leu Gln Gln Val Val 65 70 75 caa tca caa aat tat gac gaa gaa gat gat tcc tta gtt gta tta ccc 287 Gln Ser Gln Asn Tyr Asp Glu Glu Asp Asp Ser Leu Val Val Leu Pro 80 85 90 95 att ttt gga gaa tcc gaa gat aat gac gaa tat tta gat caa gta gta 335 Ile Phe Gly Glu Ser Glu Asp Asn Asp Glu Tyr Leu Asp Gln Val Val 100 105 110 act gga gaa gca ata tct gtc aca atg gat aat atc ctc tca gga ttt 383 Thr Gly Glu Ala Ile Ser Val Thr Met Asp Asn Ile Leu Ser Gly Phe 115 120 125 gaa aat gaa tat ga 397 Glu Asn Glu Tyr 130 <210> 18 <211> 131 <212> PRT <213> Plasmodium falciparum <400> 18 Asn Lys Asn Tyr Thr Gly Asn Ser Pro Ser Glu Asn Asn Lys Lys Val 1 5 10 15 Asn Glu Ala Leu Lys Ser Tyr Glu Asn Phe Leu Pro Glu Ala Lys Val 20 25 30 Thr Thr Val Val Thr Pro Pro Gln Pro Asp Val Thr Pro Ser Pro Leu 35 40 45 Ser Val Arg Val Ser Gly Ser Ser Gly Ser Thr Lys Glu Glu Thr Gln 50 55 60 Ile Pro Thr Ser Gly Ser Leu Leu Thr Glu Leu Gln Gln Val Val Gln 65 70 75 80 Ser Gln Asn Tyr Asp Glu Glu Asp Asp Ser Leu Val Val Leu Pro Ile 85 90 95 Phe Gly Glu Ser Glu Asp Asn Asp Glu Tyr Leu Asp Gln Val Val Thr 100 105 110 Gly Glu Ala Ile Ser Val Thr Met Asp Asn Ile Leu Ser Gly Phe Glu 115 120 125 Asn Glu Tyr 130 <210> 19 <211> 160 <212> DNA <213> Plasmodium falciparum <220> <221> CDS <222> (3)..(158) <400> 19 aa tct cat tct gac gaa aat att gta act tta caa gga aaa ctt aga 47 Ser His Ser Asp Glu Asn Ile Val Thr Leu Gln Gly Lys Leu Arg 1 5 10 15 aat aca gct atc tgt ata aag aat gtt gat gaa tgg ata tta aat aaa 95 Asn Thr Ala Ile Cys Ile Lys Asn Val Asp Glu Trp Ile Leu Asn Lys 20 25 30 aga ggt cta aca tta cct agt gaa tca cct aat gaa tca cct agt gaa 143 Arg Gly Leu Thr Leu Pro Ser Glu Ser Pro Asn Glu Ser Pro Ser Glu 35 40 45 tca gat agt tat ctt aa 160 Ser Asp Ser Tyr Leu 50 <210> 20 <211> 52 <212> PRT <213> Plasmodium falciparum <400> 20 Ser His Ser Asp Glu Asn Ile Val Thr Leu Gln Gly Lys Leu Arg Asn 1 5 10 15 Thr Ala Ile Cys Ile Lys Asn Val Asp Glu Trp Ile Leu Asn Lys Arg 20 25 30 Gly Leu Thr Leu Pro Ser Glu Ser Pro Asn Glu Ser Pro Ser Glu Ser 35 40 45 Asp Ser Tyr Leu 50 <210> 21 <211> 174 <212> DNA <213> Plasmodium falciparum <220> <221> CDS <222> (3)..(173) <400> 21 at gaa gga gaa gaa tta ata tta aat gat gat caa aat aaa tta cat 47 Glu Gly Glu Glu Leu Ile Leu Asn Asp Asp Gln Asn Lys Leu His 1 5 10 15 att gat aca ttt gaa aaa tac aaa tat ctc att tgt gaa aat att aat 95 Ile Asp Thr Phe Glu Lys Tyr Lys Tyr Leu Ile Cys Glu Asn Ile Asn 20 25 30 aat gac aaa ttt gtt ata aaa aat aat caa att aca aca ttt gaa aac 143 Asn Asp Lys Phe Val Ile Lys Asn Asn Gln Ile Thr Thr Phe Glu Asn 35 40 45 ttt ttg aaa aac caa caa aat ttt gaa ata a 174 Phe Leu Lys Asn Gln Gln Asn Phe Glu Ile 50 55 <210> 22 <211> 57 <212> PRT <213> Plasmodium falciparum <400> 22 Glu Gly Glu Glu Leu Ile Leu Asn Asp Asp Gln Asn Lys Leu His Ile 1 5 10 15 Asp Thr Phe Glu Lys Tyr Lys Tyr Leu Ile Cys Glu Asn Ile Asn Asn 20 25 30 Asp Lys Phe Val Ile Lys Asn Asn Gln Ile Thr Thr Phe Glu Asn Phe 35 40 45 Leu Lys Asn Gln Gln Asn Phe Glu Ile 50 55 <210> 23 <211> 637 <212> DNA <213> Plasmodium falciparum <220> <221> CDS <222> (3)..(635) <400> 23 ta aat aat gaa aat atg gat aaa caa aat gtt aat att caa aat gaa 47 Asn Asn Glu Asn Met Asp Lys Gln Asn Val Asn Ile Gln Asn Glu 1 5 10 15 ggt aat ggt ttt aat aat aat aaa aat aat aat gat ctt tta aat gtt 95 Gly Asn Gly Phe Asn Asn Asn Lys Asn Asn Asn Asp Leu Leu Asn Val 20 25 30 tat ata tca cct aat atg att aat cat tct tta tct tca act tgt gaa 143 Tyr Ile Ser Pro Asn Met Ile Asn His Ser Leu Ser Ser Thr Cys Glu 35 40 45 aaa aaa aat aaa gaa gat aac aaa atg aat gac aat aaa ttt ctt aat 191 Lys Lys Asn Lys Glu Asp Asn Lys Met Asn Asp Asn Lys Phe Leu Asn 50 55 60 agc agt agt aaa atg aaa att cca gag ata agt acg aac aac tca aat 239 Ser Ser Ser Lys Met Lys Ile Pro Glu Ile Ser Thr Asn Asn Ser Asn 65 70 75 gaa aag att gtt aat gtg tca aat gat gaa atg tta gta tat cat aat 287 Glu Lys Ile Val Asn Val Ser Asn Asp Glu Met Leu Val Tyr His Asn 80 85 90 95 tta acc gta tta aat gta aag gaa caa gga ggt gta aca gaa gaa tcg 335 Leu Thr Val Leu Asn Val Lys Glu Gln Gly Gly Val Thr Glu Glu Ser 100 105 110 agc tgt ata aaa cgc aca tat ttt gtg gat caa ttt tat gat tca tat 383 Ser Cys Ile Lys Arg Thr Tyr Phe Val Asp Gln Phe Tyr Asp Ser Tyr 115 120 125 aat atg aga aat gaa aaa ata aca gat gat aat atg caa gta gaa gat 431 Asn Met Arg Asn Glu Lys Ile Thr Asp Asp Asn Met Gln Val Glu Asp 130 135 140 ata tat aat gta aag gaa aat ata aaa aga act cta aaa ggt gat ggt 479 Ile Tyr Asn Val Lys Glu Asn Ile Lys Arg Thr Leu Lys Gly Asp Gly 145 150 155 cct gat gat gtc aaa acg aat atg ctg agt gaa gat aat agt tat gca 527 Pro Asp Asp Val Lys Thr Asn Met Leu Ser Glu Asp Asn Ser Tyr Ala 160 165 170 175 agt ggt tta tgg ggt aac gaa ata aac ttt att agt aat aat gaa aat 575 Ser Gly Leu Trp Gly Asn Glu Ile Asn Phe Ile Ser Asn Asn Glu Asn 180 185 190 tgt tta aat agc tat gat ata tca tgt gat gag aaa tat atc cca aat 623 Cys Leu Asn Ser Tyr Asp Ile Ser Cys Asp Glu Lys Tyr Ile Pro Asn 195 200 205 gaa gag gaa cag ga 637 Glu Glu Glu Gln 210 <210> 24 <211> 211 <212> PRT <213> Plasmodium falciparum <400> 24 Asn Asn Glu Asn Met Asp Lys Gln Asn Val Asn Ile Gln Asn Glu Gly 1 5 10 15 Asn Gly Phe Asn Asn Asn Lys Asn Asn Asn Asp Leu Leu Asn Val Tyr 20 25 30 Ile Ser Pro Asn Met Ile Asn His Ser Leu Ser Ser Thr Cys Glu Lys 35 40 45 Lys Asn Lys Glu Asp Asn Lys Met Asn Asp Asn Lys Phe Leu Asn Ser 50 55 60 Ser Ser Lys Met Lys Ile Pro Glu Ile Ser Thr Asn Asn Ser Asn Glu 65 70 75 80 Lys Ile Val Asn Val Ser Asn Asp Glu Met Leu Val Tyr His Asn Leu 85 90 95 Thr Val Leu Asn Val Lys Glu Gln Gly Gly Val Thr Glu Glu Ser Ser 100 105 110 Cys Ile Lys Arg Thr Tyr Phe Val Asp Gln Phe Tyr Asp Ser Tyr Asn 115 120 125 Met Arg Asn Glu Lys Ile Thr Asp Asp Asn Met Gln Val Glu Asp Ile 130 135 140 Tyr Asn Val Lys Glu Asn Ile Lys Arg Thr Leu Lys Gly Asp Gly Pro 145 150 155 160 Asp Asp Val Lys Thr Asn Met Leu Ser Glu Asp Asn Ser Tyr Ala Ser 165 170 175 Gly Leu Trp Gly Asn Glu Ile Asn Phe Ile Ser Asn Asn Glu Asn Cys 180 185 190 Leu Asn Ser Tyr Asp Ile Ser Cys Asp Glu Lys Tyr Ile Pro Asn Glu 195 200 205 Glu Glu Gln 210 <210> 25 <211> 532 <212> DNA <213> Plasmodium falciparum <220> <221> CDS <222> (3)..(530) <400> 25 ac aac aat atg aac aga ata aat agt tta aac aat aaa aat aat att 47 Asn Asn Met Asn Arg Ile Asn Ser Leu Asn Asn Lys Asn Asn Ile 1 5 10 15 aac cct ata aat caa tac aat gat gaa aaa caa aac tta ctt aac gnc 95 Asn Pro Ile Asn Gln Tyr Asn Asp Glu Lys Gln Asn Leu Leu Asn Xaa 20 25 30 cat ctt cag tyc aat caa gta aat tat nat aat aac ctt gtg aat ggc 143 His Leu Gln Xaa Asn Gln Val Asn Tyr Xaa Asn Asn Leu Val Asn Gly 35 40 45 ytt cat ana ann aaa ttt tta agc aat aat aat tat att aat act aca 191 Xaa His Xaa Xaa Lys Phe Leu Ser Asn Asn Asn Tyr Ile Asn Thr Thr 50 55 60 gat att aat gga aat aat atg att agt cat aat gat cat atg aat aat 239 Asp Ile Asn Gly Asn Asn Met Ile Ser His Asn Asp His Met Asn Asn 65 70 75 aaa tta tac agt aat ata aac aat aat tat tat tat aat agg gct aac 287 Lys Leu Tyr Ser Asn Ile Asn Asn Asn Tyr Tyr Tyr Asn Arg Ala Asn 80 85 90 95 aat gaa att cct aat aat aat agt aac aat cat aat aat aat ttc aat 335 Asn Glu Ile Pro Asn Asn Asn Ser Asn Asn His Asn Asn Asn Phe Asn 100 105 110 ata tat gaa tcc aaa tac caa acc atg att cat aac aac aac ata gga 383 Ile Tyr Glu Ser Lys Tyr Gln Thr Met Ile His Asn Asn Asn Ile Gly 115 120 125 caa gat cta aaa caa caa ata aat aat tat aat gaa aat aca tct tct 431 Gln Asp Leu Lys Gln Gln Ile Asn Asn Tyr Asn Glu Asn Thr Ser Ser 130 135 140 aat aat aat tta agt ata tct caa tta ctt gag gga aat aca aat ttt 479 Asn Asn Asn Leu Ser Ile Ser Gln Leu Leu Glu Gly Asn Thr Asn Phe 145 150 155 ata aat att tct aat aca ttt att aat acg aat tat tct aat gat ttt 527 Ile Asn Ile Ser Asn Thr Phe Ile Asn Thr Asn Tyr Ser Asn Asp Phe 160 165 170 175 cat ca 532 His <210> 26 <211> 176 <212> PRT <213> Plasmodium falciparum <400> 26 Asn Asn Met Asn Arg Ile Asn Ser Leu Asn Asn Lys Asn Asn Ile Asn 1 5 10 15 Pro Ile Asn Gln Tyr Asn Asp Glu Lys Gln Asn Leu Leu Asn Xaa His 20 25 30 Leu Gln Xaa Asn Gln Val Asn Tyr Xaa Asn Asn Leu Val Asn Gly Xaa 35 40 45 His Xaa Xaa Lys Phe Leu Ser Asn Asn Asn Tyr Ile Asn Thr Thr Asp 50 55 60 Ile Asn Gly Asn Asn Met Ile Ser His Asn Asp His Met Asn Asn Lys 65 70 75 80 Leu Tyr Ser Asn Ile Asn Asn Asn Tyr Tyr Tyr Asn Arg Ala Asn Asn 85 90 95 Glu Ile Pro Asn Asn Asn Ser Asn Asn His Asn Asn Asn Phe Asn Ile 100 105 110 Tyr Glu Ser Lys Tyr Gln Thr Met Ile His Asn Asn Asn Ile Gly Gln 115 120 125 Asp Leu Lys Gln Gln Ile Asn Asn Tyr Asn Glu Asn Thr Ser Ser Asn 130 135 140 Asn Asn Leu Ser Ile Ser Gln Leu Leu Glu Gly Asn Thr Asn Phe Ile 145 150 155 160 Asn Ile Ser Asn Thr Phe Ile Asn Thr Asn Tyr Ser Asn Asp Phe His 165 170 175 <210> 27 <211> 277 <212> DNA <213> Plasmodium falciparum <220> <221> CDS <222> (3)..(275) <400> 27 ac agc aac aac aat aat aat aat aat aat aat att agt aat aat att 47 Ser Asn Asn Asn Asn Asn Asn Asn Asn Asn Ile Ser Asn Asn Ile 1 5 10 15 agt aat aat aaa gat tgt gat gaa tac gat tat cag gaa gaa tat ttg 95 Ser Asn Asn Lys Asp Cys Asp Glu Tyr Asp Tyr Gln Glu Glu Tyr Leu 20 25 30 aaa gat aaa gca tta tac gat tca gat atg gac gaa aat aca aat caa 143 Lys Asp Lys Ala Leu Tyr Asp Ser Asp Met Asp Glu Asn Thr Asn Gln 35 40 45 ctt cac aat aat gaa cat cat aca aat caa cat cac gca aat tgg cat 191 Leu His Asn Asn Glu His His Thr Asn Gln His His Ala Asn Trp His 50 55 60 cat cac aaa cat caa aag caa cat ttc aaa caa ctt att gat cat aac 239 His His Lys His Gln Lys Gln His Phe Lys Gln Leu Ile Asp His Asn 65 70 75 aat atg ata aat aat aat gat aat aat att atc aat aa 277 Asn Met Ile Asn Asn Asn Asp Asn Asn Ile Ile Asn 80 85 90 <210> 28 <211> 91 <212> PRT <213> Plasmodium falciparum <400> 28 Ser Asn Asn Asn Asn Asn Asn Asn Asn Asn Ile Ser Asn Asn Ile Ser 1 5 10 15 Asn Asn Lys Asp Cys Asp Glu Tyr Asp Tyr Gln Glu Glu Tyr Leu Lys 20 25 30 Asp Lys Ala Leu Tyr Asp Ser Asp Met Asp Glu Asn Thr Asn Gln Leu 35 40 45 His Asn Asn Glu His His Thr Asn Gln His His Ala Asn Trp His His 50 55 60 His Lys His Gln Lys Gln His Phe Lys Gln Leu Ile Asp His Asn Asn 65 70 75 80 Met Ile Asn Asn Asn Asp Asn Asn Ile Ile Asn 85 90 <210> 29 <211> 107 <212> DNA <213> Plasmodium falciparum <220> <221> CDS <222> (3)..(107) <400> 29 gc act gcc acc ctt gtt gcg gaa gaa ttg cac cag ctc ggc tat tca 47 Thr Ala Thr Leu Val Ala Glu Glu Leu His Gln Leu Gly Tyr Ser 1 5 10 15 ctg gcg ctg ggt cgc gaa gta gtt aat gaa agt agc cgg atg gga tta 95 Leu Ala Leu Gly Arg Glu Val Val Asn Glu Ser Ser Arg Met Gly Leu 20 25 30 cct gat gaa ttc 107 Pro Asp Glu Phe 35 <210> 30 <211> 35 <212> PRT <213> Plasmodium falciparum <400> 30 Thr Ala Thr Leu Val Ala Glu Glu Leu His Gln Leu Gly Tyr Ser Leu 1 5 10 15 Ala Leu Gly Arg Glu Val Val Asn Glu Ser Ser Arg Met Gly Leu Pro 20 25 30 Asp Glu Phe 35 <210> 31 <211> 1230 <212> DNA <213> Plasmodium falciparum <220> <221> CDS <222> (784)..(1230) <400> 31 tttaaaaatt ttataaataa tttttctctt ttatatttaa tacatctata agtatatatg 60 taataatttg atacacaaga aatgtgtatt tttaatatat atatatatat atatatatat 120 atatatatat atatatatat atatatatat atgatatata taaatatata catttattta 180 ttccataatt tattaaaaat aaatttatat attttatttt attttttatt tatttatttg 240 tatatattaa atcttttcaa tggaataaaa ttcaatcgga tcgttatata aactttatta 300 tatcaaataa aacacttttt ataataatac gaaaaatata tttccttatt tttatgtttt 360 caaaatttta gtagacttat aatattatta tggataacat taacaaataa aaatattatg 420 agtataatat gtaaattatt tttttttttt tacagtttat atgtttatga acatataatg 480 tgataaataa aattgattaa ttattattat atataattac tcttgtaatt tattaaaatg 540 gtatattata tatatatata taattttttt tatattattt gaataaaaat attaaataaa 600 aattttgtgt ttgggtaaat cataataagt gctaacgttc ataatttatc tcattaaaaa 660 atagaaatga aatataatat ttacgacagt acatatatat atatgtatat tattaaaaaa 720 aaataaaaat aacacatata tatatatata tatatatata ttgataatat atatgtttta 780 agt atg gat aaa tca aaa agt tcc ata gag aaa gaa tta aat agg ata 828 Met Asp Lys Ser Lys Ser Ser Ile Glu Lys Glu Leu Asn Arg Ile 1 5 10 15 aaa cag gat gtg agc tta agc gca ttt agt atc ctc ttt agt gaa atg 876 Lys Gln Asp Val Ser Leu Ser Ala Phe Ser Ile Leu Phe Ser Glu Met 20 25 30 gta caa tat tgt tta tat aaa agt aaa aga gga tat cga ata gaa gat 924 Val Gln Tyr Cys Leu Tyr Lys Ser Lys Arg Gly Tyr Arg Ile Glu Asp 35 40 45 tgt tta cat gaa atg ggt tta cgt gta ggt tat aaa tta aat gaa tat 972 Cys Leu His Glu Met Gly Leu Arg Val Gly Tyr Lys Leu Asn Glu Tyr 50 55 60 tta aca tat aag aat aaa gtg aaa aga agc ata aat att att aat att 1020 Leu Thr Tyr Lys Asn Lys Val Lys Arg Ser Ile Asn Ile Ile Asn Ile 65 70 75 tta aca ttc ata tct aaa cat gtg tgg aaa tat tta ttt cag cat tca 1068 Leu Thr Phe Ile Ser Lys His Val Trp Lys Tyr Leu Phe Gln His Ser 80 85 90 95 tct gat tta ctt aaa tct caa gat agt att tat gag tat atg ata tgt 1116 Ser Asp Leu Leu Lys Ser Gln Asp Ser Ile Tyr Glu Tyr Met Ile Cys 100 105 110 gat aaa aat att tta tta aat aaa ttt ata aat gta cca aaa gat tat 1164 Asp Lys Asn Ile Leu Leu Asn Lys Phe Ile Asn Val Pro Lys Asp Tyr 115 120 125 gga aat ata aat tgt gct gcc ttt gca gca ggt att gtt gaa ggc ttc 1212 Gly Asn Ile Asn Cys Ala Ala Phe Ala Ala Gly Ile Val Glu Gly Phe 130 135 140 ctc tgt agt tct gaa ttc 1230 Leu Cys Ser Ser Glu Phe 145 <210> 32 <211> 149 <212> PRT <213> Plasmodium falciparum <400> 32 Met Asp Lys Ser Lys Ser Ser Ile Glu Lys Glu Leu Asn Arg Ile Lys 1 5 10 15 Gln Asp Val Ser Leu Ser Ala Phe Ser Ile Leu Phe Ser Glu Met Val 20 25 30 Gln Tyr Cys Leu Tyr Lys Ser Lys Arg Gly Tyr Arg Ile Glu Asp Cys 35 40 45 Leu His Glu Met Gly Leu Arg Val Gly Tyr Lys Leu Asn Glu Tyr Leu 50 55 60 Thr Tyr Lys Asn Lys Val Lys Arg Ser Ile Asn Ile Ile Asn Ile Leu 65 70 75 80 Thr Phe Ile Ser Lys His Val Trp Lys Tyr Leu Phe Gln His Ser Ser 85 90 95 Asp Leu Leu Lys Ser Gln Asp Ser Ile Tyr Glu Tyr Met Ile Cys Asp 100 105 110 Lys Asn Ile Leu Leu Asn Lys Phe Ile Asn Val Pro Lys Asp Tyr Gly 115 120 125 Asn Ile Asn Cys Ala Ala Phe Ala Ala Gly Ile Val Glu Gly Phe Leu 130 135 140 Cys Ser Ser Glu Phe 145 <210> 33 <211> 1052 <212> DNA <213> Plasmodium falciparum <220> <221> CDS <222> (1)..(111) <400> 33 gaa ttc caa gca gat gtt aca gcg cac act att cat gaa ggc gat gat 48 Glu Phe Gln Ala Asp Val Thr Ala His Thr Ile His Glu Gly Asp Asp 1 5 10 15 aat tat aac act act att ttt att aaa ttt tat ccg gaa gta gtg gaa 96 Asn Tyr Asn Thr Thr Ile Phe Ile Lys Phe Tyr Pro Glu Val Val Glu 20 25 30 aga gaa aaa aac cac tagatattca tataagggtc acacaataaa tatatatata 151 Arg Glu Lys Asn His 35 taatacatgt tgtataagtt gtcaaaaaat ttatatggaa aaaaataaat taaatatgta 211 aatatatata tatatatata tatatatatt ctttctttct ttcttttttt tttttttttg 271 ttattattaa tgtattattt atccttatgc atgggattat ttaacaaatt tattgataaa 331 ataaatgtac cccttttttt tttttctttt ttttcttttt tttttttttg tataaacata 391 tttatatata tttatattta attaaacctt ttttaacatt ttaaatctat atgaaataat 451 aaatgaagac atgactattt taatacaagg aaattaatgg ttccttaaat ttcacataaa 511 aaaaaaaata aaacatataa tatatatata tatatatata aaacacttgg ttctaatttt 571 tttttttttt tttttttttt tttttttaat ttgtatggag atattataat atttaaacaa 631 tatatatgac atatatagag gacatactgt taccaatatt ttcaatacat tgttggaatt 691 ttttattttt tcatatatca tacataagac cttctggaaa agaaaaaagt aataaagtgt 751 cttatatact attaattttg aatatagatt ttttttcttt tctttcaaaa ttaaaaagta 811 ttctatcaat gtatgtaaaa tatataattt tacttttttt ttgttctttt ttctattttt 871 aaatacgtat gtcctcgttt tttttttttc tttttataac attattttgc atattccaaa 931 ttttttctat gtgtccaaaa aaaaaaaaaa aaaaaataaa gtgttaataa aaaaattaaa 991 taatatatgt gaagatactt tttttaatat gcatatgtat atatatttat atatatagat 1051 c 1052 <210> 34 <211> 37 <212> PRT <213> Plasmodium falciparum <400> 34 Glu Phe Gln Ala Asp Val Thr Ala His Thr Ile His Glu Gly Asp Asp 1 5 10 15 Asn Tyr Asn Thr Thr Ile Phe Ile Lys Phe Tyr Pro Glu Val Val Glu 20 25 30 Arg Glu Lys Asn His 35 <210> 35 <211> 2383 <212> DNA <213> Plasmodium falciparum <220> <221> CDS <222> (526)..(1611) <400> 35 aatttttttt ttgaatattc tttttagcat ttgatataat attattttga aaatggtaag 60 aatataaaac atttaagaaa taaataaaag tacagtgttt atatataccg tataaatgaa 120 taagtgtata tatatatata tatattaaat acatttatat tattaattta taccaatgca 180 tagttatata tatatatact attatatatg tattcatttt attctgctca cattatttat 240 gcatatgctt cctttataat aaatatattc gtattaacat tcaagaaatg aggacgaaat 300 attccttaat ttacatatgt atttttttat taattgaaaa aaaaaaaaaa atagtaaaaa 360 taagtatagg catatattga ataatgtgct gttgaattga tttatatata tatatatata 420 tatatgtata tttatttata tttatacata tgggaatatt atatattttc cttttttctt 480 atttttatat ttttatattt ttttttaggc tcattgcact gatat atg aat gcc cca 537 Met Asn Ala Pro 1 aaa aaa tta cca gca gat gtt gcc gaa gaa tta gca acc acc gcc caa 585 Lys Lys Leu Pro Ala Asp Val Ala Glu Glu Leu Ala Thr Thr Ala Gln 5 10 15 20 aag ctt gtt caa gct gga aag gga att tta gct gct gat gaa tca aca 633 Lys Leu Val Gln Ala Gly Lys Gly Ile Leu Ala Ala Asp Glu Ser Thr 25 30 35 caa acc att aag aaa aga ttc gac aac atc aaa tta gag aac aca ata 681 Gln Thr Ile Lys Lys Arg Phe Asp Asn Ile Lys Leu Glu Asn Thr Ile 40 45 50 gaa aac aga gct agc tac aga gat tta tta ttt gga act aaa gga tta 729 Glu Asn Arg Ala Ser Tyr Arg Asp Leu Leu Phe Gly Thr Lys Gly Leu 55 60 65 gga aaa ttc att tca gga gca att tta ttt gaa gaa aca tta ttt caa 777 Gly Lys Phe Ile Ser Gly Ala Ile Leu Phe Glu Glu Thr Leu Phe Gln 70 75 80 aag aat gaa gcc ggt gta cca atg gtt aat tta tta cac aat gaa aat 825 Lys Asn Glu Ala Gly Val Pro Met Val Asn Leu Leu His Asn Glu Asn 85 90 95 100 ata att cca ggt att aag gtt gat aaa ggt ttg gtt aac att cca tgc 873 Ile Ile Pro Gly Ile Lys Val Asp Lys Gly Leu Val Asn Ile Pro Cys 105 110 115 aca gat gaa gaa aaa tca act caa ggt tta gat gga tta gca gaa aga 921 Thr Asp Glu Glu Lys Ser Thr Gln Gly Leu Asp Gly Leu Ala Glu Arg 120 125 130 tgc aaa gag tat tat aaa gct ggt gca agg ttt gct aaa tgg aga aca 969 Cys Lys Glu Tyr Tyr Lys Ala Gly Ala Arg Phe Ala Lys Trp Arg Thr 135 140 145 gtt tta gtt att gac aca gcc aaa gga aaa cca act gat tta tca att 1017 Val Leu Val Ile Asp Thr Ala Lys Gly Lys Pro Thr Asp Leu Ser Ile 150 155 160 cac gaa act gca tgg gga ttg gct aga tat gca tct att tgt caa caa 1065 His Glu Thr Ala Trp Gly Leu Ala Arg Tyr Ala Ser Ile Cys Gln Gln 165 170 175 180 aat aga tta gtt cca att gtt gaa cct gaa att tta gct gat gga cca 1113 Asn Arg Leu Val Pro Ile Val Glu Pro Glu Ile Leu Ala Asp Gly Pro 185 190 195 cac tca att gaa gtt tgt gca gtt gta act caa aaa gtt tta tca tgt 1161 His Ser Ile Glu Val Cys Ala Val Val Thr Gln Lys Val Leu Ser Cys 200 205 210 gta ttt aaa gct tta caa gaa aat ggt gta tta tta gaa ggt gca ttg 1209 Val Phe Lys Ala Leu Gln Glu Asn Gly Val Leu Leu Glu Gly Ala Leu 215 220 225 tta aaa cca aac atg gtt act gct ggt tat gaa tgt act gct aaa acc 1257 Leu Lys Pro Asn Met Val Thr Ala Gly Tyr Glu Cys Thr Ala Lys Thr 230 235 240 act act caa gat gtt ggt ttc tta act gtc aga acc tta agg aga act 1305 Thr Thr Gln Asp Val Gly Phe Leu Thr Val Arg Thr Leu Arg Arg Thr 245 250 255 260 gta cca cca gcc tta cca ggt gtt gta ttt tta tct gga gga caa tca 1353 Val Pro Pro Ala Leu Pro Gly Val Val Phe Leu Ser Gly Gly Gln Ser 265 270 275 gaa gaa gag gct tct gtt aat tta aat tca atc aat gct ttg ggt cca 1401 Glu Glu Glu Ala Ser Val Asn Leu Asn Ser Ile Asn Ala Leu Gly Pro 280 285 290 cac cca tgg gct tta acc ttc tct tac ggt aga gct tta caa gct tca 1449 His Pro Trp Ala Leu Thr Phe Ser Tyr Gly Arg Ala Leu Gln Ala Ser 295 300 305 gta ttg aac aca tgg caa gga aag aaa gaa aat gtt gca aag gca aga 1497 Val Leu Asn Thr Trp Gln Gly Lys Lys Glu Asn Val Ala Lys Ala Arg 310 315 320 gaa gtt tta tta caa aga gct gaa gcc aac tcc tta gca act tat ggt 1545 Glu Val Leu Leu Gln Arg Ala Glu Ala Asn Ser Leu Ala Thr Tyr Gly 325 330 335 340 aaa tac aaa gga ggt gca ggt ggt gaa aat gca ggt gct tca tta tat 1593 Lys Tyr Lys Gly Gly Ala Gly Gly Glu Asn Ala Gly Ala Ser Leu Tyr 345 350 355 gaa aag aaa tat gtc tat taaaaacttc accaaccaaa aatgaataat 1641 Glu Lys Lys Tyr Val Tyr 360 aataataata aataaattac taaatgaatg gtactatatt tttaaaaata agggtaatat 1701 atttctgtat gtatatatat atatatatat atacaaatat gtgaatataa aaaaaaaaaa 1761 aaaatgtaat atatatcgat caatgtatat ctacgatata taaatatata tttattcata 1821 tctccctttt ttagatgata tattataata cctaaaatta tatatattta tttattatta 1881 ttttatttat ttaataattt ttttttatta gtaaatgata ataaattttt taaacgtttt 1941 ttcaacgttt tattaaatgt gtaaatataa atataaatat tatatatata tatatatata 2001 tatgtatgta tttatttatt tatttatata tacatacata cctgttgaca ttcatgtaat 2061 ataataaagg aacacatgct tattttgtat tatatatctt accttctact ttttaataaa 2121 aaatgtcaaa gcaggaaata aaaacttttt aatttaacca aaaaaatata attaatgatg 2181 tacacttata gatattgata caagaaaaac attatatatg tttttttttt ctttcttttt 2241 tttttttttt tttttaatta taacaaaaaa tatttattat aatatataat tttaaatgaa 2301 tgatgcaaat ttaatgagcc attttattta tattttaaat aattataata ataacgtaca 2361 tatataaaat ggtgattgaa tt 2383 <210> 36 <211> 362 <212> PRT <213> Plasmodium falciparum <400> 36 Met Asn Ala Pro Lys Lys Leu Pro Ala Asp Val Ala Glu Glu Leu Ala 1 5 10 15 Thr Thr Ala Gln Lys Leu Val Gln Ala Gly Lys Gly Ile Leu Ala Ala 20 25 30 Asp Glu Ser Thr Gln Thr Ile Lys Lys Arg Phe Asp Asn Ile Lys Leu 35 40 45 Glu Asn Thr Ile Glu Asn Arg Ala Ser Tyr Arg Asp Leu Leu Phe Gly 50 55 60 Thr Lys Gly Leu Gly Lys Phe Ile Ser Gly Ala Ile Leu Phe Glu Glu 65 70 75 80 Thr Leu Phe Gln Lys Asn Glu Ala Gly Val Pro Met Val Asn Leu Leu 85 90 95 His Asn Glu Asn Ile Ile Pro Gly Ile Lys Val Asp Lys Gly Leu Val 100 105 110 Asn Ile Pro Cys Thr Asp Glu Glu Lys Ser Thr Gln Gly Leu Asp Gly 115 120 125 Leu Ala Glu Arg Cys Lys Glu Tyr Tyr Lys Ala Gly Ala Arg Phe Ala 130 135 140 Lys Trp Arg Thr Val Leu Val Ile Asp Thr Ala Lys Gly Lys Pro Thr 145 150 155 160 Asp Leu Ser Ile His Glu Thr Ala Trp Gly Leu Ala Arg Tyr Ala Ser 165 170 175 Ile Cys Gln Gln Asn Arg Leu Val Pro Ile Val Glu Pro Glu Ile Leu 180 185 190 Ala Asp Gly Pro His Ser Ile Glu Val Cys Ala Val Val Thr Gln Lys 195 200 205 Val Leu Ser Cys Val Phe Lys Ala Leu Gln Glu Asn Gly Val Leu Leu 210 215 220 Glu Gly Ala Leu Leu Lys Pro Asn Met Val Thr Ala Gly Tyr Glu Cys 225 230 235 240 Thr Ala Lys Thr Thr Thr Gln Asp Val Gly Phe Leu Thr Val Arg Thr 245 250 255 Leu Arg Arg Thr Val Pro Pro Ala Leu Pro Gly Val Val Phe Leu Ser 260 265 270 Gly Gly Gln Ser Glu Glu Glu Ala Ser Val Asn Leu Asn Ser Ile Asn 275 280 285 Ala Leu Gly Pro His Pro Trp Ala Leu Thr Phe Ser Tyr Gly Arg Ala 290 295 300 Leu Gln Ala Ser Val Leu Asn Thr Trp Gln Gly Lys Lys Glu Asn Val 305 310 315 320 Ala Lys Ala Arg Glu Val Leu Leu Gln Arg Ala Glu Ala Asn Ser Leu 325 330 335 Ala Thr Tyr Gly Lys Tyr Lys Gly Gly Ala Gly Gly Glu Asn Ala Gly 340 345 350 Ala Ser Leu Tyr Glu Lys Lys Tyr Val Tyr 355 360

【図面の簡単な説明】

【図１】図１Ａはクローン４１−１、４１−２および
４１−３の融合タンパク質からなる混合ワクチンで免疫
した後のアオタスモンキーにおける寄生虫血症の経過を
示し、図１Ｂはその対照（非免疫動物）を示す、説明図
である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＣ１２Ｐ 21/02 Ｃ１２Ｐ 21/02 Ｃ (72)発明者エリカフントドイツ連邦共和国マールブルク−ウエルシヤウゼン，ツーム，ヒルツボルン，８ (72)発明者ブルクハルトエンデルスドイツ連邦共和国マールブルク，オーベレルアイヒウエーク， 12 (72)発明者ハンスキユツペルドイツ連邦共和国マールブルク，ビーゲンシユトラーセ， 39

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】表１〜１８に示したアミノ酸配列を有す
るプラスモジウム・ファルシパルム（Ｐｌａｓｍｏｄｉ
ｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）のタンパク質、および抗
原活性を有するその部分配列物。