JPH11318486A - Production of optically active cyclopropanecarboxylic acid - Google Patents
Production of optically active cyclopropanecarboxylic acidInfo
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- JPH11318486A JPH11318486A JP13327098A JP13327098A JPH11318486A JP H11318486 A JPH11318486 A JP H11318486A JP 13327098 A JP13327098 A JP 13327098A JP 13327098 A JP13327098 A JP 13327098A JP H11318486 A JPH11318486 A JP H11318486A
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Abstract
(57)【要約】 （修正有）
【課題】ピレスロイドエステルの酸成分として有用な
（１Ｒ）−トランス−２，２−ジメチル−３−（１−プ
ロペニル）シクロプロパン−１−カルボン酸の工業的に
有利な製造法を提供すること。
【解決手段】次式
（但し、式中、ＲはＣ１〜Ｃ４のアルキル基を表す。）
で示される２，２−ジメチル−３−（１−プロペニル）
シクロプロパン−１−カルボン酸エステルに、アルスロ
バクター属に属する微生物由来のエステラーゼを作用さ
せ、（１Ｒ）−トランス−２，２−ジメチル−３−（１
−プロペニル）シクロプロパン−１−カルボン酸とその
ジアステレオマーのエステルとに分割し、（１Ｒ）−ト
ランス−２，２−ジメチル−３−（１−プロペニル）シ
クロプロパン−１−カルボン酸を分離、回収する。(57) [Summary] (Modifications) [Problem] An industrial production of (1R) -trans-2,2-dimethyl-3- (1-propenyl) cyclopropane-1-carboxylic acid useful as an acid component of a pyrethroid ester To provide a production method that is advantageous to [Solution] (In the formula, R represents a C1-C4 alkyl group.)
2,2-dimethyl-3- (1-propenyl) represented by
An esterase derived from a microorganism belonging to the genus Arthrobacter is allowed to act on cyclopropane-1-carboxylic acid ester, and (1R) -trans-2,2-dimethyl-3- (1
(1R) -trans-2,2-dimethyl-3- (1-propenyl) cyclopropane-1-carboxylic acid is separated by splitting into (-propenyl) cyclopropane-1-carboxylic acid and its diastereomer ester. ,to recover.
Description
【０００１】[0001]
【発明の属する技術分野】本発明は（１Ｒ）−トランス
−２，２−ジメチル−３−（１−プロペニル）シクロプ
ロパン−１−カルボン酸の製造法に関する。The present invention relates to a method for producing (1R) -trans-2,2-dimethyl-3- (1-propenyl) cyclopropane-1-carboxylic acid.
【０００２】[0002]
【従来の技術および発明が解決しようとする課題】式
化２BACKGROUND OF THE INVENTION Problems to be Solved by the Invention
Chemical 2
【化２】 で表される２，２−ジメチル−３−（１−プロペニル）
シクロプロパン−１−カルボン酸は、優れた殺虫効力を
有するいわゆる合成ピレスロイドと総称されるエステル
の酸成分を構成する。これらのシクロプロパンカルボン
酸にはそのＣ1位およびＣ3位に不斉炭素が存在し、4種
の異性体が存在する。このような各異性体が酸成分を構
成するピレスロイドの殺虫効力は対象害虫、製剤形の種
類等によって異なることから、目的とする上記のシクロ
プロパンカルボン酸の特定の異性体を工業的に有利に製
造する方法の開発が切望されている。Embedded image 2,2-dimethyl-3- (1-propenyl) represented by
Cyclopropane-1-carboxylic acid constitutes an acid component of an ester generally referred to as a synthetic pyrethroid having excellent insecticidal activity. These cyclopropanecarboxylic acids have an asymmetric carbon at the C 1 and C 3 positions, and have four isomers. Since the insecticidal efficacy of pyrethroids in which each of these isomers constitutes the acid component varies depending on the target pest, the type of the formulation, etc., the specific isomer of the above-mentioned cyclopropanecarboxylic acid is industrially advantageously used The development of manufacturing methods is eagerly desired.
【０００３】[0003]
【課題を解決するための手段】本発明者らは、このよう
な状況の下、（１Ｒ）−トランス−２，２−ジメチル−
３−（１−プロペニル）シクロプロパン−１−カルボン
酸の工業的に有利な製造法について鋭意検討を重ねた結
果、アルスロバクタ−（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ）属
に属する微生物由来のエステラ−ゼが、一般式 化３Under such circumstances, the present inventors have developed (1R) -trans-2,2-dimethyl-
As a result of intensive studies on an industrially advantageous method for producing 3- (1-propenyl) cyclopropane-1-carboxylic acid, an esterase derived from a microorganism belonging to the genus Arthrobacter was converted to a general formula 3
【化３】 [式中、ＲはＣ１〜Ｃ４のアルキル基を表す。]で示され
る２，２−ジメチル−３−（１−プロペニル）シクロプ
ロパン−１−カルボン酸エステルに作用してこれを不斉
加水分解しうることを見出し、本発明に至った。即ち本
発明は、上記一般式 化３で示される２，２−ジメチル
−３−（１−プロペニル）シクロプロパン−１−カルボ
ン酸エステルに、該エステルに作用し、（１Ｒ）−トラ
ンス−２，２−ジメチル−３−（１−プロペニル）シク
ロプロパン−１−カルボン酸とそのジアステレオマーの
エステルとに不斉水解する能力を有するエステラーゼを
作用させ、（１Ｒ）−トランス−２，２−ジメチル−３
−（１−プロペニル）シクロプロパン−１−カルボン酸
とそのジアステレオマーのエステルとに分割し、（１
Ｒ）−トランス−２，２−ジメチル−３−（１−プロペ
ニル）シクロプロパン−１−カルボン酸を分離、回収す
る（１Ｒ）−トランス−２，２−ジメチル−３−（１−
プロペニル）シクロプロパン−１−カルボン酸の製造法
を提供するものである。Embedded image [In the formula, R represents a C1-C4 alkyl group. The present invention has been found to be able to act on 2,2-dimethyl-3- (1-propenyl) cyclopropane-1-carboxylic acid ester represented by the formula That is, the present invention relates to 2,2-dimethyl-3- (1-propenyl) cyclopropane-1-carboxylic acid ester represented by the above general formula 3 acting on the ester to form (1R) -trans-2, 2-dimethyl-3- (1-propenyl) cyclopropane-1-carboxylic acid and an ester of its diastereomer are reacted with an esterase capable of asymmetric hydrolysis to give (1R) -trans-2,2-dimethyl ester. -3
-(1-Propenyl) cyclopropane-1-carboxylic acid and its diastereomer ester are separated into (1
R) -trans-2,2-dimethyl-3- (1-propenyl) cyclopropane-1-carboxylic acid is separated and recovered (1R) -trans-2,2-dimethyl-3- (1-
(Propenyl) cyclopropane-1-carboxylic acid.
【０００４】[0004]
【発明の実施の形態】本発明の原料として用いられる前
記一般式 化３で示される２，２−ジメチル−３−（１
−プロペニル）シクロプロパン−１−カルボン酸エステ
ルは、例えば、Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１０７６（１９
７０）に記載の方法に準じて製造することができ、メチ
ルエステル、エチルエステル、プロピルエステル、ブチ
ルエステル等が使用できるが、メチルエステル、エチル
エステルが好適である。BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION The 2,2-dimethyl-3- (1
-Propenyl) cyclopropane-1-carboxylic acid ester is described, for example, in J. Am. Chem. Soc. 1076 (19
It can be produced according to the method described in 70), and methyl ester, ethyl ester, propyl ester, butyl ester and the like can be used, but methyl ester and ethyl ester are preferred.
【０００５】本発明に用いることができるエステラーゼ
は、上記の２，２−ジメチル−３−（１−プロペニル）
シクロプロパン−１−カルボン酸エステルに作用し、
（１Ｒ）−トランス−２，２−ジメチル−３−（１−プ
ロペニル）シクロプロパン−１−カルボン酸とそのジア
ステレオマーのエステルとに不斉水解する能力を有する
エステラーゼであり、例えば、アルスロバクター属に属
し前記の不斉水解能を有する微生物由来のエステラーゼ
をあげることができる。かかるエステラーゼは、例え
ば、アルスロバクタ−（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ）Ｓ
Ｃ−６−９８−２８株（ＦＥＲＭ ＢＰ−３６５８；特
開平４−２３４９９１号公報に記載のＦＥＲＭ Ｐ−１
１８５１号より国際寄託へ移管）等から得ることがで
き、より好ましくは、上記エステラ−ゼをコードする遺
伝子が導入され該エステラーゼを産生できる遺伝子組換
え微生物、具体的には特開平５−５６７８７号公報に記
載の遺伝子組換え微生物等から得ることができる。本発
明に用いうるエステラーゼを上記のような微生物に産生
させるには、通常、常法に従い、滅菌した液体培地に微
生物を接種し、２０〜４０℃で１〜８日間、好気条件下
で培養するとよい。また、培養中に培地を加える流加培
養等を行うこともできる。培地の組成については、通常
の微生物の培養に用いられるもので、上記微生物により
利用可能なものであれば特に問題なく、例えば炭素源お
よび窒素源として、グルコ−ス、グリセロ−ル、澱粉、
デキストリン、糖蜜、油脂類、大豆粉、コ−ンスティ−
プリカ−、酵母エキス、肉エキス、ポリペプトン等の動
植物蛋白等の加水分解物等を用いることができる。ま
た、有機ないし無機塩としては、カリウム、ナトリウ
ム、マグネシウム、カルシウム、鉄、マンガン、コバル
ト、亜鉛等の塩化物、硫酸塩類、酢酸塩類、炭酸塩類お
よびリン酸塩類、具体的には、塩化カリウム、塩化ナト
リウム、塩化コバルト、硫酸マグネシウム、硫酸第一
鉄、硫酸マンガン、硫酸亜鉛、硫酸銅、酢酸ナトリウ
ム、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、リン酸水素1カ
リウム、リン酸水素2カリウム、リン酸水素1ナトリウ
ム、リン酸水素2ナトリウム等をあげることができ、硫
酸アンモニウム、塩化アンモニウム、硝酸アンモニウム
等のアンモニウム塩、尿素等も使用することができる。
また、場合によっては、培地中に脂肪酸エステル類また
は前記の一般式 化３で示されるエステル化合物を添加
することも可能である。遺伝子組換え微生物の場合は、
微生物の対数増殖期の適当な時期にイソプロピルチオ−
β−Ｄ−ガラクトシド（ＩＰＴＧ）等の遺伝子発現誘導
剤を添加してもよい。The esterase which can be used in the present invention is the above-mentioned 2,2-dimethyl-3- (1-propenyl)
Acts on cyclopropane-1-carboxylate,
(1R) -trans-2,2-dimethyl-3- (1-propenyl) cyclopropane-1-carboxylic acid and an esterase having the ability to hydrolyze asymmetrically into its diastereomer ester. Esterases derived from microorganisms belonging to the genus Bacter and having the above-mentioned asymmetric water-solubility can be mentioned. Such esterases are, for example, Arthrobacter S
C-6-98-28 strain (FERM BP-3658; FERM P-1 described in JP-A-4-234991)
(Transferred to International Deposit No. 1851), and more preferably, a transgenic microorganism capable of producing the esterase into which the gene encoding the above-mentioned esterase has been introduced, specifically, Japanese Patent Application Laid-Open No. 5-56787. It can be obtained from genetically modified microorganisms described in the publication. In order to produce the esterase which can be used in the present invention by the above-mentioned microorganism, usually, the microorganism is inoculated into a sterilized liquid medium and cultured at 20 to 40 ° C for 1 to 8 days under aerobic conditions according to a conventional method. Good to do. In addition, fed-batch culture in which a medium is added during culture can also be performed. The composition of the medium is used for cultivation of ordinary microorganisms, and is not particularly problematic as long as it can be used by the microorganisms.For example, as a carbon source and a nitrogen source, glucose, glycerol, starch,
Dextrin, molasses, fats and oils, soy flour, corn s
Hydrolysates of animal and plant proteins such as precursors, yeast extracts, meat extracts, and polypeptone can be used. Further, as organic or inorganic salts, potassium, sodium, magnesium, calcium, iron, manganese, cobalt, zinc and the like chlorides, sulfates, acetates, carbonates and phosphates, specifically, potassium chloride, Sodium chloride, cobalt chloride, magnesium sulfate, ferrous sulfate, manganese sulfate, zinc sulfate, copper sulfate, sodium acetate, calcium carbonate, sodium carbonate, 1 potassium hydrogen phosphate, 2 potassium hydrogen phosphate, 1 sodium hydrogen phosphate, Examples thereof include disodium hydrogen phosphate, and ammonium salts such as ammonium sulfate, ammonium chloride, and ammonium nitrate, and urea.
In some cases, a fatty acid ester or an ester compound represented by the above general formula 3 can be added to the medium. For genetically modified microorganisms,
At an appropriate time during the logarithmic growth phase of the microorganism, isopropylthio-
A gene expression inducer such as β-D-galactoside (IPTG) may be added.
【０００６】本発明の製造法において、前記一般式 化
３で示される２，２−ジメチル−３−（１−プロペニ
ル）シクロプロパン−１−カルボン酸エステルの不斉加
水分解反応は、該エステルと上記のエステラーゼを混合
し、攪拌または振とうすることにより行われる。使用し
うるエステラーゼとしては、例えば、上記微生物を培養
した培養液、菌体懸濁液、菌体破砕液、エステラ−ゼ抽
出液もしくは濃縮液などのエステラ−ゼ含有物、または
これらの処理物、例えば粗製エステラ−ゼもしくは精製
エステラ−ゼを含有する水溶液等をあげることができ、
必要に応じて、微生物またはエステラ−ゼを固定化して
用いることも可能である。反応温度は、使用されるエス
テラーゼの反応至適温度および熱安定性にもよるが、一
般に２０〜７０℃が適当であり、あまり高温ではエステ
ラーゼの安定性が低下しやすいことおよび低温では反応
速度が遅いことから３０〜６０℃が好ましい。反応中の
ｐＨは、使用されるエステラーゼの反応至適ｐＨおよび
安定性にもよるが、一般にｐＨ４〜１１が適当であり、
ｐＨ７〜１０であることが望ましい。次にこのようにし
て不斉加水分解反応を行った後、生成した（１Ｒ）−ト
ランス−２，２−ジメチル−３−（１−プロペニル）シ
クロプロパン−１−カルボン酸と未反応のエステルとを
分離回収する。この分離回収に際しては溶媒抽出、カラ
ムクロマトグラフィ−、分別蒸留などの操作を適宜採用
することができる。例えば、反応液をメチルイソブチル
ケトン、酢酸エチル、エ−テルまたはトルエンなどの有
機溶媒で抽出することにより、未反応のエステルを分離
取得する。次いで水層をろ過した後、塩酸、硫酸などの
無機酸または酢酸などの有機酸を加えてｐＨを酸性と
し、メチルイソブチルケトン、酢酸エチル、エ−テルま
たはトルエンなどの有機溶媒で抽出し、油層をろ過した
後、有機溶媒を留去することにより、（１Ｒ）−トラン
ス−２，２−ジメチル−３−（１−プロペニル）シクロ
プロパン−１−カルボン酸を回収する。なお、未反応の
エステルはラセミ化などの処理を施した後、本発明の製
造法における原料として利用することができ、また、目
的により、これを加水分解等の処理を施した後、ピレス
ロイドエステルに導くこともできる。In the production method of the present invention, the asymmetric hydrolysis reaction of 2,2-dimethyl-3- (1-propenyl) cyclopropane-1-carboxylic acid ester represented by the general formula (3) is carried out by reacting the ester with the ester. It is performed by mixing the above esterase and stirring or shaking. Examples of the esterase that can be used include, for example, a culture solution obtained by culturing the microorganism, a cell suspension, a cell disrupted solution, an esterase-containing substance such as an esterase extract or a concentrated solution, or a processed product thereof. For example, an aqueous solution containing a crude esterase or a purified esterase can be given,
If necessary, a microorganism or an esterase can be immobilized and used. Although the reaction temperature depends on the optimum reaction temperature and thermal stability of the esterase to be used, it is generally suitable to be 20 to 70 ° C., and if the temperature is too high, the stability of the esterase tends to decrease. A temperature of 30 to 60 ° C. is preferred because of its slowness. The pH during the reaction depends on the optimum pH and stability of the esterase used, but generally pH 4 to 11 is appropriate.
It is desirable that the pH is 7 to 10. Next, after performing the asymmetric hydrolysis reaction in this way, the generated (1R) -trans-2,2-dimethyl-3- (1-propenyl) cyclopropane-1-carboxylic acid and the unreacted ester Is separated and recovered. For the separation and recovery, operations such as solvent extraction, column chromatography, and fractional distillation can be appropriately employed. For example, an unreacted ester is separated and obtained by extracting the reaction solution with an organic solvent such as methyl isobutyl ketone, ethyl acetate, ether or toluene. Then, after filtering the aqueous layer, the pH is made acidic by adding an inorganic acid such as hydrochloric acid or sulfuric acid or an organic acid such as acetic acid, and extracted with an organic solvent such as methyl isobutyl ketone, ethyl acetate, ether or toluene, and the oil layer is extracted. After filtration, the organic solvent is distilled off to collect (1R) -trans-2,2-dimethyl-3- (1-propenyl) cyclopropane-1-carboxylic acid. The unreacted ester can be used as a raw material in the production method of the present invention after it is subjected to a treatment such as racemization. You can also lead to.
【０００７】[0007]
【実施例】以下、実施例および参考例により、本発明を
より詳細に説明するが、本発明は、これらに限定される
ものではない。The present invention will be described in more detail with reference to the following examples and reference examples, but the present invention is not limited to these examples.
【０００８】実施例 ５００ｍｌ三角フラスコに液体培地（水１Ｌにグリセロ
−ル５ｇ、酵母エキス６ｇ、リン酸１カリウム９ｇおよ
びリン酸2カリウム４ｇを溶解し、ｐＨ７．０とす
る。）１００ｍｌを入れて滅菌した後、アンピシリンを
５０μｇ／ｍｌになるように加え、後記参考例記載のア
ルスロバクタ−ＳＣ−６−９８−２８株由来のエステラ
−ゼ遺伝子導入大腸菌株を斜面培養から１白金耳接種
し、３０℃で２４時間回転振とう培養した。次に３Ｌ容
の小型培養槽（丸菱バイオエンジ社製、ＭＤＬ型）に滅
菌した液体培地（水１Ｌにグリセロ−ル１５ｇ、酵母エ
キス２５ｇ、リン酸１カリウム０．４ｇ、硫酸マグネシ
ウム２ｇおよび硫酸第一鉄０．１ｇを溶解し、ｐＨ７．
０とする。）１５００ｍｌを入れ、これに上記の培養液
１５ｍｌを接種した。３０℃で通気攪拌培養し、対数増
殖期中期（培養開始１０〜１５時間後）にＩＰＴＧ（イ
ソプロピルチオ−β−Ｄ−ガラクトシド）を終濃度１ｍ
Ｍとなるように培養液に添加した後、滅菌した培地を流
加し、さらに培養を続け４０時間培養し、培養液を得
た。この培養液の希釈液（０．５Ｍ炭酸緩衝液、ｐＨ
９．５）８０ｍｌに２，２−ジメチル−３−（１−プロ
ペニル）シクロプロパン−１−カルボン酸メチルエステ
ル（１Ｒ体／１Ｓ体＝５０／５０、トランス体／シス体
＝９８／２）４ｇを加えてｐＨ９．５となるよう調整し
ながら４５℃で２０時間攪拌した。ここで反応液の一部
を取り塩酸を加え酸性とした後、酢酸エチルで抽出し、
該抽出物に内部標準物質（けい皮酸メチル）を加えガス
クロマトグラフィ−（カラム：ＨＲ２０−Ｍ ０．５３
φ ３０ｍ １ミクロン ＵＬＢＯＮ製）により分析
し、加水分解率を求めたところ４６％であった。残りの
反応液にトルエンを加え、抽出分液しトルエン層を分離
除去した。次いで水層をろ過し、塩酸を加え酸性とした
後トルエンを加え抽出分液し、トルエン層からトルエン
を濃縮留去し、２，２−ジメチル−３−（１−プロペニ
ル）シクロプロパン−１−カルボン酸１．５ｇを得た。
この２，２−ジメチル−３−（１−プロペニル）シクロ
プロパン−１−カルボン酸を液体クロマトグラフィ−
（カラム：ＣＨＩＲＡＬＣＥＬ ＯＤ ４．６φ×２５
０ｍｍ ダイセル製）で分析し立体異性体比を求めたと
ころ、１Ｒ−トランス体／１Ｓ−トランス体／１Ｒ−シ
ス体／１Ｓ−シス体＝１００／０／０／０であった。Example 100 100 ml of a liquid medium (5 g of glycerol, 6 g of yeast extract, 9 g of 1 potassium phosphate and 4 g of potassium diphosphate) dissolved in 1 L of water to a pH of 7.0 was placed in a 500 ml Erlenmeyer flask. After sterilization, ampicillin was added to a concentration of 50 μg / ml, and a platinum loop was inoculated from a slant culture with a loopful of an esterase-introduced Escherichia coli strain derived from Arthrobacter-SC-6-98-28 described in Reference Example below. C. for 24 hours. Next, a sterilized liquid medium (15 g of glycerol, 25 g of yeast extract, 0.4 g of potassium phosphate, 2 g of magnesium sulfate, 2 g of magnesium sulfate and sulfuric acid in a 3 L small culture tank (MDL type, manufactured by Marubishi Bioengine)) was used. Dissolve 0.1 g of ferrous iron, pH7.
Set to 0. ) 1500 ml was added, and 15 ml of the above culture solution was inoculated into this. The mixture was cultured under aeration and agitation at 30 ° C., and IPTG (isopropylthio-β-D-galactoside) was added to a final concentration of 1 m in the mid-logarithmic growth phase (10 to 15 hours after the start of culture).
After adding to the culture solution so as to obtain M, a sterilized medium was fed, and the culture was further continued and cultured for 40 hours to obtain a culture solution. Diluent of this culture (0.5 M carbonate buffer, pH
9.5) 4 g of 2,2-dimethyl-3- (1-propenyl) cyclopropane-1-carboxylic acid methyl ester (1R form / 1S form = 50/50, trans form / cis form = 98/2) in 80 ml Was added and the mixture was stirred at 45 ° C. for 20 hours while adjusting to pH 9.5. Here, a part of the reaction solution was taken, acidified by adding hydrochloric acid, and extracted with ethyl acetate.
An internal standard substance (methyl cinnamate) was added to the extract, followed by gas chromatography (column: HR20-M 0.53).
(30 m, 1 micron, manufactured by ULBON), and the hydrolysis rate was 46%. Toluene was added to the remaining reaction solution, and the mixture was extracted and separated, and the toluene layer was separated and removed. Next, the aqueous layer was filtered, acidified by adding hydrochloric acid, and toluene was added thereto for extraction and separation. Toluene was concentrated and distilled off from the toluene layer, and 2,2-dimethyl-3- (1-propenyl) cyclopropane-1- 1.5 g of carboxylic acid were obtained.
The 2,2-dimethyl-3- (1-propenyl) cyclopropane-1-carboxylic acid was subjected to liquid chromatography.
(Column: CHIRALCEL OD 4.6φ × 25
(0 mm, manufactured by Daicel), and the stereoisomer ratio was determined to be 1R-trans / 1S-trans / 1R-cis / 1S-cis = 100/0/0/0.
【０００９】参考例 上記実施例で使用したアルスロバクタ−ＳＣ−６−９８
−２８株由来のエステラ−ゼ遺伝子導入大腸菌株は特開
平５−５６７８７号公報記載の方法に準じて調製した。
即ち、特開平５−５６７８７号公報記載のアルスロバク
ターＳＣ−６−９８−２８株由来のエステラーゼ遺伝子
を含むプラスミドｐＡＧＥ−１を、制限酵素Ｎｓｐ(752
4)ＶおよびＨｉｎｄIIIで消化することによりエステラ
ーゼ遺伝子の翻訳領域を含むＤＮＡ断片を切り出し、こ
れを特開平５−５６７８７号公報に記載のようにエステ
ラーゼ遺伝子の開始コドンとその近傍のＤＮＡ配列を変
換するために合成したＤＮＡ断片、およびｌａｃプロモ
ーターを有する発現ベクターｐＵＣ１１８（宝酒造株式
会社）の制限酵素ＢａｍＨI、ＨｉｎｄIII消化物とライ
ゲーションした。この様にして、ｌａｃプロモーターの
下流にアルスロバクターＳＣ−６−９８−２８株由来の
エステラーゼ遺伝子を有する大腸菌用発現プラスミドを
調製し、これをエシェリキア コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃ
ｈｉａ ｃｏｌｉ）ＪＭ１０５株に導入した。Reference Example Arthrobacta SC-6-98 used in the above embodiment
The Escherichia coli strain into which the elastase gene had been introduced from the -28 strain was prepared according to the method described in JP-A-5-56787.
That is, plasmid pAGE-1 containing an esterase gene derived from Arthrobacter SC-6-98-28 strain described in JP-A-5-56787 was replaced with a restriction enzyme Nsp (752).
4) A DNA fragment containing the translation region of the esterase gene is cut out by digestion with V and HindIII, and this is converted into the start codon of the esterase gene and the DNA sequence in the vicinity thereof as described in JP-A-5-56787. Were ligated with the DNA fragment synthesized for this purpose and the restriction enzyme BamHI and HindIII digests of the expression vector pUC118 (Takara Shuzo Co., Ltd.) having a lac promoter. In this way, an expression plasmid for Escherichia coli having an esterase gene derived from Arthrobacter SC-6-98-28 strain was prepared downstream of the lac promoter, and this plasmid was used for Escherichia coli (Escheric).
ia coli) JM105 strain.
【００１０】[0010]
【発明の効果】本発明により、ピレスロイドエステルの
酸成分として有用な（１Ｒ）−トランス−２，２−ジメ
チル−３−（１−プロペニル）シクロプロパン−１−カ
ルボン酸を工業的にも有利に製造することが可能とな
る。According to the present invention, (1R) -trans-2,2-dimethyl-3- (1-propenyl) cyclopropane-1-carboxylic acid useful as an acid component of a pyrethroid ester can be industrially advantageously used. It can be manufactured.
Claims (3)
る２，２−ジメチル−３−（１−プロペニル）シクロプ
ロパン−１−カルボン酸エステルに、該エステルに作用
し、（１Ｒ）−トランス−２，２−ジメチル−３−（１
−プロペニル）シクロプロパン−１−カルボン酸とその
ジアステレオマーのエステルとに不斉水解する能力を有
するエステラーゼを作用させ、（１Ｒ）−トランス−
２，２−ジメチル−３−（１−プロペニル）シクロプロ
パン−１−カルボン酸とそのジアステレオマーのエステ
ルとに分割し、（１Ｒ）−トランス−２，２−ジメチル
−３−（１−プロペニル）シクロプロパン−１−カルボ
ン酸を分離、回収することを特徴とする（１Ｒ）−トラ
ンス−２，２−ジメチル−３−（１−プロペニル）シク
ロプロパン−１−カルボン酸の製造法。1. A compound represented by the general formula: [In the formula, R represents a C1-C4 alkyl group. On the 2,2-dimethyl-3- (1-propenyl) cyclopropane-1-carboxylic acid ester represented by the formula (1R) -trans-2,2-dimethyl-3- (1
-Propenyl) cyclopropane-1-carboxylic acid and an ester of its diastereomer are reacted with an esterase capable of asymmetric hydrolysis to give (1R) -trans-
Splitting into 2,2-dimethyl-3- (1-propenyl) cyclopropane-1-carboxylic acid and its diastereomer ester gave (1R) -trans-2,2-dimethyl-3- (1-propenyl). ) A process for producing (1R) -trans-2,2-dimethyl-3- (1-propenyl) cyclopropane-1-carboxylic acid, comprising separating and recovering cyclopropane-1-carboxylic acid.
する微生物由来のエステラーゼである請求項１記載の製
造法。2. The method according to claim 1, wherein the esterase is derived from a microorganism belonging to the genus Arthrobacter.
６−９８−２８株（ＦＥＲＭ ＢＰ−３６５８）由来の
エステラーゼである請求項１または２記載の製造法。3. The method according to claim 1, wherein the esterase is Arthrobacter SC-
The method according to claim 1 or 2, which is an esterase derived from strain 6-98-28 (FERM BP-3658).
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|---|---|---|---|
| JP13327098A JPH11318486A (en) | 1998-05-15 | 1998-05-15 | Production of optically active cyclopropanecarboxylic acid |
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| CN99106485A CN1262330A (en) | 1998-05-15 | 1999-05-13 | Process for preparing cyclopropanecarboxylic acid with optical active |
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| JP13327098A JPH11318486A (en) | 1998-05-15 | 1998-05-15 | Production of optically active cyclopropanecarboxylic acid |
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| JPH11318486A true JPH11318486A (en) | 1999-11-24 |
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ID=15100707
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Cited By (2)
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-
1998
- 1998-05-15 JP JP13327098A patent/JPH11318486A/en active Pending
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| JP2005348686A (en) * | 2004-06-14 | 2005-12-22 | Sumitomo Chemical Co Ltd | Process for producing optically active cyclopropanecarboxylic acid |
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