JPH1143441A - 魚介類の疾病予防治療剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【課題】新規で魚介類の疾病予防治療剤を提供すること
を課題とする。 【解決手段】キトサンと、還元性末端を有する糖類とを
反応して得られたキトサン誘導体を含有する新規な魚介
類の疾病予防治療剤として応用するものである。 【効果】様々な細菌類（ビブリオ菌、エドワジェラ菌、
パスツレラ菌、エロモナス菌、連鎖球菌）に対して、増
殖抑制作用を有し、更に安全性も高いものである。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、キトサンと、還元
性末端を有する糖類とを反応して得られたキトサン誘導
体を含有する新規な魚介類疾病予防治療剤及びその応用
に関するものである。

【０００２】その利用分野は、各種の細菌による感染症
の予防や治療など、魚介類疾病予防治療剤として用いる
ことができる他、食品類への抗菌剤（ビブリオ菌、エド
ワジェラ菌、パスツレラ菌、エロモナス菌、連鎖球菌）
としても利用できる。

【０００３】

【従来の技術】近年、２００海里問題や乱獲漁による漁
業資源の不足などにより、養殖漁業がますます盛んにな
りつつあり、それに伴なって魚介類の高密度飼育が進め
ら、特にハマチやウナギなどで行なわれる高密度養殖漁
業においては、魚介類の感染症の集団発生頻度が高く、
放置すれば時に全滅に近い被害を招き、仮に全滅をまぬ
がれても、生き残った魚介類は多くの湯合、損傷を受
け、商品価値が著しく低下するなどの問題が経営上の大
きな障害となっている。又、仮に問題なく商品化されて
も、魚介類の刺身の生食により人が腸炎ビブリオ食中毒
などに感染する恐れがあり、有害である。

【０００４】尚、魚介類の感染病の予防及び治療法とし
ては、例えば、ハマチのビブリオ病や類結節症に対する
カスガマイシン投与（特開昭６１−２７５２１９）、連
鎖球菌感染症などに対する胆汁酸投与（特開昭６２−５
９２１４）、ビブリオ病やせっそう病に対するチアンフ
ェニコール類投与（特開昭４８−５６８１２）などが知
られている。

【０００５】しかしながら、上記疾病防止方法のほとん
どが、抗生物質や栄養物質の大量投与であることから、
魚介類の生体に与える影響（毒性や副作用）、人間への
安全性や耐性菌の出現、更に抗生物質や栄養物質自体の
経済性など、多くの問題点を抱えており、よって、簡便
かつ有効な代替法の開発が望まれていた。

【０００６】そこで魚介類の体内外における感染症の予
防や治療に対して、これまで様々な薬物が使用されてき
たが、その大半を占める抗生物質や合成抗菌防腐剤は、
確かにその効果は強いが、安全性の面で問題があった
り、効果はあるが副作用を起こすなど使用には厳重な注
意が必要であった。そこで副作用の少ない有効な物質が
求められていた。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】そこで、本発明者ら
は、細菌類による感染症、疾患に対して幅広い抗菌防腐
効果があり、且つ、魚介類に使用しても安全であるもの
について、様々な天然抽出物を検討し、新規な物質とそ
の作用に関する検討を積み重ねてきた。

【０００８】

【課題を解決するための手段】すなわち、本発明者ら
は、上記事情に鑑み、キトサン又は低分子化したキトサ
ンを用い、還元性末端を有する糖類とを反応させて得ら
れたキトサン誘導体が様々な細菌（ビブリオ菌、エドワ
ジェラ菌、パスツレラ菌、エロモナス菌、連鎖球菌）に
対して強い抗菌防腐効果があることを確認し、且つ、魚
介類に対して安全である、新規な魚介類の疾病予防治療
剤に応用することが極めて有効であることを発見し、本
発明を完成した。以下に本発明に至る経過を説明する。

【０００９】

【発明の実施の形態】尚、本発明のキトサン及び還元性
末端を有する糖類、製造方法などについて、以下に記載
するが、これらに限定されるものではない。

【００１０】本発明のキトサンは通常カニ、エビの甲殻
類などから得られるキチンをアルカリ処理、酵素処理な
どにより脱アセチル化して得られ、脱アセチル化度は特
に限定しないが、通常、脱アセチル化度が５０％以上の
ものが好ましい。

【００１１】又、低分子されたキトサンは、例えばキト
サンを濃塩酸又は塩素ガス、過ホウ酸ナトリウム、過酸
化水素にて処理する方法、又はキチンを酸又はアルカリ
処理えし、脱アセチル化と同時にグリコシド分解させる
方法、又はキチナーゼなどの酵素により加水分解する方
法などにより得られたものでも良い。

【００１２】還元性末端を有する糖類としては、アルド
ース、ケトース類、例えはグルコース、ガラクトース、
マンノース、アラビノース、キシロース、エリトロース
及びグリセルアルデヒド、ヘプツロース、へキスロー
ス、ペンツロース、更にはグルコサミン、Ｎ−アセチル
グルコサミン、ガラクトサミンなどのアミノ糖、デオキ
シ糖、分岐糖などが単糖として挙げられる。又、それら
単糖を構成成分とする二糖〜多糖の糖類、例えばマルト
ース、イソマルトース、マルトトリオース、ラクトース
又は各種オリゴ糖、プルラン、イヌリン、アミロース、
アミロペクチン、デキストラン、デキストリン、澱粉の
天然多糖など、又はそれらの分解物、異性化物、誘導体
（ＣＯＯＨ基化誘導など）が挙げられ、上記の糖類の１
種又は２種以上を反応に用いることができる。

【００１３】本発明のキトサン誘導体とは、キトサンの
構成糖であるグルコースアミンの２位のアミノ基と、還
元性末端を有する糖類にシアノ水素化ホウ素ナトリウム
（NaCNBH₃）又はアミンボラン系還元剤、例えばアンモ
ニアボラン（NH₃BH₃）、モノメチルアミンボラン「CH
₃(NH₂BH₃)」などを用いて、開環させたカルボキシル基
末端が遊離した糖類及び／又は分子中に遊離したカルボ
キシル基末端を有する糖類との間にアミド結合を形成さ
せて得られるものである。

【００１４】又、このアミド結合形成には、上記の糖類
の遊離カルボキシル基末端にＳＯＣｌ₂を作用させ、又
はｐ−ニトロフェノールでエステル化し、又は五酸化リ
ンなどで酸クロライド化し、カルボキシル基を活性化さ
せ、キトサンの構成糖であるグルコースアミンの２位の
アミノ基と反応してキトサン誘導体を得ることもでき
る。更に必要に応じて、カップリング剤を用いること。
又、単にキトサンと還元性末端を有する糖類を含む系中
に還元剤を併用して、カルボキシル基を遊離させると同
時にアミド結合形成を行うこともできる。

【００１５】又、還元性末端を有する糖類の遊離カルボ
キシル基を活性化する方法としては、二糖類のＤ−ガラ
クトピラノシル−グルコン酸を例示すると、ｐ−ニトロ
フェニルエステルの形態でカルボキシル基を活性化し、
活性化化合物を分離した後、キトサンの遊離のアミノ基
と反応させる。尚、この反応は、ジメチルホルムアミド
（DMF）、テトラヒドロフラン（THF）、ジメチルスルホ
キド（DMSO）などの溶媒中、室温或いは冷却下で行い、
反応時間は数時間から数日間で終了する。

【００１６】次に、カップリング剤としては、反応性、
選択性を考慮し、カルボジイミド系カップリング剤、例
えばN,N-ジシクロヘキシカルボジイミド(DCC)、１−エ
チル−３−（3-ジメチルアミノプロピル）カルボジイミ
ドハイドロクロライド(EDC)などを用いることができ、
これらのカップリング剤の１種又は２種以上を反応に用
いることもできる。

【００１７】又、還元剤としては、反応性、選択性を考
慮し、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（NaCNBH₃）又は
アミンボラン系還元剤、例えばアンモニアボラン（NH₃B
H₃）、モノメチルアミンボラン「CH₃NH₂BH₃」、ジメチ
ルアミンボラン「(CH₃)₂NHBH₃ )」、トリメチルアミンボ
ラン「(CH₃)₃NBH₃)」、ピリジンボラン（C₅H₅NBH₃）な
どを用いることができ、これらの還元剤の１種又は２種
以上を反応に用いることもできる。

【００１８】又、糖側鎖を導入したキトサン化合物のい
まだ遊離するヒドロキシル基、アミノ基に、例えば、オ
キシエチレン、オキシプロピレン付加、カルボキシメチ
ル化、リン酸化、硫酸化、ジヒドロプロピル化などを行
った誘導体を用いても良い。

【００１９】以上のようにして得られたキトサン誘導体
は、、更に溶媒洗浄、沈澱形成による精製、又はゲル濾
過、イオン交換カラムクロマトグラフィー、活性炭交換
カラムクロマトグラフィー、セルロース透析膜などによ
り精製を行うこともできる。

【００２０】尚、本発明のキトサンに対する還元性末端
を有する糖類の誘導率は、目的や用途に応じて適宜選択
できるが、一般的には１０〜１００％とにするものが好
ましい。

【００２１】又、本発明のキトサン誘導体は応用する魚
介類の疾病予防治療剤は、魚介類の形態・剤型により乾
燥、濃縮又は希釈などを任意に行い調整すれば良い。

【００２２】尚、本発明のキトサン誘導体を魚介類疾病
予防治療剤として用い、魚介類の細菌性疾病を治療又は
予防する方法としては、特に規定するものではないが、
主として本発明のキトサン誘導体を含有する薬液中に魚
介類を薬浴せしめるか、養殖池又は槽中にキトサン誘導
体を溶解して養殖すれば良く、場合によっては魚介類の
飼料に混じて投与しても良い。

【００２３】更に薬液中又は養殖池又は槽中のキトサン
誘導体濃度は、通常０００．１〜１０００ｍg／ｍｌ、
好ましくは０．１〜１００ｍg／ｍｌが適当である。キ
トサン誘導体薬液水への魚介類の薬浴時間は特に限定さ
れないが、通常１〜３時間を例示することができる。
又、飼料混入投与の場合には、キトサン誘導体を魚介類
の養殖用飼料に０．０１〜５０重量％、好ましくは１〜
２０重量％を添加して魚介類に給餌する。飼料への添加
は、配合飼料の場合には予じめ飼料調製時に行えば良
く、又、市販の養魚飼料を用いる湯合には、給餌時に行
なえば良い。又、給餌量は魚種、魚年齢、体重などによ
り適宜選択することができ、通常は１日につき、魚体重
の０．５〜５．０％を1日1回以上投与すれば良い。

【００２４】本発明のキトサン誘導体を含有する魚介類
の疾病予防治療剤はそのまま使用して良いが、通常は種
々の希釈剤と混合して、例えば、ペレット、粉末、粒
子、顆粒、錠剤、カプセル、溶液、エマルジョン、分散
液などの種々の製剤形態で使用することができる。又、
希釈剤は固体でも液体でも良く、好適な希釈剤として
は、例えば、水、エタノール、しょ糖、角料油、でん
粉、タルク、ペントナイト、魚粉、炭酸ナトリウム、炭
酸水素ナトリウムなどを挙げることができる。更に栄養
剤、飼料、別の抗菌剤、殺虫剤、代謝調節剤などを任意
に選択・併用して製造しても良い。

【００２５】又、魚介類の疾病予防治療剤へのその他の
添加物としては、植物又は動物系原料由来の添加物を以
下に挙げることができ、各々の添加物の効能・効果を目
的として使用することができる。更に他にも、これまで
に知られている各原料素材の様々な薬剤的効果を期待
し、これらを組合わせることによって目的とする効果の
増進を図ったり、又は多機能的な効果を期待した製品と
することも可能である。

【００２６】原料とする具体的な植物(生薬)としては、
例えば、アーモンド(へん桃)，アイ(藍葉)，アオカズラ
(清風藤)，アオツヅラフジ(木防巳)，アカシア，アカス
グリ果実，アカブドウ，アカメガシワ(赤芽柏)，アカネ
(茜草根)，アカヤジオウ・ジオウ(地黄)，アギ(阿魏)，
アキニレ(榔楡皮)，アケビ(木通)，アサ(麻子仁)，マル
バアサガオ又はアサガオ(牽牛子)，アシタバ(明日葉)，
アズキ(赤小豆)，アセロラ，アセンヤク(阿仙薬)，アニ
ス，アベマキ果実，アボカド，アマ，アマチャ(甘茶)，
アマチャヅル，アマドコロ(玉竹)，アミガサユリ(貝
母)，アルテア，アルニカ，アロエ(蘆薈)，アロエベ
ラ，アンジェリカ，アンズ・ホンアンズ(杏仁)，アンソ
ッコウ(安息香)，イガコウゾリナ(地胆頭)，イタドリ
(虎杖根)，イチゴ，イチジク(無花果)又はその葉，イチ
ビ(冬葵子)，イチヤクソウ，イチョウ(銀杏葉，銀杏)，
イトヒメハギ(遠志)，イナゴマメ，イネ種子又は種皮，
イノンド種子，イブキジャコウソウ，イラクサ，イラン
イラン，ウイキョウ(茴香)，ウキヤガラ(三稜)，ウグイ
スカグラ果実，ヒメウイキョウ，ウコン(鬱金)，ウスバ
サイシン・ケイリンサイシン(細辛)，ウスベニアオイ，
ウスベニタチアオイ，ウツボグサ(夏枯草)，ウド又はシ
シウド(羌活，独活，唐独活)，ウメ(烏梅)又はその果
肉，ウラジロガシ，ウワウルシ，ウンシュウミカン(陳
皮)，エストラゴン，エゾウコギ(蝦夷五加)，エノキ，
エビスグサ(決明子)，エルダーベリー果実，エレミ，エ
ンジュ(槐花，槐花米)，オウギ・キバナオウギ(黄耆)，
オウレン(黄連)，オオカラスウリ(カロニン)，オオツヅ
ラフジ(防己)，オオバコ(車前子，車前草)，オオハシバ
ミ(榛子)，オオバナオケラ・オケラ(白朮)，オオバヤシ
ャブシ果実，オオミサンザシ・サンザシ(山査子)，オオ
ムギ(大麦)，オグルマ(旋覆)，オクラ果実，オタネニン
ジン・トチバニンジ (人参)，オトギリソウ・コゴメバ
オトギリソウ・セイヨウオトギリソウ(弟切草)，オドリ
コソウ(続断)，オナモミ(蒼耳子)，オニグルミ，オニノ
ヤガラ(天麻)，オニユリ・ササユリ・ハカタユリ(百
合)，オノニス，オヒョウ(裂葉楡)，オミナエシ(敗
醤)，オランダイチゴ，オランダカラシ(クレソン)，オ
ランダゼリ，オランダミツバ，オリーブ，オレガノ，オ
レンジ果実又は果皮，カイケイジオウ(熟地黄)，カカオ
種子，カキ又はその葉(柿蒂)，カギカズラ(釣藤鈎)，カ
シア，カジノキ果実(楮実)，ガジュツ(莪朮)，カシワ
(槲樹，槲葉)，カスカリラ，カニクサ(金沙藤)，カノコ
ソウ(吉草根)，カバノキ又はシダレカンバ(白樺)，カボ
チャ，カポックノキ種子，カホクサンショウ(蜀椒)，ガ
マ(蒲黄)，カミツレ・ローマカミツレ，カミヤツデ(通
草)，カラスウリ(王瓜)，カラスビシャク(半夏)，カラ
スムギ，ガラナ種子，カラヤ，カリン(木瓜)，カワヤナ
ギ，カワラタケ，カワラヨモギ(茵チン蒿)，カンスイ
(甘遂)，カンゾウ(甘草)，カンデリラ，カントウ，カン
ナ，キイチゴ，キウイ果実，キカラスウリ(瓜呂根)，キ
キョウ(桔梗，桔梗根)，キク(菊花)，キササゲ(梓実)，
ギシギシ(羊蹄根)，キジツ(枳実)，キズタ，キダチアロ
エ，キダチハッカ，キナノキ，キハダ(黄柏)，ギムネマ
・シルベスタ，キャベツ，キャベブ未熟果，キュウリ，
キラジャ・サポナリア，キラヤ，キンカン果実，キン
マ，キンミズヒキ(仙鶴草)，グアバ果実，グアユーレ，
クェルクス・インフェクトリア(没食子)，ククイナッ
ツ，クコ(枸杞，枸杞子，枸杞葉，地骨皮)，クサスギカ
ズラ(天門冬)，クズ(葛根)，クスノキ，グースベリー果
実，クチナシ(山梔子)，クヌギ(樸ソウ)，クマザサ，ク
マツヅラ(馬鞭草)，クララ(苦参)，クランベリー果実，
クリ又はその渋皮，クルクリゴ・ラチフォリア果実，グ
レープフルーツ果実，クロウメモドキ，クロガネモチ
(救必応)，クローブ(丁子，丁香)，ケイガイ(荊芥，荊
芥穂)，ケイトウ(鶏冠花，鶏冠子)，ゲッケイジュ(月桂
樹)，ゲンチアナ，ゲンノショウコ(老鸛草)，コウシン
バラ(月季花)，コウスイハッカ(メリッサ)，コウゾ果
実，コウチャ(紅茶)，コウホネ(川骨)，コウホン(藁
本，唐藁本)，コウリャン，コエンドロ果実，コガネバ
ナ(黄ゴン)，コケモモ(越橘)，ココヤシ果実，ゴシュユ
(呉茱萸)，ゴショイチゴ(覆盆子)，コショウ(胡椒)，コ
パイババルサム，コーヒー豆，コブシ・タムシバ・モク
レン(辛夷)，ゴボウ(牛蒡，牛蒡子)，コボタンヅル，ゴ
マ(胡麻)，ゴマノハグサ(玄参)，コムギ(小麦)，米・米
糠(赤糠，白糠)・コメ油，コーラ・アクミナタ種子，コ
ーラ・ベラ種子，コロハ果実，コロンボ，コンズラン
ゴ，コンブ，コンニャク，コンフリー(鰭張草)，サキシ
マボタンヅル(威霊仙)，サクラの葉・花・果実・樹皮
(桜皮)，サクランボ，ザクロ，ササ，ササユリ(百合)，
サザンカ，サジオモダカ(沢瀉)，サツマイモ，サトウキ
ビ，サトウダイコン，サネブトナツメ(酸棗仁)，サフラ
ン(番紅花，西紅花)，ザボン果実，サボンソウ，サーモ
ンベリー果実，サラシナショウマ(升麻)，サルビア(セ
ージ)，サワギキョウ(山梗菜)，サンザシ(山ザ子)，サ
ンシチニンジン(三七人参)，サンシュユ(山茱萸)，サン
ショウ(山椒)，サンズコン(山豆根)，シア(カリテ)，シ
アノキ果実，シイタケ(椎茸)，シオン(紫苑)，ジキタリ
ス，シクンシ(使君子)，シソ・アオジソ・チリメンジソ
・カタメンジソ(紫蘇葉，紫蘇子)，シタン，シナノキ，
シナレンギョウ(連翹)，シマカンギク(菊花)，シモツケ
ソウ，ジャガイモ，シャクヤク(芍薬)，シャジン(沙
参)，ジャノヒゲ(麦門冬)，ジュズダマ，シュロ果実，
ショウガ(生姜)，ショウブ(菖蒲，菖蒲根)，ショズク果
実，シラカシ種子，シロゴチョウの種子，シロバナイリ
ス，シロバナツタの花，シロミナンテン(南天実)，シン
コナサクシルブラ，シンナモン，スイカ(西瓜)，スイカ
ズラ(金銀花，忍冬)，スイバ(酸模)，スイムベリー果
実，ストロベリー果実，スギナ(問荊)，ステビア，スモ
モ果実，セイヨウアカマツの球果，セイヨウカラマツ，
セイヨウキズタ，セイヨウグルミ，セイヨウサンザシ，
セイヨウタンポポ，セイヨウトチノキ(マロニエ)，セイ
ヨウナシ果実，セイヨウナツユキソウ，セイヨウニワト
コ，セイヨウネズ，セイヨウノコギリソウ(ミルフォイ
ル)，セイヨウバラ，セイヨウフウチョウボク，セイヨ
ウヤドリギ，セイヨウハッカ・セイヨウヤマハッカ，セ
イヨウワサビ，セキショウ(石菖根)，ゼニアオイ，ヒロ
ハセネガ，セネガ，セネガ，セリ，セロリ，センキュウ
(川キュウ)，センダン，センブリ(当薬)，センナ果実又
は葉，センニンソウ(大蓼)，ソウカ(草果)，ソバ種実，
ソメモノイモ，ダイオウ(大黄)，大根，大豆，ダイダイ
(橙皮，枳実)，タカトウダイ(大戟)，タカワラビ(狗
脊)，ダークスィートチェリー果実，タチアオイ，タチ
ジャコウソウ(タイム，百里香)，タチバナ(橘皮)，タチ
ヤナギ，タマリンド種子，タマネギ，タムシバ(辛夷)，
タラノキ又はその根皮，タンジン(丹参)，タンポポ(蒲
公英)又はシロバナタンポポ・モウコタンポポ，ダンマ
ル，チェリー果実，チガヤ又はその根(茅根)，チクセツ
ニンジン(竹節人参)，チコリ，チョウセンゴミシ(五味
子)，チョウセンダイオウ(大黄)，チョウセンニレ(蕪
夷)，チョウセンニンジン(人参)，チョウセンヨモギ(艾
葉)，チョレイマイタケ(猪苓)，ツキミソウ，ツバキ，
ツボクサ，ツメクサ(漆姑草)，ツユクサ(鴨跖草)，ツル
アズキ(赤小豆)，ツルドクダミ(何首烏)，ツルナ(蕃
杏)，ツルニンジン(四葉参)，ツワブキ，デイコ，テウ
チグルミ，デュベリー果実，テングサ，テンダイウヤク
(烏薬)，トウガ(冬瓜子)，トウガラシ(番椒)，トウキ
(当帰)，トウキンセンカ(マリーゴールド)，トウモロコ
シ又はトウモロコシ毛(南蛮毛)，トウネズミモチ(女貞
子)，トウリンドウ(竜胆)，ドクダミ(十薬)，トコン(吐
根)，トチバニンジン(竹節人参)，トチュウ(杜仲，杜仲
葉)，トマト，トラガント，トリアカンソス種子，トル
メンチラ，ドロノキ，トロロアオイ，ナイゼリアベリー
果実，ナガイモ・ヤマノイモ(山薬)，ナギイカダ(ブッ
チャーブルーム)，ナギナタコウジュ，ナズナ，ナタ
ネ，ナツミカン，ナツメ(大棗)，ナニワイバラ(金桜
子)，ナルコユリ(黄精)，ナンキンマメ(落花生)，ナン
テン(南天実)，ニガキ(苦木)，ニガヨモギ(苦艾)，ニク
ズク，ニッケイ(桂皮)，ニラ(韮子)，ニワトコ(接骨木)
の果実・花又は茎葉，ニンニク(大蒜)，ヌルデ(五倍
子)，ネギ，ノアザミ(大薊)，ノイバラ(営実)，ノコギ
リソウ，ノダケ(前胡)，ノバラ，ノモモ，パーム，パイ
ナップル果実，ハイビスカス(ブッソウゲ，フウリンブ
ッソウゲ，ローゼル)，ハカタユリ(百合)，ハカマウラ
ボシ(骨砕補)，ハクセン(白癬皮)，ハクルベリー果実，
ハコベ(繁縷)，ハシバミ(榛子)，ハシリドコロ(ロート
根)，バジル，ハス(蓮肉，蓮子)，パセリ(オランダゼ
リ)，ハダカムギ，バタタ，ハチク・マダケ(竹茹)，パ
チョリー，ハッカ(薄荷，薄荷葉)，ハトムギ(ヨクイニ
ン)，ハナスゲ(知母)，バナナ，ハナハッカ，バニラビ
ンズ，パパイヤ，ハハコグサ(鼠麹草)，ハブ草，パプリ
カ，ハマゴウ・ミツバハマゴウ(蔓荊子)，ハマスゲ(香
附子)，ハマビシ(シツ莉子)，ハマナス(マイカイ花)，
ハマボウフウ(浜防風)，ハマメリス，バラ(薔薇)，パリ
エタリア，ハルニレ(楡皮，楡白皮，楡葉)，パンノキ，
ヒオウギ(射干)，ヒカゲツルニンジン(党参)，ピーカン
ナッツ，ヒガンバナ(石蒜，蔓珠沙華)，ヒキオコシ(延
命草)，ヒシ(菱実)，ピスタチオ，ビート，ヒトツバ(石
葦)，ヒナタイノコズチ(牛膝)，ヒノキ，ヒバ，ヒマ
シ，ヒマワリ，ピーマン，ヒメガマ(香蒲)，ヒメマツタ
ケ，ピメンタ果実，ビャクシ，ヒユ果実，ビロウドアオ
イ，ヒロハオキナグサ(白頭翁)，ビワ(枇杷，枇杷葉)，
ビンロウ(大服皮，檳榔子)，フウトウカズラ(南籐)，フ
キ，フキタンポポ(款冬花，款冬葉)，フジバカマ(蘭
草)，フジマメ(扁豆)，ブドウ果実又は果皮・葉，ブ
ナ，フユムシナツクサタケ(冬虫夏草)，ブラジルカンゾ
ウ，ブラックカーラント果実，ブラックベリー，プラム
果実，フルセラリア，ブルーベリー(セイヨウヒメスノ
キ)，プルーン，ブロンドサイリウム，ブンドウ(緑
豆)，ヘチマ，ベニバナ(紅花)，ベラドンナ，ベリー果
実，ボイセンベリー果実，ボウフウ(防風)，ホウレンソ
ウ，ホオズキ(登呂根)，ホオノキ(厚朴，和厚朴)，ボケ
(木瓜)，ホソバナオケラ(蒼朮)，ホソババレンギク，ボ
ダイジュ(菩醍樹)，ボタン(牡丹，牡丹皮)，ホップ，ホ
ホバ，ホワートルベリー果実，ホンシメジ，マイズルテ
ンナンショウ(天南星)，マオウ(麻黄)，マカデミアナッ
ツ，マクリ(海人草)，マグワ(桑白皮，桑葉)，マダケ
(竹茹)，マタタビ(木天蓼)，マツカサ，松葉，マツホド
(茯苓)，マヨラム(ハナハッカ)，マルバノジャジン(苦
参)，マルベリー果実，マルメロ，マロニエ，マンゴ
ー，マンゴスチン，マンシュウグルミ，マンダリン果
実，マンネンタケ(霊芝)，ミカン属植物果実(枳実)，ミ
シマサイコ(柴胡)，ミゾカクシ(半辺蓮)，ミソハギ(千
屈菜)，ミツガシワ，ミツバ，ミツバハマゴウ(蔓荊
子)，ミドリハッカ，ミモザ，ミョウガ，ミラクルフル
ーツ果実，ミルラ，ミロバラン，ムクゲ(木槿)，ムクノ
キ，ムクロジ，ムラサキ(紫根)，ムラサキトウモロコ
シ，メハジキ(益母草)，メボウギ，メラロイカ，メリッ
サ，メリロート，メロン果実，モウコヨモギ，モウソウ
チク，モッコウ(木香)，モミジバダイオウ，モモの葉
(桃葉)，果実，種(桃仁)，モヤシ，モレロチェリー果
実，モロヘイヤ(黄麻)，ヤカワムラサキイモ，ヤクチ
(益智)，ヤグルマソウ(ヤグルマギク)，，ヤグルマハッ
カ，ヤシャブシ(矢車)，ヤチヤナギ，ヤツデ(八角金
盤)，ヤドリギ(柳寄生)，ヤナギタデの葉，ヤブガラ
シ，ヤブコウジ(紫金牛)，ヤマゴボウ(商陸)，ヤマハン
ノキ(山榛)，ヤマモモ(楊梅皮)，ヤマヨモギ， ユーカ
リ，ユキノシタ(虎耳草)，ユッカ・フレビフォリア，ユ
ズ果実，ユリ，ヨロイグサ，ヨモギ(艾葉)，ライム果
実，ライムギ，ラカンカ果実，ラズベリー葉・果実，ラ
ベンダー，リュウガン(竜眼肉)，リョクチャ(緑茶)，リ
ンゴ果実，リンドウ，ルバス・スアビシムス(甜涼)，レ
タス，レッドカーラント果実，レモン果実，レモングラ
ス，レンギョウ(連翹)，レンゲソウ，ロウヤシ，ローガ
ンベリー果実，ログウッド，ローズマリー(マンネンロ
ウ)，ローズヒップ(ノバラ)，ワカメ，ワサビ，ワレモ
コウ(地楡)などが挙げられる。

【００２７】海藻類としては、海藻［緑藻類：クロレラ
・ブルガリス，クロレラ・ピレノイドサ，クロレラ・エ
リプソイデイア，ウスバアオノリ，スジアオノリ，ヒラ
アオノリ，ボウアオノリ，ホソエダアオノリ］、海藻
［褐藻類：マコンブ，リシリコンブ，ホソメコンブ，ミ
ツイシコンブ，ワカメ，ヒロメ，アオワカメ，マクロシ
スティス・ピリフェラ，マクロシスティス・インテグリ
フォリア，ネオシティス・ルエトケアーナ，ヒジキ，ヒ
バマタ］、海藻［紅藻類：ヒジリメン，マクサ(テング
サ)，ヒラクサ，オニクサ，オバクサ，カタオバクサ，
ヤタベグサ，ユイキリ，シマテングサ，トサカノリ，ト
ゲキリンサイ，アマクサキリンサイ，キリンサイ，ビャ
クシンキリンサイ，ツノマタ，オオバツノマタ，トチャ
カ(ヤハズツノマタ)，エゾツノマタ，トゲツノマタ，ヒ
ラコトジ，コトジツノマタ，スギノリ，シキンノリ，カ
イノリ，イボツノマタ，ヤレウスバノリ，カギウスバノ
リ，スジウスバノリ，ハイウスバノリ］などが代表的な
ものとして挙げられる。

【００２８】又、動物系原料由来の素材としては、鶏冠
抽出物，牛・人の胎盤抽出物，豚・牛の胃や十二指腸又
は腸の抽出物又はその分解物，豚・牛の脾臓の抽出物又
はその分解物，豚・牛の脳組織の抽出物，水溶性コラー
ゲン，アシル化コラーゲンなどのコラーゲン誘導体，コ
ラーゲン加水分解物，エラスチン，エラスチン加水分解
物，水溶性エラスチン誘導体，ケラチン及びその分解物
又はそれらの誘導体，シルク蛋白又はその分解物又はそ
れらの誘導体，豚・牛血球蛋白分解物（グロビンペプチ
ド），豚・牛ヘモグロビン分解物（ヘミン，ヘマチン，
ヘム，プロトヘム，ヘム鉄など），牛乳，カゼイン又は
その分解物又はそれらの誘導体，脱脂粉乳又はその分解
物又はそれらの誘導体，ラクトフェリン又はその分解
物，鶏卵成分，魚肉分解物など。

【００２９】(1)微生物培養代謝物 酵母代謝物，酵母菌抽出エキス，米発酵エキス，米糠発
酵エキス，ユーグレナ抽出物，脱脂粉乳の乳酸発酵物や
トレハロース又はその誘導体など。

【００３０】(2)香料 ジャコウ，シベット，カストリウム，アンバーグリスな
どの天然動物性香料、アニス精油，アンゲリカ精油，イ
ランイラン精油，イリス精油，ウイキョウ精油，オレン
ジ精油，カナンガ精油，カラウェー精油，カルダモン精
油，グアヤクウッド精油，クミン精油，黒文字精油，ケ
イ皮精油，シンナモン精油，ゲラニウム精油，コパイバ
バルサム精油，コリアンデル精油，シソ精油，シダーウ
ッド精油，シトロネラ精油，ジャスミン精油，ジンジャ
ーグラス精油，杉精油，スペアミント精油，西洋ハッカ
精油，大茴香精油，チュベローズ精油，丁字精油，橙花
精油，冬緑精油，トルーバルサム精油，バチュリー精
油，バラ精油，パルマローザ精油，檜精油，ヒバ精油，
白檀精油，プチグレン精油，ベイ精油，ベチバ精油，ベ
ルガモット精油，ペルーバルサム精油，ボアドローズ精
油，芳樟精油，マンダリン精油，ユーカリ精油，ライム
精油，ラベンダー精油，リナロエ精油，レモングラス精
油，レモン精油，ローズマリー精油，和種ハッカ精油な
どの植物性香料、その他合成香料など。

【００３１】(3)色素・着色剤 赤キャベツ色素，赤米色素，アカネ色素，アナトー色
素，イカスミ色素，ウコン色素，エンジュ色素，オキア
ミ色素，柿色素，カラメル，金，銀，クチナシ色素，コ
ーン色素，タマネギ色素，タマリンド色素，スピルリナ
色素，ソバ全草色素，チェリー色素，海苔色素，ハイビ
スカス色素，ブドウ果汁色素，マリーゴールド色素，紫
イモ色素，紫ヤマイモ色素，ラック色素，ルチンなど。

【００３２】(4)甘味料 砂糖，甘茶，果糖，アラビノース，ガラクトース，キシ
ロース，マンノース，麦芽糖，蜂蜜，ブドウ糖，ミラク
リン，モネリン，甘草抽出物など。

【００３３】(5)各種ビタミン類 ビタミンＡ群：レチノール，レチナール（ビタミン
Ａ₁），デヒドロレチナール（ビタミンＡ₂），カロチ
ン，リコピン（プロビタミンＡ）、ビタミンＢ群：チア
ミン塩酸塩，チアミン硫酸塩（ビタミンＢ₁），リボフ
ラビン（ビタミンＢ₂ ），ピリドキシン（ビタミン
Ｂ₆），シアノコバラミン（ビタミンＢ₁₂），葉酸類，
ニコチン酸類，パントテン酸類，ビオチン類，コリン，
イノシトール類、ビタミンＣ群：アスコルビン酸又はそ
の誘導体、ビタミンＤ群：エルゴカルシフェロール（ビ
タミンＤ₂），コレカルシフェロール（ビタミンＤ₃），
ジヒドロタキステロール、ビタミンＥ群：トコフェロー
ル又はその誘導体，ユビキノン類、ビタミンＫ群：フィ
トナジオン（ビタミンＫ₁），メナキノン（ビタミン
Ｋ₂），メナジオン（ビタミンＫ₃），メナジオール（ビ
タミンＫ₄），その他、必須脂肪酸（ビタミンＦ），カ
ルニチン，フェルラ酸，γ-オリザノール，オロット
酸，ビタミンＰ類（ルチン，エリオシトリン，ヘスペリ
ジン），ビタミンＵなど。

【００３４】(6)各種アミノ酸類 バリン，ロイシン，イソロイシン，トレオニン，メチオ
ニン，フェニルアラニン，トリプトファン，リジン，グ
リシン，アラニン，アスパラギン，グルタミン，セリ
ン，システイン，シスチン，チロシン，プロリン，ヒド
ロキシプロリン，アスパラギン酸，グルタミン酸，ヒド
ロキシリジン，アルギニン，オルニチン，ヒスチジンな
どや，それらの硫酸塩，リン酸塩，硝酸塩，クエン酸
塩，又はピロリドンカルボン酸などのアミノ酸誘導体な
ど。

【００３５】(7)栄養強化剤 貝殻焼成カルシウム，シアノコラバミン，酵母，小麦胚
芽，卵黄粉末，ヘミセルロース，ヘム鉄など。

【００３６】(8)乳製品 牛乳，チーズ，生クリーム，バター，マーガリン，粉
乳，ホエー，練乳など。

【００３７】その他、保湿剤、ホルモン類、ｐＨ調整
剤、清涼剤、安定化剤、乳化剤、動・植物性蛋白質及び
その分解物、動・植物性多糖類及びその分解物、動・植
物性糖蛋白質及びその分解物、血流促進剤、消炎剤・抗
アレルギー剤、細胞賦活剤、角質溶解剤、創傷治療剤、
増泡剤、増粘剤、口腔用剤、消臭・脱臭剤、苦味料、調
味料、酵素などが挙げられ、これらとの併用によって、
相加的及び相乗的な各種の効果が期待できる。

【００３８】尚、本発明のキトサン誘導体を含有する魚
介類疾病予防治療剤の剤型は任意であり、アンプル状、
カプセル状、丸剤、錠剤状、粉末状、顆粒状、固形状、
液状、ゲル状、気泡状、乳液状、クリーム状、シート状
などの様々な形態で製品に配合して用いることができ
る。

【００３９】又、本発明のキトサン誘導体を含有する魚
介類疾病予防治療剤の使用は、例えば、鯛（タイ）、鰤
（ブリ）、ハマチ、鰺（アジ）、鰹（カツオ）、マグロ
（鮪）、秋刀魚（サンマ）鯖（サバ）、鱒（マス）、鮭
（シャケ）、平目（ヒラメ）、河豚（フグ）、鯉（コ
イ）、鮎（アユ）、マンボウ（翻車魚）、鯨（クジ
ラ）、鰻（ウナギ）、鯰（ナマズ）、穴子（アナゴ）、
海老（エビ）などの淡水性又は海水性の魚類など、更に
栄螺（サザエ）、鮑（アワビ）、牡蛎（カキ）、赤貝
（アカガイ）、帆立貝（ホタテガイ）、阿古屋貝（アコ
ヤガイ）、蛤（ハマグリ）、浅蜊（アサリ）などの貝類
や、その他一般的な飲食品類への抗菌剤（ビブリオ菌、
エドワジェラ菌、パスツレラ菌、エロモナス菌、連鎖球
菌）として応用することもできる。

【００４０】

【実施例】以下に、製造例、試験例を挙げて説明する
が、本発明がこれらに制約されるものではない。

【００４１】（製造例１）Ｄ−ガラクトピラノシル−グ
ルコン酸5.0gをTEMED緩衝液（50mMテトラメチレンジア
ミン、PH4.7）30mlに溶解し、カルボジイミドハイドロ
クロライド(EDC)5.0gを加えて30分間攪拌する。次にこ
のEDC溶液に、キトサン〔焼津水産化学工業（株）社
製、脱アセチル化度33％〕10gを溶解したTEMED緩衝液12
0mlを加えて３日間攪拌する。この間、3.3gのEDCを数回
に分けて添加する。その後、透析により低分子成分を除
去し、洗浄、乾燥して本発明のキトサン誘導体（キトサン-ラ
クトース誘導体：ラクトースの誘導率約31.5％、¹³Ｃ−ＮＭＲに
て確認）を約12.5g得た。

【００４２】（製造例２）キトサン〔焼津水産化学工業
（株）社製、脱アセチル化度85％〕l0gに水150mlを加
え、攪拌、分散後、水酸化ナトリウム水溶液にてpHを11
に調整した後、70℃に加温する。次に、過酸化水素（濃
度約35％）5.25mlを加え、3時間反応させ、反応終了
後、反応液を除去して、水洗、乾燥し、低分子キトサン
（脱アセチル化度 89％）を約8.0g得た。次に、この低
分子キトサン1.0gを300mlのフラスコに入れ、メタノー
ル／l％酢酸水溶液＝1／1の混合溶液50mlを加えて溶解
後、マルトース5.0gを加えて溶解後、更にシアノ水素化
ホウ素ナトリウム2.5gを加え、5時間反応させた。反応
終了後、アセトン／水＝5／1の混合溶液300ml及びエー
テル300mlにて洗浄、乾燥して本発明のキトサン誘導体
（キトサン-マルトース誘導体：マルトースの誘導率約42.5％）を約1.7
g得た。

【００４３】（試験１）ビブリオ菌、エドワジェラ菌、
パスツレラ菌、エロモナス菌、連鎖球菌に対する生育阻
害試験 ［試験菌種］ １．ヒ゛フ゛リオ・アンク゛イラルム(Vibro anguillarum)ビブリオ菌 ２．エト゛ワシ゛ェラ・タルタ゛(Edwardsiella tarda)エト゛ワシ゛ェラ菌 ３．ハ゜スツレラ・ヒ゜スシシタ゛（Pasteurella piscicida）パスツ
レラ菌 ４．エロモナス・サルモニサイタ゛ラ（Aeromonas samonicida）エロモ
ナス菌 ５．ストレフ゜トコツカス・エクイナス（Streptococcus equinus）連鎖
球菌 ［使用培地］Brain Heart Infusion Broth（以下、ＢＨ
Ｉ）"栄研" ［試料菌液の調製］試験に使用する菌を上記培地で培養
(37゜,18時間)し、菌数が1.0×10⁵となるよう同培地で
希釈した。 ［検体の調製］本発明のキトサン誘導体（製造例１）0.
3181gを精製水に溶かし、50mlとし0.45μmのメンブラン
フィルターでろ過し、検体溶液とした。 ［試験方法］あらかじめ精製水を希釈液とし、検体溶液
の倍数希釈系列を作成(0.5ml)しておき、これに上記培
地0.4ml及び試験菌液0.1mlを加え37℃で18時間培養し、
ＭＩＣ（最少発育阻止濃度）を判定した。結果は表１に
示した。

【００４４】

【表１】

【００４５】［試験結果］本発明のキトサン誘導体はビ
ブリオ菌、エロモナス菌、連鎖球菌に対してのＭＩＣ
（最少発育阻止濃度）は、０．１６w/v％以下と少量で
生育阻害効果を確認することができた。又、エドワジェ
ラ菌、パスツレラ菌に対しても少量で生育阻害効果を確
認することができた。尚、同様に本発明のキトサン誘導
体（製造例２）についても、ビブリオ菌、エドワジェラ
菌、パスツレラ菌、エロモナス菌、連鎖球菌に対して、
製造例１とほぼ同等の生育阻害効果が確認できた。

【００４６】（試験２）安全性試験 （１）急性毒性試験 同様に製造例１〜２で得られた本発明のキトサン誘導体
を乾燥固形分濃度が約10^W／_V％となるように精製水にて
調製し、試験前４時間絶食させたddy系マウス（雄性及
び雌性，１群５匹，５週齢）に2,000mg／kg量経口投与
し、毒性症状の発現、程度などを経時的に観察した。そ
の結果、すべてのマウスにおいて14日間何等異状を認め
ず、又、解剖の結果も異状がなかった。よって、LD₅₀は
2,000mg／kg以上と判定された。

【００４７】（処方例）魚介類疾病予防治療剤の製造 上記の評価結果に従い、以下にその処方例を示すが、各
処方例は各製品の製造における常法により製造したもの
で良く、配合量のみを示した。又、本発明はこれらに限
定されるわけではない。

【００４８】（処方例１）薬浴用可溶散剤 製造例１のキトサン誘導体粉末（１〜１０％）と乳糖
（９９〜９０％）を混合均一にする。

【００４９】（処方例２）飼料配合散剤 製造例１のキトサン誘導体粉末５％，大豆粉９０％，ア
ロエ抽出物５％を混合し飼料とする。

【００５０】（処方例３）飼料配合散剤 製造例２のキトサン誘導体粉末３％，小エビ５％，海藻
５％、レシチン１２％，グルテン７０％を混合し飼料と
する。

【００５１】（試験３）使用効果試験（タイのビブリオ
病に対する発病阻止試験） 100リットルの水槽を2つ用意し、それぞれに24℃の飼育
水を40リットル加え、一方の水槽には1gの本発明のキト
サン誘導体溶解させ、もう一方の水槽には通常飼育水を
入れた．平均体重0．4kgのタイを80尾、10⁸cfu／mlの濃
度のビブリオ・アングイラルム（Vibrio anguillarum）
懸濁飼育水中に2時間菌浴させた後、両水槽にハマチを4
0尾ずつ収容して10日間飼育し、10日後のビブリオ病の
発病（体表及び口先端の損傷、皮下筋肉及び内蔵での腫
瘍形成など）状況を観察した。尚、キトサン誘導体非含
有水飼育魚を対照として同様に発病状況を観察した。

【００５２】［試験結果］その結果、１０日間の飼育終
了後の発病魚数は、本発明のキトサン誘導体含有水飼育
魚においてはわずかに１尾であったのに対して、キトサ
ン誘導体非含有水飼育魚においては３６尾であり、キト
サン誘導体含有水飼育による発病阻止効果が確認され
た。

【００５３】 （試験
４）使用効果試験（ハマチの連鎖球菌感染症に対する発
病阻止試験） 100リットルの水槽を2つ用意し、それぞれに24℃の飼育
水を40リットル加え、一方の水槽には1gの本発明のキト
サン誘導体を溶解させ、もう一方の水槽には通常飼育水
を入れた．平均体重0．5kgのハマチを80尾、10⁸cfu／ml
の濃度のストレプトコツカス・エタイナス（Streptococ
cus equinus）懸濁飼育水中に2時間菌浴させた後、両水
槽にハマチを40尾ずつ収容して10日間飼育し、10日後の
連鎖球菌感興症の発病（体表発赤、びらん、腫瘍形成、
内蔵の出血斑など）状況を観察した。尚、キトサン誘導
体非含有水飼 育魚を対照として同様に発病状況を観察
した。

【００５４】［試験結果］その結果、１０日間の飼育終
了後の発病魚数は、本発明のキトサン誘導体含有水飼育
魚においてはわずかに２尾であったのに対して、キトサ
ン誘導体非含有水飼育魚においては３９尾であり、キト
サン誘導体含有水飼育による発病阻止効果が確認され
た。

【００５５】

【発明の効果】本発明のキトサンと、還元性末端を有す
る糖類とを反応して得られたキトサン誘導体は、様々な
細菌類（ビブリオ菌、エドワジェラ菌、パスツレラ菌、
エロモナス菌、連鎖球菌）に対して、増殖抑制作用を有
し、更に人又は動物に対しても安全である。従って、魚
介類疾病予防治療剤として用いれば、各種魚介類の疾病
汚染を防止することができる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 内藤 岳仁 岐阜県岐阜市岩井380番地の153 (72)発明者 又平 芳春 静岡県島田市東町1510番地２号 (72)発明者 由良 洋文 神奈川県藤沢市湘南台５丁目９番地１号タ ウンコート601号室

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】キトサンと、還元性末端を有する糖類とを
   反応して得られたキトサン誘導体を含有することを特徴
   とする魚介類疾病予防治療剤。
2. 【請求項２】ビブリオ菌、エドワジェラ菌、パスツレラ
   菌、エロモナス菌、連鎖球菌に対して増殖抑制作用を有
   する請求項１記載の魚介類疾病予防治療剤。