JPH1143502A

JPH1143502A - タンパク質を除去したβ−１，３グルカン及びこれを主成分とするゲルからなる超音波診断装置のプローブ用接触媒体

Info

Publication number: JPH1143502A
Application number: JP9215826A
Authority: JP
Inventors: Kazuyuki Miyazawa; 和之宮沢; Toshio Hariki; 利男梁木
Original assignee: Shiseido Co Ltd
Current assignee: Shiseido Co Ltd
Priority date: 1997-07-25
Filing date: 1997-07-25
Publication date: 1999-02-16
Anticipated expiration: 2017-07-25
Also published as: US6127431A; EP0893452A2; DE69832929D1; JP3167649B2; EP0893452B1; DE69832929T2; ES2251060T3; EP0893452A3

Abstract

(57)【要約】【課題】夾雑タンパク質が簡便かつ効率的に除去された
β−１，３グルカンを提供し、さらにこの精製β−１，
３グルカンを主成分とするゲルからなる、物理的特性及
び安全性に優れた超音波診断装置のプローブ用接触媒体
を提供すること。【解決手段】少なくともジメチルスルホキシドを含む有
機溶媒の混合溶液中で超音波処理を施すことにより夾雑
タンパク質を除去してなるβ−１，３グルカンが提供さ
れ、この主に夾雑タンパク質が除去されたβ−１，３グ
ルカンを主成分とするゲルからなる、超音波診断装置の
プローブ用接触媒体は、所望の物理的特性及び安全性に
優れた超音波診断装置のプローブ用接触媒体である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、主に夾雑タンパク
質が除去されたβ−１，３グルカン及びこのβ−１，３
グルカンを主成分とするゲルからなる超音波診断装置の
プローブ用接触媒体に関する技術分野の発明である。

【０００２】

【従来の技術】近年、患者の体力的負担を軽減し、予後
の経過を良好にする目的から、大がかりな外科手術を行
うことなく治療する方法が多数試みられている。また、
仮に開腹手術を行うにしても、術前に病巣部の状態を詳
細に知ること、並びに術中に臓器表面を切開することな
く内部の状態を知ることは、実際の手術のために極めて
有意義な情報をもたらすことになる。このようなニーズ
に応えるために、近年、超音波診断が著しく発展普及
し、これを用いた術前診断の正確さは、最近の手術成績
の向上に大いに役立っている。特に甲状腺疾患において
は、超音波診断法と穿刺吸引細胞診を組み合わせること
により診断能の飛躍的向上がなされている。しかしなが
ら、体表面若しくは臓器表面に直接超音波診断装置のプ
ローブを当てて内部の状態を観察しようとする際に、超
音波診断装置の特性上、表面下数cm以内の領域での鮮明
な画像を得ることは非常に困難である。また、実際の身
体や臓器表面は平らな状態ではなく、各々に特徴的な彎
曲や凹凸を持つのが常であるため、一定の形態の不可変
なプローブでは目的の部位に密着させることは不可能で
ある。すなわち、生体とプローブとの間に空気が介在す
ると超音波伝播率が著しく低下し、診断装置の画面上に
正確な画像を結ばせることが困難になる。

【０００３】上述した問題を解決するために、プローブ
と生体との間に適当なスペーサー（接触媒体）を介在さ
せることが有効である。この接触媒体はシート状にして
診断の際にプローブと体表面等との間に挟むか、あるい
は適当な形状に成型してプローブに直接又は治具で装着
して使用できるものが好ましい。このような接触媒体に
は、適当な柔軟性と機械的強度及び良好な音響特性（超
音波の減衰率が低いこと等）を具備することが要求され
る。例えば特開昭５５−６３６３６号公報には特定の含
水高分子ゲルが開示されているが、ここで開示されてい
るゲルは機械的強度が不十分であったり、超音波の減衰
が大きかったりする等の問題を有しており、その後この
ような問題点を解決すべく、さまざまな試みがなされ
た。

【０００４】例えば、ポリビニルアルコール系高分子ゲ
ル（特開昭６２−２９８３４２号公報），高吸水性樹脂
（特開平４−５３５４４号公報）並びに各種有機高分子
若しくは無機高分子（特公平２−２１２５２号公報）の
ものが知られている。しかしながら、これらの試みに係
る高分子ゲルも依然として種々の問題点が解決されずに
残っている。すなわち、高分子ゲルを用いたものは、穿
刺時又は術中にゲルの一部若しくはゲル自体が生体内に
混入して残留するおそれがあるため、ゲルそのもの、あ
るいは残留モノマーに由来する毒性が懸念され、安全性
の上での問題があった。また、安全性が高いと考えられ
る天然高分子やポリビニルアルコールゲルも音響特性が
必ずしも十分ではなく（例えば，減衰率が高い）、この
音響特性を向上させるためには、ゲル中の含水率を上昇
させる必要があるが、この含水率を上昇させるとゲルの
機械的強度が低下してしまうという欠点が認められた。
また、ポリビニルアルコールゲルは、圧力を加えると離
水し易く、身体や臓器表面に押しつけて使用するプロー
ブ用ゲルとしては不向きであり、さらに滅菌性に劣ると
いう欠点も認められる（すなわち，簡便な滅菌法である
オートクレーブによる１２１℃の加熱により，完全に溶
解して原形を止め得ない）ために実用化には至っていな
い。かかる状況において、従来から穿刺及び術中におい
ても使用可能な安全なプローブ用接触媒体の開発がさら
に望まれていた。

【０００５】

【発明が解決すべき課題】本発明者らは、このような既
存のプローブ用接触媒体に代わるべきプローブ用接触媒
体として適切な素材について鋭意検討した結果、微生物
が産生する多糖類の一種であるカードラン等のβ−１，
３グルカンを主成分として含むゲルが、上述した既存の
プローブ用接触媒体に関わる問題点を概ね解決し得るこ
とを見出した（特開平６−２９６６１１号公報，特開平
７−１２４１５８号公報，特開平７−１２４１５４号公
報，特開平７−８８１１１号公報，特開平−７９９７０
号公報等参照のこと）。しかしながら、これらのβ−
１，３グルカンにおいても問題点がないわけではない。

【０００６】すなわち、これらのβ−１，３グルカン
は、主に微生物由来の多糖類であるために夾雑物が認め
られることが多く、これらの夾雑物を完全に除去するに
は非常に煩雑な操作を伴い、夾雑物の種類によっては完
全除去が実質的に困難と考えられているものもある。こ
れらの夾雑物が、元来プローブ用接触媒体の素材として
は非常に優れるβ−１，３グルカンを主成分とするゲル
の安全性及びそのプローブ用接触媒体としての性能を低
下させていることは否定できない。特に、β−１，３グ
ルカンから完全に除去することが困難であると考えられ
ているものとして、エンドトキシン及び夾雑タンパク質
を挙げることができる。

【０００７】本発明者らは、酸若しくは塩基を含む有機
溶媒処理によるβ−１，３グルカンからのエンドトキシ
ンの除去手段を既に確立したが、夾雑タンパク質を除去
するには未だ至っていない。そこで、本発明が解決すべ
き課題は、β−１，３グルカンからの夾雑タンパク質の
簡便かつ有効な除去手段を確立して、プローブ用接触媒
体の素材として上記安全性及び性能に優れる精製β−
１，３グルカンを主成分とするゲルを提供することにあ
る。

【０００８】

【課題を解決するための手段】本発明者は、この課題の
解決に向けてさらに鋭意検討を行った。その結果、β−
１，３グルカンを少なくともジメチルスルホキシドを含
む有機溶媒の混合溶液中で超音波処理を施すことにより
夾雑タンパク質を簡便かつ効率的に除去することが可能
であることを見出して本発明を完成した。

【０００９】すなわち、本発明者は本願において少なく
ともジメチルスルホキシドを含む有機溶媒の混合溶液で
洗浄し、さらに超音波処理を施すことにより夾雑タンパ
ク質を除去してなるβ−１，３グルカンを提供し、さら
にこのβ−１，３グルカンを主成分とするゲルからな
る、超音波診断装置のプローブ用接触媒体を提供する。
なお、この夾雑タンパク質を除去してなるβ−１，３グ
ルカンから、エンドトキシンもまた除去されていること
が、上記超音波診断装置のプローブ用接触媒体の性質上
好ましい。

【００１０】

【発明の実施の形態】以下、本発明の実施の形態につい
て説明する。本発明において、夾雑タンパク質を除去す
る対象となるβ−１，３グルカンは、Ｄ−グルコース残
基の殆どがβ−１，３結合で連なった多糖類の総称であ
る。このβ−１，３グルカンは、側鎖の有無や分岐度等
により種々のものが知られており、本発明においては、
例えばカードラン，スクレログルカン，スクレロタン，
シゾフィラン，レンチナン，パラミロン，カロース，ラ
ミナリン等を挙げることが可能であり、またここに挙げ
たβ−１，３グルカンに本発明の適用対象が限定される
ものではない。

【００１１】なお、一般的にβ−１，３グルカンは、そ
の側鎖が多いほど水溶性となり、この側鎖をマイルドス
ミス分解等の方法で間引くことによって水不溶性とな
り、加熱によりゲルを形成する性質を持ちはじめる（Po
lym J.13(12)1135-1143(1981))。よって、β−１，３グ
ルカンを主成分とするゲルからなる超音波診断機プロー
ブ用スタンドオフ材の素材としは、β−１，３結合に対
する側鎖の比率が小さく、上記の側鎖の間引き処理をす
る必要が殆どなく、しかも比較的安価で安定的に市場に
供給されているカードランを選択することが好ましい。

【００１２】本発明に関わる夾雑タンパク質が除去され
た精製β−１，３グルカン（本発明精製β−１，３グル
カンということもある）は、上記の精製前のβ−１，３
グルカンに少なくともジメチルスルホキシドを含む有機
溶媒の混合溶液中において、超音波処理を施すことによ
り製造することができる。

【００１３】この混合溶液に含まれるジメチルスルホキ
シドは、硫化ジメチルを酸化することによって得られ
る、その化学式がＣＨ₃ＳＯＣＨ₃で表される無色，無
臭の吸湿性の液体（常温）であり、溶剤や有機合成の原
料として汎用されている化合物である。本発明におい
て、このジメチルスルホキシドの市販品を用いることが
できるのは勿論である。

【００１４】また、ジメチルスルホキシド以外の有機溶
媒は、ジメチルスルホキシドとの相溶性が認められる限
り特に限定されるべきものではなく、例えばメタノー
ル，エタノール，ｎ−プロパノール，イソプロパノー
ル，ｎ−ブタノール，sec−ブタノール，tert−ブタノ
ール，ペンタノール，アセトン，ジオキサン，アセトニ
トリル等を例示することが可能である。

【００１５】本発明においては、これらのジメチルスル
ホキシド以外の有機溶媒のうち、１種又は必要に応じて
２種以上を用いて、ジメチルスルホキシドと混合して、
本発明における「少なくともジメチルスルホキシドを含
む有機溶媒」（以下，ジメチルスルホキシド含有溶媒と
もいう）とすることができる。

【００１６】このジメチルスルホキシド含有溶媒におけ
るジメチルスルホキシドの含有量はこの溶媒の２０．０
容量％以上，９０．０容量％以下であり、好ましくは同
４０．０容量％以上，６０．０容量％以下であるであ
る。この含有量が溶媒の２０．０容量％未満の場合に
は、系のタンパク質溶解能が不十分であり好ましくな
く、逆に同９０．０容量％を超える場合はβ−１，３グ
ルカン自体の一部が系において溶解されてしまうために
好ましくない。

【００１７】また、このジメチルスルホキシド含有溶媒
中に添加するβ−１，３グルカンは、この溶媒の０．１
重量％以上，１０．０重量％以下が好ましい。この溶媒
の０．１重量％未満であると夾雑タンパク質を除去する
β−１，３グルカンに対してこの溶媒の量が多過ぎて、
夾雑タンパク質の除去効率が低下して好ましくなく、逆
に１０．０重量％を超えて配合すると夾雑タンパク質除
去効果が低下する傾向になり好ましくない。

【００１８】このジメチルスルホキシド含有溶媒中のβ
−１，３グルカンに対して、超音波処理を施すことによ
り、所望する夾雑タンパク質が除去された本発明精製β
−１，３グルカンを効率良く得ることができる。

【００１９】この超音波処理は、効率よくジメチルスル
ホキシド含有溶媒中のβ−１，３グルカンを細振動させ
て、夾雑タンパク質の除去効率を著しく向上させるため
に行う処理である。よって、この超音波処理により過度
にβ−１，３グルカンが傷つき，熱変性を起こさない限
り、適宜かかる超音波処理の条件（例えは，波長や処理
時間）を選択することができる。

【００２０】例えば、実施例のように２０KHz で３０分
間超音波処理を行うと、効率よくβ−１，３グルカンの
夾雑タンパク質の除去を行うことができる。ただし、こ
の条件に超音波処理の条件が限定されるものではなく、
適宜ジメチルスルホキシド含有溶媒に対するβ−１，３
グルカンの量等に応じて選択することが可能である。

【００２１】なお、この超音波処理を行わずに、例えば
他の方法で系を振動することによりβ−１，３グルカン
から夾雑タンパク質を除去することも可能あるが、通常
は効率的に所望する夾雑タンパク質の除去効果をあげる
ことができず好ましくない。

【００２２】これらの工程により、β−１，３グルカン
中の夾雑タンパク質が除去されたか否かの確認は、通常
公知のタンパク質定量法、例えばＬｏｗｒｙ法，又はそ
の変法等により行うことができる。

【００２３】さらに、上述した夾雑タンパク質除去工程
に引き続いて、系からジメチルスルホキシドを除去す
る「ジメチルスルホキシド除去工程」，系からエンド
トキシンを除去する「エンドトキシン除去工程」及び
エンドトキシン除去工程において用いたアルカリを除去
する「アルカリ除去工程」を、所望する本発明に係る超
音波診断装置のプローブ用接触媒体を得る基となる精製
β−１，３グルカンを得るために行うことが好ましい。

【００２４】ジメチルスルホキシド除去工程は、低級
アルコール，好ましくはエタノールで本発明β−１，３
グルカンを洗浄することで行うことができる。この工程
において、系中に上記と同様の目的から超音波処理を施
すことが可能であり、かつ好ましい。

【００２５】エンドトキシン除去工程は、本発明β−
１，３グルカンをアルカリ処理することにより行うこと
ができる。この工程において、系中に上記と同様の目的
から超音波処理を施すことが可能であり、かつ好まし
い。

【００２６】アルカリ除去工程は、上記によって得
られた精製β−１，３グルカンを水で処理することによ
って行うことができる。この工程において、系中に上記
と同様の目的から超音波処理を施すことが可能であり、
かつ好ましい。これらの工程〜については、実施例
において具体的に記載する。

【００２７】このようにして得られた本発明精製β−
１，３グルカンを、ゲル製造工程に付することにより、
本発明に係る超音波診断装置のプローブ用接触媒体を得
ることができる。このゲル製造工程は、すでに本発明者
らによって報告されている方法により行うことができ
る。

【００２８】例えば、本発明精製β−１，３グルカンと
して、精製カードランを選択する場合について、まず説
明する。カードランについては、日本食品工業会会誌Vo
l.38,No.8,736-742(1991) 等に記載されており、微生物
(Alcaligenes faecalis var.myxogenes 又はAgrobacter
ium の多くの菌株やRizobium) が産生する多糖類の一種
で、構成糖はＤ−グルコースのみであり、そのグルコシ
ド結合の９９％以上がβ−１，３結合である。カードラ
ンは水に不溶であるが、水酸化ナトリウム等のアルカリ
性水溶液には溶解する。このような性質を有するため、
カードランについては原則として上記したような側鎖の
間引き処理を行う必要がない。

【００２９】精製カードランの均一な水分散液の調製法
としては、精製カードラン粉末に水を加えて高速ホモジ
ナイザー又はカッターミキサー等で激しく攪拌するか、
５５℃程度の温水に手やプロペラ攪拌機等を用いて攪拌
しながらカードランを加えた後、冷却する方法が知られ
ている。この水分散液を加熱するとゲルを形成する。

【００３０】加熱によって得られるゲルは、その処理温
度により２つのゲルに大別される。すなわち、８０℃以
上の加熱により得られる熱不可逆性のゲルと、約６０℃
で加熱した後、冷却して得られる熱可逆性のゲルであ
り、前者はハイセットゲル及び後者はローセットゲルと
呼ばれている。また、加熱をすることなしに、カードラ
ンをアルカリ性水溶液中に溶解し、これを静置したまま
炭酸ガス等で中和するか、透析膜を用いて水酸化ナトリ
ウムを除去すること等によっても、所望するゲルを調製
することができる。さらに、同じくアルカリ性水溶液中
にカルシウム，マグネシウムイオン等のカチオンを添加
して解離した水酸基とカチオンによる架橋構造を造らせ
ることによっても所望するゲルを調製することができ
る。

【００３１】精製カードラン以外の精製β−１，３グル
カンについては、必要に応じてその側鎖の間引き処理を
行う以外は、上記精製カードランからのゲルの調製法に
準じた手法により所望するゲルを調製することができ
る。

【００３２】上記した精製カードラン等の精製β−１，
３グルカンのアルカリ水溶液等の分散液中における濃度
は、概ね分散液に対して１．０以上，１０．０重量％以
下程度が好ましく、同２．０以上，５．０重量％以下程
度が特に好ましい。この精製β−１，３グルカンの分散
液における濃度が１．０重量％未満では調製されたゲル
の強度が不十分である傾向が強く、同１０．０重量％を
超えると分散液の粘度が過剰に高くなり、気泡を含まな
い均一なゲルを調製することが困難になる傾向があり好
ましくない。また、このゲルを主成分とする超音波診断
装置のプローブ用接触媒体の音響特性を良好に保つとい
う意味合いから、可能な限りこのゲルの含水率を高くす
ることが好ましいという観点から、分散液に対して５．
０重量％以下であることが特に好ましく。その観点から
分散液に対して２．０重量％以上であればゲル強度を十
分保つことが可能である。

【００３３】なお、これらのゲルの調製工程おいて、超
音波診断装置のプローブ用接触媒体の素材としてのゲル
の性能を向上させるために、本発明者らがすでに報告し
た種々の手段を講ずることができる。例えば、上記ゲル
調製工程において調製したβ−１，３グルカンのアルカ
リ性水溶液中に架橋剤を添加することにより、さらに強
固な架橋ゲルを調製することができる（特開平７−１２
４１５８号公報参照のこと）。

【００３４】ここで、添加される架橋剤としては、水酸
基又はカルボキシル基と反応し得る官能基を１分子当り
２個以上有する架橋剤を挙げることができる。かかる架
橋剤としては、例えば（ポリ）エチレングリコールグリ
シジルエーテル，グリセロールポリグリシジルエーテル
等の多価グリシジルエーテル化合物；２，２−ビスヒド
ロキシメチルブタノール−トリス〔３−（１−アジリジ
ニル）プロピオネート〕、１，６−ヘキサメチレンジエ
チレンウレア、ジフェニルメタン−ビス−４，４’−
Ｎ，Ｎ’−ジエチレンウレア等の多価アジリジン化合
物；エチレンジアミン，ジエチレントリアミン，トリエ
チレンテトラミン，テトラエチレンペンタミン，ペンタ
エチレンヘキサミン，ポリエチレンイミン等の多価アミ
ン化合物；２，４−トリレンジイソシアネート，ヘキサ
メチレンジイソシアネート等の多価イソシアネート化合
物；エピクロルヒドリン，エピブロムヒドリン，β−メ
チルエピクロルヒドリン，β−メチルエピブロムヒドリ
ン等のハロメチルオキシラン化合物等を挙げることがで
きる。

【００３５】通常これらの架橋剤は、上記アルカリ性水
溶液に対して０．００１重量％以上，２．０重量％以下
添加され、架橋反応終了後に系を５０℃程度に加熱及び
中和して十分に水洗することで、未反応の架橋剤を系か
ら除去することができる。この架橋工程終了後に、上述
した加熱等のゲル化手段を講ずることで、より強固なゲ
ルを調製することができる。

【００３６】また、ゲルの白濁を防止して可能な限りそ
の透明性を確保するために、上記ゲル調製工程において
調製したβ−１，３グルカンのアルカリ性水溶液中に錯
体形成性化合物を添加することができる（特開平７−８
８１１１号公報参照のこと）。

【００３７】ここで添加される錯体形成性化合物として
は、例えばホウ酸，ホウ砂，フェニルホウ酸，スルホン
化フェニルホウ酸，ゲルマニウム酸，モリブデン酸等を
挙げることができる。通常これらの錯体形成性化合物
は、上記アルカリ性水溶液において５〜９００mM，好ま
しくは３０〜４００mMの範囲で添加される。

【００３８】さらに、ゲルの耐熱性をさらに向上させる
ために、上記のゲル調製工程終了後に、高圧処理を施す
ことも可能である（特開平７−１２４１５４号公報参照
のこと）。すなわち、上記のごとく調製したゲルを冷却
後、１００Kg/cm²以上，好ましくは１０００Kg/cm²以上
で高圧処理し、これに滅菌操作（６０℃以上，好ましく
は８０℃以上での１０分間以上の加熱処理，放射線照射
等）を行うことにより、高温・高圧のオートクレーブ処
理を行ってもひび割れ等が惹起されない強固なゲルを調
製することができる。

【００３９】このようなゲルを主成分とする、本発明に
係る超音波診断装置のプローブ用接触媒体には、主成分
であるβ−１，３グルカンの他に、他の高分子物質、例
えばアルギン酸，カラギーナン，寒天，グルコマンナ
ン，デンプン，ヒアルロン酸，セルロース，メチルセル
ロース，エチルセルロース，ニトロセルロース，ポリビ
ニルアルコール等を配合することができる。また、各種
の塩類、例えばリン酸，酢酸，乳酸，クエン酸等のナト
リウム塩又はカリウム塩、塩化ナトリウム等を配合する
ことができる。また、各種の糖類、例えばグルコース，
シュークロース，マルトース，ガラクトース，マンノー
ス，ラクトース等を配合することができる。また、尿
素，グリセリン，シリコーン等を必要に応じて、単独又
は２種以上の混合物として配合することができる。

【００４０】このようにして製造される本発明に係る超
音波診断装置のプローブ用接触媒体は、適度な柔軟性を
有すると共に、成型が極めて容易であり、一定の形状を
有するプローブと接触媒体との接続を考慮した場合、非
常に有利である。

【００４１】このように調製された本発明に係る超音波
診断装置のプローブ用接触媒体は、全て良好な音響特性
を示す。すなわち、音速は水の場合に近い１４８５〜１
５４０m/s であり、減衰率は０．０６〜０．２０dB/MHz
・cmである。また、これらの接触媒体の機械的強度を測
定したところ、破断強度が５．４３×１０²〜１．３２
×１０⁴g/cm²、ヤング率が１．４９×１０⁶〜１．５７
×１０⁷dyn/cm²を示し、プローブ用接触媒体として使用
するのに十分な強度を有するものである。

【００４２】また、本発明に関わる超音波診断装置のプ
ローブ用接触媒体は、上記に加えて原材料となるβ−
１，３グルカンから夾雑タンパク質が除去されているの
で、従来のβ−１，３グルカンを原材料にした超音波診
断装置のプローブ用接触媒体よりも、一層安全性に優れ
る同プローブ用接触媒体である。

【００４３】

【実施例】以下、実施例により本発明をより具体的に説
明するが、この実施例により本発明の技術的範囲が限定
的に解釈されるものではない。β−１，３グルカン中のタンパク質の定量法まず、以下に記載する各実施例等により得られたβ−
１，３グルカンを主成分とするゲルからなる超音波診断
装置のプローブ用接触媒体中における夾雑タンパク質の
定量方法について説明する。本実施例においては、Ｌｏ
ｗｒｙ法の変法を用いてかかるタンパク質定量を行っ
た。

【００４４】すなわち、２％炭酸ナトリウム水溶液を試
薬（１）とし，０．５％硫酸銅（２価）・５水和物の１
％クエン酸水溶液を試薬（２）とし，試薬（１）：試薬
（２）の５０：１混合液を試薬（３）として、市販のFo
lin phenol溶液（和光純薬社製）１／２希釈液を試薬
（４）とした。また、試料（β−１，３グルカン）１０
mgを１mlの１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液に溶解して、こ
れを水で５倍に希釈した。次いで、この希釈液１mlに試
薬（３）を２．０ml添加して、室温で１５分３０秒放置
した。そして、さらに試薬（４）をこれに０．２ml添加
して、室温で３０分放置した。

【００４５】この３０分の放置終了後、分光光度計（日
本分光社製 UbestＶ-550）により、波長６６０nmで吸光
度測定を行った。なお、スタンダードはウシ血清アルブ
ミンとし、０．０１ppm 〜５ppm の濃度で検量線を作成
し、タンパク質の濃度を算出した。

【００４６】この方法により、下記実施例に用いたカー
ドラン粉末（武田薬品工業製）中の夾雑タンパク質量を
定量したところ、０．８％であった。また、同じくレン
チナン粉末（味の素製）においては、１．２％であっ
た。さらに、同じくスクレログルカン粉末（三榮源エフ
エフアイ製）においては、０．９％であった。

【００４７】〔実施例１〕 β−１，３グルカンを用い
たゲルの調製（１）カードラン粉末（武田薬品工業製）２７．５g に、ジメ
チルスルホキシド(250ml) −エタノール（250ml)の混合
液を加え、室温で３０分間超音波処理（20KHz）を行っ
た。次いで、カードランを濾取し、さらにこの濾取した
カードランにエタノール(500ml) を加えて、上と同様の
超音波処理を３０分間行ってカードランを濾取し、さら
にこの再び濾取したカードランにエタノール（475 ml）
−水（15ml) −５Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（10ml) を
添加して、上と同様の超音波処理を３０分間行い、これ
を１時間放置した後、上清を除去した。次いで、系に注
射用水（150ml)を加え、再び上と同様の超音波処理を３
０分間行った後に上清を除去した。この操作をさらに２
回繰り返した後、沈澱物としてのカードランを採取し、
上記定量法により夾雑タンパク質の定量を行ったとこ
ろ、タンパク質濃度は０．０１％以下であった。

【００４８】この精製カードランに５Ｎ水酸化ナトリウ
ム水溶液２４mlと注射用水５１０mlの混合液を加え、こ
の精製カードランを溶解した。これに５Ｎ塩酸５０mlを
加えてｐＨを７．０に調整し、ホモジナイザー（日本精
機製；パワーホモジナイザーＰＭ１）で１０分間攪拌し
た。このように調製した精製カードラン分散液を真空下
で十分脱気後、これを型に注入し、８０℃で２０分間の
加熱をしてゲル化を行った。次いで、このゲルを冷却し
て型から取り出した後、オートクレーブで１２１℃，２
０分間の加熱を行い、目的とするゲルを得た。

【００４９】〔実施例２〕 β−１，３グルカンを用い
たゲルの調製（２）レンチナン粉末（味の素製）２７．５g にジメチルスル
ホキシド(250ml) −メタノール（250ml)の混合液を加
え、室温で３０分間超音波処理（20KHz ）を行った。次
いで、レンチナンを濾取し、さらにこの濾取したレンチ
ナンにエタノール(500ml) を加えて、上と同様の超音波
処理を３０分間行ってレンチナンを濾取し、さらにこの
再び濾取したレンチナンにエタノール（475 ml）−水
（10ml) −５Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（10ml) を添加
して、上と同様の超音波処理を３０分間行い、これを１
時間放置した後、上清を除去した。

【００５０】次いで、系に注射用水（150ml)を加え、再
び上と同様の超音波処理を３０分間行った後に上清を除
去した。この操作をさらに２回繰り返した後、沈澱物と
してのレンチナンを採取し、上記定量法により夾雑タン
パク質の定量を行ったところ、タンパク質濃度は０．０
１％以下であった。

【００５１】〔実施例３〕 β−１，３グルカンを用い
たゲルの調製（３）スクレログルカン粉末（三榮源エフエフアイ製）２７．
５g にジメチルスルホキシド(250ml) −アセトン（250m
l)の混合液を加え、室温で３０分間超音波処理を行った
（20KHz ）。次いで、スクレログルカンを濾取し、さら
にこの濾取したスクレログルカンにエタノール(500ml)
を加えて、上と同様の超音波処理を３０分間行ってスク
レログルカンを濾取し、さらにこの再び濾取したスクレ
ログルカンにエタノール（475 ml）−水（10ml) −５Ｎ
水酸化ナトリウム水溶液（10ml)を添加して、上と同様
の超音波処理を３０分間行い、これを１時間放置した
後、上清を除去した。

【００５２】次いで、系に注射用水（150ml)を加え、再
び上と同様の超音波処理を３０分間行った後に上清を除
去した。この操作をさらに２回繰り返した後、沈澱物と
してのスクレログルカンを採取し、上記定量法により夾
雑タンパク質の定量を行ったところ、タンパク質濃度は
０．０１％以下であった。

【００５３】これらの実施例１〜３の結果より、本発明
においてはβ−１，３グルカン中の夾雑タンパク質を上
記定量方法における計測限界ともいえる０．０１％以下
まで除去できることが明らかになり、本発明において提
供される精製β−１，３グルカンは極めて夾雑タンパク
質除去率が高く、超音波診断装置のプローブ用接触媒体
の素材として有用であることが明らかになった。

【００５４】〔実施例４〕得られたゲルのプローブ用接
触媒体としての性質の検討レオメーター（不動工業（株）製；NRM-2010J-CW）で、
実施例１において得られたゲルの物性を測定したとこ
ろ、破断強度が２．３×１０００g ・f/cm²、ヤング率
が５．０×１０⁶dyn/cm²を示した。また、このゲルに
ついて音響特性を測定した結果、音速が１４９５m/s 、
減衰率は１．１２×１０^-1dB/MHz・cmであった。

【００５５】次に、このゲルを接触媒体として超音波診
断装置〔ＳＳＤ−２０００（アロカ社製）〕のプローブ
と皮膚との間に置き、ヒトの頸部の画像診断を行ったと
ころ、ゲルをプローブと皮膚との間に介在させない場合
に比べて、明らかに鮮明な画像が得られた。また、この
ゲルの安全性を確認するため、ウサギを用いたＩＳＯ規
格（９００１）に準拠した埋植毒性試験を行ったとこ
ろ、埋植試験規格に適合した。

【００５６】このように、本発明精製β−１，３グルカ
ンを原材料とするゲルは、物性及び音響特性において超
音波診断装置のプローブ用接触媒体として優れているこ
とは勿論、安全性においても極めて優れていることが判
明した。

【００５７】

【発明の効果】本発明により、夾雑タンパク質が簡便か
つ効率的に除去されたβ−１，３グルカンが提供され、
さらにこの精製β−１，３グルカンを主成分とするゲル
からなる、物理的特性及び安全性に優れた超音波診断装
置のプローブ用接触媒体が提供される。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】少なくともジメチルスルホキシドを含む有
機溶媒の混合溶液中で超音波処理を施すことにより、夾
雑タンパク質を除去してなるβ−１，３グルカン。
【請求項２】請求項１記載のβ−１，３グルカンから、
さらにエンドトキシンを除去してなるβ−１，３グルカ
ン。
【請求項３】請求項１又は請求項２記載のβ−１，３グ
ルカンを主成分とするゲルからなる、超音波診断装置の
プローブ用接触媒体。