JPH11501324A

JPH11501324A - コルヒチン誘導体、それらの使用およびそれらを含有する製剤

Info

Publication number: JPH11501324A
Application number: JP9504160A
Authority: JP
Inventors: ボンバルデリ，エツイオ; ガベツタ，ブルノ
Original assignee: インデナ・ソチエタ・ペル・アチオニ
Priority date: 1995-06-27
Filing date: 1996-06-21
Publication date: 1999-02-02
Anticipated expiration: 2016-06-21
Also published as: HK1009138A1; ITMI951367A0; ATE212033T1; KR100379991B1; HUP9901685A2; ES2171691T3; NO976001L; PT840738E; DE69618600T2; US5880160A; RU2163241C2; AU717082B2; AU6414696A; DE69618600D1; IT1276996B1; ITMI951367A1; EP0840738A1; CA2225284C; CA2225284A1; WO1997001570A1

Abstract

(57)【要約】本発明は抗増殖性、抗腫瘍性、抗炎症性および筋肉弛緩性活性を有する新規なコルヒチン誘導体に関する。前記誘導体には、そのままで、または芳香族環のＣ₃およびトロポロン環のＣ₁₀のヒドロキシルを誘導体化した後に使用するための新規なコルヒチン窒素アミドが含まれる。これらの新規な化合物は、ヒト腫瘍細胞株に対して、コルヒチンと同等の細胞毒性を有するが、通常の抗カビ剤に対して抵抗性の細胞には、後者（コルヒチン）と比較してさらにもっと活性である。本化合物は、静脈内的、経口的および局所的投与に有用である医薬製剤中に含まれることができる。

Description

【発明の詳細な説明】コルヒチン誘導体、それらの使用およびそれらを含有する製剤本発明は、抗増殖性、抗腫瘍性、抗炎症性および筋肉弛緩性活性を有する新規なコルヒチン誘導体、それらの製造方法およびそれらを含有する医薬組成物に関する。コルヒチンは、痛風の処置のための治療において、たとえその毒性のために短時間だけ使用すべきものであっても、非常に長期間広く使用されている既知のプソイド−アルカロイドである。すなわち、コルヒチンは、痛風の病理に非常に迅速かつ特異的に作用する。コルヒチン誘導体、即ちチオコルヒコシドは、拘縮の治療および骨格筋の炎症性病態に広く使用されている。さらに、コルヒチンは、細胞分裂中の有糸分裂紡錘体の形成を遮断して作用する極めて強力な抗カビ剤であり；この後者の観点は、いずれの抗腫瘍活性についても徹底的に研究され、そして多数のコリヒチン誘導体がこの目的のために製造された。コルヒチン自体および多数の誘導体は、それらの高い毒性のために、それ故それらの許容できない危険／利益比のために、臨床的には使用することができなかった。ただ一種のコルヒチン誘導体、デメコルヒンは、白血病の幾つかの形態の治療のために腫瘍学ではある程度使用されている。本発明の生成物は、それらの高い活性、低い毒性および高い治療指数において、従来技術のものとは異なる。さらに詳細には、抗腫瘍分野においては、通常の細胞毒性の他に、既知の通常の抗カビ性薬物に耐性の細胞株を標的とする細胞毒性を有する生成物の探索に、研究の焦点がしぼられている。本発明の誘導体は、式（Ｉ）（式中、Ｒはメトキシルまたはチオメチル基であり；Ｒ₁はヒドロキシ；Ｂ−Ｄ −グルコピラノシルオキシ残基；ヒドロキシル４′および６′で脂肪族または芳香族アルデヒドによりケタール化されたＢ−Ｄ−グルコピラノシルオキシ残基；６−デオキシ−ガラクトピラノシルオキシ残基；Ｃ₁₆〜Ｃ₂₂ポリ不飽和脂肪酸のアシルオキシ基；飽和または不飽和の直鎖状、分岐鎖状もしくは環状のＯ−アルキルＣ₁〜Ｃ₆であり；そしてＲ₂はＣ₁〜Ｃ₆ハロアルキル基である）を有する。式（Ｉ）で示される特に好適な化合物は、Ｒ₁がメトキシル基；４′および６ ′ヒドロキシルで、芳香族または脂肪族アルデヒド、例えば、２−もしくは３− チエナールまたはキシメノイルオキシ基により場合によりケタール化されたＢ− Ｄ−グルコピラニルオキシ残基である化合物である。Ｒ₂は好適には、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチルまたはヘプタフルオロプロピルである。化合物Ｉは、天然化合物コルヒチンまたはチオコルヒチン（式（Ｉ）、それぞれＲ₁＝−ＯＣＨ₃、Ｒ₂＝ＣＨ₃、Ｒ＝−ＯＣＨ₃または−ＳＣＨ₃）からかまたは３−位置のヒドロキシルでグルコシル化されたそれらの対応する誘導体からかまたはそれらのＮ−ホルミル−Ｎ−デアセチル−誘導体から出発して製造される。前記天然化合物を強鉱酸の水溶液で加水分解すると、反応温度および反応時間を変えて、対応するＮ−デアセチルおよび３−デメチル−Ｎ−デアセチル誘導体を選択的に得ることができ、次いで３−位置のヒドロキシルでＮ−アシル化およびアルキル化もしくはアシル化の通常の反応を受けることができる。チオコルヒチンの場合、ハロゲン化水素酸またはさらに好適には硫酸（２０％Ｈ₂ＳＯ₄−１２０時間）による加水分解によって、Ｎ−デアセチルチオコリヒチンおよび３−デメチル−Ｎ−デアセチルチオコルヒチンが殆ど定量的収率で得られる。本発明の化合物は顕著な抗腫瘍活性を有する。表には、培養された乳房腫瘍の体外移植組織に対する本発明の化合物の抗有糸分裂活性が、コルヒチンおよびタキソール（Ｔａｘｏｌ）と比較して示される。この表によって、本発明の化合物は、現今では細胞毒性薬物の主要な標的と考えられている抵抗性細胞株に対して顕著な利点を有することがで示された。さらに、本発明による生成物は抗炎症性および筋肉弛緩性活性を有し、そして記載の病理のための薬物の投与に有用な医薬製剤中に含まれることができる。静脈内的、経口的、経皮的、経外表皮的（ｅｐｉｃｕｔａｎｅｏｕｓ）投与のための製剤は便宜的に製造することができる。前記製剤を製造するのに有用な賦形剤の中で、天然および合成リン脂質が、非経口的、静脈内的および／または局所的経路のためのリポソーム形態を製造するのに特に有用であることが分かった。同一の製剤は、皮膚の上皮腫の局所治療および乾癬のような皮膚の高増殖性病態に有用であることが分かった。特定の抗腫瘍分野では、リポソーム形態の薬剤の投与を可能にするリン脂質の外に、ポリエトキシ化ヒマシ油、または活性成分と相乗効果的に作用するポリソルベートのような幾つかの界面活性剤が特に有用であることが分かった。好適には活性主成分は水中に溶解するまで超微粉砕される。腫瘍学では、生成物は１〜１００ｍｇ／ｍ²の投与量で使用される。以下の実施例は本発明についてさらに説明するものである。実施例Ｉ− Ｎ−デアセチル−Ｎ−ペンタフルオロ−プロピオニル−チオコルヒチン（化合物Ｉ；Ｒ＝−ＳＣＨ₃、Ｒ₁＝−ＣＨ₃、Ｒ₂＝−ＣＦ₂−ＣＦ₃）の製造。２０ｇのチオコルヒチンを３００ｍｌの２０％硫酸中に溶解し、窒素雰囲気下１００℃で３６時間加熱し；反応混合物をｐＨ８にアルカリ性化して、１５ｇのＮ−デアセチル−チオコルヒチンを分離する。この生成物をアセトン中に溶解し、無水Ｎａ₂ＣＯ₃の存在下で、１．５当量のペルフルオロプロピオン酸無水物と強い撹拌下で反応させ；２時間後、反応混合物を濾過し、溶媒を蒸発し去る。油状残渣をメタノールに溶かし、それからＮ− デアセチル−Ｎ−ペンタフルオロプロピオニルチオコルヒチンを結晶化によって分離する。実施例ＩＩ− Ｎ−デアセチル−Ｎ−ペンタフルオロプロピオニル−３−Ｏ−キシメノイル−チオコルヒチン（化合物ＩＩ；Ｒ＝−ＳＣＨ₃、Ｒ₁＝−Ｏ−キシメノイル、Ｒ₂＝−ＣＦ₂−ＣＦ₃）の製造。２０ｇのチオコルヒコシドを３００ｍｌの２０％硫酸中に溶解し、全量を窒素雰囲気下１００℃で３６時間加熱し；反応混合物から１２ｇのＮ−デアセチル− ３−Ｏ−デメチルチオコルヒチンを分離する。この生成物をアセトン中に溶解し、無水Ｎａ₂ＣＯ₃の存在下で、３当量のペルフルオロプロピオン酸無水物と強い撹拌下で反応させ；２時間後、反応混合物を濾過し、溶媒および反応性過剰物を真空下で除去する。Ｎ−デアセチル−Ｎ−ペンタフルオロプロピオニル−３−Ｏ−デメチル−３−Ｏ−ペンタフルオロプロピオナートよりなる残渣を、ＮＨ₄Ｃｌを含有するメタノールに溶かし、薄層クロマトグラフィー（トルエン／酢酸エチル１：１）によってフェノールエステルの加水分解を検査し；溶媒を真空下で蒸発乾固し、残渣をアセトン中に溶解し、不溶性物を濾別する。アセトン溶液を乾固まで濃縮し、残渣を１００ｍｌのピリジンに溶かし；この溶液を０℃に冷却し、２当量のキシメニン酸塩化物を強い撹拌下で添加する。反応混合物を一晩放置し、次いで５００ｇの氷中に注ぎ込む。生成した水性懸濁液を５００ｍｌの塩化メチレンで３回抽出する。有機層を水で洗浄し、次いで希塩酸溶液で洗浄し、再び水で洗浄する。有機層をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥し、乾固まで濃縮する。残渣を、酢酸エチル／イソプロピルエーテル混合物から結晶化し、２７ｇのＮ−デアセチル−Ｎ−ペンタフルオロプロピオニル−３ −Ｏ−キシメノイル−チオコルヒチンを得る。実施例ＩＩＩ− Ｎ−デアセチル−Ｎ−ペンタフルオロプロピオニル−３−Ｏ −デメチル−３−Ｏ−シクロペンテニル−チオコルヒチン（化合物ＩＩＩ；Ｒ＝ −ＳＣＨ₃、Ｒ₁＝−Ｏ−シクロペンテニル、Ｒ₂＝−ＣＦ₂−ＣＦ₃）の製造。２０ｇのチオコルヒコシドを３００ｍｌの２０％硫酸中に溶解し、混合物を窒素雰囲気下１００℃で３６時間加熱し；反応混合物から１２ｇのＮ−デアセチル −３−Ｏ−デメチルチオコルヒチンを分離する。この生成物を無水Ｎａ₂ＣＯ₃の存在下でアセトン中に溶解し、３当量のペンタフルオロプロピオン酸無水物と強い撹拌下で反応させ；２時間後、反応混合物を濾過し、溶媒および反応性過剰物を真空下で除去する。Ｎ−デアセチル−Ｎ−ペンタフルオロ−プロピオニル−３−Ｏ−デメチル−３−Ｏ−ペンタフルオロプロピオナートよりなる残渣を、ＮＨ₄Ｃｌを含有するメタノールに溶かし、薄層クロマトグラフィー（トルエン／酢酸エチル１：１）によってフェノールエステルの加水分解を検査し；溶媒を真空下で蒸発乾固し、そして残渣をアセトン中に溶解し、不溶性物を濾別する。アセトン溶液にＮａ₂ＣＯ₃および出発生成物に関して５当量のシクロペンテニルブロミドを添加する。薄層クロマトグラフィーによってアルキル化を検査しながら、反応物を６時間撹拌する。反応が完結したとき、塩を濾別し、溶媒を真空下で留去する。残渣を、溶離剤として酢酸エチルを使用するシリカゲルカラム上でクロマトグラフィー処理する。所望の生成物を含有するフラクションを収集し、溶媒を除去し、生成物をアセトン／ヘキサンから晶出させる。９．２ｇのＮ−デアセチル−Ｎ−ペンタフルオロプロピオニル−３ −Ｏ−シクロペンテニル−チオコルヒチンを得る。実施例ＩＶ− Ｎ−デアセチル−Ｎ−ヘプタフルオロブチロイル−チオコルヒチン（化合物ＩＶ；Ｒ＝−ＳＣＨ₃、Ｒ₁＝−ＯＣＨ₃、Ｒ₂＝−ＣＦ₂−ＣＦ₂−ＣＦ₃ ）の製造。１０ｇのＮ−デアセチルチオコルヒチンを、Ｎａ₂ＣＯ₃の存在下で、１５０ｍｌの無水アセトン中に溶解し、１．５当量のヘプタフルオロブチロイル無水物で室温で処理する。Ｎａ₂ＣＯ₃および溶媒を除去し、残渣をイソプロピルエーテルで精製して、１２．５ｇのＮ−デアセチル −Ｎ−ヘプタフルオロブチロイル−チオコルヒチンを得る。実施例Ｖ− Ｎ−デアセチル−Ｎ−ペンタフルオロプロピオニル−３−Ｏ−イソプロピル−チオコルヒチン（Ｒ＝−ＳＣＨ₃、Ｒ₁＝−Ｏ−イソプロピル、Ｒ₂＝ −ＣＦ₂−ＣＦ₃）の製造。この誘導体の製造の場合、実施例ＩＩＩの操作法を、試薬としてイソプロピルブロミドを使用して反復する。粗反応生成物をシリカゲル上で精製しそして結晶化した後、所望の分子と一致する分光学的特性を有する、７．６ｇのＮ−デアセチル−Ｎ−ペンタフルオロプロピオニル−３−Ｏ−イソプロピル−チオコルヒチンを得る。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】１９９７年６月２５日【補正内容】請求の範囲１．式（Ｉ）（式中、Ｒはメトキシルまたはチオメチル基であり；Ｒ₁はヒドロキシ；Ｂ−Ｄ −グルコピラノシルオキシ残基；４′および６′ヒドロキシルで脂肪族または芳香族アルデヒドによりケタール化されたＢ−Ｄ−グルコピラノシルオキシ残基；６−デオキシ−ガラクトピラノシルオキシ残基；Ｃ₁₆〜Ｃ₂₂ポリ不飽和脂肪酸のアシルオキシ基；飽和または不飽和の直鎖状、分岐鎖状もしくは環状Ｏ−アルキルＣ₁〜Ｃ₆であり；そしてＲ₂はＣ₁〜Ｃ₆ハロアルキル基であるが、ただしＲ₂がＣ₁ハロアルキル基の場合、Ｒ₁はヒドロキシおよびメトキシと異なることを条件とする）で示される化合物。２．Ｒ₁がメトキシル基；４′および６′ヒドロキシルで２−または３−チエナールおよびキシメノイルオキシ基から選ばれる脂肪族または芳香族アルデヒドにより場合によりケタール化されたＢ−Ｄ−グルコピラニルオキシ残基である請求の範囲１に記載の化合物。３．Ｎ−デアセチル−Ｎ−ペンタフルオロ−プロピオニル−チオコルヒチン；Ｎ−デアセチル−Ｎ−ペンタフルオロ−プロピオニル−３−Ｏ−キシメノイル−チオコルヒチン；Ｎ−デアセチル−Ｎ−ペンタフルオロプロピオニル− ３−Ｏ−デメチル−３−Ｏ−シクロペンテニル−チオコルヒチン；またはＮ−デアセチル−Ｎ−ヘプタフルオロ−ブチロイル−チオコルヒチン；Ｎ−デアセチル −Ｎ−ペンタフルオロプロピオニル−３−Ｏ−イソプロピル−チオコルヒチンから選ばれる請求の範囲１に記載の化合物。４．活性成分として、適切な担体または賦形剤と混合した、請求の範囲１に記載の化合物を含有する医薬組成物。５．活性成分がリポソームに製剤化される請求の範囲４に記載の組成物。６．ポリエトキシル化ヒマシ油およびポリソルベートから選ばれる界面活性剤が使用される請求の範囲４に記載の組成物。７．抗腫瘍性薬、抗増殖性、抗炎症および筋肉弛緩性薬の製造のための請求の範囲１に記載の化合物の使用。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＣ０７Ｈ 15/248 Ｃ０７Ｈ 15/248 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ

Claims

【特許請求の範囲】１．式（Ｉ）（式中、Ｒはメトキシルまたはチオメチル基であり；Ｒ₁はヒドロキシ；Ｂ−Ｄ −グルコピラノシルオキシ残基；４′および６′ヒドロキシルで脂肪族または芳香族アルデヒドによりケタール化されたＢ−Ｄ−グルコピラノシルオキシ残基；６−デオキシ−ガラクトピラノシルオキシ残基；Ｃ₁₆〜Ｃ₂₂ポリ不飽和脂肪酸のアシルオキシ基；飽和または不飽和の直鎖状、分岐鎖状もしくは環状Ｏ−アルキルＣ₁〜Ｃ₆であり；そしてＲ₂はＣ₁〜Ｃ₆ハロアルキル基である）で示される化合物。２．Ｒ₁がメトキシル基；４′および６′ヒドロキシルで２−または３−チエナールおよびキシメノイルオキシ基から選ばれる脂肪族または芳香族アルデヒドにより場合によりケタール化されたＢ−Ｄ−グルコピラニルオキシ残基である請求の範囲１に記載の化合物。３．Ｎ−デアセチル−Ｎ−ペンタフルオロ−プロピオニル−チオコルヒチン；Ｎ−デアセチル−Ｎ−ペンタフルオロ−プロピオニル−３−Ｏ−キシメノイル− チオコルヒチン；Ｎ−デアセチル−Ｎ−ペンタフルオロプロピオニル−３−Ｏ−デメチル−３−Ｏ−シクロペンテニル−チオコルヒチン；Ｎ−デアセチル−Ｎ−ヘプタフルオロ−ブチロイル−チオコルヒチン；またはＮ−デアセチル−Ｎ−ペンタフルオロプロピオニル−３−Ｏ−イソプロピル− チオコルヒチンから選ばれる請求の範囲1に記載の化合物。４．活性成分として、適切な担体または賦形剤と混合した、請求の範囲１に記載の化合物を含有する医薬組成物。５．活性成分がリポソームに製剤化される請求の範囲４に記載の組成物。６．ポリエトキシル化ヒマシ油およびポリソルベートから選ばれる界面活性剤が使用される請求の範囲４に記載の組成物。７．抗腫瘍性薬、抗増殖性、抗炎症および筋肉弛緩性薬の製造のための請求の範囲１に記載の化合物の使用。