JPH11504647A

JPH11504647A - 抗生物質

Info

Publication number: JPH11504647A
Application number: JP8533895A
Authority: JP
Inventors: ボロフスキ，エドヴァルト; グジボフスカ，ヨランタ; ソヴィンスキ，パヴェウ; グミエニアク，イェジ; チェルヴィンスキ，アンヂュジェイ
Original assignee: ブリティッシュ・テクノロジー・グループ・リミテッド
Priority date: 1995-05-13
Filing date: 1996-05-10
Publication date: 1999-04-27
Also published as: IL118233A0; PL308583A1; NZ307592A; KR19990014843A; AU716883B2; AU5698396A; ZA963787B; EP0825995A1; PL180253B1; WO1996035701A1; CA2220771A1; MX9708637A

Abstract

(57)【要約】本発明は、一般式（１ａ）（式中、Ｍはポリエンマクロライド抗生物質残基を表わし、Ｒは糖残基の可変部分を表わし、かつＲ¹およびＲ²はそれぞれＣ_1-4アルキル基を表わす）のポリエンマクロライド群抗真菌性抗生物質のアルキルエステルのＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体、一般式（２ａ）（式中、Ｒ，Ｒ¹，Ｒ²およびＭは前記の通りで、Ａは有機または無機酸のアニオンを表わす）の塩類に関する。式（１ｂ）および（２ｂ）（式中、Ｎ−アルキルおよびアルキルエステル基はメチル基で表わされる）の化合物はとくに興味がある。本発明は、また、該化合物の調製法、該化合物を含有する組成物、および治療ならびにヒトおよび動物の外因性および内因性真菌感染症の処置におけるその使用にも関する。

Description

【発明の詳細な説明】抗生物質本発明は、一般式１（ａ）（式中、Ｍはポリエンマクロライド抗生物質残基を表わし、Ｒは糖残基の可変部分を表わし、そして同一かまたは異なることができるＲ¹およびＲ²はそれぞれＣ_1-4アルキル基を表わす）のポリエンマクロライド群抗真菌性抗生物質のアルキルエステルのＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体、一般式２（ａ）（式中、Ｍ，Ｒ，Ｒ¹およびＲ²は前記同様で、Ａは無機または有機酸のアニオンを表わす）によって表わされる化合物１（ａ）の塩類、一般式１（ａ）および２（ａ）の化合物の調製法ならびに薬剤におけるその使用に関する。とくに興味ある化合物は、一般式１（ｂ）（式中、Ｍはポリエンマクロライド抗生物質残基を表わし、Ｒは糖残基の可変部分を表わす）のポリエンマクロライド群抗真菌性抗生物質のメチルエステルのＮ−メチル−Ｎ−グリコシル誘導体および一般式２（ｂ）（式中、Ｍはポリエンマクロライド抗生物質残基を表わし、Ｒは糖残基の可変部分を表わし、Ａは無機または有機酸のアニオンを表わす）の、その塩類を含み、その調製法および薬剤としての使用にも興味がある。出発原料の抗生物質のアミノ基をアルキル基で置換するポリエンマクロライド群抗生物質のＮ−アルキル誘導体は公知である。出発原料の抗生物質のアミノ基を糖残基で置換するポリエンマクロライドのＮ −グリコシル誘導体も公知である(L.Falkowski、J.Golik、P.Kolodziejczyk、J.P awlak、J.Zielinski、T.Ziminski、E.Borowski の J.Antibiotics 28、244（197 5）；L.Falkowski、J.Pawlak、J.Golik、P.Kolodziejczyk、B.Stefanska、E.Byl ec、E.Borowski の Acta Polon．Pharm．37、517(1980))。これら誘導体の調製に用いられる糖類の例にはＤ−グルコース、Ｄ−マンノース、Ｌ−ラムノース、Ｄ −リボース、およびマルトースがある。ポリエンマクロライドを適当な糖と反応させると同時にアマドリ転位が起って、対応するＮ−グリコシル誘導体を生成する。該化合物は出発原料の抗生物質と同様の生物学的活性を示し、水溶性塩を生じる。しかし、それに付随する高毒性は顕著な欠点を示す。 L．Falkowski、J．Golik、P．Kolodziejczyk、J．Pawlak、J．Zielinski、T． Ziminski、E．BorowskiのJ．Antibiotics 28、244（1975）；L．Falkowski、J． Pawlak、J．Golik、P．Kolodziejczyk、B．Stefanska、E．Bylec、E．Borowski のActa Polon．Pharm．37、517(1980)の論文から出発原料の抗生物質のアミノ基をＤ−グルコース、Ｄ−マンノース、Ｌ−ラムノース、Ｄ−リボース、マルトースのような糖残基で置換するポリエンマクロライドのＮ−グリコシル誘導体が公知である。該化合物は、ポリエンマクロライドと前記の糖類との反応および同時のアマドリ転位によって調製される。該化合物は出発原料の抗生物質と同様の生物学的活性を示し、水溶性塩を生じる。しかし、該化合物は著しい毒性を示す。出発原料の抗生物質のアミノ基を完全にメチル化して第四級アンモニウム塩とするポリエンマクロライドメチルエステルのトリメチルアンモニウム誘導体も公知である（L．Falkowski、 B．Stefanska、 J．Zielinski、 E．Bylec、 J．Gol ik、P．Kolodziejczyk、 E．Borowski の J．Antibiotics 32、1080（1979））。該化合物は、出発原料の抗生物質のジメチル硫酸による完全メチル化によって調製される。該誘導体の有利な性質には水への溶解度、出発原料の抗生物質と同様の抗真菌性活性がある。別の種類の誘導体は、L．Falkowski、B．Stefanska、J．Zielinski、E．Bylec 、J．Golik、P．Kolodziejczyk、E．Borowskiの論文のJ.Antibiotics 32 1080(1 979)により公知のポリエンマクロライドメチルエステルのトリメチルアンモニウム誘導体であって、該化合物では、抗生物質のメチルエステルのアミノ基は完全にメチル化されて第四級アンモニウム塩となっている。該化合物は、出発原料の抗生物質のジメチル硫酸による完全メチル化によって調製される。該誘導体は水に可溶で、出発原料の抗生物質の活性と同様の抗真菌性活性を特徴とするが、極めて毒性があって、不安定である。他のタイプのＮ−アルキル誘導体には、抗生物質とＮ−エチルマレイミド、Ｎ，Ｎ'−ヘキサメチレンジマレイミド、Ｎ−(３−ジメチルアミノプロピル)マレイミドのようなＮ置換マレイミドとのマイケル付加反応によって生成するＮ−スクシンイミジル誘導体があり、該化合物はA．Czerwinski、W．A．Konig、T．Zie niawa、P．Sowinski、V．Sinnwell、S．Milewski、E．Borowskiの論文J.Antibio tics 44 979(1991)によって公知である。該化合物は出発原料の抗生物質よりも毒性が少ないが、抗真菌性活性が低下する。最後に、ポリエンマクロライドのＮ−アルキル誘導体の最後の公知の群は、抗生物質と、アセチルアセトン、エチルアセチルアセテート、ジメチルアセタールまたはジメチルホルムアミドとの反応によって生成するＮ−エナミンおよびアミジン誘導体であり、該化合物は、B．Stefanska、J．Zielinski、E．Borowski、L ．Falkowskiの論文Acta Polonica Phann．45、71（1988）に示されている。該誘導体は、出発原料の抗生物質と同様の抗真菌性活性および有機溶剤へのすぐれた溶解度を示すが、該化合物は依然として著しい毒性があり、また極めて不安定である。本発明者らは今やポリエンマクロライド抗生物質のアルキルエステルの混合Ｎ −アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体を調製した。これら混合化合物の調製法も確立した。これら新規化合物は、出発原料の抗生物質と同様のすぐれた抗真菌性活性を有し、酸と水に可溶な塩類を生成し、かつ著しく低毒性であることが判明した。従来技術のポリエンマクロライドのＮ−アルキル誘導体はすべて、かなりの欠点である高毒性を示すので、これらの性質は予期しないことである。本発明により含まれる化合物はこの欠点がない。現在まで、ポリエンマクロライド抗生物質のメチルエステルのＮ−メチル−Ｎ −グリコシル誘導体およびその調製法は知られていなかった。驚くべきことに、該化合物は、出発原料の抗生物質と同様の高抗真菌性活性を保持し、酸と水に可溶な塩を生成し、かつ驚異的に低毒性である。これら化合物は、従来技術のＮ− アルキル誘導体と同様の毒性を示さない。高毒性は以前に公知であったすべてのポリエンマクロライドＮ−アルキル誘導体の基本的な欠点をなすが、本発明により含まれる化合物はこの欠点がない。本発明の第１の態様は、一般式１（ａ）（式中、Ｍはポリエンマクロライド群抗生物質の残基を表わし、Ｒは抗生物質と単糖類またはオリゴ糖との反応によって生成する糖残基の一部分を表わし、そして同一かまたは異なることができるＲ¹ およびＲ²はそれぞれＣ_1-4アルキル基を表わす）のポリエンマクロライド群抗生物質のアルキルエステルのＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体を提供する。好ましくは、ポリエンマクロライド群抗生物質の残基ＭはアンホテリシンＢ、カンジジン、カンジドイン、カンジジニン、マイコヘプチン、ナイスタチン、ポリフンギン、オーレオファシン、バシジン、トリコマイシンまたはカンジシジンから選ばれる。糖残基Ｒが誘導される単糖類またはオリゴ糖はＤ−グルコース、またはＬ−グルコース、またはＤ−マンノース、またはＤ−ガラクトース、またはラクトース、またはマルトースから選ぶのが好ましい。ポリエンマクロライドを適当な糖と反応させると、同時にアマドリ転位が起って本発明の化合物に対するＮ−グリコシル前駆物質を生成する。本発明の好ましい態様は、一般式１（ｂ）（式中、Ｍはポリエンマクロライド群抗生物質の残基を表わし、Ｒは抗生物質と、単糖類またはオリゴ糖、好ましくはＤ−グルコース、もしくはＬ−グルコース、もしくはＤ−マンノース、もしくはＤ−ガラクトース、もしくはラクトース、もしくはマルトースとの反応、および同時のアマドリ転位によって生成する糖残基の一部分を表わす）によって示されるポリエンマクロライド群抗生物質のメチルエステルのＮ−メチル−Ｎ−グリコシル誘導体を含む。好ましい形態の本発明は、ポリエンマクロライド群抗生物質がアンホテリシンＢ、またはカンジジン、またはカンジドイン、またはカンジジニン、またはマイコヘプチン、またはナイスタチン、またはポリフンギン、またはオーレオファシン、またはバシジン、またはトリコマイシン、またはカンジシジンである誘導体に関する。本発明の第２の態様は、一般式２（ａ）（式中、Ｍ，Ｒ，Ｒ¹およびＲ²は前記本発明の第１の態様に示した通りであり、Ａは有機または無機酸のアニオンを表わす）のポリエンマクロライド群抗生物質のＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体の塩類を提供する。該塩は生理学的に許容できる塩であることが好ましく、またＡがＬ−アスパラギン酸のアニオンである化合物がとくに好ましい。Ｒ¹およびＲ²がメチル基である塩がとりわけ好ましい。本発明の第２の態様の好ましい実施態様は、一般式２（ｂ）（式中、Ｍはポリエンマクロライド群抗生物質の残基を表わし、Ｒは抗生物質と、単糖類またはオリゴ糖、好ましくＤ−グルコース、もしくはＬ−グルコース、もしくはＤ−マンノース、もしくはＤ−ガラクトース、もしくはラクトース、もしくはマルトースとの反応および同時のアマドリ転位によって生成する糖残基の一部分を表わし、かつＡは有機または無機酸のアニオンを表わす）によって示されるポリエンマクロライド群抗生物質のＮ−メチル−Ｎ−グリコシル誘導体の塩類を含む。好ましい形態の本発明は、ポリエンマクロライド群抗生物質がアンホテリシンＢ、またはカンジジン、またはカンジドイン、またはカンジジニン、またはマイコヘプチン、またはナイスタチン、またはポリフンギン、またはオーレオファシン、またはバシジン、またはトリコマイシン、またはカンジシジンである塩に関し、また好ましくＡがＬ−アスパラギン酸のアニオンに関する。本発明の第３の態様は、式１（ａ）（式中、Ｍ，Ｒ，Ｒ¹およびＲ²は本発明の第１および第２の態様でさきに述べた通りである）の化合物の調製法において、ポリエンマクロライド抗生物質を単糖類またはオリゴ糖と反応させ、該反応は同時にアマドリ転位を生起して、ポリエンマクロライド抗生物質のＮ−グリシジル誘導体を生成することを特徴とし、該アマドリ転位の生成物を単離し、該生成物をアルキル化剤で処理し、さらに該組成物を精製する工程を含む方法を含む。本発明の第３の態様の１つの実施態様では、アマドリ転位の生成物を、該転位が生起する溶液から沈澱させて、懸濁物として単離させる。アマドリ転位を維持させるにはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような有機溶剤が好ましい。アマドリ転位の生成物を沈澱させて懸濁液を生成させるにはジエチルエーテルのような有機溶剤が適切である。本発明の第３の態様の第２の実施態様では、アマドリ転位の生成物のアルキル化を低温で行う。−５℃ないし＋５℃の温度が好ましい。ジアゾアルカンのようなアルキル化剤を使用することができる。ジアゾメタンのエーテル溶液が好ましいアルキル化剤である。溶剤を除去し、ジエチルエーテルで沈澱させるとＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル粗製物を単離することができる。精製産物は、公知の精製工程を用いて単離することができる。本発明の第３の態様の好ましい実施態様は、一般式１（ｂ）（式中、Ｍはポリエンマクロライド群抗生物質の残基を表わし、Ｒは抗生物質と、単糖類またはオリゴ糖、好ましくはＤ−グルコース、もしくはＬ−グルコース、もしくはＤ−マンノース、もしくはＤ−ガラクトース、もしくはラクトース、もしくはマルトースとの反応、および同時のアマドリ転位によって生成する糖残基の一部分を表わす）によって示されるポリエンマクロライド群抗生物質のメチルエステルのＮ− メチル−Ｎ−グリコシル誘導体の調製法において、アマドリ転位によって得られるポリエンマクロライド群抗生物質のＮ−グリコシル誘導体を、有機溶剤、好ましくはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の該誘導体の溶液から溶剤、好ましくはジエチルエーテルで沈澱させて懸濁液に変え、次いで低温、好ましくは−５℃ないし＋５℃の範囲でジアゾメタンのエーテル溶液で処理し、撹拌し、溶剤の蒸発および濃溶液、好ましくは過剰のジエチルエーテルによる沈澱によって単離し、さらに粗製物を公知の方法で精製する方法を含む。本発明の第４の態様は、一般式２（ａ）（式中、Ｍ，Ｒ，Ｒ¹およびＲ²は本発明の第１、第２、および第３の態様についてさきに述べた通りである）のポリエンマクロライド抗生物質のアルキルエステルのＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体の塩類調製法において、本発明の第３の態様によって調製したＮ−アルキル −Ｎ−グリコシル誘導体を均質懸濁液を生成させるのに十分な水に懸濁させ、得られた懸濁液を酸性化して、生成物を単離させる工程を含む方法を提供する。ポリエンマクロライド抗生物質のメチルエステルのＮ−メチル−Ｎ−グリコシル誘導体の塩類の調製がとくに好ましい。懸濁液を酸性化するのに有機または無機酸を使用することができる。Ｌ−アスパラギン酸が好ましい。精製産物の単離は、有機溶液による粗製物の沈澱に続く補足的な適当な溶剤による洗浄および乾燥によって行うことができる。粗製物を沈澱させるのに用いる溶剤は水と混和できるものが好ましく、アセトンが好ましい。生成物を洗うのに用いる典型的な溶剤にはアセトンおよびジエチルエーテルがある。生成物は減圧で乾燥するのが好ましい。本発明の第４の態様の好ましい実施態様は、一般式２（ｂ）（式中、Ｍはポリエンマクロライド群抗生物質の残基を表わし、Ｒは抗生物質と、単糖類またはオリゴ糖、好ましくはＤ−グルコース、もしくはＬ−グルコース、もしくはＤ−マンノース、もしくはＤ−ガラクトース、もしくはラクトース、もしくはマルトースとの反応および同時のアマドリ転位によって生成する糖残基の一部分を表わす）によって示されるポリエンマクロライド群抗生物質のメチルエステルのＮ−メチル−Ｎ−グリコシル誘導体の塩類の調製法において、アマドリ転位によって得られるポリエンマクロライド群抗生物質のＮ−グリコシル誘導体を、有機溶剤、好ましくはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の該誘導体の溶液から、溶剤、好ましくはジエチルエーテルで沈澱させて懸濁液に変え、次いで低温、好ましくは− ５℃ないし＋５℃の範囲で、ジアゾメタンのエーテル溶液で処理し、撹拌し、さらに溶剤の蒸発および濃溶液、好ましくは過剰のジエチルエーテルによる沈澱により単離させ、さらに公知の方法により粗製物を精製し、次に固形物として得た誘導体を少量の水に懸濁させ、理論量の有機または無機酸を加え、次いで生成した溶液から水と混和する過剰の有機溶剤、好ましくはアセトンで生成物を沈澱させ、さらに固形物を、好ましくはアセトンで洗った後、好ましくはジエチルエーテルで洗い、好ましくは減圧で乾燥する方法を含む。本発明の第５の態様は、治療に使用する式１（ａ）のＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体またはその塩類を含む。本発明の第６の態様は、ヒトおよび動物の真菌感染症の処置法において、式１（ａ）のＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体またはその塩類を本明細書でさきに述べたようにヒトおよび動物への投与を含む方法を提供する。式１（ｂ）のＮ −メチル−Ｎ−グリコシル誘導体またはその塩類がとくに興味がある。本発明の第６の態様の第１の好ましい実施態様は、ヒトおよび動物の外因性および内因性真菌感染症の処置法において、一般式１（ｂ）（式中、Ｍはポリエンマクロライド群抗生物質の残基を表わし、Ｒは抗生物質と単糖類またはオリゴ糖、好ましくはＤ−グルコース、もしくはＬ−グルコース、もしくはＤ−マンノース、もしくはＤ−ガラクトース、もしくはラクトース、もしくはマルトースとの反応、および同時のアマドリ転位によって生成する糖残基の一部分を表わす）によって示されるポリエンマクロライド群抗生物質のメチルエステルのＮ−メチル −Ｎ− グリコシル誘導体を用いて該感染症を処置する方法を含む。本発明の第６の態様の第２の好ましい実施態様は、ヒトおよび動物の外因性および内因性真菌感染症の処置法において、一般式２（ｂ）（式中、Ｍはポリエンマクロライド群抗生物質の残基を表わし、Ｒは抗生物質と、単糖類またはオリゴ糖、好ましくはＤ−グルコース、もしくはＬ−グルコース、もしくはＤ−マンノース、もしくはＤ−ガラクトース、もしくはラクトース、もしくはマルトースとの反応、および同時のアマドリ転位によって生成する糖残基の一部分を表わし、Ａは有機または無機酸のアニオンを表わす）によって示されるポリエンマクロライド抗生物質のメチルエステルのＮ−メチル−Ｎ−グリコシル誘導体の塩類を使用して該感染症を処置する方法を含む。本発明の第７の態様は、さきに本明細書でさきに述べたように真菌感染症を処置するのに使用するための式１（ａ）のＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体またはその塩類を提供する。式１（ｂ）のＮ−メチル−Ｎ−グリコシル誘導体またはその塩類がとくに興味がある。処置が講じられる感染症は内因性であっても外因性であってもよい。投与の方式は感染症の性質による。したがって、本発明の化合物は静脈内、腹腔内、経口、局所、皮下、直腸または膣投与用に処方することができる。本発明の第８の態様は、真菌感染症の処置に使用するための式１（ａ）のＮ− アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体またはその塩、および生理学的に許容できるキャリヤーを含む組成物を提供する。Ｎ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体およびキャリヤーの性質は投与方式による。該組成物は、場合により、必要に応じて他の公知の抗真菌剤とともに、本発明による１種以上の化合物から処方することができる。式１（ｂ）のＮ−メチル−Ｎ−グリコシル誘導体またはその塩類を含有する組成物がとくに興味がある。本発明の第９の態様は、医薬用または獣医学用に処方される１種以上の式１（ａ）のＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体またはその塩類および生理学的に許容できるキャリヤーを含む単位用量形態を提供する。単位用量形態は、場合により他の公知の抗真菌剤とともに本発明による１種以上の化合物から処方することができる。本発明の前記態様の類推から式１（ｂ）のＮ−メチル−Ｎ−グリコシル誘導体を含有する単位用量形態がとくに興味がある。前述のように、単位用量形態の性質は投与方式による。典型的には、錠剤やカプセルは経口投与に適し、クリームやパッチは局所投与に適し、またペッサリーは直腸や膣投与に適する。本発明の第１０の態様は、真菌感染症の処置に用いるための薬剤調製への式１（ａ）のＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体またはその塩類の使用を提供する。Ｎ−アルキルおよびアルキルエステル置換基が共にメチル基である化合物がとくに興味がある。本発明の化合物について分光法を用いて行った構造決定は出発原料の抗生物質の安全性が反応中保持されることを示す。ポリエンマクロライド群抗生物質のメチルエステルのＮ−メチル−Ｎ−グリコシル誘導体の本発明による調製法は、出発原料の抗生物質の構造を変えることなく所望の生成物をもたらす。得られた化合物の構造は分光法を用いて確認された。式３のＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルの構造決定によって実証される。Ｎ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルの電子スペクトルは、アンホテリシンＢを意味する出発原料の抗生物質の電子スペクトルと同一であって、本発明による方法が、ポリエン発色団の分解をもたらさず、大きい吸光値（Ｅ^1% _1cm＝１３００（３８２ｎｍにおいて））は得られた生成物の高純度を確証することを示す。Ｎ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルの赤外吸収スペクトルは、１７３０ｃｍ^-1におけるエステルカルボニル基の伸縮振動に関連するバンドおよび遊離カルボキシル基のバンドの欠除を示し、これはカルボキシル基がメチルエステル基に完全に変ったことを意味する。Ｎ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルの構造に関する完全な情報は¹Ｈ（ＤＱＦ−ＣＯＳＹ、ＲＯＥＳＹ）、¹³Ｃ（ＤＥＰＴ）の核磁気共鳴スペクトル（ＮＭＲ）および化合物の式３への帰属を可能にしたヘテロ相関スペクトル（Varian ３００ＭＨＺスペクトロメーター）によってもたらされた。もっとも重要な¹Ｈおよび¹³Ｃの情報をそれぞれが表１および２に示す。アンホテリシンＢのアグリコンのＮＭＲデータは文献値（P．Sowinski、J．Pawlak、 E．Borowski、P．Gariboldiの Magn．Reson．Chem．30，275（1992））に完全に一致する。Ｎ−ＣＨ₃（δ＝２．３５ｐｐｍ）およびＨ−１”（２．３０および３.１５ｐｐｍ）の¹Ｈ化学シフト（ＤＭＳＯ／ＭｅＯＤ溶剤系中）はアミノ置換基の効果の特徴である。酸性化後、アミノ基のプロトン化によって(Ｈ−３'のδ が３.１９ｐｐｍに変る）、δはＮ−ＣＨ₃の２.９２ｐｐｍおよびＨ−１”の３. ６４に変る。これらのデータはプロトンＮＣＨ₃／Ｈ３'、ＮＣＨ₃／Ｈ２'、ＮＣＨ₃／Ｈ１”ｂおよび１″ａ／Ｈ３'間のＲＯＥ効果によっても支持される。結合定数およびＲＯＥは、以前に遊離アンホテリシンＢに認められたように、マイコサミン部分の⁴Ｃ₁立体配座を示す。表１はＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルの二糖類フラグメントの化学シフト¹ＨおよびＲＯＥ効果を示す。表２は、Ｎ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルの二糖類フラグメントの¹³Ｃ−ＮＭＲ化学シフトとＤ−フルクトースのデータとの比較を示す。表２からのフルクトシルフラグメントの¹³Ｃ−ＮＭＲデータをＤ−フルクトースの文献値と比較すると、糖置換基がピラノシド形であることがわかる。表３に示すカップリング定数の観察値は式４によって表わされるフルクトピラノシド環の舟形立体配座を立証する。該環のこのコンホメーションだけが測定したカップリング定数と完全に一致する。表３はＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルの二糖類フラグメントのプロトンのカップリング定数Ｊ_H,Hを示し（ピリジン−ｄ₅ ：メタノール−ｄ₄９：１）、密に結合したＨ３”−Ｈ６”スピン系のカップリング定数および化学シフトはコンピュータのシミュレーションによって反復改善した。示された結果は式４によって表わされるＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルのフルクトシルフラグメントの立体配座を立証する。他の、ポリエンマクロライド群抗生物質のメチルエステルのＮ−メチル−Ｎ− グリコシル誘導体は前記と同様の方法によって特徴づけた。これから、下記の非限定例を参照しながら本発明を述べる。本発明の範囲に入るさらに他の態様は当業者には明らかとなろう。抗真菌活性調製したすべての化合物について、生体外で抗真菌活性さらにまた毒性も測定した。Ｎ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルアスパラテートを指していう最良の性質を有する化合物の場合には、生体内の活性および毒性をも測定した。生体外の抗真菌活性ポリエンマクロライド処置の標準法に従って化合物の抗真菌活性を測定した。液状Sabouraud培地に１０⁴細胞/ｍｌの試験生物 Candida albicans ATCC 262778 を接種して供試抗生物質（無菌希釈液）とともに３０℃で２４時間培養した。対照としてアンホテリシンＢを使用した。化合物はＤＭＦに溶解し、溶液の適当な量を培地に加えた。成育阻止の程度を測定するのに濁度測定法（６６０ｎｍ）を適用した。真菌の成育を５０％阻止した抗生物質の濃度を投与量反応曲線から求めた。得られたＩＣ₅₀値は化合物の抗真菌活性を特徴づけた。生体外（ｉｎｖｉｔｒｏ）毒性動物細胞に対する生体外の化合物の毒性を、ヒトの赤血球の溶血度の測定により、ポリエンマクロライド処置の標準法を用いて測定した。新鮮なクエン酸添加のヒトの血液から単離したヒトの赤血球を冷塩水で２回洗った。細胞を塩水で２５０倍に希釈して、３７℃で３０分間平衡させた。赤血球試料を種々の濃度の抗生物質（ＤＭＦ中のベース溶液）とともに３７℃で３０分培養した。遠心分離後、溶液に遊離したヘモグロビンを測定することによって赤血球のリーシスを評価した。上澄液の光学濃度を５５０ｎｍで測定した。結果は、５０％の溶血が起る抗生物質の濃度としてＥＨ₅₀で表わした。ＥＨ₅₀の値は溶血度を抗生物質の投与量と関係づける曲線から読み取った。生体内（ｉｎｖｉｖｏ）毒性生体内毒性は、Ｎ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルＬ−アスパラテートについて、最大耐用量(ＭＴＤ)および急性毒性（ＬＤ₅₀ ）として求めた。ＭＴＤ用量を求めるために、化合物をグルコースの５％溶液に溶解し、Ｂａｌｂ／ｃマウスに単一および多重用量で静脈内および腹腔内に投与した。単一最大耐用量は静脈内投与の場合には１００ｍｇ／ｋｇ、腹腔内投与の場合には２００ｍｇ／ｋｇ以上であった。５日間で１００ｍｇ／ｋｇという腹腔内投与の多重最大耐用量は極めて多かった。このような用量の場合には、観察２０日間には毒性効果は認められなかった。Ｎ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルＬ−アスパラテートの急性毒性ＬＤ₅₀は平均重量が２０ｇのSwiss Websterのメスのマウスについて試験した。種々の用量の供試化合物および比較のため５％グルコースに溶解したファンギゾンの形のアンホテリシンＢをマウスの静脈内に投与した。溶液の投与量は０.５ｍlであった。対照として５％グルコース溶液の０.５ｍlをマウスに投与した。両方の配合物の各用量を５匹のマウスに投与した。マウスは７日間観察した。次に、マウスを殺して、若干の血清指数を求めた。対照と比較して、アスパラテートアミノトランスフェラーゼまたはクレアチニンのレベルが増大しないことが判明した。Ｎ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルＬ−アスパラテートの場合にはＬＤ₅₀が４００ｍｇ／ｋｇであることが認められ、一方ファンギゾン形のアンホテリシンＢの場合にはＬＤ₅₀が６ｍｇ／ｋｇであった。化学療法効果マウスの全身性カンジタ症モデルを用いてＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルＬ−アスパラテートの化学療法効果を調べた。 Candida albicans をSabouraudデキストロースブロス中で室温下で一夜間生育させた。真菌細胞を遠心分離し、０．９％塩化ナトリウム溶液で２回洗って、生理的食塩水中に懸濁させた。体重２５ｇのメスのSwiss Websterマウスに、０．９％塩化ナトリウム溶液０．２ｍl中の１０⁵個のCandida の細胞を静脈内に注射した。当初、感染症は全身的であったが、２ないし３日までには腎臓に局限された。無処置のマウスは通常感染後７日から１４日の間に死亡した。感染後３日間は２回、続けて５日間は５ないし６時間間隔でマウスの静脈内に処置した。配合物は５％グルコース溶液として投与した。マウスは感染の日から始めて５週間観察した。この時が過ぎると生存したマウスを殺して、腎臓を取り出し、滅菌水で均質にしてホモジネートをSabouraudデキトスロース寒天の上に置いて、Candidaの生育するコロニーを数えた。化学療法の有効性は、前記のテストで５０％のマウスの生存をもたらした投与量ｍｇ／ｋｇとして、また半分のマウスの腎臓からの Candidaのクリアランスに基づいて表わした。ＥＤ₅₀と呼ぶ投与量はJ.Hyg.27,49 3、(193 8)に示された方法を用いて算出した。Ｎ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルＬ−アスパラテートのＥＤ₅₀値は生存に基づくと２．３ｍｇ／ｋｇ、腎臓のクリアランスに基づくと６ｍｇ／ｋｇである。調製例ポリエンマクロライド群抗生物質のメチルエステルのＮ−メチル−Ｎ−グリコシル誘導体、その塩類、および調製法を下記実施例によって説明する。実施例Ｉ１ｇのアンホテリシンＢ（Ｅ^1% _1cm＝１３５０（３８２ｎｍ、ＭｅＯＨにおいて））を１５ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解し、０．３ｇのＤ−グルコースを加え、混合物を暗所内で、３７℃で４０時間撹拌した。次に、反応物を冷却し、過剰のジエチルエーテルで固形物を沈澱させた。固形物を遠心分離し、ジエチルエーテルで２回洗い、減圧乾燥した。過剰のグルコースを除くために固形物を２０ｍｌの水に懸濁させ、遠心分離し、少量の水で２回、アセトンで２回、さらにジエチルエーテルで２回洗った。生成物を減圧乾燥して０．９８ｇのＮ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢ（Ｅ^1% _1cm＝１２００（３８２ｎｍ、ＭｅＯＨにおいて））を得た。この生成物を撹拌しながら１０ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解し、この溶液に５０ｍｌのジエチルエーテルを加えて、微細懸濁液を得た。懸濁液を氷中で０−２℃に冷却し、烈しく撹拌しながら、Ｎ −Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢ１モル当り新たに調製したジアゾメタンのジエチルエーテル溶液２．５モルを加えた。反応に続いてクロロホルム−メタノール−水１０：６：１（容量／容量）溶剤系でシリカゲルを用いる薄層クロマトグラフィーを行った。約２時間を要した反応完了後、過剰のジアゾメタンおよびジエチルエーテルを４０℃以下の温度で減圧下で蒸発させた。過剰のジエチルエーテルを用いて残留物から粗製物を沈澱させ、遠心分離し、ジエチルエーテルで２回、さらにｎ−ヘキサンで洗い、減圧乾燥して、０．９５ｇの粗製物を得た。クロロホルム−メタノール−水２０：８：１（容量／容量）溶剤系で７０−２３０メッシュのMerk Silicagel ６０を用いてカラムクロマトグラフィーで粗製物から純粋なＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルを単離した。たとえば、０．９５ｇの粗製物を前記の溶剤混合物中に懸濁させ、もしも生成物が難溶であれば、前記溶剤の比率を１０：６：１に変えた。未溶解部分を遠心分離し、上澄液をクロマトグラフィーのカラムに入れ、次いで前記溶剤混合物（ただし、比率は２０：８：１（容量／容量））中で展開させた。クロロホルム−メタノール−水１０：６：１（容量／容量）溶剤系を用いシリカプレート上で溶離液を分析した。硫酸セリウム試薬でプレートを可視化させた。純粋のアンホテリシンＢメチルエステルのＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシル誘導体を含むＲf＝０．５−０．５４の画分を集めた。集めた画分を減圧下で蒸発させた。乾燥残留物を少量のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解し、生成物を過剰のジエチルエーテルで沈澱させ、固形物を遠心分離し、ジエチルエーテルで２回洗って、真空デシケータで乾燥した。０．１３７ｇのＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステル（Ｅ^1% _1cm＝１３００（３８２ｎｍ、メタノール中において））が得られた。構造の証明は前記説明部分に示した。前記のように試験したCandida albicansに対するこの化合物の抗真菌活性はＩＣ₅₀＝０．１２μ ｇ／ｍｌを示し、前記のように測定したヒトの赤血球に対する毒性は３５０μｇ／ｍｌよりも大きいＥＨ₅₀を示した。比較すると、出発原料のアンホテリシンＢのＥＨ₅₀値は１．５μｇ／ｍｌであった。３５０μｇ／ｍｌを上回るとこの化合物はこの実験条件では不溶であるので、Ｎ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルのＥＨ₅₀の正確な値は求めることができなかった。実施例ＩＩ０．５ｇのカンジジン(Ｅ^1% _1cm＝１１７５(３８２ｎｍ、ＭｅＯＨにおいて)) および０．１５ｇのＤ−グルコースを１０ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解して、３７℃で３６時間撹拌した。以降の手順は実施例Ｉと同様であって、０．４３ｇのＮ−Ｄ−フルクトシルカンジジン（Ｅ^1% _1cm＝１１００（３８２ｎｍ）ＭｅＯＨ中において））が得られた。実施例Ｉと同様にこの生成物をジアゾメタンのジエチルエーテル溶液でメチル化して、０．４ｇの粗製物を得た。実施例Ｉに示したと同様の方法により、カラムクロマトグラフィーによって純粋なＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルカンジジンメチルエステルを単離した。純粋な誘導体を含む画分を薄層クロマトグラフィーにかけてＲf＝０.４９−０.５２と確認した。画分を集め、蒸発乾固し、少量のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解し、ジエチルエーテルで固形物を沈澱させた。固形物を遠心分離し、ジエチルエーテルで洗い、真空デシケータで乾燥して、０.０５ｇのＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルカンジジンメチルエステル（Ｅ^1% _1cm＝１２００（３８２ｎｍ、ＭｅＯＨ中において）、ＩＣ₅₀＝０．７５μｇ／ｍｌおよび３００μｇ／ｍｌを上回るＥＨ₅₀）を得た。この化合物の構造は、Ｎ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルの場合と同じ方法によって決定された。実施例ＩＩＩ２ｇのナイスタチン(Ｅ^1% _1cm＝８７０(３０４ｎｍ、ＭｅＯＨ中において))および０．６ｇのＤ−グルコースを３５ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドに溶解して、３７℃で４０時間撹拌した。反応完了後、粗製物をジエチルエーテルで沈澱させ、遠心分離して、真空乾燥した。次に過剰のグルコースを少量の水−アセトン１：１混合物、ついでアセトン、ジエチルエーテルで洗い去り、生成物を遠心分離し、真空デシケータで乾燥して、１．２ｇのＮ−Ｄ−フルクトシルナイスタチン（Ｅ^1% _1cm＝７２０（３０４ｎｍ、ＭｅＯＨ中において））を得た。実施例Ｉと同様にジアゾメタンを用いてこの生成物をメチル化して、１．２５ｇの粗製物を得た。この生成物を実施例Ｉと同様にシリカゲルカラムで精製した。純粋なＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルナイスタチンメチルエステルを含有する画分を実施例Ｉのように薄層クロマトグラフィーにかけてＲf＝０．４９−０.５２と確認した。該画分を集め、減圧下３０℃で蒸発乾固し、少量のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解し、生成物をジエチルエーテルで沈澱させた。生成物を遠心分離し、ジエチルエーテルで洗い、真空デシケータで乾燥して、０.１７ｇのＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルナイスタチンメチルエステル（Ｅ^1% _1cm＝９００（３０４ｎｍ、ＭｅＯＨ中において））を得た。この化合物の構造はＮ− メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルの場合に述べた方法によって決定された。得られた化合物の場合、ＩＣ₅₀＝６．８μｇ／ｍｌおよび３００μｇ／ｍｌを上回るＥＨ₅₀が認められた。実施例ＩＶ１５ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の０．７９ｇのバシジン（抗生物質複合オーレオファシンの主成分）（Ｅ^1% _1cm＝９００（３７８ｎｍ、ＭｅＯＨ中において））および０．２２ｇのＤ−グルコースを３７℃で１８時間撹拌した。反応完了後、混合物を冷却し、過剰のジエチルエーテルで固形物を沈澱させた。固形物を遠心分離し、ジエチルエーテルで洗い、減圧乾燥して、０．８ｇの粗製Ｎ−Ｄ−フルクトシルバシジン（Ｅ^1% _1cm＝７２０（３７８ｎｍ、ＭｅＯＨ中において））を得た。実施例Ｉと同様にジアゾメタンを用いて得られた誘導体をメチル化して、０．５ｇの粗製物を得た。実施例Ｉに述べたと同様に、シリカゲルカラムのクロマトグラフィーによって純粋なＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルバシジンメチルエステルを単離した。ただしカラムはクロロホルム−メタノール −水３０：８：１溶剤系で展開した。純粋なバシジン誘導体を含有し、かつ薄層クロマトグラフィーにかけてクロロホルム−メタノール−水１３：８：１溶剤系でＲf＝０．５３−０．５５値を有する画分を集めて一緒にした。以後の手順は実施例ＩＩＩと同様であった。０．０７ｇのＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルバシジンメチルエステル（Ｅ^1% _1cm＝９００（３７８ｎｍ、ＭｅＯＨ中において））が得られた。この化合物はＩＣ₅₀＝０.０１μｇ／ｍｌおよびＥＨ₅₀＝１７０μｇ／ｍｌを示した。この化合物の構造はＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルについて述べた方法によって決定された。実施例Ｖ０．７９ｇのカンジシジンＤ（抗生物質複合カンジシジンの主成分）を実施例ＩＶに述べたと同様に処理した。０．１ｇのＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルカンジシジンＤメチルエステルが得られた（Ｅ^1% _1cm＝９２０（３７８ｎｍ、ＭｅＯＨ中において）、実施例ＩＶに記載した条件下の薄層クロマトグラフィーによる該化合物のＲfは０．５０−０．５３であった）。この化合物はＩＣ₅₀＝０．０１μｇ／ｍｌおよびＥＨ₅₀＝１８０μｇ／ｍｌを示した。該化合物の構造はＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルについて述べた方法によって決定された。実施例ＶＩ０．７９ｇの抗生物質複合トリコマイシン主成分を実施例ＩＶに述べたと同様に処理した。０．１ｇのＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルトリコマイシンメチルエステルが得られた（Ｅ^1% _1cm＝９１０（３７８ｎｍ、ＭｅＯＨ中において）、実施例ＩＶに記載した条件下の薄層クロマトグラフィーによる該化合物のＲfは０．４９−０．５２であった）。該化合物はＩＣ₅₀＝０．０１３μｇ／ｍｌおよびＥＨ₅₀＝１６５μｇ／ｍｌを示した。該化合物の構造はＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルについて記載した方法によって決定された。実施例ＶＩＩ８ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の０．５ｇのアンホテリシンＢ（Ｅ^1% _1cm ＝１３５０（３８２ｎｍ、ＭｅＯＨ中において））および０．１５ｇのＬ −グルコースを３７℃で４０時間撹拌した。以後の操作は実施例Ｉと同様であった。０．０６５ｇのＮ−メチル−Ｎ−Ｌ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルが得られた（Ｅ^1% _1cm＝１２８０（３８２ｎｍ、ＭｅＯＨ中において））。該化合物はＩＣ₅₀＝０．４２μｇ／ｍｌおよび２００μｇ／ｍｌを上回るＥＨ₅₀を示した。該化合物の構造はＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルについて記載した方法により決定された。実施例ＶＩＩＩ０．５２ｇのアンホテリシンＢ（Ｅ^1% _1cm＝１３５０（３８２ｎｍ、ＭｅＯＨ中において））および０．１５３ｇのＤ−マンノースを１０ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解して、３７℃で４０時間撹拌した。以後の操作は実施例Ｉと同様であった。実施例Ｉの場合と同様に、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより純粋な誘導体を単離し、実施例Ｉに記載した方法により、薄層クロマトグラフィーにおいて、Ｒf値が０．５３−０．５５の画分を集めた。以後の操作は実施例Ｉの場合と同様であった。０．０８ｇのＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステル（Ｅ^1% _1cm＝１２８０（３８２ｎｍ、ＭｅＯＨ中において））が得られた。該化合物はＩＣ₅₀＝０．４２μｇ／ｍｌおよび２００μｇ／ｍｌを上回るＥＨ₅₀を示した。該化合物の構造はＮ−メチル−Ｎ −Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルについて述べた方法によって決定された。実施例ＩＸ１２ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の０．５ｇのアンホテリシンＢ（Ｅ^1% _1cm＝１３５０（３８２ｎｍ、ＭｅＯＨ中において））および０．３ｇのＤ −ラクトースを３７℃で２日間撹拌した。以後の操作は実施例Ｉと同様であった。実施例Ｉと同様に、シリカゲルカラムクロマトグラフィーによる純粋な誘導体を単離し、実施例Ｉに記載した方法により、薄層クロマトグラフィーにおいてＲ f値が０．２５−０．３０の画分を集めた。０．０８ｇのＮ−メチル−Ｎ−Ｄ− フルクトシルガラクトシルアンホテリシンＢメチルエステル（Ｅ^1% _1cm＝１０００（３８２ｎｍ、ＭｅＯＨ中において））が得られた。該化合物はＩＣ₅₀＝６．０μｇ／ｍｌおよび２００μｇ／ｍｌを上回るＥＨ₅₀を示した。実施例Ｘ実施例Ｉにより調製した０．５ｇのＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルを１０ｍｌの水に懸濁させ、２ｍｌの水に溶解した０．０５９ｇのアスパラギン酸を添加した。撹拌しながら酸溶液を１滴ずつ加えて、溶液とした。溶液を濾過して、少量の残留固形物を除き、この透明な濾液に、塩がすべて沈澱するまで過剰のアセトンを加えた。固形物を濾別または遠心分離し、アセトンで２回、ジエチルエーテルで２回洗い、減圧乾燥して、０．５ｇのＮ−メチル−Ｎ−Ｄ−フルクトシルアンホテリシンＢメチルエステルＬ−アスパラテート（Ｅ^1% _1cm＝１１００（３８２ｎｍ、ＭｅＯＨ中において））が得られた。実施例Ｉのような条件による薄層クロマトグラフィーでＲf＝０.５−０.５４が得られた。生成物はＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、およびグルコースの５％水溶液に可溶であった。生成物は水に極めてよく溶解した。該化合物はＩＣ₅₀＝０.１２５μｇ／ｍｌおよび３５０μｇ／ｍｌを上回るＥＨ₅₀を示した。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者ソヴィンスキ，パヴェウポーランド国81−862 ソポト，クヤフスカ・ストリート 35／１ (72)発明者グミエニアク，イェジアメリカ合衆国テキサス州77477，スタッフォード，シュガー・グローブ・ブールバード 4950，ナンバー 1305 (72)発明者チェルヴィンスキ，アンヂュジェイアメリカ合衆国テキサス州77477，スタッフォード，サウス・カークウッド 12525, アパートメント 204

Claims

【特許請求の範囲】１．一般式１（ａ）（式中、Ｍはポリエンマクロライド群抗生物質の残基を表わし、Ｒは該抗生物質と単糖類またはオリゴ糖との反応によって生成する糖残基の一部分を表わし、そして同一かまたは異なることができるＲ¹およびＲ²はそれぞれＣ_1-4アルキル基を表わす）のポリエンマクロライド群抗生物質のアルキルエステルのＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体。２．ＭがアンホテリシンＢ、カンジジン、カンジドイン、カンジジニン、マイコヘプチン、ナイスタチン、ポリフンギン、オーレオファシン、バシジン、トリコマイシンまたはカンジシジンから選ばれる請求項１記載のポリエンマクロライド群抗生物質のアルキルエステルのＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体。３．該糖残基Ｒが誘導される該単糖類またはオリゴ糖がＤ−グルコース、またはＬ−グルコース、またはＤ−マンノース、またはＤ−ガラクトース、またはラクトース、またはマルトースから選ばれる請求項１または２記載のポリエンマクロライド群抗生物質のアルキルエステルのＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体。４．Ｒ¹およびＲ²がメチル基である請求項１ないし３のいずれか１つの項記載のポリエンマクロライド群抗生物質のアルキルエステルのＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体。５．一般式２（ａ）（式中、Ｍ，Ｒ，Ｒ¹およびＲ²は請求項１ないし４のいずれか１つの項により規定され、かつＡは有機または無機酸のアニオンを表わす）のポリエンマクロライド群抗生物質のアルキルエステルのＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体の塩類。６．ＡがＬ−アスパラギン酸の該アニオンである、請求項５記載のポリエンマクロライド群抗生物質のアルキルエステルのＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体の塩類。７．請求項１ないし４のいずれか１つに記載のポリエンマクロライド群抗生物質のアルキルエステルのＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体の調製法において、ポリエンマクロライド抗生物質を単糖類またはオリゴ糖と反応させ、該反応は、同時にアマドリ転位を生起して、該ポリエンマクロライド抗生物質の該Ｎ−グリコシル誘導体を生成することを特徴とし、該アマドリ転位の該生成物を単離し、該生成物をアルキル化剤で処理して、該粗製物を精製する工程を含む方法。８．該アマドリ転位の生成物を、該転移が起る該溶液から沈澱させて、懸濁液の形で単離する請求項７記載の調製法。９．Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを用いて該アマドリ転位を維持させる、請求項７または請求項８記載の調製法。１０．ジエチルエーテルを用い、該アマドリ転位の該生成物を沈澱させて、懸濁液を生成させる、請求項７ないし９のいずれか１つに記載の調製法。１１．該アマドリ転位の該生成物のアルキル化を低温で行わせる、請求項７ないし１０のいずれか１つに記載の調製法。１２．アルキル化を−５℃ないし＋５℃の温度で行わせる、請求項１０記載の調製法。１３．該アルキル化剤がジアゾメタンのエーテル溶液である、請求項７ないし１２のいずれか１つに記載の調製法。１４．請求項５または請求項６記載の一般式２（ａ）のポリエンマクロライド抗生物質のアルキルエステルのＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体の塩類の調製法において、請求項７ないし１３のいずれか１つにより調製したＮ−アルキル −Ｎ−グリコシル誘導体を、均質懸濁液を生成させるのに十分な水に懸濁させ、該生成懸濁液を酸性化して、該生成物を単離する工程を含む方法。１５．請求項１４記載のポリエンマクロライド抗生物質のアルキルエステルのＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体の塩類の調製法において、有機または無機酸を用いて該懸濁液を酸性化する方法。１６．請求項１５記載のポリエンマクロライド抗生物質のアルキルエステルのＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体の塩類の調製法において、Ｌ−アスパラギン酸を用いて該懸濁液を酸性化する方法。１７．請求項１４ないし１６のいずれか１つの項記載のポリエンマクロライド抗生物質のアルキルエステルのＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体の塩類の調製法において、有機溶剤による該粗製物の沈澱に続く補足的な適当な溶剤による次の洗浄および乾燥によって該純生成物の単離を行う方法。１８．請求項１４ないし１７のいずれか１つの項記載のポリエンマクロライド抗生物質のアルキルエステルのＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体の塩類の調製法において、該粗製物を沈澱させるのに使用する該溶剤が水と混和性を有する方法。１９．請求項１８記載のポリエンマクロライド抗生物質のアルキルエステルのＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体の塩類の調製法において、該溶剤がアセトンである方法。２０．請求項１７ないし１９のいずれか１つの項記載のポリエンマクロライド抗生物質のアルキルエステルのＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体の塩類の調製法において、該生成物を洗浄するのに使用する該補足的な適当な溶剤をアセトンおよびジエチルエーテルから選ぶ方法。２１．請求項１４ないし２０のいずれか１つの項記載のポリエンマクロライド抗生物質のアルキルエステルのＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体の塩類の調製法において、該生成物を減圧下で乾燥する方法。２２．治療に用いるための請求項１ないし６のいずれか１つに記載の式１（ａ）のＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体またはその塩類。２３．ヒトおよび動物の真菌感染症の処置法において、請求項１ないし６のいずれか１つの項記載の式１（ａ）のＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体またはその塩類のヒトおよび動物への投与を含む方法。２４．ヒトおよび動物の真菌感染症の処置法において、請求項１ないし６のいずれか１つの項記載の式１（ａ）のＮ−メチル−Ｎ−グリコシル誘導体またはその塩類のヒトおよび動物への投与を含む方法。２５．請求項１ないし６のいずれか１つに記載の式１（ａ）のＮ−アルキル− Ｎ−グリコシル誘導体またはその塩類および生理学上許容できるキャリヤーを含む真菌感染症の処置に用いるための組成物。２６．医薬用または獣医学用に処方される１種以上の式１（ａ）のＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体またはその塩類および生理学上許容できるキャリヤーを含む単位用量形態。２７．式１（ａ）の該Ｎ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体またはその塩類が式１（ｂ）の該メチルエステルのＮ−メチル−Ｎ−グリコシル誘導体またはその塩類を含む、請求項２５記載の真菌感染症の処置に用いる組成物または請求項２６記載の単位用量形態。２８．さらに公知の抗真菌剤を含む、請求項２５ないし２７のいずれか１つの項記載の組成物または単位用量形態。２９．静脈内、腹腔内、経口、局所、皮下、直腸、または膣投与用に処方される、請求項２５ないし２８のいずれか１つの項記載の組成物または単位用量形態。３０．真菌感染症の処置に用いる薬剤を調製するための請求項１ないし６のいずれか１つに記載の式１（ａ）のアルキルエステルのＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体またはその塩類の使用。３１．該Ｎ−アルキルおよびアルキルエステル置換基が両者ともメチル基である請求項３０記載の使用。３２．真菌感染症を処置するための請求項１ないし６のいずれか１つの項記載の式１（ａ）のＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体またはその塩類の使用。３３．該Ｎ−アルキルおよびアルキルエステル置換基が両者ともメチル基である請求項３２記載の使用。３４．該真菌感染症が外因性または内因性である請求項３２または３３記載の使用。３５．一般式１（ｂ）（式中、Ｍはポリエンマクロライド群抗生物質の残基を表わし、Ｒは該抗生物質と単糖類またはオリゴ糖、好ましくはＤ−グルコース、もしくはＬ−グルコース、もしくはＤ−マンノース、もしくはＤ−ガラクトース、もしくはラクトース、もしくはマルトースとの反応および同時のアマドリ転位により生成する糖残基の一部分を表わす）により示されるポリエンマクロライド群抗生物質のメチルエステルのＮ−アルキル−Ｎ−グリコシル誘導体。３６．該ポリエンマクロライド群抗生物質がアンホテリシンＢ、またはカンジジン、またはカンジドイン、またはカンジジニン、またはマイコヘプチン、またはナイスチン、またはポリフンギン、またはオーレオファシン、またはトリコマイシン、またはカンジシジンである請求項３７記載の誘導体。３７．一般式２（ｂ）（式中、Ｍはポリエンマクロライド群抗生物質の残基を表わし、Ｒは該抗生物質と単糖類またはオリゴ糖、好ましくはＤ−グルコース、もしくはＬ−グルコース、もしくはＤ−マンノース、もしくはＤ−ガラクトース、もしくはラクトース、もしくはマルトースとの反応および同時のアマドリ転位によって生成する糖残基の一部分を表わし、かつＡは有機または無機酸のアニオンを表わす）により示されるポリエンマクロライド群抗生物質のＮ−メチル−Ｎ −グリコシル誘導体の塩類。３８．該ポリエンマクロライド群抗生物質がアンホテリシンＢ、またはカンジジン、またはカンジドイン、またはカンジジニン、またはマイコヘプチン、またはナイスタチン、またはポリフンギン、またはオーレオファシン、またはバシジン、またはトリコマイシン、またはカンジシジンである、請求項３９記載の塩類。３９．ＡがＬ−アスパラギン酸の該アニオンに関する、請求項３９または４０記載の塩類。４０．一般式１（ｂ）（式中、Ｍはポリエンマクロライド群抗生物質の残基を表わし、Ｒは該抗生物質と、単糖類またはオリゴ糖、好ましくはＤ−グルコース、もしくはＬ−グルコース、もしくはＤ−マンノース、もしくはＤ−ガラクトース、もしくはラクトース、もしくはマルトースとの反応および同時のアマドリ転位によって生成する糖残基の一部分を表わす）によって示されるポリエンマクロライド群抗生物質のメチルエステルのＮ−メチル−Ｎ−グリコシル誘導体の調製法において、アマドリ転位により得られる該ポリエンマクロライド群抗生物質Ｎ −グリコシル誘導体を、有機溶剤、好ましくはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の該誘導体の溶液から、溶剤、好ましくはジエチルエーテルで沈殿させて、懸濁液に変え、次に低温、好ましくは−５℃ないし＋５℃の範囲においてジアゾメタンのエーテル溶液で処理し、撹拌し、さらに溶剤の蒸発および濃溶液、好ましくは過剰のジエチルエーテルによる沈殿で単離させ、公知の方法によって該粗製物を精製する方法。４１．一般式１（ｂ）（式中、Ｍはポリエンマクロライド群抗生物質の残基を表わし、Ｒは該抗生物質と、単糖類またはオリゴ糖、好ましくはＤ−グルコース、もしくはＬ−グルコース、もしくはＤ−マンノース、もしくはＤ−ガラクトース、もしくはラクトース、もしくはマルトースとの反応および同時のアマドリ転位により生成する糖残基の一部分を表わす）によって示されるポリエンマクロライド群抗生物質のメチルエステルのＮ−メチル−Ｎ−グリコシル誘導体の塩類の調製法において、アマドリ転位により得られる該ポリエンマクロライド群抗生物質Ｎ −グリコシル誘導体を、有機溶剤、好ましくはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の該誘導体の溶液から溶剤、好ましくはジエチルエーテルで沈殿させて懸濁液に変え、次に低温、好ましくは−５℃ないし＋５℃の範囲においてジアゾメタンのエーテル溶液で処理し、撹拌し、溶剤の蒸発および該濃溶液、好ましくは過剰のジエチルエーテルによる沈殿で単離させ、該粗製物を公知の方法によって精製し、続いて固形物として得られた該誘導体を、少量の水に懸濁させ、理論量の有機または無機酸を加え、次いで生成した該溶液から水と混和する過剰の有機溶剤、好ましくはアセトンで該生成物を沈殿させ、該固形物を、好ましくはアセトンに続いて好ましくはジエチルエーテルで洗い、ついで好ましくは減圧で乾燥する方法。４２．ヒトおよび動物の外因性および内因性真菌感染症の処置法において、一般式１（ａ）（式中、Ｍはポリエンマクロライド群抗生物質の残基を表わし、Ｒは該抗生物質と、単糖類またはオリゴ糖、好ましくはＤ−グルコース、もしくはＬ−グルコース、もしくはＤ−マンノース、もしくはＤ−ガラクトース、もしくはラクトース、もしくはマルトースとの反応および同時のアマドリ転位により生成する糖残基を表わす）によって示されるポリエンマクロライド群抗生物質のメチルエステルのＮ−メチル−Ｎ−グリコシル誘導体を用いて該感染症を処置する方法。４３．ヒトおよび動物の外因性および内因性真菌感染症の処置法において、一般式２（ｂ）（式中、Ｍはポリエンマクロライド群抗生物質の残基を表わし、Ｒは該抗生物質と、単糖類またはオリゴ糖、好ましくはＤ−グルコース、もしくはＬ−グルコース、もしくはＤ−マンノース、もしくはＤ−ガラクトース、もしくはラクトース、もしくはマルトースとの反応および同時のアマドリ転位によって生成する糖残基の一部分を表わす）によって示されるポリエンマクロライド群抗生物質のメチルエステルのＮ−メチル−Ｎ−グリコシル誘導体の塩類を用いて該感染症を処置する方法。