JPH11507727A

JPH11507727A - 抗ｔｓｈレセプター自己抗体の測定方法

Info

Publication number: JPH11507727A
Application number: JP9502655A
Authority: JP
Inventors: バングルマン，アンドレアス
Original assignee: ベー．アール．アー．ハー．エム．エスディアグノスティカゲーエムベーハー
Priority date: 1995-06-19
Filing date: 1996-06-19
Publication date: 1999-07-06
Also published as: EP0834076B1; ATE187557T1; EP0834076A1; DE59603871D1; WO1997000447A1; DE19522171C1

Abstract

(57)【要約】試料中の測定されるべき自己抗体が可溶化されたＴＳＨレセプターの結合場所について適当に標識化されていてもよいＴＳＨ競争剤と競争させられ測定されるべき自己抗体の量がこのＴＳＨレセプター又は液相から抽出された競争剤の量から計算されそして反応混合物の製造の為に、該試料、存在してもよい標識化されたＴＳＨ競争剤及びＴＳＨレセプターが本質的に同時に一緒にされこのようにして得られた反応混合物が１段階培養にかけられ次にそれ自体は知られた方法でワークアップされるヒトの血清又は血漿試料中の抗ＴＳＨレセプター自己抗体を測定する方法。

Description

【発明の詳細な説明】発明の名称抗ＴＳＨレセプター自己抗体の測定方法技術分野本発明は甲状腺の自己免疫病の臨床診断方法、特にいわゆるレセプターアッセイの助けをかりるヒトの血清又は血漿試料中の抗ＴＳＨレセプター自己抗体の測定の為の改良方法に関する。発明の背景甲状腺の病気の診断に於ては、ＴＳＨレセプターに対する自己抗体（「抗ＴＳＨレセプター自己抗体」）の測定はかなり重要である。ＴＳＨレセプターは甲状腺の機能の調節に於て重要な役割を果たす。事実、脳下垂体の分泌線によって分泌されるホルモンＴＳＨ（チロトロピン）を甲状腺膜に固定されたＴＳＨレセプターに結合させることによって、最も重要な甲状腺ホルモンのチロキシン（Ｔ４）の形成と分泌が刺激される。しかしながら、ある種の病気に於て形成される自己抗体も、このＴＳＨレセプターに結合できる。上記自己抗体はそれら全部が以下には抗ＴＳＨレセプター自己抗体として命名されている。これらの自己抗体の種類に依存して、ＴＳＨ分子のＴＳＨレセプターへの結合が遮蔽され、そしてそれによってチロキシンの形成と分泌が抑制されるか、又は逆に、ＴＳＨレセプターに結合すると抗ＴＳＨレセプター自己抗体がＴＳＨの作用を真似し、そして甲状腺ホルモンの合成と分泌を刺激するので、その甲状腺ホルモンが制御されないで分泌されてしまうかのいずれである。後者の場合に於て生じる甲状腺ホルモンの過剰は、なかでもバセドウ氏病のかたちで甲状腺機能充進症としてあらわれる。自己抗体のＴＳＨレセプターに対する重要性は多くの科学文献に詳細に議論されており、典型的な文献として、バーナードリーススミス(Bernard Rees Sm ith)らによるレビュー記事「チロトロピンレセプターに対する自己抗体」Endocr ine Reviews，第９巻 No.1，1988，106〜121頁を参照することが出来る。臨床現場に於ける抗ＴＳＨレセプター自己抗体の検出の重要性の為、キットの形態におけるこの種の測定方法が種々の診断会社によって提供されている。抗ＴＳＨレセプター自己抗体の測定の為に現在市販されているそのような方法の全ては、いわゆるラジオレセプターアッセイ（ＲＲＡ）の原理に基づくものであり、その原理では、血清試料又は場合によっては血漿試料中のもとめる自己抗体を測定するために、血清又は血漿試料中に存在する自己抗体が、添加されるＴＳＨレセプターの結合場所について、添加される¹²⁵Ｉ標識化ＴＳＨ製剤と競争させられる。このＴＳＨレセプターは通常、ブタの甲状腺物質からヒト又は動物の甲状腺材料から抽出及び可溶化によって得られたものである。全ての測定方法は本質的に次の段階からなっている。１つのそして同じ培養スキームに従って実施される。１．試料（患者の血清試料）を試験管にピペットで入れる。２．それぞれのキットで考えられている形態で可溶化されたＴＳＨレセプターを添加しそして十分に攪拌する。３．試料成分とＴＳＨレセプターを含有している生じた反応混合物を室温で通常１５〜２０分間の期間予備培養する。４．トレーサーとして標識化されたＴＳＨ製剤をその後に添加する。５．室温で２時間±３０分程度の期間、全ての試験成分を含有している反応混合物を培養する。６．ＴＳＨレセプターに結合しているトレーサーの一部分、また場合によっては自己抗体を有するＴＳＨレセプターを沈殿させるために、沈殿試薬、通常はポリレチレングリコール（ＰＥＧ）を添加する。７．遠心分離して固相から上澄み液を分離する。８．固相中の放射能を測定する。キットに供給されている標準物質又は対照が血清試料の代わりに使用されることを除いて、ちょうど同じ方法に従ってつくられる検量曲線が測定の結果の評価の為に使用される。この標準物質又は対照は、既知の組成の試料としてみなし得る。本出願で「試料」という用語が使用される場合には、これは患者から得られた血清又は血漿試料を意味するのみならず、その試料に関してなされる全ての宣言は標準溶液及び対照試料の測定にも同じように適用可能である。記載された手順が抗ＴＳＨレセプター自己抗体の測定の為のラジオレセプター検定のこの分野の現在の技術水準に於て例外なく使用できることは、我々が知っている全ての関連する試験キットの実施の為の指示書（マニュアル）から明らかである。即ちベルリンのＢ．Ｒ．Ａ．Ｈ．Ｍ．Ｓ．ディアグノスティカゲーエムベーハーからのＴＲＡＫ検定（登録商標）に対する実施指示書（マニュアル）１９９５年１月、特に表紙裏の頁に従う測定原理及び試験手順のセクション。セルチョウ(Selchow)のメディパンディアグノスティカエントウィックルングスウントフェルトリーブスゲーエムベーハー(Medipan Diagnostika Entwicklungs- und Vertriebs Gmbh）からのＴＳＨＲＥＺＡＫ（登録商標）に対する実施指示書。セクション「試験手順」（１９９４年１２月１日）ディエッツェンバッハのビーワイケー−サングテックディアグノスティカゲーエムベーハーアンドカンパニーケージー(Byk-Sangetec Diagnostica Gm bh & Co．KG,)、１９９３年、からのＴＨＹＢＩＡ検定の使用情報、セクション「試験手順」。アメリカ合衆国サンクレメンテのクロナス（登録商標）からのＴＳＨレセプター抗体（ＴＲＡｂ）キットに対する製造業社の情報１９９３年、特に６頁「検定プロトコル」。ハンブルグのゲゼルシャフトフュアイミュンケミイウントイミュンバイオロギーエムベーハーからの「チロトロピンレセプター自己抗体」に対する製造業社の情報，１９９３年１月、特にセクション６。ベルギーのスクレッシン(Sclessin)のバイオコードｓ．ａ．，からのＴＤＩＡｂＲＲＡに対する製造業社の情報，１９９１年４月、特にセクション４．２及び８．２。英国のカルディッフのアールエスアールリミテッドからの「ＴＲＡｂ」の使用の為の日本語指示書，１９９４年、特にセクション２ナンバー４。フランスのイミュノテックからの抗Ｒ−ＴＳＨの為の製造業社の情報、特にセクション７，ＳＣＨＥＭＡＯＰＥＲＡＴＯＩＲＥＤＵＤＯＳＡＧＥ。テックランドからのＴＲＡＢ ¹²⁵Ｉの為の製造業社の情報，１９９２年９月、特に５及び８頁。記載された全ての方法に於て、実際の競争的な試験反応を実施するためには、反応混合物が２段階で製造されることが必要とみなされている。即ちＴＳＨレセプターと求めようとする自己抗体との予備反応を可能とするために、第１段階として、ＴＳＨレセプター製剤を試料と一緒にしてそして反応系の一部を含有している反応溶液を予備培養することにより、そして第２段階として、予備培養の完了後、トレーサーとして加えられる競争するＴＳＨ製剤を遅れて添加することによって行われる。トレーサーも加えられた後には、全ての反応体を含有している反応混合物は、再度比較的長時間、通常は室温で２時間、又は３７℃で１時間、培養される。述べられた種類の予備培養が全ての先行技術で実施されており、そして例えば次の刊行物を参照することが出来る。エスクアシムメディ(S．Qasim Mehdi et al.)等、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．（１９７５）１４５，１０５〜１１１頁、特に１０７頁、セクション「ヒトの血清又はＩｇＧ中のＬＡＴＳの検定の為の標準手順」。Ｈ．シュロイゼナー(Schleusener)等、Ｊ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｉｎｖｅｓｔ．２：１５５〜１６１頁、（１９７８）。Ｊ．ハベルマン(Haberman)、Ｃ．Ｒ．ピッカード(Pickardt)及びＰ．Ｃ．スクライバ(Scriba)、ＡｃｔａＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．（コペンハーゲン）Ｓｕｐｐｌ．２３４，２６（１９８０）。バーナードリーススミス及びレギナルドホール、「チロトロピンレセプター抗体の測定」ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，７４巻（１９８１），４０５〜４２０頁、特に４１５頁「検定手順」、４１７頁１〜５行の以下のものからのテキスト。ケイソースゲイト(Kay Southgate)等、クリニカルエンドクリノロジー（C linical Endocrinology）（１９８４）、２０、５３９〜５４８頁、特に５４１頁、セクション「抽出されない血清の為の検定手順」。ハルオタマキ等、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｌａｂ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．（１９８６），２０，１〜６頁、特に２頁セクション「抽出されない血清の為の検定手順」。エスコスタグリオラ(S．Costagliola)等、「組替えレセプター蛋白質を使用するチロトロピンレセプター自己抗体の為の結合検定」Journal of Clinical En docrinology and Metabolism,７８巻Ｎｏ．６（１９９２）１５４０〜１５４４頁、特に１５４１頁、セクション「自己抗体測定の為の結合検定」。マンジュラケーグプタ（Manjula K．Gupta）Ｃｌｉｎ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，２５巻１９９２１９３〜１９９頁、特に194頁左欄。述べられた刊行物は２０年間の期間をカバーするものであり、より古い刊行物も抗ＴＳＨレセプター自己抗体をＬＡＴＳ（long-acting thyroid stimulator長期間作用する甲状腺刺激剤）又はＴＢＩＩ（ＴＳＨ結合阻害剤免疫グロブリン）と命名している。文献中で見出される別の略号はＴＲＡｂ（チロトロピン（ＴＳＨ）レセプター抗体）である。最も早い関連する方法は全てレセプター製剤として甲状腺膜を使用しており、そして好ましくは試料物質として単離された免疫グロブリンフラクションを使用している。上記の手順の最も古いものでさえも２３〜２５℃で３時間の予備培養を実施している。Ｊ．ハーバーマン、Ｃ．Ｒ．ピッカード及びＰ．Ｃ．スクライバ、によるＡｃｔａＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．（コペンハーゲン）Ｓｕｐｐｌ．２３４，２６（１９８０）による上記の刊行物は、６０分間の予備培養がそのような予備培養なしの手順と比較して実質的に改良された測定結果につながることを示すことによって、予備培養の重要性を明白に述べている。バーナードリーススミス及びレジナルドホールによる上記の著名な記事「チロトロピンレセプター抗体の測定」において４１７頁には、測定方法が信頼できる為には予備培養が重要であることが同様に強調されている。抗ＴＳＨレセプター自己抗体の測定の為のラジオレセプター検定の為に改良された試薬が導入され、そして測定の原理が単離されたＩｇＧフラクションの代わりに血清試料を含めるよう拡張されたとしても、予備培養を有する基本的な反応計画においては何も変っていない。この意味で、過去１０年間に生じた、全ての実施指示書（マニュアル）を含めた上の刊行物について参照することが出来る。１９９５年からＴＲＡＫ検定（登録商標）の為の実施指示書（マニュアル）において、室温に於て通常の１５〜２０分の予備培養を出願人も規定している。そのような予備培養は又、抗ＴＳＨレセプター自己抗体の測定に関する出願人の特許の全てに於て実施されている。即ちドイツ特許ＤＥ４２３７４３０、４頁の６２行の後の試験手順の記載、及びドイツ特許ＤＥ４３２８０７０、において成されている。後者は標識されないコンペティター（ｂＴＳＨ）が使用される修正方法に関するものであり、即ち最後に述べた特許の実験３に於て行われている。ドイツ特許ＤＥ４２３７４３０は放射性標識化ＴＳＨの形態のトレーサーに関するものである。このトレーサーは、蛋白質ミリグラムあたり４０ＩＵＴＳＨを越える生物活性を有し、抗ＴＳＨ抗体カラム上でのアフィニティークロマトグラフィー及びその後の末端カルボキシル基を有しそしてポリアミド被覆シリカゲルをもとにした弱酸性陽イオン交換樹脂上でのイオン交換クロマトグラフィーによって市販の粗製ウシＴＳＨの精製から得ることが出来る、粗製ウシＴＳＨから精製されることによって得られるＴＳＨ製剤の直接放射性よう素化によって得られる。このトレーサーは又ラジオトレーサー検定としてのその変形において本発明に従う方法の為に好ましいトレーサーでもある。しかしながら、中間の１５〜６０分の予備培養を用いる、実際の反応混合物を２段階調製法で実施するという当業者に認められた必要性は、診断研究所の通常の実施においては、試験手順に於けるかなりの困難性をもたらし、そして、誤差の追加的な原因となる可能性となり得るものである。本発明は、市販の改良された試薬を使用する現在の試験方法に今日まで満場一致で於て必須であるとみなされていた予備培養が、もはや全く必要とされず、予備培養なしで済ますことが出来、そしてこれに関連し、得られる測定結果に悪影響を与えること無く、ピペッティング段階の順序を変更することができるという驚くべき発見に基づくものである。従って、次の発明は、特許請求の範囲第１項の特徴となる事項の前の事項(pre characterizing clause)に従うそれ自体は知られている抗ＴＳＨレセプター自己抗体の測定の為の方法に於て反応混合物の製造の為に、試料、標識化ＴＳＨ製剤、及びＴＳＨレセプターが本質的に同時に一緒にされ、そしてこのようにして得られた反応混合物が１段階培養にかけられることを特徴とする方法に関し、そして手動のピペッティングの場合においては、反応混合物は好ましくは試料と標識化ＴＳＨ製剤をまず一緒にし、そしてＴＳＨレセプターのその後の添加によって反応を出発させ、その後培養とワークアップを慣用のやり方で実施することによって製造するのが好ましい。しかしながら自動ピペッティング装置の助けによる試験手順においては、例えば試料、ＴＳＨレセプター、及び標識化ＴＳＨ製剤が順次述べられた順序でプローブのはりによって吸い上げられ、そして慣用の試料容器中に一緒に導入されることも可能である。新規な培養及びピペット計画も、記載したように特許ＤＥ４３２８０７０の出願人の方法で、使用することが出来、ここでは実際の競争反応が標識されないＴＳＨ製剤で実施され、そして試料中の自己抗体の存在と量の測定については、液相中に残っている変換されないＴＳＨ分子が次にサンドイッチ法によって測定される。この方法の変法が特に２次的な請求項７に記載されている。出願人自身が驚いたことには、全ての反応体の単一の同時培養による新規な「１段階測定法」は、出願人自身のＴＲＡＫ検定（登録商標）に対する市販キットでの対応する試験に於て、慣用の手順による同じ試薬で得られた結果と同等の結果が与えられる。予備培養がはっきりと最近の刊行物で必要なものとして選ばれているので当業者には本方法が可能であるとは考えられることがないはずにもかかわらず、例えば、甲状腺膜及び免疫グロブリンフラクションを使用する元々の手順と比較した時に改良が達成されていることによって、そしてトレーサーの製法が改良されていることによって、予備培養が不必要なものとなったと推定される。しかし１段階培養が可能であることは実施上かなり有利であり、そして１段階試験手順の可能性は当業者にとって極めて驚くべきことである。以下に本発明に従う方法が出願人の市販のＴＲＡＫ検定（登録商標）の同じ成分を用いる伝統的な方法と比較されている。ここで２つの図を参照する。図１は、慣用方法及び新規な方法により同じ１００人の患者の血清で測定した結果を示している。図２は手順が一方では既知の方法でそして他方では本発明に従う方法によるものである、ＴＲＡＫ検定（登録商標）試薬を使用する測定方法に対する標準曲線を示している。試験の記載１．試薬全て出願人のＴＲＡＫ検定（登録商標）の慣用の試薬が用いられた。これらは特定して述べると以下の物である。Ａ：５．５ミリリットル４０ｋＢｑのビン中のすぐに使用できる形態のキットとして、特許ＤＥ４２３７４３０に従ってウシの脳下垂体から単離され、そして精製され、放射性よう素化された、ＴＳＨ製剤の形態の、トレーサーとしての¹²⁵Ｉ−ＴＳＨ製剤。Ｂ：Ｃに従う緩衝液１．５ミリリットル中でもどされるべき凍結乾燥物を有するビン中に存在する、ＴＳＨレセプター（特許ＤＥ４２３７４３０により、又はバーナードリーススミスとレジナルドホールＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｙｚｍｏｌｏｇｙ７４巻（１９８１）４０５〜４２０頁による上記記事の操作方法により、ブタの甲状腺から単離されたもの）。Ｃ：緩衝液１０．５ミリリットルのビンのすぐに使用できる、凍結乾燥ＴＳＨレセプター（試薬Ｂ）をもどすための緩衝液（燐酸緩衝塩溶液）。Ｄ：１６％ポリエチレングリコール溶液の形態における１０５ミリリットルのビンのすぐに使用が出来る沈殿試薬。このキットは又標準曲線を造るための６個のすぐに使用できる０．５ミリリットルのビンの形態のヒトの血清中の標準物質（ｂＴＳＨ）及びヒトの血清中の２つの対照血清も含有している。２．測定方法１００人の患者の血清を上記試薬を使用して測定したが、各場合に於て、規定された予備培養を含んでいる慣用の実施指示書に記載されたピペッティングと培養段階に従う測定を１回と、そして別の時間に単一培養のみの本発明に従うピペティング計画に従う測定を行った。より詳細には本発明に従う方法により実施される各測定に於ては、血清試料又は標準及び対照血清が、まず慣用の試験管中にピペットで入れられ、次にトレーサー溶液（Ａ）が直接ピペットで入れられ、そしてもどされ可溶化されたＴＳＨレセプター（Ｂ／Ｃ）が次にピペットで入れられる。２つの場合において得られる結果が実質的に同じであるとみなされることが解った。結果は図１にグラフで示される。慣用の２段階方法と本発明に従う１段階方法の相関関係として、０．９６の勾配を有する０．９７の相関係数が測定された。図２は、慣用の試験手順を用いる測定法用の、及び本発明に従う試験手順に於ける標準曲線が、実質的に同じであるとみなすことができることを示している。出願人のＴＲＡＫ検定の特定の成分を使用する本発明に従う方法の実施可能性が実証されたが、出願人は本発明に従う方法が、修正された手順によって得られる試薬を用いて、実施出来、同様の結果が得られると思っている。例えばＴＲＡＫ検定（登録商標）に於て使用される可溶化されたブタのＴＳＨレセプターの代わりにエス．コスタグリオラ等による上記の刊行物に記載された可溶化組替えＴＳＨレセプターを使用することも可能であり、そしてＴＲＡＫ検定の可溶化ブタＴＳＨレセプターと同等であることが示される。反応混合物の培養後に、変換されたＴＳＨレセプターが液体反応混合物から分離される方法も、本発明に従う方法にとって重要ではない。従って、慣用のＰＥＧ沈殿の代わりに、反応混合物の中のその前の反応に影響することなくそれ自体知られている他の固相−液相分離方法を用いることも可能である。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】１９９７年６月１９日【補正内容】請求の範囲１．試料中の測定されるべき自己抗体が、溶解されたＴＳＨレセプターの結合場所につき、適当に標識されたＴＳＨ製剤と競争させられ、そして測定されるべき自己抗体の量がこのＴＳＨレセプターに結合された標識の量から計算される、ヒトの血清又は血漿試料中の抗ＴＳＨレセプター自己抗体を測定する方法に於て、ＴＳＨレセプター、標識化ＴＳＨ、及び試料を含有している反応混合物を培養し、抗ＴＳＨレセプター自己抗体とこれに結合した標識化ＴＳＨのフラクションを有しているＴＳＨレセプターを固相に変換し、そして後者を液相から分離し、そして使用された標識について典型的な物理的な又は化学的検出方法によって、固相中の結合された標識化ＴＳＨの量を測定し、使用されるＴＳＨレセプターが、ヒト又は動物の甲状腺材料から抽出及び溶解によって得られたＴＳＨレセプター製剤であるか、または溶解された組替えＴＳＨレセプターであり、使用される標識化ＴＳＨが、粗製ウシＴＳＨの精製によって得られたＴＳＨ製剤の直接放射性ヨウ素化によって得られた放射性標識化ＴＳＨであり、蛋白質ミリグラムあたり４０ＩＵＴＳＵを越える生物活性を有しており、そして抗ＴＳＨ抗体カラム上のアフィニティークロマトグラフィ、そしてその後の末端カルボキル基を有し、ポリアミド被覆シリカゲルに基づいている弱酸性陽イオン交換樹脂上でのイオン交換クロマトグラフィーによって、市販の粗製ウシＴＳＨの精製により得ることができるものであり、該反応混合物の調製の為に、該試料、該標識化ＴＳＨ製剤、及び該ＴＳＨレセプターが本質的に同時に一緒にされ、そしてこのようにして得られた反応混合物が１段階培養にかけられることを特徴とする方法。２．反応混合物の調製のために、該試料及び標識化ＴＳＨ製剤がまず一緒にされ、そしてこの反応がＴＳＨレセプターのその後の添加によって開始させられることを特徴とする請求項１に記載の方法。３．ブタのＴＳＨレセプター製剤又は組替えヒトＴＳＨレセプターが使用される請求項１に記載の方法。４．抗ＴＳＨレセプター自己抗体を一部有するＴＳＨレセプターと、それに結合している標識化ＴＳＨとが、それ自身知られているＰＥＧ沈殿及びその後の遠心分離によって反応混合物の液相から分離される、前記請求項の何れか１に記載の方法。５．ＴＳＨレセプター、ＴＳＨ製剤、及び試料を含有している反応混合物を、適当な条件下で培養することによって、試料中の測定されるべき自己抗体が、可溶化されたＴＳＨレセプターの結合場所について、ＴＳＨ製剤と競争させられ、ＴＳＨレセプターに結合していないＴＳＨ製剤のフラクションが固相に結合させられそして標識化され、そして試料中の測定されるべき自己抗体の量が固相に結合している標識の量から計算される、ヒトの血清又は血漿試料中の抗ＴＳＨレセプター自己抗体を測定する方法であって、反応混合物の調製の為に、該試料、該標識化ＴＳＨ製剤、及び該ＴＳＨレセプターが本質的に同時に一緒にされ、そしてこのようにして得られた反応混合物が１段階培養にかけられることを特徴とする方法。６．培養するための反応混合物の製造の為に、試料及び標識化ＴＳＨ製剤がまず一緒にされ、そして反応がＴＳＨレセプターのその後での添加によって開始される請求項５に記載の方法。

Claims

【特許請求の範囲】１．試料中の測定されるべき自己抗体が、溶解されたＴＳＨレセプターの結合場所につき、適当に標識されたＴＳＨ製剤と競争させられ、そして測定されるべき自己抗体の量がこのＴＳＨレセプターに結合された標識の量から計算される、ヒトの血清又は血漿試料中の抗ＴＳＨレセプター自己抗体を測定する方法に於て、ＴＳＨレセプター、標識化ＴＳＨ、及び試料を含有している反応混合物を培養し、抗ＴＳＨレセプター自己抗体とこれに結合した標識化ＴＳＨのフラクションを有しているＴＳＨレセプターを固相に変換し、そして後者を液相から分離し、そして使用された標識について典型的な物理的な又は化学的検出方法によって、固相中の結合された標識化ＴＳＨの量を測定する段階、を含んでいる方法であって、該反応混合物の調製の為に、該試料、該標識化ＴＳＨ製剤、及び該ＴＳＨレセプターが本質的に同時に一緒にされ、そしてこのようにして得られた反応混合物が１段階培養にかけられることを特徴とする方法。２．反応混合物の調製のために、該試料及び標識化ＴＳＨ製剤がまず一緒にされ、そしてこの反応がＴＳＨレセプターのその後の添加によって開始させられることを特徴とする請求項１に記載の方法。３．使用されるＴＳＨレセプターが、ヒト又は動物の甲状腺材料から抽出及び溶解によって得られたＴＳＨレセプター製剤であるか、または溶解された組替えＴＳＨレセプターである請求項１又は２に記載の方法。４．ブタのＴＳＨレセプター製剤又は組替えヒトＴＳＨレセプターが使用される請求項３に記載の方法。５．使用される標識化ＴＳＨが、粗製ウシＴＳＨの精製によって得られたＴＳＨ製剤の直接放射性ヨウ素化によって得られた放射性標識化ＴＳＨであり、蛋白質ミリグラムあたり４０ＩＵＴＳＵを越える生物活性を有しており、そして抗ＴＳＨ抗体カラム上のアフィニティークロマトグラフィ、そしてその後の末端カルボキル基を有し、ポリアミド被覆シリカゲルに基づいている弱酸性陽イオン交換樹脂上でのイオン交換クロマトグラフィーによって、市販の粗製ウシＴＳＨの精製により得ることができるものである請求項１〜４の何れか１に記載の方法。６．抗ＴＳＨレセプター自己抗体を一部有するＴＳＨレセプターと、それに結合している標識化ＴＳＨが、それ自身知られているＰＥＧ沈殿及びその後の遠心分離によって反応混合物の液相から分離される、前記請求項の何れか１に記載の方法。７．ＴＳＨレセプター、ＴＳＨ製剤、及び試料を含有している反応混合物を、適当な条件下で培養することによって、試料中の測定されるべき自己抗体が、可溶化されたＴＳＨレセプターの結合場所について、ＴＳＨ製剤と競争させられ、ＴＳＨレセプターに結合していないＴＳＨ製剤のフラクションが固相に結合させられそして標識化され、そして試料中の測定されるべき自己抗体の量が固相に結合している標識の量から計算される、ヒトの血清又は血漿試料中の抗ＴＳＨレセプター自己抗体を測定する方法であって、反応混合物の調製の為に、該試料、該標識化ＴＳＨ製剤、及び該ＴＳＨレセプターが本質的に同時に一緒にされ、そしてこのようにして得られた反応混合物が１段階培養にかけられることを特徴とする方法。８．培養するための反応混合物の製造の為に、試料及び標識化ＴＳＨ製剤がまず一緒にさせられ、そして反応がＴＳＨレセプターのその後の添加によって、開始される請求項７に記載の方法。