JPS58129990A - アミノ酸のラセミ化方法 - Google Patents
アミノ酸のラセミ化方法Info
- Publication number
- JPS58129990A JPS58129990A JP1091482A JP1091482A JPS58129990A JP S58129990 A JPS58129990 A JP S58129990A JP 1091482 A JP1091482 A JP 1091482A JP 1091482 A JP1091482 A JP 1091482A JP S58129990 A JPS58129990 A JP S58129990A
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- Japan
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- methionine
- homoserine
- alanine
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
リンをラセミ化する方法に関する。更に詳しくはアエロ
モナス属に属しメチオニン、アラニンまたはホモセリン
をラセミ化する能力を有する菌株を培養し、その培養物
、その培養物から分離した培養菌体または培養菌体がら
の抽出物の存在下にメチオニン、アラニンまたはホモセ
リンをラセミ化する方法に関する。
モナス属に属しメチオニン、アラニンまたはホモセリン
をラセミ化する能力を有する菌株を培養し、その培養物
、その培養物から分離した培養菌体または培養菌体がら
の抽出物の存在下にメチオニン、アラニンまたはホモセ
リンをラセミ化する方法に関する。
メチオニン、アラニンおよびホモセリンは何れもアミノ
酸の一種であり、メチオニンは医薬、飼料添加物として
、アラニンは医薬、食品添加物として、またホモセリン
は医薬原料および生化学試薬として何れも重要な物質で
ある。
酸の一種であり、メチオニンは医薬、飼料添加物として
、アラニンは医薬、食品添加物として、またホモセリン
は医薬原料および生化学試薬として何れも重要な物質で
ある。
これらのアミノ酸は立体構造の相異により、二種の光学
異性体があり、Ｌ型およびＤ型が存在する。発酵法、酵
素法で得られるアミノ酸は通常Ｌ型であり、有機合成法
によって得られるアミノ酸はＤＬ型である。
異性体があり、Ｌ型およびＤ型が存在する。発酵法、酵
素法で得られるアミノ酸は通常Ｌ型であり、有機合成法
によって得られるアミノ酸はＤＬ型である。
蛋白質の構成成分としてのアミノ酸はＬ型であり、生理
活性を有する多くのアミノ俊もＬ型である。しかし乍ら
、生体成分には少量のＤ型のアミノ酸も存在し、生体内
で有意義な働きをしている。
活性を有する多くのアミノ俊もＬ型である。しかし乍ら
、生体成分には少量のＤ型のアミノ酸も存在し、生体内
で有意義な働きをしている。
輸液等に使用されるアミノ酸はＬ型である。Ｄ型アミノ
酸は生化学試薬としての用途があり価格も高い。ＤＬ−
アミノ酸は、例えばメチオニンのよりに飼料添加物とし
て大量に使用されているものもある。また、Ｌ型および
Ｄ型のアミノ酸はラセミ化することによって１）Ｌ型に
なる。ＤＬアミノ酸は公知の光学分割法によってＤ型お
よびＬ型に分割することが出来る。したがって、Ｌ型、
Ｄ型、１）Ｌ型の何れであってもラセミ化と光学分割を
行なうことによって必要とする型のアミノ酸を得ること
が出来る。以上の記載から理解されるようにアミノ酸の
ラセミ化は、アミノ酸工業にとって重要な工程の一つで
ある。
酸は生化学試薬としての用途があり価格も高い。ＤＬ−
アミノ酸は、例えばメチオニンのよりに飼料添加物とし
て大量に使用されているものもある。また、Ｌ型および
Ｄ型のアミノ酸はラセミ化することによって１）Ｌ型に
なる。ＤＬアミノ酸は公知の光学分割法によってＤ型お
よびＬ型に分割することが出来る。したがって、Ｌ型、
Ｄ型、１）Ｌ型の何れであってもラセミ化と光学分割を
行なうことによって必要とする型のアミノ酸を得ること
が出来る。以上の記載から理解されるようにアミノ酸の
ラセミ化は、アミノ酸工業にとって重要な工程の一つで
ある。
アミノ酸のラセミ化の方法としては、アミノ酸の水溶液
を高温高圧処理する方法が知られている。
を高温高圧処理する方法が知られている。
しかし、この方法は高温高圧処理に耐える装置を必要と
すること、高温高圧にするために予断のエネルギーを必
要とすること、高温高圧処理中にラセミ化反応以外の副
反応を生じ易いことなどの欠点を有する。
すること、高温高圧にするために予断のエネルギーを必
要とすること、高温高圧処理中にラセミ化反応以外の副
反応を生じ易いことなどの欠点を有する。
本発明者等は、これらの欠点のないラセミ化方法を種々
検討した結果、アエロモナス属に属する菌株の培養物、
該培養物から分離した培養菌体または該培養菌体からの
抽出物が、メチオニン、アラニンおよびホモセリンのラ
セミ化反応を触媒することを見出し、その発見に基づい
て本発明を完成させることが出来た。
検討した結果、アエロモナス属に属する菌株の培養物、
該培養物から分離した培養菌体または該培養菌体からの
抽出物が、メチオニン、アラニンおよびホモセリンのラ
セミ化反応を触媒することを見出し、その発見に基づい
て本発明を完成させることが出来た。
本発明の方法では、アエロモナス属に属する菌株が用い
られるが、後述した実施例に使用した菌株は、本発明者
等が自然界より分離した菌株で、アエロモナス・ブンク
タータ・サブスピーシス・キャビアエ（Ａ４猪藺鵠−た
＝佐久１ＪｉｐｔｃＬ匂三旦旦） ＭＴ−１ｏ２４３（
ｐｐ；ＦＬＭＢＰ−２１）およびＭＴ−１０２４４（３
ＥＲＭ ＢＰ−２２）である。
られるが、後述した実施例に使用した菌株は、本発明者
等が自然界より分離した菌株で、アエロモナス・ブンク
タータ・サブスピーシス・キャビアエ（Ａ４猪藺鵠−た
＝佐久１ＪｉｐｔｃＬ匂三旦旦） ＭＴ−１ｏ２４３（
ｐｐ；ＦＬＭＢＰ−２１）およびＭＴ−１０２４４（３
ＥＲＭ ＢＰ−２２）である。
これ等の菌株の分類学的性質は次の通りであり両菌株の
性質は互に僅かに異なり、またアエロモナスｅブンクタ
ータ・サブスピーシス・キャビアエのタイプ菌株である
ＡＴＯＯ１５４６８とも僅かに異なるが、分類学的には
同一の分類群に属すると考えられる。次にこれ等の菌株
の分類学的性質を（す。
性質は互に僅かに異なり、またアエロモナスｅブンクタ
ータ・サブスピーシス・キャビアエのタイプ菌株である
ＡＴＯＯ１５４６８とも僅かに異なるが、分類学的には
同一の分類群に属すると考えられる。次にこれ等の菌株
の分類学的性質を（す。
形態学的性質：
ＭＴ−１０２４３およびＭＴ−１０２４４の両菌株とも
栄養寒天およびプレイン・バート・インヒユージョン寒
天培地上で２４時間後の集落は平滑、金縁で不透明であ
る。羊血液寒天上では平滑、全線で輝いており、増殖の
盛んなところでは灰色の色素が存在する。兎および羊血
液寒天上で２４時間後にＭＴ−１０２４３で集落の廻り
に非常に弱い溶血現象がみられるが、ＭＴ−１０２４４
は溶血現象を示さない。両菌株とも強い運動性があり、
ダラム陰性で極性のまたは純極性の単鞭毛をも有する短
桿菌である。
栄養寒天およびプレイン・バート・インヒユージョン寒
天培地上で２４時間後の集落は平滑、金縁で不透明であ
る。羊血液寒天上では平滑、全線で輝いており、増殖の
盛んなところでは灰色の色素が存在する。兎および羊血
液寒天上で２４時間後にＭＴ−１０２４３で集落の廻り
に非常に弱い溶血現象がみられるが、ＭＴ−１０２４４
は溶血現象を示さない。両菌株とも強い運動性があり、
ダラム陰性で極性のまたは純極性の単鞭毛をも有する短
桿菌である。
生化学的性質：
ＡＴＯＯＭＴ ＭＴ
１５４６８ １０２４３ １０２４４カタラー
ゼ ＋ ＋ 十オキシダーゼ ＋
＋ ＋酸化−発酵培地 グルコースの酸化 ＋ ＋ ＋グルコ
ースの発酵 ＋ 十 士アルカリ性グ
ルコース −−− インドールの生１戊 ＋ 十 十メチ
ルレッド室温 ＋ ＋ ＋カラエ
ル室温 シラービ ボキシラーゼ 硫化水素（ＴＳＩ） −−− ウレアーゼ −−− 説アミノ化 グルコン酸の酸化 −−− ゼラチナーゼ ＋ ＋ ＋硝酸塩
の還元 ＋ モ ＋ペクチンの加
水分解 −−− クエン酸の利用 −−− り一酒石酸の利用 −−− エスクリンの加水 ＋ 七 十分群 酸生成 のガス発生 からのガス発生 からのガス発生 からの酸生成 しよ糖からの酸生成 十 ＋ 十の酸生
成 ０ＮＰＧの生成 モ モ ” −カゼ
イン加水分解 ＋ モ ＋フォスファ
ターゼ − 士 ＋７．５４ＮｄＯｆ
耐性 −−− ０５％Ｎａｒ＋Ｊ要求性 −−− 唯一の炭素源としての生育 （スタンニエルの培地） ＤＬ−アルギニン モ ＋ モＬ−
ヒスチジン ＋ ＋ ＋Ｄ−グルコー
ス ＋ ＋ ＋Ｄ−マンニトール
＋ 十 十し−アラビノース ＋
＋ 十対 照 −−− ル培地） 以上の菌学的諸性状を、Ｂｚ＊Ｆ、）／ ｊ −Ｍａｎ
ｓｂｏ、ｌ ｏｆ Ｄ４−ムｉ旭剋ｙｔ ＢαＯムルＬ
α１α９ｙ第８版（１９７４）の分類基準から判断すれ
ば、菌株ＭＴ−１０２４３およびＭＴ−１０２４４はア
エロモナス プンクタータ サブスピーシス キャビア
エ（Ａ ｃｃｙｍｅｎｔｚｂ ｐｗｒｂｃ、１ｔｚＪｂ
＋Ｉｗ４ｉｐ４０ｉｒＬｉ ｃａｖＱａ＜ ）に属する
。
ゼ ＋ ＋ 十オキシダーゼ ＋
＋ ＋酸化−発酵培地 グルコースの酸化 ＋ ＋ ＋グルコ
ースの発酵 ＋ 十 士アルカリ性グ
ルコース −−− インドールの生１戊 ＋ 十 十メチ
ルレッド室温 ＋ ＋ ＋カラエ
ル室温 シラービ ボキシラーゼ 硫化水素（ＴＳＩ） −−− ウレアーゼ −−− 説アミノ化 グルコン酸の酸化 −−− ゼラチナーゼ ＋ ＋ ＋硝酸塩
の還元 ＋ モ ＋ペクチンの加
水分解 −−− クエン酸の利用 −−− り一酒石酸の利用 −−− エスクリンの加水 ＋ 七 十分群 酸生成 のガス発生 からのガス発生 からのガス発生 からの酸生成 しよ糖からの酸生成 十 ＋ 十の酸生
成 ０ＮＰＧの生成 モ モ ” −カゼ
イン加水分解 ＋ モ ＋フォスファ
ターゼ − 士 ＋７．５４ＮｄＯｆ
耐性 −−− ０５％Ｎａｒ＋Ｊ要求性 −−− 唯一の炭素源としての生育 （スタンニエルの培地） ＤＬ−アルギニン モ ＋ モＬ−
ヒスチジン ＋ ＋ ＋Ｄ−グルコー
ス ＋ ＋ ＋Ｄ−マンニトール
＋ 十 十し−アラビノース ＋
＋ 十対 照 −−− ル培地） 以上の菌学的諸性状を、Ｂｚ＊Ｆ、）／ ｊ −Ｍａｎ
ｓｂｏ、ｌ ｏｆ Ｄ４−ムｉ旭剋ｙｔ ＢαＯムルＬ
α１α９ｙ第８版（１９７４）の分類基準から判断すれ
ば、菌株ＭＴ−１０２４３およびＭＴ−１０２４４はア
エロモナス プンクタータ サブスピーシス キャビア
エ（Ａ ｃｃｙｍｅｎｔｚｂ ｐｗｒｂｃ、１ｔｚＪｂ
＋Ｉｗ４ｉｐ４０ｉｒＬｉ ｃａｖＱａ＜ ）に属する
。
本発明に使用するアエロモナス楓の菌株は通称嫌気性菌
であるが、通常、嫌気的により好気的条件下で培養した
方が増殖が順調に進行する。培養温度は２０〜４０°Ｃ
である。培養中の培地のＰＨは中性または微アルカリ性
に維持することが望ましい。培養期間は、通常１〜６日
間である。
であるが、通常、嫌気的により好気的条件下で培養した
方が増殖が順調に進行する。培養温度は２０〜４０°Ｃ
である。培養中の培地のＰＨは中性または微アルカリ性
に維持することが望ましい。培養期間は、通常１〜６日
間である。
培地に使用する炭素源および窒素源は、使用菌の利用可
能なものならば何れの種類な用いてもよい。即ち、炭素
源としては、グルコース、グリ七ロール、フラクトース
、シュクロース、澱粉加水分解液、糖蜜などの種々の炭
水化物が使用出来る。
能なものならば何れの種類な用いてもよい。即ち、炭素
源としては、グルコース、グリ七ロール、フラクトース
、シュクロース、澱粉加水分解液、糖蜜などの種々の炭
水化物が使用出来る。
窒素源としては、アンモニア、塩化アンモニウム、硫酸
アンモニウム、炭酸アンモニウム、酢酸アンモニウムな
どの各種の無機および有機アンモニウム塩類、または肉
エキス、酵母エキス、コーン・スチープ・リカー、カゼ
イン加水分解物、フイシュミールあるいはその消化物、
脱脂大豆粕あるいはその消化物などの天然窒素源が使用
可能である。
アンモニウム、炭酸アンモニウム、酢酸アンモニウムな
どの各種の無機および有機アンモニウム塩類、または肉
エキス、酵母エキス、コーン・スチープ・リカー、カゼ
イン加水分解物、フイシュミールあるいはその消化物、
脱脂大豆粕あるいはその消化物などの天然窒素源が使用
可能である。
天然窒素源の多くの場合は、窒素源であるとともに炭素
源にもなり得る。更に無機物として燐酸第一水素カリウ
ム、燐酸第二水素カリウム、塩化カリウム、塩化ナトリ
ウム、硫酸マグネシウム、硫酸第一鉄なども必要に応じ
て使用する。
源にもなり得る。更に無機物として燐酸第一水素カリウ
ム、燐酸第二水素カリウム、塩化カリウム、塩化ナトリ
ウム、硫酸マグネシウム、硫酸第一鉄なども必要に応じ
て使用する。
本発明に使用する酵素源としては、メチオニン、アラニ
ンまたはホモセリンをラセミ化する能力を有するアエロ
モナス属の菌株の培養物そのまま、または培養液から遠
心分離などの方法により採取した生菌体、その乾燥菌体
あるいは菌体を磨砕、自己消化、音波処理などの処理に
より得られた菌体処理物、更にはこれらの菌体よりの抽
出物並びに該抽出物より得られる酵素の柑成物が利用可
能である。勿論、これらの固定化酵素または固定イｉ菌
体でもよい。
ンまたはホモセリンをラセミ化する能力を有するアエロ
モナス属の菌株の培養物そのまま、または培養液から遠
心分離などの方法により採取した生菌体、その乾燥菌体
あるいは菌体を磨砕、自己消化、音波処理などの処理に
より得られた菌体処理物、更にはこれらの菌体よりの抽
出物並びに該抽出物より得られる酵素の柑成物が利用可
能である。勿論、これらの固定化酵素または固定イｉ菌
体でもよい。
メチオニン、アラニンおよびホモセリンのラセミ化反応
は、水溶液中で行われるが、これらのアミノ酸の濃度に
は特に制限はない。反応温度は２０〜５０°Ｃ１反応液
のＰＨは５〜１０の範囲内が好適である。
は、水溶液中で行われるが、これらのアミノ酸の濃度に
は特に制限はない。反応温度は２０〜５０°Ｃ１反応液
のＰＨは５〜１０の範囲内が好適である。
次に実施例により本発明を説明するが、実施例における
これらのアミノ酸のラセミ化の程度の測定は、旋光度お
よびバイオアッセイにより行なりた。なおチはすべて重
量％で示した。
これらのアミノ酸のラセミ化の程度の測定は、旋光度お
よびバイオアッセイにより行なりた。なおチはすべて重
量％で示した。
実施例１
アエロモナスφブンクタータ・サブスピーシス・キャビ
アエＭＴ−１０２４３を次の培地５０ｍ１を入れた坂ロ
フラスコに一白金耳接種し、３０°Ｃにて２４時間振盪
培養した。
アエＭＴ−１０２４３を次の培地５０ｍ１を入れた坂ロ
フラスコに一白金耳接種し、３０°Ｃにて２４時間振盪
培養した。
培地組成 肉エキス １０％
ペプトン ０５％
酵母エキス ０１％
初期ＰＨ７，０
培養液１１を遠心分離して、菌体を果め次のラセ
１ミ化反応を供した。
１ミ化反応を供した。
Ｄ−）チオニン５０ｇ、ピリドキサール燐酸１００り、
を含む燐酸緩衝液１ｒ分から得られた菌体を加え、窒素
シール中でゆるやかに攪拌しながら３５°Ｃで２４時間
反応を行なった。反応後、反応液の分析を行った結果、
反応はは！、”１００％進行し反応液中にＤ−メチオニ
ンとＬ−メチオニンかはＶ同量づつ含まれていた。Ｄ−
メチオニンの代りにＤ−アラニン、Ｄ−ホモセリンを用
いた実験においても同様にＤ型とＬ型がはｇ同量づつ得
られた。
を含む燐酸緩衝液１ｒ分から得られた菌体を加え、窒素
シール中でゆるやかに攪拌しながら３５°Ｃで２４時間
反応を行なった。反応後、反応液の分析を行った結果、
反応はは！、”１００％進行し反応液中にＤ−メチオニ
ンとＬ−メチオニンかはＶ同量づつ含まれていた。Ｄ−
メチオニンの代りにＤ−アラニン、Ｄ−ホモセリンを用
いた実験においても同様にＤ型とＬ型がはｇ同量づつ得
られた。
実施例２
実施例１の菌株ＭＴ−１０２４３の代りにＭＴ−１０２
４４を用い同様の実験を行なった。反応液を分析した結
果、メチオニン、アラニンおよびホモセリンの何れの場
合もＤ型およびＬ型がはｙ同量台まれていた。
４４を用い同様の実験を行なった。反応液を分析した結
果、メチオニン、アラニンおよびホモセリンの何れの場
合もＤ型およびＬ型がはｙ同量台まれていた。
実施例３
実施例１のＤ−メチオニン、ｐ−アラニンおよびＤ−ホ
モセリンの代りにそれぞれＬ−メチオニン、Ｌ−アラニ
ンおよびＬ−ホモセリンを用い、実施例１と同様の実験
を行なった結果、それぞれのアミノ酸のＬ型とＤ型かは
ｇ同量づつ含まれていた。
モセリンの代りにそれぞれＬ−メチオニン、Ｌ−アラニ
ンおよびＬ−ホモセリンを用い、実施例１と同様の実験
を行なった結果、それぞれのアミノ酸のＬ型とＤ型かは
ｇ同量づつ含まれていた。
特許出願人 三井東圧化学株式会社
Claims (1)
- アエロモナス属に属しメチオニン、アラニンまたはホモ
セリンをラセミ化する能力を有する菌株を培養し、その
培養物、該培養物から分離した培養菌体または該培養菌
体がらの抽出物の存在下にメチオニン、アラニンおよび
ホモセリンからなる群から選ばれたアミノ酸をラセミ化
することを特徴とするアミノ酸のラセミ化方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1091482A JPS58129990A (ja) | 1982-01-28 | 1982-01-28 | アミノ酸のラセミ化方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1091482A JPS58129990A (ja) | 1982-01-28 | 1982-01-28 | アミノ酸のラセミ化方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58129990A true JPS58129990A (ja) | 1983-08-03 |
| JPH0254075B2 JPH0254075B2 (ja) | 1990-11-20 |
Family
ID=11763526
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1091482A Granted JPS58129990A (ja) | 1982-01-28 | 1982-01-28 | アミノ酸のラセミ化方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS58129990A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5019503A (en) * | 1986-06-02 | 1991-05-28 | Mitsubishi Petrochemical Co., Ltd. | Method for production of l-threonine |
-
1982
- 1982-01-28 JP JP1091482A patent/JPS58129990A/ja active Granted
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5019503A (en) * | 1986-06-02 | 1991-05-28 | Mitsubishi Petrochemical Co., Ltd. | Method for production of l-threonine |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0254075B2 (ja) | 1990-11-20 |
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