JPH0254075B2 - - Google Patents
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- Publication number
- JPH0254075B2 JPH0254075B2 JP1091482A JP1091482A JPH0254075B2 JP H0254075 B2 JPH0254075 B2 JP H0254075B2 JP 1091482 A JP1091482 A JP 1091482A JP 1091482 A JP1091482 A JP 1091482A JP H0254075 B2 JPH0254075 B2 JP H0254075B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- amino acids
- methionine
- type
- homoserine
- alanine
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
本発明は、メチオニン，アラニンまたはホモセ
リンをラセミ化する方法に関する。更に詳しくは
アエロモナス属に属しメチオニン，アラニンまた
はホモセリンをラセミ化する能力を有する菌株を
培養し、その培養物、その培養物から分離した培
養菌体または培養菌体から抽出物の存在下にメチ
オニン，アラニンまたはホモセリンをラセミ化す
る方法に関する。 メチオニン，アラニンおよびホモセリンは何れ
もアミノ酸の一種であり、メチオニンは医薬、飼
料添加物として、アラニンは医薬、食品添加物と
して、またホモセリンは医薬原料および生化学試
薬として何れも重要な物質である。 これらのアミノ酸は立体構造の相異により、二
種の光学異性体があり、Ｌ型およびＤ型が存在す
る。発酵法、酵素法で得られるアミノ酸は通常Ｌ
型であり、有機合成法によつて得られるアミノ酸
はDL型である。 蛋白質の構成成分としてのアミノ酸はＬ型であ
り、生理活性を有する多くのアミノ酸もＬ型であ
る。しかし乍ら、生体成分には少量のＤ型のアミ
ノ酸も存在し、生体内で有意義な働きをしてい
る。輸液等に使用されるアミノ酸はＬ型である。
Ｄ型アミノ酸は生化学試薬としての用途があり価
格も高い。DL―アミノ酸は、例えばメチオニン
のように飼料添加物として大量に使用されている
ものもある。また、Ｌ型およびＤ型のアミノ酸は
ラセミ化するこによつてDL型になる。DLアミノ
酸は公知の光学分割法によつてＤ型およびＬ型に
分割することが出来る。したがつて、Ｌ型、Ｄ
型、DL型の何れであつてもラセミ化と光学分割
を行なうことによつて必要とする型のアミノ酸を
得ることが出来る。以上の記載から理解されるよ
うにアミノ酸のラセミ化は、アミノ酸工業にとつ
て重要な工程の一つである。 アミノ酸のラセミ化の方法としては、アミノ酸
の水溶液を高温高圧処理する方法が知られてい
る。しかし、この方法は高温高圧処理に耐える装
置を必要とすること、高温高圧にするために多量
のエネルギーを必要とすること、高温高圧処理中
にラセミ化反応以外の副反応を生じ易いことなど
の欠点を有する。 本発明者等は、これらの欠点のないラセミ化方
法を種々検討した結果、アエロモナス属に属する
菌株の培養物、該培養物から分離した培養菌体ま
たは該培養菌体からの抽出物、メチオニン，アラ
ニンおよびホモセリンのラセミ化反応を触媒する
ことを見出し、その発見に基づいて本発明を完成
させることが出来た。 本発明の方法では、アエロモナス属に属する菌
株が用いられるが、後述した実施例に使用した菌
株は、本発明者等が自然界より分離した菌株で、
アエロモナス・プンクタータ・サブスピーシス・
キヤビアエ（Aeromonas punctata
subspecies caviae）MT―10243（FERM BP―
21）およびMT―10244（FERM BP―22）であ
る。 これ等の菌株の分類学的性質は次の通りであり
両菌株の性質は互に僅かに異なり、またアエロモ
ナス・プンクタータ・サブスピーシス・キヤビア
エのタイプ菌株であるATCC15468とも僅かに異
なるが、分類学的には同一の分類群に属すると考
えられる。次にこれ等の菌株の分類学的性質を記
す。 形態学的性質： MT―10243およびMT―10244の両菌株とも栄
養寒天およびプレイン・ハート・インヒユージヨ
ン寒天培地上で24時間後の集落は平滑、全縁で不
透明である。羊血液寒天上では平滑、全縁で輝い
ており、増殖の盛んなところでは灰色の色素が存
在する。兎および羊血液寒天上で24時間後にMT
―10243で集落の廻りに非常に弱い溶血現象がみ
られるが、MT―10244は溶血現象を示さない。
両菌株とも強い運動性があり、グラム陰性で極性
のまたは純極性の単鞭毛をも有する短桿菌であ
る。 生化学的性質：
リンをラセミ化する方法に関する。更に詳しくは
アエロモナス属に属しメチオニン，アラニンまた
はホモセリンをラセミ化する能力を有する菌株を
培養し、その培養物、その培養物から分離した培
養菌体または培養菌体から抽出物の存在下にメチ
オニン，アラニンまたはホモセリンをラセミ化す
る方法に関する。 メチオニン，アラニンおよびホモセリンは何れ
もアミノ酸の一種であり、メチオニンは医薬、飼
料添加物として、アラニンは医薬、食品添加物と
して、またホモセリンは医薬原料および生化学試
薬として何れも重要な物質である。 これらのアミノ酸は立体構造の相異により、二
種の光学異性体があり、Ｌ型およびＤ型が存在す
る。発酵法、酵素法で得られるアミノ酸は通常Ｌ
型であり、有機合成法によつて得られるアミノ酸
はDL型である。 蛋白質の構成成分としてのアミノ酸はＬ型であ
り、生理活性を有する多くのアミノ酸もＬ型であ
る。しかし乍ら、生体成分には少量のＤ型のアミ
ノ酸も存在し、生体内で有意義な働きをしてい
る。輸液等に使用されるアミノ酸はＬ型である。
Ｄ型アミノ酸は生化学試薬としての用途があり価
格も高い。DL―アミノ酸は、例えばメチオニン
のように飼料添加物として大量に使用されている
ものもある。また、Ｌ型およびＤ型のアミノ酸は
ラセミ化するこによつてDL型になる。DLアミノ
酸は公知の光学分割法によつてＤ型およびＬ型に
分割することが出来る。したがつて、Ｌ型、Ｄ
型、DL型の何れであつてもラセミ化と光学分割
を行なうことによつて必要とする型のアミノ酸を
得ることが出来る。以上の記載から理解されるよ
うにアミノ酸のラセミ化は、アミノ酸工業にとつ
て重要な工程の一つである。 アミノ酸のラセミ化の方法としては、アミノ酸
の水溶液を高温高圧処理する方法が知られてい
る。しかし、この方法は高温高圧処理に耐える装
置を必要とすること、高温高圧にするために多量
のエネルギーを必要とすること、高温高圧処理中
にラセミ化反応以外の副反応を生じ易いことなど
の欠点を有する。 本発明者等は、これらの欠点のないラセミ化方
法を種々検討した結果、アエロモナス属に属する
菌株の培養物、該培養物から分離した培養菌体ま
たは該培養菌体からの抽出物、メチオニン，アラ
ニンおよびホモセリンのラセミ化反応を触媒する
ことを見出し、その発見に基づいて本発明を完成
させることが出来た。 本発明の方法では、アエロモナス属に属する菌
株が用いられるが、後述した実施例に使用した菌
株は、本発明者等が自然界より分離した菌株で、
アエロモナス・プンクタータ・サブスピーシス・
キヤビアエ（Aeromonas punctata
subspecies caviae）MT―10243（FERM BP―
21）およびMT―10244（FERM BP―22）であ
る。 これ等の菌株の分類学的性質は次の通りであり
両菌株の性質は互に僅かに異なり、またアエロモ
ナス・プンクタータ・サブスピーシス・キヤビア
エのタイプ菌株であるATCC15468とも僅かに異
なるが、分類学的には同一の分類群に属すると考
えられる。次にこれ等の菌株の分類学的性質を記
す。 形態学的性質： MT―10243およびMT―10244の両菌株とも栄
養寒天およびプレイン・ハート・インヒユージヨ
ン寒天培地上で24時間後の集落は平滑、全縁で不
透明である。羊血液寒天上では平滑、全縁で輝い
ており、増殖の盛んなところでは灰色の色素が存
在する。兎および羊血液寒天上で24時間後にMT
―10243で集落の廻りに非常に弱い溶血現象がみ
られるが、MT―10244は溶血現象を示さない。
両菌株とも強い運動性があり、グラム陰性で極性
のまたは純極性の単鞭毛をも有する短桿菌であ
る。 生化学的性質：
【表】
生成
【表】
【表】
ル培地）
以上の菌学的諸性状を、Bergeys―Manual of
De―terminative Bacteriology第８版（1974）
の分類基準から判断すれば、菌株MT―10243お
よびMT―10244はアエロモナス・プンクタータ
サブスピーシス キヤビアエ（Aeromonas
punctata subspecies caviae）に属する。 本発明に使用するアエロモナス属の菌株は通
称、嫌気性菌であるが、通常、嫌気的により好気
的条件下で培養した方が増殖が順調に進行する。
培養温度は20〜40℃である。培養中の培地のPHは
中性または微アルカリ性に維持することが望まし
い。培養期間は、通常１〜３日間である。 培地に使用する炭素源および窒素源は、使用菌
の利用可能なものならば何れの種類を用いてもよ
い。即ち、炭素源としては、グルコース、グリセ
ロール、フラクトース、シユクロース、澱粉加水
分解液、糖蜜などの種々の炭水化物が使用出来
る。窒素源としては、アンモニア、塩化アンモニ
ウム、硫酸アンモニウム、炭酸アンモニウム、酢
酸アンモニウムなどの各種の無機および有機アン
モニウム塩類、または肉エキス、酵母エキス、コ
ーン・スチープ・リカー、カゼイン加水分解物、
フイシユミールあるいはその消化物、脱脂大豆粕
あるいはその消化物などの天然窒素源が使用可能
である。天然窒素源の多くの場合は、窒素源であ
るとともに炭素源にもなり得る。更に無機物とし
て燐酸第一水素カリウム、燐酸第二水素カリウ
ム、塩化カリウム、塩化ナトリウム、硫酸マグネ
シウム、硫酸第一鉄なども必要に応じて使用す
る。 本発明に使用する酵素源としては、メチオニ
ン，アラニンまたはホモセリンをラセミ化する能
力を有するアエロモナス属の菌株の培養物そのま
ま、または培養液から遠心分離などの方法により
採取した生菌体、その乾燥菌体あるいは菌体を磨
砕、自己消化、音波処理などの処理により得られ
た菌体処理物、更にはこれらの菌体よりの抽出物
並びに該抽出物より得られる酵素の粗成物が利用
可能である。勿論、これらの固定化酵素または固
定化菌体でもよい。 メチオニン，アラニンおよびホモセリンのラセ
ミ化反応は、水溶液中で行われるが、これらのア
ミノ酸の濃度には特に制限はない。反応温度は20
〜50℃、反応液のPHは５〜10の範囲内が好適であ
る。 次に実施例により本発明を説明するが、実施例
におけるこれらのアミノ酸のラセミ化の程度の測
定は、施光度およびバイオアツセイにより行なつ
た。なお％はすべて重量％で示した。 実施例 １ アエロモナス・プンクタータ・サブスピーシ
ス・キヤビアエMT―10243を次の培地50mlを入
れた坂口フラスコに一白金耳接種し、30℃にて24
時間振盪培養した。 培地組成 肉エキス 1.0％ ペプトン 0.5％ 酵母エキス 0.1％ 初期PH 7.0 培養液１に遠心分離して、菌株を集め次のラ
セミ化反応に供した。 Ｄ―メチニオン50ｇ、ピリドキサール燐酸100
mg、を含む燐酸緩衝液１分から得られた菌体を
加え、窒素シール中でゆるやかに撹拌しながら35
℃で24時間反応を行なつた。反応後、反応液の分
析を行つた結果、反応はほゞ100％進行し反応液
中にＤ―メチオニンとＬ―メチオニンがほゞ同量
づつ含まれていた。Ｄ―メチオニンの代りにＤ―
アラニン、Ｄ―ホモセリンを用いた実験において
も同様にＤ型とＬ型がほゞ同量づつ得られた。 実施例 ２ 実施例１の菌株MT―10243の代りにMT―
10244を用い同様の実験を行なつた。反応液を分
析した結果、メチオニン，アラニンおよびホモセ
リンの何れの場合もＤ型およびＬ型がほゞ同量含
まれていた。 実施例 ３ 実施例１のＤ―メチオニン、Ｄ―アラニンおよ
びＤ―ホモセリンの代りにそれぞれＬ―メチオニ
ン、Ｌ―アラニンおよびＬ―ホモセリンを用い、
実施例１と同様の実験を行なつた結果、それぞれ
のアミノ酸のＬ型とＤ型がほゞ同量づつ含まれて
いた。
以上の菌学的諸性状を、Bergeys―Manual of
De―terminative Bacteriology第８版（1974）
の分類基準から判断すれば、菌株MT―10243お
よびMT―10244はアエロモナス・プンクタータ
サブスピーシス キヤビアエ（Aeromonas
punctata subspecies caviae）に属する。 本発明に使用するアエロモナス属の菌株は通
称、嫌気性菌であるが、通常、嫌気的により好気
的条件下で培養した方が増殖が順調に進行する。
培養温度は20〜40℃である。培養中の培地のPHは
中性または微アルカリ性に維持することが望まし
い。培養期間は、通常１〜３日間である。 培地に使用する炭素源および窒素源は、使用菌
の利用可能なものならば何れの種類を用いてもよ
い。即ち、炭素源としては、グルコース、グリセ
ロール、フラクトース、シユクロース、澱粉加水
分解液、糖蜜などの種々の炭水化物が使用出来
る。窒素源としては、アンモニア、塩化アンモニ
ウム、硫酸アンモニウム、炭酸アンモニウム、酢
酸アンモニウムなどの各種の無機および有機アン
モニウム塩類、または肉エキス、酵母エキス、コ
ーン・スチープ・リカー、カゼイン加水分解物、
フイシユミールあるいはその消化物、脱脂大豆粕
あるいはその消化物などの天然窒素源が使用可能
である。天然窒素源の多くの場合は、窒素源であ
るとともに炭素源にもなり得る。更に無機物とし
て燐酸第一水素カリウム、燐酸第二水素カリウ
ム、塩化カリウム、塩化ナトリウム、硫酸マグネ
シウム、硫酸第一鉄なども必要に応じて使用す
る。 本発明に使用する酵素源としては、メチオニ
ン，アラニンまたはホモセリンをラセミ化する能
力を有するアエロモナス属の菌株の培養物そのま
ま、または培養液から遠心分離などの方法により
採取した生菌体、その乾燥菌体あるいは菌体を磨
砕、自己消化、音波処理などの処理により得られ
た菌体処理物、更にはこれらの菌体よりの抽出物
並びに該抽出物より得られる酵素の粗成物が利用
可能である。勿論、これらの固定化酵素または固
定化菌体でもよい。 メチオニン，アラニンおよびホモセリンのラセ
ミ化反応は、水溶液中で行われるが、これらのア
ミノ酸の濃度には特に制限はない。反応温度は20
〜50℃、反応液のPHは５〜10の範囲内が好適であ
る。 次に実施例により本発明を説明するが、実施例
におけるこれらのアミノ酸のラセミ化の程度の測
定は、施光度およびバイオアツセイにより行なつ
た。なお％はすべて重量％で示した。 実施例 １ アエロモナス・プンクタータ・サブスピーシ
ス・キヤビアエMT―10243を次の培地50mlを入
れた坂口フラスコに一白金耳接種し、30℃にて24
時間振盪培養した。 培地組成 肉エキス 1.0％ ペプトン 0.5％ 酵母エキス 0.1％ 初期PH 7.0 培養液１に遠心分離して、菌株を集め次のラ
セミ化反応に供した。 Ｄ―メチニオン50ｇ、ピリドキサール燐酸100
mg、を含む燐酸緩衝液１分から得られた菌体を
加え、窒素シール中でゆるやかに撹拌しながら35
℃で24時間反応を行なつた。反応後、反応液の分
析を行つた結果、反応はほゞ100％進行し反応液
中にＤ―メチオニンとＬ―メチオニンがほゞ同量
づつ含まれていた。Ｄ―メチオニンの代りにＤ―
アラニン、Ｄ―ホモセリンを用いた実験において
も同様にＤ型とＬ型がほゞ同量づつ得られた。 実施例 ２ 実施例１の菌株MT―10243の代りにMT―
10244を用い同様の実験を行なつた。反応液を分
析した結果、メチオニン，アラニンおよびホモセ
リンの何れの場合もＤ型およびＬ型がほゞ同量含
まれていた。 実施例 ３ 実施例１のＤ―メチオニン、Ｄ―アラニンおよ
びＤ―ホモセリンの代りにそれぞれＬ―メチオニ
ン、Ｌ―アラニンおよびＬ―ホモセリンを用い、
実施例１と同様の実験を行なつた結果、それぞれ
のアミノ酸のＬ型とＤ型がほゞ同量づつ含まれて
いた。
Claims (1)
- １ アエロモナス属に属しメチオニン，アラニン
またはホモセリンをセラミ化する能力を有する菌
株を培養し、その培養物、該培養物から分離した
培養菌体または該培養菌体からの抽出物の存在下
にメチオニン，アラニンおよびホモセリンからな
る群から選ばれたアミノ酸をラセミ化することを
特徴とするアミノ酸のラセミ化方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1091482A JPS58129990A (ja) | 1982-01-28 | 1982-01-28 | アミノ酸のラセミ化方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1091482A JPS58129990A (ja) | 1982-01-28 | 1982-01-28 | アミノ酸のラセミ化方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58129990A JPS58129990A (ja) | 1983-08-03 |
| JPH0254075B2 true JPH0254075B2 (ja) | 1990-11-20 |
Family
ID=11763526
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1091482A Granted JPS58129990A (ja) | 1982-01-28 | 1982-01-28 | アミノ酸のラセミ化方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS58129990A (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2516625B2 (ja) * | 1986-06-02 | 1996-07-24 | 三菱化学株式会社 | Ｌ−スレオニンの製造法 |
-
1982
- 1982-01-28 JP JP1091482A patent/JPS58129990A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS58129990A (ja) | 1983-08-03 |
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