JPS582678B2 - ビセイブツニヨル l− バリンノセイゾウホウ - Google Patents
ビセイブツニヨル l− バリンノセイゾウホウInfo
- Publication number
- JPS582678B2 JPS582678B2 JP3181275A JP3181275A JPS582678B2 JP S582678 B2 JPS582678 B2 JP S582678B2 JP 3181275 A JP3181275 A JP 3181275A JP 3181275 A JP3181275 A JP 3181275A JP S582678 B2 JPS582678 B2 JP S582678B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- valine
- medium
- previbacterium
- strain
- hours
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
この発明は、コリネバクテリウム属またはプレビバクテ
リウム属に属し、S−2−アミノエチル−L−システイ
ン(以下チアリジンという)酬性を有するL−バリン生
産菌を、栄養培地に培養し、培地中に生成蓄積したL−
バリンを採取することを特徴とする微生物によるL−バ
リンの製造法に係り、その目的とするところは、必須ア
ミノ酸として栄養上および医薬として重要であると共に
、近年調味料および飼料などに使用されているL −バ
リンを工業的に有利に製造することにある。
リウム属に属し、S−2−アミノエチル−L−システイ
ン(以下チアリジンという)酬性を有するL−バリン生
産菌を、栄養培地に培養し、培地中に生成蓄積したL−
バリンを採取することを特徴とする微生物によるL−バ
リンの製造法に係り、その目的とするところは、必須ア
ミノ酸として栄養上および医薬として重要であると共に
、近年調味料および飼料などに使用されているL −バ
リンを工業的に有利に製造することにある。
従来、微生物によるし−バリンの製造法とじては、生育
のために少くともロイシンを必要とする菌株を用いる方
法(特公昭37−12448号公報)や2−チアゾール
アラニンに劇性を有する菌株および該菌株にロイシン、
イソロイシンまたはスレオニン要求性を付与した菌株を
用いる方法(特公昭48−44877号公報、特開昭4
9−116293号公報)などがある。
のために少くともロイシンを必要とする菌株を用いる方
法(特公昭37−12448号公報)や2−チアゾール
アラニンに劇性を有する菌株および該菌株にロイシン、
イソロイシンまたはスレオニン要求性を付与した菌株を
用いる方法(特公昭48−44877号公報、特開昭4
9−116293号公報)などがある。
本発明者は、各種微生物についてL−バリンを生産する
能力を有する菌株を検索した結果、チアリジンに耐性を
有するコリネバクテリウム属またはプレビバクテリウム
属に属する菌株が培地中に著量のL−バリンを生産する
ことを見い出し、この発明を完成した。
能力を有する菌株を検索した結果、チアリジンに耐性を
有するコリネバクテリウム属またはプレビバクテリウム
属に属する菌株が培地中に著量のL−バリンを生産する
ことを見い出し、この発明を完成した。
この発明において用いられる微生物は、コリネバクテリ
ウム属またはプレビバクテリウム属に属する微生物であ
って、チアリジンに耐性を有する変異株である。
ウム属またはプレビバクテリウム属に属する微生物であ
って、チアリジンに耐性を有する変異株である。
これらの代表的なものとしては、コリネバクテリウム・
グルタミクムATCC13761を親株として変異誘導
されたコリネバクテリウム・グルタミクムKY1062
8(微工研閑寄第2924号)およびプレビバクテリウ
ム・ラクトフエルメンタムATCC13869を親株と
して変異誘導されたプレビバクテリウム・ラクトフエル
メンタムKY10614(微工研菌寄第2925号)が
ある。
グルタミクムATCC13761を親株として変異誘導
されたコリネバクテリウム・グルタミクムKY1062
8(微工研閑寄第2924号)およびプレビバクテリウ
ム・ラクトフエルメンタムATCC13869を親株と
して変異誘導されたプレビバクテリウム・ラクトフエル
メンタムKY10614(微工研菌寄第2925号)が
ある。
これらの微生物は、通常の変異誘導操作によって誘導さ
れるチアリジン耐性を有する菌株であり、その菌学的性
質は、上記した酬性およびL−バリン生産能以外は、親
株の属する種属の菌学的性質とほとんど同じである。
れるチアリジン耐性を有する菌株であり、その菌学的性
質は、上記した酬性およびL−バリン生産能以外は、親
株の属する種属の菌学的性質とほとんど同じである。
前記の変異誘導法としては、たとえば紫外線照射、X線
照射、化学薬剤(たとえばニトロソグアニジン、メチル
エタンサルフオネート)による方法などがある。
照射、化学薬剤(たとえばニトロソグアニジン、メチル
エタンサルフオネート)による方法などがある。
この発明で用いる微生物θ)i」性の度合は次の如くで
ある。
ある。
上述のKY10628(微工研菌寄第2924号)およ
びその親株であるATCC13761株ならびにKY
1 0 6 1 4 (微工研菌寄第2925号)およ
びその親株であるATCC13869株の4株をそれぞ
れ下記の組成を有する培地Aのスラントで28℃、24
時間培養後、菌体をかき取り、少量の下記組成の基本培
地Bに懸濁した。
びその親株であるATCC13761株ならびにKY
1 0 6 1 4 (微工研菌寄第2925号)およ
びその親株であるATCC13869株の4株をそれぞ
れ下記の組成を有する培地Aのスラントで28℃、24
時間培養後、菌体をかき取り、少量の下記組成の基本培
地Bに懸濁した。
この懸濁液1 rnlを8mlの下表に記載の量のチア
リジンを含有する基本培地Bに接種した液を30℃にて
24時間振とう培養した。
リジンを含有する基本培地Bに接種した液を30℃にて
24時間振とう培養した。
培養終了時における各菌株の生育状態を光学密度(OD
)で測定した結果は、下表の通りであった。
)で測定した結果は、下表の通りであった。
≧?培 地A:酵母エキス5 g/l、ペプトン10
El/l,NaCl 2.59/l、肉エキス5 9/
l、寒天2 5 9/1 基本培地B:グルコース1 09/l,NH,NO31
El/t,NH,Ct5El/t,KOH19/t、リ
ン酸一カリ3. 4 &/LNa 2 SO4 2 g
/ t. Mg SOc・7H200.2&/t、ビオ
チン50γ/t、 シスチン20m9/7、サイアミン・ HCt5ダ/t、ニコチン酸125 〜/L、パントテン酸カルシウム 12.5TVLL−7レオニン1 g/t上表から明ら
かなごと<KY10628および:KY10614は、
親株(ATCC13761およびATCC13869)
に比し、チアリジンの生育阻害に対し、酎性を有してい
た。
El/l,NaCl 2.59/l、肉エキス5 9/
l、寒天2 5 9/1 基本培地B:グルコース1 09/l,NH,NO31
El/t,NH,Ct5El/t,KOH19/t、リ
ン酸一カリ3. 4 &/LNa 2 SO4 2 g
/ t. Mg SOc・7H200.2&/t、ビオ
チン50γ/t、 シスチン20m9/7、サイアミン・ HCt5ダ/t、ニコチン酸125 〜/L、パントテン酸カルシウム 12.5TVLL−7レオニン1 g/t上表から明ら
かなごと<KY10628および:KY10614は、
親株(ATCC13761およびATCC13869)
に比し、チアリジンの生育阻害に対し、酎性を有してい
た。
この発明で用いる発酵培地として、通常の発酵培地に使
用する炭素源、窒素源および無機物その,他生育促進物
質などが使用できる。
用する炭素源、窒素源および無機物その,他生育促進物
質などが使用できる。
炭素源としては、グルコース、フラクトース、シューク
ロース、マルトース、殿粉、糖蜜、廃糖蜜その他種々の
含水炭素、酢酸、クエン酸、プロピオン酸のごとき有機
酸、エタノール、グリセリ,ンのごときアルコール類が
用いられる。
ロース、マルトース、殿粉、糖蜜、廃糖蜜その他種々の
含水炭素、酢酸、クエン酸、プロピオン酸のごとき有機
酸、エタノール、グリセリ,ンのごときアルコール類が
用いられる。
窒素源としては、通常の無機または有機の窒素源、例え
ばアンモニア、塩化アンモニウム、硫酸アンモニウム、
リン酸アンモニウム、尿素、酵母エキス、コーンスチプ
リカー、ペプトンなどが用4いられる。
ばアンモニア、塩化アンモニウム、硫酸アンモニウム、
リン酸アンモニウム、尿素、酵母エキス、コーンスチプ
リカー、ペプトンなどが用4いられる。
無機物としては、リン酸一カリウム、リン酸ニカリウム
、硫酸マグネシウム、硫酸第一鉄、硫酸マンガンなどの
リン酸塩、硫酸塩、その他マグネ?ウム塩、カルシウム
塩、鉄塩、マンガン塩および微量金属塩などが用いられ
る。
、硫酸マグネシウム、硫酸第一鉄、硫酸マンガンなどの
リン酸塩、硫酸塩、その他マグネ?ウム塩、カルシウム
塩、鉄塩、マンガン塩および微量金属塩などが用いられ
る。
生育促進物質としては、アミノ酸、ビタミン、パントテ
ン酸、カゼイン加水分解物などが用いられる。
ン酸、カゼイン加水分解物などが用いられる。
培養中にpHが低下する場合には、適当な中和剤例えば
アンモニアガス、アンモニア水、水酸化ナトリウム、炭
酸アンモニウム、炭酸カルシウムなどでpHを中性付近
に調節することが望ましい。
アンモニアガス、アンモニア水、水酸化ナトリウム、炭
酸アンモニウム、炭酸カルシウムなどでpHを中性付近
に調節することが望ましい。
また、主炭素源として有機酸を用いたため、pHが上昇
する場合は、それらの有機酸または鉱酸を用いてpHを
調節することが望ましい。
する場合は、それらの有機酸または鉱酸を用いてpHを
調節することが望ましい。
発酵夜中からのL−バリンの単離は、常法によって行え
ばよく、例えばイオン交換樹脂法、濃縮法、その他公知
の方法の組合わせにより行うことができる。
ばよく、例えばイオン交換樹脂法、濃縮法、その他公知
の方法の組合わせにより行うことができる。
実施例 1,
上記の培地Aのスラントで28℃、24時間生育させた
コリネバクテリウム・グルタミクムKY10628およ
びその親株であるコリネバクテリウム・グルクミクムA
TCC13761を、それぞれ別に、下記組成の種培養
培地に接種し、250rrLlのフラスコを用い、28
℃、2 2 0 r .p.m.で24時間培養する。
コリネバクテリウム・グルタミクムKY10628およ
びその親株であるコリネバクテリウム・グルクミクムA
TCC13761を、それぞれ別に、下記組成の種培養
培地に接種し、250rrLlのフラスコを用い、28
℃、2 2 0 r .p.m.で24時間培養する。
種培養培地;
グルコース509/t、ペプ1・ン11/t、酵母エキ
ス1 0 El / l,NaCl 2.5 9 /
t、尿素3g/t、ビオチン50γ/t、コーンスチプ
リカ−5g/l , (pH7.2 )。
ス1 0 El / l,NaCl 2.5 9 /
t、尿素3g/t、ビオチン50γ/t、コーンスチプ
リカ−5g/l , (pH7.2 )。
次に、下記組成の主発酵培地に、上記2種の種培養培地
を10%の割合で投入し、それぞれ別に250WLlの
フラスコを用い、28℃、220r.p.m.で72時
間培養する。
を10%の割合で投入し、それぞれ別に250WLlの
フラスコを用い、28℃、220r.p.m.で72時
間培養する。
主発酵培地;
糖蜜180.9/4(グルコースとして1oo.9/,
!)KH2804 29/L MnS04− 4H20
0.01g/l,. MgSO, ・7 H20
0. 5 9 / l、FeS04・7 H20 0.
0 1 g/t、(NH4)2S0420g/Lビオチ
ン50γ/t、蛋白質酸加水分解物5g/LCaC03
3 0 & / l、(pH6.8)。
!)KH2804 29/L MnS04− 4H20
0.01g/l,. MgSO, ・7 H20
0. 5 9 / l、FeS04・7 H20 0.
0 1 g/t、(NH4)2S0420g/Lビオチ
ン50γ/t、蛋白質酸加水分解物5g/LCaC03
3 0 & / l、(pH6.8)。
上記2種の発酵終了液中、コリネバクテリウム・グルタ
ミクムKY10628を用いたものは、バリンが2 3
9/t蓄積していたが、その親株であるコリネバクテ
リウム・グルタミクムATCC13761を用いたもの
は、バリンは生成していなかった。
ミクムKY10628を用いたものは、バリンが2 3
9/t蓄積していたが、その親株であるコリネバクテ
リウム・グルタミクムATCC13761を用いたもの
は、バリンは生成していなかった。
前者のバリン含有発酵液250rIllから遠心分離に
よって閑体を除去した上清液を得、これから酸性イオン
交換樹脂を用いる常法によってL−バリンを分離し、精
製を行なってL−バリンの結晶2.1gを得た。
よって閑体を除去した上清液を得、これから酸性イオン
交換樹脂を用いる常法によってL−バリンを分離し、精
製を行なってL−バリンの結晶2.1gを得た。
実施例 2.
プレビバクテリウム・ラクトフエルメンクムKY106
14およびその親株であるプレビバクテリウム・ラクト
フエルメンタムATCC13869を用いた外は、実施
例1.と同様に培養する。
14およびその親株であるプレビバクテリウム・ラクト
フエルメンタムATCC13869を用いた外は、実施
例1.と同様に培養する。
前者の菌株を用いた発酵液には、バリンが30.59/
t蓄積していたが、後者の凶株を用いた発酵液には、バ
リンは生成していなかった。
t蓄積していたが、後者の凶株を用いた発酵液には、バ
リンは生成していなかった。
前者のバリン含有発酵i’ffl250mlを実施例1
.と同様に処理し、L−バリンの結晶2.89を得た。
.と同様に処理し、L−バリンの結晶2.89を得た。
実施例 3.
上記の培地Aのスラントで28℃、24時間生育させた
プレビバクテリウム・ラクトフエルメンタムKY106
14およびその親株であるプレビバクテリウム・ラクト
フエルメンタムATCC13869をそれぞれ別に、下
記組成の種培養培地に接種し、30℃、通気量3 1
/mvL.攪拌600r.p.m.で18時間培養する
。
プレビバクテリウム・ラクトフエルメンタムKY106
14およびその親株であるプレビバクテリウム・ラクト
フエルメンタムATCC13869をそれぞれ別に、下
記組成の種培養培地に接種し、30℃、通気量3 1
/mvL.攪拌600r.p.m.で18時間培養する
。
培養中は、60%( W/V )の酢酸溶液でpHを6
.8に調節する。
.8に調節する。
種培養培地;
酢酸7&/LKi{2P0.2 g/LMgSO4・7
H20 0.5.9/LFeSO, ・7 H20
0.0 1.?/AMnSO4・4 H20 0.0
19/L (NH4 )2 8042 6.6 9/
Lピオチン50γ/t、コーンスチブリ力−2 0 1
171、(pH7.4)。
H20 0.5.9/LFeSO, ・7 H20
0.0 1.?/AMnSO4・4 H20 0.0
19/L (NH4 )2 8042 6.6 9/
Lピオチン50γ/t、コーンスチブリ力−2 0 1
171、(pH7.4)。
次に、下記糾成の主発酵培地に、上記2種の種培養培地
を20,%の割合でそれぞれ別に投入し、5tのジャー
ファーメンターを用い、通気量3t/mvl、攪拌7
0 0 r.p.m.で48時間培養する。
を20,%の割合でそれぞれ別に投入し、5tのジャー
ファーメンターを用い、通気量3t/mvl、攪拌7
0 0 r.p.m.で48時間培養する。
培養中は、60%(W/V)の酢酸溶液でpHを7,5
に調節すると共に、培地中の酢酸濃度が2〜6 El/
tになるように酢酸アンモニウムをフイードする。
に調節すると共に、培地中の酢酸濃度が2〜6 El/
tになるように酢酸アンモニウムをフイードする。
主発酵培地;
酢酸79/LKH2P0,2g/LMgS04・7H2
0o. 5 g/LF e S O4 ・7 H2 0
0−0 1 9/LMn S 0 4 ・4H20
0.01g//.NH,C7 8夕/tビオチン5
0γ/Lコーンスチプリカ−10.!9/L(pH6.
8)。
0o. 5 g/LF e S O4 ・7 H2 0
0−0 1 9/LMn S 0 4 ・4H20
0.01g//.NH,C7 8夕/tビオチン5
0γ/Lコーンスチプリカ−10.!9/L(pH6.
8)。
上記2種の主発酵培地中、プレビバクテリウム・ラクト
フエルメンタムKY10614を用いたものは、バリン
が30E//t蓄積していたが、プレビバクテリウム・
ラクトフエルメンタムATCC13869を用いたもの
は、バリンが生成していなかった。
フエルメンタムKY10614を用いたものは、バリン
が30E//t蓄積していたが、プレビバクテリウム・
ラクトフエルメンタムATCC13869を用いたもの
は、バリンが生成していなかった。
前記のバリン含有発酵液1tを実施例1と同様に処理し
、L−バリン10.9&を得た。
、L−バリン10.9&を得た。
Claims (1)
- 1 コリネバクテリウム属またはプレビバクテリウム属
に属し、S−2−アミノエチルーL−システインに酬W
Eを有するし−バリン生産菌を栄養培地に培養し、培地
中に生成蓄積したL−バリンを採取することを特徴とす
る微生物によるL−バリンの製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3181275A JPS582678B2 (ja) | 1975-03-18 | 1975-03-18 | ビセイブツニヨル l− バリンノセイゾウホウ |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3181275A JPS582678B2 (ja) | 1975-03-18 | 1975-03-18 | ビセイブツニヨル l− バリンノセイゾウホウ |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS51106788A JPS51106788A (en) | 1976-09-21 |
| JPS582678B2 true JPS582678B2 (ja) | 1983-01-18 |
Family
ID=12341492
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3181275A Expired JPS582678B2 (ja) | 1975-03-18 | 1975-03-18 | ビセイブツニヨル l− バリンノセイゾウホウ |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS582678B2 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20240147321A (ko) * | 2023-03-31 | 2024-10-08 | 씨제이제일제당 (주) | 미생물 발효를 활용한 l-발린 제조 공정 |
-
1975
- 1975-03-18 JP JP3181275A patent/JPS582678B2/ja not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS51106788A (en) | 1976-09-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3006926B2 (ja) | 発酵法によるl−スレオニンの製造法 | |
| JP3698758B2 (ja) | 発酵法によるl−ロイシンの製造法 | |
| JPH0488994A (ja) | 発酵法によるl―グルタミン酸の製造法 | |
| JP3016883B2 (ja) | 発酵法による5’−キサンチル酸の製造法 | |
| JPS5816872B2 (ja) | コリネバクテリウム・グルタミクム変異株 | |
| JPH044887A (ja) | L―リジンの発酵的製造法 | |
| JPS6115695A (ja) | 発酵法によるl−イソロイシンの製造方法 | |
| US3907637A (en) | Process for the production of L-lysine | |
| KR950005133B1 (ko) | L-발린의 제조방법 | |
| JPS6115696A (ja) | 発酵法によるl−イソロイシンの製造法 | |
| JP3131311B2 (ja) | 発酵法によるl−イソロイシンの製造法 | |
| US3700559A (en) | Method of producing tryptophan by fermentation | |
| JPH057493A (ja) | 発酵法によるl−バリンの製造法 | |
| US4368266A (en) | Method for producing L-glutamic acid by fermentation | |
| US3939042A (en) | Process for the production of L-glutamic acid | |
| US3880741A (en) | Method of producing L-serine | |
| US3623952A (en) | Method of producing l-serine by fermentation | |
| CN1058615A (zh) | 生产l-谷氨酸的方法 | |
| US4421853A (en) | Fermentative preparation of L-leucine | |
| JP3006907B2 (ja) | 発酵法によるl−アラニンの製造法 | |
| JPH0692A (ja) | 発酵法によるl−アルギニンの製造法 | |
| JP2995816B2 (ja) | 発酵法によるl―リジンの製造法 | |
| JPS5894391A (ja) | 発酵法によるl−トリプトフアンの製造法 | |
| JPS59192096A (ja) | 発酵法によるl−トリプトフアンの製造法 | |
| JPS6057831B2 (ja) | β−ハイドロキシ−β−カルボキシ−イソカプロン酸の製造法 |