JPS5837325B2 - 診断試薬用ラテツクスの製造方法 - Google Patents
診断試薬用ラテツクスの製造方法Info
- Publication number
- JPS5837325B2 JPS5837325B2 JP13104480A JP13104480A JPS5837325B2 JP S5837325 B2 JPS5837325 B2 JP S5837325B2 JP 13104480 A JP13104480 A JP 13104480A JP 13104480 A JP13104480 A JP 13104480A JP S5837325 B2 JPS5837325 B2 JP S5837325B2
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- Polymerisation Methods In General (AREA)
- Addition Polymer Or Copolymer, Post-Treatments, Or Chemical Modifications (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は免疫血清学的診断試薬に用いるラテックスの製
造方法に関する。
造方法に関する。
ポリスチレンラテツクスに抗原又は抗体を感作させ、こ
れを用いて血清中の対応する抗体又は抗原を、ラテック
スの凝集反応として検出する免疫血清学的診断法は、そ
の簡便性と迅速性の故に臨床検査の分野において多くの
種類の抗原又は抗体の検出に拡大適用され今田こ至って
いる。
れを用いて血清中の対応する抗体又は抗原を、ラテック
スの凝集反応として検出する免疫血清学的診断法は、そ
の簡便性と迅速性の故に臨床検査の分野において多くの
種類の抗原又は抗体の検出に拡大適用され今田こ至って
いる。
この目的に用いられるポリスチレンラテツクスは、一般
に粒径が０．０５ないし１ミクロンであり、粒径分布が
狭く粒径の揃ったものが望ましい。
に粒径が０．０５ないし１ミクロンであり、粒径分布が
狭く粒径の揃ったものが望ましい。
このようなラテックスは通常公知の乳化重合の方法を用
いて製造できるとされている。
いて製造できるとされている。
その方法とは、例えば水中にアニオン系、ノニオン系又
はカチオン系の乳化剤の倒れか１種又は２種以上を混合
したものに、スチレンモノマー及び水溶性ラジカル重合
開始剤等を共存させて、好ましくは酸素を除いた雰囲気
で、適当な温度に適当な時間保つことである。
はカチオン系の乳化剤の倒れか１種又は２種以上を混合
したものに、スチレンモノマー及び水溶性ラジカル重合
開始剤等を共存させて、好ましくは酸素を除いた雰囲気
で、適当な温度に適当な時間保つことである。
このようにして得られるポリスチレンラテックスにおい
ては、その安定性に寄与する乳化剤の存在形態が重要で
ある。
ては、その安定性に寄与する乳化剤の存在形態が重要で
ある。
一般には、重合の際に用いた乳化剤の一部はポリスチレ
ンラテックス粒子の表面に吸着されており、他はラテッ
クス中に遊離の状態で存在しており、これらの状態の間
には乳化剤のポリスチレンラテックス粒子表面に対する
吸着脱着平衡が或立している。
ンラテックス粒子の表面に吸着されており、他はラテッ
クス中に遊離の状態で存在しており、これらの状態の間
には乳化剤のポリスチレンラテックス粒子表面に対する
吸着脱着平衡が或立している。
このように通常の方法で製造されるポリスチレンラテッ
クスにあっては、乳化剤は安定なラテックスの形成に不
可欠である。
クスにあっては、乳化剤は安定なラテックスの形成に不
可欠である。
しかしながら、遊離の乳化剤は前述の抗原又は抗体によ
るラテックスの凝集反応に対しては不都合な影響を与え
るのである。
るラテックスの凝集反応に対しては不都合な影響を与え
るのである。
すなわち、ラテックス試薬を製造するには、まず前述の
如くポリスチレンラテックスに抗原又は抗体を感作させ
る必要があるが、遊離の乳化剤を含むラテックスを用い
るとこの段階ですでに凝集してしまうことがある。
如くポリスチレンラテックスに抗原又は抗体を感作させ
る必要があるが、遊離の乳化剤を含むラテックスを用い
るとこの段階ですでに凝集してしまうことがある。
次に、抗原又は抗体を感作させたラテックスを用いて、
この抗原又は抗体に対応する抗体又は抗原をラテックス
の凝集反応によって検出する際には、検出されるべき抗
体又は抗原を含む血清（陽性血清）と接触すれば感作ラ
テックスは凝集し、かかる抗体又は抗原を含まない血清
（陰性血清）と接触しても感作ラテックスは凝集しない
ことが必須要件である。
この抗原又は抗体に対応する抗体又は抗原をラテックス
の凝集反応によって検出する際には、検出されるべき抗
体又は抗原を含む血清（陽性血清）と接触すれば感作ラ
テックスは凝集し、かかる抗体又は抗原を含まない血清
（陰性血清）と接触しても感作ラテックスは凝集しない
ことが必須要件である。
しかし、遊離の乳化剤を含む感作ラテックスの場合には
陰性血清と接触しても凝集してしまい非特異的な凝集反
応となることがはなはだ多いのである。
陰性血清と接触しても凝集してしまい非特異的な凝集反
応となることがはなはだ多いのである。
勿論、ラテックスに含まれる遊離の乳化剤は、例えばイ
オン交換法や透析法の技術を用いて除くことは可能であ
る。
オン交換法や透析法の技術を用いて除くことは可能であ
る。
しかし、遊離の乳化剤をラテックスから除いてしまった
場合、前述の如く遊離の乳化剤との間の吸着脱着平衡の
成立によってラテツクスが安定化されているために、ラ
テックスの安定性は極端にわるくなり、実際上は使用不
可能となってしまうのである。
場合、前述の如く遊離の乳化剤との間の吸着脱着平衡の
成立によってラテツクスが安定化されているために、ラ
テックスの安定性は極端にわるくなり、実際上は使用不
可能となってしまうのである。
叙上の如く、免疫血清学的診断試薬に用いるラテックス
としては、通常の乳化重合法で製造したポリスチレンラ
テックスは遊離の乳化剤を含む点において実用上大きな
難点を有しているのである。
としては、通常の乳化重合法で製造したポリスチレンラ
テックスは遊離の乳化剤を含む点において実用上大きな
難点を有しているのである。
本発明は上記の如き欠点のない免疫血清学的診断試薬と
して用いられるラテックスを提供することを目的として
鋭意研究せる結果なされたものであり、その要旨は、ス
チレンとスチレンスルホン酸の塩とを無水珪酸の存在下
に、水溶性ラジカル重合開始剤を用いて水中で共重合さ
せることを特徴とする診断試薬用ラテックスの製造方法
に存する。
して用いられるラテックスを提供することを目的として
鋭意研究せる結果なされたものであり、その要旨は、ス
チレンとスチレンスルホン酸の塩とを無水珪酸の存在下
に、水溶性ラジカル重合開始剤を用いて水中で共重合さ
せることを特徴とする診断試薬用ラテックスの製造方法
に存する。
本発明に用いられるスチレンスルホン酸の塩としては、
スチレンスルホン酸ソーダ、スチレンスルホン酸カリウ
ム、スチレンスルホン酸リチウム、スチレンスルホン酸
アンモニウム等があげられ、これらの化合物のスチレン
モノマーに対する使用割合は１０重量％がよいが、さら
に好ましくは０．０００１から１０重量％、とくに好ま
しくはｏ．ｏｏｉ％から５重量％である。
スチレンスルホン酸ソーダ、スチレンスルホン酸カリウ
ム、スチレンスルホン酸リチウム、スチレンスルホン酸
アンモニウム等があげられ、これらの化合物のスチレン
モノマーに対する使用割合は１０重量％がよいが、さら
に好ましくは０．０００１から１０重量％、とくに好ま
しくはｏ．ｏｏｉ％から５重量％である。
本発明における無水珪酸の超微粒子としては、粒径が５
〜５０ｍμ程度の超微粒子になされた無水珪酸が用いら
れ、例えばアエロジル（商品名、日本アエロジル■社製
）が好適に用いられる。
〜５０ｍμ程度の超微粒子になされた無水珪酸が用いら
れ、例えばアエロジル（商品名、日本アエロジル■社製
）が好適に用いられる。
また、該超微粒子状無水珪酸を水中に分散させたコロイ
ド溶液、例えばスノーテツクス（商品名、日産化学工業
■社製）も好適に用いられる。
ド溶液、例えばスノーテツクス（商品名、日産化学工業
■社製）も好適に用いられる。
そしてこの超微粒子状無水珪酸の使用量はスチレンに対
して０．０１〜１０重量％の割合とするのがよいが、０
．０５〜５重量％とくに０．０８〜２重量％とするのが
好ましい。
して０．０１〜１０重量％の割合とするのがよいが、０
．０５〜５重量％とくに０．０８〜２重量％とするのが
好ましい。
又、上記コロイド溶液として用いる場合は、無水珪酸含
有量が３５重量％以下、酸化ナＩ− ＩＪウム含有量０
．６重量％以下、粘度が１０センチポイズ以下にしてｐ
Ｈ８〜１０のものを用いるのが好ましい。
有量が３５重量％以下、酸化ナＩ− ＩＪウム含有量０
．６重量％以下、粘度が１０センチポイズ以下にしてｐ
Ｈ８〜１０のものを用いるのが好ましい。
また、本発明における水溶性ラジカル開始剤としては、
過硫酸カリウム、過硫酸アンモニウム、過硫酸ナｌ−
ＩＪウム等の過硫酸塩、２−２’−アゾビス（２−アミ
ジノプロパン）鉱酸塩、アゾビスシアノブアレリン酸及
びそのアルカリ金属塩及びアンモニウム塩等のアゾ化合
物、酒石酸一酸化物、ロンガリットー過酸化物、アスコ
ルビン酸一過酸化物等のレドツクス系開始剤等があげら
れ、過硫酸塩が好適に用いられる。
過硫酸カリウム、過硫酸アンモニウム、過硫酸ナｌ−
ＩＪウム等の過硫酸塩、２−２’−アゾビス（２−アミ
ジノプロパン）鉱酸塩、アゾビスシアノブアレリン酸及
びそのアルカリ金属塩及びアンモニウム塩等のアゾ化合
物、酒石酸一酸化物、ロンガリットー過酸化物、アスコ
ルビン酸一過酸化物等のレドツクス系開始剤等があげら
れ、過硫酸塩が好適に用いられる。
これらの重合開始剤の七ノマーに対する使用割合は０．
０１ないし１重量％の範囲が好ましい。
０１ないし１重量％の範囲が好ましい。
本発明方法によりラテックス製造のための重合を行なう
には、水が仕込まれた反応器内にスチレンモノマー、ス
チレンスルホン酸の塩、無水珪酸の超微子または無水珪
酸の超微粒子を水中に分散せしめたコロイド溶液、開始
剤を加えて攪拌しながら加熱すればよく、その際の重合
温度は通常５０ないし１００℃であり、好ましくは６５
°Ｃないし３５°Ｃの範囲とするのがよい。
には、水が仕込まれた反応器内にスチレンモノマー、ス
チレンスルホン酸の塩、無水珪酸の超微子または無水珪
酸の超微粒子を水中に分散せしめたコロイド溶液、開始
剤を加えて攪拌しながら加熱すればよく、その際の重合
温度は通常５０ないし１００℃であり、好ましくは６５
°Ｃないし３５°Ｃの範囲とするのがよい。
また、重合反応に要する時間は、モノマー濃度、無水珪
酸の超微粒子または無水珪酸の超微粒子を水中に分散せ
しめたコロイド溶液の濃度、開始剤濃度等の条件により
変わるが、通常５ないし５０時間の範囲である。
酸の超微粒子または無水珪酸の超微粒子を水中に分散せ
しめたコロイド溶液の濃度、開始剤濃度等の条件により
変わるが、通常５ないし５０時間の範囲である。
かくして本発明の方法により平均粒径が０．０５ないし
２ミクロンで粒径のバラ付きが変動係数（粒径の標準偏
差／平均粒径）で表わして０．０５以下である粒径が非
常によく揃った単分散ラテックスを得ることができる。
２ミクロンで粒径のバラ付きが変動係数（粒径の標準偏
差／平均粒径）で表わして０．０５以下である粒径が非
常によく揃った単分散ラテックスを得ることができる。
本発明方法によって得られるラテックスは極めて安定で
粒径は非常にかく揃っており、そして該ラテックスは従
来法により得られたラテックスのように乳化剤が遊離の
状態で存在していることがないので、免疫血清学的診断
試薬としていわゆる非特異的凝集反応を起こすことがな
くすぐれた性能を有するものである。
粒径は非常にかく揃っており、そして該ラテックスは従
来法により得られたラテックスのように乳化剤が遊離の
状態で存在していることがないので、免疫血清学的診断
試薬としていわゆる非特異的凝集反応を起こすことがな
くすぐれた性能を有するものである。
そして本発明においては、スチレン及びスチレンスチホ
ン酸塩と共に無水珪酸の超微粒子が用いられるので、得
られるラテックスは上述の様に極めて安定であると共に
、免疫血清学的診断試薬に調整されて該診断に用いられ
た際には非常に高い感度を示すことが出来るのである。
ン酸塩と共に無水珪酸の超微粒子が用いられるので、得
られるラテックスは上述の様に極めて安定であると共に
、免疫血清学的診断試薬に調整されて該診断に用いられ
た際には非常に高い感度を示すことが出来るのである。
次に本発明の実施例について説明する。
実施例 １
スチレンモノマ−９１ｇ、スチレンスルホン酸ナトリウ
ム０．６６ｇ、硫酸マグネシウム７水塩０．４ｇ、無水
珪酸の超微粒子（平均粒径約３０扉μ）０．０９ｇを水
中に分散させたコロイド溶液０．２１，過硫酸カリウム
Ｏ．：ｌ、イオン交換水４４０ｇを反応容器に仕込み、
容器を窒素ガスで置換し反応温度７０゜Ｃで２４時間共
重合した。
ム０．６６ｇ、硫酸マグネシウム７水塩０．４ｇ、無水
珪酸の超微粒子（平均粒径約３０扉μ）０．０９ｇを水
中に分散させたコロイド溶液０．２１，過硫酸カリウム
Ｏ．：ｌ、イオン交換水４４０ｇを反応容器に仕込み、
容器を窒素ガスで置換し反応温度７０゜Ｃで２４時間共
重合した。
このようにして得られたラテックスの平均粒径は０．６
１ミクロン、粒径のばら付きは変動係数で表わして０．
０４であった。
１ミクロン、粒径のばら付きは変動係数で表わして０．
０４であった。
かくして得られたラテックスをｐＨ ８．５のグリシン
緩衝液に分散させたラテックス分散液１容に対し、グリ
シン緩衝液で０．ｌ％に希釈したヒトガンマグロプリン
溶液１容を混合し、３０゜Ｃに１５分＊＊保った後、２
６，ＯＯＯＸＧで遠心分離して未吸着のヒトガンマグ爾
プリンを除き、沈降したラテックス粒子をグリシン緩衝
液に再分散して均一な感作ラテックス分散液とした。
緩衝液に分散させたラテックス分散液１容に対し、グリ
シン緩衝液で０．ｌ％に希釈したヒトガンマグロプリン
溶液１容を混合し、３０゜Ｃに１５分＊＊保った後、２
６，ＯＯＯＸＧで遠心分離して未吸着のヒトガンマグ爾
プリンを除き、沈降したラテックス粒子をグリシン緩衝
液に再分散して均一な感作ラテックス分散液とした。
この１滴と、グリシン緩衝液で種々の倍率に希釈したリ
ウマチ因子を含む血清１滴とをガラス板上で混合し、３
分間ガラス板をゆるやかに前後左右に傾けて凝集反応の
強さを観察し、次表の結果を得た。
ウマチ因子を含む血清１滴とをガラス板上で混合し、３
分間ガラス板をゆるやかに前後左右に傾けて凝集反応の
強さを観察し、次表の結果を得た。
また、リウマチ因子を含む血清のかわりにグリシン緩衝
液で２０倍に希釈したリウマチ因子を含まない血清を用
いて同じ試験をした場合、凝集は全く観察されなかった
。
液で２０倍に希釈したリウマチ因子を含まない血清を用
いて同じ試験をした場合、凝集は全く観察されなかった
。
これらの結果から明らかなように、本発明の方法によっ
て得られたラテックスを用いて調製した免疫血清学的診
断試薬は感度が高く、かつ非特異的な凝集反応を起こさ
ないものである。
て得られたラテックスを用いて調製した免疫血清学的診
断試薬は感度が高く、かつ非特異的な凝集反応を起こさ
ないものである。
比較例
スチレンモノマ−９１ｇ、ノニオン乳化剤（第米米一工
業製薬エマルジット４９）２ｇ、過硫酸カリウム０．３
Ｌイオン交換水４４０ｇを反応容器に仕込み、容器を窒
素ガスで置換し反応温度７０℃で２４時間重合した。
業製薬エマルジット４９）２ｇ、過硫酸カリウム０．３
Ｌイオン交換水４４０ｇを反応容器に仕込み、容器を窒
素ガスで置換し反応温度７０℃で２４時間重合した。
得られたラテックスの平均粒径は０．４８ミクロン、粒
径のばら付きは変動係数で表わして０．１５であった。
径のばら付きは変動係数で表わして０．１５であった。
このラテックスを用い実施例と全く同じ方法で免疫血清
学的診断試薬を調製し、リウマチ因子を含む血清による
凝集反応の強さを観察し、次表の結果を得た。
学的診断試薬を調製し、リウマチ因子を含む血清による
凝集反応の強さを観察し、次表の結果を得た。
また、正常ヒト血清１０００例をこのラテックス試薬を
用いて試験したところ９６例の非特異凝集が観察された
。
用いて試験したところ９６例の非特異凝集が観察された
。
これらの結果から明らかなように、比較例の方法で得ら
れたラテックスを用いて調製した免疫血清学的診断試薬
は非特異的な凝集反応が強く、かつ感度が低い。
れたラテックスを用いて調製した免疫血清学的診断試薬
は非特異的な凝集反応が強く、かつ感度が低い。
Claims (1)
- １ スチレンとスチレンスルホン酸の塩とを無水珪酸の
超微粒子の存在下に、水溶性ラジカル重合開始剤を用い
て水中で共重合させることを特徴とする診断試薬用ラテ
ックスの製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP13104480A JPS5837325B2 (ja) | 1980-09-19 | 1980-09-19 | 診断試薬用ラテツクスの製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP13104480A JPS5837325B2 (ja) | 1980-09-19 | 1980-09-19 | 診断試薬用ラテツクスの製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5755909A JPS5755909A (en) | 1982-04-03 |
| JPS5837325B2 true JPS5837325B2 (ja) | 1983-08-16 |
Family
ID=15048699
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP13104480A Expired JPS5837325B2 (ja) | 1980-09-19 | 1980-09-19 | 診断試薬用ラテツクスの製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5837325B2 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6011504A (ja) * | 1983-06-30 | 1985-01-21 | Nippon Paint Co Ltd | 水分散型樹脂組成物 |
-
1980
- 1980-09-19 JP JP13104480A patent/JPS5837325B2/ja not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5755909A (en) | 1982-04-03 |
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