JPS5872054A - 溶液中の無光吸収成分の分析方法 - Google Patents
溶液中の無光吸収成分の分析方法Info
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- JPS5872054A JPS5872054A JP17083581A JP17083581A JPS5872054A JP S5872054 A JPS5872054 A JP S5872054A JP 17083581 A JP17083581 A JP 17083581A JP 17083581 A JP17083581 A JP 17083581A JP S5872054 A JPS5872054 A JP S5872054A
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- ultraviolet
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- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
- G01N30/74—Optical detectors
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- Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
外・可視領域の波長で光吸収能のない成分、即ち無光吸
収成分の分析方法に関するものである。
収成分の分析方法に関するものである。
溶液中に微量＃に晩存在する成分の初期の分析装置とし
て１９５１年シュタインとムーアによって開発はれたア
ミノ酪分析装置がある，その労、液体クロマトグラフの
技術の発展に伴って種々の分析装置が開発されるように
なった。
て１９５１年シュタインとムーアによって開発はれたア
ミノ酪分析装置がある，その労、液体クロマトグラフの
技術の発展に伴って種々の分析装置が開発されるように
なった。
イオン排除や、イオン交換クロマトグラフィーにおいて
高＃にイオン化されたイオン種は、イオン交換樹脂技術
によって分離され、例えば、電気伝導度セルを使用する
ことによって定量的に検出される、この型の最初の系は
、ビイツクボルト〔文献Ｚ．Ａｎａ１．ｃｈｅｍ．，
１３２， ４０１ （１９５１））によって開発され
たが、送液ポンプを使用しておらず、充填力ラムの効率
が悪いなどの理由で極めて分析に長時間を要１〜、しか
も感眼が低いなどの欠点を有する。
高＃にイオン化されたイオン種は、イオン交換樹脂技術
によって分離され、例えば、電気伝導度セルを使用する
ことによって定量的に検出される、この型の最初の系は
、ビイツクボルト〔文献Ｚ．Ａｎａ１．ｃｈｅｍ．，
１３２， ４０１ （１９５１））によって開発され
たが、送液ポンプを使用しておらず、充填力ラムの効率
が悪いなどの理由で極めて分析に長時間を要１〜、しか
も感眼が低いなどの欠点を有する。
その後、スモール，ステイーブンスおよびボーマ〔文献
Ａｎａ１．Ｃ！ｈｅｍ．， ４７． １８０１ （
１９７５）］によって開発されたイオンクロマトグラフ
は、高速液体クロマトグラフ技術を取り入れ、特にペリ
キーラー型イオン交換ゲルを充填した分離力ラムと脱イ
オンカラムをシリーズに用いることによって、裡々のイ
オン等の高感度分析を達成した。
Ａｎａ１．Ｃ！ｈｅｍ．， ４７． １８０１ （
１９７５）］によって開発されたイオンクロマトグラフ
は、高速液体クロマトグラフ技術を取り入れ、特にペリ
キーラー型イオン交換ゲルを充填した分離力ラムと脱イ
オンカラムをシリーズに用いることによって、裡々のイ
オン等の高感度分析を達成した。
しかし、これまでのイオン交換クロマトグラフは、各種
イオン間の分離が悪く、このため大型カラムを採用せね
ばならないこと、房に脱イオンカラムを再生するために
別個の送液ポンプや、神々の接続部品を必要とするため
、これらの分（７［装置片はこれまで大型化を余儀なく
され、かつ複雑な構成となっている。
イオン間の分離が悪く、このため大型カラムを採用せね
ばならないこと、房に脱イオンカラムを再生するために
別個の送液ポンプや、神々の接続部品を必要とするため
、これらの分（７［装置片はこれまで大型化を余儀なく
され、かつ複雑な構成となっている。
また、ゲルデやフリツク〔文献Ｊ、 Ｃｈｒｏｍ８．ｔ
ｏｇｒ、 。
ｏｇｒ、 。
復Ｔ６． １９９ （１９７９））らけ、スモールらの
装置構成から脱イオンカラムを除いた装置構成と全多孔
性イオン交換ゲルを充填した大型カラムを採用すること
によって、ある程度の装置の簡略化を計っている。しか
し、この装置においても依然として装置が大型であるば
かりでなく、感度の点において先のスモールらの方法よ
り劣っているものである。
装置構成から脱イオンカラムを除いた装置構成と全多孔
性イオン交換ゲルを充填した大型カラムを採用すること
によって、ある程度の装置の簡略化を計っている。しか
し、この装置においても依然として装置が大型であるば
かりでなく、感度の点において先のスモールらの方法よ
り劣っているものである。
一方、これまで液体クロマトグラフィーを用いて溶液中
のイオンを、アミノ酸、糖および有機酸を測定すること
は可能である。この内、Ｎａ十、 Ｉ・］″−１Ｋ雪
ＮＨ４＋：、 （！ａ！＋ のような陽イオン、Ｉ−
、Ｏ７−。
のイオンを、アミノ酸、糖および有機酸を測定すること
は可能である。この内、Ｎａ十、 Ｉ・］″−１Ｋ雪
ＮＨ４＋：、 （！ａ！＋ のような陽イオン、Ｉ−
、Ｏ７−。
Ｂｒ’ 、 Ｎｏ、 、 ＰＯｊ−のような陰イオン
の測定に当っては、その検出器として伝４変検出滞、電
気ｆＰ学用いた場合は、特定のイオン種（ＯＮ 、
Ｓ’−）のみしか測定不可能である。更に伝導度検出器
を用いて測定する場合は、分離カラムだけでは測定感度
が悪く、特開昭５０−４６１９３号に見られるように脱
イオンカラムを分離カラムとシリーズに用いなければな
らない等の欠点を有１〜でいる。
の測定に当っては、その検出器として伝４変検出滞、電
気ｆＰ学用いた場合は、特定のイオン種（ＯＮ 、
Ｓ’−）のみしか測定不可能である。更に伝導度検出器
を用いて測定する場合は、分離カラムだけでは測定感度
が悪く、特開昭５０−４６１９３号に見られるように脱
イオンカラムを分離カラムとシリーズに用いなければな
らない等の欠点を有１〜でいる。
オだ、アミノ酸、有機酸等を液ｔ４７クロマトグラフイ
ーにて検出するには、紫外線検出器と発色装置とを併用
して測定しなければならず、かつ測定条件の安定ずヒが
困難なため充分満足しうるものではない、そして、この
液体クロマトグラフィーを用いて紫外線検出器と紫外・
可視領域の波長を利用する光吸収法とを併用する方法は
、分離しだい溶液中の成分が特定波長で光吸収能を有す
ることと、液体クロマトグラフィーで使用する俗＃１′
液が該特定波長で光吸収能がないことを同時に調定する
条件で実施される。
ーにて検出するには、紫外線検出器と発色装置とを併用
して測定しなければならず、かつ測定条件の安定ずヒが
困難なため充分満足しうるものではない、そして、この
液体クロマトグラフィーを用いて紫外線検出器と紫外・
可視領域の波長を利用する光吸収法とを併用する方法は
、分離しだい溶液中の成分が特定波長で光吸収能を有す
ることと、液体クロマトグラフィーで使用する俗＃１′
液が該特定波長で光吸収能がないことを同時に調定する
条件で実施される。
これらの方法は、いずれにしても測定条件の安定化が困
難で、かつ浴液中の測定しようとする成分の種類によっ
て、それぞれに合致した検出器を用いなければならない
、壕だ、アミノ酸、有機酸等の測定にあたっては発色装
置を必要とし、このため装置の複雑化、大型化を余儀、
なくされるため、実用上問題が多く、これらの欠点をＳ
ｌ＋’（消しうる分析方法の開発が望まれている。
難で、かつ浴液中の測定しようとする成分の種類によっ
て、それぞれに合致した検出器を用いなければならない
、壕だ、アミノ酸、有機酸等の測定にあたっては発色装
置を必要とし、このため装置の複雑化、大型化を余儀、
なくされるため、実用上問題が多く、これらの欠点をＳ
ｌ＋’（消しうる分析方法の開発が望まれている。
本発明者らは、これらの要求に答えるべく、−高感度で
、かつ、いかなる成分の分析に当っても検出器の変更な
くし７て、迅速に検出可能な検出方法について鋭意探索
の結果、本発明を完成１−だものである。
、かつ、いかなる成分の分析に当っても検出器の変更な
くし７て、迅速に検出可能な検出方法について鋭意探索
の結果、本発明を完成１−だものである。
即ち、本発明老け、検出器として紫外・Ｕ［視線検出器
を用いた液体クロマトグラフィーにて溶液中の無光吸収
成分を分析するにあたって、紫外・可視領域の特定波長
で、光吸収化合物を含有する溶液を溶離液として用いて
検出することを特徴とする溶液中の無光吸収成分の分析
方法を提供するものである。
を用いた液体クロマトグラフィーにて溶液中の無光吸収
成分を分析するにあたって、紫外・可視領域の特定波長
で、光吸収化合物を含有する溶液を溶離液として用いて
検出することを特徴とする溶液中の無光吸収成分の分析
方法を提供するものである。
本発明において、無光吸収成分とは、溶液中に含有する
Ｌｊ、”、 Ｎａ＋、 Ｋ＋、 ＮＨ４＋、 Ｃａ”１
Ｍｄ″、のような陽イオン、Ｃｌ−、Ｂｒ−、ニー；
Ｎｏ； 、 ＮＯ２−。
Ｌｊ、”、 Ｎａ＋、 Ｋ＋、 ＮＨ４＋、 Ｃａ”１
Ｍｄ″、のような陽イオン、Ｃｌ−、Ｂｒ−、ニー；
Ｎｏ； 、 ＮＯ２−。
８０４２−、 ＰＯ４３−＋ ＨＡｓ０４ 、
０１０３ 、 Ｃ０３”−のような陰イオン、グルコ
ース、フルクトース、スクロースなどの糖や、アミノ酸
や、ギ酸、酢酸、プロピオン酸などの有機酸などであっ
て、紫外・可初、領領の特定波長おいてモル吸光係数が
５０未満の成分を意味する。
０１０３ 、 Ｃ０３”−のような陰イオン、グルコ
ース、フルクトース、スクロースなどの糖や、アミノ酸
や、ギ酸、酢酸、プロピオン酸などの有機酸などであっ
て、紫外・可初、領領の特定波長おいてモル吸光係数が
５０未満の成分を意味する。
そして、溶離液として用いる溶液としては、分子中の発
色の原因となる原子団、即ち不飽和基（＞Ｃ＝Ｃ！＜）
、アジド基（＞Ｃ！＝Ｎ−）、ケトン基（＞ｃ ＝ｏ）
、チオケトン基（＞Ｃ！＝８ ）。
色の原因となる原子団、即ち不飽和基（＞Ｃ＝Ｃ！＜）
、アジド基（＞Ｃ！＝Ｎ−）、ケトン基（＞ｃ ＝ｏ）
、チオケトン基（＞Ｃ！＝８ ）。
アゾ基（−Ｎ＝Ｎ−）、ニトロソ基（−Ｎ＝Ｏ’ｌ。
などの官能基を有する脂肪族化合物、共役化合物。
芳香族化合物、複素環状化合物などが挙げられる、例え
ば、具体的な化合物としては、 １．３−シクロヘキサジエン、エチルベンゼン、トルエ
ン、ベンジルアルコール、フェノール、クレゾール、ナ
フトール、ヒドロキノン、アセドア〃デヒド、サルチル
アルデヒド、アセトフェノン。
ば、具体的な化合物としては、 １．３−シクロヘキサジエン、エチルベンゼン、トルエ
ン、ベンジルアルコール、フェノール、クレゾール、ナ
フトール、ヒドロキノン、アセドア〃デヒド、サルチル
アルデヒド、アセトフェノン。
アセトン、ベンゾフェノン、安息香酸、サリチル酸、ヒ
ドロキシ安息香酸、フェニル酢酸、フタル酸、フェノキ
シ酢酸、アセチルサリチル１昏゛、フルル酊゛ジエチル
、アニリン、Ｐ−アミノ安、け査酸。
ドロキシ安息香酸、フェニル酢酸、フタル酸、フェノキ
シ酢酸、アセチルサリチル１昏゛、フルル酊゛ジエチル
、アニリン、Ｐ−アミノ安、け査酸。
Ｐ−アミノフェニール、ニトロベンゼン、ギノリン、チ
ミン、カフェイン、ピリジン、２−ピリジンカルボン酸
、ベンゼンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸などであ
る。
ミン、カフェイン、ピリジン、２−ピリジンカルボン酸
、ベンゼンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸などであ
る。
そして、本発明において重要なことは、こわらの溶液け
、紫外・可視領域の特定波長（２００〜７００ ｎｍ）
で吸光度が０５以上、好斗しく ｉｆ： ｏ、 ５〜３
０の範囲になるように、その濃度を調整１〜て溶離液と
して用いることである。
、紫外・可視領域の特定波長（２００〜７００ ｎｍ）
で吸光度が０５以上、好斗しく ｉｆ： ｏ、 ５〜３
０の範囲になるように、その濃度を調整１〜て溶離液と
して用いることである。
この溶液の吸光度が０５未満では定鯖−範囲が狭くなり
好ましくない。また、吸光度が３〔１を越えると、測定
しようとする目的成分の濃度とクロマトグラム上のビー
ク面積の間に、正確な面線関係がくずれる傾向となるた
め６特に０．５〜３０のｒｆｔｌ′Ｉ囲に調整すること
がより望ましい。
好ましくない。また、吸光度が３〔１を越えると、測定
しようとする目的成分の濃度とクロマトグラム上のビー
ク面積の間に、正確な面線関係がくずれる傾向となるた
め６特に０．５〜３０のｒｆｔｌ′Ｉ囲に調整すること
がより望ましい。
ここで溶離液の濃ｍ゛を吸光度０５以上になるように調
整するに際しては、下記の（１）式より測定波長におけ
る吸光度とモル吸光係数は比例関係にあることから、モ
ル吸光係数より容易に濃度を求めることができる。即ち
、吸収光路長ｔのクロマトグラフ用セル中にモルｉＩＢ
’ｃなる物質が入っているとすると、その物質により吸
収を受けて初Ｕ光強１ｇ’Ｉｎは光強度工に減衰する。
整するに際しては、下記の（１）式より測定波長におけ
る吸光度とモル吸光係数は比例関係にあることから、モ
ル吸光係数より容易に濃度を求めることができる。即ち
、吸収光路長ｔのクロマトグラフ用セル中にモルｉＩＢ
’ｃなる物質が入っているとすると、その物質により吸
収を受けて初Ｕ光強１ｇ’Ｉｎは光強度工に減衰する。
この種子はランベルト−ベールの法則により
ｔｏ？−一εＣｔ ・・ （１）
■
上記ｆｌ＋式が成立するのでこれより求める。（ここで
εはモル吸光係数および光吸収物質固有の値である。） そして、紫外・呵ネ＋ｐ部領域における光吸収物質のモ
ル吸光係４．ダは５０〜３００．０００の範囲にあるだ
め、光路Ｆｚ １ ｃｍの吸収セルを用いた場合、モル
濃度は１０−２〜１０−５ Ｍの範囲となる。
εはモル吸光係数および光吸収物質固有の値である。） そして、紫外・呵ネ＋ｐ部領域における光吸収物質のモ
ル吸光係４．ダは５０〜３００．０００の範囲にあるだ
め、光路Ｆｚ １ ｃｍの吸収セルを用いた場合、モル
濃度は１０−２〜１０−５ Ｍの範囲となる。
まだ、液体クロマトグラフィーに使用される浴離液禾来
の目的ば、水溶液中の混合成分を迅速かつ完全に分離す
ることにある。従って、本発明に使用する浴ｐｌ液とし
ては、測定しようとする無光吸収成分の分離性より、一
般に使用されている溶離液に、分離に悪影響を与えない
紫外・ｉｊ’ｌ視領域の特定波長で０．５以」二の吸光
度を有する浴液を一定量添加して供することも本発明の
範囲に包含する有用な溶離液と々るが、０５以上の吸光
度を有する溶液自体が、上２目的を兼ね備えているもの
を選択使用することがより好−ましい。
の目的ば、水溶液中の混合成分を迅速かつ完全に分離す
ることにある。従って、本発明に使用する浴ｐｌ液とし
ては、測定しようとする無光吸収成分の分離性より、一
般に使用されている溶離液に、分離に悪影響を与えない
紫外・ｉｊ’ｌ視領域の特定波長で０．５以」二の吸光
度を有する浴液を一定量添加して供することも本発明の
範囲に包含する有用な溶離液と々るが、０５以上の吸光
度を有する溶液自体が、上２目的を兼ね備えているもの
を選択使用することがより好−ましい。
本発明において、使用される液体クロマトグラフィーの
形態は、ゲル浸透クロマトグラフィー。
形態は、ゲル浸透クロマトグラフィー。
吸着クロマトグラフィー、分配クロマトグラフィーおよ
びイオン交換クロマトグラフィーのいずれでもか１わな
い。
びイオン交換クロマトグラフィーのいずれでもか１わな
い。
ここで、不発明において特異的々ことは、ＭｉＩ述した
ように、高感度で、かつ、いかなる無光吸収成分の分析
に対しても検出器の変（々くして分析することができる
点に加えて、後述の実施例４と比較例５比較で明らかな
ように負側のピークを全て正側のピークにクロマトグラ
フが描かれることで、この事実はこれ壕での分析技術に
おいて全くない驚異的な事柄である。
ように、高感度で、かつ、いかなる無光吸収成分の分析
に対しても検出器の変（々くして分析することができる
点に加えて、後述の実施例４と比較例５比較で明らかな
ように負側のピークを全て正側のピークにクロマトグラ
フが描かれることで、この事実はこれ壕での分析技術に
おいて全くない驚異的な事柄である。
以下、第１図のフローグイアゲラムにて、本発明の分析
方法において、痛感度で、かつ再現性のよい液体クロマ
トグラフィーの構成の一実施態様を示し、本発明を説明
するが、本発明はこれに限定するものではない。即ち、
本発明に採用しつる液体クロマトグラフィーは、これ寸
で知られている全ての１弗様のものに適宜適用しうるも
のである。
方法において、痛感度で、かつ再現性のよい液体クロマ
トグラフィーの構成の一実施態様を示し、本発明を説明
するが、本発明はこれに限定するものではない。即ち、
本発明に採用しつる液体クロマトグラフィーは、これ寸
で知られている全ての１弗様のものに適宜適用しうるも
のである。
より好ましい液体クロマトグラフィーの構成を示す。
第１図は主たる部分として試料注入バルブ（１）と、こ
の試料注入パルプ（１）からの試料を分離する分離担体
を充填した分離カラム（５）と、前記分離カラム（５）
からの溶出成分を検出する紫外・町祝光紳検出用セル（
６）とを内蔵する恒温槽（４）と、前記分離カラム（５
）へ本発明に供される溶離液貯槽（２）から溶離液を供
給するための定流歓送液ポンプ（３）とから構成されて
いるクロマト分析装置である。なお、このクロマト分析
装置には、通常設置されている検出器（７）および記録
計（８）が配されている。
の試料注入パルプ（１）からの試料を分離する分離担体
を充填した分離カラム（５）と、前記分離カラム（５）
からの溶出成分を検出する紫外・町祝光紳検出用セル（
６）とを内蔵する恒温槽（４）と、前記分離カラム（５
）へ本発明に供される溶離液貯槽（２）から溶離液を供
給するための定流歓送液ポンプ（３）とから構成されて
いるクロマト分析装置である。なお、このクロマト分析
装置には、通常設置されている検出器（７）および記録
計（８）が配されている。
本発明に用いる分離担体を充填した分離カラノ、は、従
来から使用されている通常のカラムの使用も熱論可能で
あるが、より効率よく分離するために、該カラムの長さ
が通常２０〜９０ｇの範囲のものを使用１２、材質とし
て、ステンレススチール。
来から使用されている通常のカラムの使用も熱論可能で
あるが、より効率よく分離するために、該カラムの長さ
が通常２０〜９０ｇの範囲のものを使用１２、材質とし
て、ステンレススチール。
テフロン、アクリル、ポリエチレンおよびガラスなどの
耐圧性を有する円筒状カラムを使用することが好ましい
。これは、長さが９０陣を越えると無駄な体積が大きく
より良く効率よく分離できないと共に装置が大型となり
、まだ、２０陣未満でけカラムの作製が困難となり好ま
しくないためである。
耐圧性を有する円筒状カラムを使用することが好ましい
。これは、長さが９０陣を越えると無駄な体積が大きく
より良く効率よく分離できないと共に装置が大型となり
、まだ、２０陣未満でけカラムの作製が困難となり好ま
しくないためである。
前記分離カラムに充填される分離４１１体ｉｆ、水溶液
中の無光吸収成分を迅速、かつ、クロマトグラフ的に再
現性よく同時に分離することができる分離相体を適宜選
ばよいが、特に下記（ａ）〜（ｄ）に規定する要件、即
ち、（ａ）粒径が１〜８μｍでかつ球形であること、（
ｂ）ポアサイズが１０００Ａ以下の多孔性相体で、（Ｃ
）交換容量が００３〜１０ミリ当量／１、（ｄ）耐圧２
００ Ｋｇ／ｃｒｎ２以上の機械的強度を有シ、カつ、
スルホン酩’基、）リアルキルアンモニウム基、アミノ
基などを保有する各棹のイオン交換ゲルを用いることが
好ましい。
中の無光吸収成分を迅速、かつ、クロマトグラフ的に再
現性よく同時に分離することができる分離相体を適宜選
ばよいが、特に下記（ａ）〜（ｄ）に規定する要件、即
ち、（ａ）粒径が１〜８μｍでかつ球形であること、（
ｂ）ポアサイズが１０００Ａ以下の多孔性相体で、（Ｃ
）交換容量が００３〜１０ミリ当量／１、（ｄ）耐圧２
００ Ｋｇ／ｃｒｎ２以上の機械的強度を有シ、カつ、
スルホン酩’基、）リアルキルアンモニウム基、アミノ
基などを保有する各棹のイオン交換ゲルを用いることが
好ましい。
恒温槽は測定しようとする各成分を再ｔｇよく分離する
ためと同時に、分析時間の短縮をはかると共に装置を小
型化するために、分離カラムと紫外・可視光線検出用セ
ルを同一槽内に設置するものである。恒温槽の材質、形
状は通常の恒温槽と同材質で小型化したものならなんら
さしつえないが、３０〜６０℃の温度範囲で±０１℃に
制御できるものを使用することがより好ましい。
ためと同時に、分析時間の短縮をはかると共に装置を小
型化するために、分離カラムと紫外・可視光線検出用セ
ルを同一槽内に設置するものである。恒温槽の材質、形
状は通常の恒温槽と同材質で小型化したものならなんら
さしつえないが、３０〜６０℃の温度範囲で±０１℃に
制御できるものを使用することがより好ましい。
定流量送液ポンプ（８）は、これまで使用されているい
かなるポンプをも使用しうるが、ポンプ内の流速０３〜
６ｍｌ！／分において、圧力変動による脈動が±２％以
下で一定流量送液することができるポンプを使用するこ
とがより望ましい。これは一般的に我々の経験では圧力
変動による脈−１が±２％を越えると、分離される該成
分の溶出時間の再現性が悪く、また低濃度の成分を検出
する際、ノイズを生じ定量感度が著しくイ用下するだめ
に好甘しくない。従って、これまで知られている往復ピ
ストン型送液ポンプにおいては、圧力変動による脈動を
なくするために柚々の形状を有するカム採用したり、圧
力変動を吸収するだめのダンパーを併用するなど種々の
試みがなされているのである。
かなるポンプをも使用しうるが、ポンプ内の流速０３〜
６ｍｌ！／分において、圧力変動による脈動が±２％以
下で一定流量送液することができるポンプを使用するこ
とがより望ましい。これは一般的に我々の経験では圧力
変動による脈−１が±２％を越えると、分離される該成
分の溶出時間の再現性が悪く、また低濃度の成分を検出
する際、ノイズを生じ定量感度が著しくイ用下するだめ
に好甘しくない。従って、これまで知られている往復ピ
ストン型送液ポンプにおいては、圧力変動による脈動を
なくするために柚々の形状を有するカム採用したり、圧
力変動を吸収するだめのダンパーを併用するなど種々の
試みがなされているのである。
なお、好適なポンプとして、流路出口に設置された圧力
検出素子で検出された圧力信号をマイクロコンピュータ
にフィードバックし、その圧力信号によりクイックリタ
ーン方式のポンプの一方で生じる吸引工程の圧力低下を
、他方のクイックリターン方式のポンプの吐出工程中の
ステッピングモータの回転数を増加することにより、設
定圧力を維持するよう前記マイクロコンピュータで制御
できる定流旨送液装置、すなわち、流路出口に設定され
た圧力検出素子と、この圧力検出素子で検出された圧力
信号をフィードバックされ、かつ、クイックリターン方
式のポンプのステッピングモータの回転数を制御するマ
イクロコンピュータと、コノマイクロコンビーータによ
り作動する２個のクイックリターン方式のポンプより構
成される無脈動電流計送液ポンプを挙げることがでへる
。
検出素子で検出された圧力信号をマイクロコンピュータ
にフィードバックし、その圧力信号によりクイックリタ
ーン方式のポンプの一方で生じる吸引工程の圧力低下を
、他方のクイックリターン方式のポンプの吐出工程中の
ステッピングモータの回転数を増加することにより、設
定圧力を維持するよう前記マイクロコンピュータで制御
できる定流旨送液装置、すなわち、流路出口に設定され
た圧力検出素子と、この圧力検出素子で検出された圧力
信号をフィードバックされ、かつ、クイックリターン方
式のポンプのステッピングモータの回転数を制御するマ
イクロコンピュータと、コノマイクロコンビーータによ
り作動する２個のクイックリターン方式のポンプより構
成される無脈動電流計送液ポンプを挙げることがでへる
。
以下に本発明の実施例および比較例を示す。
実施例１
汎用型の液体クロマトグラフ（東洋留達装■■ＬＣ−８
０３Ａ型）に長さ２５ｃｒｎ、内径４６調のステンレス
スチールカラムに粒径２０μｍ、交換容量０１ミリ当析
／２の陰イオン交換体（セパレーションズブループ社製
Ｖｙｄ、ａｃ ３０２工ａ、 ）を充填したカラムを設
置し、紫外・可視検出器（東洋曹達製ＵＶ−８型）より
なるクロマト分析装置を使用し、水浴液中に存在する微
針濃度の酢酸、ギ酸を含有する水浴液の分析を行なった
。
０３Ａ型）に長さ２５ｃｒｎ、内径４６調のステンレス
スチールカラムに粒径２０μｍ、交換容量０１ミリ当析
／２の陰イオン交換体（セパレーションズブループ社製
Ｖｙｄ、ａｃ ３０２工ａ、 ）を充填したカラムを設
置し、紫外・可視検出器（東洋曹達製ＵＶ−８型）より
なるクロマト分析装置を使用し、水浴液中に存在する微
針濃度の酢酸、ギ酸を含有する水浴液の分析を行なった
。
その結果、第２図のクロマトグラムに示すように５分以
内に両成分を分離し２検出することができだ。なお、第
２図における各イオン成分の＃麿が５ｐ戸となるように
調製し、その１００μｔを注入し、ｆ＃離液として紫外
＃２５４ｎｍに吸収を有するフタル酸を水酸化ナトリウ
ムでｐＨ４，６、モル濃度ｌＸ１０−’Ｍ、吸光度１．
５に調製し、流速２ｒｎｔ／分の操作条件で行なった。
内に両成分を分離し２検出することができだ。なお、第
２図における各イオン成分の＃麿が５ｐ戸となるように
調製し、その１００μｔを注入し、ｆ＃離液として紫外
＃２５４ｎｍに吸収を有するフタル酸を水酸化ナトリウ
ムでｐＨ４，６、モル濃度ｌＸ１０−’Ｍ、吸光度１．
５に調製し、流速２ｒｎｔ／分の操作条件で行なった。
ギ酸イオンの検出下限け０，０２四となった。
比較例１
紫外線検出器の代りに伝導度型検出器（Ｗｅ日Ｃａｎ社
製ｈ４ｏｄｅｌ−２１３型）を用いた以外は、実施５１
［１と同様の操作で行なった。
製ｈ４ｏｄｅｌ−２１３型）を用いた以外は、実施５１
［１と同様の操作で行なった。
その結果、第６図に示すようにベースラインの安定性が
悪く、ノイズも生じ、実施例１の検出感度の１１５以下
になった。
悪く、ノイズも生じ、実施例１の検出感度の１１５以下
になった。
実施例２
水溶液中に存在するフッ素、塩素、−１Ｆ硝酸、硝酸の
５〜２０關を測定するために溶離液として紫外線波長２
７２ｎｍに吸収をＭする安息査醐を水酸化カリウムでｐ
Ｈ６，０、モル＃度２．５ Ｘ １０−” Ｍ。
５〜２０關を測定するために溶離液として紫外線波長２
７２ｎｍに吸収をＭする安息査醐を水酸化カリウムでｐ
Ｈ６，０、モル＃度２．５ Ｘ １０−” Ｍ。
吸光度２．０に調製し、流速２．０ ｒｎｌ ７分の４
−■作粂件で行なった以外は実施例１と同様な４１’ｉ
４作で行なった結束、第４図に示すように４成分し１完
全に分離し、畠感度検出できた。
−■作粂件で行なった以外は実施例１と同様な４１’ｉ
４作で行なった結束、第４図に示すように４成分し１完
全に分離し、畠感度検出できた。
比較例２
紫外線検出器の代りに伝導度検出（ＷＯＦ□Ｃａｎ社製
Ｍｏｄｅｌ ２１３型）を用いた以外は、実施例２と同
様の操作で行なった結果、全成分の検出感度は実施例２
に比較して１１５以下となった。
Ｍｏｄｅｌ ２１３型）を用いた以外は、実施例２と同
様の操作で行なった結果、全成分の検出感度は実施例２
に比較して１１５以下となった。
実施例３
長さ２５ｃｍ、内径４．６．のステンレススチールカラ
ムに直径１０μｍの全多孔性破砕状充填剤（メルク社製
Ｌｉｃｈｒｏｓｏｒｂ ＲＰ−８）を充填し、溶離液に
４０％メタノールと６０係純水に０．０２チのフタル酸
カリウムを添加した混合溶媒を用い流速１．６ｍＪ／分
で通液した以外は実施例１と同様の操作条件で各１ｍ
朋１０１＋ｐｍの４柚のアルキルスルホン酸塩の分析を
行なった。
ムに直径１０μｍの全多孔性破砕状充填剤（メルク社製
Ｌｉｃｈｒｏｓｏｒｂ ＲＰ−８）を充填し、溶離液に
４０％メタノールと６０係純水に０．０２チのフタル酸
カリウムを添加した混合溶媒を用い流速１．６ｍＪ／分
で通液した以外は実施例１と同様の操作条件で各１ｍ
朋１０１＋ｐｍの４柚のアルキルスルホン酸塩の分析を
行なった。
その結果、第５図に示すように４釉収１のアルキルスル
ホン酸ナトリウムを１２分以内に完全に分離し検出する
ことができた。
ホン酸ナトリウムを１２分以内に完全に分離し検出する
ことができた。
比較例３
溶離液に６０％メタノールと４０％純水に０．０１チの
酢酸アンモニウムを用いる以外は実施例３と同様の操作
で行なった結果、アルキルスルポン酸を検出できなかっ
たつ 比較例４ 紫外線検出器の代りに伝導要検出器（ＷＢＢｃａｎ社製
ＭＯｄｅ１．２１３型）を用いる以外は比較例３と同様
の操作で行なった結果、第６図に示すようにアルキルス
ルホン酸ナトリウムを検出でへたが、実施例３で得られ
た感度の１１５以下となった、実施例４ 無脈動定流佃ポンプ（流ｆ７１． Ｏｍｌ ／分、圧力
変動±０．２Ｋｚ／ｃＩｎ２）と長さ１００．、内径４
闇のステンレススチールカラムに粒（革５±１μｍ、ポ
アサイズ２ｏｏＸ、交換容量が０５ミリ当坩゛／２゜耐
圧３００ Ｋｙ／ｃｒｎ２以上のトリメチルアンモニウ
ム型陰イオン交換ゲル（商品名ＴＳＫ−ＧＦＴ、 ＴＥ
Ｘ−５２２）充填した分離カラムを温度４０±０１℃に
コントロールした恒温槽内に設置し、紫外線（２５４ｎ
ｍ）。
酢酸アンモニウムを用いる以外は実施例３と同様の操作
で行なった結果、アルキルスルポン酸を検出できなかっ
たつ 比較例４ 紫外線検出器の代りに伝導要検出器（ＷＢＢｃａｎ社製
ＭＯｄｅ１．２１３型）を用いる以外は比較例３と同様
の操作で行なった結果、第６図に示すようにアルキルス
ルホン酸ナトリウムを検出でへたが、実施例３で得られ
た感度の１１５以下となった、実施例４ 無脈動定流佃ポンプ（流ｆ７１． Ｏｍｌ ／分、圧力
変動±０．２Ｋｚ／ｃＩｎ２）と長さ１００．、内径４
闇のステンレススチールカラムに粒（革５±１μｍ、ポ
アサイズ２ｏｏＸ、交換容量が０５ミリ当坩゛／２゜耐
圧３００ Ｋｙ／ｃｒｎ２以上のトリメチルアンモニウ
ム型陰イオン交換ゲル（商品名ＴＳＫ−ＧＦＴ、 ＴＥ
Ｘ−５２２）充填した分離カラムを温度４０±０１℃に
コントロールした恒温槽内に設置し、紫外線（２５４ｎ
ｍ）。
検出器（東洋曹達１１ＪＵＶ−８）よりなるクロマト分
析装置を使用し、水浴液中に存在する微量濃度の堪累、
亜硝酸、硝酸、リン酸、硫酸の各イオンを含有する水溶
液の分析を行なった。その結束、第７図のクロマトグラ
ムに示すように２０分以内に全成分を分離し、検出する
ことができた。
析装置を使用し、水浴液中に存在する微量濃度の堪累、
亜硝酸、硝酸、リン酸、硫酸の各イオンを含有する水溶
液の分析を行なった。その結束、第７図のクロマトグラ
ムに示すように２０分以内に全成分を分離し、検出する
ことができた。
なお、第７図における各イオン成分は、それぞれのカリ
ウム塩より各イオン／＃ ）ＪＩが５１１１１１となる
ように調製し、その１００μｔを注入し、溶離液として
紫外線２５４ｎｍに吸収を有するフタル酸を水酸ｆヒカ
リウムでｐＨ６，５、モル渦度２Ｘ１０−’Ｍ。
ウム塩より各イオン／＃ ）ＪＩが５１１１１１となる
ように調製し、その１００μｔを注入し、溶離液として
紫外線２５４ｎｍに吸収を有するフタル酸を水酸ｆヒカ
リウムでｐＨ６，５、モル渦度２Ｘ１０−’Ｍ。
吸光度２．６に調製１７、流速１．２ ｍｅ ／分、圧
力５０に９／ｃｒｎ２の操作条件で行なった。
力５０に９／ｃｒｎ２の操作条件で行なった。
Ｉ４素イオンの電相範囲け０１〜１５０ Ｈ１１＋ｕ１
． ＄、出上下限００５岬となった。
． ＄、出上下限００５岬となった。
比較１＋ｌ１５
紫外線検出器の代りに、伝導度型検出器（東洋曹ａ製Ｃ
Ｍ−８型）を用いた以外は、実Ｎｉ例４と同様の操作で
行ない、第８図に示すように、リン酸イオンが負側のピ
ークを生じ、好ましくないりロマトグラムが描かれた。
Ｍ−８型）を用いた以外は、実Ｎｉ例４と同様の操作で
行ない、第８図に示すように、リン酸イオンが負側のピ
ークを生じ、好ましくないりロマトグラムが描かれた。
比較例６
溶離液に１ ｘ １０−３Ｍクエン酸ニアンモニウム（
ｐＨ５，２）を使用し、紫外線検出器の後側に伝導度型
検出器を直結した以外は、実施例４と同様の操作で行な
った。その結東、伝導度検出器では全５Ｖ分が検出され
たにもかかわらず、紫外線検出器では検出できなかった
。
ｐＨ５，２）を使用し、紫外線検出器の後側に伝導度型
検出器を直結した以外は、実施例４と同様の操作で行な
った。その結東、伝導度検出器では全５Ｖ分が検出され
たにもかかわらず、紫外線検出器では検出できなかった
。
なお、紫外線波長２２０ｎｍで（＋４、尤吸収能を有す
る亜硝酸と硝酸のみが正側のピークを生Ｉ７．た。
る亜硝酸と硝酸のみが正側のピークを生Ｉ７．た。
第１図は、本発明の一実施例のフローダイアグラムであ
る。＠２図は本発明による有機酸の分配を示すクロマト
グラムで、第６図ｒｒ伝導度検１１」器を使用して得ら
れた有機酸の分離を示すクロマトグラムであろう第４図
は本発明による４神の却機１奪イオンの分離を示すクロ
マトグラムである、第５図は本発明による４種のアルキ
ルスルホン酸ナトリウムの分離を示すクロマトグラムで
あシ、第６図は伝導度検出器を使用して得られたアルキ
ルスルホン酸ナトリウムの分離を示すクロマトグラムで
ある。第７図（１本発明による５抽類の陰イオンの分ｐ
１１１を示すクロマトグラムであり、第８図は伝導度検
出器を使用して得られた陰イオンの分離を示すクロマト
グラムである。 １、 試料注入パルプ ２、ｌ＃□ヮ １３、定流掘
送液ポンプ ４、恒温槽 ５、 分離カラム ６、紫外・可視光線検出用セル Ｚ 検出器 ８、記録計 ９、酢酸 １０、蟻酸 １１、 フッ素イオン １２．１篇素イオン １３、 亜硝酸イオン １４、硝酸イオン １５、 オクチルスルホン酔ナトリウム１６、 デ
シルスルホン酸すｌ・リウム１７、 ドデシルスルホ
ン酸ナトリウム１８、 テトラデシルスルホン酸ナト
リウム１９ リン帳・イオン ２０、 硫酸イオン 特許出願人 東洋曹達工業株式会社 １面の浄書（内容に変更なし） 第１面 第２０ １０ ０ ５ 分 事３図 ０ ５ 分 男十記 ０ ４０ ガ第号（２
） １ ０ １２介 手続補正書 昭和５６年１２月２３日 特許庁長官 島田春樹 殿 １事件の表示 昭和５６年特許願第 １７０８３５ 号２発明の名
称 溶液中の無光吸収成分の分析方法 ろ補正をする者 電話番号（５８５）３３１１ ４補正命令の日付 「明細書」および「図面」 （内容に変更なく、タイプ印書による明細書および適正
な図面に補正するもの） ７補正の内容 別紙のとおり ８添付書類の目録 （１）タイプ印書による明細書全文および適正な図面
１通
る。＠２図は本発明による有機酸の分配を示すクロマト
グラムで、第６図ｒｒ伝導度検１１」器を使用して得ら
れた有機酸の分離を示すクロマトグラムであろう第４図
は本発明による４神の却機１奪イオンの分離を示すクロ
マトグラムである、第５図は本発明による４種のアルキ
ルスルホン酸ナトリウムの分離を示すクロマトグラムで
あシ、第６図は伝導度検出器を使用して得られたアルキ
ルスルホン酸ナトリウムの分離を示すクロマトグラムで
ある。第７図（１本発明による５抽類の陰イオンの分ｐ
１１１を示すクロマトグラムであり、第８図は伝導度検
出器を使用して得られた陰イオンの分離を示すクロマト
グラムである。 １、 試料注入パルプ ２、ｌ＃□ヮ １３、定流掘
送液ポンプ ４、恒温槽 ５、 分離カラム ６、紫外・可視光線検出用セル Ｚ 検出器 ８、記録計 ９、酢酸 １０、蟻酸 １１、 フッ素イオン １２．１篇素イオン １３、 亜硝酸イオン １４、硝酸イオン １５、 オクチルスルホン酔ナトリウム１６、 デ
シルスルホン酸すｌ・リウム１７、 ドデシルスルホ
ン酸ナトリウム１８、 テトラデシルスルホン酸ナト
リウム１９ リン帳・イオン ２０、 硫酸イオン 特許出願人 東洋曹達工業株式会社 １面の浄書（内容に変更なし） 第１面 第２０ １０ ０ ５ 分 事３図 ０ ５ 分 男十記 ０ ４０ ガ第号（２
） １ ０ １２介 手続補正書 昭和５６年１２月２３日 特許庁長官 島田春樹 殿 １事件の表示 昭和５６年特許願第 １７０８３５ 号２発明の名
称 溶液中の無光吸収成分の分析方法 ろ補正をする者 電話番号（５８５）３３１１ ４補正命令の日付 「明細書」および「図面」 （内容に変更なく、タイプ印書による明細書および適正
な図面に補正するもの） ７補正の内容 別紙のとおり ８添付書類の目録 （１）タイプ印書による明細書全文および適正な図面
１通
Claims (1)
- （１）検出器として紫外・可視線検出器を用いた液体ク
ロマトグラフィーにて、溶液中の無光吸収成分を分析す
るにあたり、紫外・可視領域の特定波長で光吸収化合物
を含有する溶液を溶離液として用いて検出することを特
徴とする溶液中の無光吸収成分の分析方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP17083581A JPS5872054A (ja) | 1981-10-27 | 1981-10-27 | 溶液中の無光吸収成分の分析方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP17083581A JPS5872054A (ja) | 1981-10-27 | 1981-10-27 | 溶液中の無光吸収成分の分析方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5872054A true JPS5872054A (ja) | 1983-04-28 |
Family
ID=15912208
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP17083581A Pending JPS5872054A (ja) | 1981-10-27 | 1981-10-27 | 溶液中の無光吸収成分の分析方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5872054A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6073341A (ja) * | 1983-08-31 | 1985-04-25 | イスコ・インコーポレーテツド | 液体クロマトグラフにおけるシユリーレン雑音を低減する方法及び装置 |
| JPS6151566A (ja) * | 1984-05-31 | 1986-03-14 | ザ ダウ ケミカル カンパニ− | 光度計を使用するイオン交換クロマトグラフ分析方法 |
| US4713346A (en) * | 1986-02-03 | 1987-12-15 | The Children's Medical Center Corporation | Formation of analyzable boron containing adducts |
-
1981
- 1981-10-27 JP JP17083581A patent/JPS5872054A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6073341A (ja) * | 1983-08-31 | 1985-04-25 | イスコ・インコーポレーテツド | 液体クロマトグラフにおけるシユリーレン雑音を低減する方法及び装置 |
| JPS6151566A (ja) * | 1984-05-31 | 1986-03-14 | ザ ダウ ケミカル カンパニ− | 光度計を使用するイオン交換クロマトグラフ分析方法 |
| US4629705A (en) * | 1984-05-31 | 1986-12-16 | The Dow Chemical Company | Indirect-photometric chromatography done in and with a variable capacity weakly basic or acidic ion exchange column |
| US4713346A (en) * | 1986-02-03 | 1987-12-15 | The Children's Medical Center Corporation | Formation of analyzable boron containing adducts |
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