JPS6073341A - 液体クロマトグラフにおけるシユリーレン雑音を低減する方法及び装置 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は液体クロマトグラフにおけるシュリーレン雑音
を低減する方法及び装置に関する。

溶出［とフローセルとの間の温度差を低減することによ
り液体クロマトグラフにおけるンユリーレン雑音を低減
することが知られている。これは濃度の差を低減し、従
ってフローセル中の溶出液の部分間の屈折率の差を低減
するものである。溶出液が動いているので、この差は、
予測できｌい方法で光を反射しこれにょシ測光雑音が生
じる。

従来の技術は、溶出液をフローセル中（・こ設けられた
熱交換器中に導入することにより、フローセルとこのフ
ローセルに入る溶出液との間の温度の一致を保とうとし
た。この技術では、熱交換器の出口がフローセルの流入
口に接続されておシ、また熱交換器の本体が熱的にフロ
ーセルの本体に接続されていた。別の技術は、シュリー
レン散乱光がセル壁によって吸収されないようにフロー
セル内に円錐形光学径路を使用することである。

従来の技術は幾つかの欠点を有している。っ舊９、（」
）シュリーレン雑音のほとんどが残っていること、（２
）吸光検出器がフローセルに熱を伝えさせ、そのため溶
出液の流れに対してフローセル中に温度勾配を形成する
こと；（３ン従米の方法は安定が遅く、過大なシュリー
レン雑音を伴なわずに測定ができるよりになる１でに多
くの時間が必要であること：及び（４ン熱交換器の液体
体積あるいは円筒径路上の円錐光学径路の過大な体積が
溶出液中の狭いクロマトグラフピークあるいはバンドの
分離度を低下させること−等である。

熱交換器の液体体積あるいは円筒径路上の円錐光学径路
の過大な体積による欠点は、ミクロ液体タロマドグラフ
ィーに固有の問題である。ミクロ液体タロマドグラフィ
ー（ＭＬＣ）用の一般のカラム直径は１ミリメートルで
あり、従来の一般の高性能液体タロマドグラフィー（Ｈ
ＰＬＣ）のカラム直径は４６ミリメードルである。この
ように、ＭＬＣのカラムの断面積はＩ−１’　Ｐ　Ｌ　
Ｃのカラムの断面積の約％。てあり、そしてＭＬＣの溶
出液のピークは体積で少なくとも２０の因数だけ小さい
。

これはカラム中にあるビータの長さがＩｆ　Ｐ　Ｌ　Ｃ
からＭＬＣになる時に低減する場合には２０の因数より
も太きい。

溶出液のピークがＭＬＣでは小さいので、ピーク分解能
の減少という問題は低いポリュームノ＼ンドを検出し集
束することが困難であるために悪化する。この問題は直
径−が０．１　ミＩＪメートル以下のミクロ毛細管ＭＬ
Ｃカラムが使用される時には更に悪化する。

ｔＷＬｃの小さいピークボリュームは轟然に同じクロマ
トグラフ分解能を維持するためにはｙＣＣ径径路中小さ
い液体体積を必要とする。光学経路長を短かくするとベ
ール（Ｂｅｅｒ）の法則に基づいて吸光感度が減少する
ので、経路長の直径は代ゎシに小さくされなけれはなら
ない。ＭＬＣセルの長さ対直径の大きな比は、同等のＩ
−ＩＰＬＣセルのそしｃｃ　対シ、てシュリーレン雑音
を噌太し、そのためＨｌ）Ｌ（ＪＡことってよりも７１
ｔ　Ｌ　Ｃにとっての問題でさえある。従来のＩＩ　Ｐ
　Ｌ　Ｃの雑音低減法は、Ｊｉ　Ｐ　Ｌ　Ｃにお（ｌす
るよりもＭＬ　Ｃ４ことってよシＭ喪である体積分解能
を減少させるのでＭＬＣには望１しくない。

従って、本発明の目的は、フローセルの近辺の１１別Ａ
〔を低下することによりンユリーレン雑音を減少する新
規な液体タロマドグラフを提供することである。

本発明では、液体クロマ）・グラフにおけるＭ＋音全１
氏減する装置は、吸光検出器、クロマトグラフカラム、
及び光学包囲体内ζζ取り付けられたフローセルを備え
、第１の端部て空気包囲体と連通ずる通風管及び空気包
囲体によって特徴づけられる。

通風管及び空気包囲体は吸光検出器に取り付けられた第
２の端部を有している。空気包囲体には、少なくとも部
分的に吸光検出器内にクロマトグラフカラムを支持する
調整可能な腕及び支持カラムがらる。空気を吸光検出器
から通ノ虱管、空気室を通して吸光検出器に戻すように
流させる手段が備えられており、またフローセル及びカ
ラムは、少なくともカラムの一部分が空気包囲体内にあ
りかつフローセルの一部分及びタロマドグラフのカラム
が吸光検出器内にあるように取り１月けられており、こ
れにより空気が通風管から空気室に流れ、この空気室か
らクロマトグラフのカラムに向けてクロマトグラフのカ
ラムｆ：通りフロルセルに流れる液体の方向に流れる。

′好都合にも、液体クロマトグラフにおける雑音全低減
する装置は更に、注入弁及びカラムの両方が空気室内０
こある工うζこクロマトグラフのカラムに眠り付けられ
た注入弁を備えている。

この装置は更に、１８０ナノメートルと３０００ナノメ
ートルの間の波長の光を発生しかつフロー七ル全通して
光を送る光発生装置を備え、光が１分１町こ１０％以下
だけ強度を変えることを特徴としている。

装置は更に、空気が移動する速度を測定しかつ調整し、
葦だ空気室内の温度を測定する空気流割線１部によって
特徴づけられるという利点がある。

好都合にも、を気流制御部は、温度が空気室の外側の１
点の温ｅ、ｌ：ｖも低下した時に自動的に前記速度〒増
加し、かつ温度が空気室の外側の１点の温度に対して増
大した時に速度を降下させる。

クロマトグラフカラムとフローセルとの間の直接の接続
がその間の直接の連通を可能にし、筐た高熱猷導性かつ
保温性の駕属がら成る腕及び支持カラムがクロマトグラ
フのカラムを取９１すりている。

新しいクロマトグラフを動作する１つの方法は、少なく
ともフローセルとクロマトグラフカラムの一部分を含む
視囲体内の吸光検出器ζこ電力を供給すること、サンプ
ル注入弁と少なくともクロマトグラフカラムの一部分と
を取り囲んでいる空気室中に包囲体から空気を流すこと
及び各位置における時間に対する温度変化が１分間の時
間周期内で包囲体及び空気室内で０．１度ＣＸり小さく
なるまでサンプル注入弁の近くの位置からカラムに沿っ
てフローセルに向けて空気を再循環すること：温度が平
衡になった後に溶出液をカラム及びフローセルに通すこ
と２１分間の周期中に強度が１０％以下変化する光源か
ら１８０ナノメートルから３０００ナノメートルの範囲
の波長を有する光ビームをフローセルを通して送ること
、及び前記フローセルを通る光の吸収の変化を検出する
こと：の各ステップから成っている。

都合のよいことに、この方法は空気を区画からタロマド
グラフのカラムの入口に流れさせ区画に戻させ、更に始
動時に空気室の容積の各ボリュームについて毎分工ない
し」００ボリユームの範囲の空気の流速によって特徴づ
けられる。

液体クロマトグラフを動作する方法は、更に、を気を電
気−光学区画からタロマドグラフのカラムに沿って流さ
せかつ溶出液のカラム内を流れる方向と同じ方向に区画
に向けて戻させること、及び温度が区画内で時間に対し
て安定した後にクロマトグラフの操作を実行することの
ステップによって特徴づけられる。

空気を流させるステップは、空気を区画から、少なくと
もその内部にクロマトグラフのカラムの一部分を有する
空気室へ流させること、及び温度が空気室内で安定する
まで空気をフローセルに近い端部から隔置されたカラム
上の１点から、フローセルとの並置位置に再循環するこ
と、及び温度が安定化した後に溶出液をカラム及びフロ
ーセルを通して送ることの各ステップを含んでいる。

好都合にも、空気を流させるステップは、空気を区画か
ら空気室中に流させること、及び各位置における時間に
対する温度変化が空気室内で毎分当り帆１度ＣＪ：り小
さくなるまで空気を再循環することの各ステップを含ん
でいる１、 以下に図面を参照して本発明の実施例について詳細に説
明する。

第１図には、フローセルアセンブリ１２、光路アセンブ
ＩＪ　ｉ　４、電気−光学部１６及び空気流佑１］御部
１８を有し、液体タロマドグラフにおけるシュリーレン
（５ｃｈｌ　１ｅｒｅｎ　）雑音を低減する装置１０の
簡単化斜視図が示されている。光路アセンブＩＪ　ｌ　
４は光を発生し、この光を電気−光学部１６内のフロー
セルアセンブリ１２を弁して送り、−万全気流制御部１
８がシュリーレン雑音を低減するため電気−光学部１６
の外側のＩＦ−フローを制御する。空気流は空気室６０
のレベルの下の装置の周囲のキャビネット１０２の外壁
１１１及び上壁１１２によっても制御される。

この装置１０はミクロ液体クロマトグラフに特別の用途
がある。ミクロ液体クロマトグラフィは、カラムの内径
が通常の４ないし５ｍｍよりも実質的に小さいという点
で従来の高性能液体クロマトグラフ・ｒ−と相違する高
性能液体クロマトグラフィーの一形式である。

フローセルアセンブリ１２はその頂部が液体タロマドグ
ラフのカラム２０に接続され、七の底部が溶出液出口２
２に接続されている。カラム２０の上端０こ（・工、（
１）分析のためにタロマドグラフにサンプルを供給する
サンプル注入弁２４、及び（２）一般には周囲温度Ｏこ
ある溶出液源からの高圧溶出液入口２６が設けられてい
る。

タロマドグラフ自体は任意の形式のものでよいが、好適
実施例は１９８１年９月９日にＲｏｂｅｒｔＷ、　Ａｌ
　ｌ　ｉｎ（μｏｎにより出願されかつ本発明と同じ譲
受人に譲渡されたて光域中の特許出願３００，５６７に
説明され一〇いるもののようなミクロスケール、高性能
液体クロマトグラフである。

光路ア七／ブリ１４は並べて配置された重水素灯アセ／
ブリ３０と光学区画３２とを有し、そして重水素灯アセ
ンフリ３０からの光はつ°Ｃ学区画３２に送られ、ここ
で光が光学区画３２内のフローセルアセンブリ１２を介
して流される。重水素灯アセンブリ３０は重水素灯３４
と非球面集束鏡３６とを含んでいる。非球面集束鏡は光
を小スリット３８を通して光学区画３２中に集束させる
。

光学区画３２は、空気流制御部１８からの空気がその外
側区画表面で、この区画３２０こ触れる一ｂ＝光路を通
っては流れないようにシール これは非球面モノクロメータ集束鏡４０、ｌｏｇ　Ｍｒ
格子アセンブリ４２、及びビームスフ１ノツタ４４を有
している。非球面モノクロメータ集束鏡４０（１光がス
リット３８を通った後で重水素灯アセンフ゛す３０から
の光を受けるように位置決めされ、この光を回折格子ア
センブリ４２上に集束させる。

回折格子アセンブリは所定周波数の光をビームスプリッ
タ４４上に集束する。ビームスフ１ノツタ４４を通る光
の部はフローセルアセンブリ１２を弁して送られ、集光
鏡４６ｉこより第１の検出器４８上に反射される。この
検出器４８は信号を導体５０上に発生する。ビームスプ
リッタ４４からの光の第２の部分は第２の検出器５２上
に集束され、信号を導体５４上に発生させる。これらの
信号は、以降に説明される特許出願に説明さ］した及び
当該技術で既知であるサンプルについての情報を与える
ために用いられる。

電気−光学部１６は、典形的な吸光モニタに必要とされ
る電子設備と共に重水素灯アセンブリ３０及び光学区画
３２の両方を有している。吸光モニタは溶出液出口２２
を流れる溶出液についての情報を与える出力１ぎ号を発
生する。

好適実施例における吸光モニタは、１９８２年２月２２
日にＲｏｂｅｒｔ　Ｗ．　Ａｌｌｉｎｇｔｏｎの名前で
出願され本発明と同じ譲受人に譲渡された米国特許出願
３　５４，１　９　３の「吸光モニタ（　Ａｂｓｏｒｂ
ａｎｃｅＭｏｎｉｔｏｒ　）　Ｊ中に開示されたものと
同じである。

しかし、吸光モニタは好適実施例の第１図に示されｒｃ
　ｘ　）　ｔｒこキャビネット内のクロマトグラフカラ
ム及びフローセルに適合するようＯこ修正されている。

特殊な吸光モニタは本発明の部分ではない。

空気流制御部１８は、送風機５６、通風路５８及び空気
室６０を有している。通風路５８は一般には、キャビイ
、ットから電気−光学部１６に向けて出口の上に取り付
けられた頂壁及び４つの側壁から成る平行六面体である
。こｆ’Ｌらの壁は具インチ厚であり、＊　ｉｆ側面が
ＩＡインチ×１３７８インチであり、全体の通風路５８
は高さがｉＢ４インチであり、はぼ帆０１立方フィート
の体積を有している。これは空気室６０に向けて位置決
めされており、これと共に共通の頂部を共有している。

空気室６０はタロマドグラフのカラム２０の頂部、サン
プル弁２４及び溶出液入口２６を取り囲んでいる。通風
路５８を空気室６０との間の接続壁６２は多少短かめで
あって、通風路５８がら空気室６０へ空気が流れること
ができるようにほぼ１！４インチ×２インチという両者
間の２１１’Ｌ通間の開Ｉコ空間６８を形成している。

通気室の体積はほぼ０、２５立方フイートであり、その
壁のｊ阜さはほぼＡインチである。

通風路５８に、そしてここから空気室６０に空気を送る
ために、送風機５６が電気ー光学部１６内に取り付けら
れてお９、その頂部及び開口６９を弁して通風路５８の
底部と流通する。空気は通風路５８を通って空気室６０
中にほぼ１０立方フィート／分流れる。空気室６０から
の空気は下向きにタロマドグラフのカラム２０の頂部の
上に流れ、電気−光学部１６中に戻り、ここで空気は熱
を取り去るために光学区画３２の表面を横切って流れる
。

オペレータがクロマトグラフのカラムを使用できるよう
にするために、通風路５８及び空気室６（１）ｉはアタ
リルプラスチックから成り透明である。空気室６０の壁
は溶出液人口２６がその中ｆ　；ｉ［ｌｉる第Ｊの開口
６４と、サンプル弁２４がノブ６７によって操作できる
第２の開口６６とを有している。サンプル（１孔６５４
こ導入された通常の注射針から注入することによってサ
ンプル弁中に負荷される。過剰なサンプルは孔６１を通
っている通気管６３を介して弁から出る。

好適実施例では、通風路５８と空気室６０との体積の比
はほぼ１対２５である。通風路５８の空気室６０に対す
る比は効率的な動作のためには１対１．５の比より小さ
く１対３００の比より大きい範囲内にあり、空気室６０
の体積の熱を発生する電気−光学部１６の体積に対する
比は１．５対１よシ大きくなく１対３０より小さくない
。

送風機５６により生じた体積流速は、空気を微圧力を発
生するに十分なものである。よシＭ要なことは、本発明
の目的を達成するためには、平衡温度分布及び熱線束（
ｔｈｅｒｍａｌ　ｆｌｕｘｅｓ　）が後述する特別の基
準に適合しなければならないことが必要である。好適実
施例では、送風機５６は約１０立方フイート／分の空気
を交換し、かつ毎分空気室６０及び通風路５８内の空気
の体積の少なくとも’ｌｏ　ｔ”交換する容量ヲ有して
いる。

動作Ｏこついて説明する。電気−光学部１６は送風機５
６が動作されている間ｌこ温度平衡が実現される壕で動
作される。温度つまり熱平衡は、温度が１分間の時間周
期内に任意の位置において０．１度Ｃ以上変わらないと
いう状態である。この状態においては、空気は電気□−
光学部１６から通風路５８を通って全気室６０に流れ、
開口６８を通って空気室６０の底部に向けて下方に流れ
、そして光学区画３２の表面上を通って再循環のために
電気−光学部１６に戻る。

好適実施例、では、平衡に達する１てに常温始動の場合
は３時間が待機の暖機始動の場合は１時間が必要とされ
るが、これは空気の体積、局部的熱発生量、及びを気流
速の関数である。送風機は、低電圧直流電源にＸ、９２
５Ｖ１約６０ｍＡで動作される任意の電動機によって、
はぼ２５００ＲＰＭで駆動される渦形ハウジングの内側
にかご形ホイールを有する等の任意の市販のユニットで
よい。

窒気制ｔｉｆｌ１部１８を通る空気流は０．０８インチ
静圧てほぼ］、　Ｕ　ＣＦＭ　（ｃｕｂｉｃ　ｆｅｅｔ
　ｍ１ｎｕｔｅ　）である。一般に、タロマドグラフ温
匿が安定するまで動作されず、この時に送風機５６がら
通風管５８の頂部へ至る′４＋２気の温度変化がある。

空気が下方に空気室６０から光学区画３２へ降下するに
つれてこの空気は流路に沿って空気の温度勾配を形成し
熱を失い、流路を流れるＧこつれて段々冷たくなる。

送風機５６により駆動される加熱空気と同じ方向にカラ
ム２０ｉこｎつて移動する流路内の液体は流路の頂部で
予熱され、流れるにつれて温度が上昇する。しかし、フ
ローセル上約１０′ｆＬいＬ２０ｓｒＩＬの距離では、
空気は流路内の液体の温度近辺葦で冷却される。これは
空気流が空気室の最も近い壁全弁して外部環境に熱を絶
えず失っているためである。空気が十分に冷えた時には
、このを気はもはや流路内の液体を加熱せず、流路内の
液体の温度は液体がこの点から下方向に流れても変化し
ない。

カラム２０内の液体が下方にそして光路区画１４内に流
れた時に、この液体は光学区画３２からの熱的条件に応
じて熱を吸収し始め１次に電気−光学部１６からの熱的
条件に応じて加熱され続ける。同時に、空気流はカラム
２０の下側部分のまわりをそして光学区画３２の壁のま
わりを下り続ける。その間ずつと、空気流は、まず空気
￥１８の外壁を介して次に光路アセンフリ１４を囲んで
いるキャビネット１０２の外壁１１１及び上壁１１２を
弁して外部環境に熱を失い続ける。この空気は冷え続け
、カラム２０及びフローセル１２の下部よシも低います
１す低い温度に低下し続ける。

空気の流速及び大きさ及びコンポーネントの間すは、カ
ラム２ｏの下側部分内及びフローセル１２内の流れてい
る液体の熱平衡温度が等しいように決足テれる。これは
この特定の温度では流路のこの部分の全部あるいはほと
んどに沿っては空気への熱損失が、電気−光学部１６が
らの条件に裏って得られる熱に等しいためである。正及
び負の熱線束はカラム２ｏの下側の１０ないし２０ｃｍ
のところｘｌ）もフローセル１２の近辺が高いが、両方
の場所において流路の外部の正及び負の熱線束はｒａｔ
ｅ路内の同じ温度ζこ対して等しい。

この結果は、説明さ７Ｌ＾並流熱交侠器の形式全周いて
得られるだけであると考えられる。逆流熱交換器−は一
般に並流熱交換器より十分に効率的であると信じられて
いるので、このことは驚くべき結果である。事実、並流
熱交換器は一般に熱交換器の全ての形式の９らで最も効
率が悪いと信じられてい／こ。

温度が安定した時にクロマトグラフは迅速に動作され、
セしてサンプルがサンプル注入弁２４ζこ注入され、−
力漕出液が入口２６を通って流れカラム２０内を下方に
空気流と同じ方向に流れる。

移動相が下方（・こ流れた時に、これは電気−光学部１
６内の温度従って光学区画３２及びフローセル１２の温
度に近い温度１で加熱される。

熱は伝導に工って電気−光学部１６からフローセル１２
に伝わるが、空気が下方に光学区画３２の表面の１わり
全流れ電気−光学部１６に戻る時にこの熱の一部分はを
気によって吸収きれる。

電気−光学部１６から光学区画３２へ伝わる別の熱は通
風管５８及び空気室６０を辿って流れる熱い空気からの
増大した熱にＪ：り相殺きれるので、装置は１度安定す
れば変化には反応しない。このように、光学区画３２内
に伝わった熱の増加は空気室６０内に伝達された熱の増
加を伴ない、両方の温度は平衡の１１にある。

熱が光学ユニット３２内の〕ｌｊ−セル１２の領域から
周囲環境に失なわれた時に、空気室を介して下方に流れ
ているを気から祈気室の壁全介しての空気の熱損失がそ
れ自体同じ比例した増加を維持するので、２つの温度は
平衡のままイ・こある。空気から空気室壁を介して損失
の増加を補償するために熱がフローセル１２の・誤域か
ら更に取り除かれるのでこの平衡はｆｉｌ持さ１し、そ
してこれが安定を保つ。逆に、フローセル１２とカラム
２ｏとの１用の温度差がここに説明した熱的装置を使用
して最初Ｇこゼロにセットされた場合に周囲温度の変化
もこの温度差の変化に多少影響する。これは全気室ｆ：
通って流れる′空気からの熱損失の低減がフローセル１
２の領域からの低減によって相殺されるためである。

熱損失の自動平衡によって、フローセル１２とこのフロ
ーセル１２を通って流７１２るカラム２ｏ内の液体との
１均の少しの温度差を用いて安定を実現するために、送
風機５６の速度の手動調整かがなジｄ易に烙れだ。この
謳度走會１度Ｃより手込い値に、１市１持することも可
能である。

第２図には、光学区画３２、重水素区画３ｏ及び送風機
ｆｌＩｌ制御装置７ｏの回路図が示されている。

−実用物では、送風機制御装置 区画及び電気−光学部で発生された熱ζこよる温度勾配
に裏って生じたシュリーレン雑音を低減するために、光
学区画内の温度を安定化することを助ける。

クロマトグラフのピークを検出するために、重水素灯３
４からの光は鏡３６にＪ：！ｌｌ開口上に集束され、こ
こから隣接の光学区画３２中に通るように光学区画３２
０入ロ開ロ板っ一１′クスーロット３８が光学区画３２
と重水素灯区画３ｏとの間に位置決めされている。光学
区画３２がらの電気信号は導体５０．５４及び７２によ
り外方に送られ、導体５０及び５４からの信号は前述の
竹許出劇中に開示されている吸光検出器に送られ、壕だ
導体°７２からの信号は送風機制御装置７ｏに送られる
。

光学区画３２は、冷却されるべき空気尾６ｏから下方ｆ
・こ流れる望見の通路中に配置さ扛ている。

このユニット内で少食の熱がタングステン灯（図示せず
〕から発生さｉする。タングステン灯ｉＪ：水素灯３４
への別の光源として使用はれる。

格子４２はタングステン灯おるいは重水素灯３４のどち
らかからの光の周波数を選択するためにビホットできる
。このｙｏの選択された周波数はビームスプリッタ４４
に送られる。このビームスプリッタ４４は光ン：フロー
セル１２を通る一方のビームと検出器５２への他方のビ
ームとに分割する。フローセル１２を通る光は集束鏡４
６ｉこよジ検出器４８上に反射される。導体５０及び５
４（ｌ−ｉそｆｌ−ぞ扛検出器４８及び５２からの信号
を伝える。

シュリーレン雑音全低減する装置及び方法は、（１）別
に発生にする下方に増加する液体温度勾配を逆にするこ
とによりカラム中の温度変動を低減するために装置中を
循環する電気の下方に増加する温度の温１↓り勾配を発
生し安ボにする。（２）ンユＩＪ−レン雑音を低減する
ためＯこクロマトグラフの流路の全体に沿つ／Ｃ任意の
点での正味横方向熱線束の′不平衡のために、フローセ
ル１２の上側部分を通りかつフローセルの光路を通りカ
ラム２０から流れる溶出液の各部分間の温度変化を低減
する；及び（３〕異なった密度のを気の層によって発生
した別のフローセルンユリーレン雑音を低減するためＧ
こ、元学区画内の空気の温度変化を低減する。しかし、
主要な効果はフローセル１２を通って流れる液体によっ
て発生する雑音である。

一般に、光源の暖機の後には、短時間の光源の光強度の
変動はより吐くなる。この暖機周期の後光強度の変動は
１分間に１０％より少なくなる。

吸光側足はこれよりもつと正確に０行なわれ、そのため
これは通常は基準ホトセルあるいは当該技術で既知の方
法の１つで光源の帰還安定化を必要とする。送るために
選択された光の周波数は１８０ないし３０００ナノメー
トルの範囲内にある。

送風機５６からのを気の流込を調整するために、送風機
制御１−１Ｉ装置７０は差動増幅器７８、電力増幅器８
０、スイッチ８２、及び送風機５６用の電動機８４を備
えている。第１の温度測定装置７Ｇは好適にはフローセ
ルの上のクロマトグラフのカラム上に取り付（Ｊられ、
第２の温度測定装置８６は光学区画３２内の好適Ｏこは
光路に近接したフローセル１２上に取り付けら扛、導体
７２を介して差動増幅器７８の１方の入力端に接続され
る。差動増幅器７８の他方の入力端は、カラム２ｏ内の
溶出液の温１現である光学区画３２の外側に位置された
温度測定装置７６に電気的に接続されている。

（第１図） この構成によって、温度測定装置７６及び８６からの信
号が差動増幅器７８で比較される。差動増幅器７８の１
方の入力は温度？１１す定装置７６の１つ及び差動増幅
器７８で回路に接続されている可変抵抗８８によシ調整
てきる。温度測定装置７６は電気−光学部１６からは絶
縁によりあるいは物理的に隔置ぢれているようなカラム
温度あるいは周囲温度をＣｌ４１１足する１つの位置０
こ位置決めされている。

生気の移動の手動調整あるいは自動調整を選択するため
に、スイッチ８２はそのスイッチアームが送風機の電動
機８４の入力端に電気的ζこ接続されている単極双投ス
イッチである。投入される接点の１方は車力増幅器８ｏ
の出力端に接続されている。電力増幅器８０の入力端は
差動増幅器７８の出力端に′電気的に接続されている。

スイッチ８２が電力増幅器の出力端ζこ接続されている
時に、可変抵抗８８により制御される設定点の変動は電
動機８４の速度変化を発生しそのため温度の安定性を増
大する。フローセルの光路の壁がフローセルに入る溶出
液と同じ温度にある時に、シュリーレン雑音は実質的に
低減される。これはフローセル１２を通る光の屈折の変
化を生じさせる液体の層の筐度変化がほとんどないため
である。

好適実施例では、液体タロマドグラフにおけるシュリー
レン雑音を低減する方法及び装置によって安定性を得る
ことが容易であるために、送風機５６の速度は手動て制
御てきるだけてあり、めったに変動しない。これは第２
図の図示実施例では可変抵抗９２を介して電位源９０に
接続された第２の接点に向けてスイッチ８２を投入する
ことによ゛り実行される。可変抵抗９２の抵抗値従って
送風機の速度はキャビネットの外側から制御ノブ９４ζ
こよって手動で調整できる。

この構成によって、温度の安定性が得られるまて送風機
５６の速度は制御ノブ９４により調整され一方光学区画
３２あるいは電気−光学部１６内の温度が画定さ７Ｌる
（第１図）。送風機及びその電動機の適正な大きさを決
めることによって、制＠＋は全然必茨でなくなる。適当
な送風機が、例えば、０．０８　ｓｐ、で１０ｃＦＭを
発生する電動機により２４４０　ＲＰ　Ｍの一定速度で
回転される送風機ホイールを備えた送風機の渦巻等が使
用できる。

標準市販ユニットは基本的には５　ｒｒ＋ｍ長ｓｘｏ、
２５ｍｍ直径の光路フローセル及び空気室及び他の変形
を有するソユリーレン雑音フリー動作の可変波長Ｈ／’
　Ｌ　Ｃ検出器を備えている。

第３図は？と気流制御部１８及び内部の回路を示した電
気−光学部１６を備えた、シュリーレン雑音を低減する
装置１０の斜視図である。この第３図に最も良く示され
ているように、クロマＩ・クラフカラム２０は調整Ｅｉ
Ｊ能腕１００に取り１丁けられている。この腕１００は
、ノブ１（Ｊ４の締めつけによって固定位置に把持さＪ
しる支持カラム１０３に沿って位置決めされている。

腕１００及び支持カラム１０３は、実施例にあっては１
０ｃｒｎｈるいは２５ｃｒｎのカラムのどちらかに適合
される一定高さにカラム２０を支持するために、空気室
６０内Ｏこ密閉されている。この構成によって、カラム
の頂部及びサンプル注入弁が空気室６０内に取り付けら
れ、かつ安定が得られシュリーレン雑音が低減されるま
で空気を通風管５８を弁して空気室６０に送ることによ
って制御される。腕１００及び支持カラム１０３は剛性
てあり、）・ウジングの枠組に硬く取り・１月けられて
いる。それらは容易な熱移動を可能にしかつ望ましくな
い熱勾配の形成を避けるために熱伝導性材料から成って
いる。

前述の説明により、液体クロマトグラフにおけるンユリ
ーレン雑音を低減する装置及び方法が幾つかの利点を有
していることがわかる。つ育９、（１）安価であること
、（２）温度安定性を与えるのを助けること、（３）制
御が容易であること：（４）かなり短かい時間周期内で
安定すること、（５）温度に従属する保持時間の変化を
減少することを助けること・（６）分解能を低減するこ
とを助けること；（７）分解能を１氏減せずζこシュリ
ーレン雑音を非常に減少すること、及び（８）実際にク
ロマトグラフの分解能を改善すること、等である。

好適実施例では、空気は垂直通風管５８を介して仝気室
６０の頂部に吹くけれども、空気がカラムに沿って移動
するにつれて空気がより暖められまた、温度を均等にす
るためフローセルに対してより冷やされることだけが必
要なのである。更に、カラムは数多くの異なった方法で
、キャビネットに対する異なった高さに取すイ１けるこ
とがてきる。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明の実施例の部分斜視図、第２図は第１図
の実施例の一部分の斜視図、第３図は第１１凶の本発明
の実施例の別の角度からの部分断面斜視図である。 １０　：　・／ユリーレン雑音低減装置１２、フローセ
ル　１４　：　光発生システム１６：吸光検出器　１８
：窒気流制御部２０：クロマトクラフンフラム　２２：
溶出液出口２４：サンプル注入弁　２６：溶出液入口３
０：重水素灯　３２：光学区画 ３８ニスリツト ４ｏ：弁球８モノクロメータ集束鏡 ４２：回折格子　４４：ビ−ムスプリツタ４６：集光鏡
　４８．５２：検出器 ６４．６６：開口　６７：ノブ ７０：送風機制御装置　７６．８６：温度ｍ＋＋定装置
７８：差動増幅器　８０：電力増幅器 １００：腕　１０２．キャビネット １０３：支持カラム （外５名〕

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）吸光検出器（１６）及びクロマトグラフカラム（
   ２０）及び光学包囲体（３２）内に取り付けら扛たフロ
   ーセルを有する液体タロマドグラフにおけるンユリーレ
   ン雑音を低減する装置において、空気包囲体（６０）及
   び第１の端部で前記空気包囲体（６０）と連通ずる通風
   管（５８）　；前記通風？ｉ’（５１３）及び空気包囲
   体（６０）は吸光検出器（１６）に取り句（プら−２ま
   た第２の！Ｈｔ部を有している；吸光検出器のキャビネ
   ット内に少なくとも部分的にある前記クロマトグラフカ
   ラム（２０）を支持する調整可能腕（１００）及び支持
   カラム（１０３）　；空気を前台己吸光検出器から通風
   管（５８）、空気室（６０）を通して前記吸尤検１」４
   器に戻すように流させる手段（５６）　；少なくとも前
   記カラム（２０）の一部分が前記包囲体内にあり、かつ
   前記フローセル（１２）及びクロマトグラフカラム（２
   ０ンの一部分が前記吸光検出器内にあるように取り付け
   られた）ｏ　−セル（１２）及びカラム（２０）　；か
   ら成り、これにより液体が前記クロマトグラフカラム（
   ２０）を通して前記フローセル（１２）に流れる方向に
   、空気が前記通風管（５８）から前記空気室（６０月こ
   流れこの空気室（６０）を介してクロマトグラフカラム
   （２０）に向けて流れることを特徴とする液体クロマト
   グラフにおけるシュリーレン雑音を低減する装置。 （２〕　特許請求の範囲第１項において、更に、注入弁
   とカラムの両方が前記空気室（６０）内にあるように前
   記クロマトグラフカラムに取り４月けられた注入弁を備
   えることを特徴とする液体タロマドグラフにおけるンユ
   リーレン雑音を低減する装置。 （３）特許請求の範囲第１ないし２項において、１８０
   ナノメートルと３０００ナノメーレレの間の波長の光を
   発生し、このブｆｌ、を前記フローセルを介して送る光
   発生装置を備え、前８ｉ１２元発生システム（１４）が
   １分間に１０３！／、以下だけ強度ｋＶ化する光な発生
   することを特徴とする装置。 （４〕　特許請求の範囲第１ないし３項において、更に
   、前記空気が移動する速度を測定し調整する空気流制御
   部（１８）を備えることを特徴とする装置。 （５）特許請求の範囲第４項において、前記空気流制御
   部（１８）が前記空気室内の温度を測定することを特徴
   とする装置。 （６ン　特許請求の範囲第１ないし５項において、前記
   空気流制御部（１８）は、前記温度が空気室（６０ンの
   外部の１点の温度ｌこ比して低下した時に自動的に前記
   速度を増加し、かつ前記温度が空気室（６０）の外部の
   １点の温度Ｏこ比して上昇した時に前記速度を低減する
   ことを特徴とする装置。 （７）特許請求の範囲第１ないし６項において、前記ク
   ロマトグラフカラム（２０）と前記フローセル（１２）
   との間の実質的に直接の接続がその間の直接の連通を可
   能にすることを特徴とする装置。 （８）特許請求の範囲第１ないし７項において、高熱伝
   導性かつ保温性金属から成る前記カラム（２０）をＩｖ
   、シ付ける腕（１０（Ｊ）及び支持カラム（１０３）全
   備えることを特徴とする装置。 （９）少なくともクロマトグラフカラム、サンプル注入
   弁、及びフローセルを有する液体クロマトグラフを動作
   する方法において、少なくともフローセルとタロマドグ
   ラフカラムの一部分を含む包囲体内の吸光検出器に電力
   を供給すること、サンプル注入弁（２４）と少なくとも
   クロマトグラフカラム（２０）の一部分とを取り囲んで
   いる空気室（６０）中に包囲体（３２）から空気を流す
   こと及び各位置における時間に対する温度変化が１分間
   の時間周期内で包囲体及び空気室内で０．１度ＣＪ、り
   小さくなるまでサンプル注入弁（２４）の近くの位置か
   らカラム（２０）ζこ沿ってフローセル（１２）に向ケ
   て空気を再循環すること、温度が平衡になった後溶出液
   をカラム（２０）及びフローセル（１２）に通スこと；
   １分間の周期中ζこ強度が１］９’以下変化する光源か
   ら１８０ナノメートルから３，０００ナノメートルの範
   囲の波長を有する元ビームをフローセル（１２）を通し
   て送ること、及び前記フローセル（１２）ｋ通る光の吸
   収の変化を検出すること：の谷ステップから成ることを
   特徴とする液体タロマドグラフを動作する方法。 （ＩＱ）％許請求の範囲第９項において、始動時には空
   気室（６０）の容量の各体積に対し毎分当り１ないし１
   ００空気ボリユームの範囲での流速で、空気を区画から
   クロマトグラフカラムの入口へ流させそして区画へ戻さ
   せることを特徴とする液体タロマドグラフを動作する方
   法。 田つ特許請求の範囲第９ないし１０項において、溶出液
   がカラム（２０）内を流れる方向と同じ方向で、空気を
   電気−光学区画（３２）からクロマトグラフカラム（２
   ０）に沿って流させそして区画（３２）ｋこ戻させるこ
   と、及び温度が区画内で時間に対して安定した後クロマ
   トグラフの操作を実行すること；の谷ステップから成る
   ことを特徴とする方法。 （至）特許請求の範囲第９ないし１１項において、区画
   （３２）から少なくともクロマトグラフカラム（２０）
   の一部分をその内部に有する空気室（６０）に空気を流
   させること、及び温度が空気室（６０）内で安定になる
   １て空気をフローセル（１６）ＲＬ近い方の端部から隔
   置されたカラム（２０）上の一点よシフローセル（１２
   ）との並置位置へ再循環すること；及び温度が安定にな
   った後にカラム（２０）及びフローセル（１２）ｋ通し
   て溶出液全速ること；の各ステップから成ることを特徴
   とする方法。 （２）特許請求の範囲第９ないし１２項において、区画
   （３２）から空気室（６０月こ空気を流させること、及
   び各位置における時間に対する温度変化が空気室（６０
   ）内で毎分当り０．１度Ｃ，ｌ：り小さくなる壕で空気
   を再循環することのステップから成ることを特徴とする
   方法。