JPS5899498A - フラボノ−ル配糖体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は式 で表わされる７ラボン誘導体に関するもので、ある。た
だし、ＲＩはソホロシル基、グルコシル基または水素を
意味し、−および狗は一方が水素を、他方が７エルロイ
ル基を意味する。

さらに詳しくは９本発明は０−７８ルロイルグルコシル
ケン７エロールおよびその８−０−グルコシルもしくは
ソホロシル誘導体に関するものである。

これらの化合物はニラの抽出物から得られ。

あるいはこれを原料として加熱、酵素処理、酸処理等の
処理手段により得ることができ、線溶誘導活性および／
または抗アレルギー作用を有し医薬として期待される。

ニラ（ＡＡｌｌｌｕ　ｔｕｂｅｒｏｓｕｍ　Ｒｏｔｔｌ
　）は、広く食用に供されているが、その薬理作用につ
いては殆んど知られていない。漢方ではその種子が白色
帯下、頻尿らに用いられることもあるが、その葉茎部は
全く用いられていない。またニラの成分研究も少なく、
含硫黄揮発性物質が数種知られているが、その他の成分
に関してはこれまでに殆んど報告が見られない。

本発明者らは、ニラの葉茎部の抽出エキスから線溶誘導
作用および／または抗アレルギー作用をもつ新規７ラボ
ノイドを単離し、７ラボノイドムと命名した。７ラボノ
イドＡの構造は。

ケンフェロール（ｋａｅｓｉｐｈａｒｏｌ　）骨格を有
し、その８位にソホロース（ｓｏｐｈｏｒｏｇｅ　）　
、また７位に２−７エルロイルグルコース（２−ｆｅｒ
ｕｌｏｙｌ　ｇｌｕ−ｃｏｓａ　）の結合したものであ
る。

７ラボノイドム水溶液を加熱することによりフェルロイ
ル基が２位から６位に転位した７ラボノイドＢが得られ
、またこの７ラボノイドＢを希酸で加水分解すると８位
ソホロースの脱離した７ラボノイドＣが得られた。また
、７ラボノイドムを希酸で加水分解すれば、８位ソホロ
ースの血離した７ラボノイドＤが得られ、さらに、７ラ
ボノイドＡをヘスペリジナーゼで酵素分解することによ
り、８位ソホロースから１個のグルコースの脱離した７
ラボノイド！が得られた。これらの化合物は、いづれも
薬理活性を有し、かつ新規物質である。

７ラボノイドＡを得るには、ニラの葉茎部を新鮮のま＼
あるいは乾燥したのち、水または含ま 水有機溶媒で抽出する。葉茎部はそのま＾抽出してもよ
いが、抽出効率を高めるために切断または粉砕して用い
る方が望ましい。抽出溶媒は水のみよりも、それに適量
の有機溶媒２例えばメタノール、エタノール、プロパツ
ールなどのアルコ−“ル、ア七トン、ジオキサンなどを
添加した混合溶媒の方が抽出効率が良い。またベンゼン
、ヘキサンなどでクリロフィルなどの色素を除去したの
ち、水で抽出する方法でも良い。

ただし、いづれの溶媒を用いる場合でも、７ラボノイド
Ａが熱に対して不安定であるため、抽出温度は室温以下
であることが望ましい。例えば、新鮮二う葉茎部を３乃
至５倍量の８０−メタノールと室温８〜６日冷浸したの
ち、濾過して抽出液を得る。

抽出液から７ラボノイドムを分離精製するには一般の天
然物の単一に用いられる公知の手段を適宜組合せて行う
ことができる。すなわち。

非極性多孔性ポリマー、デキストランゲル類。

活性炭、ｌリアミド類やシリカゲル類を用いた吸着クロ
マトグラフィーや分配クロマトグラフィーが適用できる
。また、これらのクロマトグラフィーを高速液体クロマ
トグラフィー装置ヲ用いて行うこともできる。さらに必
要によりブタノールなど適当な笹媒を用いて再結晶する
こともできる。

７ラボノイドムは新規物質であり１次の理化学的性質を
有する。

イ）性状：Ｓ−ブタノール−エタノールから再結晶した
とき、一点ＺＯＯ〜Ｓｌｌ”Ｃの淡黄褐色粉末品を与え
る。

→元素分析 計算値（ｃ４３Ｈ４・０２４・Ｈ２Ｏ）０　６Ｂ、１％
、　　Ｈ５１Ｂ１％ 実測値 ０　６Ｂ、２？％、Ｈ４，９８％ ハ）呈色反応 塩酸マグネシウム反応、塩化第二鉄反応に陽性、ニンヒ
ドリン反応、ドラーゲンドルフ反応に陰性。

副索外部吸収スペクトル λＲ−Ｈｄ（ｌｏｇｇ　）　：　２ＢＢ　（４，８６Ｌ
　２４６ＩＩＩ龜Ｘ （４Ｊ？　）ｔ　２６９　（４，８１）、　８８Ｂ　（
４，４２）λ”Ｈ−ＡＩＣ”　ａｍ　（ｌｏｇ　ｇ　）
　＝　２８４　（４，８５）　。

墓１Ｌｘ ８７８（４，８６）、８０！（４４Ｂ）、８８９（４，
８１３，８９９（４，０８） ２””−””ＩＣ′５１１（ｌｏｇ　ｉ　）　：　２４
　Ｂ　（４，５８）　。

ａｘ ！６８　（４，５０＞ｔ　８８８　（４，６０）λ””
−”０Ａ０ｓｌＩ（１ｏｇ　ｇ　）　！　ｉＢ　８　Ｂ
　（４，８６）　。

―亀Ｘ ２４７　（４Ｊ６　Ｌ　　２６８　（４，Ｚ９　Ｌ　　
８ＢＢ（４，４１） ホ）赤外線吸収スペクトル へ）マススペクトル ＦＤ−Ｍａｗ／ｚ：１１８Ｂ、　　１１１９．　９８７
　　（Ｍ”＋Ｋ）、９７１（Ｍ”＋Ｎａ）、９５？、８
０９゜７９５．６６８，６４７，６８８，４８７．４７
１゜ト）溶解性 水に易溶、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキサ
イドに可溶、エタノール、メタノール、クロロホルム、
アセトン、ベンゼン。

エーテル、酢酸エチルに難溶。

チ）核磁気共鳴ｘペク）ルー（ＳＯＯＭＨｚ、ＤＭ８０
−＜ｌｓ　−Ｄｚｏ　）δｐｐｍ　（ＪＨｚ　）　”８
．８０　（８Ｈ，ｓ）　　　　　４．６６（１Ｍ、　ｅ
ｉ、　Ｊ−Ｆｌ）４．９　？　（ＩＨ，ｔ、　Ｊ−８）
　　５．４６（ＩＨ，ｄ、　Ｊ−８）５−６９　（ｌ　
Ｈ１ｂｒｅｉ−Ｊ−８）　　６−４１　（ｌ　Ｈｓ　’
！　）６．５０（ＩＨ，１，Ｊ−１６）　　６．８０（
ＩＨ，！ｌ）６．８８　（１）１．　ｄ、　Ｊ−８）　
　６Ｊ　５（ｔｌＨ，（１，Ｊ−８）？、１６（ＩＨ，
ａ、Ｊ−８）　　７．８１（ＩＨ，８）７．６４　（Ｌ
Ｈ，（１，Ｊ−１６）　　８．１１　（２Ｈ，ｄ、　Ｊ
−８）す）酸分解物 ＩＮ−塩酸中、１００°Ｃ，５時間加水分解したとき、
ケンフェロールおよびグルコースを生成する。

ヌ）アルカリ分解物 １％力セイカリ水溶液中、室温、１５時間加水分解した
とき、７！ルラ酸を生成する。

ル）糖のメチル化分析 アルジトールアセテート法により、　８，４．６−トリ
メチルグルコース１．００モルに対シ。

２、８．４．６−チトラメチルグルコースを１．９７モ
ル検出した。

上記の理化学的性質から、７ラボノイドムの構造式は、
下記のごとく推定された。すなわち７ラポノイドＡは８
−０−β−Ｄ−ソホロシルー７−０−β−Ｄ−（２’−
０−）、ルロイル）グルコシルケンフ！ｐ−ルである。

ド真水溶液を加熱すればよい。水溶液のｐＨは中性附近
もしくはアルカリ性であることが必要で、酸性側のｐＨ
では転位反応が起り難い。ただし、アルカリ側のｐＨで
は、７エルロイル基の脱離などの副反応を助長するので
好ましくない。また反応温度は室温乃至ｉｏｏ℃の間の
いづれを選んでもよいが、低温では９反応の進行が遅い
ため、８０乃至１００℃の範囲が望ましい。７ラボノイ
ドＢの生成は１反応時間に比例して増加するが、１０時
間以上の長時間では副反応が起るので、好ましくは２乃
至５時間の反応時間が適当である。反応液から７ラボノ
イドＢを得るには反応液を氷冷し、生ずる沈でんを集メ
、　含水アルコールなどの溶媒から再結晶すればよい。

７ラボノイードＢは以下の理化学的性質を有することか
ら、７ラボノイド真のｉＬ位７エルロイル基が６位に転
位した構造であると推定された。

イ）性状＝５０襲メタノールから再結晶したとき融点ｚ
１４〜２１７℃の微黄色針状晶を与える。

口）元素分析 計算値（Ｃｎ５ＨａｓＯ２４４Ｈ２０）０　１ａ、４４
％、　　Ｈ５，８１％　　−実測値 ０　６２．８８％、　　）１　６．０９％ハ）溶解性 アルカリ性水溶液、ジメチルホルムアミドお−よびジメ
チルスルホキサイドに易溶、エタノールに可溶、水およ
びベンゼン、酢酸エチル。

エーテル、メタノールなどに難溶。

二）紫外線吸収スペクトル ＫｔＯＨ λ　　ｗ（ｌｏｇｇ）　：２８Ｂ（４，８１）ｔ　２４
７ＩＩａＸ （４，２１）、　２６８　（４，２幻、８８Ｂ（４，８
８）λ″″ｔｏＨ＋Ａ１０”ｓｍ（ｌｏｇｇ）　　：　
　Ｚ　　８　５　　（４，８ＯＬａＸ ！７９（４，２８Ｌ　８０Ｂ（４，１６）、８８８（４
，８０）、　８９６　（８Ｊ４　）λＩｔＯ）））−Ｎ
ａＯＡｃ ｍｉｘ　　　　ｓａ（ｌｏｇｇ）　：　２　Ｂ　４　（
４４９）　。

２４８（４，１？）、１６８（４，１９）、８Ｂ４（４
，８１） ホ）　赤外ｉ吸収スペクトル ｙ””ｃｗｌ−”：　８４００．１６５５．１６００．
１０８０ａｘ へ）マススペクトル ＦＤ−Ｍ８　１１／！Ｗ　：　９８７　（Ｍ”＋Ｋ　Ｌ
　９？　１（Ｍ”＋Ｎａ）、８（ＤＩ、７９５，６６８
，６８１ト）核磁気共鳴スペクトル（２００ＭＨＫ、　
ＤＭ８０−＜１ｓ−ＤｚＯ）δｐｐｍ　（ＪＨｚ　）　
：８．８０　（８Ｈ，ｇ　）　　　　　４．２１　（Ｉ
Ｈ，ｄａ、　Ｊ−１２，８）４．５、Ｊ（ＩＨ，Ｊ−Ｉ
Ｊ）　　　４．６６（ＩＨ，ｄ、Ｊ−８）６．１８（Ｉ
Ｈ，ａ、−Ｊ−８）　　５．７０（１）１．ｂ惰Ｊ−８
）６．４７（ＩＨ，！、Ｊ−１６）　　６．５５（ＩＨ
，ｓ）６．８１（ＬＨ，＋１．Ｊ−８）　　６．８５（
ＬＨ，１ｍ）６．９８（８１（、ｄ、　Ｊ−８）　　７
．０８（ＩＨ，ｄ、　Ｊ−８３？Ｊ？（ＩＨ，８）　　
　　　　７．５９（ＩＨ，ｄ、Ｊ−１６）８．１　Ｂ　
（２Ｈ，（１，Ｊ−８） ７ラボノイドＣは、７ラボノイドＢの部分加水分解によ
って得られる。７ラポノイドのグルコサイドは結合位置
により酸加水分解に対する抵抗性が興なることは公知（
例えば、　Ｊ、Ｂ。

Ｈａｒｂｏｒｎｅ、　Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍ＋１ｓｔｒｙ
　ｉｔ　１０７　（１’９６５年））であり、７位グル
コサイドを残し、８位グルコサイドのみを選択的に加水
分解することができる。この方法を適用して、７ラボノ
イドＢから得た７ラボノイドＣの理化学的性質は表１に
示した。

７ラボノイドＤは、同様にして、７ラボノイドムの８位
グルコサイドを部分加水分解して得られ、その理化学的
性質は表１に示し、た。

７ラボノイドＸは、７ラボノイドＡの８位ソホｐ−スの
非還元末端のグルコースのみを選択的に加水分解する方
法１例えばヘスペリジナ−ゼを用いる酵素分解で得るこ
とができる。７ラボノイド！の理化学的性質は表１に示
した。

表１７ラボノイドＯ，Ｄおよび２の理化学的性質 ７ラボノイドム、Ｂ、Ｏ，Ｄおよび２の線溶誘導活性お
よび抗アレルギー活性を試験した結果を表２に示した。

表２７ラボノイドム、　Ｂ、　Ｏ，Ｄおよび冨の薬理活
性 注１）ラットに検体を静脈内投与し、１０分後援血した
血液のニーグロブリン溶解時間を測定し、投与前のそれ
と比較して、投与前／投与後×１００（４）士標準誤差
で示した。一群８匹。

注２）う、）ＰＯＡ反応（抗卵白アルブミンラ。

ト血清を感作後４８時間惹起）の抑制率で示した。抑制
率は各群の色素漏出面積から次式により求めた。一群５
匹。

抑制率（４）−（対照群−投薬群）／対照群±標準誤差 注８）５１１９／１１９投与 注４３ｇ１１９／Ｊ投与 注５）ジナトリウムクロモグリケート 実施例１ ニラの集綿（湿重量Ｓ、０Ｉ９）を粉砕し、８０襲メタ
ノールｔ、ｈｔで室温にて６日間抽出した。

濾過後、濾液からメタノールを留去し、得られた水溶液
を多孔性樹脂（三菱化成製ダイヤイオンＨＰ−２０）１
．０１ｆ）カラムに通過させ、水８１で洗浄した。つぎ
に８０％メタノール１１で溶離する部分を集め、濃縮乾
固して、濃褐色粉末が１４．Ｏｊ得た。

この粉末９．０ｇをｌθ％メタノールｌｌに溶かし、１
０％メタノールで充填した＝ＨＰ−２０（１，Ｏｊ）カ
ラムにかけた。カラムをｌｏｇメタノール１１，５０％
メタノール１１で洗浄後８０％メタノール２１で溶離す
る部分を集め。

濃縮乾固すれば、茶褐色粉末がＬ４８９得られた。

つぎにこの粉末１．６０９を６０％メタノール８０−に
溶かし、逆相系シリカゲル（東洋曹達製７８に−ＧＫＬ
ＬＳ−４１００ＤＳｉ９ＩＬ）（ＩＸｌ１インチ）カラ
ムを用いて高速液体クロマト装置による分取を行った。

溶媒は６０％メタノール、流速は１４ｇＬｔ／分、サン
プルの注入量は毎回８−とじ、紫外部２６４５ｍ　　に
よって検出した。活性画分として保持時間６ないし８分
の部分を分取し、濃縮乾固して０．５０９の茶褐色粉末
を得た。

さらに、精製するために再びＬＳ−４１０カラムにかけ
た。すなわち、この粉末８４６■を４５９＆メタノール
１７．８−に溶かし、ＬＳ−４１０カラム（ＩＸＩＩイ
ンチ）を接属した高速液体クロマト装置により分画した
。４６弾メタノールを流速１４＠ｔ／ｍｌｌで流し、１
８ないし２１分の保持時間で溶出する活性画分を集めｔ
濃縮乾固すれば淡褐色粉末が４４ｍ９得られた。

この粉末を襲−ブタノール−エタノールの混合溶媒から
再結晶し、７ラボノイドＡを淡黄褐色粉末品として得た
。

実施例２ ７ラボノイドムｌ（１”９をｐＨ７，０のリン酸緩衡液
１Ｏ６９−に溶解し、沸騰水浴上で８時間加熱した。−
晩冷蔵庫内に放置し、生じた沈殿を遠心分離した。沈殿
は水５ｓａ／で洗浄後、５０％メタノールで再結晶し、
微黄色針状晶の７ラボノイドＢを５５■得た。

実施例８ ７ラボメイド８４０■を２．５ｓ硫酸の５０％エタノー
ル溶液ｌ〇−中で１００分間加熱還流した。反応液を酢
酸エチルで抽出し、酢酸エチル相を水洗、乾燥後、濃縮
乾固した。得られた黄色粉末をエタノールから再結晶す
れば、黄色針状晶の７ラボノイドｃｌＢＮ９が得られた
。

実施例会 ７ラボノイドＡ３０１１９を５％硫ａ！８−に溶解し、
沸騰水浴上で１００分間加熱した。冷却後生じた黄色沈
殿をエタノールから再結晶して。

黄色粉末品のフラボノイドＤ１０１６９を得た。

実施例５ ７ラボノイドＡ１００ｗｋｇをｐＨ４のクエン酸−リン
酸緩衝液ｚ５−中で可溶性へスペリジナーゼ（田辺）２
００■を用い８７℃で４０時間酵素分解した。冷却後生
じた沈殿を十分に水洗し、黄色粉末品の７ラポノイドに
６１”９を得た。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （式中Ｒ１はソホロシル基、グルコシル基または水素を
   、＆および＆は一方が水素を、他方が７エルロイル基を
   あられす。）であられされる７ラボン誘導体。 （ｇ）ｓ−ｏ−β−Ｄ−ソホロシルー７−０−β−Ｄ−
   （！’−０−フェルロイル）−グルコシルケン７！ロー
   ルである特許請求の範囲第一項記載の化合物。 （８）　８−０−β−Ｏ−ソホロシルー７−〇−β−Ｄ
   −（６’−０−７エルロイル）−グルコシルケン７！ロ
   ールである特許請求の範囲第一項記載の化合物０