JPS59166865A - ペルオキシダ−ゼ活性検出組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、ペルオキシダーゼ活性の検出に対して有用な
組成物および特に種々な被検体中のはルオキシダーゼ活
性の確認に関するものである。更に詳しくは、本発明は
、糞便性潜血、ヘモグロビンおよび生物学的液体中に存
在するペルオキシダーゼ活性の検出に対して有用な安定
な指示体溶液の製造に関するものである。

ペルオキシダーゼ活性の検出は多数の病気を診断するた
めの開業医にとって非常に貴重な助けとなっている。ペ
ルオキシダーゼ活性は、被検体中のヘモグロビンの存在
を示すことが判っておりそして女性の高められた受精期
間と比較されることが報告されている。

本国においては１年につき１００，０００Å以上が男性
および女性人口の両方において等しく発生する結腸およ
び直腸の癌によって冒されている。

それぞれの年に発生する結腸直腸癌の数を食道および胃
を包含する他の消化性器官において発生する癌の数と合
した場合、消化性組織のこのような癌はすべての他の単
一形態の癌より多くの癌の発生を占める。他の多くの形
態の癌に反して、消化性管癌の初期の診断および治療は
、この病気によって冒された患者の８０〜９０チの治癒
割合を与える。しかしながら、もし後期の段階までこの
病気が検出されない場合は、治癒割合は徹底的に２５チ
またはそれ以下に低下する。このように、この病気の初
期の検出は、消化性管癌の有利な治療に対して非常に重
要である。

すべてではないが大抵の場合、消化性管の癌は、ある程
度出血する。胃内容物および嘔吐物中に見出される若干
の血液は、潰瘍、憩室炎、大腸炎および癌腫のような粘
膜の病気に関連する症状を示す。対比的に、若干の血液
は、消化性組織から排泄される糞便物質に沈着する。し
かしながら、糞便物質中の血液の存在は、大量の出血が
起って肉眼でみることのできる程度に血液を生ずるまで
は、普通検出されない。しかしながら、大量の出血は、
消化性管の癌が進行した段階になるまで、普通起らない
。

また、初期の段階における消化性管癌が出血して糞便物
質中に潜血を生ずる傾向のあることも知られている。糞
便物質中の潜血の存在を試験するために医師によって使
用される試験装置および試験操作方法が開発されている
。もつとも有利な試験の一つとして”ヘモカル）　（Ｈ
ｅｍｏｃｃｕｌｔ）■”（スミス・クライン・ダイアグ
ノステクスによって製造販売）がある。

ヘモカルト試験に対するノぞツケージは米国特許第３，
９９６，００６号明細書に説明されている。簡単に言え
ばこの試験はグアヤク（ｇｕａｉａｃ　）試薬で含浸し
そして試験スライドの両側面に開口できるフラップを鳴
する特別の試験スライドに入れた吸収剤白色紙を使用す
る。この試験スライドを使用するためには、糞便物質の
試料を得、試験スライドの一側面上のパネルを開口する
ことによってそれをグアヤク含浸紙上に塗りそしてその
彼パネルを閉じる。次に試験スライドの対立側面上のパ
ネルを開きそして過酸化水素および変性アルコールの安
定化溶液である発色剤を、グアヤク含浸紙に適用する。

もし潜血が紙の対立側面上に塗られた糞便物質中に存在
する場合は、グアヤク反応の生成物が白色紙背量に対す
る青色物質として現出し％糞便物質中の血液の存在の正
の指示をふえる。

この試験は診療室での医師による使用および診断実験室
での使用に対してはすぐれているけれども、糞便物質の
取扱いに対する通常人の嫌忌反応のためおよび結果を判
断する通常人の未熟さのためにそれは通常人による使用
に対して容易に適合できる型の試験ではない。前述した
ように、この試験は糞便物質の被検体を得ることを必要
とする。通常、へらまたは木製圧子の先端上に試料をと
ることによって被検体な得そして次にこれを使用して試
験スライドの紙上に被検体を塗る。いったん試料を得そ
して操作を完了したら、試験スライドおよびへらまたは
圧子は処分しなければならない。仮に心理的嫌忌反応が
ないとしても、使用したものの処分は通常人にとって物
理的問題を与える。このようにその不潔な性質および使
用した試験スライドおよびへらまたは圧子に関連した処
分の問題のために、通常人はこの試験を好んで使用しな
い。

その上１通常人は必ずしも試験結果を分析しそして試験
結果から正確な結論を下すのに必要な熟練を有してはい
ない。

あるいはまた、通常人は家庭においてこの試験を開始し
そして次に試験スライドを発色剤の添加および試験の分
析のために医師または実験室に送ることができる。しか
しながら、試験を完了するまでにかなりの時間を要する
場合は、この操作は試験スライドおよび被検体の冷温貯
蔵を必要とする。云うまでもなく、通常人は被検体を医
師または適当な実験室に与えることができるまで、糞便
被検体を通常利用し得る唯一の冷温貯蔵手段である家庭
の冷蔵庫に貯蔵することを望まない。従って、この方法
は一般には採用されていない。

潜血に対する他の試験は、米国特許第２，８３８，３７
７号明細書により示唆されている。開示されているこの
試験は糞便物質を含有するトイレット・ボール中で行う
ことができる。この試験に使用される基本的な試験試薬
は０−トリジンおよびベンジジノである。血液および他
の反応剤の存在下においてこれらの試薬は肉眼に見える
色素を生成する。この試験は潜血に対する実行可能な家
庭での試験を見出すという問題に対する解決であると思
われるけれども、それは次の２つの理由のために成功し
ていない。第一に、前述した試薬はそれ自体筋を発生す
る原因であることが知られており、従って一般に配布す
るには適当ではない。更に、この試薬は、相対的に高度
な割合で潜血の存在について間違った指示を与える。

このように、現在まで、前記米国各特許の試験および他
の同様な試験の使用は主として医師および診断実験室に
制限されている。この制限は一見、有意な問題は与えな
いかも知れないけれども、主に患者は大量の出血のよう
な消化管の癌の他の徴候が現われるまで医師に見せない
ので、消化管の癌の初期の検出は制限されている。従っ
て消化管の癌の初期の検出は、この病気にかかっている
患者の大部分においては未だに行われていない。

従来の技術はにルオキシダーゼ活性を検出するための簡
単な且つ信頼できる試験の必要性を認めているけれども
、このような試験は許容し得る型の日常的な家庭の使用
に対しては利用されていない。

ペルオキシダーゼ活性の検出に対して有用である組成物
が意外にも発見された。この組成物は、混合したときに
特定の被検体または試料中のヘモグロビンの存在のよう
なペルオキシダーゼ活性の存在を示す安定な視覚的に肉
眼でみることのできる指示体の形成を生ずる４種の本質
的な成分からなる。血液のようなはルオキシダー七活性
の存在下において組成物は肉眼でみることのできる色変
化を示す。組成物は、室温において安定でありそして家
庭の使用に対して有効なものにする許容し得る方法で容
易に使用される。本発明の組成物は、４種の主成分すな
わち（ａ）可溶性指示物質、（ｂ）指示物質を溶解する
有機溶剤　（ｃ）　’ルオキシグーセ活性の存在下で指
示物質を酸化できる酸化剤および（Ｃ）緩衝剤からなる
。

本発明はまたｔ　（ｉ）Ｒルオキシダー七活性の存在に
ついて分析される被検体を集め、（２）この被検体を（
ａ）可溶性指示物質、（ｂ）指示物質を溶解する有機溶
剤　（ｃ）　’ルオキシダーゼ活性の存在下で指示物質
を酸化できる酸化剤および（ｄ）緩衝剤から製造された
組成物と接触させそして（３）ペルオキシダーゼ活性の
存在または不存在を検出する工程からなるペルオキシダ
ーゼ活性の検出方法およびそれの使用のためのキ□ット
を企図するものである。

従来の技術の概念と同様に１本発明の概念はヘモグロビ
ンおよび生理学的液体中ｉで存在するＲルオキシダーゼ
活性の検出に基づくものである。血液の場合における接
触的に活性な物質としても参照されるこのはルオギシダ
ーゼ活性は。

ヘモクロビン中において確認される。これらの物質は、
ヘモ蛋白質、同じ配合群を有する複合蛋白質、鉄プロト
ポルフィリンまたはヘムの一般的級に属する。この配合
群は受容体へのｒｅ、素源からの酸素の移動を接触する
能力を有し、受容体は次に酸化される。受容体はそれが
酸化されるまで無色のプレカーサーであり、酸化された
形態は色形成によってペルオキシダーゼ活性の存在を示
す。

本発明の組成物は、予め有機溶剤に溶解された指示物質
および酸素源特に酸化剤を含有している。接触活性基を
含有するヘモグロビンのようなペルオキシダーゼ活性の
存在下において。

指示体は酸化されそして着色する。

本発明は、Ｒルオキシダーゼ活性の検出に必要なすべて
の本質的な物質を含有する安定な診断組成物の製造によ
って当該技術における有意な進歩を示す。この組成物は
、単に単一の簡単な工程で分析される被検体を溶液と接
触させることによって使用されそして従来の技術の多数
の試薬および被検体の操作上の取扱いを避けることがで
きる。

酸素を受容しそして酸素源の存在下において酸化され発
色する任意の指示物質も本発明の実施に使用することが
できる。指示物質の例としては、グアヤク、アニリンお
よびその誘導体、０−トリジン、ｏ−トルイジン、ｐ−
トルイジン、ベンジジン、テトラメチルベンジジン、ジ
アニシジン、０−クレゾール、ｍ−クレゾール。

アルファーナフトール、ベーターナフトール、カテコー
ル、グアヤコール、ヒロガロールおよびこれらの混合物
が包含される。指示物質は、有効な指示体としてのその
認識能、非発癌性および商業的入手性のために、グアヤ
クが好適である。酸素源およびペルオキシダーゼ活性の
存在下においてグアヤクは無色から青色に変化する。

本発明の処方に使用される指示物質の量は、所望される
感受性すなわち酸化反応から示される色変化の程度によ
ってきまってくる。好適な有用な量は、全体の処方の重
量を基にして約０．０１〜３．０重−ｉ％そして好適に
は約１２５〜２．０重量％に変化し得る。約３チ以上の
量は間遠った正の結果を示す過感受性を招く′ので望ま
しくない。約［１０１％以下の宛はペルオキシダーゼ活
性の正確な検出を示す充分な色発生を与えないので好ま
しくない。

有機溶剤は存在する酸化剤を安定化せしめて指示物質の
早期酸化を防止するために本発明の処方中に存在させる
。処方成分と反応しないそして好適には水と混和性であ
る広範囲な有機溶剤を使用することができる。

代表的な有機溶剤として、（１）メタノール、エタノー
ル、プロノぐノール、ブタノール、インプロノミノール
およびイソブタノールのようなアルコール、（２）ジエ
チルエーテル、ジイソプロピルエーテルのようなエーテ
ル、（６）アセトン、メチルエチルケトン、メチルイソ
ブチルケトンのようなケトン、（４）ベンゼンおよびト
ルエンのような芳香族炭化水素、（５）塩化メチレン、
クロロホルム、四塩化炭素のような塩素化炭化水素、（
６）酢ｅおよびプロピオン酸のようなカルボン酸および
これらの混合物から選択された化合物があげられる。も
つとも好適な溶剤は、メタノール、エタノール、インプ
ロパツールおよびこれらの混合物からなる群から選択さ
れる。

使用される溶剤の量は酸化剤を安定化するのに充分な量
である。この量は広く変化することができそして好適な
範囲は全処方の７５重量％までの量である。特定の処方
に対する溶剤の正確な量は容易に決定することができる
。伺故かというと、それは１００チ溶液を得るために残
留成分に加えられる量であるからである。

酸化剤は過酸化水素または水の存在下において過酸化水
素を生ずる物質から選択される。過酸化水素は、指示物
質とペルオキシダーゼ活性化剤との間の反応を促進して
指示物質の色変化を生ずる酸化剤である。酸化剤は、ペ
ルオキシダーゼ活性物質の存在下においＣのみ指示物質
と結合することができそして貯蔵期間中処方中に安定な
ものとして残るものでなければならない。指示物質の酸
化は処方中の水の固有の存在のために酸化剤の存在下に
制限すべきであるということが認められなければならな
い。この阻止は、前述した有機溶剤の使用によって達成
される。

代表的な酸化剤としては有機および無機過酸化物の両方
が包含される。例示的な化合物としては過酸化水素、ク
メンヒドロ過酸化物、第３級ブチルヒドロ過酸化物およ
びこれらの混合物がある。

酸化剤は処方の重量を基にして約α１５〜３．０重量％
そして好適には約１．０〜３．０重量％の量で使用され
る。より多い量は指示物質の早期的な酸化および貯蔵中
の成分の沈殿の可能性を生ずるので好適でなくそしてよ
り少ない量は視覚による検出に対する不充分な酸化、予
想される低反応性およびペルオキシダーゼ活性の喪失の
ために好適でない。

緩衝剤は安定性を助けるためおよび接触活性を生ぜしめ
得る最適のｐＨ値を与えるために処方に使用される。選
択した緩衝剤は指示物質がｐＨを酸化によって色を変化
する範囲内に維持することが必須である。通常、これは
、約２〜８そして好適には約６〜５のｐＨの間にある。

より高度なｐＨ値は間違った正の結果を与える指示物質
の自動酸化を防止するために避けねばならない。

より低いｐＨ値は有効な酸化を与えない。

代表的な緩衝剤は拘柵酸塩、酒石酸塩、燐酸塩、酢酸塩
およびこれらの混合物を包含する。

拘楊酸塩が好適である。

本発明の組成物は慣用の操作によって製造することがで
きる。指示物質は残留成分の添加前に溶解しなければな
らないということを除いては試薬を混合する正確な方法
は重要でない。このように、添加の順序は特定の指示物
質の溶解度によってきまって（る。例えば指示物質とし
てグアヤクを使用する場合は、好適にはそれを有機溶剤
に溶解し、濾過して不溶粒子を除去し、予め水に溶解し
た酸化剤と混合しそして最後に緩衝剤溶液と混合してｐ
Ｈ値を調整する。これに対して、ベンジジンまたはトリ
ジンのような可溶性指示物質を使用する場合は、このよ
うな指示物質を水に溶解しそして有機溶剤と混合するか
または必要な水および有機溶剤濃度を有する水性アルコ
ールとはじめに混合する。次に、緩衝剤を加えてｐＨ値
を調整しそして溶液を貯蔵する。混合操作を遂行するた
めに任意の適当な温度も使用できる。室温すなわち２０
〜２５℃が釣適である。

処方中に水を使用する場合は最終水含量を約４５重量％
以下に維持することが重要である。

約５〜４５重量係の水の量が系において許容され得る。

より多い量は酸化剤の早期分解を起し得るので避けなけ
ればならない。

当業者によって容易に認められるように、本発明は試薬
含浸した紙を使用する従来の技術の診断剤以上の有意な
進歩を示す。本明細書に定義した単一の組成物系をもっ
て実施するのに必要なことは組成物をペルオキシダーゼ
活性について試験される内容物上におきそして特有の色
変化について組成物を観察することである。本発明によ
るペルオキシダーゼ活性によって潜血におけるようなヘ
モグロビンの存在を測定する診断剤および方法は糞便の
ような被検体の在来の取扱いを必要とせずそして結果を
専門的に判断する必要なしに家庭で簡単に遂行できる。

本発明によれば、被検体と接触せしめた場合に指示物質
酸化反応から得られる特有の色変化を生ずるすべての必
要な試験試薬を含有する単一の容器を使用する。従って
、この容器はペルオキシダーゼ活性の検出に対する診断
キットにおいて有用である。

試薬は任意の有利な方法で分与することができる。慣用
の分与手段としては、滴下壜、噴霧送出装置およびエア
ゾール送出装置があげられる。あるいはまた、溶液のチ
キソトロピーを増大するのに充分な量の在来の濃厚化添
加剤を使用することができる。次に、このような溶液を
ローラ一手段、滴下手段および（または）在来の物理的
操作によって分与することができる。

このようなチキソトロピー添加剤としてはシリカゲル、
ポリエチレングリコール、メチルセルロース、ポリビニ
ルアルコール、ポリ（エチレンオキシド）および第４級
アンモニウム防導体が包含されるがこれらに限定される
ものではない。

被検体は慣用の収集操作によって得ることができる。特
に限定するものではないが、このような操作としては親
便性潜血、ヘモグロビン、生物学的液体などを単離する
標準技術がある。

本明細書に使用される生物学的液体なる用語は唾液、尿
、胃液、膣分泌物および頚部分泌物を意味する。このよ
うな被検体は紙片および木製製品を含めて標１ｉＩＡ吸
収物質を使用して得ることができる。被検体を収集する
実際の方法は当業者に容易に入手できる標準の公知の技
術を示す。

以下の例は本発明を説明するために示すものであって、
本発明は以下の例に限定されるものではない。明細書を
通じて示されるチは、特記しない限りすべて重量に基づ
くものである。

例１　（実験１） この例は有機可溶性指示物質を使用した本発明の組成物
の製造を示す。

フラスコにメタノール１００ＣＣを加え次いでグアヤク
粉末１２を加える。内容物を約３０発温合してグアヤク
指示物質をメタノール溶剤に溶解する。溶液なＰ遍して
未溶解粒子を除去する。

得られた溶液５　Ｑ　Ｃｅを６０チ過酸化水素４．５ｃ
ｃと混合し次いで０．１１１Ｊｍ酸塩緩衝剤１５ＣＣを
添加してｐＨを５．０に調整する。水１０ｃｃを加えて
緩衝剤の結晶化を防止しそして次いで新しいメタノール
の添加によって容量を１００８Ｃに増加する。得られた
溶液は僅かにこはく色を示す。

ペルオキシダーゼ活性を検出するこの溶液の有効性は予
め調製したヘモグロビン被検体をこの溶液と接触するこ
とによって達成される。ヘモグロビン被検体は希釈され
た血液試料をとり、この試料の数滴をワットマンＮ［Ｌ
　Ｉ　Ｆ紙上におくことによって調製される。本発明の
調合物の１滴を希釈された血液試料に適用しそして無色
から青色への色の明白な変化を観察する。ヘモグロビン
試験操作を上昇温度（４５℃）で６週間貯蔵した後の前
記溶液を使用して反復する。認め得る反応性の損失は観
察されない。

促進貯蔵寿命条件下の安定性を測定するために種々の時
間間隔において過酸化水素の濃度を測定する。結果はこ
の調合物の高度な安定性を示す過酸化水素含量の小滴を
示す。

例２　（実験２〜５） グアヤク指示物質と共に異なる有機溶剤を使用して例１
の操作を反復する。

実験２は１％エタノール溶液を使用した。

実験６は６チトルエン溶液を使用した。

実験４は６％クロロホルム溶液を使用した。

実験５は３％アセトン溶液を使用した。

実験２および５は単一の相溶液の形成を示しそして実験
１におけるようにこは（色を有す。

実験３および４は２相（有機−水性）系を示し、倒れの
相もにルオキシダーゼ活性の検出において有効である。

実験２〜実験５で調製した溶液を例１の方法によってヘ
モグロビンの検出に使用した。すべての溶液は正の色の
変化を示す。溶剤としてエタノールを使用した実験２の
みを速進貯蔵条件下においた。この溶液は実験１で観察
されたような同じ安定性を示す。

例３　（実験６および７） この例は本発明の範囲内における水溶性指示物質の使用
を示す。

フラスコに水１００ｅｅを加え次いで指示物質１２を添
加する。内容物を約６０発温合して指示物質を水に溶解
する。溶液を沖過して未理解の粒子を除去する。実験６
においては指示物質は０−トリジンでありそして他方実
験７においては指示物質はテトラメチルベンジジンであ
る。

得られた溶液２０ｃｃを３０係過酸化水素４．５４と混
合し次いで０．１　Ｍ％ｌ攪酸塩酸塩緩衝剤１５ｄえて
ｐＨを５，０に円整する。次にエタノール６０Ｃｅを加
えて最終５ｌｆｔを１［１０ＣＣにする。得られた溶液
は倒れも赤色〜オレンジ色を示す。

ペルオキシダーゼ活性の検出のための溶液の有効性は予
めＺｊｊＵしたヘモグロビン被検体をこの溶液と接触す
ることによって達成される。ヘモグロビン被検体は希釈
した血液試料をとり、この数滴をワットマンＮα１Ｆ紙
上におくことによって調製される。本発明の調合物の１
滴な希釈した血液試料に適用しそして青色〜緑色への明
白な変化が両方の溶液に対して観察された。

例４　（実験８〜１１） この例は種々な濃度のグアヤクを使用した本発明の組成
物の有効性を示す。

メタノールを有機溶剤としてのエタノールで置き換える
以外は例１の操作を反復する。使用したグアヤクの濃度
および得られた結果は第１表に示すとおりである。結果
は広範囲のグアヤク濃度を使用してすぐれた安定性を示
す。

第１表 ４５℃で６週間 ９　　　　ｔ５　　　　　　　＋　　　　後感受性を保
持４５℃で６週間 １０　　　　［１７５＋　　　　後感受性を保持４５℃
で６週間 １１　　　α５０　　　　　＋　　　　後感受性を保持
例５　（実験１２〜１３） この例は本発明の組成物における種々な濃厚化剤の使用
を示す。

メタノールを有機溶剤としてのインプロパツールによっ
て置き換える以外は例１の操作を反復する。第■表に示
したような濃厚化剤を予め調製した溶液に加えそして約
５公理合して均質な混合物を得る。使用した添加剤は次
のとおりである。

実験１２　　ＰＫＧ−４０００：ポリエチレングリコー
ル、グラム分子量４０００ 実験１３　、　ＰＯ１７０Ｘ”　：ユニオン・カーバイ
ト社製イソプロピルアルコール中 のＱ、２５％溶液として使用 得られた処方物の粘度は濃厚化剤の不存在下における処
方物より高い。これらの高粘度の組成物は濃厚な流動性
調合物を示す。

ペルオキシダーゼ活性の検出のこれらの濃厚化溶液の有
効性を予め調製したヘモグロビンをこれらの溶液と接触
させることによって測定する。ヘモグロビン被検体は希
釈した血液試料をとり、この数滴をワットマンｒａ　Ｉ
　Ｆ紙上におくことによって調製する。本発明の調合物
の１滴を希釈した血液試料に適用しそして無色から青色
への明白な変化が観察される。安定性検査からの結果は
、第■表に示されるとおりである。

第■表 前述した本発明は多くの点において変化し得ることは明
らかである。このような変化は本発明の精神および範四
から離脱するものとしてみなされるべきではない。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 Ｉ　Ｘ＆）　　可溶性指示物質、 （ｂ）　　有機溶剤、 （Ｃ）　　−？ルオキシダーゼ活性の存在下において前
   記指示物質を酸化できる酸化剤、および（ｄ）緩衝剤か
   らなるペルオキシダーゼ活性の存在を測定する組成物。 ２）可溶性指示物質がグアヤク、アニリンおよびその誘
   導体、０−トリジン、ｏ−トルイジン＆　　ｐ　−）ル
   イジン、ペン：）ジン、テトラメチルベンジジン、ジア
   ニシジン、Ｏ−クレゾール、ｍ−クレゾール、ｐ−クレ
   ゾール、アルファーナフトール、ベーターナフトール、
   カテコール、グアヤコール、ピロガロールおよびこれら
   の混合物からなる群から選択されたものである前記特許
   請求の範囲第１項記載の組成物。 ６）有機溶剤がアルコール、エーテル、ケトン、芳香族
   炭化水素、脂肪族炭化水素、カルボン酸およびこれらの
   混合物からなる群から選択されたものである前記特許請
   求の範囲第１項記載の組成物。 ４）　　有機ｉ剤がメタノール、エタノール、インプロ
   パツールおよびこれらの混合物からなる群から選択され
   たものである前記特許請求の範囲第３項記載の組成物。 ５）酸化剤が有機過酸化物および無機過酸化物からなる
   群から選択されたものである前記特許請求の範囲第１項
   記載の組成物。 ６）酸化剤が過酸化水素、クメンヒドロ過酸化物、第３
   級ブチルヒドロ過酸化物およびこれらの混合物からなる
   群から選択されたものである前記特許請求の範囲第５項
   記載の組成物。 ７）緩衝剤が組成物のｐＨを約２．０〜ａＯＯ間に維持
   する前記特許請求の範囲第１項記載の組成物。 ８）緩衝剤が組成物のｐＨを約３．０〜５．０の間に維
   持する前記特許請求の範囲第１項記載の組成物。 ９）（ａ）　　可溶性指示物質約ｏ、ｏｉ〜３．０重量
   ヴ。 し）　ペルオキシダーゼ活性の存在下において前記指示
   物質を酸化できる酸化剤約０．１５〜３．０重量％、 （Ｃ）液状溶液のｐＨ値を約２．０〜ａＯＯ間に維持す
   るのに充分な量の緩衝剤、および （ｄ）　　指示物質を溶解できる有機溶剤の残量＜ｑ６
   はすべて最終組成物の重量％である）からなるペルオキ
   シダーゼ活性の存在を測定する液状診断剤。 １０）指示物質の量が約０．２５〜２．０重量％である
   前記特許請求の範囲第９項記載の診断剤。 １１）可溶性指示物質がグアヤク、アニリンおよびその
   誘導体、ｏ　−）　ＩＪクメン０−トルイジン、ｐ−）
   ルイジン、ベンジジン、テトラメチルベンジジン、ジア
   ニシジン、○−クレゾール、ｍ−クレゾール、ｐ−クレ
   ゾール、アルファーナフトール、は−ターナフトール、
   カテコール、グアヤコール、ピロガロールおよびこれら
   の混合物からなる群から選択されたものである前記特許
   請求の範囲第９項記載の診断剤。 １２）酸化剤の量が約１．０〜６．０襲である前記特許
   請求の範囲第９項記載の診断剤。 １３）酸化剤が有機過酸化物または無機過酸化物から選
   択されたものである前記特許請求の範囲第９項記載の診
   断剤。 １４）酸化剤が過酸化水素、クメンヒドロ過酸化物、第
   ３級ブチルヒドロ過酸化物およびこれらの混合物からな
   る群から選択されたものである前記特許請求の範囲第９
   項記載の診断剤。 １５）緩衝剤が診断剤のｐＨを約３．０〜５．０の間に
   維持する前記特許請求の範囲第９項記載の診断剤。 １６）有機溶剤を約７５重量％までの量で使用する前記
   特許請求の範囲第９項記載の診断剤。 １７）有機溶剤がアルコール、エーテル、クトン、芳香
   族炭化水素、脂肪族炭化水素、カルボン酸およびこれら
   の混合物からなる群から選択されたものである前記特許
   請求の範囲第９項記載の診断剤。 １８）有機溶剤がメタノール、エタノール、イソプロパ
   ツールおよびこれらの混合物からなる群から選択された
   ものである前記特許請求の範囲第９項記載の診断剤。 １９Ｘ１）　　’ルオキシダーゼ活性の存在について分
   析される被検体を集め、 （２）　　この被検体を （ａ）　　可溶性指示物質。 （ｂ）　　有機溶剤、 （Ｃ）　　ペルオキシダーゼ活性の存在下において前記
   指示物質を酸化できる酸化剤、および （ｄ）　　緩衝剤 を混合することによって製造した組成物と接触させそし
   て （３）−″？ニルオキシダーゼ活性の存在または不存在
   を検出することからなるはルオキシダーゼ活性の検出方
   法。 ２０）可溶性指示物質がグアヤク、アニリンおよびその
   誘導体、０−トリジン、０−トルイジン、ｐ−トルイジ
   ン、ベンジジン、テトラメチルベンジジン、ジアニシジ
   ン、０−クレゾール、ｍ−クレゾール、ｐ−クレゾール
   、アルファーナフトール、ベーターナフトール、カテコ
   ール、グアヤコール、ピロガロールおよびこれらの混合
   物からなる群から選択されたものである前記特許請求の
   範囲第１９項記載の方法。 ２１）　　有機溶剤がアルコール、エーテル、ケトン、
   芳香族炭化水素、脂肪族炭化水素、カルボン酸およびこ
   れらの混合物からなる群から選択されたものである前記
   特許請求の範囲第１９項記載の方法。 ２２）有機溶剤がメタノール、エタノール、イソプロパ
   ツールおよびこれらの混合物からなる群から選択された
   ものである前記特許請求の範囲第２１項記載の方法。 ２３）酸化剤が有機過酸化物または無機過酸化物から選
   択されたものである前記特許請求の範囲第１９項記載の
   方法。 ２４）酸化剤が過酸化水素、クメンヒドロ過酸化物、第
   ３級ブチルヒドロ過酸化物およびこれらの混合物からな
   る群から選択されたものである前記特許請求の範囲第２
   ３項記載の方法。 ２５）緩衝剤が溶液のｐＨを約２．０〜ａＯの間に維持
   する前記特許請求の範囲第１９項記載の方法。 ２６）緩衝剤が溶液のｐ）（を約６．０〜５．０の間に
   維持する前記特許請求の範囲第１９項記載の方法。 ２７）被検体が糞便物質でありそしてペルオキシダーゼ
   活性が糞便性潜血として示される前記特許請求の範囲第
   １９項記載の方法。 ２８）被検体がヘモグロビンである前記特許請求の範囲
   第１９項記載の方法。 〃ン　被検体が生物学的液体である前記特許請求の範囲
   第１９項記載の方法。 ３０）生物学的液体が唾液、尿、両液、膣分泌物および
   頚部分泌物から選択されたものである前記特許請求の範
   囲第２９項記載の方法。 ３１　Ｘａｌ　　可溶性指示物質、 （１））　　有機浴剤、 （ＣＩ　　Ｒルオキシダーゼ活性の存在下において前記
   指示物質を酸化できる酸化剤、および（ｄｌ　　緩衝剤 からなる安定な組成物を含有する容器からなる被検体中
   のペルオキシダーゼ活性を検出するための診断キット。 ３２）更に被検体収集手段を含有する前記特許請求の範
   囲第６１項記載・・の診断キット。 ３３）（ａ）　　グアヤク、アニリンおよびその誘導体
   、０−トリジン％　０−トルイジン、ｐ−トルイジン、
   ベンジジン、テトラメチルベンジジン、ジアニシジン、
   ０−クレゾール、ｍ−クレゾール、ｐ−クレゾール、ア
   ルファーナフトール、ベーターナフトール、カテコール
   、グアヤコールおよびピロガロールおよびこれらの混合
   物からなる群から選択された可溶性指示物質約０，０１
   〜３，０重量％、（ｂ）　　過酸化水素、クメンヒドロ
   過酸化物、第３級ブチルヒドロ過酸化物およびこれらの
   混合物からなる群から選択された酸化剤約Ｑ、１５〜３
   ．０重量％。 （Ｑ）　　組成物のｐＨを約２．０〜ａＯの間に維持す
   る緩衝剤の充分な量、 （ｄ）　　フルコール、エーテル、ケトン、芳香族炭化
   水素、脂肪族炭化水素、カルボン酸およびこれらの混合
   物からなる群から選択された有機溶剤の残量（％はすべ
   て最終組成物の重量に基づく）からなるヘモグロビンの
   存在を測定する組成物。 ３４Ｘａ）　　グアヤク約［ＬＯｌ　〜３．０重景チ。 （ｂ）　　過酸化水素約［１１５〜３．０重量％、（Ｃ
   ）溶液のｐＨを約２．０〜ａＯＯ間に維持するのに充分
   な緩衝剤の量および （ｄ）メタノール、エタノール、イソプロノミノールお
   よびこれらの混合物からなる群から選択された有機溶剤
   の残量（％はすべて最終溶液の重量に基づく）からなる
   糞便物質中の潜血の存在を測定する安定なグアヤク溶液
   。 ３５）全溶液の重量を基にして水約４５重量％までを含
   有する前記特許請求の範囲第６４項記載の安定なグアヤ
   ク溶液。