JPS59192086A - バチルス・リケニホルミスｍｎ００１ - Google Patents
バチルス・リケニホルミスｍｎ００１Info
- Publication number
- JPS59192086A JPS59192086A JP58065200A JP6520083A JPS59192086A JP S59192086 A JPS59192086 A JP S59192086A JP 58065200 A JP58065200 A JP 58065200A JP 6520083 A JP6520083 A JP 6520083A JP S59192086 A JPS59192086 A JP S59192086A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- medium
- growth
- bacillus licheniformis
- properties
- grows
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Fodder In General (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、バチルス・リケニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕ
ｓｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ ） ＭＮ−００１に関
するものである。
ｓｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ ） ＭＮ−００１に関
するものである。
更に詳細には、本発明は、プロテアーゼ、セルラーゼを
菌体外に多量生成する飼料添加に好適なバチルス・リケ
ニホルミス ＭＮ−００１に関するものである。
菌体外に多量生成する飼料添加に好適なバチルス・リケ
ニホルミス ＭＮ−００１に関するものである。
現在、配合飼料は、自家製飼料を主体とするものから、
近代的工場で生産される配合飼料への転換がすすみ、全
飼料に占める配合飼料の比率は極めて高い値となってい
る。
近代的工場で生産される配合飼料への転換がすすみ、全
飼料に占める配合飼料の比率は極めて高い値となってい
る。
これらの配合飼料においては、主原料である穀類、油粕
類、魚粉、油脂類の他に、栄養補給、消化吸収改善、成
長促進、疾病防止等々の目的で、アミノ酸類、ミネラル
類、ビタミン類、抗生物質、酵素類、生菌剤等が副原料
として用いられている。
類、魚粉、油脂類の他に、栄養補給、消化吸収改善、成
長促進、疾病防止等々の目的で、アミノ酸類、ミネラル
類、ビタミン類、抗生物質、酵素類、生菌剤等が副原料
として用いられている。
しかしながらこのうち抗生物質についてはその残留移行
によシ、人間にアレルギーや、腸内細菌の変化を引き起
こす恐れがあるため使用上の規制が強められ、使用範囲
が限定、縮少される方向にある。また酵素類については
、リパーゼ剤、アミラーゼ剤、セルラーゼ剤、プロテア
ーゼ剤、混合酵素剤等について、生菌剤については、納
豆菌、乳酸菌、酪酸菌、ビフィズス菌等について検討さ
れているが、その効果がまちまちであり常に一定した効
果は期待できないのが現状である。
によシ、人間にアレルギーや、腸内細菌の変化を引き起
こす恐れがあるため使用上の規制が強められ、使用範囲
が限定、縮少される方向にある。また酵素類については
、リパーゼ剤、アミラーゼ剤、セルラーゼ剤、プロテア
ーゼ剤、混合酵素剤等について、生菌剤については、納
豆菌、乳酸菌、酪酸菌、ビフィズス菌等について検討さ
れているが、その効果がまちまちであり常に一定した効
果は期待できないのが現状である。
本発明者らは、生体にきわめて安全なバチルス属の菌の
なかに酵素生産性のよりすぐれた変異株が見出せるので
はないかとの想定のもとに、自然界から多くのバチルス
属の菌を分離し、更に変異操作を行った結果、プロテア
ーゼ、セルラーゼの菌体外生産能が著しるしくすぐれた
バチルス・リケニホルミス ＭＮ−００１を単離獲得す
るに至った。
なかに酵素生産性のよりすぐれた変異株が見出せるので
はないかとの想定のもとに、自然界から多くのバチルス
属の菌を分離し、更に変異操作を行った結果、プロテア
ーゼ、セルラーゼの菌体外生産能が著しるしくすぐれた
バチルス・リケニホルミス ＭＮ−００１を単離獲得す
るに至った。
ことに単離されたバチルス・リケニホルミスＭＮ−００
１は菌学的性質においてはバチルス・リケニホルミスと
嫌気的条件下で生育する点及びその他の性質でよく一致
しているが、プロテアーゼ、セルラーゼの生産性が顕著
である点で全く相違しており、バチルス・リケニホルミ
スの変異株と認められたものである。
１は菌学的性質においてはバチルス・リケニホルミスと
嫌気的条件下で生育する点及びその他の性質でよく一致
しているが、プロテアーゼ、セルラーゼの生産性が顕著
である点で全く相違しており、バチルス・リケニホルミ
スの変異株と認められたものである。
バチルス・リケニホルミス ＭＮ−００１は微工研にＭ
Ｎ−００１の表示の下にＦＥＲＭ ＢＰ−２６６として
寄託されている。
Ｎ−００１の表示の下にＦＥＲＭ ＢＰ−２６６として
寄託されている。
次に、バチルス・リケニホルミス ＭＮ−００１の菌学
的性質を示す。
的性質を示す。
Ａ、形態
（１）巾０．５〜０８μｍ１長さ２〜６μｍの桿菌。
（２） ダラム染色：陽性。
（３）楕円状の内生胞子を形成。
（４）運動性：有。
Ｂ、生育
（１）普通寒天培地：非常に良く生育する。色素の生成
なし。
なし。
（２）糖蜜、硫酸アンモニウムを主体とした培地：非常
に良く生育する。色素の生成なし。
に良く生育する。色素の生成なし。
（３）食塩液体培地
５％：生育する。
７％：生育する。
１０チ：生育する。
Ｃ６生理学的性質
（１） カタラーゼ生成 ＋（２
）嫌気的条件下での生育 ＋（３１ＶＰ反応
＋（４）高温での生育状態
５０°Ｃ＋ ５５゛Ｃ− （５）糖類から酸生成の有無 グルコース ＋ Ｌ−アラビノース ＋ Ｄ−キシロース ＋ マンニット ＋ Ｄ−タガトース ＋（６） アル
ギニンジヒドロラーゼ ＋（７）レシチナーゼ
〜（８）デンプンの加水分解性
＋（９）ゼラチンの加水分解性 十
Ｑ（１） ＤＮＡの加水分解性 ＋（１１
）クエン酸塩の利用性 十ｕり プロピ
オン酸塩の利用性 ＋（ｌ四 硝酸還元性
＋（１４）インドール生成
−（１９フェニルアラニンの脱アミノ化
−〇〇 特異的性質ニ プロテアーゼ（バチルス−リケニホルミス ＩＦＯ１２
１９９に比 較して約１０倍菌体外に 生産する） セルラーゼ （バチルス・リケニホルミス ＩＦＯ１２
１９９に比 較して約１５倍菌体外に 生産する） の菌体外生産能が著しるしく高い。
）嫌気的条件下での生育 ＋（３１ＶＰ反応
＋（４）高温での生育状態
５０°Ｃ＋ ５５゛Ｃ− （５）糖類から酸生成の有無 グルコース ＋ Ｌ−アラビノース ＋ Ｄ−キシロース ＋ マンニット ＋ Ｄ−タガトース ＋（６） アル
ギニンジヒドロラーゼ ＋（７）レシチナーゼ
〜（８）デンプンの加水分解性
＋（９）ゼラチンの加水分解性 十
Ｑ（１） ＤＮＡの加水分解性 ＋（１１
）クエン酸塩の利用性 十ｕり プロピ
オン酸塩の利用性 ＋（ｌ四 硝酸還元性
＋（１４）インドール生成
−（１９フェニルアラニンの脱アミノ化
−〇〇 特異的性質ニ プロテアーゼ（バチルス−リケニホルミス ＩＦＯ１２
１９９に比 較して約１０倍菌体外に 生産する） セルラーゼ （バチルス・リケニホルミス ＩＦＯ１２
１９９に比 較して約１５倍菌体外に 生産する） の菌体外生産能が著しるしく高い。
本発明のバチルス・リケニホルミス ＭＮ−００１を培
養するには、通常の醗酵法に準じて、液体培養、又は固
体培養する事によって行なえばよい。
養するには、通常の醗酵法に準じて、液体培養、又は固
体培養する事によって行なえばよい。
培地としては天然培地、半合成培地、合成培地等いずれ
でも使用する事ができる。培地の組成は、（１）炭素源
としては、グルコース、サッカロース、デキストリン、
グリセリン、デンプン、糖蜜等を、（１１）窒素源とし
ては、ペプトン、肉エキス、酵母エキス、乾燥酵母、大
豆粕、尿素、チオ尿素、アンモニウム塩、硝酸塩、その
他有機あるいは無機窒素化合物を、冊無機塩としては、
マグネシウム、マンガン、カリウム、カルシウム、鉄等
の燐酸塩、硝酸塩、炭酸塩、塩化物などが用いられる。
でも使用する事ができる。培地の組成は、（１）炭素源
としては、グルコース、サッカロース、デキストリン、
グリセリン、デンプン、糖蜜等を、（１１）窒素源とし
ては、ペプトン、肉エキス、酵母エキス、乾燥酵母、大
豆粕、尿素、チオ尿素、アンモニウム塩、硝酸塩、その
他有機あるいは無機窒素化合物を、冊無機塩としては、
マグネシウム、マンガン、カリウム、カルシウム、鉄等
の燐酸塩、硝酸塩、炭酸塩、塩化物などが用いられる。
寸だアミノ酸類、ビタミン類、核酸およびその関連化合
物を添加してもよい。培養温度は、通常の醗酵法に準す
るが、たとえば２０°Ｃ〜５０°Ｃで好適に培養できる
。培養期間も通常の醗酵法に準するがたとえば１２時間
〜５日で好適に培養できる。
物を添加してもよい。培養温度は、通常の醗酵法に準す
るが、たとえば２０°Ｃ〜５０°Ｃで好適に培養できる
。培養期間も通常の醗酵法に準するがたとえば１２時間
〜５日で好適に培養できる。
ここに得られた培養物は、そのままもしくは洗滌をくり
かえして菌体のみにして凍結乾燥、噴霧乾燥するなどに
よシ製剤化することができる。
かえして菌体のみにして凍結乾燥、噴霧乾燥するなどに
よシ製剤化することができる。
動物用飼料又は飼料添加物とする場合は、たとえば、培
養液をそのまま、あるいは、小麦粉、デンプン、デキス
トリン等や、飼料用原料の穀類、脱脂米ぬか等の糟糠類
、油粕等の適当な希釈剤を用い、製剤化する事ができる
。又培養液から菌体のみを洗滌分離し、同様に製剤化し
て、用いてもよい。
養液をそのまま、あるいは、小麦粉、デンプン、デキス
トリン等や、飼料用原料の穀類、脱脂米ぬか等の糟糠類
、油粕等の適当な希釈剤を用い、製剤化する事ができる
。又培養液から菌体のみを洗滌分離し、同様に製剤化し
て、用いてもよい。
このようにして得られたバチルス・リケニホルミス Ｍ
Ｎ−００１製剤は動物用飼料又は飼料添加物として、肉
用牛、乳用牛、子牛、豚、子豚、羊、山羊、馬、ウサギ
、犬、猫等の家畜類、および肉用鶏、採卵鶏、雛、種鶏
、アヒル、鵞鳥、七面鳥、うずら、子馬等の家禽類等に
適宜与えて有効である。また投与量は対象動物によシ又
対象動物の日冷により、又飼料の他の成分によシ変わシ
うるもので一概には規定できないが通常バチルス・リケ
ニホルミス ＭＮ−００１菌体が飼料１ ｋｇ当り１０
２〜１０１５個、望ましくは１０４〜１０１２個、最も
望ましくは１０５〜１０１０個になるごとく添加すると
よい。
Ｎ−００１製剤は動物用飼料又は飼料添加物として、肉
用牛、乳用牛、子牛、豚、子豚、羊、山羊、馬、ウサギ
、犬、猫等の家畜類、および肉用鶏、採卵鶏、雛、種鶏
、アヒル、鵞鳥、七面鳥、うずら、子馬等の家禽類等に
適宜与えて有効である。また投与量は対象動物によシ又
対象動物の日冷により、又飼料の他の成分によシ変わシ
うるもので一概には規定できないが通常バチルス・リケ
ニホルミス ＭＮ−００１菌体が飼料１ ｋｇ当り１０
２〜１０１５個、望ましくは１０４〜１０１２個、最も
望ましくは１０５〜１０１０個になるごとく添加すると
よい。
次に本発明の試験例、実施例、参考例を示す。
試験例
１、 バチルス・リケニホルミス ＴＦＯ１２１９９２
、バチルス・リケニホルミスＭＮ−００１、Ｆｌ、Ｍ
ＢＰ−２６６ 上記１．２の各菌株を、５００ ｍｌ 坂ロフラスコに
糖蜜 ２ｇ、硫酸アンモニウム １ 、！ｉ’、 Ｋ、
ＨＰｏ、 ０．ＩＩ、酵母エキス００５Ｉを添加し、水
道水を１００ｍＡ入れ、０．ＩＮ ＨＣ７と０．ＩＮ
ＮａＯＨでｐＨを８に調整した後、１２１℃で１５分間
殺菌した培地に接種し、６７°Ｃで２４時間振とう培養
し、それぞれの菌体外酵素（プロテアーゼ、アミラーゼ
、セルラーゼ）を測定した。
、バチルス・リケニホルミスＭＮ−００１、Ｆｌ、Ｍ
ＢＰ−２６６ 上記１．２の各菌株を、５００ ｍｌ 坂ロフラスコに
糖蜜 ２ｇ、硫酸アンモニウム １ 、！ｉ’、 Ｋ、
ＨＰｏ、 ０．ＩＩ、酵母エキス００５Ｉを添加し、水
道水を１００ｍＡ入れ、０．ＩＮ ＨＣ７と０．ＩＮ
ＮａＯＨでｐＨを８に調整した後、１２１℃で１５分間
殺菌した培地に接種し、６７°Ｃで２４時間振とう培養
し、それぞれの菌体外酵素（プロテアーゼ、アミラーゼ
、セルラーゼ）を測定した。
測定方法は培養Ｆ液を粗酵素液として用い、アミラーゼ
活性測定には、基質としてデンプンを用いたジニトロサ
リチル酸法、セルラーセ活性測定には、基質としてカル
ボキシメチルセルロースを用いたジニトロサリチル酸法
、プロテア−上宿性測定には、基質としてミルクカゼイ
ンを用いた銅Ｆｏｌｉｎ法を採用し、菌体外生産能を比
較した。
活性測定には、基質としてデンプンを用いたジニトロサ
リチル酸法、セルラーセ活性測定には、基質としてカル
ボキシメチルセルロースを用いたジニトロサリチル酸法
、プロテア−上宿性測定には、基質としてミルクカゼイ
ンを用いた銅Ｆｏｌｉｎ法を採用し、菌体外生産能を比
較した。
なお、表中の数字はＩＦＯ１２１９９の値を１とした時
の相対値である。
の相対値である。
結果は次の第１表に示される。
第１表
実施例
ジャーファーメンタ−に試験例と同じ組成の培地１１を
入れ、殺菌後あらかじめ前培養をしたＢａｃｉｌｌｕｓ
Ｉｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ ＭＮ−００１、Ｆ
ＩＲＭＢＰ−２６６を接種し、２４時間振とり培養した
。
入れ、殺菌後あらかじめ前培養をしたＢａｃｉｌｌｕｓ
Ｉｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ ＭＮ−００１、Ｆ
ＩＲＭＢＰ−２６６を接種し、２４時間振とり培養した
。
遠心分離により培養源から菌体を分離後、デンプン１ｋ
ｇを添加し乾燥させＪ３ａｃｉｌｌｕｓ Ｉｉｃｈｅｎ
ｉｆｏｒｍｉｓＭＮ−００１胞子製剤を作製した。この
製剤の生菌数は１０８個／、！９であった。
ｇを添加し乾燥させＪ３ａｃｉｌｌｕｓ Ｉｉｃｈｅｎ
ｉｆｏｒｍｉｓＭＮ−００１胞子製剤を作製した。この
製剤の生菌数は１０８個／、！９であった。
参考例
ブロイラー１２０羽を用い（雄雌各４０羽）各群４０羽
（雄雌２０羽）ずつの２区に分け、第２表に示した基本
飼料に対照区（デンプン添加区）実施例で得たＭＮ−０
０１製剤添加区（デンプン１ｇ当９１０８個の菌数を含
有）を設け、８週間の飼養試験を実施した。結果を第３
表に示した。
（雄雌２０羽）ずつの２区に分け、第２表に示した基本
飼料に対照区（デンプン添加区）実施例で得たＭＮ−０
０１製剤添加区（デンプン１ｇ当９１０８個の菌数を含
有）を設け、８週間の飼養試験を実施した。結果を第３
表に示した。
第 ２ 表 （基本飼料の組成）
第３表
以上のように、ＭＮ−００１製剤は、動物に対して優れ
た効果を発揮する。
た効果を発揮する。
また菌体外酵素産生能の優れたＭＮ−００１製剤は動物
用飼料又は飼料添加物のみならず、魚類等の飼料用、食
品用、医薬品用、化粧品用、酵素製造用等の用途にも有
効である。
用飼料又は飼料添加物のみならず、魚類等の飼料用、食
品用、医薬品用、化粧品用、酵素製造用等の用途にも有
効である。
代理人 弁理士 戸 １）親 列
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 （１）下記の菌学的性質を有するバチルス・リケニホル
ミス ＭＮ−００１゜ Ａ、形態 （１）巾０．５〜０．８μｍ１長さ２〜３μｍの桿菌。 （２）ダラム染色：陽性。 （３）楕円状の内生胞子を形成。 （４）運動性：有。 Ｂ、生育 （１）普通寒天培地：非常に良く生育する。色素の生成
なし。 （２）糖蜜、硫酸アンモニウムを主体とした培地：非常
に良く生育する。色素の生成なし。 （３）食塩液体培地 ５％：生育する。 ７チ：生育する。 １０％：生育する。 Ｃ０生理学的性質 （１） カタラーゼ生成 ＋（２）
嫌気的条件下での生育 ＋（３）ＶＰ反応
＋（４）高温での生育状態 ５
０°Ｃ＋ ５５°Ｃ− （５）糖類から酸生成の有無 グＪレコース ＋ Ｌ−アラビノース ＋ Ｄ−キシロース 士 マンニット ＋ Ｄ＝タガトース 十（６） アル
ギニンジヒドロラーゼ′ 十（カ レシチナーゼ
−（８）デンプンの加水分解性
＋（９）ゼラチンの加水分解性
十ＱＩＤＮＡの加水分解性 十αυ クエ
ン酸塩の利用性 ＋σつ プロピオン酸塩
の利用性 十（ｌ尋 硝酸還元性
十α→ インドール生成
−（へ） フェニルアラニンの脱アミノ化 −（１
６１％異的性質； プロテアーゼ、セルラーゼの菌体外生産能力が著しるし
く高い。
Priority Applications (6)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58065200A JPS59192086A (ja) | 1983-04-15 | 1983-04-15 | バチルス・リケニホルミスｍｎ００１ |
| GB08406605A GB2138023A (en) | 1983-03-29 | 1984-03-14 | Bacillus licheniformis used in animal feeds |
| DE19843410771 DE3410771A1 (de) | 1983-03-29 | 1984-03-23 | Tierfutterzusatz, futter und darin verwendeter mikroorganismus |
| PH30448A PH19390A (en) | 1983-03-29 | 1984-03-27 | Animal feed additive,feed and microorganism employed therefor |
| FR8404894A FR2543409A1 (fr) | 1983-03-29 | 1984-03-29 | Additif alimentaire et aliment pour animaux contenant bacillus licheniformis et nouvelle souche de ce micro-organisme |
| KR1019840001623A KR880001275B1 (ko) | 1983-03-29 | 1984-03-29 | 동물 사료의 제조방법 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58065200A JPS59192086A (ja) | 1983-04-15 | 1983-04-15 | バチルス・リケニホルミスｍｎ００１ |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS59192086A true JPS59192086A (ja) | 1984-10-31 |
| JPH0379986B2 JPH0379986B2 (ja) | 1991-12-20 |
Family
ID=13280030
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP58065200A Granted JPS59192086A (ja) | 1983-03-29 | 1983-04-15 | バチルス・リケニホルミスｍｎ００１ |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS59192086A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1093803A3 (fr) * | 1996-10-23 | 2004-03-31 | Sanofi-Synthelabo | Composition cosmétique contenant un antagoniste des récepteurs du neuropeptide Y |
| KR100443267B1 (ko) * | 2002-07-22 | 2004-08-04 | 한국생명공학연구원 | 폐유기물 분해활성이 우수한 신균주 바실러스리케니포미스 ｈ－３（ｋｃｔｃ １０２７３ｂｐ） |
-
1983
- 1983-04-15 JP JP58065200A patent/JPS59192086A/ja active Granted
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1093803A3 (fr) * | 1996-10-23 | 2004-03-31 | Sanofi-Synthelabo | Composition cosmétique contenant un antagoniste des récepteurs du neuropeptide Y |
| KR100443267B1 (ko) * | 2002-07-22 | 2004-08-04 | 한국생명공학연구원 | 폐유기물 분해활성이 우수한 신균주 바실러스리케니포미스 ｈ－３（ｋｃｔｃ １０２７３ｂｐ） |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0379986B2 (ja) | 1991-12-20 |
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