JPS59205979A - 微生物菌体の製造方法 - Google Patents
微生物菌体の製造方法Info
- Publication number
- JPS59205979A JPS59205979A JP58082349A JP8234983A JPS59205979A JP S59205979 A JPS59205979 A JP S59205979A JP 58082349 A JP58082349 A JP 58082349A JP 8234983 A JP8234983 A JP 8234983A JP S59205979 A JPS59205979 A JP S59205979A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- lipid
- mortierella
- medium
- concentration
- culture
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
- C12P7/6436—Fatty acid esters
- C12P7/6445—Glycerides
- C12P7/6463—Glycerides obtained from glyceride producing microorganisms, e.g. single cell oil
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Botany (AREA)
- Mycology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明はモルティエレラ属に属するイサベリナ、ビナセ
ア、ラマニナ・アングリスポラ及びナナの菌株を高濃度
の炭水化物を炭素源とする培地に培養することにより脂
質含量の高い菌体を培地中に高密度に製造する方法並び
にその菌体より脂質〔中性脂質（油脂など）極性脂質（
リン脂質、糖脂質）〕を採取する生産性の高い脂質の製
造方法に関するものである。現在までに報告されている
脂質（油脂）含量の高い糸状菌（かび）としてはジオト
リクム・カンディダム、フザリウム・リニ、フザリウム
・プルビゲナム、ペニシリウム・リラシナム、ペニシリ
ウム・ソビ、ペニシリウム・スピニュロサム、アスペリ
ギルス・ニデユランス、ムコール・サンネロイデス（山
田漬−著、食品工業微生物学６３ｐ）モルティエレラ・
ビナセア（Ｃ、Ｑ Ｃ、ＣＬｅ、、ｂｉ＜ａ、、 Ｊ
、Ｆ 、 Ｐｄ＝ｈｙｌｙ、 Ｊ 、 ＦＩＬ １Ｍｂ
ｃ＊ｅ−４Ｌ６Ｊ−，４１，１２７（１９６５）］、ア
スベリギルス・テレウス、アスペリギルス・オクラシア
ス、クラドスポリウム・フルゴム、クラドスポリウム・
ヘルバルム、ペニシリウム・グラジオリ［Ｊ 、 Ｓ、
；ｎμ、 Ｍ、Ｇ。
ア、ラマニナ・アングリスポラ及びナナの菌株を高濃度
の炭水化物を炭素源とする培地に培養することにより脂
質含量の高い菌体を培地中に高密度に製造する方法並び
にその菌体より脂質〔中性脂質（油脂など）極性脂質（
リン脂質、糖脂質）〕を採取する生産性の高い脂質の製
造方法に関するものである。現在までに報告されている
脂質（油脂）含量の高い糸状菌（かび）としてはジオト
リクム・カンディダム、フザリウム・リニ、フザリウム
・プルビゲナム、ペニシリウム・リラシナム、ペニシリ
ウム・ソビ、ペニシリウム・スピニュロサム、アスペリ
ギルス・ニデユランス、ムコール・サンネロイデス（山
田漬−著、食品工業微生物学６３ｐ）モルティエレラ・
ビナセア（Ｃ、Ｑ Ｃ、ＣＬｅ、、ｂｉ＜ａ、、 Ｊ
、Ｆ 、 Ｐｄ＝ｈｙｌｙ、 Ｊ 、 ＦＩＬ １Ｍｂ
ｃ＊ｅ−４Ｌ６Ｊ−，４１，１２７（１９６５）］、ア
スベリギルス・テレウス、アスペリギルス・オクラシア
ス、クラドスポリウム・フルゴム、クラドスポリウム・
ヘルバルム、ペニシリウム・グラジオリ［Ｊ 、 Ｓ、
；ｎμ、 Ｍ、Ｇ。
ＳσＩｙｅｌ、 Ｊ 、 Ｓｒ、Ｌ 、ｐｄ、Ａ、？４
−ルＱ、、 ２３．１１１３（１９７２））などがある
。どれらの菌はいずれも菌体内の油脂含量が２５〜６５
チであることは認められているが、いずれの糸状菌もフ
ラスコスケールあるいは小型培養槽による菌体の増殖に
際しては原料炭素源の炭水化物濃度は２０〜６０ｆμに
とどまっていた。
−ルＱ、、 ２３．１１１３（１９７２））などがある
。どれらの菌はいずれも菌体内の油脂含量が２５〜６５
チであることは認められているが、いずれの糸状菌もフ
ラスコスケールあるいは小型培養槽による菌体の増殖に
際しては原料炭素源の炭水化物濃度は２０〜６０ｆμに
とどまっていた。
しかも脂質（油脂）含量の高い菌体を得る場合、一般１
」爛菌体の増殖は悪く、多くは原料炭素源が完全に消費
されることなく残っている程度の菌体増殖量しか認めら
れていないっ〔例えばモルティエレラ・ビナセアの最高
の結果で、初期グルコース濃度２１．２ ｔ／ｌ、
１０日間２０℃で培養、１７７のグルコースを消費、菌
体増殖量（乾燥重量）４．７ ｔ／ｌ、生成脂質量３７
μ、Ｃ，Ｇ、Ｃ，Ｃ＆、ムん。
」爛菌体の増殖は悪く、多くは原料炭素源が完全に消費
されることなく残っている程度の菌体増殖量しか認めら
れていないっ〔例えばモルティエレラ・ビナセアの最高
の結果で、初期グルコース濃度２１．２ ｔ／ｌ、
１０日間２０℃で培養、１７７のグルコースを消費、菌
体増殖量（乾燥重量）４．７ ｔ／ｌ、生成脂質量３７
μ、Ｃ，Ｇ、Ｃ，Ｃ＆、ムん。
Ｊ 、 Ｆ、Ｐｄ４Ｍ１２． Ｊ 、 ｇ−ｅ−ｎ、
ＭＬｃｓ−ｖＫｄ、、 ４１．１２７ （１９６５）’
：１又、ペニシリウム・スピニーロサムでは原料炭素源
である糖蜜の濃度を高くしても、その割合では菌体の増
殖量は増加せず、逆に炭素源の消費割合が減少すること
を認めているうその場合、最高の結果で糖蜜濃度１６４
２μで出発して３０℃で６日間で糖蜜の消費量４０チ、
菌体増殖量（乾燥重量）２２ ？／ｌ、油脂生成量２．
５ｖμにとどまっていた。［Ａ、Ｗ、にムｎ、 ’ｌ”
； Ｋ 、ＷｅＬＩＡｃａ−、Ｃａｎ 、Ｊ ０Ｍル
ｃ、ａ、ｒｌＬＪＬ、。
ＭＬｃｓ−ｖＫｄ、、 ４１．１２７ （１９６５）’
：１又、ペニシリウム・スピニーロサムでは原料炭素源
である糖蜜の濃度を高くしても、その割合では菌体の増
殖量は増加せず、逆に炭素源の消費割合が減少すること
を認めているうその場合、最高の結果で糖蜜濃度１６４
２μで出発して３０℃で６日間で糖蜜の消費量４０チ、
菌体増殖量（乾燥重量）２２ ？／ｌ、油脂生成量２．
５ｖμにとどまっていた。［Ａ、Ｗ、にムｎ、 ’ｌ”
； Ｋ 、ＷｅＬＩＡｃａ−、Ｃａｎ 、Ｊ ０Ｍル
ｃ、ａ、ｒｌＬＪＬ、。
７．８９５（１９６１））
本発明はモルティエレラ属に属するイサベリナ、ビナセ
ア、ラマニアナ・アングリスポラ及びナナの糸状菌菌株
が炭水化物を炭素源として３５〜７０チの脂質含量を有
することを見出し、しかも、細菌や酵母と異なり菌糸で
増殖する糸状菌は一般に通気Ｓ＜拌培養における菌体の
高密度培養は困難とされていたのに対してモルティエレ
ラ属に属する前記糸状菌が高密度培養が可能であること
を見出した。すなわち、モルティエレラ属に属する特定
の糸状菌が高濃度の炭水化物を炭素源とする培地を用い
ての、通気撹拌培養において撹拌速度を早くすることに
より、菌糸を伸ばさず小単位で増殖し、脂質含量の高い
状態で菌体の高密度培養を可能であること、たとえば原
料炭水化物（グルコース２７０２μ）が３０℃、７２時
間の菌体培養により完全に消費され、増殖菌体量（乾燥
重量）１００ｔ／を以上、脂質生成量約５０ ｙｙｔ培
地、脂質含量約ｉＩが得られることを見出し本発明は完
成するに到った。
ア、ラマニアナ・アングリスポラ及びナナの糸状菌菌株
が炭水化物を炭素源として３５〜７０チの脂質含量を有
することを見出し、しかも、細菌や酵母と異なり菌糸で
増殖する糸状菌は一般に通気Ｓ＜拌培養における菌体の
高密度培養は困難とされていたのに対してモルティエレ
ラ属に属する前記糸状菌が高密度培養が可能であること
を見出した。すなわち、モルティエレラ属に属する特定
の糸状菌が高濃度の炭水化物を炭素源とする培地を用い
ての、通気撹拌培養において撹拌速度を早くすることに
より、菌糸を伸ばさず小単位で増殖し、脂質含量の高い
状態で菌体の高密度培養を可能であること、たとえば原
料炭水化物（グルコース２７０２μ）が３０℃、７２時
間の菌体培養により完全に消費され、増殖菌体量（乾燥
重量）１００ｔ／を以上、脂質生成量約５０ ｙｙｔ培
地、脂質含量約ｉＩが得られることを見出し本発明は完
成するに到った。
すなわち、本発明はモルティエレラ属に属するイサベリ
ナ、ビナセア、ラマニアナ・アングリスポラ及びナナの
菌株を高濃度の炭水化物を炭素源とする培地に培養する
ことにより脂質含量の高い菌体を培地中に高密度に製造
する方法並びにその菌体より脂質〔中性脂質（油脂など
）、極性脂質（リン脂質、糖脂質）〕を採取する生産性
の高い脂質の製造方法である。
ナ、ビナセア、ラマニアナ・アングリスポラ及びナナの
菌株を高濃度の炭水化物を炭素源とする培地に培養する
ことにより脂質含量の高い菌体を培地中に高密度に製造
する方法並びにその菌体より脂質〔中性脂質（油脂など
）、極性脂質（リン脂質、糖脂質）〕を採取する生産性
の高い脂質の製造方法である。
本発明の使用菌はモルティエレラ（Ｍｆｆ４ｉｕ４−ｅ
、１ｊ４）属のイサベリナ（ＬＡａ４ＬＪＬＪ’１ｎｅ
ｚ ）［ＩＦ’０７８２４，７８７３゜７８８４、８１
８３．８３０８：］、ビナセア（Ｖｊ−ＯＬα）［ＩＰ
’０ 。
、１ｊ４）属のイサベリナ（ＬＡａ４ＬＪＬＪ’１ｎｅ
ｚ ）［ＩＦ’０７８２４，７８７３゜７８８４、８１
８３．８３０８：］、ビナセア（Ｖｊ−ＯＬα）［ＩＰ
’０ 。
６７３８］ラマニアナ、アングリスポラ（４ａｒＮＬｎ
心αＵｙａｈ、ａｘＮｉ、Ａｐｅｒａ、ａ）［ＩＦｏ
、８１８７：］、−ナナ（−−）〔ｉＦＯ。
心αＵｙａｈ、ａｘＮｉ、Ａｐｅｒａ、ａ）［ＩＦｏ
、８１８７：］、−ナナ（−−）〔ｉＦＯ。
８７９４）の各種菌株である。
なお、上記した菌はいずれも財団法人発酵研究所に保存
され、ＩＦＯカタログ（菌株目録）に記載されている糸
状菌である。
され、ＩＦＯカタログ（菌株目録）に記載されている糸
状菌である。
上記の糸状菌を培養する培地の炭素源である炭水化物と
しては、例えばグルコース、フラクトース、サッカロー
ス、糖蜜、デン粉、木材糖化液などが用いられる。炭水
化物は培地ｉｚ中に６０〜４００１用いられるのが好ま
しい。また窒素源としては、例えば硝酸アンモニウム、
硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、リン酸アンモニ
ウムなどの様な無機窒素源、または尿素、ペプトン、酵
母エキス、コーン・スチーブ・リカーなど有機窒素源が
用いられる。無機塩としては、例えばＫＩ−ＬＰ０１．
ＫＩＨＰＯｔ 、 ＮａＣｌ 、 Ｆ ｇ ＳＯｔ
” ７１（＋ ０． Ｍ１７８０＋ ”７Ｈ＝ ０．
ＺｔＬＳＯ４・７Ｉ−（，０などが用いられる。そのイ
也必要に応じて微量要素、その他の栄養源を添加する。
しては、例えばグルコース、フラクトース、サッカロー
ス、糖蜜、デン粉、木材糖化液などが用いられる。炭水
化物は培地ｉｚ中に６０〜４００１用いられるのが好ま
しい。また窒素源としては、例えば硝酸アンモニウム、
硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、リン酸アンモニ
ウムなどの様な無機窒素源、または尿素、ペプトン、酵
母エキス、コーン・スチーブ・リカーなど有機窒素源が
用いられる。無機塩としては、例えばＫＩ−ＬＰ０１．
ＫＩＨＰＯｔ 、 ＮａＣｌ 、 Ｆ ｇ ＳＯｔ
” ７１（＋ ０． Ｍ１７８０＋ ”７Ｈ＝ ０．
ＺｔＬＳＯ４・７Ｉ−（，０などが用いられる。そのイ
也必要に応じて微量要素、その他の栄養源を添加する。
上記の糸状菌の培養は通常液体培地で通気攪拌培養など
により行われる。培地のｐＨは４．０〜６．０が、良く
、撹拌速度３００〜８００ ｒｐｍ通気量０．５〜２
ｖｖｍで２日〜１５日培養が行われる。かくして
λ脂質含量の高い菌体が培地中に高密度で生産され
るので、培養物より菌体セ］分離し、脂質が糸状菌の菌
体中に含まれるので、この菌体より脂質を採取するのが
゛好蓮である。培養物より菌体の分離に当っては菌体が
菌糸があまりのびず極めて小単位（１〜１０細胞）で培
養されており、従って、例えば遠心脱水器などにより極
めて容易に分離され、乾燥度の高い菌体（含水率約６０
％）になる利点を有することも明らかになった。脂質の
採取は常法に従って例えば溶媒抽出などによって行われ
る。
により行われる。培地のｐＨは４．０〜６．０が、良く
、撹拌速度３００〜８００ ｒｐｍ通気量０．５〜２
ｖｖｍで２日〜１５日培養が行われる。かくして
λ脂質含量の高い菌体が培地中に高密度で生産され
るので、培養物より菌体セ］分離し、脂質が糸状菌の菌
体中に含まれるので、この菌体より脂質を採取するのが
゛好蓮である。培養物より菌体の分離に当っては菌体が
菌糸があまりのびず極めて小単位（１〜１０細胞）で培
養されており、従って、例えば遠心脱水器などにより極
めて容易に分離され、乾燥度の高い菌体（含水率約６０
％）になる利点を有することも明らかになった。脂質の
採取は常法に従って例えば溶媒抽出などによって行われ
る。
かくして、本発明によれば高濃度の炭水化物を炭素源と
して脂質含量の高い菌体を培地中に高濃度に製造するこ
と並びに培養された菌体より脂質を採取することにより
生産性の高い脂質の製造が可能になる。このことは特に
微生物による脂質の生産を目的とｌ〜だ菌体培養に対す
る装置上の大きな利点を有する。培地量に対する生産性
として実績として得られた菌体増殖量１００グ／ｌ、脂
質生成量５０７μの場合で、生産に要する時間を考慮に
入れた菌体の生産性は１．７ Ｙ／Ｌ−ｈｒであり、ｉ
ｏ、ｏｏｍ’の培養液か゛年間稼動する培養槽の組合せ
（例えば５ｏｏｎ’の培養槽３基）で菌体が１４゜００
０ ｔ／年、その内詣脂が７０００ ｔ／年にのぼる生
産を確保できるものである。また、生成脂質は９５グ以
上が油脂（トリグリセリド）であり、食料を始めとして
、加工用油脂原料などとして利用できるものであり、リ
ン脂質、糖脂質は医薬品界面活性剤などとして利用でき
ることはもちろん、脂質抽出後の菌体は主成分であるタ
ンパク質、核酸はそれぞれ飼料、医薬品などの用途に利
用できるものであることは明らかであろう 次に本発明の実施例を示すが、本発明はこれにより制限
を受けるものではない。
して脂質含量の高い菌体を培地中に高濃度に製造するこ
と並びに培養された菌体より脂質を採取することにより
生産性の高い脂質の製造が可能になる。このことは特に
微生物による脂質の生産を目的とｌ〜だ菌体培養に対す
る装置上の大きな利点を有する。培地量に対する生産性
として実績として得られた菌体増殖量１００グ／ｌ、脂
質生成量５０７μの場合で、生産に要する時間を考慮に
入れた菌体の生産性は１．７ Ｙ／Ｌ−ｈｒであり、ｉ
ｏ、ｏｏｍ’の培養液か゛年間稼動する培養槽の組合せ
（例えば５ｏｏｎ’の培養槽３基）で菌体が１４゜００
０ ｔ／年、その内詣脂が７０００ ｔ／年にのぼる生
産を確保できるものである。また、生成脂質は９５グ以
上が油脂（トリグリセリド）であり、食料を始めとして
、加工用油脂原料などとして利用できるものであり、リ
ン脂質、糖脂質は医薬品界面活性剤などとして利用でき
ることはもちろん、脂質抽出後の菌体は主成分であるタ
ンパク質、核酸はそれぞれ飼料、医薬品などの用途に利
用できるものであることは明らかであろう 次に本発明の実施例を示すが、本発明はこれにより制限
を受けるものではない。
実施例１
グルコース６０グ、 ＫＨｚ ＰＯｔ ２ ｆ 、 Ｍ
ｇ ＳＯｔ ７Ｈｔ ００．３グ、 ＮａＣｌ ０．
１ ？ 、 マ／Ｌ／ト・エキスＱ、２ｆ。
ｇ ＳＯｔ ７Ｈｔ ００．３グ、 ＮａＣｌ ０．
１ ？ 、 マ／Ｌ／ト・エキスＱ、２ｆ。
イースト・エキス０．２ ｆ 、ペプトン０．１ ｔ、
Ｆ ｅ ＳＯ。
Ｆ ｅ ＳＯ。
・７Ｈ８０１０ｍｇ、 ＣａＣ１，２Ｈ−０１０７ｎｇ
、 Ｃｕ５Ｏ１・５Ｉ−ＬＯＯ，２Ｔｎｔ、 Ｍｎ３Ｏ
４・４Ｈ−０１，Ｏｍｇと窒素源ス、糖な２）の濃度を
増加させた場合、その濃度に応じて培地成分を増加して
、又窒素源を尿素などに変えた場合は同じＣ／Ｎ比にな
るように培地を調整した。
、 Ｃｕ５Ｏ１・５Ｉ−ＬＯＯ，２Ｔｎｔ、 Ｍｎ３Ｏ
４・４Ｈ−０１，Ｏｍｇと窒素源ス、糖な２）の濃度を
増加させた場合、その濃度に応じて培地成分を増加して
、又窒素源を尿素などに変えた場合は同じＣ／Ｎ比にな
るように培地を調整した。
この培地を１０６の培養槽で培養する“場合には６ｔ、
３０ｔの培養槽では２０を仕込み、それぞれ菌株を接種
し、３０℃の培養温度で所定の時間、通気量０．５〜２
． ＯＶＶｍで３００〜７００ ｒｐｍで攪拌して培養
を行った。培養後遠心分離法で菌体を集めた。又、菌体
の増殖量、脂質生成量及び培地中の炭水化物濃度の測定
を行うだめ、培養の中間段階において所定の時間毎に１
００ｒｎｌ−ずつ試料の４光取を行い、口過法により菌
体と培地の分離を行った。分離された菌体はその一部を
含水率の定量のだめ、精秤し恒温槽中１２０℃で一昼夜
乾燥し、含水率を求め、残りの菌体について脂質の抽出
を行った。菌体からの脂質の抽出は、残りの湿菌体にク
ロロホルム−メタノール（２：ＩＶ／Ｖ）混液を加え、
ガラスピーズ存在下にホモジナイズすることにより菌体
の破砕と脂質の抽出を同時に行った。なお、抽出を完全
に行うだめ、これを５回繰返し、全抽出液を集めた。上
記抽出液をＦｌ ｏ −ｃ）Ｌの分配洗多傘法により精
製した後、溶媒を減圧留去し、重量法で全脂質量を測定
した。菌体を除いた培地については高速液体クロマトグ
ラフィー（ＨＰＬＣ）により炭水化物（グルコース、フ
ラクトース、サッカロース）の濃度を測定し、濃度が０
になった時点で培養を終了した。
３０ｔの培養槽では２０を仕込み、それぞれ菌株を接種
し、３０℃の培養温度で所定の時間、通気量０．５〜２
． ＯＶＶｍで３００〜７００ ｒｐｍで攪拌して培養
を行った。培養後遠心分離法で菌体を集めた。又、菌体
の増殖量、脂質生成量及び培地中の炭水化物濃度の測定
を行うだめ、培養の中間段階において所定の時間毎に１
００ｒｎｌ−ずつ試料の４光取を行い、口過法により菌
体と培地の分離を行った。分離された菌体はその一部を
含水率の定量のだめ、精秤し恒温槽中１２０℃で一昼夜
乾燥し、含水率を求め、残りの菌体について脂質の抽出
を行った。菌体からの脂質の抽出は、残りの湿菌体にク
ロロホルム−メタノール（２：ＩＶ／Ｖ）混液を加え、
ガラスピーズ存在下にホモジナイズすることにより菌体
の破砕と脂質の抽出を同時に行った。なお、抽出を完全
に行うだめ、これを５回繰返し、全抽出液を集めた。上
記抽出液をＦｌ ｏ −ｃ）Ｌの分配洗多傘法により精
製した後、溶媒を減圧留去し、重量法で全脂質量を測定
した。菌体を除いた培地については高速液体クロマトグ
ラフィー（ＨＰＬＣ）により炭水化物（グルコース、フ
ラクトース、サッカロース）の濃度を測定し、濃度が０
になった時点で培養を終了した。
菌株モルティエレラ・イサベリナＩＦ０７８８４につい
て、グルコースあるいは糖蜜を炭素源として各種の初期
炭素源濃度における窒素源及び窒素源゛濃度を変えて１
０を及び３０Ａ培養槽により培養して得られた菌体増殖
量（乾燥重量ｙ７ｔ＞ 、脂脂生成量Ｃｔ／ｌ）脂質含
量（％）、脂質係数（消費された炭水化物１００ｆに対
する脂質７数）、菌体係数（消費された炭水化物１００
１に対する生成−昼２数）を表−１にまとめて示した。
て、グルコースあるいは糖蜜を炭素源として各種の初期
炭素源濃度における窒素源及び窒素源゛濃度を変えて１
０を及び３０Ａ培養槽により培養して得られた菌体増殖
量（乾燥重量ｙ７ｔ＞ 、脂脂生成量Ｃｔ／ｌ）脂質含
量（％）、脂質係数（消費された炭水化物１００ｆに対
する脂質７数）、菌体係数（消費された炭水化物１００
１に対する生成−昼２数）を表−１にまとめて示した。
なお培養時間として示した時間は炭素源であるグルコー
スあるいは糖蜜が完全に消費され、培地中になくなった
時間であり、その時間で培養を停止した。
スあるいは糖蜜が完全に消費され、培地中になくなった
時間であり、その時間で培養を停止した。
表−１では炭素源として用いたグルコース及び糖蜜がそ
れぞれ濃度２５０り／を以上と高くても菌体の増殖は早
く、菌体濃度として約１００ ｔ／を脂質生成量として
約５０ ｔ／を脂質含量４５％以上の生産性を示しだ。
れぞれ濃度２５０り／を以上と高くても菌体の増殖は早
く、菌体濃度として約１００ ｔ／を脂質生成量として
約５０ ｔ／を脂質含量４５％以上の生産性を示しだ。
最後にグルコース濃度３９０ ？／ｌの実験例を示した
が、この場合最終菌体濃度としては１５６ ｔ／ｌに達
する値が得られ、生成脂質量としても８３ｆ／ｌであっ
た。しかし、菌体の増殖速度は基質限外のためか、特に
初期において炭水化物濃度３００ｙ／を以下の場合と異
なり遅くなっており、増殖終了に要する時間が２倍近く
かかっていた。菌体増殖にかかる時間を考慮した場合、
実用的とは言いがたいが、菌体濃度としての到達点とし
て極めて高い値が得られることを示した。
が、この場合最終菌体濃度としては１５６ ｔ／ｌに達
する値が得られ、生成脂質量としても８３ｆ／ｌであっ
た。しかし、菌体の増殖速度は基質限外のためか、特に
初期において炭水化物濃度３００ｙ／を以下の場合と異
なり遅くなっており、増殖終了に要する時間が２倍近く
かかっていた。菌体増殖にかかる時間を考慮した場合、
実用的とは言いがたいが、菌体濃度としての到達点とし
て極めて高い値が得られることを示した。
実施例２
炭素源としてグルコースを濃度２００ ｔ／ｌとし、窒
素源として尿素を用いて濃度６．５ ？／ｌとし、その
他の組成分としては実施例１に示した基準で調整した培
地を用いて各種モルティエレラ属糸状菌を１０を培養槽
において培養して得られた結果を表２に示しだ。
素源として尿素を用いて濃度６．５ ？／ｌとし、その
他の組成分としては実施例１に示した基準で調整した培
地を用いて各種モルティエレラ属糸状菌を１０を培養槽
において培養して得られた結果を表２に示しだ。
表２では１０を培養槽の場合、幾分ＤＯ（溶存酸素濃度
）が装置上の問題点として、増殖速度に対して律速に働
くため、３０１培養槽を使用する場合修グルコース濃度
を上げられないだめ、２００グ／ｌの濃度で行ったが完
全にグルコースは消費され、それぞれ７０ ’Ｉ／を以
上の菌体増殖量と３０ｆ／を以上の生成脂質量が得られ
たことが分る。
）が装置上の問題点として、増殖速度に対して律速に働
くため、３０１培養槽を使用する場合修グルコース濃度
を上げられないだめ、２００グ／ｌの濃度で行ったが完
全にグルコースは消費され、それぞれ７０ ’Ｉ／を以
上の菌体増殖量と３０ｆ／を以上の生成脂質量が得られ
たことが分る。
手続補正書（方式）
特許庁長官 若杉和夫殿
■、事件の表示 昭和５８年特許願第８２３４９号２
、発明の名称 微生物菌体及び脂質の製造方法３、補
正をする者 事件との関係特許出願人 住所 東京都千代田区霞がｌＩ！１１丁目３番１号
氏名（１１４）工業技術院長 川 １）袴部（発送日
昭和５８年８月３０日）６、補正により増加する発
明の数 Ｏ 目止の内容 ■、別紙訂正願書のとおり。
、発明の名称 微生物菌体及び脂質の製造方法３、補
正をする者 事件との関係特許出願人 住所 東京都千代田区霞がｌＩ！１１丁目３番１号
氏名（１１４）工業技術院長 川 １）袴部（発送日
昭和５８年８月３０日）６、補正により増加する発
明の数 Ｏ 目止の内容 ■、別紙訂正願書のとおり。
２本願明細書中において、水のとおり補正します。
■第１２頁表−１を、次のとおり訂正します。
■第１４頁表−２を、次のとおり訂正します。
Claims (2)
- （１） モルティエレラ属に属するイサベリナ、ビナ
セア、ラマニアナーアングリスボラ及びナナの菌株を高
濃度の炭水化物を炭素源とする培地に培養することによ
る脂質含量の高い菌体を培地中に高密度で生産すること
を特徴とする脂質含量の高い菌体の製造方法。 - （２） モルティエレラ属に属するイサベリナ、ビナ
セア、ラマニアナ・アングリスポラ及びナナの菌株を高
濃度の炭水化物を炭素源とする培地に高密度に培養され
た脂質含量の高い菌体より脂質を採取することを特徴と
する生産性の高い脂質の製造方法。
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58082349A JPS59205979A (ja) | 1983-05-11 | 1983-05-11 | 微生物菌体の製造方法 |
| EP84301889A EP0125764B1 (en) | 1983-05-11 | 1984-03-20 | Method for the preparation of a fungal body and a lipid therefrom |
| DE8484301889T DE3475532D1 (en) | 1983-05-11 | 1984-03-20 | Method for the preparation of a fungal body and a lipid therefrom |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58082349A JPS59205979A (ja) | 1983-05-11 | 1983-05-11 | 微生物菌体の製造方法 |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP25560487A Division JPS63119687A (ja) | 1987-10-09 | 1987-10-09 | 脂質の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS59205979A true JPS59205979A (ja) | 1984-11-21 |
| JPS6350993B2 JPS6350993B2 (ja) | 1988-10-12 |
Family
ID=13772086
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP58082349A Granted JPS59205979A (ja) | 1983-05-11 | 1983-05-11 | 微生物菌体の製造方法 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0125764B1 (ja) |
| JP (1) | JPS59205979A (ja) |
| DE (1) | DE3475532D1 (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60168391A (ja) * | 1984-02-09 | 1985-08-31 | Agency Of Ind Science & Technol | γ‐リノレン酸濃縮物の製造方法 |
| JPS61130237A (ja) * | 1984-11-30 | 1986-06-18 | Agency Of Ind Science & Technol | γ−リノレン酸含有油脂を含む組成物 |
| JPS63119687A (ja) * | 1987-10-09 | 1988-05-24 | Agency Of Ind Science & Technol | 脂質の製造方法 |
| US4870011A (en) * | 1985-01-22 | 1989-09-26 | Director General Of Agency Of Industrial Science And Technology | Method for obtaining lipids from fungus bodies |
| JP2010158219A (ja) * | 2009-01-09 | 2010-07-22 | Univ Of Yamanashi | 油脂生産菌の培養方法 |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3470061D1 (en) * | 1984-02-09 | 1988-04-28 | Agency Ind Science Techn | A method for the preparation of a fungal body and a lipid rich in gamma-linolenic acid therefrom |
| JPS6137096A (ja) * | 1984-07-31 | 1986-02-21 | Nisshin Oil Mills Ltd:The | γ−リノレン酸含量の高い脂質成分の製造法 |
| JPH0716424B2 (ja) * | 1985-10-01 | 1995-03-01 | ライオン株式会社 | アラキドン酸含有脂質の製造方法 |
| ES2052564T3 (es) * | 1986-07-08 | 1994-07-16 | Suntory Ltd | Procedimiento para la produccion de acido bishomo-gamma-linolenico y acido eicosapanteonico. |
| JPH0712314B2 (ja) * | 1986-07-08 | 1995-02-15 | サントリー株式会社 | γ―リノレン酸及びこれを含有する脂質の製造方法 |
| GR1000154B (el) * | 1989-03-17 | 1991-09-27 | Aggelis Georgios | Παραγωγη γ-λινολενικου οξεος gla με βιομετατροπη του λινελαικου οξεος απο μυκητες phycomycetes και εκχυλιση του στο εξωκυτταρικοπεριβαλλον, παραλληλα με την παραγωγη μικροβιακης πρωτεινης υψηλης βιολογικης αξιας |
| US6746857B2 (en) | 1996-12-27 | 2004-06-08 | Suntory Limited | Media for culturing microorganisms and process for producing unsaturated fatty acids or lipids containing the same |
| PL335227A1 (en) * | 1997-02-20 | 2000-04-10 | Dsm Nv | Industrial-scale production of valuable compounds by fermentation in a chemically defined medium |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS59130191A (ja) * | 1983-01-12 | 1984-07-26 | Agency Of Ind Science & Technol | γ−リノレン酸含量の高い脂質の製造方法 |
-
1983
- 1983-05-11 JP JP58082349A patent/JPS59205979A/ja active Granted
-
1984
- 1984-03-20 EP EP84301889A patent/EP0125764B1/en not_active Expired
- 1984-03-20 DE DE8484301889T patent/DE3475532D1/de not_active Expired
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS59130191A (ja) * | 1983-01-12 | 1984-07-26 | Agency Of Ind Science & Technol | γ−リノレン酸含量の高い脂質の製造方法 |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60168391A (ja) * | 1984-02-09 | 1985-08-31 | Agency Of Ind Science & Technol | γ‐リノレン酸濃縮物の製造方法 |
| JPS61130237A (ja) * | 1984-11-30 | 1986-06-18 | Agency Of Ind Science & Technol | γ−リノレン酸含有油脂を含む組成物 |
| US4870011A (en) * | 1985-01-22 | 1989-09-26 | Director General Of Agency Of Industrial Science And Technology | Method for obtaining lipids from fungus bodies |
| JPS63119687A (ja) * | 1987-10-09 | 1988-05-24 | Agency Of Ind Science & Technol | 脂質の製造方法 |
| JP2010158219A (ja) * | 2009-01-09 | 2010-07-22 | Univ Of Yamanashi | 油脂生産菌の培養方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6350993B2 (ja) | 1988-10-12 |
| EP0125764A3 (en) | 1985-08-21 |
| EP0125764A2 (en) | 1984-11-21 |
| DE3475532D1 (en) | 1989-01-12 |
| EP0125764B1 (en) | 1988-12-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA1235083A (en) | METHOD FOR THE PREPARATION OF A FUNGAL BODY AND A LIPID RICH IN .gamma.-LINOLENIC ACID THEREFROM | |
| EP0005277B1 (en) | Process for the microbiological production of oil | |
| Lee et al. | Production of Candida utilis biomass on molasses in different culture types | |
| JPS59205979A (ja) | 微生物菌体の製造方法 | |
| Ibrahim Rajoka et al. | Production of single cell protein from rice polishings using Candida utilis | |
| CN116162554B (zh) | 一株间型脉胞菌菌株及其在替代蛋白中的应用 | |
| Araújo et al. | Mead production by Saccharomyces cerevisiae Safbrew T-58 and Saccharomyces bayanus (Premier Blanc and Premier Cuvée): Effect of cowpea (Vigna unguiculata L. Walp) extract concentration | |
| Vega et al. | Optimization of banana juice fermentation for the production of microbial oil | |
| Mujdalipah et al. | Utilization of pineapple peel and rice washing water to produce single cell proteins using Saccharomyces cerevisiae | |
| US4485173A (en) | Preparation of fats and oils | |
| SE453836B (sv) | Biologiskt ren kultur av saccharomyces cerevisiae samt dess anvendning for hydrolys av raffinos | |
| CN114907983B (zh) | 一种红平菇菌丝体液体培养基和一种红平菇菌丝体的发酵方法 | |
| Bednarski et al. | Utilization of beet molasses and whey for fat biosynthesis by a yeast | |
| JPS6131084A (ja) | 新規微生物 | |
| Lee et al. | Rapid growth of a thermotolerant yeast on palm oil | |
| Macris et al. | Continuous fermentation to produce fungal protein. Effect of growth rate on the biomass yield and chemical composition of Fusarium moniliforme | |
| Burgess et al. | Alcohol production by yeast in concentrated ultrafiltration permeate from cheddar cheese whey | |
| CN105907566B (zh) | 一种窖泥及其制备方法 | |
| Gabriel-Ajobiewe et al. | Basal media formulation using Canavalia ensiformis as carbon and nitrogen source for the growth of some fungi species | |
| Wijeyaratne et al. | Characteristics of two yeast strains (Candida tropicalis) isolated from Caryota urens (Kithul) toddy for single cell protein production | |
| Andersen et al. | d-lactic acid fermentation of Jerusalem artichokes | |
| Khan et al. | Transformation of agricultural wastes into sugar by Trichoderma viride | |
| Rodriguez et al. | Single cell protein from bagasse pith by a mixed bacterial culture | |
| JPS63119687A (ja) | 脂質の製造方法 | |
| Asri et al. | Application of Acetobacter Xylinum in The Production of Nata De Legen From Palmyra Palm Neera |