JPS5936689A - 抗ウロキナ−ゼモノクロ−ナル抗体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、ウロキナーゼに対して特異性があるモノクロ
ーナル抗体に関する。また、本発明は、ウロキナーゼの
精製処理において使用される前記モノクローナル抗体に
関する。

従来、ある抗原に対する特異抗体の取得は、抗原で免疫
した動物から抗血清金得ることにより達成されてきた。

しかし、この抗血清中の特異抗体は、他の抗体群と混合
状態にあり、必要な特異抗体を他の抗体群から分離する
ことは非常に困難である。また、得られた特異抗体も、
異なる抗原決定基に対して反応する性質の異なる特異抗
体の混合物である。さらに、一つの抗原決定基に対して
も結合力の異なる種々の特異抗体が産生されてくる。以
上の理由から、従来の抗血清からの特異抗体と抗原との
反応は混合反応であり、用途上程々の制限金堂けてきた
。

一方、ウロキナーゼは、人尿あるいは人由来細胞培養液
に含まれる繊維素溶解酵素であり、その製剤は血栓症、
心筋梗塞の治療薬として広く知られている。また、抗癌
剤との併用効果の確認と共に、大量投与による治療が行
なわれてｂる。したがって、用いるウロキナーゼに起源
して、その製剤中に混在している副作用を発する物質を
除去した高純度ウロキナーゼの提供が臨床医学上非常に
望まれている。

従来、ウロキナーゼの取得法としては、硫酸バリウム、
ケイ酸およびその塩類、活性炭への吸着、または各種イ
オン交挨体を用いる方法、リジンまたはアルギニンを不
溶性担体に固定して用いる方法（％開閉４９−１２５５
８４　）、セトラキセートをアガロースもしくはポリア
クリルアミドまたは多糖体高分子物質に結合させて用い
る方法（％開閉５５−４００４０号）、ヘパリンま九は
そのアルカリ金属塩全不溶性相体に結合させて用いる方
法（特開昭５６−５９１９２号）等が知られている。

［２かしながら、これらの方法では、ウロキナーゼとの
特異的な結合が弱く、高純度のウロキナーゼを得ること
は不可能であった。加えて、これらの方法では回収率も
それほど高くなく、満足のゆくものではなかった。また
、抗血清から得られる特異抗体を用いる精製法では、抗
体が混合物であるため、ウロキナーゼに対する親和性、
抗体の安定性、カラム化の条件などが均一でない。その
ために、カラム化工程、ウロキナーゼ精製工程が煩雑に
なり、回収率、精製効率も十分高くなかった。

本発明者らは、これらの問題点を克服すべく鋭意研究を
重ねた結果、ウロキナーゼに対する特異性を有する新規
な４種類の抗ウロキナーゼモノクローナル抗体を取得し
、この抗つロギナーゼモノクローナル抗体を用いて高純
度のウロキナーゼをｎ製することができることを見出し
、この知見に基づいて本発明を完成するに至った。

すなわち、本発明は、ヒトのウロキナーゼに対して特異
性があり、分子量が１４００００〜１８００００で、Ｉ
ｇＧ１サブクラスに属し、等電点が５．０〜６．５であ
ることを特徴とする抗ウロキナーゼモノクローナル抗体
に関するものである。また、本発明は、ウロキナーゼの
精製処理において使用することを特徴とする抗つロキナ
ーゼモノクローナル抗体ニ　５− 関するものである。

本発明における抗ウロキナーゼモノクローナル抗体の製
造方法としては、例えば、マウスリンパ系Ｂ細胞とミエ
ローマ細胞を細胞融合することにより創出された新規な
雑種細胞を培養することにより得ることができる。この
雑種細胞は、Ｍｉｌｓｔｅｉｎら（Ｎａｔｕｒｅ、　２
５６巻、４９５−４．９７頁、１９７５年）Ｋよって確
立され、例えば、Ｇ、ＫＭｈｌｅｒら（Ｓｏｍａｔｉｃ
　Ｃｅ１ｌ　Ｇｅｎｅｔｉｃｓ　　、　３　、３０３　
、１９７７年）、Ｒ，Ａ、Ｇｏｌｄｓｂｅｒｇら（Ｎａ
ｔｕｒｅ　、　２６７巻、　７０７゜１９７７年）、谷
口克他（臨床免疫、１２（４）。

２８４−２８９頁、１９８０年）記載の方法等で得るこ
とができる。

すなわち、抗原として人腎細胞培養液より得られたウロ
キナーゼ（比活性５６７００　ＩＵ／り）　０，５２９
／−を、あらかじめ免疫しておいたマウスＢ　Ａ　Ｌ　
Ｂ　／　ｃ♂のひ臓からのＢ細胞（ここで用いるウロキ
ナーゼは必ずしも高純度のものを用いる必要はなく、例
えば、純度１チ以上のものであれは免疫は達成される）
と、同マウス骨髄の腫瘍から　６− のミエローマ細胞（例えば、Ｐ３Ｘ６３Ａｇ８ＵＩ　）
を、細胞数１０：１の割合にてポリエチレングリコール
の存在下で融合させ、融合した細胞のみを選択的に生き
残らせるように調製した１０チ牛脂児血清添加ＨＡＴ培
養液に浮遊させ９６穴デイツシユにブレーティングする
。約１週間後、ミエローマ細胞とＢ細胞との雑種細胞以
外は、はとんど死滅しており、雑Ｓ細胞のコロニーが形
成されてくる。

次に、雑種細胞が目的とするウロキナーゼに対する抗体
全産生じているかどうかを調べるため、その培養上清を
用いて「酵素免疫測定法」　（石川栄治他著　医学書院
、１９７８年）記載の酵素免疫測定法にてマイクロタイ
タープレー１−ヲ用いて抗体産生能をチェックする。抗
体産生が田の培養上清のコロニーについては、一つのコ
ロニーが一つの培養孔に存在するようにクローニングし
、７〜１０日間培養後、再び酵素免疫測定法にて抗体産
生全チェックする。ここでも抗体産生が（ト）となった
クローンは目的とするウロキナーゼに対して同一の抗体
を産生ずる雑種細胞のコロニーであり、抗ウロキナーゼ
モノクローナル抗体産生雑種細胞種細胞は無限に継代培
養され、抗ウロキナーゼモノクローナル抗体を生産１．
続ける。

次に、抗ウロキナーゼモノクローナル抗体は、この雑種
細胞を１０〜２０チ牛脂児血清添加ＲＰＭＩ−１６４０
培地中にて大、！ｌ培養することにより得られた培養液
、またはプリスタン（２，６，１０，ｉ４−テトラメチ
ルペンタデカン）０．２ｍで抗原刺激１７たマウスＢａ
１ｂ／ｃの腹腔内に雑種細胞５　Ｘ　１０”〜Ｉ　Ｘ　
１０’　ｃｅｌｌｓ／匹を注射し増殖させて得られた腹
水から回収することができる。回収方法は通常の血清か
らの抗体の回収方法に準じた方法、例えば、Ｌ、Ｈｕｄ
ｓｏｎら（Ｐｒａｃｔｉｃａｌ　Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ
　。

Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ　Ｓｃｉ、Ｐｕｂ、、　１９７６年
）を適用することができる。

以上のようにして得られた抗ウロキナーゼモノクローナ
ル抗体産生雑種細胞系からの４ｓ類の抗つロギナーゼモ
ノクローナル抗体は、不溶性担体と化学的に結合するこ
とにより、ウロキナーゼ精製に利用することができる。

す々わち、カラムに充填された該不溶性担体と、人尿あ
るいは１由来細胞培養液またはウロキナーゼ生産菌培養
液またはこれらの粗精製ウロキナーゼ溶液を接触せしめ
ることにより、ウロキナーゼは該不溶性担体に固定され
てカラムに保持される。次に、ｐ）Ｉ　’〜８の洗浄液
にて該不溶性担体全洗浄して未吸着不純物質を除去し、
続いて溶離液にて該不溶性担体から吸着ウロキナーゼ金
溶離せしめる。ここで用いられる不溶性担体、不溶性担
体と抗ウロキナーゼモノクローナル抗体との結合方法、
溶離液等は通常のアフィニティークロマトグラフィーに
用いられるものならどのようなものでも適用することが
できる。

本発明方法によれば、人尿あるいは人由来細胞培養液ま
たはウロキナーゼ生産菌培養液またはこれらの粗精製ウ
ロキナーゼ溶液中に含まれる不純物質を１ステツプで容
易に分離除去することができ、非常に高純度（１００，
０００ＩＵ／■以上）のウロキナーゼを９０％以上の非
常に高い回収率で取得することができる。ここで該不溶
性担体は、異　９− なる抗ウロキナーゼモノクローナル抗体を結合したもの
であれば、２種以上組合せて使用することができ、さら
に高純度のウロキナーゼを取得することができる。

また、該不溶性担体へのウロキナーゼの吸着は非常に速
く、あ１り接触時間に影響されない。したがって、他の
アフィニティークロマト処理に比べてかなり速い流速を
用いることができ、操作時間を大巾に短縮することがで
きる。しかも、該不溶性担体に対するウロキナーゼの吸
着容量は非常に大きい（例えば、１−の不溶性担体ゲル
に対して３．５〜の抗つロギナーゼモノクローナル抗体
全結合した場合１５０，０００〜２００，０００ＩＵ）
ので、小さなカラムで十分である。

さらに、該不溶性担体はウロキナーゼを脱着せしめたの
ち、洗Ｎ）液で洗゛浄するだけで何回でも使用すること
ができるので、ウロキナーゼＮ製工程に簡便さを与える
ことができるなど多くの利点を有し、工業的に非常に有
用である。

また、本発明における抗ウロキナーゼモノクロ１０− −ナル抗体の異なる利用方法としては、臨床等における
血中ウロキナーゼの免疫定量が挙げられる。

ウロキナーゼの血中での作用機構、投与量と効果あるい
はその他のプラスミノーゲンアクチベーターとの関係な
ど、今なお不明な点が多く、凝固線溶系の解析に抗ウロ
キナーゼモノクローナル抗体を導入することにより、従
来の混合抗体を利用する方法よりＦｉるかに鋭敏に、【
〜かも、極めて倣量で正確なウロキナーゼの血中レベル
等を測定することができ非常に有用である。

次に、本発明を実施例により説明する。

実施例１（物理化学的性質） １）抗ウロキナーゼモノクローナル抗体（ＩＧｌｌａ）
ａ）分子量：１５０，０口０〜１７０ＩＯ口０８ＤＳ−
ポリアクリルアミドゲル電気泳動法による非還元形態に
おいて測定した。この試験では、９％ゲルを用いて、Ｕ
、に、Ｌａｅｍｍｌｉ　　（Ｎａｔｕｒｅ　２２７　。

６８０．１９７０）の方法にしたがって実施した。

ｂ）ＩｇＧサブクラス：ＩｇＧ１ ９６穴マイクロタイトレ一ジヨンプレートＩｇＧ　２　
ａ　、　ＩｇＧ２ｂ　（Ｍｉ　ｌｅｓ社）を各々１，０
００倍に希釈１−てブレーティングし、４℃、−晩放置
後、前記（−だ酵素免疫測定法にて測定した。

（ニ）　等′Ｎイ点：　５，２５〜５．６薄層ゲル等′
Ｐに焦電気泳動法にて等電点分画し測定し７た。この試
験では、アンフオラインとしてファルマライ）　ｐＨ３
〜１０（ファルマシア社）を用いてＺ、Ｌ、Ａｗｄｅｈ
ら（Ｎａｔｕｒｅ、　２１９　、６６〜６７　。

１９６８）の方法にしたがって実施【７た。

ｄ）　アミノ酸組成二表１に示す。

真空中の６ＭＨＣ４で１１０℃、２４時間加水分解し、
高速アミノ酸分析計（日立、８５５型）を用いてアミノ
酸組成（モル襲）を測定した。

表　　１ アミノ酸　　　　　　　含有量（モル襲）アスパラギン
＋アスパラギン酸　　　　　１００トレオニン　　　　
　　　　　　　９．７セ　　リ　　ン　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　１２．０グルタミン＋グル
タミン酸　　　　　　　　１１．０グリシン　　　　　
　　　１１．４ アラニン　　　　　　　　６．２ バ　　リ　　ン　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　７．０シスチン　　　　　　　　　　　検出
できずメチオニン インロイシン　　　　　　　　　　３．２０イシン　　
　　　　　　　５．７ チロシン　　　　　　　　　２．９ フエニルアラニン　　　　　　　３．５リジン　　　　
　　　　６．５ ヒスチジン　　　　　　　　　　　２．０アルギニン　
　　　　　　　　　　２．′５プロリン　　　　　　　
　　　　　　６９なお、システィンは加水分解後空気酸
化してシスチンに変換。

−１３− １１）抗ウロキナーゼモノクローナル抗体（２Ｃ３ｉ）
ａ）　　分子ｆｉ：：１５０，０００〜１６５，０００
ｂ）ＩｇＧサブクラス：ＩｇＧＩ Ｃ）　等電点：　５，９５〜６．２５ ｄ）　アミノ酸組成：表２に示す。

表　　２ アミノ酸　　　　　　　含有ｔ（モル％）アスパラギン
＋アスパラギン酸　　　　　　　８．０トレオニン　　
　　　　　　　　　８．１セ　リ　　７　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　９．８グルタミン士グル
タミン酸８．２ グリシン　　　　　　　　２４．３ アラ二ノ　　　　　　　　５．０ バ　　リ　　ン　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　６．４シスチン　　　　　　　　　　検出で
きずメチオニン　　　　　　　　　　　０．フイソロイ
シン　　　　　　　　　　３２３０イシン　　　　　　
　　　５０ チロシン　　　　　　　　　２．６ フエニルアラニン　　　　　　　　３．０リジン　　　
　　　　　５．３ ヒスチジン　　　　　　　　　　　１．８アルギニン　
　　　　　　　　　　２．５プロリン　　　　　　　　
６．１ −１４− ａ）〜ｄ）はすべて１）と同様の方法により測定を行っ
た。

ｉｉｉ　）　　抗ウロキナーゼモノクローナル抗体（５
Ｇ４１）ａ）　分子量：１５０，０００〜１７０，００
０ｂ）ＩｇＧサグクラス：ＩｇＧＩ Ｃ）　等電点：　５，７５〜６．１５ ｄ）　アミノ酸組成：表３に示す。

表　　６ アミノ酸　　　　　　　含有量（モルチ）アスパラギン
＋アスパラギン酸　　　　　１０．２トレオニン　　　
　　　　　　　９．４セ　　リ　　ン　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　１１．４グルタミン＋グルタミ
ン酸１　０．３ グリシン　　　　　　　　８．６ アラユン　　　　　　　　５．９ バ　リ　　ン　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　７．１シスチン　　　　　　　　１．１ メチオニン インロイシン　　　　　　　　　３．３０イシン　　　
　　　　　　５．７ チロシン　　　　　　　　５．４ フェニルアラニン　　　　　　　３．９リジン　　　　
　　　６．４ ヒスチジン　　　　　　　　　　２．１アルギニン　　
　　　　　　　　２．８プロリン　　　　　　　　　７
．３ 定した。

ｉｖ）　　抗ウロキナーゼモノクローナル抗体（６Ｇ８
ｕ）ａ）　分子量：１５０，０００〜１７５，０００ｂ
）ＩｇＧタプクジス：ＩｇＧＩ Ｃ）　等電点：５．１〜５．４ ｄ）　アミノ酸組成二表４に示す。

トレオニン　　　　　　　　　　　６．８セ　リ　　ン
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　８６グ
ルタミン＋グルタミン酸　　　　　　　　　８．４グリ
シン　　　　　　　　３１．７ アラニン　　　　　　　　４．７ バ　リ　　ン　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　２．６シスチン　　　　　　　　　１．０ メチオニン イソロイシン　　　　　　　　　３．０ロイシン　　　
　　　　　　４．９ チロシン　　　　　　　　３．４ フェニルアラニン　　　　　　　２．７リジン　　　　
　　　５．０ ヒスチジン　　　　　　　　　　１．６アルギニン　　
　　　　　　　　２．０プロリン　　　　　　　　　５
．４ ａ）〜ｄ）はすべて１）と同様の方法により測定した。

ｅ）　　ジエチルアミノエチル（ＤＥＡＥ）イオン交換
体に対する結合能二〇〜１５　ｍｕ／ｃｒｒＩの溶液存
在下で結合 開蓋の抗ウロキナーゼモノクローナル抗体と正常マウス
血清から精製（−た抗体（ＩｇＧ　）　ｋ　、０−ｓ　
、　１ｏ　、　１５ｍＵ／ｃｒｎ各電導度の０．０２５
　Ｍ　トリス−塩酸緩衝液（ｐＨ８，０）存在下におい
てジエチルアミンエチルセルロース（ワットマン社、Ｄ
Ｅ５２）と接触攪拌後、上澄みに残存する抗体量（吸光
度Ａｔａ。で測定）から結合抗体１ｋを換算し、全抗体
量に対する結合抗体量の割合を表５に示した。

表　　５ −１７　＝ 実施例２ 人腎細胞を培養して得られた培養液１　ｔ（２００ＩＵ
／ｓｇ）に硫安４７２　Ｓ”ｉｉ加えて７０チ飽和とし
、得られた沈殿′ｔ−ＮＩＬＣｔで電導度を５０ｍ（Ｊ
／薗とした１０ｍＭリン酸緩衝Ｑ（ｐＨ７，０）１５ｄ
に溶かし、２００倍量の同緩衝液にて４０１−晩透析し
た。透析終了後、遠沈して得られた粗ウロキナーゼ溶液
（１４−）は１０７００ＩＵ／−であった。

この粗ウロキナーゼ溶液１５０口００ＩＵｔ−１ＮａＣ
１で５０ｍで一５１０ＩＩＬに調節した洗浄用１０ｍＭ
リン酸緩衝液（ｐ　Ｈ７，０）で十分に洗浄したｌＧ１
１ａ抗ウロキナ一ゼモノクローナル抗体を化学的に結合
したセファロース、ファルマシア社（抗体５．５■／−
担体）のカラム（０，９ＱＩＩφ、１−）に通した。

未吸着分画を洗浄用リン酸緩衝液で洗浄除去後、カラム
に吸着保持されたウロキナーゼｆ、ＮａＣ１で電導度會
５０ｎ１０／薗にした０、１Ｍグリシン−塩酸緩衝液（
ｐ　Ｈ２−８）で溶出した。溶出した分画の吸光度Ａ２
！１Ｇとウロキナーゼ活性（欅準フィブリ／平板法にて
測定）の関係を第１図に示し、原料−１８− の粗ウロキナーゼ溶液と溶出分画の性質全表６に示した
、 表　　　６ 表６から、アフィニティークロマトグラフィーにより比
活性が一段階で約６５倍に上昇し、１５１．０００　Ｉ
Ｕ／１１１９という非常に高純度のウロキナーゼが９３
チという高回収率で得られた（全活性回収率は９８チ）
。

実施例３ 採取した人尿２５ｔ（８ＩＵ／ｍ／）を実施例２と同様
に処理し、粗ウロキナーゼ溶液（３９００ＩＵ／−）全
４０ゴ得た。この粗ウロキナーゼ溶液１５０、口００　
ＩＵ’ｅ、ＮａＣ１でｓｏｍ’Ｑ７ａｓに調節した洗浄
用１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐ　Ｈ７，０）で十分に洗浄
した２Ｃ３ｉ抗ウロキナ一ゼモノクローナル抗体を化学
的に結合し九粒状ポリアクリルアミド（抗体３．５〜Ｚ
ｔｎｔ相体）のカラム（０，９帥φ、１＃Ｉ７りに通し
た、 未吸着分画全洗浄用リン酸緩衝液で洗浄除去後、カラム
に吸着保持されたウロキナーゼｆ、ＮａＣ１で電導ｌＪ
１′に５０ｎ１て、）／―に調節した４　％　ＮＨ４０
Ｈ（ｐＨ１１）で溶出し、原料の粗つロギナーゼ溶液と
溶出分画の性質を表７に示し７ＩＣ。

全活性回収率は９５チ。

実施例４ 人腎細胞全培養して得られた培養液９８〇−（１８９Ｉ
［Ｊ／ｓ＋／）　ｆ、ＮａＣ１でｓ　ｏ　ｍ７Ｊ／−に
調節した洗浄用１（ｌｔｎＭリン酸緩衝液（＄１　Ｈ７
−０）で十分に洗浄し７’ｊ　５Ｇ４　ｌ　　抗ウロキ
ナーゼモノクローナル抗体を化学的に結合した粒状セル
ロース（抗体５．５ｍｙ／−相棒）のカラム（０，９ａ
ｍφ、１−）に通した、 未吸着分１ｉ１１１’を洗浄用１）７ｔｌｌ緩衝液で洗
浄除去後、カラムに吸着保持されたウロキナーゼｆ、Ｎ
ａＣｔで電導塵＠　ｓ　ｏ　ｍＵ／眞に調節した６Ｍグ
アニジン−ｔｊＡ酸緩衝Ｑ（ｐＨ３，１）で溶出し、原
料の培養液と溶出分画の性質を表８に示した、 表　　８ 全活性回収率は９９チであシ、比活性が１ステツプで約
６５０倍上昇した、 実施例５ 実施例２と同様の方法にて粗ウロキナーゼ溶液を取得し
、この１　Ｂ　０，０００　Ｉ　Ｕ’ｉｒ、　Ｎａ（、
ｔで電導塵ｉ５０ｍＵ／ｍに調節した洗浄用１０ｍＭＩ
Ｊン酸緩衝液（ｐＨ７，０）で十分に洗浄した６Ｇ８ｕ
抗ウロキナ一ゼモノクローナル抗体を化学的に結合した
粒状デキストラン（抗体３．５Ｉｎ９／−担体）のカラ
ム（０，９傷φ、１−）に通した、 未ｒＪ＆着分画を洗浄用リン酸緩衝液で洗浄除去後、−
２１− カラムに吸着保持されたウロキナーゼを、ＮｌｌＣｌで
電導層をｓｏｍ？Ｕ／―に調節した８Ｍ尿素（ｐｌＩ７
．０　）で溶出し、原料の粗つｐキナーゼ溶液と溶出分
画の性質を表９に示した。

全活性回収率は１００％０ 実施例６ 実施例４で取得したウロキナーゼ溶液９−（２０，００
０１Ｕ／ｌｎｌ　）　’ｉ、ＮａＣｔで電導塵を５０ｍ
７Ｎ／ＱｌｌにｖＭ節した１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ
７，０）　２　を中にて４Ｕ％−晩透析した。透析終了
後、遠沈して得られたウロキナーゼ溶液（８，５−）は
１９．０１１０　ＩＵ／−であった、次に、このウロキ
ナーゼ溶液１６０１口００　ＩＵ金、Ｎａ　ＣＬでｓ　
ＧＩＴＩＵ／　ｃｙｎに調節した洗浄用１０ｍＭＩ）７
ｔｌｌ緩衝液（ｐ　Ｈ７，０）で十分に洗浄した実施−
２２− 例５と同じカラムに通した、 未吸着分画全洗浄用リン酸緩衝液で洗浄除去後、カラム
に吸着保持されたウロキナーゼｆ、ＮａＣ４で電導度１
５０ｍ７Ｊ／―に調節した０、１Ｍグリシン−塩酸緩衝
液（ｐ　Ｈ２，８）で溶出した、溶出した分画の吸光度
Ａ２１１０とウロキナーゼ活性の関係を第２図に示し、
原料のウロキナーゼ溶液と溶出分画の性質を表１０に示
した。

表　１０ 全活性回収率は９８％。

表１０から、２種類の（５Ｇ４ｊおよび６　Ｇ　８　ｕ
　）抗ウロキナーゼモノクローナル抗体を結合した不溶
性担体の絹合せにより、さらに高純度のウロキナーゼを
取得することができた。

【図面の簡単な説明】

第１図は実施例２による溶出分画の吸光度Ａ２１１０は
実施例乙による浴出分画の吸光度Ａ２８０とウロキナー
ゼ活性の関係を示すグラフである、（”ｉｊＫべＫ ｌ（−一

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. （１）　　ヒトのウロキナーゼに対して特異性があり、
   分子量が１４０，０００〜１８０，０００で、ＩｇＧ１
   サブクラスに属し、等電点が５．０〜６．５であること
   を特徴とする抗ウロキナーゼモノクローナル抗体。
2. （２）下記の性質を有する特許請求の範囲第１項記載の
   抗ウロキナーゼモノクローナル抗体。 ａ）　分子量：ｉ５０，０００〜１７０，０００ｂ）　
   　ＩｇＧサブクラス：ＩｇＧＩ Ｃ）等電点：　５，２５〜５．６ ｄ）　アミノ酸組成：表１ＶＣ示す。
3. （３）　　下記の性質を有する特許請求の範囲第１項記
   載の抗ウロキナーゼモノクローナル抗体。 ａ）　分子量：１５０，０００〜１６５，０００ｂ）　
   　ＩｇＧサブクラス：ＩｇＧＩ Ｃ）等電点：　５，９５〜６．２５ ｄ）　アミノ酸組成：表２に示す。
4. （４）下記の性質を有する特許請求の範囲第１項記載の
   抗ウロキナーゼモノクローナル抗体。 ａ）分子量：１５０，０００〜１７０，０００ｂ）　　
   ＩｇＧサブクラス：ＩｇＧＩ Ｃ）等電点：　５，７５〜６．１５ ｄ）アミノ酸組成：表３に示す。
5. （５）　　下記の性質を有する特許請求の範囲第１項記
   載の抗ウロキナーゼモノクローナル抗体。 ａ）分子ｌ　：　　１５０，０００〜１７５，０００ｂ
   ）ＩｇＧサブクラス：ＩｇＧｉ Ｃ）等電点：５．１〜５．４ ｄ）アミノ酸組成：表４に示す ｅ〕　ジエチルアミノエチル（ＤＥＡＥ）イオン交換体
   に対する結合能：口〜１５　ｍ０７ｃｍの溶液存在下で
   結合
6. （６）　　ウロキナーゼの精製処理において使用する特
   許請求の範囲第１項ないし第５項記載の抗クロキナーゼ
   モノクローナル抗体。