JPS5937960B2 - 新規抗生物質ｄｃ−５−４およびその製造法 - Google Patents
新規抗生物質ｄｃ−５−４およびその製造法Info
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- JPS5937960B2 JPS5937960B2 JP2278978A JP2278978A JPS5937960B2 JP S5937960 B2 JPS5937960 B2 JP S5937960B2 JP 2278978 A JP2278978 A JP 2278978A JP 2278978 A JP2278978 A JP 2278978A JP S5937960 B2 JPS5937960 B2 JP S5937960B2
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明は式
ＣＨ２ＯＨＨＯＯＨ
ＨＯ□Ｏ□ ０−工ーＮＨ２
ＮＨＯＨ０ＯＨ
／ ／
Ｃ＝ＮＨＣ＝０
／ ′
ＮＨ２ＮＨ２
で表わされる新規抗生物質ＤＣ−５−４およびその発酵
法による製造法に関する。
法による製造法に関する。
ＤＣ−５−４は広範囲のグラム陽性菌やグラム陰性菌に
対して抗菌力を示す。
対して抗菌力を示す。
本発明者らは有用な抗生物質を見い出す目的で天然より
数多くの微生物を入手して抗生物質の生産性について研
究した。
数多くの微生物を入手して抗生物質の生産性について研
究した。
その結果横浜市戸塚区の土壌から分離したコリネバクテ
リウム属に属する菌株が培養物中に抗生物質マイオマイ
シンＢを生産する事実を見い出した。この製造法に関し
てはすでに特許出願している（特願昭５２−３２２８２
号）。本発明者ら譬まさらに研究を重ねた結果、上記菌
株の培養物中にマイオマイシンＢとは異なる新規抗生物
質（ＤＣ−５−４と命名）が存在することを見い出し、
本発明を完成した。
リウム属に属する菌株が培養物中に抗生物質マイオマイ
シンＢを生産する事実を見い出した。この製造法に関し
てはすでに特許出願している（特願昭５２−３２２８２
号）。本発明者ら譬まさらに研究を重ねた結果、上記菌
株の培養物中にマイオマイシンＢとは異なる新規抗生物
質（ＤＣ−５−４と命名）が存在することを見い出し、
本発明を完成した。
すなわち本発明はまず新規抗生物質ＤＣ−５一４および
その酸付加塩に関する。
その酸付加塩に関する。
さらに本発明はコリネバクテリウム属に属し、かつＤＣ
−５−４生産能力を有する微生物を栄養培地に培養して
、培養液中にＤＣ−５−４を蓄積せしめ、該培養液より
ＤＣ−５−４を採取することを特徴とする発酵法による
ＤＣ−５−４の製造法に関する。なお、ＤＣ−５−４の
異性体にあたる式で表わされる化合物は既知である〔Ｔ
ｈｅＪＯｕｒｎａｌＯｆＡｌｈｂｉＯｔｉｃｓｖＯｌ２
６（▲５）２７２一２８３（１９７３）の２７５頁のＣ
ＯｍｐＯｍｄ〕ｏしかしながらＤＣ−５−４はこの化合
物とは２つの １１基のつく位置が異なる。
−５−４生産能力を有する微生物を栄養培地に培養して
、培養液中にＤＣ−５−４を蓄積せしめ、該培養液より
ＤＣ−５−４を採取することを特徴とする発酵法による
ＤＣ−５−４の製造法に関する。なお、ＤＣ−５−４の
異性体にあたる式で表わされる化合物は既知である〔Ｔ
ｈｅＪＯｕｒｎａｌＯｆＡｌｈｂｉＯｔｉｃｓｖＯｌ２
６（▲５）２７２一２８３（１９７３）の２７５頁のＣ
ＯｍｐＯｍｄ〕ｏしかしながらＤＣ−５−４はこの化合
物とは２つの １１基のつく位置が異なる。
ハバＩｉι
以下本発明をさらに詳しく説明する。
本発明に係る新規抗生物質ＤＣ−５−４の理化学的性状
は次の通りである。
は次の通りである。
１）塩基性の白色粉末
２）元素分析値（％）
３）分子式 Ｃｌ，Ｈ２７Ｎ，Ｏ，．（分子量４６９．
４）４）融点 ２０４−２０８℃（分解）（塩酸塩）１
６．５５）比旋光度 Ｃａ；ＪＴｌ− １．６（Ｃ ＝
０．７４，６）紫外吸収スペクトル本物質の水溶液の
紫外吸収スペクトルは２００− ３６０ｎｍの間で特徴
的な吸収極大を示さず、末端吸収を示すのみである。
４）４）融点 ２０４−２０８℃（分解）（塩酸塩）１
６．５５）比旋光度 Ｃａ；ＪＴｌ− １．６（Ｃ ＝
０．７４，６）紫外吸収スペクトル本物質の水溶液の
紫外吸収スペクトルは２００− ３６０ｎｍの間で特徴
的な吸収極大を示さず、末端吸収を示すのみである。
７）赤外線黙収スペクトル（ＫＢｒ）（ＣｎＬ−１）第
１図８）溶解性 水に可溶、メタノール、エタノール、アセトンに少しと
けるが、クロロホルム、ベンゼン、酢酸エチル、ブタノ
ール、エチルエーテル、ｎ−ヘキサン、石油エーテルな
どには不溶。
１図８）溶解性 水に可溶、メタノール、エタノール、アセトンに少しと
けるが、クロロホルム、ベンゼン、酢酸エチル、ブタノ
ール、エチルエーテル、ｎ−ヘキサン、石油エーテルな
どには不溶。
９） ＰＭＲスペクトル（塩酸塩）
第１表の通り
ただし重水溶度、ＰＤ＝３．８にての測定値で、Ｓは一
重線、ｄは二重線、ｍは多重線を表わす。
重線、ｄは二重線、ｍは多重線を表わす。
１Ｃｊリ３Ｃ−ＮＭＲスペクトル
ＤＣ−５−４塩酸塩重水溶液のケミカルシフト（ＴＭＳ
基準）１５８．９，１５８．６，１５８．０，１０１．
３，８０．４，７７．７，７４．７，７３．９，７２．
９，７０．８，６９．９，６９．０，６６．５，６１．
６，５７．７μ鱒オペーノマーカロフｋガ→コｌ−ｒ を前記のごとく同定した。
基準）１５８．９，１５８．６，１５８．０，１０１．
３，８０．４，７７．７，７４．７，７３．９，７２．
９，７０．８，６９．９，６９．０，６６．５，６１．
６，５７．７μ鱒オペーノマーカロフｋガ→コｌ−ｒ を前記のごとく同定した。
次にＤＣ−５−４の各種展開剤によるペーパークロマト
グラフイ一および薄層クロマトグラフイ一のＲｆ値は、
つぎの第２表、第３表の通りである。
グラフイ一および薄層クロマトグラフイ一のＲｆ値は、
つぎの第２表、第３表の通りである。
抗生物質ＤＣ−５−４は常法により、塩酸、硫酸、リン
酸、酢酸、プロピオン酸、乳酸、コハク酸、リンゴ酸、
フマル酸、アスコルビン酸等と反応させて酸付加塩とす
ることができる。
酸、酢酸、プロピオン酸、乳酸、コハク酸、リンゴ酸、
フマル酸、アスコルビン酸等と反応させて酸付加塩とす
ることができる。
次に抗生物質ＤＣ−５−４の各種微生物に対する抗菌ス
ペクトルを第４表に示す。
ペクトルを第４表に示す。
このようにＤＣ−５−４は広範囲のグラム陽性菌や陰性
菌に対して抗菌力を有している。
菌に対して抗菌力を有している。
一方本物質の急性毒性はマウスを用いた静脈内投与では
５００η／Ｋｇ与えても全く認められなかつた。また経
口投与で１９／Ｉ＜９与えても毒性は全く認められなか
つた。本物質は低毒性の抗菌性抗生物質として医薬用や
器械の消毒用などに適用できることを示すものである。
５００η／Ｋｇ与えても全く認められなかつた。また経
口投与で１９／Ｉ＜９与えても毒性は全く認められなか
つた。本物質は低毒性の抗菌性抗生物質として医薬用や
器械の消毒用などに適用できることを示すものである。
次に本発明の抗生物質ＤＣ−５−４の製造法について説
明する。
明する。
前述のごとく、ＤＣ−５−４はコネリバクテリウム属に
属するＤＣ−５−４生産菌株を栄養培地中で培養するこ
とにより製造される。
属するＤＣ−５−４生産菌株を栄養培地中で培養するこ
とにより製造される。
本発明に使用する菌株はコリネバクテリウム属に属し、
ＤＣ−５−４を生産する能力を有する菌株であればいず
れの菌株でもよい。
ＤＣ−５−４を生産する能力を有する菌株であればいず
れの菌株でもよい。
特に好適な菌株としてはコリネバクテリウム・スペーシ
ーズＫＹ４７Ｏ４（微工研菌寄第３８８４号）（ＮＲＲ
ＬＢ−１１，０７２）、コリネバクテリウム・スペーシ
ーズＫＹ４７Ｏ５（微工研菌寄第３８８５号）（ＮＲＲ
ＬＢ−１１，０７３）などがあげられる。
ーズＫＹ４７Ｏ４（微工研菌寄第３８８４号）（ＮＲＲ
ＬＢ−１１，０７２）、コリネバクテリウム・スペーシ
ーズＫＹ４７Ｏ５（微工研菌寄第３８８５号）（ＮＲＲ
ＬＢ−１１，０７３）などがあげられる。
次にコリネバクテリウム・スペーシーズＫＹ４７Ｏ４お
よびＫＹ４７Ｏ５の菌学的性質について詳しく説明する
。
よびＫＹ４７Ｏ５の菌学的性質について詳しく説明する
。
本２菌株の分類学的研究に用いた培地及び方法は、医学
細菌同定の手びきＳ．Ｔ．ＣＯｗａｎａｎｄＫ．Ｊ．Ｓ
ｔｅｅＩｌ坂崎利一、島崎保家共訳（納谷書店）、細菌
の同程法、飯塚広、瀬戸伺典、発酵協会誌２０巻７号１
４頁−２５頁（１９６２）によつた。
細菌同定の手びきＳ．Ｔ．ＣＯｗａｎａｎｄＫ．Ｊ．Ｓ
ｔｅｅＩｌ坂崎利一、島崎保家共訳（納谷書店）、細菌
の同程法、飯塚広、瀬戸伺典、発酵協会誌２０巻７号１
４頁−２５頁（１９６２）によつた。
本２菌株は好気的に生育し、グラム陽性、非抗酸性菌、
運動性はなく、胞子を形成しない。
運動性はなく、胞子を形成しない。
その大きさはさまざまで０５〜１ミクロン×１〜３ミク
ロンであり、その形状は桿菌状、曲状、コンマ状あるい
は分枝状であり、あるものは球状にもなる。しかしフイ
ラメント状に長く連結したものはなくいわゆる菌糸状（
Ｍｙｃｅｌｉｕｍ状）にはならない。さらに本２菌株中
の遊離脂肪酸をジヤーナル・−●オブ・ゼネラル・マイ
クロバイオロジ一９２巻１８８頁−１９９頁（１９７６
）の方法に従つて分析したところその炭素数がＣ３，を
中心としており、コリノマイコール酸に相当することが
示された。
ロンであり、その形状は桿菌状、曲状、コンマ状あるい
は分枝状であり、あるものは球状にもなる。しかしフイ
ラメント状に長く連結したものはなくいわゆる菌糸状（
Ｍｙｃｅｌｉｕｍ状）にはならない。さらに本２菌株中
の遊離脂肪酸をジヤーナル・−●オブ・ゼネラル・マイ
クロバイオロジ一９２巻１８８頁−１９９頁（１９７６
）の方法に従つて分析したところその炭素数がＣ３，を
中心としており、コリノマイコール酸に相当することが
示された。
このように生物学的・化学的性質は本２菌株がコリネバ
クテリウムに属することを明確に示している。
クテリウムに属することを明確に示している。
又ここに示した性質及び以下に示すような本菌株の特徴
はバージイズ・マニユアル・オブ・）デタミネイテイブ
・バクテリオロジ一第８版（１９７４）に記載されてい
るコリネバクテリウム属の菌の特徴とよく一致する。以
下検討した性質を記載する。
はバージイズ・マニユアル・オブ・）デタミネイテイブ
・バクテリオロジ一第８版（１９７４）に記載されてい
るコリネバクテリウム属の菌の特徴とよく一致する。以
下検討した性質を記載する。
尚コリネバクテリウム・スペーシーズＫＹ４７Ｏ４及び
ＫＹ４７Ｏ５は同様の性質を示したので、ＫＹ４７Ｏ４
の性實について記載してある。コリネバクテリウム・ス
ペーシーズＫＹ４７Ｏ４は肉汁寒天、グルコース肉汁寒
天、バレイシヨ培地によく生育する。
ＫＹ４７Ｏ５は同様の性質を示したので、ＫＹ４７Ｏ４
の性實について記載してある。コリネバクテリウム・ス
ペーシーズＫＹ４７Ｏ４は肉汁寒天、グルコース肉汁寒
天、バレイシヨ培地によく生育する。
コロニーの大きさは、いずれノ も０．５１１！〜３１
１１である。コロニーの色は、カラー・ハーモニ一●マ
ニユアル（コンテイナ一●コ―ポレーシヨン・オブ・ア
メリカ）による色表示で肉汁寒天上では３１ａ（マリゴ
ールド）、グリコース肉汁寒天及びバレイシヨ培地上で
は３ｎｃ（アッパー）である。コロニーの形はいずれの
場合も円形、コロニー表面の形状は乳頭状、コロニーの
隆起状態は半球状である。コロニーの周縁は全縁、コロ
ニーの内容は細粒状、コロニーの透明度は半透明であつ
た。コリネバクテリウム・スペーシーズＫＹ４７Ｏ４の
各種液体培地での生育状態は第５表にまとめてある。
１１である。コロニーの色は、カラー・ハーモニ一●マ
ニユアル（コンテイナ一●コ―ポレーシヨン・オブ・ア
メリカ）による色表示で肉汁寒天上では３１ａ（マリゴ
ールド）、グリコース肉汁寒天及びバレイシヨ培地上で
は３ｎｃ（アッパー）である。コロニーの形はいずれの
場合も円形、コロニー表面の形状は乳頭状、コロニーの
隆起状態は半球状である。コロニーの周縁は全縁、コロ
ニーの内容は細粒状、コロニーの透明度は半透明であつ
た。コリネバクテリウム・スペーシーズＫＹ４７Ｏ４の
各種液体培地での生育状態は第５表にまとめてある。
リトマスミルクを青変させたが凝固させ、またペプトン
化は認められなかつた。
化は認められなかつた。
ゼラチンの液化は４０日の観察でも認められなかつた。
この他の各種性質を第６表にまとめて示す。
この他の各種性質を第６表にまとめて示す。
次に本発明に使用する培地および培養条件こついて説明
する。本発明に使用する培地は炭素源、窒素源、無機物
、その他使用菌株の必要とする微量の栄養素を程よく含
有するものであれば合成培地、天然培地いずれも使用可
能である。
する。本発明に使用する培地は炭素源、窒素源、無機物
、その他使用菌株の必要とする微量の栄養素を程よく含
有するものであれば合成培地、天然培地いずれも使用可
能である。
培地の炭素源としてはブドウ糖、果糖、蔗糖、糖蜜、ソ
ルビトールなどの炭水化物：ｎ−パラフイン、ケロセン
などの炭化水素：酢酸等が用いられる。
ルビトールなどの炭水化物：ｎ−パラフイン、ケロセン
などの炭化水素：酢酸等が用いられる。
窒素源としては塩化アンモニウム、硫酸アンモニウム、
リン酸アンモニウム、尿素、グルタミン酸ナトリウム、
グリシン、アスパラギン酸ナトリウム等の無機有機窒素
化合物が使用できる。
リン酸アンモニウム、尿素、グルタミン酸ナトリウム、
グリシン、アスパラギン酸ナトリウム等の無機有機窒素
化合物が使用できる。
さらに窒素源としてはまたペプトン、肉工キズ、酵母工
キズ、コーン・スチープ・りカーなどの窒素含有天然物
も使用できる。無機物としてはリン酸一カリウム、リン
酸二カリウム、リン酸二ナトリウム、硫酸マグネシウム
、硫酸第一鉄、硫酸亜鉛、硫酸マンガン、塩化カリウム
、塩化ナトリウム、塩化第二銅等が使用できる。その他
にビオチン、ビタミンＢｌｌイノシトール等の微量栄養
素を必要に応じ使用する。本発明におけるＤＣ−５−４
生産菌の培養は通常振盪培養あるいは通気攪拌培養で行
う。
キズ、コーン・スチープ・りカーなどの窒素含有天然物
も使用できる。無機物としてはリン酸一カリウム、リン
酸二カリウム、リン酸二ナトリウム、硫酸マグネシウム
、硫酸第一鉄、硫酸亜鉛、硫酸マンガン、塩化カリウム
、塩化ナトリウム、塩化第二銅等が使用できる。その他
にビオチン、ビタミンＢｌｌイノシトール等の微量栄養
素を必要に応じ使用する。本発明におけるＤＣ−５−４
生産菌の培養は通常振盪培養あるいは通気攪拌培養で行
う。
培養温度は２０〜６０℃、特に２０〜４０℃が好適であ
る。培養経過中尿素液、アンモニア水あるいは炭酸アン
モニウム溶液等を添加しつつ培地の…を４〜１０（好ま
しくは６〜８）に調節する。
る。培養経過中尿素液、アンモニア水あるいは炭酸アン
モニウム溶液等を添加しつつ培地の…を４〜１０（好ま
しくは６〜８）に調節する。
発酵は通常１〜７日で完了するが、培養液中への蓄積量
が最高を示した時をもつて終了するのがもつとも好まし
い。
が最高を示した時をもつて終了するのがもつとも好まし
い。
培養終了液からＤＣ−５−４の単離・精製は公知の種々
の方法で行うことができる。
の方法で行うことができる。
一例を次に示す。
培養終了後、菌体を淵別した済液に活性炭を加えて、Ｄ
Ｃ−５−４を吸着させる。
Ｃ−５−４を吸着させる。
ついでＤＣ−５−４を吸着した活性炭をカラムにつめ、
塩酸または硫酸等で酸性にしたメタノールまたはエタノ
ール等で溶出する。溶出液を濃縮し、メタノールを加え
てＤＣ−５−４の酸塩（粗製物）を沈殿させる。ついで
該ＤＣ−５−４の酸塩をメタノール一水混合溶液等に溶
解し、セフアデツクスＬＨ−２０（Ｐｈａｒｍａｃｉａ
ＦｉｎｅＣｈｅｍｉｃａｌｓＩｎｃ．製造、スウエーデ
ン）等のゲル済過樹脂のカラムに通塔する。
塩酸または硫酸等で酸性にしたメタノールまたはエタノ
ール等で溶出する。溶出液を濃縮し、メタノールを加え
てＤＣ−５−４の酸塩（粗製物）を沈殿させる。ついで
該ＤＣ−５−４の酸塩をメタノール一水混合溶液等に溶
解し、セフアデツクスＬＨ−２０（Ｐｈａｒｍａｃｉａ
ＦｉｎｅＣｈｅｍｉｃａｌｓＩｎｃ．製造、スウエーデ
ン）等のゲル済過樹脂のカラムに通塔する。
ＤＣ−５−４画分を集めて濃縮し、メタノールで沈殿さ
せて精製物とする。以下実施例につき説明するが、これ
らは単なる一例示に過ギず、本願発明の範囲を何ら制限
するものではない。
せて精製物とする。以下実施例につき説明するが、これ
らは単なる一例示に過ギず、本願発明の範囲を何ら制限
するものではない。
実施例 １
種菌としてコリネバクテリウム・スペーシーズＫＹ４７
Ｏ４を用いた。
Ｏ４を用いた。
該菌を肉工キズ１９／Ｄｌｌ酵母工キズ１９／Ｄｌｌ塩
化ナトリウム０．５９／Ｄｊの組成の種培養用培地（殺
菌前ＰＨ７２）で３０℃で２４時間振盪して種培養を行
つた。得られた種培養液を３０１ジヤーフアーメンタ一
中の下記組成の本培養用培地１５１に５％（容］の割合
で移した。
化ナトリウム０．５９／Ｄｊの組成の種培養用培地（殺
菌前ＰＨ７２）で３０℃で２４時間振盪して種培養を行
つた。得られた種培養液を３０１ジヤーフアーメンタ一
中の下記組成の本培養用培地１５１に５％（容］の割合
で移した。
蔗糖７９／Ｄｌ，、硫酸アンモニウム１９／Ｄｌｌ塩化
カリウム０．８Ｌ宿１１硫酸マグネシウム０．１１／Ｄ
ｌｌリン酸二カリウム０．１９／ａ１酵母工キズ０．５
９／Ｄｌｌ硫酸第一鉄４０η／１１硫酸亜鉛３〜／１１
イノシトール４０ワ／１１ビタミンＢｌｌＯ〜／ｌ（殺
菌前ＰＨ７．２）。
カリウム０．８Ｌ宿１１硫酸マグネシウム０．１１／Ｄ
ｌｌリン酸二カリウム０．１９／ａ１酵母工キズ０．５
９／Ｄｌｌ硫酸第一鉄４０η／１１硫酸亜鉛３〜／１１
イノシトール４０ワ／１１ビタミンＢｌｌＯ〜／ｌ（殺
菌前ＰＨ７．２）。
本培養は３０℃で２５０ｒＦの攪拌と毎分１５１／ｌの
無菌空気を通気しつつ行つた。
無菌空気を通気しつつ行つた。
培地の…はアンモニア水を用いてＰＩＩ６．５〜７５に
調節した。このようにして７２時間培養した結果培養液
中にＤＣ−５−４が５η／Ｍｊの濃度で蓄積した。なお
、ＤＣ−５−４の定量は次のごとくして行つた。
調節した。このようにして７２時間培養した結果培養液
中にＤＣ−５−４が５η／Ｍｊの濃度で蓄積した。なお
、ＤＣ−５−４の定量は次のごとくして行つた。
培養液を済紙上にスポツトし展開剤（メタノール：０．
１Ｍ酢酸アンモニウム＝１：１）（容量比）で６時間展
開後ＤＣ−５−４に該当する部分を切り抜き熱水で抽出
する。通常２０〜８０μｌの培養液をスポツトし、３〜
５ｍ１の水で抽出する。これより２１１１１を試験管に
取り氷冷し、尿素で飽和したエタノールにα−ナフトー
ルを０．０２％（ｗ／ｖ）ほど入れた溶液１ＴＩＩＩと
５％（ｗ／ｖ）ＫＯＨにＢｒ，を０．２％（ｖ／ｖ）は
ど入れた溶液１ｍｊを加え攪拌し、１５分間室温に放置
後再び氷冷する。次いで５００ｎｍの吸光度を測定する
。予め標準サンプルで得た値より培養液中に存在するＤ
Ｃ−５−４の量を測定した。培養液より菌体および沈殿
物を済別した済液１３１！の…をアンモニア水を用いて
７．５に調整後、活性炭（クロマトグラフイ一用、和光
純薬製）４００９を加えて攪拌し、済液中に含まれるＤ
Ｃ−５−４を活性炭に吸着させた。
１Ｍ酢酸アンモニウム＝１：１）（容量比）で６時間展
開後ＤＣ−５−４に該当する部分を切り抜き熱水で抽出
する。通常２０〜８０μｌの培養液をスポツトし、３〜
５ｍ１の水で抽出する。これより２１１１１を試験管に
取り氷冷し、尿素で飽和したエタノールにα−ナフトー
ルを０．０２％（ｗ／ｖ）ほど入れた溶液１ＴＩＩＩと
５％（ｗ／ｖ）ＫＯＨにＢｒ，を０．２％（ｖ／ｖ）は
ど入れた溶液１ｍｊを加え攪拌し、１５分間室温に放置
後再び氷冷する。次いで５００ｎｍの吸光度を測定する
。予め標準サンプルで得た値より培養液中に存在するＤ
Ｃ−５−４の量を測定した。培養液より菌体および沈殿
物を済別した済液１３１！の…をアンモニア水を用いて
７．５に調整後、活性炭（クロマトグラフイ一用、和光
純薬製）４００９を加えて攪拌し、済液中に含まれるＤ
Ｃ−５−４を活性炭に吸着させた。
該活性炭をカラムにつめ蒸留水でよく洗浄後、０．５Ｎ
塩酸酸性メタノールで溶出し、溶出液・を減圧下に濃縮
した。
塩酸酸性メタノールで溶出し、溶出液・を減圧下に濃縮
した。
濃縮液にメタノールを加えＤＣ−５−４の塩酸塩を沈殿
させ、済取することにより粗製品（了イオマイシンＢを
含む）１５０ｇを得ることができた。粗製品をメタノー
ル一水混合液（容量比１：１）に溶解し、同混合液で膨
潤させたセフアデツクスＬＨ−２０２１のカラムに通塔
する。溶出も上記混合液で行う。マイオマイシンＢがま
ず溶出され、次いで完全にマイオマイシンＢと分離され
てＤＣ−５−４が溶出される。ＤＣ−５−４の画分を集
めて濃縮し、凍結乾燥して３０９の精製品（ＤＣ−５−
４塩酸塩）を得た。この精製品の理化学的性質は先に明
記した通りである。実施例 ２ 種菌としてコリネバクテリウム・スペーシーズＫＹ４７
Ｏ５を用い、本培養培地の蔗糖にかえてブドウ糖を用い
、本培養を６０時間行う以外は実施例１と同様にして種
培養および本培養を行つた。
させ、済取することにより粗製品（了イオマイシンＢを
含む）１５０ｇを得ることができた。粗製品をメタノー
ル一水混合液（容量比１：１）に溶解し、同混合液で膨
潤させたセフアデツクスＬＨ−２０２１のカラムに通塔
する。溶出も上記混合液で行う。マイオマイシンＢがま
ず溶出され、次いで完全にマイオマイシンＢと分離され
てＤＣ−５−４が溶出される。ＤＣ−５−４の画分を集
めて濃縮し、凍結乾燥して３０９の精製品（ＤＣ−５−
４塩酸塩）を得た。この精製品の理化学的性質は先に明
記した通りである。実施例 ２ 種菌としてコリネバクテリウム・スペーシーズＫＹ４７
Ｏ５を用い、本培養培地の蔗糖にかえてブドウ糖を用い
、本培養を６０時間行う以外は実施例１と同様にして種
培養および本培養を行つた。
培養終了後培養液中にＤＣ−５−４が２．５〜／ｍｌの
濃度で蓄積した。培養終了液から実施例１と同様の方法
で単離することにより、ＤＣ−５−４の塩酸塩２０ｆ！
を得た。
濃度で蓄積した。培養終了液から実施例１と同様の方法
で単離することにより、ＤＣ−５−４の塩酸塩２０ｆ！
を得た。
実施例 ３
種菌としてコリネバクテリウム・スペーシーズＫＹ４７
Ｏ４を用いた。
Ｏ４を用いた。
該菌を肉工キズ１９／Ｄｊｌペプトン１ｇ／Ｄｌｌ塩化
ナトリウム０．５ｆ！／Ｄｊおよびソルビトール２９／
ｄｌの組成を有する種培養用培地（殺菌前ＰＨ７２）で
３０℃で２４時間振盪して種培養を行つた。得られた種
培養液を３０１１ジヤーフアーメンタ一中の下記組成の
本培養用培地１５１に５％（容量）の割合で移した。
ナトリウム０．５ｆ！／Ｄｊおよびソルビトール２９／
ｄｌの組成を有する種培養用培地（殺菌前ＰＨ７２）で
３０℃で２４時間振盪して種培養を行つた。得られた種
培養液を３０１１ジヤーフアーメンタ一中の下記組成の
本培養用培地１５１に５％（容量）の割合で移した。
ＫＨ，ＰＯ４Ｏ．２９／Ｄｊ，Ｎａ２ＨＰＯ４Ｏ．２９
／Ｄｌ，Ｋ２ＳＯ，Ｏ．ｌ９／Ｄｌ，（ＮＨ４）２Ｓ０
４０．５９／Ｄｌ，Ｍ９ＳＯ４・７Ｈ２００．１９／Ｄ
ｌ，ＭｎＳＯ４・４Ｈ２００．００２９／ｄ′，ＦｅＳ
Ｏ４・７Ｈ，００．０２９／Ｄ４ＺｎＳＯ４・７Ｈ，０
０．００１９／Ｄｊ，Ｃｕｃｌ，・４ル００．０００３
９／Ｄｌｌ酵母工キズ０．２９／Ｄｌｌビオチン１００
μ９／１ｓｎ−パラフイン（炭素数１２〜１６）１゛Ｏ
％（容量）（殺菌前ＰＨ７．２）。
／Ｄｌ，Ｋ２ＳＯ，Ｏ．ｌ９／Ｄｌ，（ＮＨ４）２Ｓ０
４０．５９／Ｄｌ，Ｍ９ＳＯ４・７Ｈ２００．１９／Ｄ
ｌ，ＭｎＳＯ４・４Ｈ２００．００２９／ｄ′，ＦｅＳ
Ｏ４・７Ｈ，００．０２９／Ｄ４ＺｎＳＯ４・７Ｈ，０
０．００１９／Ｄｊ，Ｃｕｃｌ，・４ル００．０００３
９／Ｄｌｌ酵母工キズ０．２９／Ｄｌｌビオチン１００
μ９／１ｓｎ−パラフイン（炭素数１２〜１６）１゛Ｏ
％（容量）（殺菌前ＰＨ７．２）。
培養は３０℃で４００ｒ．ｐ．ｍ．の攪拌と毎分１１１
／ｌの無菌空気を通気しつつ行つた。培地の…はアンモ
ニア水を用いてＰＨ６．５〜７，５に調節した。このよ
うにして７２時間培養した結果培養液中ＫＤＣ−５−４
が３．５Ｔｆ９／ｍｌの濃度で蓄積した。
／ｌの無菌空気を通気しつつ行つた。培地の…はアンモ
ニア水を用いてＰＨ６．５〜７，５に調節した。このよ
うにして７２時間培養した結果培養液中ＫＤＣ−５−４
が３．５Ｔｆ９／ｍｌの濃度で蓄積した。
第１図は本発明により得られたＤＣ−５−４塩酸塩の赤
外吸収スペクトルを表わす。
外吸収スペクトルを表わす。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ （１）式 ▲数式、化学式、表等があります▼ で表わされる新規抗生物質ＤＣ−５−４。 （２）コリネバクテリウム属に属し、かつ式▲数式、化
学式、表等があります▼で表わされる新規抗生物質ＤＣ
−５−４を生産する能力を有する微生物を栄養培地に培
養して、ＤＣ−５−４を培養液中に蓄積せしめ、該培養
液よりＤＣ−５−４を採取することを特徴とする発酵法
によるＤＣ−５−４の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2278978A JPS5937960B2 (ja) | 1978-03-02 | 1978-03-02 | 新規抗生物質ｄｃ−５−４およびその製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2278978A JPS5937960B2 (ja) | 1978-03-02 | 1978-03-02 | 新規抗生物質ｄｃ−５−４およびその製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS54117094A JPS54117094A (en) | 1979-09-11 |
| JPS5937960B2 true JPS5937960B2 (ja) | 1984-09-12 |
Family
ID=12092438
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2278978A Expired JPS5937960B2 (ja) | 1978-03-02 | 1978-03-02 | 新規抗生物質ｄｃ−５−４およびその製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5937960B2 (ja) |
-
1978
- 1978-03-02 JP JP2278978A patent/JPS5937960B2/ja not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS54117094A (en) | 1979-09-11 |
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