JPS5946254A - 弗化環式ヘキサペプチドソマトスタチン類似物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 発明の背景 ソマトスタチンは環式のトデカペブチトを結合するテト
ラデ力ペプチトで次の構造をもち、成長ホルモンの分泌
を阻止し、インシュリン１ 、ノ１１！　ａ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ　−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−
Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ１２３４５６
７８９１０ Ｈ グルカコンの放出（ｒｅｌｅａｓｅ　）　　をｌｉｄ　
＋Ｊ二し、胃分泌液を減少さぜる性質をもっている。ソ
マトスタチン自身は短期間持続の作用をもつ、そのわけ
は特に、生体内に存在するアミノペプチターセ及びカル
ホキシペブチクーセによって不活性化されるからである
。この短期間作用の問題は、低電解ｌ牛をもつソマトス
タチン誘導体を作ることによって先進技術では部分的に
解決されている。これシこよ−って皮Ｆ　？ｇ＋−射に
際して緩１ψな１ヂＣ離を得ている。しかしながら一度
ＷＪ　ｉＱ’ｌされると、これら誘導体はアミノペプチ
ダーセやカルホキシペブチターセによる不活性化に対し
てンマ、トスクチン自身より安定でない１、 発明の要約 本発明は弗化環式へキサペプチドを記載しており、この
ものはソマトスタチンの誘導体で、なかんずく、アミノ
配板の７個が第２アミノ酸によって置換されておシ、エ
キソサイクリック・アミノ酸の二個が除去されリジン側
鎖はｒ位かその他の位置でモノ弗化されている。残って
いるアミノ酸の置換と反応が更にｉ己１１戊されている
。環式のへキサペプチドはクルカコン、成長ホルモン及
びインシュリンの分圧をｌＵ１市し、胃酸分ｙ、＊の放
出（ｒｅ　１ｅａｓｅ　）を：　ｔｉｌｌ市する３、躬
゛定的にはこれら化合物は両分／！ビ、液の水準に影響
なく、或ｄ、胃分泌液、インシュリン及びクルカコンの
水１９４に影響なく優先的に成長ホルモンの放出をｌ５
１１市し或はこれら化合物は胃酸分ｇ、８！ｉ、の放出
を１１１１市するかも知れない１．それ故に、この化合
物力１はソマトスタチンよりも一層追択的生理学的活１
１ユをもつ。この化合物の環式へキサペプチド構造は、
また、ソマトスタチンよりも艮い活１牛持続性をもつ。

このために、本発明の環式へキサペプチドは、！ｔ４　
ｆｓｌｓ又は手足の肥大症、糖尿病、糖尿病性網ｊ挨症
、消化性潰瘍の処理にＭ用である。この環式へキサペプ
チドソマトスタチンｉａ’ｊ似物を記すことが本発明の
目的である。

更に本発明の別の目的は、かかる弗化環式へキサペプチ
ドの調製のだめの方法をｋすことである。史に本発明の
１−１的は、かがる化合物力′１を、頭部又は手足の肥
大症、糖尿病性網膜症及び消化性ｒｉ１瘍の処理に曲用
することを記すことである。史にそのほかの１−、目的
は次の明細−１（１−を読むことＫ　、ｔつて明らかに
なるだろう。

発明の記述 本発明の化合物類ＶＪ次の構造式で最もよく衣わされる
。

及び ここにＹｌとＹ２　　が同じでないことを条件として、
Ｙｌ及びＹ２は水素か弗素である。Ｘは（（ｊ１２）　
　（ｍば０，１或は２）又は硫黄である。

Ｒ１及びＲ２は独立に低級アルキル、ヘンシル、置換ヘ
ンシルで、その置換基は低級アルキル、ハロゲン、ヒド
ロオキシ、アミン、ニトロ又は低級アルコキシの１つ又
は２つであり；及び５員又は６員のへテロ壌式環で置換
された低級アルキルである。

Ｒ３は３−インドリルメチル又は置換３−インドリルメ
チルで、この置換基は低級アルキル、低級アルコキシ又
はハロケンである。

Ｒ４は低級アルキル、ヒドロオキシ低級アルキル、ヘン
シル、カルホオギシル低級アルキル、アミン１氏級アル
キル又は置換ヘンシルで、この置換基は低級アルキル、
低級アルコキシ、ヒドロキシ、ハロケン、アミノ又はニ
トロである。

Ｒ５ｔま水素、１ｊ（級アルキル、ヘンシル又は１ｄ挨
ヘンシルで、この置換基は低級アルキル、低級アルコキ
シ、ヒドロキシ、ハロケン、アミノ又はニトロである。

［１氏級アルキル−１という袷は本発明に用いられてい
る時は重鎖か又は分枝鎖のいずれかのアルキル基で１〜
５個の炭素原子をもつものを表わす意である。かかるア
ルキル基の例はメチル、エチル、プロピル、インプロピ
ル、ブチル、第２−ブチル、ペンチル及び同様なもので
ある。

「低級アルコキシ」という語は、１〜５個の炭素原子の
直鎖が又は分枝鎖のいずれかのアルコキシ基を含む意で
ある。このようなアルコキシ基の例は、メトキシ、エト
キシ、プロポオキシ、インプロポオキシ、メトキシ、第
４フト・キシ、ペントオキシ及び同様なものである。

１−ハロケン−１又は「ハロ」の胎は弗素、ＪＩｔ４素
、臭素及び沃素を含む意である。「５員又ｔ」６員へテ
ロ」ｓＪ式項」の語は、酸素、窒素及び１１ＩＩｄ黄か
ら選ｉ（Ｊ′、れた１つ又は２つのへテロ原子をともな
う５員及び６員のへテロ環式のものを會む石：である。

ががるヘテＯ壌式の典型的なものはイミダゾール、フラ
ン、チアゾール、ビランール、ピリジン及び同様なもの
である。

本発明の比合物頻て於ては、いくつかの不斉中心が存在
し、かがる化合物では光学的異性体の存在に導くだろう
。本発明に於ては、一式へキサペプチドを作っているい
ろいろのアミノ酸の不斉中心の各々に文・」シて、それ
らに含まれるジアステレオマー（ｄｉａｓＬｅｒｏｍｅ
ｒ　）と同時にＤ及びＬ構造の両省が考えられる。

Ｒ１＆ひＲ２がヘンシルであり、Ｒ３がインドリルメチ
ルであり、ＹｌとＹ２が水素であり、Ｉ尤、がＩ−ヒド
ロオキシエチルである時ｔよ、ソマトスタチン（円１ｅ
−’ｌ’ｒｐ−Ｌｙｓ　−Ｔｈｒ　−Ｐｈｅ　−）　　
の７．８，９．１０及び１１のアミノ酸が代表さＩｔＸ
　捷だ第２アミノ酸で、Ｒ５がメチルであるときけＮメ
チルアラニンで表わされ、Ｘがメチレンであるときはプ
ロリンで表わされる第２アミノ酸がソマトスタチンアミ
ノ酸の残Ｌ１１３ノＩ（の（＞’ｔ−，ｉ首をしめるこ
とはそれに熟練した人によって察知されるだろう。

置換基の」−述定義を用いて、ソマトスタチンの欠配環
式へキザペブチトガ１似物が形成される。

」＼発明の環式へキサペプチドの好適な具体例は、Ｙ、
及びＹ２　が１−述の定義であり、Ｒ。

及びＩ尤２　は上記の如く定義され、Ｒ３は３−インド
リルメチルか、置換インドリルメチルであり、置換ノ、
！；けメトキシ又はフルオロであり’、＝　Ｉ’？、＋
　　ｋｉメチル、エチル、ヒドロキシメチル、又Ｑ−」
：ヒドロキシメチルであり、Ｒ６はメチル又１１７ｊ水
索である前記構造式で示される。

史に好適な共作１夕１］は、Ｙがメチレンであり、ｙ、
　＋　”２　＋　Ｒ１及びＲ，は上記定義の如くであり
、Ｉ（３は３−インドリルメチルであり、Ｒ１はヒドロ
オキシエチルであり、Ｒ５はメチルであるときに実現さ
れる。好適なＲ１及びＲ２基は低級アルキル、ヘンシル
又は置換ヘンシルであり、その置換基は低級アルキル、
ハロケン、ヒドロオキシ、アミノ、ニトロ又ハアルコキ
シである。

これら好適な化合物には次のものが含−まれるニ ジクロ−（Ｎ　−Ｍｅ　−／ｌどａ　−Ｔｈｒ−Ｄ−Ｔ
ｒｐ−γ−Ｆ−Ｌｙｓ及びδ−Ｆ−Ｌｙｓ　−Ｔｈｒ　
−Ｐｈｅ　） シクロ−（Ｎ　−１ＶＩｅ−Ａｌａ−Ｐｈｅ　−Ｄ　−
Ｔｒｐ　−γＦ−Ｌｙｓ及びδ−Ｆ−Ｌｙｓ　−’ｌ”
ｈｒ　−ＰｌＩＯ） シクロ−（Ｎ−Ｍｅ−Ａｌａ−Ｐｂｅ−Ｌ−Ｔｒｐ　−
７’　−Ｆ　−−Ｌｙ　ｓ及びδ−Ｆ　−Ｌｙｓ−Ｔｈ
ｒ　−Ｐｈｅ　）シクロ−（Ｎ−Ｍｅ−，４Ｊａ−Ｐｈ
ｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−γ−Ｆ　−Ｌｙｓ及びδ−Ｆ−Ｌｙｓ
−Ｔｈｒ−Ｐ−α−Ｐｌ＋ｅ　） シフｏ　−（Ｎ−Ｍｅ−ｉｌｅａ−Ｐｈｅ−１）−５−
Ｆ　−Ｔｒｐ−ｒ　−Ｆ−Ｌｙｓ−及びδ−Ｆ−Ｌｙｓ
−Ｔｈｒ　”　Ｐｈｅ　） シクロ−（Ｎ−Ｍｅ−ＡＩ！ａ−Ｐｈｅ　−Ｉ、５−　
Ｆ　−Ｔｒｐ　−ｒ−Ｆ−Ｌｙｓ−及びδ−Ｐ　　Ｉ、
ｙ　ｓ−Ｔｈｒ　−Ｐｈｃ　） シクロ−（Ｎ　−Ｍｅ−Ｉｌｇａ　−Ｐｈｅ　−Ｄ　−
Ｔｒｐ　−ｒ　−Ｆ−−Ｌｙｓ及びδ−Ｆ−Ｌｙｓ　−
５ｅｒ−Ｐｈｅ　）シクロ−（Ｎ−Ｍｅ　−Ｉｌｇａ−
Ｔｒｐ−Ｄ−Ｔｒｐ−ｒ−Ｆ−Ｌｙｓ及びδ−Ｆ　−Ｌ
ｙｓ　−Ｖａｌ　−Ｐｈｅ　）シクロ−（Ｓｅｔ　−Ｐ
ｈｅ−１）　−Ｔｒｐ−γ−Ｆ−Ｌｙｓ及びδ−Ｆ　−
Ｌｙｓ　−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ　）シクロ−（Ｎ−Ｍｅ　−
Ａｌａ−Ｐｂｅ−Ｄ−Ｔｒｐ　−γ−Ｆ−（、ｙｓ及び
δ−Ｆ　−Ｌｙｓ　−Ｖａｔ−Ｐｈｅ　）シクロ−（Ｐ
ｒｏ　−Ｔｈｒ　−Ｄ　−Ｔｒｐ−γ−Ｆ　−Ｌｙｓ及
びδ−Ｆ　　Ｌｙｓ　　Ｔｈｒ−Ｐｈｅ　）シクロ−（
Ｐｒｏ−Ｐｈｅ　−Ｄ　　Ｔｒｐ　　Ｔ　　Ｆ　−Ｌｙ
ｓ及Ｏ・δ−Ｆ　−Ｌｙｓ　−Ｔｈｒ　−Ｐｈｅ　）シ
クロ−（Ｐｒｏ−Ｐｈｅ　−Ｌ　−Ｔｒｐ−γ−Ｆ　　
Ｌｙ　ｓ及Ｏ・δ−Ｆ　−Ｌｙｓ　−Ｔｈｒ　−Ｐｈｅ
　）シクロ−（Ｐｒｏ　−Ｐｈｅ　−１）　−Ｔｒｐ　
−ｒ−Ｆ　−Ｌｙｓ及びδ−Ｆ−Ｌｙｓ　−Ｔｈｒ　　
ｐ　−ＣＩ−Ｐｂｅ　）シクロ−（Ｐｒｏ　−Ｐｈｅ　
　Ｄ　−５−Ｆ　−Ｔｒｐ−γ−Ｆ　−Ｌｙｓ及びδ−
Ｆ　−Ｌｙｓ　−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ）シクロ−（Ｐｒｏ−
Ｐｈｅ　−Ｌ　−５−Ｆ　−Ｔｒｐ−γ−１ｉ’−Ｌｙ
ｓ及びδ−Ｆ　−Ｌｙｓ　　Ｔｈｒ−Ｐｂｅ　）シクロ
−（Ｐｒｏ　−Ｐｈｅ　−Ｄ−Ｔｒｐ−γ−Ｆ−Ｌｙｓ
及びδ−Ｆ　−Ｌｙｓ−８ｅｒ　−Ｐｈｅ　）本発明に
於てアミノ酸、あるイ１１１の好適な保護基、反応剤及
び溶剤に対して用いられている省略記号の意味は表−■
に示す。

表　−■ Ｌｙｓ　　　　　Ｌ−リジン Ｐｈｅ　　　　　Ｌ−フェニルアラニンＴｒｐＬ−トリ
プトファン Ｄ−ＴｒｐＤ−トリプトファン Ｔｈｒ　　　　　　Ｌ−スレオニン Ａｈａ　　　　　　７−−アミノヘプタン酸Ｔ　ｙ　ｒ
　　　　　　Ｌ−チロシン ＶａＬＬ−バリン Ａｂｕ　　　　　　Ｔ、−α−アミノ酪酸Ｓｅｒ　　　
　　Ｌ−セリン Ａｓｎ　　　　　■、−アスパラキン Ｐｒｏ　　　　　　Ｔ７−プロリン Ａ　ｓ　ｕ　　　　　　Ｉ）又はＬ−アミノスへリン酸
Ｃｙｓ、　　　　　Ｌ−システィン ＴＮＯＣイソニコチニルオキシ力ルホニルＢＯＣｔ−フ
チルオキシ力ルホニル ＯＭｅ　　　　　メチルエステル ＢＵ　　　　　　ｔ−メチル ＣＢＺ　　　　ヘンシルオキシ力ルホニルＢＺｔ　　　
　ヘンシル ２−（−’１−ＣＢＺ　　　２−クロロヘンシルオキシ
力ルホニルＡｃｍ　　　　　アセトアミドメチル Ｍｅ　　　　　　メチル ＦＭＯＣα−フルオレニルメチルオキシカルホ二Ｊし ＯＮＰ　　　　　　ｐ−−ニトロフェニルエステルｌｌ
５Ｅ　　　　　　Ｎ−ヒトロオキシサクシニミトエステ
ル １１ＢＴ　　　　　１−ヒトロオギシヘンゾトリアンー
ル１）ＣＣＩ　　　　　シシクロヘキシル力ルポシイミ
ト略号　　　　反応剤 ＴＦＡ　　　　　　トリフルオロ酢酸 ＴＥＡ　　　　　　トリエチルアミン Ｉ）ＩＰＥＡ　　　　ジイソプロピルエチルアミンＥＰ
ＡＷ　　　　酢酸エチル−ピリジン−酢酸−水ＢＡＷ　
　　　　フタノール−酢酸−水０県　　　　クロロホル
ム−メタノール−水ＤＭＦ　　　　　ジメチルホルムア
ミドＴＩ（Ｆ　　　　　テトラヒドロフランＣＭＡ　　
　　　クロロホルム−メタノール−酢酸本発明の他の局
面は本発明の弗化環式へキサペプチドを作るのに用いら
れる弗化リシン出発１勿′ｔ′！である１゜ 竹にγ−弗化化合物は新規である。加うるに、ｒ−フル
オロ−リシンのα及びεを保護した誘導体は同様に新規
である。例えばＣＢＺ。

２−　Ｃ１−ＣＢＺ　、　　ＢＯＣ、ｌＮ０Ｃ又はＦＭ
ＯＣ基で保護した化合物である。

ｒ−フルオロリシンは、フルオロテヒトロオキシ化によ
るか又は光学的弗化のいずれかの方法によってリジンを
弗素化して作られる。

フルオロテヒトロオキシ化反応に於ては、出発Ｍ　本１
は弗化されるべき位ｔＫ？にヒドロオキシ基をもたねば
ならない。リジンの場合には力ルホオキシｔ：Ｊ′ラク
トン化を防ぐために保護されねばならない。］（ｏｌｌ
ｏｎｉｔｓｅｈ　ｅｔ　ａｌ、、　Ｊ、　Ｏｒｇ。

Ｃｈｅ＋ｎ、、　　４４．７７１　（１９７９）　　の
−・般法に従ってγ−フルオロ化合物を作るには弗化水
素と四弗化イ流黄が、保護したｒ−ヒドロオキシリシン
と共ＶＣ用いしれる。

γ−フルオロリシンはトリフルオロメチルハイポフルオ
ライドと共に弗化水素中で光学的弗素化によって又作ら
れる。この方法は、捷だ、普通ばδ−フルオロ化合物も
作る。こノ′シら化合物の混合物は本発明化合物を作る
ために用いた出発材料の両者を生ずる。それらは少なく
とも一例で行った如くに本発明の環式へキサペプチドの
形成に先☆二ち分離される１゜γ−及びδ−フルオロリ
シン化合物の混合物は、フルオロフシ１式へキサペプチ
ドの対応する？Ｊ＋合物を作るのに用いられる。この２
つのフルオロ異性体１１ついで分離される。−・般的な
光学的弗化方法はＫｏｌｌｏｎｉｔｓｃｈ　ｅｔ　ａｌ
、、　Ｊ、　Ａｒｎ。

Ｃｈｅｍ、　Ｓｏｃ、、　９２．７４９４　　（１９７
０）　　の報文に記載されている。

本発明に従って、新規弗化環式へギサペプチトソマトス
タチンカ′１似物は対応する直鎖ペプチドを環式化する
ことによって作られる。

直鎖ペプチドは同相逐次合成法を用いることによって作
られる。従って、本発明の弗化環式へキサペプチドソマ
トスタチン類似物を作る方法ｋＪ：　　ａ）　　固相樹
脂に伺ｊ／’ｔ　した対応するフロック直鎖ペプチドを
作り、ｂ）Ｎ一端末アミン基を選択的に脱ブロックし、
Ｃ）この樹脂から直鎖ペプチドを除去し、ｄ）直鎖ペプ
チドを環式化剤と処理してアミド結合の形成により環式
へキサペプチドを（！Ｌ　　ｅ）　　側鎖フロラキンク
基をすべて除去することがら成る。。

直鎖ペプチドが樹脂上に形成されるときは、もし直鎖ペ
プチド中のアミノ酸の順序が希望のソマトスフチン類似
物のそれに対応する場合のみには、どのアミノ酸がＣ−
ψ１＾１末位にあるようにポげれるかは一股にｄ：臨界
的ではない。一度び直鎖ペプチドが環化されたならば、
も幻バ・どのアミノ酸が直鎖ペプチドのｃ；、ｊｊ、Ｈ
末にあるかを決定することはできない。

一般に、鎖ができはじめる第１のアミノ酸の選択は臨界
的ではない。しが（−１直鎖ペプチドが環化されるから
、一つのスタートアミノ酸が他より好ましいかも知れな
いという他の因子が存在することができる。例えば、Ｄ
ＴｒｐはＢＯＣ／＋ｕが除去される時形成されるＥ−７
チルカルホニウムイオンと反応しうる。

それ故、直鎖ペプチドのＮ　１ｇ末位にＤ　−Ｔｒｐを
置くという反応順序の選択はＤ　−Ｔｒｐを最后に加え
ることになるだろう。従ってｔ−ブチル力ルホニウムイ
オンＶＣ最も少なくさらすことになるだろう。例えは、
ペプチド中（ｔ（二つのインドールａ有部が存在する場
合なとにｔま、この型の選択は、必ずしもつねに”Ｔ　
ｉ７Ｂではないかも知−ｈない。かがる反応鋭敏性はペ
プチド反応順序をプランするときに考えらＩｒねばなら
４：い３゜ 固相法ｒ（よる重鎖ペプチドの合成し１クロロメチル化
１針脂（（利して段階的り法で行われる。

この位↑脂Ｑすスチレンと１〜２％のシヒニルヘンセン
との共重合によって作られた合成樹脂の微ポ用ヒース（
２０〜７０ミクロン直径）より成る。樹脂中のヘンセン
リンク。すクロロメチルメチルエーテルと塩化第２錫と
のフリーデルクラ−フッ反応でクロルメチル化さ７１．
る。

このフリーデルクラーフッノズ応σ、樹１１ｔｒの１ｇ
当り０．５ミリモル〜５ミリモルのＪｗ素を官有する丑
で続けられる。

直鎖ペプチドのｃ端末アミノ酸であるように選ばれたア
ミノ酸は、アミノ保護誘導体にかえられる。選はれノこ
Ｃ一端末アミノ酸のカルホキシル基は不溶性のポリマー
樹脂サポートに共イ１結合的に結合される。例えばクロ
ロメチル１行Ｊ淀ポリスチレン・シヒニルヘンセン樹脂
中にイｒ在する樹脂結合した塩化ヘンシルのカルホキシ
ルエステルの如くである。アミノ保護基が除去された後
は、つついてつきのアミノ酸のアミノ１呆ｎφ誘？Ｍ体
がカップリング削１タリえはシシクロヘキシル力ルホシ
イミトと共に加えられる。アミノ酸反応剤はカルホキシ
ル活性化アミノ酸例えはＯＮＰエステル、アミノ酸アシ
ッド及びその他同様なものの形で用いられる。保護基を
除き、その後のアミノ酸の添加は希望の直鎖ペプチドが
形成される１で行われる。

保護基の選択は、一部は特別なカップリンク条件によっ
てきめられ、一部その反応に含まれるアミノ酸とペプチ
ド成分によってきめられる。

普通Ｖこ用いられるアミノ保護基はその方法でよく知ら
れるものを介む。例えばウレタン保穫基にはヘンシルオ
キシカルホニル（カルホヘンスオキシ）、ｐ−メトキシ
カルホヘンスオキシ、ｐ−ニトロ力ルホヘンスオキシ、
Ｌ−プチルオキシ力ルホニル、その他同１ｉＱなもので
ある１）アミノｖｌｔ２のカルホキシルψ；ｉ、ｌ、で
反ＬＥ、をうけつつあるアミノ酸のα−アミノ基をイ呆
護するためＫも一プチルオキシカルホニル（ＢＯＣ）を
利用することが好−ましい。ＢＯＣ保護基は、カップリ
ング反応をうけ、その陵の段階に先ｈン、ち、比較的に
渦第１１な酸の作用Ｖ（より容易に除かれる。（即ち、
トリフルオロ酢酸、又は酢ｒ唆エチル中の」１、）化水
素）Ｔ’ｈｒ及び３ｅｒのＯＨ基に１ヘンシル基によっ
て保護され、Ｉ’ｉｙ８のεアミノ基はｌＮ０Ｃ基、２
−クロロヘンシルオキシ力ルホニル（２−ｃｅ、　−Ｃ
ＢＺ　）　　基又はヘンシルオキシカルホニル（ＣＢＺ
　）　　基によって１呆護されイ［Ｉる。Ｌｙｓの場合
にばεアミノ基を２−　（’ｌ　−ＣＢＺ又はＣＢＺ’
！ｌｉ：によって保護することがよい。それは、これら
の基は直鎖ペプチドがムＪ化された後で、ＩＩ　Ｆ　ト
処理することによってＢ　Ｚ　ｌ　基と共に同時に除去
されるからである。ｌＮ０Ｃ基はＨＦによって除去され
ず、Ｚｎとのも一度の処理を安する４、いずれの基も、
ＢＯＣ保バφ基を除去する／ζめｅ（用いたＴＦＡによ
ってｄ−影響されない。

直鎖ペプチ］・が環化された後ｉｄ：　２−　（’ｅ　
−ＣＢＺ。

ＣＢＺ及びＢＺＩ　　の如き保獲基ばＩＩ　Ｆとの処理
によって除去される。

直鎖ペプチドが固相樹脂１−ｖ′Ｃ形成された後Ｉｆ１
、その技術でよく知られている多くの方法で樹脂から除
去される。例えばペプチドＱすヒドラジンと共に樹脂か
ら裂開される。かくして直接にペブチトヒトラシツトを
形成する。

こｆ’Ｌはその後アシッドを経て身１化され希望の」シ
を式ペプチドとなる。ヒドラジットは、その場で亜硝１
ツを供給する試薬との反応によって対応するアジドにか
えられる。この目的のために適当な試薬は低級アルキル
亜硝酸塩（例えば、ｔ−ブチル亜硝酸、イソアミル１ｔ
ｌｊ　（ｉ）！ｉ酸）或ｄ、アルカリ金１．［１ｌｌｊ
蛸ｒ”ｖ＋ｇ、’＋　（Ｉシ］１えは叱（消Ｃ唆ナトリ
ウム、曲、（消１朦カリ）でｊλ１Ｙ酸、リン酸の如き
強酸のイＹ在下でのものが沈棟れる。この反応は水及び
／或は非水電媒（ＩｙｌＪえばジメチルホルムアミ［・
、テトラヒドロフラン、ンオキザン、クロロホルム、メ
チレンクロライドすとの存在−１骨Ｃ約−４０Ｃ〜−１
２０℃の間の温度で行わｔする３、別法として、ペプチ
ドは、メタノールの如き低級アルコールと、例えばトリ
メチルアミンの如き有機塩基の存在トーに処理すること
によって（☆ｌ脂から除去される。このようにして重鎖
ペプチドの差」）心する低級、アルコールエステルを生
成する。かくして（！）　’ｌ　Ｉｔだエステル附１、
そのヒドラジドにかえらＩ）７、これは環化さ；ｔｌ、
アシドを経て＠望の」哀式ペプチドになる。本発明に於
て（酊脂からペプチドを裂開するのに好適な方法に、ヒ
ドラジンの１吏用である。

蚕考として表−１ｌｉｉ、本発明の望Ｊしい環式ペプチ
ド製造のための一つの好適な総合的操作１、固相樹脂上
の直鎖ペプチドの段階的合成を含むことを示す。更に明
４１１．１にはを、１１・“４製する方法に於て、Ｎ−
フロラクト・アミノ［ｌ１１２フエニルアラニンのカル
ホキシルψｊｆｌｉは、樹脂結合したヘンシルクロライ
ドのカルホキシル酸エステルとして不溶性のポリマー樹
脂支持体に共イｆ結合的に結ばれている。ｐｈｅのアミ
ノ基はＢＯＣ基によって保護される。円〕ｅの同着が樹
脂−にで完成さ几て後、保穫基ＢＯＣばＣ１ｆ２（’ｌ
！２中（７）　ＴＦＡ　　との処Ｊｇｊｌｉによで）で
除去される。その結果生ずるアミノ酸は、縮合剤として
Ｉ）ＣＣＩを用いるか或はＯＮｐの如き活性エステルを
用いてＢＯＣ−アミノ酸の形で＋１着される。希望の直
鎖ペプチドが調製された後はＮ一端アミン基が選択的に
脱フロックされペプチドはヒドラジンと処理することに
よって樹脂から除去される。かくして得られた直鎖ペプ
チトヒトラシットは次の ＢＺ１ １）−Ｔｒｐ−γ／δ　Ｆ　−Ｌｙｓ　−Ｔｈｒ　−Ｐ
ｈｅ　−Ｐｒｏ−Ｐｂｅ　−ＮＨＮＩ１２ｐｓ アミノ酸順列をもち、脱フロックさｔ’ｌ　Ｐｃ　Ｎ　
−☆ｊ１（１未アミツノ、（を・もっており、こ７１、
は敵性１）１１の中で１Ｉｒｒ−硝酸イソアミルで処理
（されで対応するアジドを形成する。アジド溶液は溶剤
で協″釈され、有機塩基で中和される。重鎖ペプチドは
環化されて次のものを形成する。

ＢＺ１ シクロ−（１’）−Ｔｒ　ｐ　−’／６−Ｉｉ’−Ｌｙ
ｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ　−Ｐｒ　ｏ　−Ｐｈｅ　）ＣＩ’
３Ｚ ノ哀化の間、１）１１が横骨され、＋ｉ機塩基の添加ｅ
こよって中性に維持される。４１磯浴剤中のｐｌ＋は溶
液の微鼠を用いて狭域範囲１）１１紙をつけて測定され
る。

直鎖ペプチドが環化されて後、保獲基ＣＢＺ及びＢＺＩ
はアニソールの存在下にＨＦで処」呈することにより除
去される。イ）Ｉられる徂環式ペブチ］・−クロマトク
ラフ的に、好−ましくけカラムクロマトクラフィでシリ
カケルにより、１１″Ｊ製さ；／−１，る。脱７１′３
浴剤は−・般に、−有機溶媒かその（昆合Ｉ勿で助層ク
ロマトクラフィーを月」いて材イ１の微］１七を分４４
１して選ばれる。

衣−１１ 本発明の１５２式へキサペプチドの２つの調製のだめの
反応式ｆｄ次の反応シリースで大要を示す。次の化合物 はｒ−Ｆ及びδ−Ｆ−リジン出発出発材温合物を用いて
作られた。１１？ｉ々の環式へキサペプチド１：反応順
列の終りに分離された。しかしながら１固々のｒ−Ｆ−
リンン及びδ−Ｆ−リシン出光伺４′・１げ回じ結果で
欧州され（！Ｉｆｃ。

ＢＯＣ−Ｐｈｅ−０−ＣＩ２φ樹脂 ＢＯＣ−Ｄ−Ｔｒｐ　（ｅ　−ＣＩＩＺ）　ｒ／、３−
Ｆ−Ｌｙｓ　−（ＯＢＺ　ｌ　）　Ｔｈ　ｒ　−Ｐｈｅ
　−Ｄ−Ｔｒｐ−（ε−ＣＢＺ）γ／ｂ−Ｆ−Ｌｙｓ　
−（ＯＢＺ　ｌ　）Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ　−１）−
Ｔｒｐ−（ε−ＣＢＺ）γ／、１−Ｆ−Ｌｙｓ（ＯＢＺ
Ｉ）Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ　−ひシクロ−（１）−Ｔ
ｒｐ−δ−Ｆ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｐｒ。

−因１ｅ　　） 次の１／１１　＆：Ｉ：本発明不発行うのに用いしれた
方法を１況明するためＶＣ記される。これらの例は説明
の１」的で記されるがこれに眠られるものでＱづ、ない
。

実施例−■ クロルメチル樹脂（２％クロス結合メリフィールド樹脂
）　８６２．Ｏｇ（２，：３７モル）ｌ？当り２．７５
ミリ当↓ｄ塩系含有、及び６０７．（１ｇ（２，３７モ
ル、１当ト１［）のＢＯＣ−Ｐｈｅが４３２０　ｍｅの
過「實化吻すしのテトラヒドロフランに加えられる。

この混合物は／１１１浴中で浴温度８０℃で４５分間か
くはんされた。トリエチルアミン３１０．０１ｎｅが加
えられ、この反応？ｌＬ合物は浴Ｔｉ８Ｍ、　８０　℃
で７０時間かくはんされ、２５℃に冷却さ７］２、か＜
ｄ：ん固相反応カラム（／こ２０００＋ｎ（！のテトラ
ヒドロフランと共にうつされる。電媒除去陵、この樹脂
は攪拌カラムを用いて次ｒｉｂ：　Ｋ　Ｊ：り洗われん
。

３　Ｘ　２０００　ｍｅテトラヒドロフラン４×５１７
０１１Ｉｅエタノール Ｉ　Ｘ　５１．７０　ｍｌ酢酸 ３　Ｘ　５１７０　ｍｅ水 ３　Ｘ　５１７０　、、＋ピメタノール３　Ｘ　５１７
０ＩＩｌｅ　りＣ１ロホＬムＢＯＣ−Ｐｈｅ−０−Ｃ１
ｌ、、−φ−樹脂ｄ゛真空２５℃１６時１川乾燥される
と、樹脂７尚り１．２ミリモルのフェニルアラニンを菖
−むＢＯＣ−Ｐｈｅ−０−Ｃ１（２−φ−樹脂１２０３
ｇ　をイｉＪる。

１１０ＣＰｈ　ｅ　−０−ＣＨ２φ−樹脂（２，１３ｙ
　；　２．０ミリモル）は衣１１１及びハｌ中の方法で
行ゎｆ’した。２回脱フロック法（２分及び２５分）を
メチジ／りロチイト中２５％ＴＦＡ及び１．２〜２．５
尚１１トのＢＯＣアミノ酸と共（Ｃ用いて必要な順列で
希望の＋３０ｃｍへキサペプチド−０−ＣＨ２φ　樹脂
がイ（↑られる−まで行われた。

との段１留ても「１ｉ−カップリンク炸［として１）Ｃ
ＣＩが用いしノ′シた。谷ア、ミノｌ’ｉｌ夕のカップ
リンクｉ」月ｎ′＊調に進んだ。最トの収率はカップリ
ンクを名段階で繰返えさ、ｌ′’Ｌ、６時ｖｃ　ｆ！ｊ
られた。カップリンクが繰返えされた時は、初めの２回
のクロロホルム洗浄、脱フロック段階及びつきの３回の
クロロホルム洗浄はすへて省略され、−回のクロロホル
ム洗浄で代えら汎た。

繰返しカップリンクは、ＨＢＴの存在でＤＣＣＩ粘性化
を丹ｊいてＤＭＦ中で行われた。

カップリンク反応はメチレンクロライド、新たＶこ脱カ
スしたＤＭＦ中、或にこれらの２つの浴序］混合吻中で
行われた。Ｎ−ψ；１１１末アミノ基ｋＩ谷々のＪ局舎
１３０Ｃ基でフロックさ扛た。

１’ｈｒのヒドロキシ基はＢＺＩでフロックされ、γ−
及びδ−フルオロリシンのεアミノ基はＣＢＺでフロッ
クされた。

希望のＢＯＣ−ヘキサペプチド−２−ＣＨ２−φ樹脂が
イｉＩられた時はＮ　　、４：、ｊｉ末ＢＯＣ基は衣＝
Ｖ中に提出したψ１１１１末脱ブロックカ法によって除
去された。

曲回　二区回　　　　ｔｎｌ叫　　　木表−１＼ｆ 保護アミノ酸　　　　　　　ｋｆ剤　Ｍｔ。

ＢＯＣ−Ｐｒｏ　（０，６４５９）　　　　　　２５１
Ｉｌｅ　　ＣＨ２α２ＢＯＣ−Ｐｈｅ　（０，７’：）
　５　ｇ）ＢＯＣ（ＯＩ３Ｚ）’ｌ’ｈｒ　（０゜９２
７ｇ）ＢＯＣ−Ｄ−Ｔｒｐ　（０，９１９）　’　　　
　　２０　ｌｎｅ　　ｃ）１２ｃｇ２゜５　　ｍｅ　　
　　ＤＭＦ ＢＯＣ−Ｄ−Ｔｒｐ　（０，６１）　　　　　　１０　
＋ａＩ！ＤＭＦ旧ＩＢＴ　ＩＪ２０　（０４６ｆｉ’）
と再カップル叩　　　　　、叱　　　　　ｌｌｌ町　　
　才人Ｉ１１．ハを及び■の方法が完成された後は、フ
ロックしたヘキサペブチｌ’　−ＯＣ１１２０−樹脂は
一夜乾燥され３．８０＋？イ：Ｊた３、実施例−２ 実施例−１の樹脂＆ｊ：　２０１１１１４のメタノール
、１０　ｒｎｅのヒドラジンと一緒に（７室ｌ晶で３７
分間攪拌されん。不溶解樹脂は濾過によって除去され、
メタノールで洗われた。水が加えられ、混合物は内び蒸
発された。４５　Ｑ　ｍｅの水がペプチドを洗うのに用
いられた。１残分は高真空ドに−°夜放置され、すべて
の揮発性物を除去する。残分ｔす１．８９ｉｉ’であっ
た。

実施例−３ 実施例２からの倒斜は窒素封入下に脱ガスしたジメチル
ホルムアミド２０　ｍｅと一緒にし一１０℃に冷却し、
テトラヒドロフラン中５．１５ＭのＨＣ１１，７０ｍｅ
　カ加えられた。コノ溶液は一２５℃に冷却され１．０
．３０　ｍｌの亜硝酸イソアミルが加えられた。反応の
完結は薄層クロマトクラフィとヒドラジット出発４］ｆ
トの消失にＪ二って追跡された。

実ｈ（！１例−４ 実施し１］−３のアシソト化合物が、前もって一２５℃
に冷却した脱ガスしたジメチルホルムアミド１．５ｔに
加えられ、１〕１１はＤＩｐ＋＞Ａ　により７．０〜７
．２に調節され、この反応混合物はフリーサー中に一夜
放置された。必要の場合ｉＪ、１１１１１−、Ｊ’、　
７．０　７．’　２に調節された。約１４時間の後、こ
の混合物は２４時間５℃Ｖこ貯蔵され／こ。ｌ０層クロ
マトグラフィーは、この反応が完成されたことを示した
。この混合物は小谷１１１゛まで濃縮され、残分は１０
０　ｍｌの水と共につき砕かれ濾過された。Ｆ別された
固体は水で洗い、真空中で一夜乾燥され、Ｌｓｏｆの生
成物を生ずる。

実施例−５ ｐｒｏ−Ｐｈｃ）　　の製造 実施１１／１］−４の保護し／こ床式へキサペプチド１
８０ｇが、テフロンで内張すされた室中で３ｍｅのアニ
ソールと一緒１／Ｃされた。この室ｄ、ついで真空にさ
れ、トライアイス／アセトン浴の温度で３５１１１ｅの
液体弗化水素と一緒に充填された。温度は（１’Ｃに上
荷さ）１７．１７２時間Ｊ景拌をつづけた。弗化水素は
蒸発さぜ残分ｄ−↓′ｊ；空中におかれた。残分はイ冑
１１１エーテルで４回ついで酢酸エチルで洗われ、静過
され＝−ｆダ乾燥後１．３８　′ｉの生成物を生ずる１
、実施１列−６ γ−フルオロ及びδ−フルオロペア’チＦ（１，３９）
の両者を含む粗壌式生成物混合物がシリノコケル６０　
（３９０ｇ）を用いてクロマトクラフさノまた。ＣＭＡ
　（９０−４０−１）での溶出Ｑ−ＪＸ蒸発、希酢酸中
俗解及び凍結乾燥措δ−フルオロ化合物（２９０ｔ１１
／　）を与えた。

さらに石川すると２５０　ｍｖのγ−フルオロ化合−吻
を生じ／ｃｏ中間溶出分はγ−フルオロ及びδ−フルオ
ロリシン含有趙似物の４−ム合物として６　Ｑ　Ｑ　ｌ
ｌｌ！／の生成物を与えた。異性体ペプチドｔ１、核両
気共鳴スペクトルによって特に良好に７１１−微つけら
れた。リジン１ｌｌｔｌ鎖のプロトンの脱カップル実験
はγ−フルオロ及びδ−フルオロ化合物の構造について
証明を与えた。すへての他の観点でニ１：、スペクトル
はｊコ・互に非常に３ｊ′１似しており非弗化化合物に
もよく似ている。ｒ−フルオロ化合物の酸加水分解後の
アミノ酸分析し」γ−Ｆ−リジンの２つのジアステレオ
マー（「エリスロ」及び「スレオ」）の３＝１の比での
存在を示した。２つのシアステレオマヘキサペプチド（
「エリスロ」及び１−スレオＪ−ｒ−Ｆ−リシンを含む
）は又、ＨＰ　Ｌ　Ｃでｒ：ｉ）留時間にｂ発て１・・
１１がな差（１６，１：３分と１６７９分）を示した。

いずれの異性体が主成分かについては何等の指示もなか
った。δフルオロ化合物のアミノ酸及びＨＩ）　Ｌ　Ｃ
分析は２つの異性体の存在をみつけでいない。

ｌｘ　Ｈｔ方力法従い、実ＭＩＵ１列−１の方法に於て
アミノ酸の選択と舶ｆ′１・のみを変えることによって
、本発明の能の環式へキサペプチドが作られる。

ソマトスタチンのこの６１式へキサペプチド類似物が試
験され、ソマトスタチン効果について、ｊ成長ホルモン
、インシュリン及びクルカロンの１ｉ１１１１に幻する
試駆ヱで」七１國さノ１．／こ。試！、宏結果は次の通
りである。

成長ホルモン　試験管中（ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　）ラット
の粘ｔ１ｋがｒ’ｌ？素学の力ａ、中ヘイル及びクラン
ド（Ｖａｌｅ　ａｎｄ　Ｇｒａｎｔ　）　の方法”Ｉｎ
ＶｉＬｒｏ　ＰｉＬｕｉｔａｒｙ　Ｉｌｏｒｍｏｎｅ　
５ｅｃｒｅｔｉｏｎ　Ａｓ５ａｙ　ｆｏｒＨｙｐｏｐｈ
ｙｓｉｏｐｒｉｖｉｃ　Ｓｔ市５ｔａｎｃｅｓｌｌ（Ｖ
ｏｌ、　　＼−ＸＸＶＩＩ　、　　ｅｄｓ、ｏ’Ｍａｌ
ｌｅｙ、　　Ｂ、Ｗ、ａｎｄｌｌａｒｄｍａｎ、　Ｊ、
Ｇ、’（Ａｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ’、　　Ｉｎｃ
、　　、　　ＮｅｗＹｏｒｋ　）　Ｈ〕ｐ　５〜９３　
（１９７５）　］に従って分離され／？：ｏ４１」間培
養後、細胞を洗い、各類似物又はソマトスタチンの粉砕
調合薬の添加酸（−１無添加の１・−でタルｔ＼ツコ・
モディファイド・イークルの（］）ｕｌｂｅｃｃｏ　ｍ
ｏｄｉｆｉｅｄ　Ｅａｇｌｅ’ｓ　）培養基中で４時間
培養された。培養基はラット族Ｊ（ホルモン用のタフル
抵体うシオイムミュノアツセイ（ｄｏｕｂｌｅ　ａｎｔ
ｉｂｏｄｙ　ｒａｄｉｏｉｍｍｕ−ｎｏａｓｓａｙ）に
よってその後の成長ホルモン測定に集められ／ｃ。

インシュリン及びクルカロン ソマトスタチン類似物が、麻酔ラットの門脈クルカコン
とインシュリンの水準を減少させる能力についてソマト
スタチンと比較された。１６０〜２００１？　　の重さ
の１４１．のスブラーク・トーレイｅラット（Ｍａｌｅ
　Ｓｐｒａｇｕｅａｌ）ａｗｌｅｙ　ｒａｔｓ　）（Ｃ
Ｉ＋ａｒｌｅｓ　Ｒｉｖｅｒ　ＣＤ　）　　がウレタン
（ｔ　５０１１１１／／１００ｇの体重；　Ａｌｄｒｉ
ｃｈ　）　　で麻酔された。サリン（５ａｌｉｎｅ　）
或はペプチドが外頚部静脈を経て注射された。５分装門
脈がとり出さ、ｔシ、血液が３　ｍｇのＥ　Ｉ）Ｔ　Ａ
をバむｌ十射器によりとられ、その後のホルモン分析の
ため、１００μとのトラシロール（Ｔｒａｓｙｌｏｌ　
）　（ＦＢＡ　Ｉ〕ｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ　）
をγ壓む冷却管に入れられた９、クルカロンの血漿水準
はファルーナ及びアンカー（Ｆａｌｏｏｎａ　ａｎｄ　
Ｕｎｇｅｒ　）の方法［Ｍｅ　ｔ　ｈ　Ｏ（ｌ　Ｓ　Ｏ
ｆＨｏｒｍｏｎｅ　　Ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏａｓｓａ
ｙ、Ｊａｆｆ　　ａｎｄ　　１３ｅ１１ｒｍａｎ（Ｅｄ
ｓ　）　、　Ａｃａｄｅｍｉ　Ｐｒｅｒｓ　、　Ｎｅ’
ｖｔ　Ｙｏｒｋ　、　Ｖｏｌ　ｌｌ。

ｐｐ　２５７５２７　　（１９７６）　　〕’−ｆ、ア
ール・アンカー（Ｒ，Ｕｎｇｅｒ　）　（Ｄａｌｌａｓ
　、　ＴＸ　）からｒｒｔだクルカロン・アンティセラ
（ａｎＬｊｓｅｒａ　）　３０　Ｋを利用して決定され
／こ。インシュリンの血漿水準はへルハート秀（ＩＴｅ
ｒｂｅｒＬ　ｅＬ　ａｌ　）　ＣＪ。

ＣＨｎ、　Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ、　Ｉｖｌｅｔａｂ、
　、　２’５．１３７５〜１３８４（１９６５）　　］
　　の方法の改良法によって決定された１、 本発明の化合物類のあるものの試験結果？３１、最初に
表示１〜、任意値１を！Ｕえたソマトスタチンの結果と
共に以−ドに記される。本発明化合物の結果は、ソマト
スタチンの倍数か分数どｌ〜てＡｊえられる。括弧内の
数字は前の数のｆｒ−ｊ　ＭＩｌ’ｌ　限界（ｆｉｄｕ
ｒｉａｌ　１１ｍ１ｔｓ　）である。表示し／（二本発
明化合物の最初のものは、実施例１〜５中で作った化合
物である。その化合物（−［、ソマトスタチン中にみつ
けらオｔだアミノ酸の１１１＋’ｉ　ｌ′Ｉ：と一致さ
ぜるために僅かに異在って記載さ）土でいる３゜ 本発明のソマトスタチンの環状へキサペプチド類似物の
胃酸分泌に対する効果は次の方法で決定される。化合物
類は、慢性痩性犬のペンタカストリンでひき出さね、た
胃液分記、を１ｉ１４　＋ＩｔするＴＪヒカＶこ対′し
て試験された。雌のビーられ＼痩化套管（ｆｉｓｔｕｌ
ａ　ｃａｎｎｕｌａ　）を註て胃液分泌物が集められた
。サンプルは３０分間隔で芥ｔｉｉ：　（ｍｅ　）と滴
定可能Ｍ（ｍＥｑ／Ｌ　）（Ｑ、０１　Ｎ　ＮａＯＨで
ｌｕｌ＋　７　　に滴定）が分析された。

総１１１：酸分継、（ｍＥｑ）　　は分泌容量と酸濃１
にとしてｉｆ”）２され／こ。試験化合物力゛１ば（）
から６０分の一定速１変で注入された。データは同じ動
物の気体め桑試験と関係する認Ｈ１酸分〜、の係変化と
して表わされている。

実施例−７ Ｎ、Ｎ’−−シカルホヘンシルオキシーｒ−ヒＩ・ロキ
ンーＬ−リシンアミド（２，０９，４，６５ミリモル）
　　（Ｉｚｕｍｉｙａ　ｅｔ　ａｌ、　、　ｆ３ｉｏｃ
ｈｅｍ、　、　４．。

２５０１　　（１９６５）　　）　　がケル−エフ（Ｒ
）　（Ｋｅｌ　−ｒ、゛（［ｐ　）縦比、器中に入れら
肛、無水の弗化水素（４Ｑ　ｍｅ　）が−７８℃で凝縮
された。反応容器に接わ“Ｃした度盛管中で一７８℃で
四弗化硫黄（１，８＋ｎｌ！、　　３１ミリモル）がん
Ｃ確ｉされた。

冷却浴が除去され、四弗化硫黄が蒸発によって反応液（
−７８℃に（９却）にうつされた。

この混合物は５時間−７８℃で］ｍ拌さ扛−夜ＪＪ父１
１へされた。弗化水素は窒素の流れによって除去され、
残分は３０　ｍｌの２．５　Ｎ　）ＩＣｇ中Ｋ　Ｈ月イ
さノＬだ。不溶解物はｐ過され、Ｐ液は乾燥する徒で真
空中で蒸発さ几、未反応の４−ヒドロオキシ−し−リシ
ンアミドで汚染された１０１ｇの柑４−フルオロ−し一
リシンアミドを生ずる。この徂アミド（１，４ｆ）は１
．５時間還流されることに」：す９０　ｍｅの２．５　
Ｎ　Ｉｗｉ中で加水前され、この反応溶液ｄ、乾燥する
゛まで蒸発されイオン交換クロマトクラフィー〔タウエ
ックス（Ｄｏｗｅｘ　）　　５０−　Ｘ　８樹脂。

１２０ｍｅ、　　＋１１型、　初めに５００７１ｊｅ　
（７’）水−Ｃ？＆　イ２、５　Ｎ　ＩＩαで流出させ
る〕に」：って分離すれた。４−ヒドロオキシ−Ｌ−リ
シンは強ｒ唆中でラクトンを形成し、これけり！Ｉ）塩
基であり２、５　Ｎ　Ｈ（’／’　′ｃ４１１脂から浴
出さｆ’Ｌなかツ／コ。４−フルオｏ　７　（、−リシ
ン−２Ｈｃｅが５２％収率９０％より高い純度、〔α〕
。−１−１６，８°　（２，５Ｎ　ＩＩＬ’ｌ中３％）
でイＩＩられた。このモノハイドロクロライドは７６％
１区率で、ジヒドロクロライドを１５　芥ｉ１ｔメタノ
ール中ＶＣ＃；月イし、５０％モル過刺ビリジンを加え
ることＶＣよって得られた。このものはインプロパツー
ル／水（２冒）から内結晶されて旋光度〔α〕１゜＋２
０’　（２，５Ｎ　Ｉ［：１９２％）、融点２１０？（
脱色）２１５〜１７°（ｄ）の生成物ケ与える。

実施例−８ ン Ｋｅｌ　−Ｆ”　　ｌｌＪ畑反塔反応器ｏｌｌｏｎｉｔ
ｓｃｈ　ｅｔ　ａｌ。

Ｊ、Ａｒｎ、　ＣＩ＋ａｍ、　Ｓｏｃ、、　９２．７４
９４　（１９７０）中に記載の一般的尤学弗素化法がリ
ジンの弗素化に用いらＪ’Ｌｉζ。光源はハノヒア（ｌ
１ａｎｏｖｉａ　）水ｕ、！−キセノン２５００Ｗ　ラ
ンプでクラトス・インコーポレーテットの（Ｋｒａｔｏ
ｓ　Ｉｎｃ、　）　　ショフエル（５ｃｈｏｅｆｆｅｌ
　）　　機材部門によって製」告された石りｙプロジェ
クタ−中に酸１定された。

装置ｉ′７は窒素で通風し、すべての操作は墾索ドに行
われ／（二。

ｒ、　−！Ｊ　シン塩酸ＪＭ（３ｏ　ｙ　、　、　　０
．１６５モル）ｌ−Ｊ’、　Ｋｅｌ　Ｆ’反ｊ、ｓ器中
に入れられ、−７８℃に冷去１ｊさフＬ（トライアイス
アセトン浴）、８０ｒｒノｅの弗化水素が凝縮され、室
温で窒ポの早い流ノシによって除去された（これにより
アミノ酸はＩＩ　Ｆ’塩にかえら汎すべでのＵ−イオン
が除去さ）した。ｔ、ｅ−の存在は弗素化に加えてアミ
ノｒ唆の塩素化を牛するかも知れない）。反応器けｒｌ
ｆひ一７８℃に冷却さｉシ２０（１＋＋＋ｌ！　（ｒ）
　ＩＩ　Ｆ　カ凝縮された。ｋ；／１ダを通してトリフ
ルオロメチルハイポフルオライド（１９，５ν０．１８
７モル）がＵ　Ｖ投射と撹拌のｉ’　Ｋ　７１ｌｊｊ間
−７８℃でバフルされた。ｆｉｌ”Ｏす−（少窒素の流
れと共に吹きとばされた。残分（淡黄色カム状）は２５
Ｎ　ＩＩ（’ｅ　１００　ｍｅ中ＶＣ浴＋Ｏ’ｒ　サ、
？ｔ、”−＜　空中で乾ｋ　する−まで蒸発された。残
分はタウエックス５〇−×８イオン交換樹脂（■■″型
、５００＋＋＋ｅ）　　ｆ通し、１１ｔＤｙｌテ洗イ４
　Ｎ　ＩＩ（：ｌ”ＣＩＲ出さｔした。

アミノ酸を會む留分０．。−緒にし、乾燥する−まで蒸
発すると３５．２ｇの徂弗素化Ｌ　−リシン・２　ＨＣ
’／ｌ！を生じた。この和生成物は５−フルオロ−し−
リジン２５％、４−フルオロ−Ｌ−リジン７１％及び未
同定アミノ酸４％の混合９勿であった。

４−及び５−フルオロ−Ｌ−リジン・２　ＭＣＩの−［
二り己社へ合物（１０ｇ、４２ミリモル）は１５０　！
ｎ＋！のメタノール中に・浴Ｍ’さｒし、１５　ｍｌの
ンメチルサルファイトが加えられた。この溶ｌイダ＆：
ｌ：　０　℃てＩＩ　（’／！カスで飽和され、ついで
室温で一イシ（）′Ｌ件された。結晶性沈殿物が４１日
成され、θ専過さλ１、冷インプロパツールで洗われ６
４Ｃ貞り）コ中で一定の屯さになる−まで乾燥され、１
．７２／（１６％収率）のメチル４−フルオロ−Ｉ７−
リノン２ＨＣ：Ｚ、（α］　Ｄ−１−１４，７°（２％
。

２、５　Ｎ　ＩＩｔ、’ｌ中）を生じだ。他の２４ｆ（
１０１ミリモル）の弗素化混合物のエステル化は７．９
／（３２％）のメチル４−フルオロ−■、−リシネート
・２　ｆ−（こｌを生じ欠。これ（」５：う２・、／の
メタノールからの再結晶後（４７％収率）、ＪＪｉ＋：
尤度〔αＪｌ）二十１４．３°（２，５Ｎ　ｒＩｃ−゛
ｅ中２％）の生成物をりえた。

このエステルの加水分ｆＩＩイＱま１０拝量の濃７謔１
１ど中で９５℃６時間加熱することによって定：ｌ；的
に４−フルオロ−Ｌ−リシン・２　ＨＣ２しαＪ　Ｉ）
　＋１４９０（２％、　　２．５　Ｎ　Ｈｃｇ　ｔｌ、
＋　）を生じた。スピンコ（５ｐｉｎｃｏ　）アミノ酸
分析と１９１”　Ｎへ４１え　は、こ、ｔ′シか４−フ
ルオロ−し−リシン（７７％）と５−フルオロ−し−リ
ジン（２３％）の混合物であることを示した。。

実施例−９ ＩＩ γ−及びδ−Ｆ−リジン・１１α（２，４８９）と塩化
鋼（Ｃｕｔ’ε２・２１ｆ２０）　　（０，９８ｉ／　
）を汁む水浴液（５０ｍｅ　）　（Ｄ　Ｉ）ＩＩが２Ｎ
力セイソータで９．５にｉ周節された。ヘンシルオキシ
力ルホニルクロライｆ”　（１，６４＋＋＋ｆ！　）が
加えられ、混合物Ｑフ↓２５゛Ｃて４０分間電磁攪拌さ
れ２Ｎ力セイソータの添加によりｐＨ９，５に保たれた
３、Ｈ２Ｏと酢酸エチルとでθｆ過と粉砕の後、固体生
１戊物は水−酢ｔ”ａ　（８：　２　）　（見合１勿中
Ｋ　Ｗ４ｉｌｌイし濃塩酸でＩ）ＩＩ　Ｏ，５に調１′
Ｊｉ′ｊして溶解さ７↓た。

この浴／戊を通して５分間何ｉ化水素をバフルして、沈
殿した硫化銅（ＣｕＳ）を濾過しＰ液は真空で３０　ｍ
ｌ−まで蒸発された。１）１１はピリジンによって４．
５に調節さノ′し、生成物（２，４ｉ？　）は濾過によ
って果めた。生成物は薄層クロマトクラフ分析でＲｆ　
Ｏ，４５（６０−３０−４−６クロロホルムーメタノー
ルー水−水酸化アンモニウム）て、ｌりｆｏ、４５（６
０−３０−５クロロホルム−メタノール−水）であった
。核磁気共鳴スペクトルを；１、Ｉ）ＭＰ−ｄ７−Ｎａ
ＯＤ　Ｌｌ’　：３．２５　ｐｐｍに三屯点庖・ノｊ＜
［７、酸性化によってもケミカル・シフトをかえなかっ
た。

　　Ｏｌｌ γ−及びδ−Ｆ　−Ｌｙｓ　（ＣＢＺ　）　　ＯＨ（２
，６９）と１．９　ｒｎｅ（Ｃｒ　ＴＥＡ（１）　２０
１１１ｅ　ＴＨＦ　−Ｈ２Ｏ（１：１）中の浮遊物に、
２−（ｔｅｒｔ−７トギシカルホニルオキシイミノ）−
２−フェニルアセトニトリル（１３０Ｃ−ＯＮ、　２．
４９　）　　が加えられた。

２５℃で２０時間ノ□＝、ｉ（２０（５０ｍｅ　）　　
が加えら；ｌ’Ｌ　、反応混合９勿はエーテルで抽出さ
れた（　３　Ｘ　２０　ｍｅ　）　。コ（７）水の層は
１０％ＨＣ１で１）ＩＩ　１．２に酸性化され、油性生
成物は酢酸エチルで抽出された（　３　Ｘ　５０　ｍｅ
　）。−緒にしノこ有機層は硫酸マクネシウムで乾燥し
、υ４過し、溶剤の蒸発後、１３０　Ｃ−γ−及びδ−
Ｆ−Ｌｙｓ　（ＣＢＺ）−０１（（３，３２ｆ？　）が
濃い油としてｆＩＩられた。生成混合物はＲｆ　（１，
３（８０２０−２クロロホルム−メタノール　水酸化ア
ンモニウム）であつ／ｃ。

クロロホルム−′■゛ＥＡ中での赤外スペクトルは６２
３μにカルホキシレート吸収の介在を示した。

出願　　人　：　メルク　エントカムパニーインコーポ
レーテット

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 ■、　次式の化合物 及び 〔ここにＹｌ及びＹ２は水素か弗素である（ｙ＋とＹ２
   　が同じでないことを条件として）、Ｘは（ＣＨ２）ｍ
   （ｍは０，１又は２）或ｄ゛硫黄である。Ｒ１とＲ７は
   独＼ｒに低級アルキル、ヘンシル、置換ヘンシル、ここ
   にその置換基は低級アルキル、ハロゲン、ヒドロオキシ
   、アミン、ニトロ又は低級アルコキシ一つ又は二つであ
   ることができ；及び５員又は６員のへテロ項式環で置換
   した低級アルキルであり；Ｒ４は３−インドリルメチル
   又は置換３−インドリルメチルで、ここに置換基は低級
   アルキル、低級アルコキシ、又はハロケンでよい。Ｒ，
   、ｉＪ：低級アルキル、ヒドロオキシ低級アルキル、ペ
   ンシル、カルホキシ低級アルキル、アミン低級アルキル
   、又ｄ：置換ヒドロオキシヘンシル、ここにその置換基
   は１氏級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロオキシ、ハ
   ロケン、アミノ又はニトロである。Ｒ５は水素、低級ア
   ルキル、ヘンシル或は置換ヘンシルで、ここにその置換
   基は低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、ハロ
   ケン、アミノ或はニトロである。〕。 ２、Ｙｌ、＋　”２　ｒ　’！ｌ及びＲ２、特許請求の
   範囲第１項に定義されたもので；Ｒ３は３−インドリル
   メチルか、置換インドリルメチルで、その１１′を横用
   はメトキシかフルオロであり；Ｒ４はメチル、エチル、
   ヒドロオキシメチル又はヒドロオキシエチルであり；Ｒ
   ３はｔ１１１′許請求の範囲第１項に定義したものであ
   ることを特徴とする特許請求の範囲第１項の化合物。 ３、Ｒ５げメチルであ゛る特許請求の範囲第２項の化合
   物。 ４、　　Ｙがメチレンであり、Ｒ１及びＲ２は特許請求
   の範囲第１項中に定義したものであり、Ｒ３が３−イン
   ドリルメチルであり、Ｒ，ｌがヒドロオキシエチルであ
   り、ｌも　　がメチルであることを特徴とする特許請求
   の範囲第２項の化合物。 ５、　シクロ（Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−γ−Ｆ−
   Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ　）であることを特徴とする特
   許請求の範囲第２項の化合物。 ６、　シクロ（Ｐｒｏ−円］ｅ−Ｄ−Ｔｒｌ）−δ−Ｆ
   −Ｌｙ　ｓ　−Ｔｈ　ｒ−円１ｅ　）であることを特徴
   とする特許ｉｆｊ求の範囲第２項の化合物。 ７、　シクロ（Ｎ−Ｍｅ−Ａｆ’ａ−Ｔｙｒ７Ｄ−Ｔｒ
   ｐ−ｒ−１ｉ’−Ｌｙｓ−Ｖａｔ−Ｐｈｅ）であること
   を特徴とする特π１−請求の範囲第２項の化合物。 ８　シクロ（Ｎ　−Ｍｅ　−ｙＩｌａ−Ｔｙｒ　−１）
   　−Ｔｒｐ−δ−Ｆ　−Ｌｙｓ　−Ｖａｌ　−Ｐｈｅ　
   ）であることを特徴とする特許請求のｄＩｌｌ！囲第２
   項の化合物。 ９、特許請求の範囲第１項に記載の環式へキサペプチド
   の製造方法において、 ａ）固」゛目樹脂に付着した対応するフロックされた直
   鎖ペプチドを作り； ｂ）　　Ｎ一端末アミノ基を選択的に脱フロックし； Ｃ）その樹脂から直鎖ペプチドを除去し；ｄ）その直鎖
   ペプチドをシクロ化剤で処理し、希望の環式へキサペプ
   チドのアミド結合を作り； ｅ）　　１ｌｌｌ珀保１１φ基を除去することを特徴と
   する製造方法。 １０ｃ）段階では直鎖ペプチドをヒドラジンで処理して
   ヒドラジドを作ることを特徴とする特許請求の範囲第９
   項の製造方法。 １１、シクロ化段階はヒドラジドを亜硝酸をその場で作
   る反応剤で処理してアンドをつくり、このものは第４ア
   ミンの存在ドにシクロ化され希望の環式へキサペプチド
   にすることを特徴とする特許請求の範囲第１０項の方法
   。 １２、　　アジドがヒドラジドを低級アルキル亜硝ｌＦ
   ２塩か又はアルカリ金属亜硝酸塩で強酸の存在下に処理
   することにより作ることを特徴とする特許請求の範囲第
   １１項の方法。 １３、塩酸の存在下にヒドラジドをイソアルミ亜硝酸塩
   で処理することによってアジドを作ることを特徴とする
   特許１清求の範囲第１２項の方法。 １４、特π１−請求の範囲第１項の環式へキサペプチド
   のイ１効址を動物に投与することからなることを特徴と
   する成長ホルモンの放出を阻止する方法。 １５、！ＩＪＪ′許請求の範囲第１項記載の環式へキサ
   ペプチド又はその無毒性酸４−＝１加塩の治療法」二有
   効なり七を製薬」二ｄ１−容される液体又ｒ１固体担体
   中に含む薬剤組成物。 １６、γ−フルオローリシンのジアステレオ異性体、及
   のα及び／又はεＭ置でのＣＢＺ−。 ２−Ｃ１−ＣＢＺ、　　ＢＯＣ，ＴＮＯＣ及びＦＭｏｃ
   で保獲した誘導体を含む　　°　　　　γ−フルオロリ
   シン。 １７、γ−ヒドロオキシーＬ−リシンアミドを四弗化値
   黄の存在［に無水の弗化水素で処理するとと；このアミ
   ドを加水分解して遊離酸を作ること；及びα−及び／又
   はε−ＣＢＺ　、　２−　Ｕ　−ＣＢＺ　、　　ｌＮ０
   Ｃ又はＦＭＯＣで保護された誘導体を作ることを営むこ
   とを特徴とする特許請求の範囲第１６項の保護された化
   合物を作る方法。 １８、リジンを、触媒として光源の存在下に弗化水素で
   処理することを含むことを特徴とする’ｔ！Ｊ”　ｉｌ
   ｌ’　ｉ！ｉ！Ｉ求の範囲第１６項の化合物を作る方法
   。