JPS5951201A - 胚等の凍結方法および低温化装置 - Google Patents

胚等の凍結方法および低温化装置

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JPS5951201A
JPS5951201A JP58138639A JP13863983A JPS5951201A JP S5951201 A JPS5951201 A JP S5951201A JP 58138639 A JP58138639 A JP 58138639A JP 13863983 A JP13863983 A JP 13863983A JP S5951201 A JPS5951201 A JP S5951201A
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cooling
gas
temperature
gas body
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    • A01N1/145Stationary or portable vessels generating cryogenic temperatures, e.g. liquid nitrogen baths
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、動物または人間の胚、細1]1す組織。
血液細胞その他これに類するようなものの凍結方法とそ
のための低温化装置に関するものであろQ 近年、動物または人間の胚1組織、血液細胞のような生
物学上の元素または標本のような物qJ1の低温度貯蔵
の必要性がいわ11ている3、そこで、本発明は、これ
らの物質を極低温における凍結状態におくために、温度
または冷却速度を調整制御して低下せしめることを目的
とするものである。
液体窒素は、−35C以下の極低温レベルまで物質の温
度を低下させる能力があることから、低温状態下の物質
の冷却や貯蔵に使用さねできたが、しかしこれは高価で
あるしまた室全体にわたる温度とその冷却速度を厳密に
制御することにつ℃・ては欠点があった。したがって、
冷却速度を調整する点では正確な制御のできろ空気のよ
うな窒素以外のガス体で温度を低下させる、1: 51
=τし、fた取扱う物質の分子構造を破壊したりA化し
/二すすることを防1(−する点では温度・l1Jll
li i、・c二す3ける不自然な制御をしないように
する・−とか必要であり、本発明はそのような欠点をげ
)3することを目的とするものである。
イ、発明の構成↑Jよび作用を図面の実殉例につ(・て
訛、明−4−ろ3、 灯土しい低温化装置は、他から絶縁された冷却’441
+21を設置するハウジング(10)から成るものでル
)イW+?r7脱可能な支持部材fl−11は冷却室(
12)の開口j、;f、l iて設置し、この支持部材
(1,11に適当間隔をおいてj投けた開11部0′、
!J・・には胚支持管f151−・を吊下げイ)1、空
気その曲のガス体(以下、ガス体という)1:1. 、
閉めL’lJつた冷却室(12)の基部に設置した送風
IQ 、i+ilによって室内を循環する。このガス体
は、冷却室(12)の内It!I+壁に沿って支持部材
(1・1)に対し軸/、向(0循環111′1路を形成
し、上方の支持部(オ(11)でIJ向を変え、冷却室
の中心部に沿って封爺されt二I11; ′qを17/
r [:IJりでi’yfQ下する1、)11.交換器
1181i1熱電装置の形式をとり、その熱電装置は電
圧が電源によって印加されろ逆→ノーーモカツプル(1
9を有し、蛇行状のフィン32からIJ7る熱交換媒体
は熱交換器またはプレナムI21)と連結して冷却室(
12)の相対する壁面に設けている。
前記ブレナム3υには、第4図に示すように、外部の給
水タンク(ハ)との間に導入管(Fillと制水t11
゛(lililで連結して熱交換をする。邪魔板C9の
は、冷却室I21)の長手方向に延びフィン(ハ)C2
の内’11111に入ン゛設し、その上端は支持部材(
14)との間に空間を保って℃・るが、これはフィン(
ハ)(ハ)に熱交換で通過するように邪魔板G!41 
c:4と冷却室(12)との間の外側部分C2ejを通
る空気循環の手助けとなる1、冷却速度を感知1−るた
めに、温度センサー(ハ)が空気流の戻り通路内に設置
され、第5図に示す電気制御回路(至)へ電気的に接続
されている。、この電気制御回路ωは、温度降下の速度
に即応して、以下で説明する方法で逆サーモカッグル(
+!]+に印7JI+される電圧値を調整するために、
電源12r11を通して機能するようになるクローズド
フィード・・ツクループ中にマイクロプロセッサ−((
4を含む1、好ましくは、ハウジング(10)が第1図
に示ずよ5に外部間(・ぐ9の中に位置していることで
ある。
このハウジング(川)は通常円筒形状のものであり、ポ
リウレタンフォームの絶縁材料で構成する絶朽、壁(仲
を有し、その」1端は円形の絶縁カバー(ハ)11i−
よって密閉されて見・る1、この絶縁カバーCnは、絶
縁壁ζIの上端部と−1一方に突出している中央体((
7)とが重複する外側リム(7)を有し、また1個以十
のンーリングC内を有している。冷却室(12)の」二
側部内側には適当間隔をおいてリブ00・・が設けらJ
lており、このリプ上に前記支持部刊(11)の板が載
置する。この板の開口部G121に係合する胚支持管(
15)は開「1か溝を有しているが、これには等間隔に
脚04)が設けられている。胚は瓶G15+に収容され
ており、これを横切る空気に直接当たるように前記脚G
14)−1−に置かれている。
jt風機(1G)は好ましくは、冷却室(12)の外側
下部に設置したモータ(52)の−1一方に向いた駆動
軸ω十(Cあり、冷却室(12)の基部に支持されたか
ご型ファンとする。このモータじは、モータまたはその
駆動軸からの熱を最小限にするためにアルミニウムフィ
ン(53)をその下側部に設けてオ6す、これによって
冷却室(121へ熱の伝達を防屯する1、送風機(16
)は、空気を放射状方向にその外周部(51)を通して
排出し、その上側部に空気吸入にI (551を有する
邪魔板G!41 c:41は、直径的に相対するF 1
fii H* (5:+) 4+:おいて冷却室(12
1の直径に対応する大きさでア7.)基板(58)土に
取付けられてオ6す、この基板68)の中央には開口部
(60)を設ける。送風機(16)から上方・\の空気
の動きについては空間部(至)により案内する。温度セ
ンサー(ハ)は、基板価の上刃に吊インされ空気の流路
中の基板の中央間11部(作に臨設している。その空気
は、冷却室(12)の中心に沿って吸入口(551へ戻
るようになる1、 熱電装置(18)の好ましい構造は、プレナ1.2++
の各々の内壁表面に接触しているアルミニウム、フィン
から成り、このプレナム2+)は熱電装置(18)のサ
ーモカップル(19)を囲んで(・イ)。プレナムの吸
熱源は、通常細長い矩形状でサーモカップル(1!I)
を1も−む、1このサーモカツプルは好ましくは、米・
国マサチューセツソ、キャムビイオン・オブ書キャl、
ブリッジ製の型爵806−1008−01で、:口/1
86の組合せ化で、−55Cから+125Cの温度範囲
にわたって動作可能のような逆サーモカップル型とする
。このプレナム3Dは、排りJ(を熱電要素から取除く
のに使用される液体冷却の熱交換器であり、通常の水道
水はその冷却流体として使用してよい。温度センサーC
8は抵抗サーモメーターでよいが、これもまたマサチュ
ーセソツ、ギヤ11ピオン・オプ争キャムブリノジから
入手できる。この温度センサーは、制御11回路へ延び
る適当なリード線り;8)を有する3、この発明の低温
装置の動作は、第5図の電気制御回路に示すように、電
源(20)が出力信号を配fB’A ff11+を越え
て熱電装置(18)へ指令し、また電源(20)は、テ
マンド信弓によって配線(7りを越えて出力ランチ回路
(7=11から逆サーモカップルで調整される。要求さ
おろ冷却速度が太きければ大きいほど、逆ザーモカツプ
ル吐へ供給されろ電圧は多くなる。この接続においては
冷却速度ばあ1“つかしめ選択され、ディスプレイパネ
ル(781を通して制御信号を出力ラッチ回路(7=1
1へ供給するマイクロプロセッサ0つへプログラムされ
る1、ディスプレイパネル(781には、時間につ℃・
てIjえられたどの点においても冷却速度および温度レ
ベルのLうな低温室内の各種のパラメータまたは作動状
態を数字的に示すためのディスプレイライ) (7!1
が設けである。マイクロプロセッサ−へプログラムされ
る代表的冷却速度はディスプレイパネル(T8)にあら
れされ、低温室で到達されイ)・h−Cの与えられた時
間の間、いろいろな温度レベルを示す。例え、ば、この
温度範囲は=I OCの出発点から一35C以下まで拡
がるかもしれな(・1、また、各温度レベルの間におい
てT6を経てT1で指定されるような望ましい冷却速度
がマイクロプロセッサ−へプログラムされる3、この場
合、限定された時間にわたって一定のレベルに温度ヲ保
持し、次の温度への冷却が続(と(・うil、ii7留
11.’j間を含むものである。
十ンザー128によ−)て冷却室(12)で感知される
温1朗は、配線−を越えてアナログ信号としてアナログ
/デジタル変換器(ハ)へ作用する。この変換器は、マ
イクロプロセッサ(76)に作用するデジタルパルスへ
アナログ信−シを調節して変換するものである。マイク
ロプロセッサは、これらの信りとプログラムされた温度
レベルとを比較し、配置(771を越えて修正信号をラ
ッチ回路(71)へ出す。
その信号はまた、配線01131を越えて温度プリンタ
(81)へ出され、配線()!!I!を越えて発光ダイ
オード−ディスプレイ(79)へ出される。もし冷却室
において感知された温度が、マイクロプロセッサ02へ
プログラムされた事前選択温度レベルとかけ離11で(
・る場合は、マイクロプロセッサ6つはサーモカップル
(11への作用動力の増減につ(・ての修正信5づを発
生ずることになる。
物質の取扱や保存にとって、冷却速度の制御1、一連(
・て’l’、!iに重要なことは、nトの場合、11ト
の凍結点を通りこしてOrから一22iCの範囲に冷却
を続けるときに、突然の温度低下を避けることである。
空気のようなガス体を利用するこ、とによって、冷却速
度はさらに厳密に調整すく〉ことができ、同時に胚の適
正な保存のために必要な極低温まで到達できる。例えば
、T1は次のT2の時間において40Cがら2()Cま
での温度降下を行うことができる。その温度は、5分毎
に制御された時間間隔の間保持される。T3の時間にお
いては、その温度は一7Cまで毎分tCの割合で降下す
る。T4において5分とするように、他の制御時間の間
その温度レベルに保持される。
冷却サイクルの間ずつとその温度は、温度レベルと冷却
速度に関して監視されてプログラド、された冷却速度が
続くということが確認される1、もし冷却の温度または
速度がそのプログラドから変化するならば、印加電圧を
減らすかまたは増すように修正信゛弓が出される。例え
ば、もし温度がプログラムレベル以上であるべきならば
、電圧は増加される。もし温度がプロゲラl、レベル以
下であるべきならば、電圧は減少さねる1、もし冷却速
度がプログラムされた速度よりも小であるべきならば、
電圧は増加され、もし冷却または温度降下速度がより大
きい場合には、上記と反対のようになる。図示した特別
な温度曲線は代表的プログラムの一つに過ぎな℃・。極
低温状態にまで凍結して温度を低くする物”質にしたが
って、実際、)二のどの温度曲線しU取替えてもよい。
もし望むなら、冷却室により胚を一50Cもの低い温度
レベルまで温度降下させて、その後は胚を冷却室から取
外しさらに低温にするための窒素室の中へ移し換えても
よい。冷却終了時には、外部カバー゛(至)を取外すこ
とが必要であり、続いて支持部材(14)および吊り下
げられた胚を取外す。
次の胚との交換時間の間は、送風機(16)は熱電装置
(18)と同様に作動しており、次の組の胚が冷却室(
121内に収容されて外部カッく−(至)が再び正常な
fX?置と装着されるとすぐに、この胚は直ちに冷却化
に入るようになる3、 ディスプレイパネル上のデマンくドライドは熱電装置へ
印加される電圧量を指示する。電圧レベルが増大すると
、デマンドライトの明るさが増ず。発光ダイオード−デ
ィスプレイ(79)によって指示される冷却室の特別な
条件にしたかつ−C1操作者は供給電圧量を減らすよう
にまたは増すように、プログラム修正を望むこともでき
る。
温度プリンタ@4)は既知の方法で動作し、選択された
温度プログラムのハードコピーまたはプリントされた記
録、および運転中は低温装置の実際性能な揚供する。順
次、キーボード化(:)によって、動物の胚1人間の肝
臓組織など、凍結を希望するものに対して、操作者が温
度プログラドをつくることができる。電流値は、温度変
化によって熱電装置の中で変化するので、電流値または
電流レベルを電源(2■に対し監視する。ある出力、す
なわち毎分約+oort’の空気量で:3.O開rpm
の範囲で運転するとき、送風機(16)は家畜の胚凍結
装置に使用することができる。この場合、冷却室(12
1は直径約100IILのオーダーどなり、す、(、板
’C13)と可動支持板(1,Dとの間の長さ+6.し
び高さは約30−のオーダーとなる。
【図面の簡単な説明】
図面は本発明の実施例を示し、第1図は冷却室の透視図
、第2図は要部の平面図、第;う図は9部の正断面図、
第4図は冷却室と熱交換手段との関係を示した透視図、
第5図は温度制御関係を示す回路図である。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 +!、I  II・その他こ第1に類するものが取外し
    可能に支持される冷却室を用、ム、し、この冷却室内に
    熱伝・f’s /A1体および肝等を連続的に横切って
    冷却室に切曲して内側壁に沿って軸方向に流れろガス体
    又はりと気を循環させ、前記熱伝導媒体の温度を調整す
    ることによりガス体又は空気の冷却速度を制御するよう
    に成る肝等の凍結方法。 (21制御し予め定められた速度で胚その他これに類す
    〈〉ものの温度を低下させる方法にお℃・て、冷却室お
    よびこの冷却室内で胚等を着脱自在に吊下げる支持手段
    を設け、ガス体の循環回路内(tこ11f・等をガス体
    とともに冷却室を通って内1jll壁(て白わせて循環
    させる循環手段を設け、ガス体の流路内に設置i’51
    .た熱伝導部制を含む熱交換丁二段を設け、前記冷却室
    を循環するガス体の熱伝導速度と冷却速度を調整する手
    段を設けて成る低温化装置。 (3)冷却室が通常円筒形状で、支持手段が冷却室の開
    目端とこの開目端を密封する開11可能の2:jから成
    る特許請求の範囲(2)K記載した低温化装置。 (41支持手段が冷却室の開11端近(の壁面にリブお
    よびこのリブ土に着脱可能に配置1へ−する複数の;t
    7!孔を有する通常円形の支持板から成り、 11.1
    ・等の吊下げ手段が前記支持板の通孔に着脱しく1ろよ
    うにして成る特許請求の範囲121に記11・Vした低
    温化装置。 (5)  熱交換手段が冷却室の内壁面に沿って1ln
    l+方向に延びている空気通路を含み、ガス体循ノζ2
    丁段が前記空気通路を通してガス体を排出するように成
    る特許請求の範囲(2)に記載した低温化装置1、(6
    )制御し予め定められた速度で胚その仙こA1に類する
    ものの温度を低下させる方法におし・で、f<i却’+
    ’、 i6よひこの冷却室内で胚等を着脱自在t’: 
    jT’r士げろ支持手段を設け、ガス体の循環1i’l
    路内に胚l!9をガス体とともに冷却室を通って閉回路
    に1丁)わぜて循環させろ循環手段を設け、ガス体の流
    路内に設置した熱伝導部利を含む熱交(勢T、段を設け
    、前舘冷却室を循環するガス体の熱伝導速度と冷却速度
    を調整する手段を設け、前記支持手段を前記循環手段に
    相対する冷却室の一端の壁面の熱交換手段と連結し、こ
    の熱交換手段は−50”Cまでガス体温度を低下させる
    機能を有する逆サーモカップルから成り、この11ηザ
    ーモカツプルは冷却室の外部に設置し、熱1、l(導部
    拐が冷却室の内部に空気の流れに平行に延ひて(・ろコ
    イルから成る低温化装置0f71  Jl&当間陥を1
    6いて平行に設置した邪魔板によ−)て、熱伝導部月を
    4’M切る循環手段からのガスで1、の流」1を拘束す
    7:、)ように軸線方向に延びろ流路イど形成する!1
    ′I′、i′1′、qlIf求の範囲(6)に記載した
    低温化装置1.
JP58138639A 1982-07-29 1983-07-28 胚等の凍結方法および低温化装置 Pending JPS5951201A (ja)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US402840 1982-07-29
US06/402,840 US4459825A (en) 1982-07-29 1982-07-29 Apparatus for controlled reduction in temperature and preservation of embryos in a cryogenic state

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JPS5951201A true JPS5951201A (ja) 1984-03-24

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ID=23593485

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP58138639A Pending JPS5951201A (ja) 1982-07-29 1983-07-28 胚等の凍結方法および低温化装置

Country Status (4)

Country Link
US (1) US4459825A (ja)
EP (1) EP0101906A3 (ja)
JP (1) JPS5951201A (ja)
GB (1) GB2135035B (ja)

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