JPS595184A - 免疫調節剤としてのイソキノリン誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 免疫抑制剤は、心臓移植、腎臓移植などの臓器移植手術
における役割のため、極めて重要になってきている。免
疫応答によるヒｌ−の防禦機構の一部は、外来抗原（上
記の場合は、移植臓器によって生産される）を除去する
ことにある。従って。

臓器移植手術においては、供与臓器に対する宿主の拒絶
を防止するために、術前および術後に継続して大量の免
疫抑制剤を投与する必要がある。

免疫応答は、外来物質（抗原）に対する二項応答（ｂｉ
ｍｏｄａｌ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　）に至る一連の細胞変
性および生化学変化によって構成される。この応答に関
与する細胞は、骨髄に由来する幹細胞から発生し。

末梢リンパ器官に送出される。抗原による刺戟があると
、生体の応答は、上記部位から血漿細胞（抗体を産生ず
る）および特異免疫リンパ球に達する。抗体は循環系に
放出され、産生細胞から離れたところで作用し得る（体
液性免疫）。特異免液リンパ球もまた循環系に入り、損
傷部位で作用する（細胞性免疫）。抗原と抗体の反応は
、好塩基性白血球からのヒスタミンの放出を誘発し１次
いでヒスタミンは血管の透過性を変える働きをし。

抗体および特異免疫リンパ球の損傷部位への流入を促す
。こうして免疫応答は１体内の色々な部位における細胞
系での一連の生化学的変化を含むものである。この応答
は、生化学的あるいは細胞変性過程の多くの段階で変更
され、抑制され得る。

抗ヒスタミン剤は、免疫応答における第二次反応にのみ
影響し、抗体産生細胞あるいは特異免疫リンパ球には直
接作用しない。現在、免疫抑制剤として用いられている
多くの薬剤は、免疫応答過程のさらに上位に作用する。

ある種の抗炎症性ステロイド、例えばコーチシンは、抗
体および特異免疫リンパ球の産生を抑制するが、正常の
リンパ組織をも抑制し、他にも好ましくない副作用を示
す。ある種の抗新生物剤１例えばアザチオプリン。

サイクロヘキサマイト、メトトレキセートは、免疫抑制
剤として使用されるが、これらもまた正常リンパ組織を
抑制し、さらに他の骨髄由来細胞を劇的に制止する。こ
れらの化合物は広範な型の細胞に対する毒性に基いて選
ばれているため、一般的な細胞毒性を有することが予想
される。

本発明の目的は、免疫応答の中で機能している細胞に作
用して哺乳類における免疫応答を変化させる化合物であ
って、現在免疫調節剤として利用されている化合物に見
られるある種の副作用や望才しくない性質を示さないも
のを提供することを目的とする。

置換７Ｈ−ベンゾイミダゾ［２，７−ａ］ベンゾ［ｄｅ
ｌイソキノリン−７−オン類は、”Ｒｉｎｇ　Ｉｎｄｅ
ｘ”　。

ｔｈｅ　Ａｍｅｒ　１ｃａｎ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　５ｏ
ｃｉｅｔｙ　、Ｎ１５　ｆ　／　Ｉに従って命名され１
次のように番号がつけられる。

！ ０ｋａｚａｋｉは１式Ｉで表わされ、Ｒが水素、メチル
。

メトキシまたは塩素である１０−および／ｌ−置換化合
物の製法を記載１ツている［０ｋａｚａｋｉ　、ｅｔ　
ａｌ。

Ｊ、　Ｓｏｃ、　Ｏｒｇ、　５ｙｎｔｈｅｔ、　Ｃｈｅ
ｍ、、　Ｊａｐａｎ、　／　３　、　Ｉ　Ｏ、／　７．
５：２Ｊ、ｇ　、　ｌｌ／　３（ｔ　９！；！；　）］
。同様に、Ａｒ１ｅｎｔとＭａｒｈａｎは。

Ｒが塩素、メチル、ニトロまたはアミノである関連化合
物の合成を記載している［Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎ　Ｃｚ
ｅｃｈ。

Ｃｈｅｍ、　Ｃｏｍｍｕｎ、　、　、２Ｊ’　、　／２
９２（／　９６３　）］　ｏ両文献とも、同じ二種類の
製造法を記載している。その第一の方法は、適当な０−
ニトロアニリン原料物質から製造した置換０−フェニレ
ンジアミンを一旦単離しまたは単離することなく（ｉｎ
　５ｉｔｕ）、これをＸ♂−ナフタリン酸無水物と反応
させるものである。ｉｎ　５ｉｔｕ　　で反応を行う場
合、酸無水物は、初めから存在させてもよいし、ジアミ
ンの生成後に加えてもよい。

第二の方法は、ナフタリン酸無水物と適当な置換ｏ−ニ
トロアニリンを反応させて中間体であるＮ−置換ナフタ
ルイミドとし１次いで化学的還元と縮合によりこれを最
終生産物（すなわち１式Ｉで表わされる）に変換するも
のである。

画法共、米国特許４１−．０９７．’ｌ−３；θ号に記
載されており、０−フェニレンジアミン類および０−ニ
トロアニリン類を３６−シヒドロキシナフタリン酸無水
物と反応させて９式Ｉで表わされる化合物の２゜ｊ−ジ
ヒドロキシ同族体を得ている。

これら三種の文献のすべてにおいて、対応する０−フェ
ニレンジアミン反応が二種の異性（１与えるかその可能
性があるときは、０−ニトロアニリンを使用する第二の
方法が第一の方法より優れているとされている。例えば
、　０ｋａｚａｋｉ（前記。

ｇ／？Ｊｍ）は３，１１．−ジアミノクロロベンゼンを
ナフタリン酸無水物と反応させた場合７０−クロロ体と
／／−クロロ体の比が４ｔ２：！；ｆであるのに対して
、適当な置換０−ニトロアニリンを酸無水物と反応させ
１次いで化学的還元および縮合を行えば純粋な異性体が
得られることを証明している。

Ａｒ１ｅｎも９Ｌｎｄ　Ｍａｒｌｌａｎ　（前記）は１
式■においてＲがニトロである化合物から如何に多くの
誘導体が得られるかを教示している。例えば、還元して
Ｒがアミノであるアニリン化合物とし１次いでサンドマ
イヤー反応による変換を行えば、Ｒが塩素である化合物
を得ることができる。

これらの文献において１式■の化合物は、染料および顔
料として使用するのに適する品質を有することが認めら
れている。最近、いくつかの誘導体が、エポキシ硬化剤
として、またグリース・シックナーとして有用であると
も言われている。

本発明によって１式Ｉ ［式中、Ｒは臭素、塩素、フッ素またはトリフルオロメ
チルを表わし、ｌ０位またはｌｔ位に結合している］ で表わされる化合物およびその製薬上許容される塩が医
薬として、さらに詳しくは温血動物における免疫抑制剤
として有用であることが見出された。

式Ｉの化合物は、Ｒが塩素である場合の遊離塩基を除い
て新規であり１本発明の一側面である。

本発明の好ましい化合物は１式■においてＲがｌ１位に
存在する場合である。特に好ましいのは／／−）リフル
オロメチル−７Ｈ−ペンツイミダゾ［，２，７−ａ］ベ
ンゾ［ｄｅ］イソキノリン−７−オンおよびその製薬上
許容される塩である。

本発明は、他の側面において９式Ｉで表わされる化合物
またはその製薬上許容される塩の製造法を提供する。こ
の製造方法は９式■ で表わされる化合物を分子内縮合反応に付し、必要に応
じてその生成物を製薬上許容される塩に変換することか
らなる。この縮合は、高温で実施するのが好ましく、多
くは適当な非反応性溶媒を使用し、およそｊθ−／ｆθ
°Ｃの間で実施される。

式Ｈの化合物は、置換０−フェニレンジアミンとナフタ
リン酸無水物との縮合によって製造され得ル。この０−
フェニレンジアミンは、適当な０−ニトロアニリン前駆
体を接触水素化するか、化学的に還元することによって
得られる。こうして製造されたジアミンは、単離した後
に酸無水物と反応させてもよいし、単離することなくそ
のま５酸無水物と反応させてもよいし、また酸無水物を
予め存在させて製造してもよい。適当な水素化触媒には
、他のものと共に、ラネーニッケル、パラジウム炭素、
酸化白金、スルフィド化白金炭素が含まれる。水素化条
件に影響しない溶媒９例えばエタノール、酢酸、テトラ
ヒドロフランなどが反応に使用される。化学的還元方法
には１例えば亜鉛もしくは鉄粉または塩化第一錫を酸２
例えば塩酸の存在下に用いることが含まれる。本発明の
実施には、一般に等モル量の０−フェニレンジアミンま
たは０−ニトロアニリン反応材と酸無水物が使用される
。しかし、必要ならいずれかの反応材を過剰に用いても
収率に対する悪影響はない。この反応は、１個の置換基
を有する０−フェニレンジアミンまたは０−ニトロアニ
リンから１式Ｉで表わされる化合物の２個の異性体を生
成する。これらの生成物は溶媒を留去することによって
回収され、結晶化および／またはクロマトグラフィーの
ような常法によって精製される。

別法としては、酸無水物を適当な０−ニトロアニリンと
、適当な非反応性溶媒中で加熱して縮合させて中間体Ｎ
−（置換−〇−二トロフェニル）ナフタルイミドを得る
ことができる。次いで還元して式Ｈのアミンとし、これ
を前記同様に加熱してやると式Ｈのアミンが式Ｉの単一
の異性体に変換される。

後者の方法は単一異性体化合物を製造するのに好ましい
が、ある場合には利用できないことが見出されている。

例えば、３．ｑ−ジアミノベンシトリフルオライドとナ
フタリン酸無水物との反応は期待どおり式Ｉの１０−お
よび／／−）リフルオロメチル体を与え、これらはクロ
マトグラフィーによって分離されるが、ｔ−アミノ−３
−ニトロペンシトリフルオライドを酸無水物と上記の方
法で接触させても予期に反して所望のイミド中間体を与
えない。しかしながら本発明は１式ＩにおいてＲがトリ
フルオロメチルである化合物の単一異性体化合物を直接
かつ効果的に製造する別法を提供する。

ナフタルイミドのアルカリ金属塩（例えば、ナフタルイ
ミドをアルカリ金属の炭酸塩、水酸化物などの塩基と反
応させて得られる）を、好ましくはヨウ化カリウム、フ
ッ化カリウムなどのアルカリ金属ハロゲン化物触媒の存
在下に、高沸点溶媒中でｌ−または、１−トリフルオロ
メチル置換〇−ニトロハロベンゼンと加熱すると、所望
のＮ−（トリフルオロメチル−置換−〇−二トロフェニ
ル）ナフタルイミドを得ることが見出された。この中間
体は、前記の方法により還元し、縮合させることができ
る。

ナフタルイミドとトリフルオロメチル−置換−〇−ニト
ロハロベンゼンとの反応を実施するのに効果的な温度は
、３θ−２θ０°Ｃの範囲を含み。

好ましくは１０θ−／ｆθ°Ｃであり、さらに好ましく
はｌゲθ−ｌ３０°Ｃである。適当な高沸点溶媒は１例
えばジグライム、Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジオ
キサンなどである。ｍ媒は、〇−ニトロハロベンゼン反
応材への好ましくない作用を最少にするため、実質的に
無水であるべきである。ナフタルイミド塩を形成し得る
好ましい塩基は、炭酸カリウム、水酸化ナトリウムなど
のアルカリ金属炭酸塩および水酸化物である。本発明の
必須事項ではないが、少量のアルカリ金属ハライド、例
えばフッ化カリウム、ヨウ化カリウムなどが本反応の触
媒になることが見出されている。従って１本反応の進行
を容易にするため１反応混合物中にこれらの化合物を存
在させることが望ましい。

一般に９本発明実施に際しては、ナフタルイミドは、／
、θ−２．ｊモル当量の塩基と、／−３モル当量の０−
ニトロハロベンゼンの存在下に反応させる。しかしなが
ら、これらの比は本発明の範囲を限定するものではない
。

本発明の製薬上許容される酸付加塩は、塩酸。

硝酸、リン酸、硫酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸などの
無機酸および脂肪族、芳香族スルホン酸などの有機酸か
ら誘導される塩を含む。この製薬上許容される塩には、
硫酸塩、硝酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸
塩、ベンゼンスルホンｅｍ、トルエンスルホン酸塩、ク
ロロベンゼンスルホン酸塩、キシレンスルホン酸塩、メ
タンスルホン酸塩、プロパンスルホン酸塩、ナフタレン
−７−スルホン酸塩、ナフタレン−ユニスルホン酸塩な
どが含まれる。本化合物環系の１３位の窒素原子をアル
キル化することによって得られるような第四級アンモニ
ウム塩もまた適当な製薬上許容される塩の範囲に含まれ
る。′製薬上許容される′塩とは、温血動物の化学療法
に使用される塩を意味する。

ナフタリン酸無水物およびナフタルイミドは市販されて
いる。反応材として必要な０−ニトロハロベンゼン、０
−ニトロアニリンおよび０−フェニレンジアミンもまた
市販されているか、適当な芳香族前駆体からアミノ化、
ハロゲン化、ニトロ化あるいは還元などの既知方法によ
って製造され得る。必要なペンシトリフルオライド反応
材は。

対応する安息香酸を四フッ化硫黄でフッ素化することに
よって製造され得る。

前述のとおり１式Ｉの化合物は哺乳類における免疫応答
を抑制するのに有用である。ここに言う抑制には、＠乳
動物生体が外来タンパク質の存在に対応して抗体および
活性細胞を産生する際に生じる免疫応答の抑制が含まれ
る。免疫抑制活性の実際的な応用は多様である。免疫抑
制活性の重要な応用は臓器移植にあるが、免疫抑制活性
はまた自己免疫性疾患として総括される諸種の疾病の治
療に際しても好都合に使用される。代表的な自己免疫性
疾患には、自己免疫溶血性貧血、特発性血小板減少性紫
斑病、狼癒紅斑、類狼癒性肝炎、狼癒性腎炎、糸球体腎
症、腎症々候群、グッドパスチュア症候群、ウエゲナー
肉芽腫症、浮腫性硬化症、セザリー病（Ｓｅｚａｒｙ’
ｓ　ｄｉｓｅａｓｅ　）　、乾癖、葡萄膜炎、リュウマ
チ性関節炎、潰瘍性大腸炎、甲状腺炎、おたふくかぜ畢
丸炎などが含まれる。

本発明による免疫抑制方法を実施するに際しては９式Ｉ
の化合物は経口的もしくは非経口的に投与され得る。使
用される活性物質の詳細な量は。

化合物毎に異なる。しカルながら１本発明化合物は高い
治療係数を有し、いずれの場合も有効かつ非毒性の用量
は広い範囲にわたっている。試験方法にもよるが１本発
明化合物のうち高活性のものについては、この範囲は、
小型哺乳動物で試験した場合、１日当りθスないし２ｊ
〜／ｋｑである。

本発明化合物の他のものについては、小型哺乳類におい
て、　７００　ｍｅ／ｋＱに達する用量を必要とする。

小型動物と大型動物とにおける他の薬剤の用量の関係に
基いて（例えば、アザチオプリンのネスミにおける用量
は約ｊθ〜／ｋｑであるのに対して、ヒトにおける用量
は約／−２ダ／ｋ（ｊである。

そのほか、　Ｃａｎｃｅｒ　Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ
　Ｒｅｐｏｒｔｓ　、　Ｊ”０．２　／　９（１９６乙
）参照）９本発明化合物のヒトに対する日用量は約θθ
３−１０ｑ／ｋＱと考えられる。

本発明方法のために好ましい製剤は２式■の活性化合物
とその投与経路に適したｌまたはユ種以上の補助剤から
なる。経口投与用の組成物は、適当な補助剤を用いたカ
ブ十ル剤１錠剤、丸剤、粉剤、乳剤、液剤、懸濁液、シ
ロップ剤またはエリキシル剤である。固形製剤の場合、
適当な補助剤にはシヨ糖、乳糖、デンプンのような不活
性物質が含まれる。液体製剤の場合、適当な補助剤には
水、鉱油、その他のものが含まれる。水溶液にしようと
する場合、酸付加塩が好都合に利用される。

固形または液状の製剤は、滑沢剤、湿潤剤、乳化および
懸濁剤、保存剤、甘味剤あるいは香料を含有してもよい
。

非経口投与の場合には１本発明化合物は適当な滅菌ずみ
の注射用液を用いて製剤される。静脈注射その他の注射
用には１例えば、製薬上許容される酸付加塩が８等張性
溶液に溶かして用いられる。

好ましい製剤は免疫抑制効果を得るための経口投与に適
した単位投与量剤形であって、−投与量単位当り１式１
の化合物の化学療法上適当な酸付加塩約θユないし約ｌ
θｏｏｔｎｙ、好ましくは約ユないし約２３０１ｎ’ｊ
と生理学的に許容される賦形剤を含む。

本発明をさらに説明するため、以下に実施例を示すが、
これらは本発明を限定するものではない。

実施例／ ／／−）リフルオロメチル−７Ｈ−ベンゾイミダゾ［２
，／−８］ベンゾ［ｄｅ］イソキノリン−７−オンの製
造 Ａ、２−（２−ニトロ−ｇ−）リフルオロメチルフェニ
ル）−／Ｈ−ベンゾ［ｄｅ］イソキノリン−１３（２Ｈ
）−ジオン Ｘざ−ナフタルイミドｌｊ７乙ｆ（０１モル）。

ｔ−クロロ−３−二ｌ・ロベンゾトリフルオライド２乙
Ｏｇ（１７３モル）、無水炭酸カリウム乙ｑｆ　（０，
’１６モル′）、ヨウ化カリウム約グｌ７（００２ｑモ
ル）および無水Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド２ゲθθ
ｔｒｔｌを窒素雰囲気中で約ｇ時間還流させた。

反応混液を室温まで冷やし０次いで反応容器を水浴中で
冷却した。生成した沈澱を戸数し、水で洗浄し、減圧乾
燥して粗製のニー（２−ニトロ−ゲートリフルオロメチ
ルフェニル）−／Ｈ−ベンゾ［ｄｅ］イソキノリン−１
３（２Ｈ）−ジオンを得た。

Ｂ、／／−）リフルオロメチル−７Ｈ−ベンゾイミダゾ
［！、ｔ−ａ、］ベンゾ［ｄｅ’］イソキノリン−７−
オン ２−（，２−ニトロ−４−トリフルオロメチルフェニル
）−／ＰＩ−ベンゾ［ｄｅ］イソキノリン−４３（２Ｈ
）−ジオン／３’／−，３ｇ（０３１１−７モル）を、
５％パラジウム−炭素ｌｊダの存在下、氷酢酸乙θθｍ
ｌ中、ｊ５’Ｃ，乙θｐｓｉで水素化した。

温度は約ｌθθ°Ｃまで上昇し、７３時間後に水素３当
量を吸収して温度は室温に戻った。反応混液を沸点まで
加熱し瓢、濾過して触媒を除去した。

冷後、析出した生成物を集め、２Ｂエタノールで洗浄し
た。Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミドから再結晶して、／
／−）リフルオロメチル−７Ｈ−ベンゾイミダゾ［２，
／　−ａ］ベンゾ［ｄｅｌイソキノリン−７−オン約１
．９．２ｆ（収率ｊ９％）を得た。

９約２７２−ユｌグ°Ｃ０ 元素分析　Ｃ，Ｈ，Ｆ３Ｎ、２０ 計算値：Ｃ，６７グｌ、；Ｈ，２，６ざ；Ｘ、と２１；
Ｆ、／乙、ざＳ 実験値：　Ｃ，ｌ、７／９；Ｈ，ふ＃Ｎ、７．９９゜Ｆ
、／１ｓＫ３ 式■においてＲがトリフルオロメチルである中間体アミ
ン、すなわちニー（ニーアミノ−ゲートリフルオロメチ
ルフェニル）−／Ｈ−ベンツ［ｄｅ］イソキノリン−４
３（，２Ｅ（１−ジオンは、還元をＤＭＦ中室温で行う
ことを除いて上記同様に反応処理して得られる。得られ
た生成物（収率ｊθ％）は望２１．／−２６２°Ｃを示
す。

実施例ユ ｔθ−および／／−）リフルオロメチルフェニル−７Ｈ
−ベンゾイミダゾ［，２，／−ａ］ベンゾ［ｄｅコイソ
キノリン−７−オンの別製法’Ａ　−７Ｆ、　／　−３
−二トロペンゾトリフルオライドユθ１，９（０１モル
）を、２Ｂエタノール３３０ｔｔｔｌ中、ラネーニッケ
ル約３ｇを用い、約６θｐ８１で接触還元した。吸収が
止った後、触媒を枦去し。

Ｐ液にナフタリン酸無水物／　９１９　（０／モ＃）を
加え、封管中／１０°Ｃで１６時間加熱した。冷後、析
出した固体を戸数し、酢酸エチルから再結晶した。上記
Ｐ液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、酢酸エチルを蒸
発させてさらに生成物を追加取得した。エタノールから
結晶化させることにより、９約／　９．！ｒ′Ｃ（ｄｅ
ｃ　）の物質を得た。両方の結晶化により合計７６．９
１（収率ｊ０％）を取得した。シリカゲル薄層クロマト
グラフィー（溶媒系：トルエンー酢酸エチル、ｌＡ：　
ｔ）により、ユ種類の主成分が略等量存在することが認
められた。

この混合物１０θｇを逆相高速液体クロマトグラフィー
に付し、低極性物質／／−）リフルオロメチル−７Ｈ−
ベンゾイミダゾ［，２，７−ａ］ベンゾ［ｄｅ］イソキ
ノリン−７−オン１３ｆ（酢酸エチルより黄色結晶とし
て得られ１ｍＰ約２／７−２７９°Ｃ）と、高極性物質
１０−トリフルオロメチル−７Ｈ−ベンゾイミダゾ［，
２，／−ａ］ベンゾ［ｄｅ］イソキノリン−７−オンＩ
ｆｆ／　（酢酸エチルより黄色結晶として得られ、ｔＰ
約２３７−２３９°Ｃ）とに分離した。

実施例３ １θ−および／／−クロロ−７Ｈ−ベンゾイミダゾ［２
，７−ａ］ベンゾ［ｄｅ］イソキノリン−７−オンの製
造 実施例ユの方法に従って、ｔ−クロロ−ニーニトロアニ
リン／’Ａ、ＺＱ（０７モル）をｊ％スルフィド化臼金
−炭素で接触還元し、ナフタリン酸無水物７９ｇｆ（０
７モル）と反応させてｌθ−および／ｌ−クロロ異性体
混合物を得た。収率６１％。望約ユθ０−２θ３°Ｃ（
Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミドより結晶化）。プレパラ
ティブＨＰＬＣおよび酢酸エチルからの再結晶により、
下記各異性体の純品を得た。

／ｌ−クロロ−７Ｈ−ベンゾイミダゾ［，２，７−ａ］
ベンゾ［ｄｅ］イソキノリン−７−オン、ＩＲｐ約２３
３−２３３′Ｃ 元素分析　ｃ　、、Ｈ，ＣＡＮ、０ 計算値：　Ｃ，７０９３；Ｈ，２，９ざｉＮ、５！／９
実験値：Ｃ１７０６ｇ；Ｈ，３，／ｌ、；Ｎ、９／６１
θ−クロロ−７Ｈ−ベンゾイミダゾ［２，ｔ　−−］ベ
ンゾ［ｄｅ］イソキノリン−７−オン、９約２２ｇ−２
３θ０Ｃ 元素分析　Ｃ、、Ｈ，ＣＡＮ、２０ 計算値：Ｃ１７θ９ｊ曇Ｈ、２，９ざ；Ｎ、９／９実験
値：Ｃ，７０乙１；Ｈ，，２，Ｉ７逼Ｎ、９３１１一実
施例グ ｌθ−および／／−プロモーフＨ−ペンツイミダゾ［２
，７−ａ］ベンゾ［ｄｅ］イソキノリン−７−オンの製
造 実施例ユの方法に従って、４ｔ−プロモーニーニトロア
ニリンを、酢酸ｌ００ｍｌ中で５％スルフィド化白金−
炭素により接触還元した。触媒を瀘去し、ナフタリン酸
無水物／９１Ｑ（０７モル）を２Ｂ工タノール３θＯｍ
ｌ中で加えた。実施例２に記載したように加熱し、冷浸
生成物を戸数した。

収率ｔθ％。を約／ざ乙−／ざに°Ｃ（Ｎ　、　Ｎ−ジ
メチルホルムアミドから再結晶）。プレパラティプＨＰ
ＬＣおよび酢酸エチルからの再結晶により。

下記各異性体の純品を得た。

／／−プロモーフＨ−ベンゾイミダゾ［２，７−ａ］ベ
ンゾ［ｄｅ］イソキノリン−７−オン、ＩＲＰ約ユθｇ
−２ＩＯ′Ｃ。

元素分析　Ｃｔ　ｒＨｙＢ　ｒＮＪ　Ｏ計算値：　Ｃ，
ｌ、１９／；Ｈ，２，６０；Ｎ、ざθ２実験値：　Ｃ、
Ａ／９．ｆｆ、Ｈ，ス、ｊゲ；Ｎ、７７６１０−プロモ
ーフＨ−ベンゾイミダゾＥ２．／　−ａ］ベンゾ［ｄｅ
］イソキノリン−７−オン、を約２θｇ−ユｔθ０Ｃ０ 元素分析　Ｃ、、Ｈ，Ｂ　ｒＮ、０ 計算値：　Ｃ，６１９／ｉＨ，，２，ｇθ；Ｎ、ざθユ
実験値：Ｃ１６７９３；Ｈ，λに’ｌ−；Ｎ、７７６実
施例！ ｌθ−おヨヒ／／−フルオロー７Ｈ−ペンツイミダゾ［
，２，／−ａ］ベンゾ［ｄｅ］イソキノリン−７−オン
の製造 実施例ユの方法に従って、≠−フルオロー、２−ニトロ
アニリン／１６ｆ（０７モル）’ｘ　、　２　Ｂ　ｘタ
ノール弘０θｔｔｔｌ中でラネーニッケルを用いて接触
還元した。触媒をＰ去し、ナフタリン酸無水物ｔ９１Ｑ
（Ｏｔモル）を加え、実施例２に記載したように加熱し
、冷浸生成物を炉腹した。テトラヒドロフランから結晶
化させ、収率ｔθ％で異性体温合物を得た。を約、２／
３−２／７°Ｃ０このうち約３７を用いてプレパラティ
ブＨＰＬＣを行い。

テトラヒドロフランから再結晶してｔ／−フルオロ−７
Ｈ−ベンゾイミダゾ［，２，７−ａｌベンゾ［ｄｅ］イ
ソキノリン−７一オン／乙ｇ、を約２．２ｇ−，２３０
°Ｃおよび少量ｌＯ−フルオロ異性体を得た。

／／−フルオロ−７Ｈ−ベンゾイミダゾ［２，／−ａ　
］　ヘンＪ　［ｄｅ］イソキノリン−７−オン元素分析
　Ｃ，、Ｈ，ＦＮ、２０ 計算値：　Ｃ，７３，００，Ｈ，、、’、／！；：Ｎ、
９７１実験値：０．７左の乱Ｈ９３，ユ／；Ｎ、９．７
３実施例乙 ／／−トリフルオロメチル−７Ｈ−ベンゾイミダゾ［２
，／　−ａ　］ベンゾ［ｄｅ］イソキノリン−７−オン
・グーメチルベンゼンスルホネートの製造／／−）リフ
ルオロメチル−７Ｈ−ベンゾイミダゾ［２／−ａ］ベン
ゾ［ｄｅ］イソキノリン−７一オン／ｇをＴＨＦ　２０
　ｍｌに溶かし、ｐ−トルエンスルホン酸モノハイドレ
ート０／ｆ／をＴＨＦ　／　Ｏｍｌに溶かして加えた。

この溶液を室温で攪拌すると結晶性沈澱が析出した。１
時間後、固体を炉腹し。

ＴＨＦで数回洗浄して目的物質を明黄色結晶として得た
。ラニー１．７−ユ２９°Ｃ０ 元素分析　ＣムＨ，７Ｎ、Ｏ□ＳＦ３ 計算値：Ｃ１乙１７７：Ｈ，３，３乙；Ｎ、５μ９実験
値：Ｃ１乙１３７；Ｈ，３，３３；Ｎ、盈６３実施例７ ／／−−クロロ−７Ｈ−ベンゾイミダゾ［２，／　−ａ
］”Ｃンソ［ｄｅ］イソキノリン−７−オン・ｇ−メチ
ルベンゼンスルホネートの製造 ／／−クロロー７Ｈ−ベンゾイミダゾ［２，／　−ａ］
ベンゾ［ｄｅ］イソキノリン−７−オン０／ｆヲＴＨＦ
約３０　ｍｌに溶かし、ｐ−トルエンスルホン酸θ／１
をＴＨＦ／θｍｌに溶かして加えた。室温に約３時間放
置した後、生成した結晶性沈澱を集め。

ＴＨＦで洗浄して目的物質を黄色結晶として得た。

望ユ氾θ−２，２３°Ｃ０ 元素分析　Ｃ，、Ｈ，７Ｎ、２０，５ＣＩＩ計算値：　
Ｃ，ｇ！９！；ｉｎ、３．３９．Ｎ、ｉｆ７実験値二〇
、乙２．９ざ；ＨｊＪ／；Ｎ、、＆ざｊ実施例ｇ ／３−メチル−７−オキソ−／ｌ−トリフルオロメチル
−７Ｈ−ベンゾイミダゾ［２，／　−ａ　］　ヘンツ［
ｄ　ｅｌイソキノリニウム・グーメチルベンゼンスルホ
ネートの製造 ／／−）リフルオロメチル−７Ｈ−ベンゾイミダゾ［，
２，／−ａ］ベンツ［ｄｅ］イソキノリン−７−オン乙
９（００／、８’モル）をｐ−）ルエンスルホン酸メチ
ル、２３ｍ１に加え、窒素雰囲気中において、約／θθ
°Ｃて約３時間放置した。冷浸、溶液をエーテルに圧加
した。固形物をン戸数し、メタノール−エーテルから２
回再結晶して所望の生成物ＩＡ７ｇ（収率ＳＯＳ％）を
得た。望約２６３−ス乙３６Ｃ。

元素分析　”２７Ｈ１９Ｆ３Ｎ、２０’ＩＳ計算値：Ｃ
２乙／ざ３；Ｈ，３，１，！；；Ｎ、！；、３’／−実
験値：　Ｃ，６１３’ｌ−、Ｈ，３，１，ＩＩ−、Ｎ、
ま／／実施例９−．２／ マウスにおける血球凝集素検定（経口投与１合併血清検
定） 一群ｊ匹からなる体重ユθｆの無作為飼育雄スイスマウ
スに、羊赤血球細胞３；’１．．１０７を静脈内に注射
した。この注射に用いた細胞は、牛革血液（Ａｌｓｅｖ
ｅｒの溶液）を０ｇ３％食塩水で３回洗浄して調製した
。各被験化合物は、ポリエチレングリコールグθθで可
溶化し、赤血球細胞の注射の３日前から、θ／　ｍｌず
つ９日間経口的に投与した。各化合物についてス倍ずつ
増量した数種類の投与を行ッた。コントロール群のマウ
スは、赤血球細胞の注射を受けたが、薬物に代えて担体
のみを９日間投与された。抗原注射の６日後に心臓穿刺
によ血球凝集素量の検定を行った。この検定は、０）、
！ｒ％羊赤血球懸濁液中の被験血清を微量滴定トレー中
で食塩水で倍数稀釈するようにプログラムされた”Ａｕ
ｔｏｔｉｔｅｒ　７０７機器（１ｍｅ８Ｄｉｖ、　、　
Ｍｉ　ｌｅｓ　Ｌａｂｏｒａｔｏ−ｒｉｅｓ　）を用い
て行った。１倍（７ｊ％）またはそれ以上の抗体減少（
被験血清においてコントロール血清に対して）が有意と
された。結果は、最少有効投与量（ＭＥＤ−７３％また
はそれ以上の抗体抑制を示す最少投与量）で表わした。

抗体産生抑制能力について３本発明化合物を試験した結
果は第１表にまとめられている。臨床上免疫抑制剤とし
て用いられているアサチオプリン（イムラン）は、この
試験においてｆ０θ１７ｇ／　ｋｑ×９のＭＥＤ値を示
す。

表　　　　ｌ ７Ｈ−ペンゾイミタゾ［，２，／−ａｌベンゾ［ｄｅｌ
ｌイソキノリン−７−オン（式Ｘ）の経口免疫抑制ＥＤ 被験化合物（Ｒ置換基）　　　　■／　ｋｇ×９　Ｐ、
　Ｏ。

ｌＯ−トリフルオロメチル　　　　　　　　２５．０１
１−）リフルオロメチル　　　　　　　　　θユｌＯ−
クロロ　　　　　　　　　　　　　　　３／″−り°°
　　　　　　　　　　　　　　　θ７１０−ブロモ　　
　　　　　　　　　　　／、２．３１１−ブロモ　　　
　　　　　　　　　　　／６／／−フルオロ　　　　　
　　　　　　　　　　　ｔユｊ１０−トリフルオロメチ
ル（メチル　ｐ　−ｔｏ。

トルエンスルホネート塩） ／／−トリフルオロメチル（メチル　ｐ−１６トルエン
スルホネート塩） ｆＯ−クロロ（メチル　ｐ−トルエン　　＞７００スル
ホネート塩） ／／−クロロ（メチル　Ｉ）−トルエン　　　１００ス
ルホネート塩） ／／−トリフルオロメチル（ｐ−トルエン　　　、３．
７スルホネート塩） ／／−クロロ（ｐ−トルエンスルホネ−ト塩） 実施例２２−、２．ｆｆ 個別血清検定法 本試験では．実施例９−、２／の方法を修飾し。

一群５匹の代りに一群／θ匹のマウスを用いた。

マウスは前記のようにして採血したが，血清は合併せず
，個々に検定した。平均血球凝集値（Ｉｏｇ．２）±Ｓ
．　Ｅ．　　を各群（７０匹）について計算し．コント
ロール群と対照してｐ値（Ｓｔｕｄｅｎも’ｓ　ｔ　Ｔ
ｅｓも）を求めた。抗体価を有意（ｐ＜０．０３）に低
下させる最低薬用量を終末用意としｔコ。薬物は，赤血
球細胞の注射の３日前から始めて７０日間経経口に投４
ｔ，．？こ。薬物は．ｏｆ２５％のメチルセルローズお
よび０．２％非イオン性乳化剤を含む食塩水からなる担
体に懸濁した。抗体（血球凝集素）の検定は．赤血球細
胞の注射から７日後に実施した。本発明の代表的化合物
についての個別血清試験で得られた結果は表■にまとめ
られている。アザチオプリンはこの検定系において．終
末投与量／θ０〜／ｋＱＸ／　Ｏ　Ｐ．　Ｏ．を示す。

（以下余白） 表　　　　■ 終末投与量 式ｌの化合物　　　　　　　　　　　（　ｐ＜００！ｒ
　）／／−トリフルオロメチル　　　　　　　　　０＜
１１／−クロロ　　　　　　　　　　　　　　　０．２
。

ｌ／−トリフルオロメチル（メチル　　　　１２，３ｐ
−）ルエンスルホン酸塩） ｌ／−ブロモ　　　　　　　　　　　　　／１．Ｊ実施
例ユ６−３θ 移植細胞対宿主反応（Ｇｒａｒｔ　Ｖｅｒｓｕｓ　Ｈｏ
ｓｔ　（ＧＶＨ）Ｒｅａｃｔｉｏｎ） 本試験では，親（Ｃ，５−７ＢＬ）マウスの婢細胞を。

Ｆ７交配種（Ｃ．ｔ７ＢＬＸＣ３Ｈ）のマウスに注射す
る。

受取側のマウスは注射された胛細胞を拒絶しない。

これは、交配種が同形の親（ｈｏｍｏｚｙｇｏｕｓ　ｐ
ａｒｅｎｔ）に由来するＣ．ｔ７ＢＬ関連抗原を．′自
身′と認識するからである。しかしながら、注射された
細胞は外来のＣ３Ｈ由来抗原のため受取側組織と反応す
る。

その結果、受取側の膵臓が肥大する。免疫抑制はこの肥
大を阻止し、または減少させる。従って。

胱臓の重量が、　ＧＶＨ反応および免疫抑制によるその
阻害の指標となる。

Ｓｉｍｏｎｓｅｎの方法（Ａｎｎ　Ｎ、　Ｙ、　Ａｃａ
ｄ、　Ｓｃｉ　８．７３　、ざ３ｔ（／　９！；Ｉ　）
）の変法を用いた。大量の牌細胞は、一般に用いられて
いる胱臓の厨子破砕を行わず、切断刃を逆にしたＷａ　
ｒ　ｉ　ｎｇのブレンターを用いて取得した。６秒ずつ
ユ回のブレンディングによって。

胱臓（食塩水、ｌ！ｒｍｌ中のＣｊ７ＢＬの膵臓２ｊ個
をｌバッチとした）は、充分に結合組織から遊離された
。後者は、数枚のチーズ布を通して瀘過することにより
除去した。こうして得た細胞懸濁液は。

Ｌｅｖｙ−Ｈａｕｓｓｅ　ｒのチャンバーカウントによ
り、／ｍｅ当り、６×／θ′個の有核細胞を含むように
標準化し　ｔこ　。

一群ｌθ匹からなる体重／４−／ＩｆのＣ，ｆｆ７ＢＬ
×Ｃ３Ｈマウスの腹腔内に、上記供与細胞懸濁液ｔｔｓ
ｌを注射した。被験化合物は、０７２５％メチルセルロ
ーズおよび０２％乳化剤（ｅｍｕｌｐｈｏｒ）を含む食
塩水からなる担体を用いて経口（Ｐ、　０．１　もしく
は皮下注射により、細胞注射の３日前から開始してｔ３
日間投与を続けた。コントロール動物は。

細胞と担体のみを与えられた。細胞注射のｔ０日後に胱
臓を摘出し１重量を測定して、ダ牌臓／ｇ体重の値を計
算した。

被験化合物は数段階の用量で投与し、各用量における肝
臓／体重の比の平均値を、担体のみを投与されたコント
ロール群と比較した。さらに、コントロール群との対比
によりｐ値（Ｓｔｕｄｅｎｔ’ｓ　ｔｗｏ−ｔａｉｌ　
ｔ　Ｔｅ５ｔ）を決定した。肝臓／体重比を有意（ｐく
θθｊ）に低下させる最少投与量を終末用量とした。本
発明化合物および標準化合物についての移植細胞対宿主
反応の結果は表■にまとめられている。

（以下余白） 表　　■ 終末用量 式Ｉの化合物　　　　　　　　　　　（ｐ＜θ０ｊ）ｌ
／−トリフルオロメチル　　　　Ｐ、Ｏ，／、２．．３
ｔｔ　　　　　　　　　　　　Ｓ、Ｃ，（θｌｌθｌｌ
ジールオロメチル　　　　Ｐ、Ｏ，＜Ｊ、左θ／／−ク
ロロ　　　　　　　　　　Ｐ、　Ｏ９／２．！；ｔ／−
ブロモ　　　　　　　　　Ｐ、Ｏ，＜ｌ：θｌｌ−トリ
フルオロメチル（メ　　Ｐ、Ｏ，／２．３チル　Ｉ）−
トルエンスルホネー ト塩） （標準化合物） アザチオプリン　　　　　　　　　Ｐ、Ｏ，／２．３サ
イクロホスホアミド　　　　　　Ｐ、Ｏ，／２Ｊコーチ
シン　　　　　　　　　　　Ｐ、０．　　　　３．／メ
トトレキセート　　　　　　　　Ｐ、０．　　　　　０
．２実施例３１ ラットのアジュバント関節炎試験 ラット、におけるアジュバント浮腫（Ａｄｊｕｖａｎｔ
　−１ｎｄｕｃｅｄ　ｅｄｅｍａ　’）による後肢腫脹
および管損傷に対する１ｉ−ｔ−リフルオロメチル−７
Ｈ−ベンゾイミダゾ［Ｊ、／−ａ］ベンゾ［ｄｅ］イソ
キノリン−７−オンの効果を試験した。アジュバント関
節炎による後肢腫脹の抑制を評価するために、炎症を次
の２相に区分した。（１）注射後肢における第を次およ
び第２次炎症、（２）非注射後肢における第２次炎症（
注射後肢における炎症の誘発から、一般に／／日程度で
発生する）。後者のタイプの炎症の抑制が免疫抑制に由
来する（Ｃｈａｎｇ、　Ａｒｔｈ、　Ｒｈｅｕｍ２θ、
／／３に一／／グ／　（／９７７　）参照）。比較評価
のための標準抗炎症化合物として、フェノプロフェン（
４ｔＯａｌ／ｋＱ　’Ｉを用いた（Ｎｉｃｋａｎｄｅｒ
、　ｅｔ　ａｌ　、　。

Ｆｅｄ、　Ｐｒｏｃ、　Ａｎｎｕａｌ　ＦＡＳＥＢ　Ｍ
ｔｇｓ　、、　Ａｐｒｉ　ｌ　、　／　９７７　、ＡＢ
Ｓ随２θｊ）。

アジュバント関節は、加熱殺菌後凍結乾燥したマイコバ
クテリウム・ラベルクロシス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅ　−
ｒｉｕｍ　ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ　、Ｃａｌｂｉｏ
ｃｈｅｍ−Ｐｅｒｒｉｇｅｎ−Ｃ）の０ｔ％鉱油懸濁液
θ／ｍｌを、　Ｌｅｗｉｓ−Ｗｉｓｔａｒ　ラット（体
重ユθθ−，２１０りの右後肢にｔ回注射（ａ　ｓｉｎ
ｇｌｅｐｌａｎＬａｒ　　１ｎｊｅｃｔｉｏｎ）し　？
、＝　　（Ｗｉｎｔｅｒ、　　ｅＬ　　ａｌ、　　Ａｒ
ｔｈ、　Ｒｈｅｕｍ、。

９．３９４ｔ−３９７（／９６６）の方法の変法）。を
群（ＴＢ−コント［Ｊ−ル）ｆθ匹のラットはこの処置
だけを受けた。他の群５匹のラットは無処置とした（普
通コントロール）。被験化合物は、１％カルボキシメチ
ル士ルローズに懸濁し、経口１日投与量／θ０１１／ｋ
Ｑ（試験／　）　オヨｌＦ３０Ｗ／ｋＱ　（試験２）で
各群５匹に投与した。投与は、アジュバント注射を行っ
た日に開始し、第２３日日まで（ユク回）行った。肢容
積は、　Ｓｔａｔｈａｍの圧カドランスジューサーおよ
びデジタル電圧計を用いて水銀置換により測定した。注
射および非注射の後肢容積は、／／日、／グ日、／１日
、ｌＩ日。

２１日、２３日および２ｊ日に測定した。Ｘ線写真は、
動物の屠殺後、２ｊ日に撮影した。非注射後肢の容積測
定は７７日から、２ｊ日まで実施し。

ＴＢコントロール群、普通コントロール群および薬物処
置群について、コンピューター・プロットした。そして
曲線間［（ＴＢコントロール−普通：］　ンｌ−ｏ−ル
）と（薬物処置−普通コントロール）］の面積を求めた
。その結果は表■にまとめられている。

表　　　　■ 非注射肢の炎症容積の抑制（／／日−，２，ｊ日）フェ
ノプロフェン　　　　　　グθ　　　　　４ｔｌＡθ／
／−トリフルオロメチル ソキノリン−７−オン 試験２ フェノプロフェン　　　　　　グθ　　　　　６０７／
／−トリフルオロメチル ソキノリン−７−オン １抑制率＋ｉ、／／日、／ＩＩ−日、ｌＡ日、１ｇ日。

２１日、１３日および２ｊ日についてプロットした非注
射肢平均容積の曲線下面積（ＡＵＧ）の相異であって１
次式により計算される。

非注射後肢のＸ線写真の概要によれば、処置ラットはＴ
Ｂコントロール群に対して９ゲ％（試験りおよびｆ♂％
（試験２）の骨損傷抑制を示した。注射後肢についても
、骨損傷の実質的抑制が見られた（試験／、１．ｇ％；
試験２６６％）。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １式■ ［式中、Ｒは臭素、塩素、フッ素またはトリフルオロメ
   チルを表わし、ｌ０位またはｌ１位に結合しているもの
   とする。］ で表わされる化合物またはその製薬上許容される塩を有
   効成分とし、これに製薬上許容される担体その他の補助
   剤の１種またはユ種以上を加えてなる医薬組成物。 ユ式ｌ （以下余白） ［式中、Ｒは臭素、塩素、フッ素またはトリフルオロメ
   チルを表わし、７０位またはｌ１位番こ結合しているも
   のとする。但し、化合物が遊離塩基であるとき、Ｒは塩
   素ではない。］ で表わされる化合物またはその製薬上許容される塩。 ３、Ｒがトリフルオロメチルである特許請求の範囲コ記
   載の化合物。 ｌＡ／３−メチル−７−オキソ−ｔ／−トリフルオロメ
   チル−７Ｈ−ペンゾイミグゾ［，２，ｔ−ｈ　］ベンゾ
   ［ｄｅ］イソキノリニウム・ｑ−メチルベンゼンスルホ
   ネートである特許請求の範囲ユまｔこ（よ３記載の化合
   物。 ４Ｒが臭素である特許請求の範囲２記載の化合物。 ６Ｒがフッ素である特許請求の範囲ユ記載の化合物。 ７式Ｉ ！ ［式中、Ｒは臭素、塩素、フッ素またはトリフルオロメ
   チルを表わし、ｌ０位または７７位に結合しているもの
   とする。但し、化合物が遊離塩基であるとき、Ｒは塩素
   ではない。］ で表わされる化合物またはその製薬的に許容される塩を
   製造するにあたり１式■ ［式中、Ｒは臭素、塩素、フッ素またはトリフルオロメ
   チルを表わし、２−アミノフェニル基のグ位才たは５位
   に結合している。］ で表わされるアミンを分子内縮合反応にＨし、必要に応
   じてその生成物を製薬上許容される塩に変換することを
   特徴とする製造方法。 と式■のアミンに対応するニトロ化合物の還元反応に引
   き続いて当該アミンを取り出すことなく分子内縮合を実
   施する特許請求の範囲７記載の方法。 ９式■ ［式中、Ｒは臭素、フッ素またはトリフルオロメチルを
   表わし、２−アミノフェニル基の１位または５位に結合
   している。］ で表わされる化合物。