JPS60161559A - 核酸の塩基配列決定装置 - Google Patents
核酸の塩基配列決定装置Info
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- JPS60161559A JPS60161559A JP59015226A JP1522684A JPS60161559A JP S60161559 A JPS60161559 A JP S60161559A JP 59015226 A JP59015226 A JP 59015226A JP 1522684 A JP1522684 A JP 1522684A JP S60161559 A JPS60161559 A JP S60161559A
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- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔発明の利用分野〕
本発明は、ＤＮＡ（デオキシリボ核酸）あるいはＲＮＡ
（リポ核酸）などの核酸における塩基配列を決定する装
置に関する。
（リポ核酸）などの核酸における塩基配列を決定する装
置に関する。
遺伝子工学の進歩に伴ない、遺伝情報を含んだＤＮＡあ
るいはＲＮＡの迅速な解読が必要となってきた。例えば
、ＤＮＡ上には、アデニン（Ａ）、クアニン（Ｇ）、シ
トシン（０） 、チミン（Ｔ）の４種類の塩基が配列さ
れ、遺伝情報はこれら塩基の配列で決定される。そこで
、生体における形質発現とＤＮＡ上の塩基配列との関係
について精力的に研究がなされている。そのためにはＤ
ＮＡ上の塩基配列を迅速に決定することが必要で、現在
までいくつかの決定方法が提案されている（「細胞工学
Ｊ Ｖｏｗ、 １ 、 Ｎ１１ 、 Ｎ１２ （１９８
２） ）。
るいはＲＮＡの迅速な解読が必要となってきた。例えば
、ＤＮＡ上には、アデニン（Ａ）、クアニン（Ｇ）、シ
トシン（０） 、チミン（Ｔ）の４種類の塩基が配列さ
れ、遺伝情報はこれら塩基の配列で決定される。そこで
、生体における形質発現とＤＮＡ上の塩基配列との関係
について精力的に研究がなされている。そのためにはＤ
ＮＡ上の塩基配列を迅速に決定することが必要で、現在
までいくつかの決定方法が提案されている（「細胞工学
Ｊ Ｖｏｗ、 １ 、 Ｎ１１ 、 Ｎ１２ （１９８
２） ）。
これらの提案された方法の中で最も広く用いられている
のが次に説明するＭａｘａｐｎ−ＧＨｂｅｒｔ法による
ＤＮＡ塩基配列の決定方法である。この方法では、次の
ステップによって決定される。
のが次に説明するＭａｘａｐｎ−ＧＨｂｅｒｔ法による
ＤＮＡ塩基配列の決定方法である。この方法では、次の
ステップによって決定される。
（１）配列決定をしようとするＤＮＡの７ラグメン覧
、トをまず分離する。
（２）分離されたＤＮＡフラグメントの両末端を放射性
リン（３２Ｐ）でラベルする。
リン（３２Ｐ）でラベルする。
（３）両末端がラベルされたＤＮＡ７ラグメントの二本
鎖を分離して、片方の末端のみが３２ｐでラベルされた
一本鎖ＤＮＡフラグメントを調製する０あるいは両末端
がラベルされたＤＮＡフラグメントを制限酵素で切断し
た後、ＤＮＡ断片を分離して、片方の末端のみが３２ｐ
でラベルされたＤＮＡフラグメントを調製する。
鎖を分離して、片方の末端のみが３２ｐでラベルされた
一本鎖ＤＮＡフラグメントを調製する０あるいは両末端
がラベルされたＤＮＡフラグメントを制限酵素で切断し
た後、ＤＮＡ断片を分離して、片方の末端のみが３２ｐ
でラベルされたＤＮＡフラグメントを調製する。
（４） 上記で得た、片方の末端が３２ｐでラベルされ
たＤＮＡフラグメントに、ＤＮＡ上の塩基Ｇを修飾する
化学物質を作用させ、ついで切断用の化学物質を作用さ
せて、修飾された塩基Ｇの部位で切断する。切断は各Ｄ
ＮＡフラグメントについて平均−回生起するようにする
。こうすると、第１（ｂ）図に示すように、３２ｐでラ
ベルされた一端を含みかつ他端が塩基Ｇの部位で切断さ
れた種々の長さのＤＮＡ７ラグメントが得られる。この
場合、第１（Ｃ）図に示すように、３２ｐにラベルされ
たニ端を含まないＤＮＡフラグメントも同時に得られる
が、後に述べるように３２ｐから放射される放射線を計
測するのでこれらは障害にならない。
たＤＮＡフラグメントに、ＤＮＡ上の塩基Ｇを修飾する
化学物質を作用させ、ついで切断用の化学物質を作用さ
せて、修飾された塩基Ｇの部位で切断する。切断は各Ｄ
ＮＡフラグメントについて平均−回生起するようにする
。こうすると、第１（ｂ）図に示すように、３２ｐでラ
ベルされた一端を含みかつ他端が塩基Ｇの部位で切断さ
れた種々の長さのＤＮＡ７ラグメントが得られる。この
場合、第１（Ｃ）図に示すように、３２ｐにラベルされ
たニ端を含まないＤＮＡフラグメントも同時に得られる
が、後に述べるように３２ｐから放射される放射線を計
測するのでこれらは障害にならない。
（５ン 同様のことを他の塩基Ａ％Ｏ，Ｔについて個々
に行なう。
に行なう。
なお、塩基Ａと塩基Ｔについては、これらの部位に夫々
特異的に作用する適切な化学物質がない。それゆえ、塩
基Ａの部位の切断には、例えば塩基Ｇと塩基Ａの双方に
作用する化学物質を用いて、塩基Ｇの部位及び塩基Ａの
部位での切断処理（Ｇ十Ａ）を行い、塩基Ｇの部位で切
断されたＤＮＡフラグメントのパターンが存在しない場
合を、塩基Ａの部位で切断されたＤＮＡフラグメントと
する。同様に塩基Ｔの部位の切断の場合には、例えば塩
基Ｃと塩基Ｔの双方に作用する化学物質を用いて、塩基
Ｏの部位及び塩基Ｔの部位での切断処理（０＋Ｔ）を行
い、塩基Ｃの部位で切断されたＤＮＡフラグメントのパ
ターンが存在しない場合塩基Ｔの部位で切断されたＤＮ
Ａフラグメントとする。こうして一端が３２ｐによって
ラベルされ、かつ他端がそれぞれ塩基Ｇ、Ｇ十Ａ、Ｏ＋
Ｔ 、０の部位で切 ゛断された４種類のＤＮＡ７ラグ
メントのグループを得る。
特異的に作用する適切な化学物質がない。それゆえ、塩
基Ａの部位の切断には、例えば塩基Ｇと塩基Ａの双方に
作用する化学物質を用いて、塩基Ｇの部位及び塩基Ａの
部位での切断処理（Ｇ十Ａ）を行い、塩基Ｇの部位で切
断されたＤＮＡフラグメントのパターンが存在しない場
合を、塩基Ａの部位で切断されたＤＮＡフラグメントと
する。同様に塩基Ｔの部位の切断の場合には、例えば塩
基Ｃと塩基Ｔの双方に作用する化学物質を用いて、塩基
Ｏの部位及び塩基Ｔの部位での切断処理（０＋Ｔ）を行
い、塩基Ｃの部位で切断されたＤＮＡフラグメントのパ
ターンが存在しない場合塩基Ｔの部位で切断されたＤＮ
Ａフラグメントとする。こうして一端が３２ｐによって
ラベルされ、かつ他端がそれぞれ塩基Ｇ、Ｇ十Ａ、Ｏ＋
Ｔ 、０の部位で切 ゛断された４種類のＤＮＡ７ラグ
メントのグループを得る。
（６） これらのＤＮＡフラグメントを各種類ごとに一
枚の電気泳動板（図示せず）上に並べて同時に泳動させ
る。
枚の電気泳動板（図示せず）上に並べて同時に泳動させ
る。
（７）適当な時間だけ泳動させた後、ゲルに写真乾板を
密着させ、３２ｐによる放射線に感光させる。
密着させ、３２ｐによる放射線に感光させる。
写真乾板には、塩基Ｇ、Ｇ十Ａ、０＋Ｔ 、Ｏで切断さ
れたフラグメントに対応した４本の帯状のパターンが得
られる。ＤＮＡフラグメントは、その塩基数に応じて泳
動速度が異なる。塩基数が少なくて短かいものほど速く
泳動するので、一端から他端へ速く移行する。
れたフラグメントに対応した４本の帯状のパターンが得
られる。ＤＮＡフラグメントは、その塩基数に応じて泳
動速度が異なる。塩基数が少なくて短かいものほど速く
泳動するので、一端から他端へ速く移行する。
（８）最後に、塩基Ｇ、Ｇ十Ａ、ｏ＋’ｒ 、Ｏで切断
されたフラグメントを短かい方から読み取っていくと、
３２ｐでラベルした末端側からＤＮＡ上の塩基配列を順
次決定できる。
されたフラグメントを短かい方から読み取っていくと、
３２ｐでラベルした末端側からＤＮＡ上の塩基配列を順
次決定できる。
この方法は、放射性リンを使用する必要があること、電
気泳動は数時間でできるが写真乾板へ感光させるのに約
−昼夜かかること、−回に約２００ないし３００塩基程
度までしか決定できない不便さがあることなどの問題が
あった。
気泳動は数時間でできるが写真乾板へ感光させるのに約
−昼夜かかること、−回に約２００ないし３００塩基程
度までしか決定できない不便さがあることなどの問題が
あった。
本発明の目的は、上記の問題点に鑑み、短時間で塩基配
列を容易に決定しうる装置を提供することにある。
列を容易に決定しうる装置を提供することにある。
本発明は、上記の目的を達成するために、その特徴とす
るところは、各塩基の部位で種々の長さに切断された核
酸の７２グメントが注入される槽と、前記核酸の７ラグ
メントをその分子量に対応した速度で前記槽内で移動さ
せる手段と、前記核酸の７２グメントの各移動経路上に
設けられ前記核酸の７ラグメントを検出する手段とを備
えた核酸の塩基配列決定装置にある。
るところは、各塩基の部位で種々の長さに切断された核
酸の７２グメントが注入される槽と、前記核酸の７ラグ
メントをその分子量に対応した速度で前記槽内で移動さ
せる手段と、前記核酸の７２グメントの各移動経路上に
設けられ前記核酸の７ラグメントを検出する手段とを備
えた核酸の塩基配列決定装置にある。
本発明の他の特徴は、各塩基の部位で種々の長さに切断
された核酸の７２グメントが注入される槽と、前記フラ
グメントをその分子量に対応した速度で前記槽内で移動
させる手段と、前記７ラグメントの各移動経路上に設け
られ前記フラグメントを検出する手段と、前記検出手段
からの検出信号に基づいて、フラグメントの塩基配列を
解読する手段とを備えた核酸の塩基配列決定装置にある
。
された核酸の７２グメントが注入される槽と、前記フラ
グメントをその分子量に対応した速度で前記槽内で移動
させる手段と、前記７ラグメントの各移動経路上に設け
られ前記フラグメントを検出する手段と、前記検出手段
からの検出信号に基づいて、フラグメントの塩基配列を
解読する手段とを備えた核酸の塩基配列決定装置にある
。
以Ｆ１本発明の一実施例を第２図および第３図に基づい
て説明する。
て説明する。
まず第一に、測定しようとするＤ Ｎ Ａをいくつかの
フラグメントに分割する。このＤＮＡの分割は、ＤＮＡ
上の特定の塩基配列部位を認識して切断することができ
る制限酵素を用いて行なわれる。
フラグメントに分割する。このＤＮＡの分割は、ＤＮＡ
上の特定の塩基配列部位を認識して切断することができ
る制限酵素を用いて行なわれる。
この制限酵素には、複数個（４個、６個等）の塩基配列
を認識して切断するようなものがある。こりして形成さ
れたフラグメントをＦ、 、 Ｆ２．・・・Ｆｎと呼ぶ
。これらのＤＮＡフラグメントの塩基配列を決定するこ
とが課題である。
を認識して切断するようなものがある。こりして形成さ
れたフラグメントをＦ、 、 Ｆ２．・・・Ｆｎと呼ぶ
。これらのＤＮＡフラグメントの塩基配列を決定するこ
とが課題である。
次に、各ＤＮＡフラグメントを分離精製した後、前述の
従来法に準じ処理して、片方の末端が３２ｐで、あるい
は蛍光物質で２ベルされたＤＮＡフラグメントを調製す
る。
従来法に準じ処理して、片方の末端が３２ｐで、あるい
は蛍光物質で２ベルされたＤＮＡフラグメントを調製す
る。
次に、４種の塩基Ｇ、Ｇ＋Ａ、Ｏ＋Ｔ、Ｏｔ−特異的あ
るいは選択的に修飾する化学物質によって修飾した後、
その修飾部位を選択的に切断する化学物質によって部分
切断する。
るいは選択的に修飾する化学物質によって修飾した後、
その修飾部位を選択的に切断する化学物質によって部分
切断する。
上記の７ラグメントＦ１のうち塩基Ｇの部位を部分切断
したものをＦＩＧと呼ぶこととする。フラグメン） Ｆ
ＩＧの中には、一端がラベルされ他端が塩基Ｇの種々の
部位でそれぞれ切断された７ラグメントおよび、両端と
も塩基Ｇの種々の部位で切断され、ラベルされていない
フラグメントが含まれる。これらのうち、一端がラベル
されたものだけに注目すると、一端がラベルされ、他端
が種々の塩基Ｇ部位で一回切断された大小の７ラグメン
トのセットができる。同様に塩基Ｇ＋Ａ、０＋Ｔ 。
したものをＦＩＧと呼ぶこととする。フラグメン） Ｆ
ＩＧの中には、一端がラベルされ他端が塩基Ｇの種々の
部位でそれぞれ切断された７ラグメントおよび、両端と
も塩基Ｇの種々の部位で切断され、ラベルされていない
フラグメントが含まれる。これらのうち、一端がラベル
されたものだけに注目すると、一端がラベルされ、他端
が種々の塩基Ｇ部位で一回切断された大小の７ラグメン
トのセットができる。同様に塩基Ｇ＋Ａ、０＋Ｔ 。
Ｃについても大小の７ラグメントのセットができる。
次に、これら４′種類の７ラグメントＦ□。。
ＦＩＧ＋Ａ ｌ ”ＩＣ＋Ｔ Ｉ ＦＩＣのセットを電
気泳動槽に注入して分離を行なう。大小の各７７グメン
トは、その長さによって泳動速度が異なるので分離され
、同じ長さのものは同速度で泳動する。従来法では。
気泳動槽に注入して分離を行なう。大小の各７７グメン
トは、その長さによって泳動速度が異なるので分離され
、同じ長さのものは同速度で泳動する。従来法では。
ここで、十分に泳動させた後に写真乾板を用いてバンド
を転写し、そのパターンを分析することによって塩基配
列を決定していた。本発明では、泳動を継続させながら
、その泳動路上の特定箇所を通過する放射線バンドある
いは蛍光物質でラベルされたバンドを検出する。
を転写し、そのパターンを分析することによって塩基配
列を決定していた。本発明では、泳動を継続させながら
、その泳動路上の特定箇所を通過する放射線バンドある
いは蛍光物質でラベルされたバンドを検出する。
第２図は、電気泳動槽と本発明による検出器、データ処
理装置、出力器などを備えた塩基配列決定装置を示して
いる。電気泳動槽１の両端には、それぞれ正負の電極２
Ａ、２Ｂを配置し、両電極２Ａ、２Ｂ間に電圧をかける
泳動駆動電源３を設置する。電気泳動槽１の上面には、
分離板４が設けられる。一端が塩基Ｇ、Ｇ十Ａ、Ｏ＋Ｔ
、Ｏで切断された４種の７ラグメントＦＩＧ ＋ ＦＩ
Ｇ＋Ａ ｒＦＩＣ＋Ｔ Ｉ ＦＩｃの泳動路上で分離板
４の所定位置４箇所に検出器５（イ）、５（ロ）、５（
ハ）、５（ニ）を設ける。検出器の数は４個に限らず、
５個の場合もあ）、この場合には１個はレファレンス用
として用いられる。又、４個を１組として複数組設けて
もよく、５個を１組としてそれを複数組設けてもよい。
理装置、出力器などを備えた塩基配列決定装置を示して
いる。電気泳動槽１の両端には、それぞれ正負の電極２
Ａ、２Ｂを配置し、両電極２Ａ、２Ｂ間に電圧をかける
泳動駆動電源３を設置する。電気泳動槽１の上面には、
分離板４が設けられる。一端が塩基Ｇ、Ｇ十Ａ、Ｏ＋Ｔ
、Ｏで切断された４種の７ラグメントＦＩＧ ＋ ＦＩ
Ｇ＋Ａ ｒＦＩＣ＋Ｔ Ｉ ＦＩｃの泳動路上で分離板
４の所定位置４箇所に検出器５（イ）、５（ロ）、５（
ハ）、５（ニ）を設ける。検出器の数は４個に限らず、
５個の場合もあ）、この場合には１個はレファレンス用
として用いられる。又、４個を１組として複数組設けて
もよく、５個を１組としてそれを複数組設けてもよい。
この検出器は、ＤＮＡ７ラグメントの一端におけるラベ
ルが３２ｐである場合には放射線検出器であシ、ラベル
が蛍光物質による場合には光検出器である。なお、放射
線の強度あるいは光の種類などを変えて各種の７ラグメ
ントの種類を識別できるようにすれば１個の検出器でも
よい。この、ｌＫ、１個の検出器が複数種の７ラグメン
トが通過したことを検出してもよい。これらの検出器５
（イ）、５（ロ）、５（ハ）、５（ニ）は泳動しながら
通過する各７ラグメントを検知し、検知信号を出す。
ルが３２ｐである場合には放射線検出器であシ、ラベル
が蛍光物質による場合には光検出器である。なお、放射
線の強度あるいは光の種類などを変えて各種の７ラグメ
ントの種類を識別できるようにすれば１個の検出器でも
よい。この、ｌＫ、１個の検出器が複数種の７ラグメン
トが通過したことを検出してもよい。これらの検出器５
（イ）、５（ロ）、５（ハ）、５（ニ）は泳動しながら
通過する各７ラグメントを検知し、検知信号を出す。
その状態を第３図に基づいて説明する。
第３図において、各フラグメントＦＩＧ Ｉ ＦＩＱ＋
Ａ ＩＦＩＣ＋Ｔ Ｉ ＦＩＣの泳動路上の検出器５（
イ）、 ５ （０） 。
Ａ ＩＦＩＣ＋Ｔ Ｉ ＦＩＣの泳動路上の検出器５（
イ）、 ５ （０） 。
５（ハ）、５（ニ）による検知信号は増幅器６で増幅さ
れる。増幅信号は時間の経過とともに増幅器６から第３
（ｂ）図に示すような信号として送シ出される。信号強
度のピーク部分は、各検出器５（イ）。
れる。増幅信号は時間の経過とともに増幅器６から第３
（ｂ）図に示すような信号として送シ出される。信号強
度のピーク部分は、各検出器５（イ）。
５（ロ）、５（ハ）、５（ニ）がそれぞれ塩基Ｇ、Ｇ十
Ａ、Ｏ＋Ｔ、Ｏのフラグメントの泳動を検知したことを
示している。
Ａ、Ｏ＋Ｔ、Ｏのフラグメントの泳動を検知したことを
示している。
次に、この増幅信号が第２図に示すデータ処理装置７に
入力されて、解読されて塩基配列が決定される。第３（
ｂ）図に示す信号のうち、図中下部に位置するピークは
、短時間で速く泳動したフラグメントを示し、長さが短
かく分子量の小さいＤＮＡフラグメントを検知したこと
を意味している。そこで、長さが１塩基変化する毎に検
出時間が異なるので、短時間であられれるピークから順
次読むことによシ塩基配列を決定することができる。た
とえば、第３（ｂ）図に示す信号については、フラグメ
ントＦ１ｏのラインからの信号が最初に出てくるので末
端は塩基Ｇであシ、次いで塩基Ａ。
入力されて、解読されて塩基配列が決定される。第３（
ｂ）図に示す信号のうち、図中下部に位置するピークは
、短時間で速く泳動したフラグメントを示し、長さが短
かく分子量の小さいＤＮＡフラグメントを検知したこと
を意味している。そこで、長さが１塩基変化する毎に検
出時間が異なるので、短時間であられれるピークから順
次読むことによシ塩基配列を決定することができる。た
とえば、第３（ｂ）図に示す信号については、フラグメ
ントＦ１ｏのラインからの信号が最初に出てくるので末
端は塩基Ｇであシ、次いで塩基Ａ。
Ｇ、Ｏ，Ａ、Ｔ、Ｏと順次配列が決定さ托ていく。
これらの出力はデータ処理装置７内で整理された後、配
列順に、出力装置８、例えばプリンタによってＧＡＧＯ
ＡＴＯなどの文字で出力される。
列順に、出力装置８、例えばプリンタによってＧＡＧＯ
ＡＴＯなどの文字で出力される。
なお、核酸の塩基配列決定装置としては、検出手段を備
えていればよく、前記の増幅器、データ処理装置、出力
装置などは所望によシ備えることもできる。
えていればよく、前記の増幅器、データ処理装置、出力
装置などは所望によシ備えることもできる。
本発明によれば次のような効果がある。
（１）従来のように電気泳動パターンを写真に撮る必要
がなく、短時間で、しかも泳動を継続しながら塩基配列
を決定することができる。
がなく、短時間で、しかも泳動を継続しながら塩基配列
を決定することができる。
（２）従来法では電気泳動に要する時間に非常な注意を
要していた。すなわち、時間が短かすぎると十分にＤＮ
Ａフラグメントが分離しないのでせいぜい１００塩基程
度しか解読できず、時間が長すぎると小さいＤＮＡ７ラ
グメントがゲルの終端に到達してしまい読みとれなくな
ってしまう。そこで、伺段かに分けて泳動させるという
手間がかかつていた。本発明によれば、小さいフラグメ
ントからゲルによる分離能の限界に至る程大きいフラグ
メントまでの測定をすることができる。
要していた。すなわち、時間が短かすぎると十分にＤＮ
Ａフラグメントが分離しないのでせいぜい１００塩基程
度しか解読できず、時間が長すぎると小さいＤＮＡ７ラ
グメントがゲルの終端に到達してしまい読みとれなくな
ってしまう。そこで、伺段かに分けて泳動させるという
手間がかかつていた。本発明によれば、小さいフラグメ
ントからゲルによる分離能の限界に至る程大きいフラグ
メントまでの測定をすることができる。
（３）以上のことはＲＮＡについても言える。
第１（ａ）図は、一端がラベルされたＤＮＡフラグメン
トを模式的に示した図である。第１（ｂ）図は、塩基Ｇ
に特異な反応によって第１（ａ）図に示すフラグメント
が塩基Ｇの部位でさらに切断されたＤＮＡフラグメント
を模式的に示した図である。 第１（Ｃ）図は、第１ （ｂ）図に示すＤＮＡフラグメ
ントを除くフラグメントを示した図である。第２図は、
本発明の一実施例を示す図である。第３図は、第２図中
の検出器と増幅器から出力された信号を示す図である。 １・・・電気泳動槽、２Ａ、２Ｂ・・・電極、３・・・
泳動駆動電源、４・・・分離板、５（イ）、５（ロ）、
５（ハ）。 ５（ニル・・検出器、６・・・増幅器、７・・・データ
処理装置、８・・・出力装置。 矛 １ 図 ■−−− 第 ２ 口 第 ３ 目
トを模式的に示した図である。第１（ｂ）図は、塩基Ｇ
に特異な反応によって第１（ａ）図に示すフラグメント
が塩基Ｇの部位でさらに切断されたＤＮＡフラグメント
を模式的に示した図である。 第１（Ｃ）図は、第１ （ｂ）図に示すＤＮＡフラグメ
ントを除くフラグメントを示した図である。第２図は、
本発明の一実施例を示す図である。第３図は、第２図中
の検出器と増幅器から出力された信号を示す図である。 １・・・電気泳動槽、２Ａ、２Ｂ・・・電極、３・・・
泳動駆動電源、４・・・分離板、５（イ）、５（ロ）、
５（ハ）。 ５（ニル・・検出器、６・・・増幅器、７・・・データ
処理装置、８・・・出力装置。 矛 １ 図 ■−−− 第 ２ 口 第 ３ 目
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、各塩基の部位で種々の長さに切断された核酸のフラ
グメントが注入される檜と、前記フラグメントをその分
子量に対応した速度で前記槽内で移動させる手段と、前
記フラグメントの移動経路上に設けられ前記フラグメン
トを検出する手段とを備えたことを特徴とする核酸の塩
基配列決定装置。 ２、前記槽が電気泳動槽であシ、前記移動させる手段が
前記フラグメントに電気泳動力を与える泳動駆動電源で
あることを特徴とする特許請求の範囲第１項に記載の核
酸の塩基配列決定装置。 ３、前記７ラグメントは放射性物質で２ベルされておシ
、前記検出手段は放射線検出器であることを特徴とする
特許請求の範囲第１項に記載の核酸の塩基配列決定装置
。 ４、前記フラグメントは蛍光物質でラベルされておシ、
前記検出手段は光検出器であることを特徴とする特許請
求の範囲第１項に記載の核酸の塩基配列決定装置。 ５、前記検出手段は４箇以上設けられることを特徴とす
る特許請求の範囲第１項に記載の核酸の塩基配列決定装
置。 ６、１個の前記検出手段は複数種の前記フラグメントの
検出を行なうことを特徴とする特許請求の範囲第１項に
記載の核酸の塩基配列決定装置。 ７、各塩基の部位で種々の長さに切断された核酸の７ラ
グメントが注入される槽と、前記７ラグメントをその分
子量に対応した速度で前記槽内で移動させる手段と、前
記フラグメントの移動経路上に設けられ前記フラグメン
トを検出する手段と、前記検出手段からの検出信号に基
づいて、フラグメントの塩基配列を解読する手段とを備
えたことを特徴とする核酸の塩基配列決定装置。 ８、前記槽が電気泳動槽であシ、前記移動させる手段が
前記フラグメントに電気泳動力を与える泳動駆動電源で
あることを特徴とする特許請求の範囲第７項に記載の核
酸の塩基配列決定装置。 ９．前記フラグメントは放射性物質で２ベルされておシ
、前記検出手段は放射線検出器であることを特徴とする
特許請求の範囲第７項に記載の核酸の塩基配列決定装置
。 １０、前記フラグメントは蛍光物質でラベルされておシ
、前記検出手段は光検出器であることを特徴とする特許
請求の範囲第７項に記載の核酸の塩基配列決定装置。 １１、前記検出手段は４箇以上設けられることを特徴と
する特許請求の範囲第７項に記載の核酸の塩基配列決定
装置。 １２．１個の前記検出手段は複数種の前記フラグメント
の検出を行なうことを特徴とする特許請求の範囲第７項
に記載の核酸の塩基配列決定装置。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59015226A JPH0610665B2 (ja) | 1984-02-01 | 1984-02-01 | 核酸の塩基配列決定装置 |
| JP5114374A JPH0734005B2 (ja) | 1984-02-01 | 1993-05-17 | 核酸の塩基配列決定装置 |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59015226A JPH0610665B2 (ja) | 1984-02-01 | 1984-02-01 | 核酸の塩基配列決定装置 |
| JP5114374A JPH0734005B2 (ja) | 1984-02-01 | 1993-05-17 | 核酸の塩基配列決定装置 |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5114374A Division JPH0734005B2 (ja) | 1984-02-01 | 1993-05-17 | 核酸の塩基配列決定装置 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60161559A true JPS60161559A (ja) | 1985-08-23 |
| JPH0610665B2 JPH0610665B2 (ja) | 1994-02-09 |
Family
ID=26351346
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59015226A Expired - Lifetime JPH0610665B2 (ja) | 1984-02-01 | 1984-02-01 | 核酸の塩基配列決定装置 |
| JP5114374A Expired - Lifetime JPH0734005B2 (ja) | 1984-02-01 | 1993-05-17 | 核酸の塩基配列決定装置 |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5114374A Expired - Lifetime JPH0734005B2 (ja) | 1984-02-01 | 1993-05-17 | 核酸の塩基配列決定装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
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| JP (2) | JPH0610665B2 (ja) |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61173158A (ja) * | 1985-01-02 | 1986-08-04 | カリフオルニア・インステイテユ−ト・オブ・テクノロジ− | Ｄｎａ配列決定法 |
| JPS62110152A (ja) * | 1985-06-17 | 1987-05-21 | イ− ジ− アンド ジ− インコ−ポレ−テツド | 生物的高分子のサイズ測定用装置 |
| EP0268406A3 (en) * | 1986-11-06 | 1988-06-22 | AMERSHAM INTERNATIONAL plc | Apparatus for biochemical sequencing |
| JPH01299463A (ja) * | 1988-05-27 | 1989-12-04 | Hitachi Ltd | Ｄｎａ検出装置 |
| US5338687A (en) * | 1992-09-11 | 1994-08-16 | Lee Lawrence L | Detection of biological macromolecules by NMR-sensitive labels |
| US5821058A (en) * | 1984-01-16 | 1998-10-13 | California Institute Of Technology | Automated DNA sequencing technique |
| USRE43096E1 (en) * | 1984-01-16 | 2012-01-10 | California Institute Of Technology | Tagged extendable primers and extension products |
| US8097405B1 (en) | 1982-06-23 | 2012-01-17 | Enzo Biochem, Inc. | Nucleic acid sequencing processes using non-radioactive detectable modified or labeled nucleotides or nucleotide analogs, and other processes for nucleic acid detection and chromosomal characterization using such non-radioactive detectable modified or labeled nucleotides or nucleotide analogs |
Family Cites Families (1)
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-
1984
- 1984-02-01 JP JP59015226A patent/JPH0610665B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
1993
- 1993-05-17 JP JP5114374A patent/JPH0734005B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8097405B1 (en) | 1982-06-23 | 2012-01-17 | Enzo Biochem, Inc. | Nucleic acid sequencing processes using non-radioactive detectable modified or labeled nucleotides or nucleotide analogs, and other processes for nucleic acid detection and chromosomal characterization using such non-radioactive detectable modified or labeled nucleotides or nucleotide analogs |
| US5821058A (en) * | 1984-01-16 | 1998-10-13 | California Institute Of Technology | Automated DNA sequencing technique |
| US6200748B1 (en) | 1984-01-16 | 2001-03-13 | California Institute Of Technology | Tagged extendable primers and extension products |
| USRE43096E1 (en) * | 1984-01-16 | 2012-01-10 | California Institute Of Technology | Tagged extendable primers and extension products |
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Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0610665B2 (ja) | 1994-02-09 |
| JPH0643135A (ja) | 1994-02-18 |
| JPH0734005B2 (ja) | 1995-04-12 |
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