JPS60181099A - オリゴペプチド - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は鎮痛作用を有するオリゴペプチドに関するもの
であり、詳しくは式（１） ％式％（１） （式中、ＸはＴｈｒ−！３ｅｒ−Ｌｙｓ、　Ｔｈｒ−Ｐ
ｒｏ−Ｌｙｓ。

５ｅｒ−ＬｙｓまたはＩ、ｙｓを表わす。ただしＨ−Ｌ
−Ｔｈｒ−Ｌ−８ｅｒ−Ｌ−Ｌｙｓ”Ｌ−Ｔ７ｒ−Ｌ−
Ａｒｇ−ＯＨを除く）で表わされるオリゴペプチド及び
その塩に関するものである。

゛尚、一本明細書中において使用されるアミノ酸残基の
略号は、当該分野の慣用にならったものであり１次の略
号が使用される。

Ａｒｇ　：アルギニン Ｔｙｒ　：チロシン ＬｙＳ：リジン Ｓｅｒ　：七リン Ｐｒｏ　ニブロリン Ｔｈｒ　：スレオニン 本発明者の１人である高木らは、ウシ脳から内在性鎮痛
物質ネオキョートルフィン（Ｈ−Ｌ−Ｔｈｒ−Ｌ−８ｏ
ｒ−Ｌ−Ｌｙｓ−Ｌ−Ｔｙｒ−Ｌ−Ａｒｇ−ＯＨ）を単
離（Ｈ，Ｔａｋａｇｉ　ｅｔ　ａｌ、、　ＬｉｆｅＳｃ
ｉ、、８１．１７８８（１９８２））した。ネオキョー
トルフインは、その構造中にキョートルフィン（Ｈ−Ｌ
−Ｔｙｒ−Ｌ−Ａｒｇ−ＯＨ）（ＨｏＴａ−ｋａｇｉ　
ｅｔ　ａｌ、、　Ｎａｔｕｒｅ　、　２８Ｊ　４１０（
１９７９）　）を含むこと、マウスにおいてナロキソン
で部分的に拮抗される鎮痛作用を有することから新しい
タイプの鎮痛薬として期待されている。

本発明者らは、経済的に有利で、化合物として安定であ
り、充分な鎮痛効果のある化合物を得るべく鋭意検討の
結果、ネオキョートルフインより強力な鎮痛作用を有す
る化合物を見出し本発明を完成した。

本ＣＩ）に示した本発明のオリゴペプチドは公知の手段
を用いた化学的合成法により得ることができる。すなわ
ち１本オリゴペプチドの合成は液相法でも固相法でも可
能である。

ペプチド合成におけるペプチド鎖の延長方法には、アミ
ノ酸を逐次延長してゆくステップワイズエロンゲーショ
ン法とアミノ酸数個からなるフラグメントをあらかじめ
合成しておき１次いでフラグメントの間でカップリング
するフラグメントコンデンセーション法とがあるが９本
オリゴペプチドはいずれの方法によっても製造すること
ができる。

縮合方法としては、アジド法、混合酸無水物法、ジシク
ロへキシルカルボジイミド（ｐｅａ）法、活性エステル
法、カルボジイミダゾール法。

酸化還元法、ジフェニルリン酸アジド（ＤＰＰＡ）法、
　ＤａＣ＋添加物（１−ヒドロキシベンゾトリアゾール
、Ｎ−ヒドロキシサクシンイミド。

Ｋ−ヒドロキシ−５−ノルボルネン−２，８−ジカルボ
キシイミド等）法、ウッドワード試薬Ｋを用いる方法等
をあげることができる。

溶媒としては、ペプチド縮合反応に使用しうることか知
られているものから適宜選択されつる。たとえば、ジメ
チルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、ヘキサメチ
ルホスホロアミド。

ジオキサン、テトラヒドロフラン、酢酸エチル。

クロロホルム、ジク四ルエタンまたはこれらの混合物が
あげられる。

反応温度としては、特に制限がなく広い範囲内で適宜選
択できるが、一般には一り０℃〜８０℃程度の温度にて
反応を行うのが好ましい。

尚１本発明のオリゴペプチドの製造にあたり。

反応に関与しないアミノ酸あるいはペプチドのカルボキ
シル基は、一般にはエステル化することにより、すなわ
ち、低級のアルキルエステル（メチルエステル、エチル
エステル、第三級ブチルエステル等）、アラルキルエス
テル（ベンジルエステル、ｐ−メトキシベンジルエステ
ル。

ｐ−ニトロベンジルエステル等）として保護すれる。反
応に関与しないアミ７基の保護基として、ベンジルオキ
シカルボニル基、ｐ−メトキシベンジルオキシカルボニ
ル基、ホルミル基。

第三級ブチルオキシカルボニル基、トリフルオロアセチ
ル基等、ペプチド合成・化学の分野で通常使用されてい
る保護基を例示することができる。

さらに、側鎖に官能基を有するアミノ酸のうち、　Ｔｙ
ｒの水酸基はアセチル基、ベンジル基。

ベンジルオキシカルボニル基、第三級ブチル基等で保護
されることがあるが、必ずしも常に保護する必要はない
。また、　ＴｈｒあるいはＳｅｔの水酸基についてもア
セチル基、ベンジル基、第三級ブチル基、テトラヒドロ
ピラニル基、ベンジルオキシカルボニル基等で保護され
ることがあるが、必ずしも常に保護する必要はない。

Ａｒｇのグアニジ７基の保護基としては１例えば、ニド
ｔ４＊　）シル基、ｐ−メトキシベンゼンスルホニル基
、メシチレン−２−スルホニル基、ベンジルオキシカル
ボニル基、インボルニルオキシカルボニル基、アダマン
チルオキシカルボニル基等を示すことができる。

保護基を有するアミノ酸、ペプチドフラグメント、さら
に最終的に製造された保護基のついたオリゴペプチドの
脱保護は２通常、この分野で使用されている方法、すな
わち、パラジウム黒、パラジウム炭素、白金等を触媒と
する接触還元法、液安ナトリウム法、トリフルオロ酢酸
法、臭化水素法、塩化水素法、フッ化水素法。

酢酸法、ギ酸法、メタンスルホン酸法、トリフルオロメ
タンスルホン酸法等により行われる。

尚、酸を用いる方法においては、アニソール。

チオアニソール等のカチオン捕捉剤の添加が有効である
。

保護基を有するアミノ酸、ペプチドフラグメント、保護
基のついたオリゴペプチド、さらに最終的に製造された
オリゴペプチドは、ペプチドを分離するのに通常、採用
されている手段。

例えば、抽出、再沈澱、シリカゲルクロマトグラフィー
、イオン交換クロマトグラフィー、向流分配、ゲルクロ
マトグラフィー等により容易に単離精製される。　一 本発明のオリゴペプチドは医薬的に許容されちる酸と容
易に酸付加塩を形成させることができ、斯かる塩も１本
発明化合物に包含される。

用いられる酸としては９例えば、塩化水素、臭化水素等
のハロゲン化水素、硫酸及び硝酸等の無機酸並びにシー
ウ酸、マレイン酸、クエン酸。

酒石酸、酢酸、ｐ−トルエンスルホン酸等の有機酸等を
あげることができる。

尚１本発明のオリゴペプチドには、光学異性体及びラセ
ミ体のいずれも包含する。

次に９本発明のオリゴペプチドの試験例を示す。

試験例 ｄａ−に系雄性マウス（１４−１７ｇ）を１群ｌＯ匹ず
つ用い、試験化合物を生理食塩水に溶解し、無麻酔下、
大槽内に投与した。鎮痛作用はＴａ１ｌ　−Ｐｉｎｃｈ
法（Ｈ，Ｔａｋａｇｉ　ｅｔ　ａｌ、、　Ｊａｐａｎｅ
ｓｅＪ、　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、、　１６．２８７（１
９６６）　）により測定した。試験化合物は容量依存的
に鎮痛作用が認められ、これらの鎮痛作用の５−０％有
効量（ＲＤｓｏ　）は次表の通りである。

試験化合物はいずれも、ネオキョートルフインより強い
鎮痛効力を示す。また１モルヒネやエンケファリンとは
興なり、オピオイドレセプターに対する直接作用はない
ことから、非オピオイド性鎮痛ペプチドと考えられ９本
発明のオリゴペプチドがモルヒネの有する好ましくない
副作用、すなわち２便秘、呼吸抑制、血圧降下。

縮瞳、依存性等を伴なわない安全かつ有用な。

作用機作の点でも新しいタイプの鎮痛薬となることが大
いに期待される。

本発明のオリゴペプチドは主として、非経口的（静脈内
、皮下等）に投与されるが、場合によっては経口投与さ
れることもある。投与量は広い範囲から適宜選択され２
例えば大人で１〜１００１１１９／に９ｌ日の範囲が適
当である。

以下に実施例をあげ本発明を説明するが、これは本発明
の技術的範囲を制限するものではない。

尚、実施例中の略号は当該分野での慣用に従い、下記の
略号を使用する。また、使用するアミノ酸は、特にこと
わらない限りＬ型を意味する。

Ｚ（ＯＭｅ）　：　ｐ−メトキシベンジルオキシカルボ
ニル ２　：ペンジルオキシ力ルボニル Ｔｏｓ　：　ｐ−トルエンスルホニル Ｂｏａ　：第三級ブチルオキシカルボニルＢｚｌ　：ベ
ンジル Ｏ８ｕ　：Ｎ−ヒＦロキシサクシンイミトエステル ＯＮＢ　：Ｎ−ヒドロキシ−５−ノルボルネン−２，８
−ジカルボキシイミドエ ステル ＤＭＦ　ニジメチルホルムアミド ＴＦＡ　：）リフルオロ酢酸 ｎｃｃ　ニジシクロへキシルカルボジイミドｏｇｔ　：
エチルエステル ＯＭｅ　：メチルエステル また薄層クロマトグラフィー（Ｔｂｃ）は特にことわら
ない限りはシリカゲルを用い、溶媒系は次の通りである
。

Ｒｆｌ；クロロホルム：メタノール：水−８，：８：１ Ｒｆｚ　；　ｎ−ブタノール：酢酸：ピリジン：水−４
：　１　：　１　：　２ Ｒｆ３；ｎ−ブタノール′：酢酸：ピリジン：水−４：
１：１：５ 実施例１ ■ｚ（ｏＭｅ　）−ｔ、ｙｓ（ｚ　）−Ｔｙｒ−Ｄ−Ａ
ｒｇ（Ｔｏｓ　）−ｏｌ（ｚ（ｏＭｅ　）−Ｌｙｓ（Ｚ
　）−Ｔｙｒ−ＮＨＮＨ＋　（３，１０ｇ）　。

８．９　Ｎ　Ｈｅ１−ジオキサン（８，８１ｎｔ）、亜
硝酸イソアミル（０，６７−）、）リエチルアミン（２
，１記）より調整したアジドのＤＭＦ溶液＜　８　Ｍ）
とトリエチルアミン（１，０５−）を含むＨ−Ｄ　−Ａ
ｒｇ（Ｔｏｓ）−０Ｈ（、２，４６９’）のＤＭＦ溶液
（２０づ）を混合して、４°Ｃで２４時間攪拌する。Ｄ
ＭＦを留去後、残渣を酢酸エチル及び１０％クエン酸溶
液に溶解し、酢酸エチル層を１０％クエン酸、飽和食塩
水、水で順次洗浄する。硫酸す）　ＩＪウムで乾燥後、
酢酸エチルを留去。残渣度エーテルで粉末化。更にシリ
カゲルカラムクロマトグラフィーに付し、クロロホルム
：メタノール−２０＝１で溶出。ＴＬＧでピュアな画分
を集め、溶媒留去後エーテルで粉末化する。

収量：ａ、２ｇ（ｌｏ％）、融点１８８．’１８５°Ｃ
２Ｒｆ、　−０，１８゜ 元素分析　Ｃ４５Ｈｓｓ？Ｊｙｏ＋２ｓ−１，５ＨｚＯ
計算値　Ｃ５７，１８，Ｈ６，１９，Ｎ　１０．８７実
測値　Ｃ５７，０！、Ｈ５，８０，Ｎ　１０．０８■Ｚ
（ＯＭｅ　）−Ｔｈｒ−８ｅｔ−Ｌｙｓ（Ｚ　）−Ｔｙ
ｒ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）ＯＨ ２（ＯＭｅ　）−Ｌｙｓ（Ｚ）−Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｒｇ（
Ｔｏｓ）−０Ｈ（１，３８２）にアニソール（０，’？
−）を加え。

水冷下ＴＦＡ（８ｍｌ）で４５分間処理をする０ＴＦＡ
を留去後、エーテルを加えて粉末とした。

濾取しＫＯＨ上で２時間減圧乾燥。Ｚ（ＯＭｅ　）−Ｔ
ｈｒ−８ｅｒ−ＮＨＮＨ２（１，１５り）　、　ｓ、９
　Ｎ　Ｈａｔ−ジオキサン（２Ｊｔｄ）、亜硝酸イソア
ミル（０，４０ｇ）、トリエチルアミン（１，２６ｆｎ
ｌ）から調整したアジドのＤＭＦ溶液（１５ＷＬｔ）と
、トリエチルアミン（ｏ、ｚ１＋ｄ）を含む上記トリペ
プチドのＴＦＡ塩のＤＭＦ溶液（１５ｔｄ）を混和し。

４°Ｃで２４時間攪拌する。ＤＭＦを留去後、残渣を酢
酸エチルと１０％クエン酸に溶解し、酢酸エチル層を１
０％クエン酸、飽和食塩水及び水で順次洗浄。硫酸す）
　ＩＪウムで乾燥後、酢酸エチルを留去し、残渣にエー
テルを加えて粉末化。メタ／−ルー酢酸エチルから再結
晶を行った。収量１．０８ｇ（６５％）、融点１１５〜
１１７°Ｃ、Ｒｆｌ−０，１４゜ 元素分析　Ｃ５２ＨｓｙＮ９０＋　６８−Ｈ２０計算値
　Ｃ５５，５５，Ｈ６，１９，Ｎ　１１．２１実測値　
Ｇ　５５．５５．　Ｈ６，２９，Ｎ　１１．０７■Ｈ−
Ｔｈｒ−８ｅｒ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｒｇ−ＯＨ２
（ＯＭｅ　）−Ｔｈｒ−８ｅｒ−Ｌｙｓ　（Ｚ　）−Ｔ
ｙｒ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ　）−ＯＨ（０，５５９）に
チオアニソール（８，１ｆｎ！−）。

０−クレゾール（２，７ｉ）ｔＪＩＪｃ、　ＴＦＡ（１
２ｍ）で水冷下８０分間、続いてトリフルオロメタンス
ルホン酸（１，２ｄ）を加えて１時間、更に室温に戻し
て１時間処理をする。

、ｌｏ”ｃでＴＦＡを留去したのち、ｎ−ヘキサンで３
回洗浄。残渣を水（５ｋｉ）に溶解し、アンバーライト
ＩＲ−４００樹脂（アセテートサイクル、５ｇ）を加え
て８０分間攪拌。樹脂を濾去後、濾液を５％アンモニア
でｐＨ１０に調整し８０分間攪拌。８％酢酸でｐＨ７に
戻したのち、凍結乾燥した。凍結乾燥品を３％酢酸（５
ｆｎｌ）に溶解し、セファデックスＧ−１５（３，Ｏｘ
　Ｉ　０５ｃｍ）のカラムに付し、同一溶媒で溶出した
。各フラクション（１０ｇ）の２７５　ｎｍでの吸光度
を測定し、目的物画分（試験管番号２５−８４）を集め
て凍結乾燥した。（収量２９５Ｔｎ９）。更にこの粉末
をｎ−ブタノール；酢酸：水−４：１：５（７ζ）の有
機層（上層）（５−）に溶解し、セファデックスＧ−２
５（２，４Ｘ９０Ｃｆｉ）の分配）ｙ　ｏ　−ｔ　）　
り５フイーに付した。同溶媒で約８５〇−溶出したのち
、同一溶媒系の下層に変えて溶出した。各フラクション
（８り）の’Ｉ’ＬＣを検討し、ニンヒドリンでシング
ルスポットの両分（試験管番号１８−１７）を集め、溶
媒を８０℃で留去したのち凍結乾燥をくり返して粉末と
した。収量１８４■（５６％）　、　、Ｒｆｚ　−０，
１７（セルロース）。酸分解後のアミノ酸分析：　Ｔｈ
ｒ　Ｏ，９８゜Ｓｅｒ　Ｏ，９０，Ｌｙｓ　１．０２．
　Ｔｙｒ　１．００．　Ａｒｇ　Ｏ，８５゜元素分析　
０２ＢＨ４７Ｎ９０９・２ＣＨ３ＣＯＯＨ−４，５Ｈ２
０計算値　Ｃ４４，９５，Ｈ７，５５，Ｎ　１４．７５
実測値　Ｃ４４，９０，Ｈ７，６２，Ｎ　１４．７５実
施例２ ■Ｚ（ＯＭｅ　）−、Ｄ−Ｌｙｓ（Ｚ　）−Ｔｙｒ−Ｏ
ＲｔＺ（ＯＭｅ）−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｚ）−０Ｈ（８，０９
）をＤＭＦ（５ａｄ）に溶解し、水冷下ＤＯＣ（４，１
２９）を加え、トリエチルアミン（２，５ｆｎｌ）で中
和したＨ−Ｔｙｒ−ＯＥｔ　・塩酸塩（４，９１ｇ）の
ＤＭＦ（１００ｍ７）溶液を混和して、室温で２４時間
攪拌する。反応中析出するウレア誘導体を濾失後、ＤＭ
Ｆを留去し、残液を酢酸エチルに溶解し１０％クエン酸
、５％炭酸ナトリウム、飽和食塩水、水で順次洗浄する
。硫酸す）　ＩＪウムで乾燥後、酢酸エチルを留去。石
油エーテルとエーテルの混合溶液を残渣に加えて粉末化
する。

酢酸エチル−エーテルで再結晶する。収量７．１９（５
６％）、融点１２６ｗ１２９℃、Ｒｆ、−−０，６１゜ 元素分析　０３４Ｈ４１Ｎｓｏ９ 計算値　０６４．２４．　Ｈ６，５０，Ｎ　６．６１実
測値　Ｃ６４，８４，Ｈ６，８８，Ｎ　６．８１■ｚ（
ＯＭｅ　）−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｚ　）−Ｔｙｒ−ＮＨＮＨｚ
Ｚ（ＯＭｅ）”Ｄ−Ｌｙａ（Ｚ）−Ｔｙｒ−ＯＥｔ　（
６，８６Ｌｉ　）をメタノール及びＤＭＦの混合溶媒（
８０ｔｎｌ−８０ｔｄ）に溶かし、８０％抱水ヒドラジ
ン（５，Ｏｍｊ）を加えて室温で一晩攪拌する。溶媒を
十程度まで濃縮したのち、メタノールで希釈し、生成す
る結晶を濾取。冷メタノールでよく洗浄する。収量５．
８ｇ（８５％）、融点２１４〜２１６℃、　Ｒｆ、　−
０，４５゜ 元素分析　ＣＣ５２Ｈａ９Ｎ５０ 計算値　Ｃ６１，８２，Ｈ６，８２，Ｎ　１１．２７実
測値　Ｃ６１，６２，Ｈ６，８１，Ｎ　１０．９７■Ｚ
（ＯＭｅ　）−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｚ）−Ｔｙｒ−Ａｒｇ（Ｔ
ｏｓ　）−ＯＨｚ（ｏＭｅ　）−ｐ−ｔ、ｙｓ（ｚ　）
−Ｔｙｒ−ＮＨＮＨ２（８，１０ｇ）　。

８ＮＨＣ１−ジオキサン（ａ、ａｔｙ）、亜硝酸イソア
ミル（０１１／）及びトリエチルアミン（１，４ｄ）か
ら調製したアジドのＤＭＦ（３０−）溶液と、トリエチ
ルアミン（１，０５ｉ）を含むＨ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−
０Ｈ（２，４６９）のＤＭＦ（２５ｍ／）溶液を混合し
て４°Ｃ″′Ｃ″４８時間反応する。ＤＭＦを留去し、
残渣を酢酸エチル及び１０％クエン酸溶液に溶解し、酢
酸エチル層を１０％クエン酸、飽和食塩水、水で順次洗
浄。

硫酸ナトリウムで乾燥後、酢酸エチルを留去し。

残渣にエーテルを加えて粉末化。酢酸エチル−エーテル
から２度再結晶した。収量４．１０９（８９％）、融点
１０４．’１０６℃、Ｒｆ１−０．１７゜ 元素分析　０４５Ｈ６５Ｎ７０１２Ｓ 計算値　（ｊ　５８．８７．　Ｈ６，０４，Ｎ　１０．
６８実測値　Ｃ５８，８０，Ｈ６，３０，Ｎ　１０．２
４■Ｚ　（ＯＭｅ　）−Ｔｈｒ−８ｅｒ−Ｄ−Ｌｙｓ（
Ｚ　）−Ｔｙｒ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ　）ＯＨ ２（ＯＭｅ）−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｚ）−Ｔｙｒ−Ａｒｇ（Ｔ
ｏｓ）−０Ｈ（１，３８９）にアニソール（０，７ＷＬ
ｌ）を加え。

水冷下’ｆ　ｐ　Ａ　（３ｍｌ　）で８０分間処理をす
る。

ＴＦＡを留去後、エーテルを加えて粉末化。濾取してＫ
ＯＨ上で減圧乾燥する。Ｚ　（ＯＭｅ　）−Ｔｈｒ−ｇ
ｅｒ−ＮＨＮ＆（０，７７り）ｔａＮａｃｌ−ジオキサ
ン（１，８ｆｒＬｌ）、亜硝酸イソアミル（０，２７ｉ
）。

トリエチルアミン（０，５６ｔｄ）より調製したアジド
のＤＭＦ（２５ｆｎｔ）溶液と、トリエチルアミン（ｏ
、ｚｌｉ）を含むＨ−Ｄ−Ｉ、ｙｓ（Ｚ）−Ｔｙｒ−Ａ
ｒｇ（Ｔｏｓ）−０ＨＴ　Ｆ　Ａ塩のｎＭＦ（２５ｉ）
溶液を混合し、４℃で４８時間攪拌する。ＤＭＦを留去
し、残渣を酢酸エチル及び１０％クエン酸に溶解し、酢
酸エチル層を１０％クエン酸。

飽和食塩水、水で順次洗浄。硫酸ナトリウムで乾燥後、
酢酸エチルを留去。エーテルを加えて粉末化する。メタ
ノール−エーテルより再結晶。

収量１．１５９（６９％）、融点１０４〜１ｏ６°Ｃ２
Ｒｆ、　−０，１７゜ 元素分析　Ｃ５ｚＨ６ｙｌｈ０１５Ｓ−８２０計算値　
Ｃ５５，５５，Ｈ６，１９，Ｎ　１１．２１実測値　Ｃ
５５，４６，Ｈ６，０２，Ｎ　１０．９０■Ｈ−Ｔｈｒ
−９ｅｒ−Ｄ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＯＨＺ　（Ｏ
Ｍｅ　）−Ｔｈｒ−８ｅｒ−Ｄ−Ｌｙｓ　（Ｚ　）−Ｔ
ｙｒ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−０Ｈ（５ｓ　８　ｍｙ　）に
チオアニソール（８，１ｍ／）、Ｑ−クレゾール（ｇ、
７ｉ）を加えてＴＦＡ（１ｊＱ＠／）で水冷下８０分間
９次いでトリフルオロメタンスルホン酸（１，２ｄ）を
加えて水冷下１時間、更に室温に戻して１時間攪拌する
。３０℃でＴＦＡを留去したのち、ｎ−ヘキサンで洗浄
。残渣を水（５ｏｄ）に溶解し。

アンバーライトエＲ−４０９（アセテートサイクル、５
り）と共に室温で８０分間攪拌する。

樹脂を濾去後、濾液を５％アンモニア水でｐＨ１０に調
整し攪拌する。８０分後、８％酢酸でｐＨ７に戻し、凍
結乾燥。得られる粉末を８％酢ｍ（５−＝／）に溶解し
、セファデック７、Ｇ−１５（ｉｌｌ、２Ｘ１２９Ｃｆ
ｆＬ）のカラムに付し、同一溶媒で溶出。各フラクショ
ン（８り）の２７５ｒＬｍでの吸光度を測定し、試験管
番号４０−５８の両分より凍結乾燥後２１５■の粗粉末
を得た。更にこの粉末をｎ−ブタノール：酢酸：水−４
：１：５（”乙）の上層（有機層）（５−／）に溶解い
セファデックスＧ−１５（２，４Ｘ１０５ＣＩ１１）の
分配クロマトに付す。有機層を約５００−流したのち、
同−溶媒系の下層（水層）に溶出溶媒を変え、各フラク
ション（１２９）のＴＬＯをそれぞれチェックする。ニ
ンヒドリンで単一スポットを示す両分（試験管番号１ｌ
−１８）を集めて溶媒を留去ののち凍結乾燥をくり返す
。収量１４（１１１９（４３％）、Ｒｆ２−０．０８゜ 元素分析　Ｃ２５Ｈ４ｙＮ９０９−２ＣＨ３ＣＯＯＨ・
８Ｈ２０計算値　Ｃ４６，４２，Ｈ７，４８，Ｎ　１５
．１実測値　Ｃ４６，２５，Ｈ７，２５，Ｎ　１４．９
５酸加水分解後のアミノ酸分析値：　Ｔｈｒ　１．０１
゜Ｓｅｒ　Ｏ，９８，Ｌｙｓ　Ｏ，９６，Ｔｙｒ　１．
００．　Ａｒｇ　Ｏ，９００実施例８ ■Ｚ（ＯＭｅ　）　−Ｔｈｒ−Ｄ−８ｅｒ−ＯＭｅＺ（
ＯＭｅ）　−Ｔｈｒ−ＮＨＮＨ２（９，０９）　、　８
．９　Ｎ　ＨＯＩ−ジオキサン（１５，４ｖｃｌ　）　
、亜硝酸イソアミル（４，０ｔｄ）、）リエチルアミン
（８，４ｏｇ）がら調製したアジドのＤ　Ｍ　Ｆ　（ｓ
　ｏｗ　）溶液ト、）リエチルアミン（５，，６ｍｌ）
を含むＨ−Ｄ−８ｅｒ−ＯＭｅ−塩酸塩（６，４１のＤ
ＭＦ（２５ｍ／）溶液とを混合し、４℃で４８時間攪拌
する。ＤＭＦを留去し、残渣を酢酸エチルと水に溶解し
た後、１０％クエン酸、５％Ｎ　Ｃ２Ｃ０３，飽和食塩
水。

水で順次洗浄。硫酸す）　ＩＪウムで乾燥後濃縮し。

残液にエーテルを加えて結晶化する。酢酸エチル−エー
テルから再結晶。収量６．５９（５６％）。

融点１２９〜１３０℃、　Ｒｆ、　−０，５４゜元素分
析　Ｃ１ｘｔＨ２ｔＮｚＯａ 計算値　Ｃ５８，１礼　Ｈ６，２９，Ｎ　７．２９募着
値　Ｃ５８，０８，Ｈ６，８９，Ｎ　７．１９■Ｚ（Ｏ
Ｍｅ　）−Ｔｈｒ−Ｄ−８ｅｒ−ＮＨＮＨ２Ｚ（ＯＭｅ
）−Ｔｈｒ−Ｄ−８ｅｒ−ＯＭｅ　（５，７６９）をメ
タノール（１００ｉ）に溶解し、８０％抱水ヒドラジン
（７，５ｉ）を加えて室温で２４時間攪拌する。析出す
る沈殿物を濾取し、冷メタノールで２回洗浄する。収量
４．７５９（８２％）。

融点２０４〜２０６°Ｃ：　＋　Ｒｆｌ　”−０−２６
。

元素分析　Ｃ１６）（２４Ｎ４０７ 計算値　Ｃ４９，９９，Ｈ６，２９，Ｎ　１４．５８実
測値　Ｃ４９，４２，Ｈ６，５６，Ｎ　１５．０１■ｚ
（ＯＭｅ　）−Ｔｈｒ−Ｄ−８ｓ　ｒ−Ｌｙｓ　（Ｚ　
）−Ｔｙｒ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ　）−ＯＨ ２（０Ｍ６　）−Ｌｙｓ（Ｚ　）−Ｔｙｒ−Ａｒｇ（Ｔ
ｏｓ　）−ＯＨ（，１，８８り）にアニソール（０，７
ｍ）を加え。

Ｔ、ＦＡ（８ｍ／）で水冷下８０分間処理。ＴＦＡを留
去後、エーテルを加えて粉末とし、濾取。

ＫＯＨ上で２時間減圧乾燥する。ｚ（ｏＭｅ　）−Ｔｈ
ｒ−Ｄ−８ｅｒ−ＮＨＮＨ２（０，７７９）　ｔ　８−
９　Ｎ　ＨＧＩ−ジオキサン（１，１ｄ）、亜硝酸イソ
アミル（０，２７−）、トリエチルアミン（０，５６ｍ
／）より調製したアジドのＤ　Ｍ　Ｆ　（２ｓ　ｍｌ　
）溶液と、トリエチルアミン（０，２１ｄ）を含む上記
のＴＦＡ塩のｎ１ａＦ（２ｏ−）溶液を混合し、４°Ｃ
で２４時間攪拌する。ＤＭＦを留去した後、残渣をｎ−
ブタノールに溶かし、１０％クエン酸、飽和食塩水、水
で洗浄。硫酸す）　ＩＪウム上で乾燥した後、ｎ−ブタ
ノールを留去。エーテルを加えて粉末化。更にシリカゲ
ルカラムクロマトに付し、クロロホルム：メタノール：
水−８：８：１（％）の溶媒系で溶出。ＴＬＣで単一ス
ポットの画分を集め、濃縮後エーテルを加えて粉末化し
た。収量８２０■（４９％）、融点１８８〜１８５℃、
　Ｒｆｌ　−０，１８゜ 元素分析　Ｇ５２ＨｅｙＮｅｏ１ａｓ−１，５Ｈ２０計
算値　Ｃ５５，１１，Ｈ６，２２，Ｎ　１１．１２実測
値　Ｃ５５，０３，Ｈ６，１９，Ｎ　１０．９５■Ｈ−
Ｔｈｒ−Ｄ−８ｅｒ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＯＨｚ
（ＯＭｅ　）−Ｔｈｒ−Ｄ−８ｅｒ−Ｌｙｓ（Ｚ　）−
ｒｙｒ−＊ｒｇ（Ｔｏｓ　）−ｏＨ（５５ａＷ１９）に
チオアニソｌｋ　（８，１’　）　＊Ｏ−クレゾール（
２，７ｉ）を加え、ＴＦＡ（１２ｔａ／）で氷冷下８０
分間２次いでトリフルオロメタンスルホン酸（１，２ｄ
）を加えて水冷下３０分間、室温に戻して１時間攪拌す
る。

８０℃でＴＦＡを留去したのち、ｎ−ヘキサンで洗浄。

残渣を水（５ｏｉ）に溶解し、アンバーライトＩＲ−４
０，０（アセテートサイクル。

５ｇ）と共に室温で８０分間攪拌する。樹脂を濾去後、
濾液を５％アンモニア水でｐＨ１０に調整し８０分間攪
拌。８％酢酸でｐＨ７に戻して凍結乾燥する。得られる
粉末を８％酢酸（５−）に溶解し、セファデックスＧ−
１５（，９，ＯＸ　Ｉ　Ｑ　５Ｃｍ　）のカラムに付し
、同一溶媒で溶出する。各７ラクシヨン（１０９）の２
７５　ｎｍでの吸光度を測定し、試験管番号２５−８４
の両分を集め凍結乾燥。更にこの粗粉末をｎ−ブタノー
ル：酢酸：水−４：１：５（％）の上層（５−）に溶解
し、セフ７デツクスＧ−２５（２，４Ｘ９０Ｃｆｆｌ）
の分配クロマトに付す。同一溶媒で約５００−溶出した
のち、同一溶媒系の下層に変えて溶出。各フラクション
（１０９）のＴＬＣを調べ、ニンヒドリンで単一スポッ
トを示す両分（試験管番号９−１２）を集め、溶媒留去
後、凍結乾燥をくり返し粉末とする。収量２９７■（９
１％）、　Ｒｆ２−’０．２５　（セルロース）。

元素分析　Ｃ４５ＨａｌＮｅＯｅ−２ＣＨａＣｉＯＯＨ
−４Ｈ２０計算値　Ｃ４５，４３，Ｈ７，５１，Ｎ　１
４．９０Ｍ値　０４５．４４．　Ｈ７，２３，Ｎ’１４
．９０酸分解後のアミノ酸分析値：　Ｔｈｒ　１．０４
．５ｅｒＯ，９９，Ｌｙｓ　１．００．　Ｔｙｒ　１．
００．　Ａｒｇ　１．０８゜実施例４ ■Ｚ（ＯＭｅ　）−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｚ　）−Ｔｙｒ−Ｄ−
Ａｒｇ（Ｔｏｓ　）−ＯＨ２（ＯＭｅ）−Ｄ−Ｌｙｓ（
Ｚ）−Ｔｙｒ−ＮＨＮＨｚ（０，９８ｇ）＋８．０ＮＨ
（３／−ジオキサン（１−０”　）　＋亜硝酸イソアミ
ル（０，２０ｔｎｌ）、）リエチルアミン（０，４２ｙ
ｄ）から調製したアジドのＤＭＦ（２０ｍ／）溶液と、
トリエチルアミン（０，８２ｍ／）を含むＨ−Ｄ−Ａｒ
ｇ（Ｔｏｓ）−０Ｈ（０，７４９）のＤＭＦ（２０１１
１７）溶液を混合して、４℃で４８時間攪拌する。ＤＭ
Ｆを留去して残渣を酢酸エチル及び１０％クエン酸に溶
解して、酢酸エチル層を１０％クエン酸、飽和食塩水、
水で順次洗浄。硫酸す）　ＩＪウムで乾燥後、濃縮。エ
ーテルを加えて粉末化する。酢酸エチル−エーテルから
再結晶。収！１．１（１（８０％）、融点１８５〜１８
７℃、　Ｒｆ、　−０，１０゜元素分析　Ｃ４５Ｈ５５
Ｎ７０１２Ｓ 計算値　Ｃ５８，８７，Ｈ６，０４，Ｎ　１０．６８実
測値　０５８．４０．　Ｈ６，１１，Ｎ　１０．１０■
Ｚ（ＯＭｅ　）−Ｔｈｒ−８ｅｒ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｚ　）
−Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ（０，９２９）
にアニソール（ｏ、５ｆｎｌ）を加え、水冷下ＴＦ＊（
２，０−）で８０分間処理をする。ＴＦＡを留去後、エ
ーテルを加えて粉末化し、濾取。ＫＯＨ上で減圧乾燥す
る。

Ｚ（ＯＭｅ）−Ｔｈｒ−８ｅｒ−ＮＨＮＨｚ　（０，７
７９）　、　８．０ＮＨＣ１−ジオキサン（１，８８ｉ
）、亜硝酸イソアミル（０，２７ｇＬｔ）、）リエチル
アミン（０，５６−）から調製したアジドのＤ　Ｍ　Ｆ
　（２０ｍｌ　）溶液と、トリエチルアミン（０，１４
ｍ／）を含むＨ−ｎ−ｒ、ｙｓ（ｚ）−ｒｙｒ−ｎ−＊
ｒｇ（Ｔｏｓ）−ｏＨ−Ｔ　Ｆ　Ａ塩のｐＭｐ（２０＋
７）溶液とを混合して、４℃で４８時間攪拌する。ＤＭ
Ｆを留去し、残渣を酢酸エチルと１０％クエン酸に溶解
する。酢酸エチル層を１０％クエン酸、飽和食塩水、水
で順次洗浄。硫酸す）　ＩＪウムで乾燥後、酢酸エチル
を濃縮。エーテルを加えて粉末化する。メタノール−エ
ーテルより再結晶。収量０．５４９（４９％）、融点１
０５〜１０７℃、Ｒｆ、−０．０９゜ 元素分析　Ｃ５ｚＨ６ｙＮ９０１６８　＋Ｈ２０計算値
　０５５．５５．　Ｈ６，１９，Ｎ　１１．２１実測値
　Ｃ５５，８８，Ｈ６，４６，Ｎ　１０．６３■Ｈ−Ｔ
ｈｒ−８ｅｒ−Ｄ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｒｇ−ＯＨ
ｚ（ＯＭｅ　）−Ｔｈｒ−８ｅｒ−Ｄ−ＩＬｙｓ　（Ｚ
　）−Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−０Ｈ（０，５５
ｇ）にチオアニソール（３，ｌ−ン、０−クレゾール（
２，７ｆｎｌ）を加えて、氷冷下ＴＦＡ（１２ｉ）で８
０分間２次いでトリフルオロメタンスルポン酸（１，２
１ｎｔ）を加えて８０分間、更に室温に戻して１時間攪
拌スル。８０℃でＴＦＡを留去したのち、ｎ−ヘキサン
で洗浄。残液を水（５０ｄ）に溶解し。

アンバーライトエＲ−４００（アセテートサイクル、５
ｇ）と共に室温で３θ分間攪拌する。

樹脂を濾去い濾液を５％アンモニアでｐＨ１０に調整し
８０分間攪拌。８％酢酸でｐＨ７に戻して凍結乾燥する
。得られる粉末を３％酢酸（５−＝／）に溶解し、セフ
アゾ、クスＧ−１５（８，２Ｘ１０９ｃｍ）のカラムに
付す。同一溶媒で溶出し、各フラクション（８ｇ）の２
７５　ｒＬｍにおける吸光度を測定する。試験管番号５
５−６６を集めて凍結乾燥。更にこの粉末をｎ−ブタノ
ール：酢酸：水−４：１：５（’／）の上層（５ｔｄ）
に溶解いセファデックスＧ−２５（２，４Ｘ　１０５Ｃ
ｍ）の分配クロマトグラフィーに付す。同一溶媒で約５
００−溶出した後、同じ溶媒系の下層に変えて溶出。各
フラクション（８ｇ）のＴＬＣを調べ、ニンヒドリン単
一スポットの画分（試験管番号１Ｏ−１８）を集めて溶
媒を留去後、凍結乾燥をくり返す。収量２１０ｗｌ９（
６４％）　、　Ｒｆ２−０．０９゜元素分析　Ｃ２５Ｈ
４７Ｎ９０９・２　ＣＨ３ｃＯＯＨ−Ｈ２０計算値　０
４８．５８．　Ｈ７，２６，Ｎ　１５．９２実測値　Ｃ
４８，６７、Ｈ７，４８，Ｎ　１５．８８酸加水分解後
のアミノ酸分析値：　Ｔｈｒ　ｉ、ｏｏ。

Ｓｅｒ　Ｏ，８９，Ｌｙｓ　１．１８．　Ｔｙｒ　Ｏ，
９７，Ａｒｇ　Ｏ，９６゜実施例５ ■Ｚ（ＯＭｅ　）−Ｔｈｒ−Ｄ−８ｅｒ−Ｌｙｓ（Ｚ　
）−Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ　）−ＯＨ ２（ＯＭｅ　）−Ｌｙｓ　（Ｚ　）−Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｒ
ｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ（１，８８り）にアニソール（０，
７ｖｌ）をカロえて氷冷下ＴＦＡ（ａ、Ｏｙ＋７）で３
０分間処理する。

ＴＦＡを留去ののち、エーテルを加えて粉末化し、濾取
。ＫＯＨ上で減圧乾燥する。Ｚ（ＯＭｅ）−Ｔｈｒ−１
）−８ｅｔ−ＮＨＮＨ２（０，７７９）　、　８．９　
Ｎ　ＨＣ／Ｃジーキサン（１，ｉｉ）、亜硝酸イソアミ
ル（ＯＪ７ｆｎｔ）、）リエチルアミ”ｙ　（０，５６
ｖｌ　）から調製したアジドのＤＭＦ（２５ｄ）溶液と
トリエチルアミン（０，２１ｙｄ）を含むＨ−Ｌ　Ｖ　
８（Ｚ）−Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−０Ｈ−Ｔ　
Ｆ　Ａ塩のＤＭＦ（２５ｍｌ）溶液を混合して、４°Ｃ
で２４時間攪拌する。ＤＭＦを留去し、残渣を酢酸エチ
ルと１０％クエン酸に溶解し、酢酸エチル層を１０％ク
エン酸、飽和食塩水、水で順次洗浄。硫酸ナトリウムで
乾燥したのち、酢酸エチルを留去。

結晶性残渣を冷酢酸エチルで粉末としたのち濾取。メタ
ノール−エーテルより再結晶。収量１．２ｇ（７２％）
、融点１１７〜１１９°Ｃ１Ｒｆｌ　−０，１１゜ 元素分析　Ｃ５ｚＨｓ７ＮｓＯｓｓＳ　・１．５Ｈ２０
計算値　Ｃ５７，１８，Ｈ６，１９，Ｎ　１０Ｊ７実測
値　０５７．０８．　Ｈ５，８０，Ｎ　１０．０！■Ｈ
−Ｔｈｒ−Ｄ−８ｅｒ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｒｇ−
ＯＨ２（ＯＭｅ　）−Ｔｈｒ−Ｄ−８ｅｒ−Ｌｙｓ　（
Ｚ　）−Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ’　（０
，５５９）にチオアニソール（８，１ｄ）と０−クレゾ
ール（２，７ｆｎｔ）を加えて、ＴＦＡ（１２−）で水
冷下８０分間９次いでトリフルオロメタンスルホン酸（
１，２ｉ）を加えて８０分間、更に室温に戻して１時間
攪拌する。３０°ＣでＴＦＡを留去したのち、ｎ−ヘキ
サンで洗浄。残液を水（５０ｍ）に溶解し。

アンバーライトエａ−＋ｏｏ（アセテートサイクル、５
ｇ）と共に室温で８ｏ分間攪拌。樹脂を濾去し、濾液を
５％アンモニアでｐＨ１０に調整して８０分間攪拌。８
％酢酸でｐＨ７に戻して凍結乾燥する。この粉末を８％
酢酸（５ｍ７）に溶解し、セファデックスＧ−１５（３
，０Ｘ１０５Ｃｊｌ）に付す。同一溶媒で溶出し、各フ
ラクシ、ン（１０９）の２７５　ｎｍでの吸光度を測定
する。試験管番号２７−８４を集めて凍結乾燥。更にこ
の粉末をｎ−ブタノール：酢酸：水−４：１：５（／、
）の上層（、５ｔｎｔ”）に溶解し。

セファデックスｃ−２５（２，４ｘ９ｏｃｍ）の分配ク
ロマトグラフィーに付す。同溶媒で約５０〇−溶出した
のち、同一溶媒系の下層に変えて溶出を続ける。各フラ
クション（８９）のＴＬＣを調べ、ニンヒドリン単一ス
ポットの両分（試験管番号１２−１５）を集め、溶媒を
留去したのち凍結乾燥をくり返す。収量２７５ｍ９（８
４％）、　Ｒｆ２−０．２６　（セルロース）。

元素分析　０２８Ｈ４７Ｎ９０９・２ＣＨ３ＣＯＯＨ・
５Ｈ２０計算値　Ｃ４４，９９，Ｈ７，５８，Ｎ　１４
．５９実測値　Ｃ４４，２８，Ｈ７，５５，Ｎ　１４．
７７酸分解後のアミノ酸分析値：　Ｔｈｒ　１．０４．
５ｅｒＯ，９９，Ｌｙｓ　１．００．　Ｔｙｒ　１．０
０．　Ａｒｇ　１．０８゜実施例６ ■Ｂｏａ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ（Ｚ　）−Ｔｙｒ−Ａｒｇ（
Ｔｏｓ　）−ＯＨ２（ＯＭｅ　）−Ｌｙｓ（Ｚ　）−、
Ｔｙｒ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ（２，７５７）にアニ
ソール（１，５ｉ）を加え。

水冷下Ｔ　Ｆ　Ａ　（６ｍ／　）を加えて３０分間処理
。

ＴＦＡ留失後、エーテルで粉末化し濾取。ＫＯＨ上で減
圧乾燥。乾燥したＴＦＡ塩をＤＭＦ（８０ｄ）に溶解し
て、トリエチルアミン５ＬＬ （１，２６ｄ　）　、　Ｂｏｃ−Ｐｒｏ−撰（０，９４
９）を加えて６時間攪拌。ＤＭＦを留去し、残液を酢酸
エチルに溶解して、１０％クエン酸、飽和食塩水、水で
洗浄。硫酸す）　ＩＪウムで乾燥後、濃縮してエーテル
を加え、粉末とする。更にシリカゲルカラムクロマトに
付し、クロロホルム：メタノール−１０＝１の溶媒系で
溶出、精製した。メタノール−エーテルより再結晶。収
量２．１ｇ（７４％）、融点１５０〜１５８°Ｃ２Ｒｆ
ｌ−０，１８゜ 元素分析　Ｃ１４５ＨｓｚＮａｏ＋２ｓ・ｉ、５１（ｚ
　。

計算値　０５６．４８．　Ｈ６，７０，Ｎ　１１．４５
実測値　Ｃ５６，６９，Ｈ６，Ｌ（、Ｎ　１１．２９■
ｚ（ＯＭｅ　）−’ｒｈｒ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ（Ｚ）−’
Ｉ’ｙｒ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ　）０Ｈ Ｂｏａ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ（Ｚ　）−Ｔｙｒ−Ａｒｇ（Ｔ
ｏｓ　）−ＯＨ（１，４８ｇ）にアニソール（Ｑ、３ｍ
ｊ）を加え。

水冷下Ｔ　Ｆ　Ａ　（８ｔｎｔ　）を加えて８０分間処
理。

ＴＦＡ留去ののち、エーテルを加えて粉末とし濾取。Ｋ
ＯＨ上で減圧乾燥。ｚ（ｏＭｅ　）−Ｔｈｒ−ＮＨＮＨ
２（０，８９２）’、　ａ、（ＩＮ　ＨＣｌ−ジオキサ
ン（２，〇−）、亜硝酸イソアミル（０，４８ｔｄ）、
）リエチルアミン（０，８４−）から調製したアジドの
ｎＭＦ（１５ｍ／）溶液と、トリエチルアミン（０，２
１ｉ）を含む上記のＴＦＡ塩のＤＭＦ（１５ｍ）溶液と
を混合し、４°Ｃで４８時間攪拌する。ｐＭＦを留去し
、残渣を酢酸エチルと１０％クエン酸に溶解して、１０
％クエン酸。

飽和食塩水及び水で順次洗浄する。硫酸す）　ＩＪウム
で乾燥後、濃縮。エーテルを加えて粉末とする。更に、
シリカゲルカラムクロマトグラフィーに付シ、クロロホ
ルム：メタノール：水−８：８：１の溶出により精製し
た。メタノール−エーテルから再結晶。収量０．５１９
（８２％）。

融点１４１〜１４４°Ｃ，Ｒｆ、　−０，１９゜元素分
析　Ｃ５４Ｉ（６９Ｎ９０］５Ｓ−Ｈ２０計算値　０５
７．１８．　Ｈ６，３０，Ｎ　１１．１２実測値　Ｃ５
６，９７，Ｈ６，２６，Ｎ　１０．９２■Ｈ−Ｔｈｒ−
Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＯＨｚ（ＯＭｅ　）
−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ（Ｚ　）−Ｔｙｒ−Ａ’ｒｇ
（’Ｔｏｓ　）ｏｎ（ｏ、ａ９ｇ）にチオアニソール（
４，３ｍｚ）とＯ−クレゾール（３，８ｍｊ）を加え、
ＴＦＡ（５−ｔ）で氷冷下８０分間２次いでトリフルオ
ロメタンスルボン酸（ｌｔｄ）を加えて８０分間更に室
温に戻して１時間攪拌する。８０℃でＴＦＡを留去後ｎ
−ヘキサンで洗浄する。残渣を水（５ｏｄ）に溶解し、
アンバーライトＩＲ−４００（アセテートサイクル、５
ｇ）と共に３０分間攪拌。樹脂を濾去後、濾液のｐＨを
７に調整してそのまま凍結乾燥。この粉末を８％酢酸（
５−／）に溶解し、セファデックスＧ−１５（８，ＯＸ
１０５ｃｍ）に付す。同一溶媒で溶出し、各７ラクシヨ
ン（８ｆｒＬｔ）の２７５　ｎｍでの吸光度を測定。試
験管番号８５−４８を集めて凍結乾燥する。更にこの粉
末をｎ−ブタノール：酢酸：水−４：１：５（Ｖ／Ｉ）
の上層（有機＃）（５−Ｚ）に溶解し、セファデックス
０−２５（２，４Ｘ９０ｃｍ）の分配クロマトグラフィ
ーに付す。同溶媒で約５００−溶出したのち。

同一溶媒系の下層（水層）に変えて溶出。各フラクショ
ン（１２９）のＴＬＣｊをチェックし。

ニンヒドリン単一スポットを示す両分（試験管番号５−
９）を集めて溶媒を留去後、凍結乾燥をくり返し、目的
物を得る。収量１５Ｌｌ＋’９（６６％）　＋　Ｒｆ３
−０−２０゜ 元素分析　Ｃ３ｏ１（４９Ｎ９０ａ・２ＧＨ３ＧＯＯＨ
−ａｇ。

計算値　Ｃ４８，り８．　Ｈ７，５７，Ｎ　１５．０４
実測値　Ｃ４８，７８，Ｈ７，２４，Ｎ　１４．９１酸
加水分解後のアミノ酸分析値：　Ｔｈｒ　Ｏ，９１゜Ｐ
ｒｏ　Ｏ，９５，Ｌｙｓ　Ｏ，９４，Ｔｙｒ　１．００
．　Ａｒｇ　Ｏ，９９゜実施例？ ■Ｂｏａ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ（Ｚ）−Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｒｇ
（Ｔｏｓ）−０Ｈ２（ＯＭｅ　）−Ｌｙｓ（Ｚ　）−Ｔ
ｙｒ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ　）−ｏｌ（（１，８４２）
にアニソール（１−）を加え、水冷ＴＴｐＡ（４ｍ／）
を加えて８０分間処理。ＴＦＡを留去後、エーテルで粉
末とし濾取。ＫＯＨ上で減圧乾燥する。乾燥したＴＦＡ
塩をＤＭＦＯ５１，Ｌ （８０ｇｎｔ）に溶解し、　Ｂｏａ−Ｐｒｏ−舅噂（０
，６２９）＋トリエチルアミン（０，８４１１１／）を
加えて、室温で５時間攪拌する。ＤＭＦを留去したのち
、残渣を酢酸エチルに溶解し、１０％クエン酸、飽和食
塩水、水で順次洗浄。硫酸す）　ＩＪウムで乾燥後、濃
縮し、エーテルを加えて粉末とする。

メタノール−エーテルから再結晶。収量１．５ｇ（７９
％）、融点１１９〜１２２°Ｃ，Ｒｆ、−０，２０゜ 元素分析　０４Ｇ珈ｚＮａＯ１２８−Ｈ２０計算値　Ｃ
５７，０１，Ｈ，６，６５，Ｎ　１１．５６実測値　Ｃ
５７，０４，Ｈ６，６８，Ｎ　１１．８１■Ｚ（ＯＭｅ
　）−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ（Ｚ　）−Ｔｙｒ−Ｄ−
Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ Ｂｏａ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ（Ｚ　）−Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｒｇ
（Ｔｏｓ　）−ＯＨ（１，８８ｇ）にアニソール（０，
）―）を加え。

水冷下Ｔ　Ｆ　Ａ　（２，８ｍｌ　）を加えて８０分間
処理をする。ＴＦＡ留去後、エーテルを加えて粉末化し
、濾取。ＫＯＨ上で減圧乾燥する。Ｚ（ＯＭｅ）−Ｔｆ
ｉｒ−ＮＨＮＨ２（０，５１９）　、　８．０　Ｎ　Ｈ
Ｃ３１−ジオキサン（１，１３ｇＬｔ）、亜硝酸イソア
ミル（ｏ、ｇｙｔｎｔ）、トリエチルアミン（０，４８
ｄ）から調製したアジドのＤＭＦ（１０ｔｒＬｌ）溶液
と、トリエチルアミン（０，２０ｍ）を含む上記ＴＦＡ
塩のＤＭＦ（２０ｗｄ）溶液を混和して４℃で２４時間
攪拌する。ＤＭＦを留去後、残渣を酢酸エチルと１０％
クエン酸に溶解し、１０％クエン酸。

飽和食塩水、水で順次洗浄。硫酸す）ＩＪウムで乾燥後
、濃縮し、エーテルを加えて粉末化する。

メタノール−エーテルより再結晶。収量０．９２９（５
９％）、融点１１４〜１１７℃。

元素分析　Ｃ４４Ｈ６９Ｎ９０１５Ｓ・１．５Ｈ２０計
算値　Ｃ５６，７８，Ｈ６，８４，Ｎ　１１．０８実測
値　Ｃ５６，９８，Ｈ６，８９，Ｎ　１０．９９■Ｈ−
Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｒｇ−ＯＨ２
（ＯＭｅ　）−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ（Ｚ　）−Ｔｙ
ｒ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ（５５８■）にチオア
ニソール（６，２１ｍ）。

０−クレゾール（＋ｓ、４ｄ）を加えて、ＴＦＡ（１２
ｍｊ）で水冷下８０分間２次いでトリフルオロメタンス
ルホン酸（１，２ｄ）を加えて８０分間、室温に戻して
１時間攪拌する。８０℃でＴＦＡを留去したのち、ｎ−
ヘキサンで洗浄。

更に残渣を水（５０ＷＬｔ）に溶解してアンバーライト
ＩＲ−４００（アセテートサイクル、５ｇ）と共に８０
分間、室温で攪拌する。樹脂を濾去後、濾液のｐＨを７
に調整し凍結乾燥する。得られる粉末を８％酢酸（５−
）に溶解し、セフアゾ、クスＧ−１５（８，ＯＸ１０５
ｃｍ）に付す。

同一溶媒で溶出し、各フラクション（８１＋１／）の２
７「Ｉでの吸光度を測定。試験管番号８７−４５を集め
て凍結乾燥する。更にこの粉末をｎ−ブタノール：酢酸
：水−４：１：５（ｖ／Ｉ）の上層（５ｇＬｔ）に溶解
し、セファデックスＧ−２５（２，４Ｘ９０Ｃ１ｌ）の
分配クロマトグラフィーに付す。同一溶媒で約５０〇−
溶出したのち。

下層に変えて更に溶出。各フラクション（１２ｙ＞のＴ
ＬＣをチェックしたのち、ニンヒドリン単一スポットの
両分（試験管番号１６−”８）を集めて、溶媒留去後、
凍結乾燥をくり返す。

収量１９６１１９（５９％）、Ｒｆ２−０．２１゜元素
分析　Ｃ３ｏＨ４ｓＮｓｏａ・２ＣＨ３ＣＯＯＨ−Ｈ２
０計算値　Ｃ５０，９２，Ｈ７，４２，Ｎ　１５．７２
実測値　Ｃ５０，７２，Ｈ７，４６，Ｎ　１５．６８酸
加水分解後のアミノ酸分析値：　Ｔｈｒ　Ｏ，９０＋Ｐ
ｒｏ　Ｏ，９５，Ｌｙｓ　１．００．　Ｔｙｒ　１．０
０．　Ａｒｇ　１．０２゜実施例８ ｚ（ｏＭｅ　）−ｒ、ｙｓ（ｚ　）−Ｔｙｒ−Ａｒｇ（
Ｔｏｓ　）−ＯＨ（４６０■）にチオアニソール（３，
１−）、。

−クレゾール（２，７ｍ）を加え、ＴＦＡ（１０−）で
水冷下８０分間２次いでトリフルオロメタンスルホン酸
（１，０ｇ／）を加え８０分間、更に室温に戻して１時
間攪拌する。８０°ＣでＴＦＡを留去したのち、ｎ−ヘ
キサンで洗浄。残渣を水（ｓａＷＬりに溶解し、アンノ
く−ライトＩＲ−４００（アセテートサイクル、５ｇ）
と共に室温で８０分間攪拌する。樹脂を濾去後、濾液の
ｐＨを７に調整して凍結乾燥。凍結乾燥粉末をｎ−ブタ
ノール：酢酸：水−４：１：５（′Ｉ／Ｉ）の上層（５
ｓａ／）に溶解し、セフ丁デフクスＧ−２５（Ｌ４ｘ９
０ｃ＋ｎ）の分配列マドグラフィーに付す。同１溶媒で
約５００−溶出したのち。

下層に変えて更に溶出。各フラクション（１２り）のＴ
ＬＯをチェックし、ニンヒドリン単一スポットの両分（
試験管番号９−１８）を集めて溶媒を留去後、凍結乾燥
をくり返す。収量１１６ｔｎｇ（５０％）　ｔ　Ｒｆ２
−０−１７　（セルロース）０ 元素分析　（４１Ｈａｓ　Ｎ７０５・２Ｃ）ｔ３ＣＯＯ
Ｈ・２Ｈ２０計算値　Ｇ　４８．８０．　Ｈ７，６２，
Ｎ　１５．７７実測値　Ｃ４８，４２，Ｈ７，８１，Ｎ
　、１６．２８酸加水分解後のアミノ酸分析値：　Ｌｙ
ｓ　ｏ、ｓａ。

Ｔｙｒ　１．００．　Ａｒｇ　０１８５゜実施例９ ■Ｚ（ＯＭｅ　）−８ｅｒ（Ｂｚｌ　）−Ｌｙｓ（Ｚ）
−Ｔｙｒ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ　）ＯＨ ２（ＯＭｅ　）−Ｌｙｓ（Ｚ　）−Ｔｙｒ−Ａｒｇ（Ｔ
ｏｓ　）−ＯＨ（ｏ、７ａｇ）にアニソール（０，４ｉ
）を加え。

水冷下ＴＦＡ（１，５ａ（）で８０分間処理するっＴＦ
Ａ留去後、エーテルを加えて粉末とし、濾取。ＫＯＨ上
で減圧乾燥する。このＴＦＡ塩をＤＭＦ（２０−）に溶
解し、　Ｚ（ＯＭｅ）−８ｅｔ（Ｂｚｌ）−ｏＮｓ（０
，４１’ｉ　）ｅ　）リエチルアミン（０，８４ｗ＋／
）を加えて室温で５時間攪拌。ＤＭＦを留去し、残渣を
酢酸エチルに溶解、１０％クエン酸、飽和食塩水、水で
順次洗浄する。硫酸ナトリウムで乾燥後、濃縮し、エー
テルを加えて粉末とする。酢酸エチル−エーテルから再
結晶。収量０．５１９（５８％）、融点９５〜９７℃、
　Ｒｆｌ　−０，２０゜ 元素分析　Ｃｓ５ＨｓｓＮｓＯｕＳ−Ｈ２０計算値　Ｃ
５９，８４，Ｈ６，１６，Ｎ　１０．０？実測値　０５
８．８９．　Ｈ６，９８，Ｎ　９．９８■Ｈ−８ｏｒ−
Ｌｙｅ−Ｔｙｒ−ムｒｇ−ＯＲＺ（ＯＭｅ）−８ｅｒ（
Ｂｚｌ）−Ｌｙｓ（Ｚ）−Ｔｙｒ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−
ｏＨ（ｏ、ａｓ９）にチオアニソール（４，８＋ｎｊ）
。

０−クレゾール（８，８ｗ４）を加え、ＴＦＡ（４−）
で水冷下８０分間２次いでトリフルオロメタンスルホン
酸（０，４ｇＬｔ）を加えて８０分間。

室温に戻して１時間攪拌する。８０℃でＴＦＡを留去し
たのち、残渣をｎ−ヘキサンで洗浄。

水（ｒ＋ｏｉ）に残液を溶かし、アンバーライト、ＩＲ
−４００（アセテートサイクル、５ｇ）と共に室温で８
０分間攪拌する。樹脂を濾去後を濾液を５％アンモニア
でｐＨ１０に調整し。

３０分間攪拌。これを８％酢酸でｐＨ７に戻して凍結乾
燥する。得られた粉末をｎ−ブタノール：酢酸：水−４
：ｌ：５の上層（５−）に溶解し、セファデックスｅ　
−２５（２，４ｘ９０ｃｍ）の分配りｐマドグラフィー
に付す。同−溶媒系で約５００ｄ溶出後、下層に変えて
溶出。各７ラクシいン（１２ｇ）のＴＬＣをチェックし
てニンヒドリン単一スポット画分を集め、溶媒留去後、
凍結乾燥をくり返す。収量８２■（４２％）、ＲｆＺ−
０，１４゜

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 式 ％式％ （式中、ＸはＴｈｒ−８ｅｒ−Ｌｙｓ、　Ｔｈｒ−Ｐｒ
   ｏ−Ｌｙｓ。 ５ｅｒ−ＬｙｓまたはＬｙｓを表わす。ただしＨ−Ｌ−
   Ｔｈｒ−Ｌ−Ｓｅｒ−Ｌ−Ｌｙｓ−Ｌ−Ｔｙｒ−Ｌ−Ａ
   ｒｇ−ＯＨを除く）で表わされるオリゴペプチド及びそ
   の塩