JPS60234596A - リジン脱炭酸試験用培地 - Google Patents
リジン脱炭酸試験用培地Info
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- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
10発明の背景
皮髭文j
本発明は、微生物の生、化学的性状検査用培地に関する
。さらに詳しくは、本発明は腸内細菌等微生物の生化学
的同定法でリジン脱炭酸試験に用いられる改良された培
地に関するものである。感染症に対して適切な治療を施
すためには病原菌を同定し、感受性試験を行ない、その
病原菌に有効な薬剤を決定することが重要である。この
ような病原菌の同定に際しては多項目にわたる生化学的
性状検査が行なわれ、その項目の1つとしてリジン脱炭
酸試験が行なわれる。本発明の培地はこのようなリジン
脱炭酸試験に好適に使用される。
。さらに詳しくは、本発明は腸内細菌等微生物の生化学
的同定法でリジン脱炭酸試験に用いられる改良された培
地に関するものである。感染症に対して適切な治療を施
すためには病原菌を同定し、感受性試験を行ない、その
病原菌に有効な薬剤を決定することが重要である。この
ような病原菌の同定に際しては多項目にわたる生化学的
性状検査が行なわれ、その項目の1つとしてリジン脱炭
酸試験が行なわれる。本発明の培地はこのようなリジン
脱炭酸試験に好適に使用される。
′−よび、 屯
リジン脱炭酸試験は、L−リジンをカタベリンと炭酸ガ
スに脱炭酸する菌を検出する試験であって現在ではもっ
とも重要な菌の生化学的性状検査の−・つである、この
試験は菌をL−リジン及びpH指示薬を主要組成として
含有する培地で培養することによって実施される。この
試験で使用する培地として、最近トリプトンT、グルコ
ース、リン酸二水素−ナトリウム、L−リジン−塩酸塩
、ブロムチモールブルーおよび精製水の組成からなるも
のが提案されている(特公昭58−20263)。 こ
の培地は、培養時間が従来のものに〈らべて大巾に短縮
されている。即ち、従来の培地において°は培養期間が
1〜2日間であったのに対してこの培地では培養期間が
4〜5時間に短縮されており、即日判定が可能である。
スに脱炭酸する菌を検出する試験であって現在ではもっ
とも重要な菌の生化学的性状検査の−・つである、この
試験は菌をL−リジン及びpH指示薬を主要組成として
含有する培地で培養することによって実施される。この
試験で使用する培地として、最近トリプトンT、グルコ
ース、リン酸二水素−ナトリウム、L−リジン−塩酸塩
、ブロムチモールブルーおよび精製水の組成からなるも
のが提案されている(特公昭58−20263)。 こ
の培地は、培養時間が従来のものに〈らべて大巾に短縮
されている。即ち、従来の培地において°は培養期間が
1〜2日間であったのに対してこの培地では培養期間が
4〜5時間に短縮されており、即日判定が可能である。
しかしながらこの培地においても菌の種類によっては4
〜5時間の培養では反応が不十分であり判定が困難なも
のもあり、そのような場合には培養時間を長くし、翌日
に判定せざるをえない場合があった。
〜5時間の培養では反応が不十分であり判定が困難なも
のもあり、そのような場合には培養時間を長くし、翌日
に判定せざるをえない場合があった。
従って全ての菌について4〜5時間の培養で反応の陽性
、陰性を明瞭に判定できる培地′が要望されている。
、陰性を明瞭に判定できる培地′が要望されている。
また早期治療のためには菌の同定はできるだけ速やかに
行なわれるのが望ましいが他方、検査作業の都合上、判
定を翌日に行なわざるを得ない場合も生ずる。このよう
な場合には培養期間が厳格に規定されておらず、作業上
の都合で培養期間を延長しても反応過剰になったすせず
正確な判定が可能な培地が望ましい。
行なわれるのが望ましいが他方、検査作業の都合上、判
定を翌日に行なわざるを得ない場合も生ずる。このよう
な場合には培養期間が厳格に規定されておらず、作業上
の都合で培養期間を延長しても反応過剰になったすせず
正確な判定が可能な培地が望ましい。
さらに生化学的性状検査は作業の効率上多数の試験を多
穴培養プレートを用いて一度に行なうことが多いので各
試験の培養期間をそろえることが必要となる。このよう
な場合にも培養期間に厳格な制限のない培地が望ましい
。
穴培養プレートを用いて一度に行なうことが多いので各
試験の培養期間をそろえることが必要となる。このよう
な場合にも培養期間に厳格な制限のない培地が望ましい
。
II 、発明の目的
本発明は培養期間が特に制限されず、即日同定および翌
日同定が可能なリジン脱炭酸試験用培地を提供すること
を目的とする。
日同定が可能なリジン脱炭酸試験用培地を提供すること
を目的とする。
本発明はさらに呈色反応が明瞭であり判定が容易なリジ
ン脱炭酸試験用培地を提供することを目的とする。
ン脱炭酸試験用培地を提供することを目的とする。
本発明によれば、酵母エキストlog;ペプトン 1〜
10g;グルコース0.1〜2g;リン酸二水素−アル
カリ金属塩0.2〜2g ; L−リジン鉱酸塩5〜5
0g ; 5 ′−ピリドキサールリン酸エステル0.
005〜0.1g;およびpH指示薬0.O1〜0.2
gの割合の組成よりなり、水1交に溶解したときのpH
が5.5〜6.5であるリジン脱炭酸試験用培地が提供
される。
10g;グルコース0.1〜2g;リン酸二水素−アル
カリ金属塩0.2〜2g ; L−リジン鉱酸塩5〜5
0g ; 5 ′−ピリドキサールリン酸エステル0.
005〜0.1g;およびpH指示薬0.O1〜0.2
gの割合の組成よりなり、水1交に溶解したときのpH
が5.5〜6.5であるリジン脱炭酸試験用培地が提供
される。
本発明の培地におけるpH指示薬としてはフェノールレ
ッドが特に好ましい。
ッドが特に好ましい。
■0発明の詳細な説明
本発明の培地は、酵母エキス、ペプトン、グルコース、
リン酸二水素−アルカリ金属塩、L−リジン鉱酸塩、5
′−ピリドキサールリン酸エステルおよびPH指示薬か
らなる。酵母エキスは、酵素反応を促進させるためであ
る。5′−ピリドキサールリン酸エステルはリジンの脱
炭酸反応を促進する作用があり培養時間を短縮すること
ができる。リン酸二水素−アルカリ金属塩はPH調整剤
であり、アルカリ金属としてはカリウムまたはナトリウ
ムが好ましい。L−リジン鉱酸塩は基質であり鉱酸塩と
しては塩酸、硫酸、硝酸またはリン酸塩が好ましい。p
H指示薬には特に制限は、ないが、フェノールレッド、
ブロムチモールブルー、ブロムクレゾールパープル、ク
レゾールレッド、ブルムフェノールレッド等が適当であ
る。特にフェノールレッドを使用すると呈色が明瞭であ
り試験試料が少量でも陽性、陰性の判定がしやすい。
本発明の培地における前述した成分割合は臨界的であり
、特にリン酸二水素−アルカリ金属は該組成物を水1文
に溶解したときにpHが5.5〜6.5このましくは5
.8〜6.2となり、呈色反応が明瞭に現われるように
設定されている。またリジンおよび5′−ピリドキサー
ルの量は培養期間を短縮可能なように設定されている。
リン酸二水素−アルカリ金属塩、L−リジン鉱酸塩、5
′−ピリドキサールリン酸エステルおよびPH指示薬か
らなる。酵母エキスは、酵素反応を促進させるためであ
る。5′−ピリドキサールリン酸エステルはリジンの脱
炭酸反応を促進する作用があり培養時間を短縮すること
ができる。リン酸二水素−アルカリ金属塩はPH調整剤
であり、アルカリ金属としてはカリウムまたはナトリウ
ムが好ましい。L−リジン鉱酸塩は基質であり鉱酸塩と
しては塩酸、硫酸、硝酸またはリン酸塩が好ましい。p
H指示薬には特に制限は、ないが、フェノールレッド、
ブロムチモールブルー、ブロムクレゾールパープル、ク
レゾールレッド、ブルムフェノールレッド等が適当であ
る。特にフェノールレッドを使用すると呈色が明瞭であ
り試験試料が少量でも陽性、陰性の判定がしやすい。
本発明の培地における前述した成分割合は臨界的であり
、特にリン酸二水素−アルカリ金属は該組成物を水1文
に溶解したときにpHが5.5〜6.5このましくは5
.8〜6.2となり、呈色反応が明瞭に現われるように
設定されている。またリジンおよび5′−ピリドキサー
ルの量は培養期間を短縮可能なように設定されている。
グルコースの量も試験試料が少量でも反応の陽性、陰性
が明瞭に判定できるように設定されている。pH指示薬
の使用量はその種類によって多少異なり例えばフェノー
ルレッドは0.04〜0.1gの量使用するのが好まし
い。
が明瞭に判定できるように設定されている。pH指示薬
の使用量はその種類によって多少異なり例えばフェノー
ルレッドは0.04〜0.1gの量使用するのが好まし
い。
本発明の培地は常法に従って所定量の各成分を水に溶解
することによって使用される。近年生化学的性状検査は
多数の試験を多穴プレート上で同時に行うのが普通であ
り、このような場合には本発明培地を試験用プレートの
ウェルに注入し、乾燥させて乾燥培地とする。試験に際
しては該ウェルに試験菌の懸濁水を所定量分注し、所定
時間培養する。培養液の色の変化により、リジン脱炭酸
反応の陽性、陰性を判定する。
することによって使用される。近年生化学的性状検査は
多数の試験を多穴プレート上で同時に行うのが普通であ
り、このような場合には本発明培地を試験用プレートの
ウェルに注入し、乾燥させて乾燥培地とする。試験に際
しては該ウェルに試験菌の懸濁水を所定量分注し、所定
時間培養する。培養液の色の変化により、リジン脱炭酸
反応の陽性、陰性を判定する。
■1発明の具体的作用および効果
本発明の培地は、従来のリジン脱炭酸試験用培地と全く
同様にして使用される。培養時間は3〜5時間に短縮可
能であるが特に制限体されず、長時間培養も可能であり
、即日同定、翌日同定のいずれにも適している。また呈
色が明瞭であり、反応の陽性、陰性の判定が容易である
。
同様にして使用される。培養時間は3〜5時間に短縮可
能であるが特に制限体されず、長時間培養も可能であり
、即日同定、翌日同定のいずれにも適している。また呈
色が明瞭であり、反応の陽性、陰性の判定が容易である
。
次に本発明の培地を使用してリジン脱炭酸試験を行なっ
た実施例を示す。
た実施例を示す。
実施例
ト リ プ ト ン (g) よ −2゜5 −酵母エ
キス(g)よ禾 3.0 3.0ペプトン(g)零〇
5.0 5.0 グルコース(g) 1.0 0.5 1.0フエノール レッド(g) O,OB −0,013精製水(文)
l 1 1 P HEi、Op )18.0 p H8,0よ第1ソ
イド(Oxoid)社製品のカゼイン−トリプシン加水
分解ペプトンを使用。
キス(g)よ禾 3.0 3.0ペプトン(g)零〇
5.0 5.0 グルコース(g) 1.0 0.5 1.0フエノール レッド(g) O,OB −0,013精製水(文)
l 1 1 P HEi、Op )18.0 p H8,0よ第1ソ
イド(Oxoid)社製品のカゼイン−トリプシン加水
分解ペプトンを使用。
未来ディフコ(Ilifco)社製品の酵母エキスを使
用。
用。
?11ディフコ(Dirco)社製品の混合ペプトンを
使用。
使用。
暗JLI吾
上記の組成の本発明の培地および対照培地を多穴プレー
トの各穴に、50g1ずつ分注し、40°Cで乾燥した
。次に寒天平板培地1で各種微生物を35〜37℃で1
8〜24時間培養し、1.01の滅菌蒸留水中に約6〜
9X 10 /mlになるように懸濁して各穴に50ル
見ずつ接種後蓋をし、35〜37℃で所定時間培養し、
培養液の色の変化によりリジン脱炭酸反応の有無を判定
した。結果を第1表に示す。
トの各穴に、50g1ずつ分注し、40°Cで乾燥した
。次に寒天平板培地1で各種微生物を35〜37℃で1
8〜24時間培養し、1.01の滅菌蒸留水中に約6〜
9X 10 /mlになるように懸濁して各穴に50ル
見ずつ接種後蓋をし、35〜37℃で所定時間培養し、
培養液の色の変化によりリジン脱炭酸反応の有無を判定
した。結果を第1表に示す。
(以下余白)
第1表
■
暑
−・陰性色 士〜−:より陰性に遅い甲間已第1表の結
果から明らかなように、リジン脱炭酸試験において本発
明の培地を使用するときは培養時間の長短を問わず正確
な菌の同定が可能である。従って検査作業の都合により
即日同定、翌日同定のいずれをも選択できる。
果から明らかなように、リジン脱炭酸試験において本発
明の培地を使用するときは培養時間の長短を問わず正確
な菌の同定が可能である。従って検査作業の都合により
即日同定、翌日同定のいずれをも選択できる。
これに対して対照培地を使用するときは、菌によっては
4〜5時間の培養では呈色が不十分であり、即日同定が
困難な場合がある。
4〜5時間の培養では呈色が不十分であり、即日同定が
困難な場合がある。
また、本発明の培地のように培養時間に厳格な制限を受
けないことは多数の生化学的試験を同時に実施する場合
に極めて好都合である。
けないことは多数の生化学的試験を同時に実施する場合
に極めて好都合である。
Claims (2)
- (1)酵母エキス 1〜10g;ペプトン1−10g;
グルコース0.1〜2g;リン酸二水素−アルカリ金属
塩0.2〜2g ; L−リジン鉱酸塩5〜50g;5
′−ピリドキサールリン酸エステル0.005〜0゜1
g;およびpH指示薬0.O1〜0.2gの割合の組成
よりなり、水1見に溶解したときのpHが5.5〜6.
5であるリジン脱炭酸試験用培地。 - (2)pH指示薬がフェノールレッドである特許請求の
範囲第1項記載のリジン脱炭酸試験用培地。
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59091065A JPS60234596A (ja) | 1984-05-09 | 1984-05-09 | リジン脱炭酸試験用培地 |
| US06/720,717 US4673636A (en) | 1984-05-09 | 1985-04-08 | Medium for lysine decarboxylation test |
| DE8585104303T DE3579736D1 (de) | 1984-05-09 | 1985-04-10 | Medium zum lysin-dekarboxylationstest. |
| EP85104303A EP0160851B1 (en) | 1984-05-09 | 1985-04-10 | Medium for lysine decarboxylation test |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59091065A JPS60234596A (ja) | 1984-05-09 | 1984-05-09 | リジン脱炭酸試験用培地 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60234596A true JPS60234596A (ja) | 1985-11-21 |
| JPH0526477B2 JPH0526477B2 (ja) | 1993-04-16 |
Family
ID=14016097
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59091065A Granted JPS60234596A (ja) | 1984-05-09 | 1984-05-09 | リジン脱炭酸試験用培地 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4673636A (ja) |
| EP (1) | EP0160851B1 (ja) |
| JP (1) | JPS60234596A (ja) |
| DE (1) | DE3579736D1 (ja) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62104593A (ja) * | 1985-10-31 | 1987-05-15 | Terumo Corp | アミノ酸脱炭酸能検査用培地組成物 |
| AT403054B (de) * | 1996-03-04 | 1997-11-25 | Stauffer Elisaweta Mag | Verfahren und vorrichtung zum bestimmen coliformer und fäkalcoliformer keime in wasser |
| DE29710050U1 (de) * | 1997-06-11 | 1997-10-16 | Macherey, Nagel GmbH & Co. Handelsgesellschaft, 52355 Düren | Mikrobiologisches Nährmedium |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU737452A1 (ru) * | 1976-05-25 | 1980-05-30 | Московский Научно-Исследовательский Институт Вакцин И Сывороток Им. И.И.Мечникова | Питательна среда дифференциации энтеробактерий |
| CH636376A5 (en) * | 1977-02-14 | 1983-05-31 | Sarrebourg Hopital Civil Saint | Process for the identification of bacteria and culture medium for its implementation |
| US4070247A (en) * | 1977-03-30 | 1978-01-24 | Indiana University Foundation | Diagnostic media |
| US4335205A (en) * | 1979-04-06 | 1982-06-15 | Greenwood James R | Low protein degradation product basal medium for identification of non-fermentative gram-negative bacilli and other microorganisms |
| JPS568691A (en) * | 1979-07-03 | 1981-01-29 | Denki Kagaku Kogyo Kk | Method and apparatus for continuous production of l-alanine |
-
1984
- 1984-05-09 JP JP59091065A patent/JPS60234596A/ja active Granted
-
1985
- 1985-04-08 US US06/720,717 patent/US4673636A/en not_active Expired - Fee Related
- 1985-04-10 EP EP85104303A patent/EP0160851B1/en not_active Expired
- 1985-04-10 DE DE8585104303T patent/DE3579736D1/de not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0526477B2 (ja) | 1993-04-16 |
| EP0160851B1 (en) | 1990-09-19 |
| EP0160851A2 (en) | 1985-11-13 |
| DE3579736D1 (de) | 1990-10-25 |
| US4673636A (en) | 1987-06-16 |
| EP0160851A3 (en) | 1988-05-04 |
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