JPS6023680B2 - デカペプチド誘導体およびその製造法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、デカベプチド誘導体およびその製造法に関す
る。

さらに詳しくは本発明は、一般式＜・）〔式中、Ｘ，は
日またはアミノ基の保護基、Ｙ，、Ｙ２はカルボキシル
基の保護基であり、両者は、同一でも異っていてもよく
、Ｙ３はＮＱまたはカルボキシル基の保護基、ＺはＨま
たは側鎖水酸基の保護基または一Ｓ０３×（×はＫ、Ｎ
ａなどのアルカリ金属または、トリェチルアミン、シク
ロヘキシルアミンなどの塩基または日を意味する）を示
し、Ｚ２はＨまたは側鎖水酸基の保護基を示し、Ｐの、
Ｇｉｎ、Ａｓｐ、Ｔの、Ｔｈｒ、ＧＩｙ、Ｔｒｐ、Ｍｅ
ｔおよびＰｈｅはそれぞれピログルタミン酸、グルタミ
ン、アスパラギン酸、チロシン、スレオニン、グリシン
、トリプトフアン、メチオニンおよびフエニルァラニン
残基を示す〕で示されるデカベプチド誘導体およびその
塩ならびにそれらの製造法に関する。

一般式（１）で示されるデカベプチド誘導体は、新規物
質であり、例えば生理活一性べプチドとして知られてい
る、セルレイン（Ｃａｅｒ■ｅｉｎ）の製造原料として
利用される。

セルレィンは、生理活‘性べプチドとして知られており
、一般名セルレチド、ジェチルアミン〔化学名：Ｌ−ピ
ログルタミニル−Ｌ−グルタミニルーＬーアス／ぐルチ
ル−○ースルホーＬーチロシルーＬースレオニルーグリ
シルーＬートリプトフアニルーＬーメチオニルーＬ−ア
ス／ぐルチル−Ｌ−フエニルアラニンアミド・トリジエ
チルアミン塩・三水和物の慣用名であり、胆道、解の機
能検査薬などとして有用な物質である。

従来、該セルレィンの製法としては、式Ｐｙｒ−Ｇｉｎ
−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｎ３で示されるテトラベプチドアジ
ドを式（式中、Ａｃは、１〜４個の炭素原子を有する脂
肪酸のアシル残基を示す）で示されるへキサベブチドと
縮合させて、式で示されるデカベプチドを得、これを無
水ピリジン一驚水硫酸複合体で、低温で処理し、式？ｙ
ｒ−Ｇｉｎ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ（Ｓ０３Ｈ）−Ｔｈｒ（Ａ
ｃ）−ＧＩｙ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−ＮＨ
２を得、これを温和な条件下でアルカリ加水分解するこ
とによってセルレィンを得る方法が知られている（特公
昭４４一２５０７ｙ号公報）。

この従来法には、ラセミ化、副反応の生起、目的物の精
製が困難などの難点があり、さらに優れたセルレィンの
製造の開発が望まれている。

本発明者らは、デカベプチド謙導体について種々研究し
た結果、たとえば、前記一般式（１）において、Ｘ，＝
ペンジルオキシカルボニル基（Ｚ）、Ｙ，＝Ｙ２＝ペン
ジル基（Ｂｚｌ）、Ｙ３＝ＮＨ２、Ｚ＝Ｓ０３日、Ｚ２
二Ｂｚｌであるデカベプチド誘導体｛〔Ｚ−Ｐｙｒ−Ｇ
ｉｎ−Ａｓｐ（０＆１）‐Ｔｙｒ（ＳＱＨ）−Ｔｈｒ（
Ｂｚｌ）−ＧＩｙ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ
）−Ｐｈｅ−ＮＨ２〕・（Ｃ２日５）２ＮＨ｝〔デカベ
ブチド誘導体Ａ〕を還元することによって、脱保護する
場合には従来法におけるラセミ化、副反応の生起、など
の問題が改良され、かつ容易にセルレインの精製を行う
ことができることを見し、出した。前記デカベプチド誘
導体Ａは、メチオニン残基と、チロシン残基の水酸基に
、イヒ学的に不安定な硫酸ェステル基を同時に含むべプ
チド誘導体であるが、従来、該メチオニンなどの含硫ア
ミノ酸を含むべプチド誘導体の場合、接触還元による保
護基の脱離は困難とされており、また、メチオニン残基
と硫酸ェステル基を同時に含むべプチド誘導体から接触
還元によって保護基を脱離させた例は皆無である。本発
明者らは、意外なことに、メチオニン残基とチロシン残
基に硫酸ェステルを同時に含むデカベプチド誘導体Ａか
ら接触還元によって、不安定な硫酸ェステルの脱離を伴
うことなく、選択的に保護基を脱保護し、円滑に目的と
するセルレィンが高収率で得られることを見し、出した
ものである。

本来、硫酸ェステルは、酸にきわめて不安定であり、通
常用いられる酸による保護基の脱離は、硫酸ェステルを
含むべプチド誘導体の保護基の脱離には適用できないた
め、前記の従釆法においては、アルカリによる○−アシ
ル基の脱離法を採用している。しかし、アルカリ条件下
では一部のアミノ酸残基のラセミ化およびアスパラギン
酸残基に由来する副反応を避けることができず、高純度
のセルレィンを得ることは困難であった。この点、一般
式（１）で示されるデカベプチド誘導体、たとえば、デ
カベプチド誘導体Ａの接触還元によるセルレィンの合成
は副反応が少く、精製が容易で高純度、高活性のセルレ
ィンが得られる点で、従来法をはるかに上まわるもので
ある。勿論、一般式（１）で示されるデカベプチド誘導
体中、たとえばデカベプチド誘導体Ａ以外のデカベプチ
ド誘導体もべプチド化学における常法により、脱保護で
きるがその際、Ｓ０３日基が脱離するような方法を採用
した時には脱保護後にＳＱＨ基を導入さ・ることにより
例えばセルレィンに導くことができる。以下、一般式（
１）で示されるデカベプチド誘導体および塩ならびにそ
れらの製法ならびに本発明におけるデカベプチド誘導体
からセルレィンの製法についてそれぞれ説明する。

本発明におけるデカベプチド誘導体は、一般式（１）で
示される新規物質である。

一般式（１）中、Ｘ，は日またはペンジルオキシカルボ
ニル基（Ｚ）、Ｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル
基（ＰＭＺ）、Ｐーニトロベンジルオキシカルボニル基
などの置換ペンジルオキシカルボニル基、ｔ−プチルオ
キシカルボニル基（敗ｃ）、トシル基（Ｔｏｓ）などの
アミノ基の保護基、Ｙ，，Ｙ２は、同一でも異っていて
もよく、メチルおよびエチルェステル、ベンジルエステ
ル、ｔーブチルエステル、Ｐーニトロベンジルエステル
などのカルボキシル基の保護基、Ｙ３はＮ比またはＹ，
、Ｙ２と同様カルボキシル基の保護基、Ｚ，は日または
アセチル、トリフルオロアセチル、ベンジル、ｔーブチ
ル、トリチルなどの側鎖水酸基の保護基または−Ｓ０３
×（×はＫ、Ｎａなどのアルカリ金属またはトリェチル
アミン、シクロヘキシルアミンなどの塩基または日を意
味する）、Ｚ２はＨまたはアセチル、トリフロオロアセ
チル、ベンジル、ｔ−ブチル、トリチルなどの側鎖水酸
基の保護基をそれぞれ示す。一般式（１）で示されるデ
カベプチド譲導体には保護基（Ｘ，、Ｙ，、Ｙ２、Ｙ３
、乙、Ｚ２）の種類に応じて多数の誘導体が含まれるが
、代表例としては、一般式（１）において、Ｘ，＝Ｚ（
ベンジルオキシカルボニル基）、Ｙ，＝Ｙ２＝Ｂｚｌ（
ベンジル基）、Ｙ３＝ＮＨ２、Ｚ，＝日、Ｚ＝Ｂｚｌ（
ベンジル基）のものがあげられる。

上記の物質（以下、デカベプチド誘導体Ｂ）の理化学的
物質は以下の通りである。

｛１）融点 ２０２〜２０４００ ｛２）〔Ｑ〕蟹＝一２６０（Ｎ・Ｎ−ジメチルホルムア
ミド、Ｃ＝０．０９８）‘３１ 元素分析値（％） Ｃ日Ｎ 分析値 ６１．５２ ５．８３ １０．６０計算値
６１．６４ ５．９０ １０．７４【４’アミノ酸分
析値（鮒ＨＣＩ中、１１０００で２独特間加水分解）Ａ
ｓｐ（２．０）（数値は分子の数を示す）、Ｔｈｒ（１
．１）、Ｇｉｎ（２．０）、ＧＩｙ（１．２）、Ｍｅｔ
（０．８）、Ｔｙｒ（０．９）、Ｐｈｅ（１．２）。

さらに、他のデカベプチド誘導体としては、前記のデカ
ベプチド譲導体があげられる。

一般式（１）で示されるデカベプチド誘導体は次の方法
によって製造することができる。

すなわち、一般式（０） （式中、Ｘ，、Ｙ，、Ｚは前記と同義であり、Ｙ４はＯ
Ｈまたはメチルエステル、エチルエステルなどのカルボ
キシル基の保護基を示す）で示されるテトラベプチド誘
導体と、一般式（ｍ） （式中、Ｙ２、Ｙ３、Ｚは前記と同義）で示されるへキ
サベプチド譲導体もしくはその酸塩とを、フラグメント
縮合させることによって一般式（１）で示されるデカベ
プチド議導体を得ることができる。

原料に用いられる、一般式（０）で示されるテトラベプ
チド譲導体は新規物質であり、その代表的なものとして
は、一般式（ロ）においてＸ，＝ペンジルオキシカルボ
ニル基（Ｚ）、Ｙ，＝ペンジル基（Ｂｚｌ）、Ｙ４＝Ｏ
ＣＨ３（ＯＭｅ）、Ｚ，＝日のもの、すなわち、式で示
されるテトラベプチド誘導体（テトラベプチド誘導体１
）があげられる。

このテトラベプチド誘導体１は、通常のべプチド合成法
によって合成することができるが、具体的には後記の参
考例１において示す方法によって製造することができる
。テトラベプチド誘導体１以外の他のテトラベプチド誘
導体も参考例１に準じて製造することができる。また、
他方の原料として用いられる、一般式（ｍ）で示される
へキサベプチド譲導体も新規物質であり、その代表的な
ものとしては、一般式（ｍ）において、Ｙ２＝ペンジル
基（Ｂｚｌ）、Ｙ３：Ｎ比、Ｚ２＝ペンジル基（Ｂｚｌ
）のもの、すなわち、式で示されるへキサベプチド誘導
体（ヘキサベプチド誘導体（１）があげられる。

このへキサベプチド誘導体１は通常のべプチド合成法に
よって合成することができるが、具体的には後記の参考
例２において示す方法によって製造することができる。
へキサベプチド誘導体１以外の他のへキサベプチド議導
体も参考例２に準じて製造することができる。本発明に
おけるデカベプチド誘導体を製造するためのフラグメン
ト縮合に際しては、一般式（ｍ）で示されるへキサベプ
チド議導体を、一般式（Ｄ）で示されるテトラベプチド
誘導体に対して等モル〜２倍モル使用することによって
効果的に目的とするデカベプチド誘導体を得ることがで
きる。

反応は、０．１〜０．５ミリモルのテトラベプチド誘導
体およびへキサベプチド誘導体もしくはその塩を、プロ
ティナーゼの存在下、ｐＨ２．０〜１１．０の水性媒体
中、酸素の失活しない温度下、通常室温で約数十秒ない
し２加持間行うか、または通常のべプチド合成法に従っ
てフラグメント縮合を行う。

酸素を用いる方法においてはプロティナーゼとしては、
たとえば、酸性プロテアーゼＮＯ．３０６〔Ａｇｒ．Ｂ
ｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．３９、４２３（１９７５）〕（Ａｃ
ｒｏｃｙｌｉｎｄｒｉｍｍ種、協和醗酵工業ＫＫ製）、
ペプシン、サーモライシン、プロリシン、トリプシン、
Ｑーキモトリプシン、パパィンなどの酸性、中性、アル
カリ性のいずれのプロテアーゼも使用できる。特に本発
明においては、後記の実施例において示す如く従来フラ
グメント縮合において全くその利用が知られていない微
生物起源のプロテアーゼが効果的に使用できる。プロテ
ィナーゼの使用量は、反応原料などに応じて任意に決定
することができる。反応は、水またはメタノール、エタ
ノール、ジオキサン、ＮＯＮ−ジメチルホルムアミドな
どの如き水と相溶性のある有機溶媒を含む水性溶媒中で
円滑に進行し、生成物は通常、沈でん物として得られる
。反応物からの生成物（デカベプチド誘導体）の回収は
、沈でんを常法によって炉取し、これを適宜に、弱酸性
水溶液、弱アルカリ性水溶液および水で洗撤することに
よって高純度の目的物を得ることができる。

さらに、一般式（１）で示されるデカベプチド誘導体は
「一般式（Ｗ）（式中、Ｙ５はＯＨまたはメチルェステ
ル、エチルェステルなどのカルボキシ基の保護基、他の
記号は前記と同義）で示されるへプタベプタィド誘導体
と、一般式（Ｖ）で示されるトリベプタィド誘導体もし
くはその酸塩とを前記の方法と同機の条件下でフラグメ
ント縮合させることによっても製造することができる。

一般式（Ｗ）で示されるへプタベプタィド誘導体は新規
物質であり、その代表的なものとしては、式で示される
へプタベプタイド誘導体（ヘプタベプタィド誘導体１）
があげられる。

このへプタベブタィド誘導体１は通常のべプチド合成法
によって合成することができるが、具体的には後記の参
考例３において示す方法によって製造することができる
。へプタベプタイド議導体１以外の他のへプタベプタィ
ド誘導体も参考例３に準じて製造することができる。一
般式（Ｖ）で示されるトリベプタィド誘導体としては、
たとえば（トリベプタイド誘導体１）があげられる。

このトリベプタィド誘導体１は既知物質〔Ｊｏｕｍａｌ
ｏｆＣｈｅｍｉｃａＩＳｏｃｉｅｔｙＰ．５５５（１９
６６）〕であり、たとえば後記の参考例２において示す
方法によって製造することができる。前記のトリベプタ
ィド誘導体１以外のものも、参考例２の方法に準じて製
造することができる。一般式（Ｗ）で示されるへプタベ
プタィド誘導体と、一般式（Ｖ）で示されるトリベプタ
ィド誘導体もしくはその酸塩とのフラグメント縮合は、
前記のテトラベプチド誘導体とへキサベプチド譲導体と
の縮合における条件に準じて行うことができる。

本発明におけるデカベプチド誘導体の製造において、酵
素を利用しないでフラグメント縮合を行う場合にはべプ
チド合成法に用いられる通常の縮合法が利用できる。

かくして得られるデカベプチド誘導体は、たとえば後記
の参考例４に例示する方法によって容易にセルレィンに
変換することができる。

以下実施例および参考例を示す。

実施例 １ Ｚ−Ｐｙｒ−Ｇｉｎ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｔｙｒ（参
考例１）１８９犯９（０‐２５肌 ｍｏｌｅ）と、Ｔｈ
ｒ（Ｂｚｌ）−ＧＩｙ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ａｓｐ（ＯＢ
ｚｌ）一Ｐｈｅ−ＮＨ２・トリフルオロ酢酸塩（参考例
２）２６０の９（０．２５のｍｏｌｅ）を、Ｎ・Ｎ−ジ
メチルホルムアミド（ＤＭＦ）２地に溶かし、ｐＨ４．
０の０．２Ｍ酢酸緩衝液５の‘とＩＮＮａＯＨＯ．２５
の‘を加えた後、さらに酸性プロテアーゼＮｏ．３０６
（ＡｃｒｏｃｙｌｉｎｄｒＭｍ種、協和醗酵工業Ｋ．Ｋ
製）２０の９を加えて、３０ｑｏで１期時間振とうした
。

かくして析出してくる白色沈でんを炉取し、これを、０
．８Ｋクエン酸、水、４％ＮａＨＣｏ３、水の順で洗撤
し、真空乾燥した。ついで、これをＮ・Ｎ一ジメチルホ
ルムアミド５の‘に溶かし、これに酢酸エチルを加えた
。かくして生成する次でんを炉取し、これを真空乾燥し
、目的物のＺ−ＰＭ一Ｇｉｎ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｔ
ｙｒ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＧＩｙ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ａ
ｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｐｈｅ−Ｎ比・弦○（デカベプチド
議導体Ｂ）１５．７の９を得た。このものの理化学的性
質は前記した通りであつた。実施例 ２ Ｚ−Ｐｙｒ−Ｇｉｎ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−ＴＭ−ＯＭ
ｅ（参考例１）１９３の９（０．２５の ｍｏｌｅ）と
Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＧＩｙ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ａｓｐ（
ＯＢｚｌ）−Ｐｈｅ・Ｎ均トリフルオ。

酢酸塩（参考例２）２６０の９（０．２５の ｍｏｌｅ
）をＮ・Ｎ−ジメチルホルムアミド５のＺに溶かし、Ｉ
Ｎ−ＮａＯＨＯ．２５の‘、０．２ＭＣａｃ１２０．５
泌、ｐＨ９．０の０．２Ｍトリス塩酸緩衝液５の上を加
えた後、Ｑ−キモトリプシン（結晶）〔ウオージントン
社製、１００００Ｕ／の９（活性）〕１０の９を加え、
室温で約５分間振とうする。印一日ＣＩＯ．０５の‘を
加え、反応を停止した後、さらに反応終了液に対し、２
倍量の水を加えると白色沈でんを生ずる。この沈でんを
炉取し、０．８Ｍクエン酸、水、４％ＮａＨＣｏ３、水
の順で十分洗総し、ついでＮ・Ｎ−ジメチルホルムアミ
日こ溶かし、酢酸エチルを加え、生成する枕でんを炉取
し、これを真空、乾燥することによって実施例１におけ
ると同一の目的物１３１Ｍを得た（収率３１％）。実施
例 ３ Ｚ−Ｐｙｒ−Ｇｉｎ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｔｙｒ（参
考例・）３０４の９・Ｔｈｒ（ＢＺ１）一Ｇ１ｙ−Ｔｒ
ｐ一Ｍｅｔ一ＡＳｐ（ＯＢｚｌ）−Ｐｈｅ−ＮＨ２・ト
リフルオロ酢酸塩（参考例２）３８８の９をＮ・Ｎ−ジ
メチルホルムアミド４の‘に溶かし、この溶液にメチル
モルホリン０．４の【（０．４０５夕）を加え、一１ｏ
ｏ０に冷却し、１−ハイドロキシベンゾトリアゾール９
２の９、Ｎ。

Ｎ′−ジシクロヘキシルカルボジイミド９２の９を加え
、２時間鷹拝する。ついで４糊時間一１軍Ｃの冷蔵庫に
放置した。生成する不溶物（Ｎ・Ｎ′−ジシクロヘキシ
ル尿素）を炉去し、炉液に酢酸エチル２０の【を滴下し
、冷室に１報時間放置する。かくして生成する次でんを
炉取し０．９Ｍクエン酸水溶液約１００の‘で洗い、次
いで、水、４％ＮａＨＣ０３、水各５０の‘で順に洗い
、次にエーテル１０の上で洗って乾燥する。かくして実
施例１におけると同様のデカベプチド誘導体Ｂが得られ
る。収量３６０の９（収率弦％）。実施例 ４Ｚ‐Ｐｙ
ｒ−Ｇｉｎ‐瓜ｐ（ＯＢＺＩ）‐ＴＭ‐Ｔｈｒ（Ｂｚｌ
）−ＧＩｙ−Ｔｒｐ−ＯＭｅ（後記参考例３）５８９雌
（０．０５の ｍｏｌｅ）とＭｅｔ一Ａｓｐ（ＯＢｚｌ
）一Ｐｈｅ−ＮＱ・ＨＣ１（後記参考例２）２６．８畝
９（０．０５ｍｍｏｌｅ）をＮ・Ｎ−ジメチルホルムア
ミド１の‘に溶かし、この溶液に０．２ＭＣａＣ１２０
．０５の‘とｐＨ９．０の０．２Ｍトリス塩酸緩衝液１
叫を加えた後、さらにＱーキモトリプシン２５のｃを加
え、室温で、１０分間激しく振とうして反応を行い、反
応液から実施例１と同様の方法でデカベプチド誘導体Ｂ
は４．７の９を得た。

収率１０％。実施例 ５ 原料として、実施例４におけると同様のＺ−ＰＭ−Ｇｉ
ｎ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｔｙｒ一丁ｈｒ（Ｂｚｌ）一
ＧＩｙ−Ｔｒｐ−〇ＭｅとＭｅｔ−Ａｓｐ（〇Ｂｚｌ）
−Ｐｈｅ一ＮＨ２・ＨＣＩを用い、実施例３における合
成法に準じて反応、精製を行い、実施例１におけると同
様のデカベプチド誘導体Ｂを得た。

参考例 １ Ｚ‐ＰＭ‐Ｇｉｎ一郎ｐ（ＯＢＺＩ）一ＴＭ−ＯＭｅお
よびＺ−Ｐｙｒ−Ｇｉｎ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｔｙｒ
の合成：川 Ｚ−ＰＭ−Ｇｉｎ−ＯＨ（製法は後記）３
．９１夕（１０の ｍｏｌｅ）と日一Ａｓｐ（ＯＢｚｌ
）−ＴＭ−ＯＭｅ・トリフルオロ酢酸塩〔Ｒ．日．Ｍａ
ｚｕｒ、Ｊ．Ｍ．Ｓｃｈｌａｔｔｅｒ ａｎｄ ＡＨ．
Ｇｂｌｄｋａｍｐ、Ｊ．Ａ．Ｃ．Ｓ．９１、２６８４ぐ
６９）〕５．１５夕（ｌｏｗ ｍｏｌｅ）をＮ●Ｎ−
ジメチルホルムアミド１５のとに溶かす。

この溶液にメチルモルホリン１．０１夕を加え、一２０
００に冷却した後、１ーハィドロキシベンゾトリアゾー
ル２．３０夕、Ｎ・Ｎ′−ジシクロヘキシルカルボジィ
ミド（ＤＣＣ）２．２７夕を加え、一晩縄拝した。生成
する不溶物（Ｎ・Ｎ′ージシク。へキシル尿素）を除去
し、かくして得られる上薄液を、０．３Ｍクエン酸１０
０の‘に滴下する。かくして生成する白色次でんを炉取
し、０．８Ｍクエン酸、水、４％ＮａＨＣ０３、水の順
で十分洗糠した後、Ｎ・Ｎ−ジメチルホルムアミド‘こ
溶かし水を加えて晶出し、Ｚ−Ｐｙて−Ｇｉｎ−Ａｓｐ
（ＯＢｚｌ）一ＴＭ−ＯＭｅを得た。収量４．５４夕（
収率５９％）。このテトラベプチド誘導体の融点は１９
９−２０ｒ○、〔Ｑ〕色２＝十４２．９０（Ｎ・Ｎ−ジ
メチルホルムアミド、Ｃ＝２．０４）元素分析値（％）
は分析値Ｃ：６０．５０、Ｈ：５．７１、Ｎ：９．１１
、計算値 Ｃ：６０．５４、Ｈ：５．６い Ｎ：９．０
５であり、赤外線吸収スペクトル（ＫＢ亀菱剤法による
）（以下、ＩＲスペクトル）を第１図に、核磁気共鳴ス
ペクトル（ＮＭＲスペクトル）を第２図に示す。

‘。

）Ｚ−Ｐｙｒ−Ｇｉｎ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｔｙｒ−
ＯＭｅからＺ−Ｐｙｒ−Ｇｉｎ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−
Ｔｙｒへの変換は、次のようにして行った。Ｚ‐Ｐｙｒ
−Ｇｉｎ‐松ｐ（ＯＢＺＩ）‐Ｔｙｒ‐ＯＭｅ２．５０
夕（３．２の ｍｏｌｅ）をＮ・Ｎ一ジメチルホルムア
ミド５０松とに溶かし、これを０．２ＭＣａＣ１２５叫
、ｐＨ８．７の０．２Ｍトリス塩酸緩衝液５０叫と混合
した。

これにズブチリシンＢＰＮ′（商品名ナガーゼ、長瀬産
業社製）２０の９を加え、数分間室温で灘拝した後、Ｐ
Ｈを州一日ＣＩで２に調整すると白色枕でんを生成する
。これを炉取し、十分水洗した後、熱メタノールから再
結晶することにより、Ｚ−ＰＭ−Ｇｉｎ−Ａｓｐ（ＯＢ
ｚｌ）−Ｔｙｒを得た。収量２．３５夕（収率９７％）
。このものの理化学的物質は次の通りである。（１１融
点 ２０３〜２０４℃【２１〔Ｑ〕客＝−２５．３０（
Ｎ・Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｃ＝１．０２）‘３１
元素分析値（％） Ｃ日Ｎ 分析値 ５９．８３ ５．４５ ９．０６計算値
６０．０７ ５．４４ ９．２２【４）ＩＲスペクトル
を第３図に示す。

‘５１ ＮＭＲスペクトルを第４図に示す。

し一 Ｚ−ＰＭ一Ｇｉｎ−ＯＨの合成：Ｚ一ＰＭ−ＯＨ
２５夕、Ｎーオキシコハク酸ィミド１０．９１夕、Ｎ・
Ｎ′ージシクロヘキシルカルボジイミド１９．５７夕に
、ジオキサン１７５泌およびクロロホルム２５の【を加
えて、一１０ｑｏに冷却下一夜擬拝した。

生成する不溶物（Ｎ・Ｎ′ージシクロヘキシル尿素）を
炉去し、炉液を蒸発乾固し、残澄を酢酸エチルに溶かし
、不溶物を除いて、炉液を濃縮することにより結晶を得
た。収量２７．１夕（収量７９．２％）。上記で得られ
た結晶全量をアセトニトリル４００の‘に溶かし、この
溶液に、Ｇｉｎ（グルタミン）１３．斑夕とＮａＨＣｏ
３７．９８夕を含有する水溶液を滴下し、室温で一夜棚
梓する。

ついで、この反応液のｐＨを即日ＣＩで１に調整し、濃
縮すると白色の沈でんが生ずる。該沈でんを一夜、氷冷
下に保ち、ついで炉過し、袷エーテルで結晶を洗練する
。該結晶を、熱メタノールに溶かし、一夜氷冷下に保ち
、炉遇し、炉液を減圧下で濃縮することにより１５．７
６２（収率５４．０％）のＺ−ＰＭ−Ｇｉｎ−ＯＨを得
た。このものの理化学的性質は次の通りであった。‘１
’ 融点 １８１〜１８が０ 【２｝ 〔Ｑ〕費＝−１７．７０（Ｎ・Ｎ−ジメチルホ
ルムアミド、Ｃ＝１．０１）｛３’ 元素分析値（％） Ｃ日Ｎ 分析値 ５４．９６ ５．４９ １０．５２計算値
５５．２４ ５．４１ １０．７４参考例 ２（イー
Ｔｈｒ（Ｂｚｉ）一ＧＩｙ一Ｔｒｐ一Ｍｅｔ一Ａｓｐ
（ＯＢｚｌ）一Ｐｈｅ・ＮＨ２の合成：Ｂｏｃ−Ｔｈｒ
（Ｂｚｌ）−ＧＩｙ−Ｔｒｐ（後記の方法により製造）
５２４のｏ（１の ｍｏｌｅ）とＭｅｔ−松ｐ（ＯＢｚ
ｌ）−Ｐｈｅ−ＮＨ２・ＨＣ１（後記の方法により製造
）５３７のｏ（ｌｍ ｍｏｌｅ）を、Ｎ・Ｎ−ジメチル
ホルムアミド２の‘に溶かし、ＩＮＮａＯＨＩの‘、０
．０２Ｍ Ｃａ（ＯＣＯＣ瓜）２１の【、ｐＨ７．０の
Ｍｃｎｖａｉｎｅ緩衝液５泌を加えた後、サーモラィシ
ン（中性プロテァーゼ）（大和化成社製）（９３９０ｐ
ｕ／の９）２００の９を加え、３０午○で２０時間振と
うした。

かくして析出した白色沈でんを炉取し、該沈でんを０．
９Ｍクエン酸、水、４％ＮａＨＣ０３、水の順で洗練し
、ついでＮ・Ｎージメチルホルムアミドーこ溶かし、こ
れに酢酸エチルを加えて晶出し、敬ｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ
）‐Ｇｉｎ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｐ
ｈｅ−ＮＨ２を得た。収量４６１の夕（収率４５％）。
このものの理化学的性質は次の通りである。（１’融点
２０４〜２０５午Ｃ ■ 〔Ｑ〕奪＝−２６．９ｏ（Ｎ・Ｎ−ジメチルホルム
アミド、Ｃ＝１）‘３’元素分析値（％） Ｃ日Ｎ 分析値 ６２．５３ ６．４２ １０．６１計算値
６２．４１ ６．５１ １０．６２■ アミノ酸分析
値（鮒ＨＣＩ中、１１０ｑｏで２独特間加水分解）Ａｓ
ｐ（１．０３）（分子）、Ｔｈｒ（１．０）、ＧＩｙ（
１．０）、Ｍｅｔ（０．８６）、Ｐｈｅ（１．雌）。

【ロ’８Ｘ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＧＩｙ−Ｔｒｐ−Ｍｅ
ｔ−Ａｓｐ（０＆１）−Ｐｈｅ−Ｎ比からＴｈｒ−（Ｂ
ｚｌ）−ＧＩｙ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）
−Ｐｈｅ・ＮＨ２の合成：ＢＭ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｇ
Ｉｙ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ａｓｐ（０＆１）−Ｐｈｅ−Ｎ
比０．５１夕をギ酸５０の‘に溶かし、室温で２時間縄
拝する。

ついで室温で減圧下、蒸発乾固し、残溝にエーテル（無
水）を加えて粉末とし、ついでこれを真空乾燥する。か
くしてＴｈｒ（Ｂｚｌ）−ＧＩｙ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ａ
ｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｐｈｅ−Ｎ比・ＨＣＯＯＨを得た。
収量０．３６夕（収率７４％）。このもののＩＲスペク
トルを第５図に示す。

し一 ＢＸ一Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＧＩｙ−ｈｐの合成：
欧ｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）‐ＧＩｙ−Ｔｒｐ−ＯＭｅ（後
記）２．４３夕をＮ・Ｎ−ジメチルホルムアミド２５の
‘に溶解し、これに０．２Ｍトリス塩酸緩衝液（ｐＨ８
．８）５０Ｍを加え、さらに、ナガーゼ（長瀬産業社製
）（１０２×１ぴＰＵ／の９）１０雌を加え、室温で約
２時間燈梓する。ついで氷冷下で、溶液のＰＨを即日Ｃ
Ｉで２に調整し、酢酸エチル５００の【で抽出する。抽
出酢酸エチル層を無水硫酸ソーダで乾燥する。ついでこ
の酢酸エチル層液を濃縮し、無水エーテルでトリチュレ
−ト（Ｔｒｉｔｍａに）する。

得られた白色粉末を炉過し、真空下に乾燥すると、ＢＸ
−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＧＩｙ−Ｔｒｐが得られる。収量
１．７７夕（収率５５．７％）。このもののＩＲスペク
トル、ＮＭＲスペクトルを第６図、第７図にそれぞれ示
す。

Ｂ Ｂ比−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＧＩｙ−Ｔｒｐ−ＯＭｅ
の合成：Ｂ比−ＧＩｙ−ＯＨ０，３５０夕、日一Ｔｒｐ
一ＯＭｅ．Ｈｃｌ ｏ．４７３夕を５の【のＮ・Ｎージ
メチルホルムァミド‘こ溶解し、これにＮ−メチルモル
ホリン０．１１０私、ハイドロキシベンゾトリアゾール
０．２３０夕、ＤＣＣＯ．２７７夕を加え、一１５℃で
２時間凝拝する。

ついで室温で一夜放置し、生成した不溶物（Ｎ・Ｎ′ー
ジシクロヘキシル尿素）を炉過する。炉液を濃縮乾固し
「残溝を酢酸エチルに溶解する。ついで、酢酸エチル溶
液を０．９ Ｍクエン酸溶液、水、４％ＮａＨＣｏ３、
水の順で洗糠する。

酢酸エチル溶液を無水硫酸ソーダで乾燥し、ついで濃縮
し、無水エーテルでトリチュレートする。得られた沈で
んを炉適し、真空下に乾燥することにより「 ＆ｃ−Ｇ
Ｉｙ−Ｔｒｐ−ＯＭｅを得た。収量０．４６４夕（収率
６５．１％）。このものの理化学的性質は次の通りであ
る。‘１１ 融点 １３〜１３２０【２） 〔Ｑ〕奪＝
１２‐８０（メタノール、Ｃ：１‐０）（３’元素分析
値（％）Ｃ日Ｎ 分析値 ６０．７６ ６．７８ １１．１８計算値
６０．７８ ６．７１１１．１９上記において得られ
た＆ｃ−０１ｙ−Ｔｒｐ−ＯＭｅ（約０．４６４夕）を
９８％のギ酸に溶解し、室温で２時間燈梓する。

ついで室温で減圧下、蒸発乾固し、これに無水エーテル
を加えてトＩＪチュレートし、得られる白色の粉末を炉
別し、これを集めて真空下で乾燥する。かくしてＨ−０
１ｙ−Ｔｒｐ−ＯＭｅ・ＨＣＯＯＨＯ．３２１夕（収率
８４．６％）を得た。ついで上記の如くして得られたＢ
ｏｃ−Ｔｈｒ（ＢＺＩ）−ＯＨ３．０９夕、日一ＧＩｙ
一Ｔ沙一ＯＭｅ・ＨＣＯＯＨ２．９１夕をＮ・Ｎージメ
チルホルムアミド２０の‘に溶かし、これにＮ−メチル
モルホリン１．１０の‘、ハイドロキシベンゾトリアゾ
ール２３０夕、ＤＣＣ２．２７夕を加え、一１０ｑｏで
５時間擬梓する。

ついで室温で一夜蝿拝し、生成した不落物（Ｎ・Ｎ′ー
ジシクロヘキシル尿素）を炉去する。炉液を濃縮乾固し
、残湾を酢酸エチル２００の‘に溶解し、ついで、０．
９Ｍクエン酸、水、４％ＮａＨＣｏ３、水の順で洗練す
る。酢酸エチル溶液を、無水硫酸ソーダで乾燥し、つい
で濃縮し、無水エーテルでトリチュレートする。得られ
る白色粉末を炉別し「 これを集めて真空下で乾燥する
ことにより、ＢＭ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＧＩｙ−ｈｐ−
ＯＭｅを得た。収量５．３２夕（収率９８．８％）。こ
のものの理化学的性質は次の通りである。

｛１｝ 融点 ２２４〜２２５ｑｏ■ 〔Ｑ〕色２＝十
９．１０（メタノール、Ｃ＝１‐〇）｛３’元素分析値
（％） Ｃ日Ｎ 分析値 ６９．３２ １０．９６１２．３３計算値
６９．３１ １０．６６１２．５１【４）ＮＭＲスペ
クトルを第８図に示す。

上記の方法において得られたＢｏｃ−Ｔｈｒ（弦１）一
０１ｙ−Ｔｒｐ一ＯＭｅからのＴｈｒ（Ｂｚｌ）−ＧＩ
ｙ−Ｔｒｐ−ＯＭｅの合成は上記の則ｃ−ＧＩｙ−Ｔｒ
ｐ−ＯＭｅからＨ−ＧＩｙ−Ｔｒｐ−ＯＭｅの合成法に
準じて行った。

■ Ｍｅｔ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｐｈｅ−Ｎ比・Ｈｃ
ｌの合成：Ｐｍｚ−Ｍｅｔ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｐｈ
ｅ−ＮＨ２（後記の方法により合成）０．４０５夕を１
０ｗ‘の３．州Ｈｃｌ−酢酸エチルに溶かし、室温で約
１時間蝿拝する。

ついでこの溶液を濃縮し、濃縮液を無水エーテルでトリ
チュレートする。得られる粉末を炉過し、真空乾燥する
と、Ｍｅｔ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｐｈｅ−ＮＨ２・Ｈ
ｃｌｏ．２８６夕（収率８７．４％）が得られる。この
ものの理化学的性質は次の通りである。

‘１１ 融点 ２０１〜２０２０‘２１ 〔Ｑ〕色２＝
−８．？（Ｎ。

Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｃニ１．０）‘３１ 元素
分析値（％） Ｃ日Ｎ 分析値 ５５．６４ ６．１６ １０．２３計算値
５５．９１ ６．１９ １０．４３‘４１ＮＭＲスペ
クトルを第９図に示す。

Ｎ ＰｍセーＭｅｔ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｐｈｅ−Ｎ
Ｈ２の合成：Ｐｍｚ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−ＯＨ３．７
０夕、Ｈ−Ｐｈｅ−ＮＨ２１．６４夕を１０の‘のＮ・
Ｎージメチルホルムアミド‘こ溶解し、これにヒドロキ
シベンゾトリアゾール２．３０夕、Ｎ・Ｎ′ージシクロ
ヘキシルカルボジイミド２．２７夕を加え、一１ｏｏ○
で約４時間櫨拝する。

ついでｖ さらに室温で１夜鷹拝する。生成した不溶物
を炉去し、炉液を室温で濃縮する。残簿を約３００奴【
の酢酸エチルに溶解し、この酢酸エチル溶液を３００の
‘の０．９Ｍクエン酸水溶液、４００の‘の水、３００
のとの４％ＮａＨｃｏ３溶液、４００の‘の水で洗浴す
る。ついで、この酢酸エチル溶液を無水流酸ソーダで乾
燥した後、濃縮乾固し残笹を約４０の‘の熱メタノール
に溶解する。この溶液を一夜、冷蔵庫中（５℃）に保存
すると結晶が晶出する。これを炉過して真空乾燥する。
収量３．班夕（収率７７．２％）。上記で得られた結晶
３．鱗夕をトリフロロ酢酸４０の‘、アニソール８の上
の混合溶液に溶解し、室温で約１時間蝿拝する。ついで
この溶液を室温で濃縮する。濃縮残笹を２００の‘の無
水エーテルでトリチュレートして得られた結晶を炉過し
、真空乾燥すると、３．３６夕のＨ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ
）−Ｐｈｅ−Ｎ比・トリフルオロ酢酸塩が得られる。収
率９３．４％。ＮＭＲスペクトルを第１０図に示す。

上記で得られたＨ−舵ｐ（ＯＢｚｌ）−Ｐｈｅ・Ｎ仏・
トリフルオｏ酢酸塩０．４６７夕、Ｐ血‐Ｍｅｔ一ＯＨ
Ｏ．２９６夕、Ｎーメチルモルホリン０．１１０の‘、
ハイドロキシベンズトリアゾール０．２３０夕、ＤＣＯ
Ｏ．２２７夕、ＤＭＦ５．０叫を加え、一１０℃で１加
持間燈梓する。

生成した不溶物を炉去し、炉液を室温で濃縮する。残澄
を１００の【の酢酸エチルに溶解し、２００の‘の０．
９Ｍクエン酸水溶液、２００の‘の水、２００泌の４％
重曹水、２００の‘の水で洗浄し、次いで酢酸エチル層
を無水硫酸ソーダで乾燥後、濃縮する。濃縮残笹を１０
の‘の熱メタノールにとかし、一夜冷蔵庫（十５℃）中
で保存すると結晶化する。この結晶を炉過し、真空乾燥
する。１物‘の熱メタノールで同様に再結晶をくり返す
と０．４０５夕のＰｍリーＭｅｔ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）
−Ｐｈｅ−Ｎ比が得られる。

（収率６０．９％）このものの理化学的性質は次の通り
である。

【１１ 融点 １８１−１８２０‘２１ 〔Ｑ〕色２：
十１４．５ｏ（メタノール、Ｃ＝１‐〇）‘３ｌ 元素
分析値（％） Ｃ日Ｎ 分析値 ６１．４５ ６．０２ ８．４３計算値
６１．３６ ６．０１ ８．５２参考例 ３Ｚ−Ｐｙｒ
−Ｇｉｎ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−（＆
１）−ＧＩｙ−Ｔｒｐ−ＯＭｅの合成：Ｚ−Ｐｙｒ−Ｇ
ｉｎ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｔｙｒ（参考例１）７６雌
（０．１の ｍｏｌｅ）とＴｈｒ（Ｂｚｌ）−ＧＩｙ−
Ｔｒｐ一ＯＭｅ・Ｐートルェンスルホン酸塩（参考例２
）鼠雌（０．１の ｍｏｌｅ）をＮ・Ｎ−ジメチルホル
ムアミド０．６の‘に溶かし、この溶液にｐＨ４．０の
Ｍｃｌｌｖａｉｎｅ緩衝液１．２の‘を加えた後、さら
に酸性プロテアーゼＮｏ．３０６１０雌を加え、３００
０で１幼時間振とう下、反応を行った。

かくして析出する白色次でんを炉取し、これを０．８Ｍ
クエン酸、水４％ＮａＨＣｏ３、水の順で洗膝し、Ｎ・
Ｎ−ジメチルホルムアミドで平衡化したセフアデツクス
ＬＨ−２０によりカラムクロマトグラフィーを行い、活
性区分を濃縮し、残澄を凍結乾燥し、４０の９（収率３
２．８％）のＺ−ＰＭ−Ｇｉｎ一＄ｐ（ＯＢＺＩ）‐Ｔ
×‐Ｔｈｒ（舷１）−ＧＩｙ−Ｔｒｐ−ＯＭｅ・日２０
を得た。このものの理化学的性状は次の通りであった。
｛１） 〔Ｑ〕客＝−５．６０（Ｃ：１．０、Ｎ・Ｎ−
ジメチルホルムアミド）｛２｝ 元素分析値（％） Ｃ日Ｎ 分析値 ６１．６４ ５．８１ １０．１４計算値
６１．７０ ５．８４ １０．２８【３’アミノ酸分
析値（即日ＣＩ中、１１０００で２想時間加水分解）Ｇ
・Ａ２．０９（分子） Ａｓｐｌ．０６、Ｔｙｒｏ．６
５、Ｔｈｒｌ．００、ＧＩｙｌ．００。

上記の方法において、ｍｒ（Ｂｚｌ）−ＧＩｙ一Ｔｒｐ
−ＯＭｅ・Ｐ−トルェンスルホン酸塩の代りに、Ｔｈｒ
一ＧＩｙ−Ｔｒｐ一ＯＭｅ・Ｐートルエンスルホン酸塩
を用いた他は、同様に反応を行い、Ｚ−ＰＭ一Ｑｎ−Ａ
ｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−ＧＩｙ−Ｔｒｐ−
ＯＭｅ・Ｈ２０を得た。

このものの理化学的性質は次の通りであった。‘１’融
点 １９６〜２０１００ 【２） 〔Ｑ〕多＝一１４．７０（Ｃ：１．０、Ｎ・Ｎ
一ジメチルホルムアミド）‘３｝ 元素分析値（％） Ｃ日Ｎ 分析値 ５９．０２ ５．５９ １０．８２計算値
５９．２０ ５．７７ １１．０９参考例 ４デ
カベプチド誘導体Ｂからセルレインの製造：デカベプチ
ド誘導体Ｂ（実施例１）１４２岬をＮ・Ｎ−ジメチルホ
ルムアミド（ＤＭＦ）（無水）２地に溶解し、これにピ
リジン２叫を加え、ついで、無水ピリジン−無水硫酸コ
ンプレックス（結晶）８００の９をＤＭ円４の‘と、ピ
リジン４の‘に溶解したものを混合し、室温で１磯時間
蝿拝する。

かくして、デカベプチド譲導体Ｂのチロシン残基の水酸
基が硫酸ェステル（ＳＱＨ）となる。ついで、この反応
液を、ジヱチルアミン０．斑夕をＤＭＦ５羽に溶解した
液に滴下して中和する。

生成するゲル状の沈でんを遠心分離によって除去し、上
演をとる。この上債液を、Ｎ・Ｎ−ジメチルホルムアミ
ドで平衡化したセフアデツクスＬＨ−２０のカラムに通
す。

始めに流出する活性区分を集めて濃縮した後、無水エー
テル（５０の【）を加えて白色の枕でんを析出させこれ
を集め、真空乾燥することにより〔デカベプチド譲導体
Ａ〕１３物９を得た。

収率９０％。デカベプチド譲導体ＡのＩＲスペクトル（
第１３図）における特性吸収は１２５０および１０５０
仇‐１に特徴的に観察され、チロシン残基の水酸基がＳ
ＱＨになっていることが確認された。

デカベプチド誘導体Ａ５０雌、Ｐｄ−Ｃ（パ・ラジウム
炭素）３００の９を、Ｎ・Ｎ一ジメチルホルムアミド５
泌に加え、１期時間、水素雰囲気下、常圧下、室温で還
元する。ついで溶液部を炉取し、ＤＭＦで平衡化したセ
フアデックスＬＨ−２０（Ｐｈａｒｍａｃｉａ社製）の
カラムに通す。初めに出てくる活性区分３０奴（フラク
ションＮｏ．６−８、１０の【ずつのフラクション３本
分）にメタノール１０のを加える。ついで生じる不溶物
を炉去し、炉液にエーテル１０のｒを加える。生成する
枕でんを遠心分離により採取する。該沈でんを水に溶か
し、凍結乾燥する。このようにして得られたセルレイン
を水に溶かし、イオン交換樹脂〔アンバーライトＣＧ−
５０（日十）〕で処理し脱イオン化を行った。

かくして得られるセルレィン含有水溶液を濃縮し、残澄
を真空乾燥することによって３６．九ｃ（収率９０．７
％）の製品を得た。得られた化合物の理化学的性質は次
の通りである。【１’元素分析値（％） ＣＨＮ 分析値 ５１．４ ５．３１３．６ 計算値 ５１．５ ５．４１３．５ ‘２１ ｍスペクトルを第１１図に示す。

【３１ 核磁気共鳴スペクトルを第１２図に示す。

‘４’簿層クロマトグラフィーでのＲｆ値プレートとし
て、シリカゲル（Ｅ．Ｍｅｒｃｋ製）、溶媒として■ク
ロロホルム：メタノール：酢酸：水＝１：１：０．１：
０．５（容量比）の下層を用いての薄層クロマトグラフ
ィーにおける標品および本法において得られた製品のＲ
ｆ値はそれぞれ０（原点動かず）であり、■クロロホル
ム：メタノ−ル：２８％アンモニア水：水＝１：１：０
．１：０．１を用いてのＲｆ値は共に０．ね（ＵＶ吸収
およびＨＢｒ／ニンヒドリン発色）であつた。

‘５１ 炉紙電気泳敷 炉紙として、東洋炉紙Ｎｏ．５１Ａを用い、溶媒として
、ピリジン：酢酸：水＝３：６：１４１（容量比）を用
いて電圧２．４ＫＶ、約２時間の露気泳動において、標
品には３つのバンド、本法における製品には１つのバン
ドが観察された。

｛６｝ セルレインの生理活性試験（Ｂｉｏａｓｓａｙ
）■ 被検薬物として、本件の実施例で得られた製品、
対照として、標品を用い、被検薬物を生理食塩水に溶解
し、１００ｙタ力値／肌【（推定値）の液を調製し、こ
れを原液として溶封アンプルに小分けして用時開封して
使用した。

＠ 使用動物として、モルモットＨａｒ０ｅｙ系雌性３
００〜４００夕のものを用いた。

■ 試験方法 試料原液（１０００ムタ力価／肌【推定値）の生理食塩
水で正確に希釈して、０．２ムタ力価／私、０．１仏岬
力価／舷（推定値）とし、それぞれ高用量試料液（ＴＨ
）及び低用量試料液（ＴＬ）とした。

標品のセルレィンも同様に調製し、胆のう摘出標本およ
びマグヌス操作法はすべて“セルレインのバイオアツセ
イ（Ｂｉｏａｓｓａｙ）”（応用薬理、Ｖｏｌ．８ ８
６５〜８７０、１９７４）に従って行った。

＠ 試験結果 ムタ力価／奴 被検薬物（本件製品） １１４９ 標品（対照） １０００

【図面の簡単な説明】

第１図、第２図はＺ−Ｐｙｒ−Ｇｉｎ−Ａｓｐ（ＯＢｚ
ｌ）−ＴＭ−ＯＭｅのそれぞれＩＲスペクトル、ＮＭＲ
スペクトルを示す。 第３図、第４図はＺ−ＰＭ−Ｇｉｎ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ
）一ＴｙｒのそれぞれＩＲスペクトル、ＮＭＲスペクト
ルを示す。第５図は、Ｔｈｒ（Ｂ２ｌ）−Ｃｌｙ−Ｔｒ
ｐ−Ｍｅｔ‐兆ｐ（ＯＢＺＩ）‐Ｐｈｅ−ＮＨ２・蟻酸
塩のＩＲスペクトルを示す。第６図、第７図は、８Ｘ−
Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＧＩｙ−Ｔｒｐの、それぞれＩＲス
ペクトル、ＮＭ旧スペクトルを示す。第８図は、ＢＭ−
ｍｒ（Ｂｚｌ）−ＧＩｙ−Ｔｒｐ−ＯＭｅのＮＭＲスペ
クトルを示す。第９図は、Ｍｅｔ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）
−Ｐｈｅ一Ｎ比・ＨｃｌのＮＭＲスペクトルを示す。第
１ ０図は、Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｐｈｅ・ＮＨ２・Ｈ
ｃｌのＮＭＲスペクトルを示す。第１１図、第１２図は
、セルレィンの、それぞれｍスペクトル、ＮＭＲスペク
トルを示す。第１３図は、デカベプチド誘導体ＡのＩＲ
スペクトルを示す。函 主隈 図 べ 鮒 図 Ｍ 蝦 図 斗 服 図 Ｖ 球 函 心 蛾 ．図 ト 濠 図 的 船 図 い 割辰 図 〇 蛇 図 渉 図 ｛ 熊 図 船

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｚはベンジルオキシカルボニル基を示し、Ｂｚ
   ｌはベンジル基を示し、Ｚ＿１はＨまたはＳＯ＿３Ｈを
   示す）で示されるデカペプチド誘導体またはその塩。