JPS60259192A - 微生物脂質の生産方法 - Google Patents
微生物脂質の生産方法Info
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- JPS60259192A JPS60259192A JP59115162A JP11516284A JPS60259192A JP S60259192 A JPS60259192 A JP S60259192A JP 59115162 A JP59115162 A JP 59115162A JP 11516284 A JP11516284 A JP 11516284A JP S60259192 A JPS60259192 A JP S60259192A
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- lipid
- lipids
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- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明はモルテイエレラ属に属するイサベリナ、ビナセ
ア、ナナ、ラマニアナ、ラマニアナ・アングリスポラの
菌株を炭水化物を炭素源とする培地に培養し脂質含量の
高い菌体を培地中に増殖するのに際して培地に酢酸ある
いは酢酸塩を加えることにより、菌体の増殖量及び菌体
中の脂質含量の（油脂など）、極性脂質（リン脂質、糖
脂質など）〕２採取する生産性の高い脂質の生産方法に
関するものである。
ア、ナナ、ラマニアナ、ラマニアナ・アングリスポラの
菌株を炭水化物を炭素源とする培地に培養し脂質含量の
高い菌体を培地中に増殖するのに際して培地に酢酸ある
いは酢酸塩を加えることにより、菌体の増殖量及び菌体
中の脂質含量の（油脂など）、極性脂質（リン脂質、糖
脂質など）〕２採取する生産性の高い脂質の生産方法に
関するものである。
本発明者らは既にモルテイエレラ属に属するイサベリナ
、ビナセア、ナナ、ラマニアナ・アングリスポラの糸状
菌菌株が高濃度Ｙ炭水化物を炭素源とする培地に培養す
ることにより脂質含酸の高い菌体が培地中に高密度の製
造されること並びにその菌体より脂質を採取することに
よる生産性高く脂質が製造されることを見出した。捷だ
、同じくモルテイエレラ属に属する同種の糸状菌菌株が
高濃度の炭水化物を炭素源とした培地において培養され
た場合、γ−リルン酸含有脂質の高含計画体が高密度に
生産され、培養菌体よ！ｌ） ｒ −’Ｊルン酸含有脂
質あるいはγ−リルン酸が生産性高く製造されることを
見出した。
、ビナセア、ナナ、ラマニアナ・アングリスポラの糸状
菌菌株が高濃度Ｙ炭水化物を炭素源とする培地に培養す
ることにより脂質含酸の高い菌体が培地中に高密度の製
造されること並びにその菌体より脂質を採取することに
よる生産性高く脂質が製造されることを見出した。捷だ
、同じくモルテイエレラ属に属する同種の糸状菌菌株が
高濃度の炭水化物を炭素源とした培地において培養され
た場合、γ−リルン酸含有脂質の高含計画体が高密度に
生産され、培養菌体よ！ｌ） ｒ −’Ｊルン酸含有脂
質あるいはγ−リルン酸が生産性高く製造されることを
見出した。
以上の発明はそれぞれ動、植物に代わる微生物（糸状菌
）による脂質（油脂など）の生産に関するものであり、
後者の場合特につきみ阜（０θｎｏｔｂ−リルン酸ある
いはその含有脂質の製造方法に代るものである。
）による脂質（油脂など）の生産に関するものであり、
後者の場合特につきみ阜（０θｎｏｔｂ−リルン酸ある
いはその含有脂質の製造方法に代るものである。
本発明者らは更にモルテイエレラ属に属するイサベリナ
、ビナセア、ナナ、ラマニアナ、ラマニアナ・アングリ
スポラの糸状菌菌株を炭水化物を炭素源とする培地に培
養して得られた菌体から脂質を採取する脂質の製造に際
して、培地に添加物あるいは補助炭素源として酢酸ある
いは酢酸塩を加えることにより、同じ培養条件下で加え
ない場合よりも乾燥菌体中に占める脂質の含量が１０〜
３００％増加し、しかも菌体増殖量の増加が同時に認め
られるため、脂質の生産性が著しく高くなる１／ルン酸
を含めた全不飽和脂肪酸の脂肪時に占める含、Ｉ￥ｉが
３〜１８チ増加することを見出し、本発明は完成するに
至った。すなわち、本発明はモルテイエレラ属に属する
イサベリナ、ビナセア、ナナ、ラマニアナ、ラマニアナ
・アングリスポラの菌株を炭水化物を炭素源とする培地
に培養し、１旨質含量の高い菌体を培地中に増殖するに
隙して、培地に酢酸あるいは酢酸塩を加えることにより
、菌体の増殖量及び菌体中の脂質含量の大幅な増加を図
り、その菌体より脂質〔中性脂質（油脂など）極性脂質
（リン脂質、糖脂質など）〕を採取する生産性の高い脂
質の生産方法である。
、ビナセア、ナナ、ラマニアナ、ラマニアナ・アングリ
スポラの糸状菌菌株を炭水化物を炭素源とする培地に培
養して得られた菌体から脂質を採取する脂質の製造に際
して、培地に添加物あるいは補助炭素源として酢酸ある
いは酢酸塩を加えることにより、同じ培養条件下で加え
ない場合よりも乾燥菌体中に占める脂質の含量が１０〜
３００％増加し、しかも菌体増殖量の増加が同時に認め
られるため、脂質の生産性が著しく高くなる１／ルン酸
を含めた全不飽和脂肪酸の脂肪時に占める含、Ｉ￥ｉが
３〜１８チ増加することを見出し、本発明は完成するに
至った。すなわち、本発明はモルテイエレラ属に属する
イサベリナ、ビナセア、ナナ、ラマニアナ、ラマニアナ
・アングリスポラの菌株を炭水化物を炭素源とする培地
に培養し、１旨質含量の高い菌体を培地中に増殖するに
隙して、培地に酢酸あるいは酢酸塩を加えることにより
、菌体の増殖量及び菌体中の脂質含量の大幅な増加を図
り、その菌体より脂質〔中性脂質（油脂など）極性脂質
（リン脂質、糖脂質など）〕を採取する生産性の高い脂
質の生産方法である。
本発明で用いる使用菌はモルテイエレラ（Ｍｏｒｔ−ｉ
ｅｒｅｌｌａ ）属のイサベリナ（１ｓａｂｅｌｌｉｎ
ａ ） （Ｉ ＦＯ７８２４；７８８４，７８７３，８
１８３．８３０９）ビナセア（Ｖｉｎａｃｅａ ） （
Ｉ Ｐ’０６７３８ ）、ナナ（ｎａｎａ ） （ＴＦ
Ｏ８７９４）、ラマ＝ ７ ｆ （ｒａｍａｎｉａｎａ
） （ＩＦＯ８２８７）、ラマニアナ・アングリスポ
ラ（ｒａｍａｎｉ−ａｎａ ｖａｒ、 ａｎｇｌｉｓｐ
ｏｒａ ） （ＩＦＯ８１８７）の各種菌株である。な
お、上記した菌はいずれも財団法人発酵研究所に保存さ
れ、■ＦＯカタログ（菌株目録）に記載されている糸状
菌である。
ｅｒｅｌｌａ ）属のイサベリナ（１ｓａｂｅｌｌｉｎ
ａ ） （Ｉ ＦＯ７８２４；７８８４，７８７３，８
１８３．８３０９）ビナセア（Ｖｉｎａｃｅａ ） （
Ｉ Ｐ’０６７３８ ）、ナナ（ｎａｎａ ） （ＴＦ
Ｏ８７９４）、ラマ＝ ７ ｆ （ｒａｍａｎｉａｎａ
） （ＩＦＯ８２８７）、ラマニアナ・アングリスポ
ラ（ｒａｍａｎｉ−ａｎａ ｖａｒ、 ａｎｇｌｉｓｐ
ｏｒａ ） （ＩＦＯ８１８７）の各種菌株である。な
お、上記した菌はいずれも財団法人発酵研究所に保存さ
れ、■ＦＯカタログ（菌株目録）に記載されている糸状
菌である。
上記の糸状菌を培養する培地の炭素源である炭水化物と
しては、たとえばグルコース、フラクトース、サッカロ
ース、糖蜜、デン粉、木材糖化液などが用いられる。炭
水化物は培地】ｌ中に２０〜４００ｇ用いられるのが好
ましい。また窒素源としては、例えば硝酸アンモニウム
、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、リン酸アンモ
ニウムナトの様々無機窒素源、または尿素、ペプトン、
酵母エキス、コーン・スチーブ・リカーなど有機窒素源
が用いられる。無機塩としては、例えばＫＨ２ＰＯ４に
２ＨＰＯ４，ＮａＣｌ、 ＦｅＳＯ４，７＋（２０、Ｍ
ｇＳＯ４−７Ｈ２０、ＺｎＳＯ４・７１−１２０などが
用いられる。その他必安に応じて微量要素、その他の栄
養源を添加する。
しては、たとえばグルコース、フラクトース、サッカロ
ース、糖蜜、デン粉、木材糖化液などが用いられる。炭
水化物は培地】ｌ中に２０〜４００ｇ用いられるのが好
ましい。また窒素源としては、例えば硝酸アンモニウム
、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、リン酸アンモ
ニウムナトの様々無機窒素源、または尿素、ペプトン、
酵母エキス、コーン・スチーブ・リカーなど有機窒素源
が用いられる。無機塩としては、例えばＫＨ２ＰＯ４に
２ＨＰＯ４，ＮａＣｌ、 ＦｅＳＯ４，７＋（２０、Ｍ
ｇＳＯ４−７Ｈ２０、ＺｎＳＯ４・７１−１２０などが
用いられる。その他必安に応じて微量要素、その他の栄
養源を添加する。
上記糸状菌の培養は通常液体培地で、振とう培養、通気
攪拌培養などにより行われる。培地のｐＨは３０〜６０
が良く、通常２日〜１０日間位培養が行われる。史に、
培養の初期すなわち初期培地に、また通気攪拌培養の場
合では前培養培地に、あるいは培養の中間段階で酢酸あ
るいは酢酸塩（ナトリウム塩、カリウム塩などのアルカ
リ金属塩）を炭素源濃度など培養条件に応じて０．１〜
２０ｊｉ／ｌ培地の割合で加えることにより菌体の培養
が行われる。かくして、培養物中にγ−リルン酸など不
飽和脂肪酸含量が高い脂質の高含量菌体が生産性ｉ自り
生産されるので、培養物より菌体を分離し、脂質が糸状
菌菌体中に含まれるので、この菌体よりγ−リルン酸な
ど不飽和脂肪酸含量の高い脂質を採取するのが好適であ
る。培養物より菌体の分離に当っては菌糸があまりのび
ず極めて小単位（１〜１０細胞）で培養されており、従
って、例えば遠心脱水器などにより極めて容易に分離さ
れ、乾燥度の高い菌体（含水率約６０係）になる利点を
有することが明らかになった。γ−リルン酸など不飽和
脂肪酸含量の高い脂質の採取は常法によって溶媒抽出な
どにより行われる。
攪拌培養などにより行われる。培地のｐＨは３０〜６０
が良く、通常２日〜１０日間位培養が行われる。史に、
培養の初期すなわち初期培地に、また通気攪拌培養の場
合では前培養培地に、あるいは培養の中間段階で酢酸あ
るいは酢酸塩（ナトリウム塩、カリウム塩などのアルカ
リ金属塩）を炭素源濃度など培養条件に応じて０．１〜
２０ｊｉ／ｌ培地の割合で加えることにより菌体の培養
が行われる。かくして、培養物中にγ−リルン酸など不
飽和脂肪酸含量が高い脂質の高含量菌体が生産性ｉ自り
生産されるので、培養物より菌体を分離し、脂質が糸状
菌菌体中に含まれるので、この菌体よりγ−リルン酸な
ど不飽和脂肪酸含量の高い脂質を採取するのが好適であ
る。培養物より菌体の分離に当っては菌糸があまりのび
ず極めて小単位（１〜１０細胞）で培養されており、従
って、例えば遠心脱水器などにより極めて容易に分離さ
れ、乾燥度の高い菌体（含水率約６０係）になる利点を
有することが明らかになった。γ−リルン酸など不飽和
脂肪酸含量の高い脂質の採取は常法によって溶媒抽出な
どにより行われる。
かくして、本発明によればｒ−リルン酸などの不飽和脂
肪酸含量が高い脂質を生産性高く製造することができ、
本発明はｒ−’）ルン酸含有脂質の製造法あるいけ脂質
の改質方法として優れたものである。本発明は、特に現
在植物種子から採取されているｒ −＋）ルン酸含有脂
質の生産方法としてすぐれたものである。！ なお、γ−リルン酸（１８：３ （６，９，１２））は
リノール酸と共に哺乳動物では体内で合成することので
きない、食飼として要求される脂肪酸（必須脂肪酸）で
ある。これはγ−リルン酸が体内でビスホモ−ｒ−リル
ン酸となり、さらにはアラキドン酸となる前駆体である
こと、ビスホモ−γ−リルン酸、アラキドン酸はそれぞ
れプロスタグランジン、Ｅｌ ＋ Ｆｌ ｃｌ及びＦ２
＋ Ｆ２．ｔとなり生体中で極めて重要な生理的な役
割をはたしているからである。従って、γ−リルン酸含
有脂質は医薬品などとして利用できるものであることは
明らかである。
肪酸含量が高い脂質を生産性高く製造することができ、
本発明はｒ−’）ルン酸含有脂質の製造法あるいけ脂質
の改質方法として優れたものである。本発明は、特に現
在植物種子から採取されているｒ −＋）ルン酸含有脂
質の生産方法としてすぐれたものである。！ なお、γ−リルン酸（１８：３ （６，９，１２））は
リノール酸と共に哺乳動物では体内で合成することので
きない、食飼として要求される脂肪酸（必須脂肪酸）で
ある。これはγ−リルン酸が体内でビスホモ−ｒ−リル
ン酸となり、さらにはアラキドン酸となる前駆体である
こと、ビスホモ−γ−リルン酸、アラキドン酸はそれぞ
れプロスタグランジン、Ｅｌ ＋ Ｆｌ ｃｌ及びＦ２
＋ Ｆ２．ｔとなり生体中で極めて重要な生理的な役
割をはたしているからである。従って、γ−リルン酸含
有脂質は医薬品などとして利用できるものであることは
明らかである。
次に本発明の実施例を示すが、本発明はこれにより制限
を受けるものではない。
を受けるものではない。
実施例１゜
グルコース３０９ 、 ＫＨ２ＰＯ４２、！ｉ’ 、
ＭｇＳＯ３・７Ｈρ０．３ｇ、ＮａＣ１０，１ｇ、Ｆｅ
ＳＯ４，７Ｈ７Ｈ２Ｏ１０、ＣａＣｌ２２Ｈ２０ＬｏＩ
ｎｉｉｉＩ、 Ｃｕ５Ｏ，−５Ｈ２００，２Ｔｎ９、Ｚ
ｎＳＯ４・７Ｈ２０１、Ｏｒｎｇ、Ｍ ｎ Ｃ１２・４
Ｈ２０１，Ｏｍ？、’Ｉ”ｈｉａｍｉｎｅ−ＨＣＩＪ２
ｒｎｇ、Ｄ−Ｂｉｏｔｉｎ Ｏ，ｏ ２ ｍｇ ト窒素
源として（ＮＨ４）２８０４３ｇ、（Ｃ／Ｎ比（グルコ
ース中の炭素原子重量／窒素源中の窒素原子重量）は２
．２．２）を脱イオン水１０１００Ｏに混合し、ｐ）（
を４．６に調整した合成培地を基準として酢酸あるいは
酢酸塩（ナトリウム塩、カリウム塩）を所定量加えて培
地を作成した。この合成培地４００ｍ１を１１の三角フ
ラスコに入れ、それぞれ菌株を接種し、培養温度３０°
Ｃで７日間１５０ ｒｌ；１ｍで振とり培養を行った。
ＭｇＳＯ３・７Ｈρ０．３ｇ、ＮａＣ１０，１ｇ、Ｆｅ
ＳＯ４，７Ｈ７Ｈ２Ｏ１０、ＣａＣｌ２２Ｈ２０ＬｏＩ
ｎｉｉｉＩ、 Ｃｕ５Ｏ，−５Ｈ２００，２Ｔｎ９、Ｚ
ｎＳＯ４・７Ｈ２０１、Ｏｒｎｇ、Ｍ ｎ Ｃ１２・４
Ｈ２０１，Ｏｍ？、’Ｉ”ｈｉａｍｉｎｅ−ＨＣＩＪ２
ｒｎｇ、Ｄ−Ｂｉｏｔｉｎ Ｏ，ｏ ２ ｍｇ ト窒素
源として（ＮＨ４）２８０４３ｇ、（Ｃ／Ｎ比（グルコ
ース中の炭素原子重量／窒素源中の窒素原子重量）は２
．２．２）を脱イオン水１０１００Ｏに混合し、ｐ）（
を４．６に調整した合成培地を基準として酢酸あるいは
酢酸塩（ナトリウム塩、カリウム塩）を所定量加えて培
地を作成した。この合成培地４００ｍ１を１１の三角フ
ラスコに入れ、それぞれ菌株を接種し、培養温度３０°
Ｃで７日間１５０ ｒｌ；１ｍで振とり培養を行った。
培養後、口過法あるいは遠心分離法で菌体を集めた。そ
の一部を含水率の定量の為、精秤し、恒温槽中１２０°
Ｃで−・膠液乾燥し、含水率をめ、残りの菌体について
脂質の抽出を行った。菌体からの脂質の抽出は、残りの
湿菌体にクロロホルム−メタノール（２：ＩＶ ／ Ｖ
）混液を加え、ガラスピーズ存在下にホモジナイズす
ることにより菌体の破砕と脂質の抽出を同時に行った。
の一部を含水率の定量の為、精秤し、恒温槽中１２０°
Ｃで−・膠液乾燥し、含水率をめ、残りの菌体について
脂質の抽出を行った。菌体からの脂質の抽出は、残りの
湿菌体にクロロホルム−メタノール（２：ＩＶ ／ Ｖ
）混液を加え、ガラスピーズ存在下にホモジナイズす
ることにより菌体の破砕と脂質の抽出を同時に行った。
なお、抽出を完全に行うため、これを５回繰返し全抽出
液を集めた。上記抽出液をｉｉ”ｏｌｃｈの分配洗浄法
によ゛り精製した後、溶媒を減圧留去し重量法で全脂質
を測定した。得られた脂質について常法によりメチルエ
ステル化した後、ガスクロマトグラフィーを行い脂肪酸
組成をめた。このような方法で各種モルテイエレラ属糸
状菌について酢酸今るいは酢酸塩（ｆ、トリウム塙カリ
ウム塩）を添加した場合００しない場合汁ｄ菌体増殖量
及び脂肪酸組成の変化について断聾結果を表−１に示し
た。
液を集めた。上記抽出液をｉｉ”ｏｌｃｈの分配洗浄法
によ゛り精製した後、溶媒を減圧留去し重量法で全脂質
を測定した。得られた脂質について常法によりメチルエ
ステル化した後、ガスクロマトグラフィーを行い脂肪酸
組成をめた。このような方法で各種モルテイエレラ属糸
状菌について酢酸今るいは酢酸塩（ｆ、トリウム塙カリ
ウム塩）を添加した場合００しない場合汁ｄ菌体増殖量
及び脂肪酸組成の変化について断聾結果を表−１に示し
た。
表−１の結果から、同じ菌株について、酢酸あるいは酢
酸塩（ナトリウム塩、カリウム塩）を添加した場合に添
加しない場合よりも常に菌体増殖量が高く、多くの場合
２倍以上の値が得られていることが分る。そのことは脂
質生成量に関して、更に顕著に表れており、１５〜６倍
に増加していた。脂質含量においては、あまり変化が認
められ′ない場合もあるが、多くの場合１０〜２０係含
量が大きくなっていることが認められた。これらの事実
はグルコース１００．９の消費に対して出来る菌体ｉｉ
ｆ１ｇ）及び脂質量（Ｉ）で表わした菌体係数及び脂質
係数がそれぞれ酢酸あるいは酢酸塩を添加しない場合と
比べて大幅に増加しており、この系に −おいて脂質及
び菌体の生産性が著しく高くなることが明らかになった
。
酸塩（ナトリウム塩、カリウム塩）を添加した場合に添
加しない場合よりも常に菌体増殖量が高く、多くの場合
２倍以上の値が得られていることが分る。そのことは脂
質生成量に関して、更に顕著に表れており、１５〜６倍
に増加していた。脂質含量においては、あまり変化が認
められ′ない場合もあるが、多くの場合１０〜２０係含
量が大きくなっていることが認められた。これらの事実
はグルコース１００．９の消費に対して出来る菌体ｉｉ
ｆ１ｇ）及び脂質量（Ｉ）で表わした菌体係数及び脂質
係数がそれぞれ酢酸あるいは酢酸塩を添加しない場合と
比べて大幅に増加しており、この系に −おいて脂質及
び菌体の生産性が著しく高くなることが明らかになった
。
又、脂肪酸組成としてγ−リルン酸の含量カ酢醸あるい
は酢酸塩（ナトリウム塩、カリウム塩）を添加すること
により増加しており、全不飽和脂肪酸において１．７〜
２０１％の増加が認められた。
は酢酸塩（ナトリウム塩、カリウム塩）を添加すること
により増加しており、全不飽和脂肪酸において１．７〜
２０１％の増加が認められた。
１個の脂肪酸に対する不飽和結合の数を示す不飽和系数
もかなり大きく増加していることから、不飽和脂肪酸の
増加と同時に、不飽和脂肪酸の亮進 不飽和が起っていることが明らかである。こｑとは酢酸
あるいは酢酸塩の添加がその生成指軍おいて高度不飽和
酸であるγ−リルン酸を含む不飽和脂肪酸含情苔増加さ
せると言う意味における脂質の改質に効果を及ぼしてい
ることが確認さオする。
もかなり大きく増加していることから、不飽和脂肪酸の
増加と同時に、不飽和脂肪酸の亮進 不飽和が起っていることが明らかである。こｑとは酢酸
あるいは酢酸塩の添加がその生成指軍おいて高度不飽和
酸であるγ−リルン酸を含む不飽和脂肪酸含情苔増加さ
せると言う意味における脂質の改質に効果を及ぼしてい
ることが確認さオする。
Ａ７８２４ −−４．３５ ２．０１
〃 ＨＭ要ナナトリウム ５ ８，８３ ４．３８＃
７８７３ − − ５．５４ ２．１９酢酸ナトリウム
５ ９，９５ ５．７２〃 ７８８４ −− − ５
．５５ ２．２］〃 酢酸すｌ・リウム ５ ’７，０
８ ４．０４〃 酢酸カリウム ５ ６，３０ ３．８
４〃 酢酸 １ ７，３０ ３．１５ ＃ ８１８３−−− ９．０８ ３．３７〃 酢酸ナト
リウム ５ ９．９８ ４．６５＃８３０９ − −
５．２５ １．３０〃 酢酸ナトリウム ５ １０，９
０ ６．０３８ ６７３８ 、− −− ５．０３ １
．８５〃 酢酸ナトリウム ５ １０，１０ ５．１９
Ｃ８７９４−−４，５２２，３３ 〃 酢酸ナトリウム ５ ９，１５ ４．４２１） ８
２８７ −−３．６５ １．４９〃 酢酸ナトリウム
５ ５，２０ ２．７５ｒ＞ ８１８７ − − −
３．８０ ０．７１〃 酢酸ナトリウム ５ ８，３３
４．３１表 −１ ４５，８６，７１４，６８，０７１！１ １．０３４９
．６ １４，６ ２９，５ １０，７ ７５．１ １．
０７４０．２ ７．３ ］ ８．２ ４，７ ６３．’
、） （１，８４５７，５］９，１ ３３．２ ６，７
６５．０ ＋、１（１３９，９７，４１８，５３０５
９，０（１，７５５６，９１３，５２３，６４，２６７
４１（１，８８６＋、３ １２，８ ２１．０ ４．２
（）９．８ ０．８９４２．８ １０，５ ２１．９
４，０ ６４．：（０８５３７，２１１，２３０，３
４，２６４６（１８２４６，６１５５３３，２７９７３
７１００２４，７’ ４，３ １７．５ ５，６ ６８
．４ ０４１：（５５，３２０，１３６，３１０，（１
８８，５１，：（ｉ）３６．８ ６．２ ］ ６．８
３．２ ５ Ｇ、３ ０．６７５１．４ １７，３ ３
３．７ ３，６ ６４．５ ０．８：（５１，３７，８
１５，１５３５８，＋ ０．７８４８．３ １４，８
３０．５ ６．１ ７＋、９（］イ）５４０．９ ５，
０ １２．２ ５，８ ６４．６ ０．８＋５２．９
９，２ １７．３ ７，４ ６８．０ ０．９６１８．
８ ２，４ １２．７ ９．１ ６］、７ ｆ）、８２
５１．８ １４，４ ２７．７ ９，２ ７７．８ １
．００なお、表−１において、八け、モルテイエレライ
サベリナ（１１ｏｒｔｉｅｒｅ１１ａ １ｓａｂｅ］、
］、ｉｎａ ） 、１３は、モルテイエレラビナセア（
Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ｖｉｎａｃｅａ ）、Ｃは、
モルテイエレラナナ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａｎａｎａ
）、Ｄは、モルテイエレララ＝ンニアナ（’Ｍｏｒｔ
ｊ、ｅｒｅｌｌａｒａｍａｎｉａｎａ ）及びＥは、モ
ルテイエレララマニア埴− グルコースを示し、不飽和係数は脂肪酸１個に〜誦（ する不飽和結合の平均個数を示す。
７８７３ − − ５．５４ ２．１９酢酸ナトリウム
５ ９，９５ ５．７２〃 ７８８４ −− − ５
．５５ ２．２］〃 酢酸すｌ・リウム ５ ’７，０
８ ４．０４〃 酢酸カリウム ５ ６，３０ ３．８
４〃 酢酸 １ ７，３０ ３．１５ ＃ ８１８３−−− ９．０８ ３．３７〃 酢酸ナト
リウム ５ ９．９８ ４．６５＃８３０９ − −
５．２５ １．３０〃 酢酸ナトリウム ５ １０，９
０ ６．０３８ ６７３８ 、− −− ５．０３ １
．８５〃 酢酸ナトリウム ５ １０，１０ ５．１９
Ｃ８７９４−−４，５２２，３３ 〃 酢酸ナトリウム ５ ９，１５ ４．４２１） ８
２８７ −−３．６５ １．４９〃 酢酸ナトリウム
５ ５，２０ ２．７５ｒ＞ ８１８７ − − −
３．８０ ０．７１〃 酢酸ナトリウム ５ ８，３３
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．６ １４，６ ２９，５ １０，７ ７５．１ １．
０７４０．２ ７．３ ］ ８．２ ４，７ ６３．’
、） （１，８４５７，５］９，１ ３３．２ ６，７
６５．０ ＋、１（１３９，９７，４１８，５３０５
９，０（１，７５５６，９１３，５２３，６４，２６７
４１（１，８８６＋、３ １２，８ ２１．０ ４．２
（）９．８ ０．８９４２．８ １０，５ ２１．９
４，０ ６４．：（０８５３７，２１１，２３０，３
４，２６４６（１８２４６，６１５５３３，２７９７３
７１００２４，７’ ４，３ １７．５ ５，６ ６８
．４ ０４１：（５５，３２０，１３６，３１０，（１
８８，５１，：（ｉ）３６．８ ６．２ ］ ６．８
３．２ ５ Ｇ、３ ０．６７５１．４ １７，３ ３
３．７ ３，６ ６４．５ ０．８：（５１，３７，８
１５，１５３５８，＋ ０．７８４８．３ １４，８
３０．５ ６．１ ７＋、９（］イ）５４０．９ ５，
０ １２．２ ５，８ ６４．６ ０．８＋５２．９
９，２ １７．３ ７，４ ６８．０ ０．９６１８．
８ ２，４ １２．７ ９．１ ６］、７ ｆ）、８２
５１．８ １４，４ ２７．７ ９，２ ７７．８ １
．００なお、表−１において、八け、モルテイエレライ
サベリナ（１１ｏｒｔｉｅｒｅ１１ａ １ｓａｂｅ］、
］、ｉｎａ ） 、１３は、モルテイエレラビナセア（
Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ｖｉｎａｃｅａ ）、Ｃは、
モルテイエレラナナ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａｎａｎａ
）、Ｄは、モルテイエレララ＝ンニアナ（’Ｍｏｒｔ
ｊ、ｅｒｅｌｌａｒａｍａｎｉａｎａ ）及びＥは、モ
ルテイエレララマニア埴− グルコースを示し、不飽和係数は脂肪酸１個に〜誦（ する不飽和結合の平均個数を示す。
実施例２
グルコース６０ｇ、ＫＨ２ＰＯ４２ｇ、Ｍ、！９Ｓ０４
・７Ｉ］２００．３ｇ、ＮａＣ１０，１，ｇ、−ｉ’
ｆｉｖト・エキス ０．２ｇ、イースト・エキス ０．
２ｇ、ペプトン０．１ｇ、ＦｅＳＯ４・７ Ｈ２Ｏ１０
ｍｇ、Ｃａｃｌｚ Ｈ２Ｉ４２０１０ ”ｆ／、ｃｕｓ
ｏ４・５Ｈ２゜０．２ｍ９、Ｍｎ５０４−４１−１□０
１．０ ”９ト９．素源トＬ、”’Ｃ尿１ｔ（（ＮＩＩ
２）２ＣＯ）及び硫酸アンモニウム（（ＮＨ４）ｚＳＯ
４）をＣ／Ｎ比（炭素源中の炭素原子重量／窒素源中の
窒素原子重量）を約６０になるように加え、脱イオン水
１０１００Ｏ［混合ｍｆｒ嬉抽を禁漁用で岸査源である
炭水化物（グルコース）の濃度を増加させた場合、その
濃度に応じて培地成分を増加して、また窒素源を尿素な
どに変えた場合は同じＣ／Ｎ比になるように培地を調整
した。
・７Ｉ］２００．３ｇ、ＮａＣ１０，１，ｇ、−ｉ’
ｆｉｖト・エキス ０．２ｇ、イースト・エキス ０．
２ｇ、ペプトン０．１ｇ、ＦｅＳＯ４・７ Ｈ２Ｏ１０
ｍｇ、Ｃａｃｌｚ Ｈ２Ｉ４２０１０ ”ｆ／、ｃｕｓ
ｏ４・５Ｈ２゜０．２ｍ９、Ｍｎ５０４−４１−１□０
１．０ ”９ト９．素源トＬ、”’Ｃ尿１ｔ（（ＮＩＩ
２）２ＣＯ）及び硫酸アンモニウム（（ＮＨ４）ｚＳＯ
４）をＣ／Ｎ比（炭素源中の炭素原子重量／窒素源中の
窒素原子重量）を約６０になるように加え、脱イオン水
１０１００Ｏ［混合ｍｆｒ嬉抽を禁漁用で岸査源である
炭水化物（グルコース）の濃度を増加させた場合、その
濃度に応じて培地成分を増加して、また窒素源を尿素な
どに変えた場合は同じＣ／Ｎ比になるように培地を調整
した。
この培地を１０１の培養槽で培養する場合には６１．３
０１の培養槽でけ２０１仕込み、それぞれ菌株を接種し
、３０°Ｃの培養温度で所定の時間、通気量０．５〜２
．ＯＶＶｍで３００〜７００ｒｐｍで攪拌して培養を行
った。培養後遠心分離法で菌体を集めた。また、菌体の
増殖量、脂質生成量及び培地中の炭水化物濃度の測定を
行うため、培養の中間段階において所定の時間毎に１０
０ｍｔずつ試料の採取を行い、口過法により菌体と培地
の分離を行った。
０１の培養槽でけ２０１仕込み、それぞれ菌株を接種し
、３０°Ｃの培養温度で所定の時間、通気量０．５〜２
．ＯＶＶｍで３００〜７００ｒｐｍで攪拌して培養を行
った。培養後遠心分離法で菌体を集めた。また、菌体の
増殖量、脂質生成量及び培地中の炭水化物濃度の測定を
行うため、培養の中間段階において所定の時間毎に１０
０ｍｔずつ試料の採取を行い、口過法により菌体と培地
の分離を行った。
分離された菌体からの脂質の抽出、定量は実施例１に従
って行った。菌体を除いた培地については高速液体クロ
マトグラフィーにより炭水化物（グルコース）の濃度を
測定し、濃度が０になった時点で培養を終了した。
って行った。菌体を除いた培地については高速液体クロ
マトグラフィーにより炭水化物（グルコース）の濃度を
測定し、濃度が０になった時点で培養を終了した。
菌株モルテイエレラ・ラマニアナ・アングリスポラＩＦ
Ｏ８１８７について、グルコースを炭素源として種々の
条件での添加物としての酢酸す） ＩＪウムの添加効果
を調べるため、１０１及び３０１培養槽により培養を行
い、菌体増殖量（乾燥重量ｇ／ｌ）、脂質生成量（ｇ／
ｌ）、脂質含量（％）などをめた。
Ｏ８１８７について、グルコースを炭素源として種々の
条件での添加物としての酢酸す） ＩＪウムの添加効果
を調べるため、１０１及び３０１培養槽により培養を行
い、菌体増殖量（乾燥重量ｇ／ｌ）、脂質生成量（ｇ／
ｌ）、脂質含量（％）などをめた。
その結果を添加条件など含めて表−２に示した。
表−２において１０１培養槽を用いた場合、グルコース
濃度約９０ｇの系で酢酸ナトリウムの添加量を０．３〜
ＩＣＪｊｊ／ｌと変えると同時に、添加条件などを変え
て培養を行った結果を無添加の場合と比較して示した。
濃度約９０ｇの系で酢酸ナトリウムの添加量を０．３〜
ＩＣＪｊｊ／ｌと変えると同時に、添加条件などを変え
て培養を行った結果を無添加の場合と比較して示した。
酢酸ナトリウムを添加した場合は添加条件によらず特に
脂質生成量及び脂質含量の大幅な増加が認められる。こ
のことは炭素源であるグルコース１００ 、！９に対す
る脂質の生成量である脂質系数が無添加の場合と比較し
て大きく増加していることからも分る。菌体の増殖量も
無添加の場合よりも一般的に大きくはなっているが幾分
ばらつきが認められた。３Ｍ培養槽を用いてのグルコー
ス濃度約２ｏ１／１３と高濃度炭素源による培養結果で
も無添加の場合よりも０．３及び５１／１１ＳＡ添加の
系ではいずれも菌体増殖は幾分低下したが、脂質含量は
１０％以上増加しており、従って、脂質生成量が２０％
以上増加していることが認められた。このことは脂質系
数の大きな増加となって表れており、ＳＡの添加効果が
０３〜５ｊ９／１とかなり幅を持って菌体の高密度培養
により脂質生産に対して認められたことを示している。
脂質生成量及び脂質含量の大幅な増加が認められる。こ
のことは炭素源であるグルコース１００ 、！９に対す
る脂質の生成量である脂質系数が無添加の場合と比較し
て大きく増加していることからも分る。菌体の増殖量も
無添加の場合よりも一般的に大きくはなっているが幾分
ばらつきが認められた。３Ｍ培養槽を用いてのグルコー
ス濃度約２ｏ１／１３と高濃度炭素源による培養結果で
も無添加の場合よりも０．３及び５１／１１ＳＡ添加の
系ではいずれも菌体増殖は幾分低下したが、脂質含量は
１０％以上増加しており、従って、脂質生成量が２０％
以上増加していることが認められた。このことは脂質系
数の大きな増加となって表れており、ＳＡの添加効果が
０３〜５ｊ９／１とかなり幅を持って菌体の高密度培養
により脂質生産に対して認められたことを示している。
２ ＃ Ｇ９０ ＳＡ５ ５１
３ １ Ｇ９０ ５ＡＩＯ６９
４Ｉｙ Ｇ９０ ＳＡ５ ６３
５ ＃ Ｇ９０ ５ＡＩＯ６９，５
７〃 Ｇ８５ ５ＡＩＯ５１
８＃ Ｇ８５ ＳＡ２．３ ４６
９ ＋’ Ｇ８５ ＳＡｏ、３ ５０
１１ ｙ Ｇ１８５ ＳＡ５ ９８
２
３１．９ １１．９ ３７．２ １３．２ ３５．４３
４．０ １７．２ ５Ｑ、７ １９．１ ３７．８３６
．１ １８．４ ５１．０ ２Ｑ、５ ４０．１４０．
５ １７．０ ４１．９ １８．９ ４５．０３６．８
１７．９ ４８．５ １９．８ ４０．９３１．３
１４５ ４６．４ １７１ ３６．８２９．３ １５．
７ ５３．４ １８．４ ３４５３２．７ １４．７
４５．０ １７，３ ３８，４３４．４ １５，２ ４
４，２ １７，９ ４０，７７７．６ ２８，８ ３７
，１ １５，２ ４０，９６６．８ ３３，８ ５０，
６ １８，２ ３６．１’７４５ ３５．９ ４８，２
１８，０ ３７．３なお、前記衣−２において、ｑは
グルコース、（Ｊは尿素、Ａｓは硫酸アンモニウム、Ｓ
Ａは酢酸ナトリウムを示す。
４．０ １７．２ ５Ｑ、７ １９．１ ３７．８３６
．１ １８．４ ５１．０ ２Ｑ、５ ４０．１４０．
５ １７．０ ４１．９ １８．９ ４５．０３６．８
１７．９ ４８．５ １９．８ ４０．９３１．３
１４５ ４６．４ １７１ ３６．８２９．３ １５．
７ ５３．４ １８．４ ３４５３２．７ １４．７
４５．０ １７，３ ３８，４３４．４ １５，２ ４
４，２ １７，９ ４０，７７７．６ ２８，８ ３７
，１ １５，２ ４０，９６６．８ ３３，８ ５０，
６ １８，２ ３６．１’７４５ ３５．９ ４８，２
１８，０ ３７．３なお、前記衣−２において、ｑは
グルコース、（Ｊは尿素、Ａｓは硫酸アンモニウム、Ｓ
Ａは酢酸ナトリウムを示す。
また、表−２に示した実験番号１〜１２において、実験
番号１と１０は対照試験（コントロール）であり、実験
番号２〜５では、前培養培地に′対してはＳＡ無添加で
あり、実験番号４〜５では、培養スタート後、３０時時
間区ＳＡを添加し、実験番号６〜９及び実験番号１１．
１２では前培養地にＳ Ａ ５ ｊｉ／１１を添加した
。
番号１と１０は対照試験（コントロール）であり、実験
番号２〜５では、前培養培地に′対してはＳＡ無添加で
あり、実験番号４〜５では、培養スタート後、３０時時
間区ＳＡを添加し、実験番号６〜９及び実験番号１１．
１２では前培養地にＳ Ａ ５ ｊｉ／１１を添加した
。
Claims (1)
- （１） モルテイエレラ属に属するイサベリナ、ビナセ
ア、ナナ、ラマニアナ、ラマニアナ・アングリスポラの
菌株を炭水化物を炭素源とする培地に培養し、培養物よ
り脂質を採取するに際して、菌体を培養するための培地
に酢酸あるいは酢酸塩を加えることを特徴とする微生物
脂質の生産方法。
Priority Applications (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59115162A JPS60259192A (ja) | 1984-06-05 | 1984-06-05 | 微生物脂質の生産方法 |
| DE8484306511T DE3470061D1 (en) | 1984-02-09 | 1984-09-25 | A method for the preparation of a fungal body and a lipid rich in gamma-linolenic acid therefrom |
| EP84306511A EP0155420B1 (en) | 1984-02-09 | 1984-09-25 | A method for the preparation of a fungal body and a lipid rich in gamma-linolenic acid therefrom |
| CA000473158A CA1235083A (en) | 1984-02-09 | 1985-01-30 | METHOD FOR THE PREPARATION OF A FUNGAL BODY AND A LIPID RICH IN .gamma.-LINOLENIC ACID THEREFROM |
| US06/929,601 US4783408A (en) | 1984-02-09 | 1986-11-10 | Method for the preparation of a fungal body and a lipid rich in Y-linolenic acid therefrom |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59115162A JPS60259192A (ja) | 1984-06-05 | 1984-06-05 | 微生物脂質の生産方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60259192A true JPS60259192A (ja) | 1985-12-21 |
| JPS6251110B2 JPS6251110B2 (ja) | 1987-10-28 |
Family
ID=14655866
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59115162A Granted JPS60259192A (ja) | 1984-02-09 | 1984-06-05 | 微生物脂質の生産方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60259192A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5401646A (en) * | 1986-07-08 | 1995-03-28 | Suntory Limited | Process for production of bishomo-gamma-linolenic acid and eicosapentaenoic acid |
| EP3894575A1 (en) * | 2019-02-18 | 2021-10-20 | Technische Universität München | A method for producing microbial lipids |
-
1984
- 1984-06-05 JP JP59115162A patent/JPS60259192A/ja active Granted
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5401646A (en) * | 1986-07-08 | 1995-03-28 | Suntory Limited | Process for production of bishomo-gamma-linolenic acid and eicosapentaenoic acid |
| EP3894575A1 (en) * | 2019-02-18 | 2021-10-20 | Technische Universität München | A method for producing microbial lipids |
| JP2022519874A (ja) * | 2019-02-18 | 2022-03-25 | テクニッシュ ウニヴェルジテート ミュンヘン | 微生物脂質を生産するための方法 |
| US12473577B2 (en) | 2019-02-18 | 2025-11-18 | Technische Universität München | Method for producing microbial lipids |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6251110B2 (ja) | 1987-10-28 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| EXPY | Cancellation because of completion of term |