JPS6028996A - ポリペプチドの製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は次のアミノ酸配列を有するポリペプチド（ＩＸ
）の製造法に関する。

Ｈ−Ｉ″ｙｒ−Ａｌ　ａ−Ａｓｐ−、Ａｌ　ａ−Ｉ　］
　］ｅ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−＾５ｎ−５ｅｒＴｙ　ｒ−Ａ
ｒ　ｇ−Ｌｙ　５−Ｖａ　１−Ｌｅ　ｕ−Ｇｌ　ｙ−Ｇ
ｌ　ｎ−Ｌｅ　ｕ−５ｅ　ｒ−Ａｌ　＊−Ａｒ　ｇ−Ｌ
ｙ　５−Ｌｅ　ｕ−Ｌｅ　ｕ−Ｇｌ　ｎ−Ａｓ　ｐ−Ｉ
　１　ｅ−Ｍｅｔ−ｓｅｒ−Ａｒ　ｇ−Ｇｌ　ｎ−Ｇ１
　ｎ−Ｇ１　ｙ−Ｇｌ　ｕ−８ｅ　ｒ−Ａｓ　ｎ−Ｃ１
ｎ−Ｇ１　ｕ−Ａｒ　ｇ−Ｇｌ　ｙ−Ａｌｌ　−０Ｂ （ＩＸ） 本ヘフチＦ　ハＮａｔｕｒｅ　、　３００　、１８　ｒ
　ＮＯＶ　＋２７６　、１９８２　において公知のごと
くヒトの膵臓腫瘍から分離抽出された物質で、４０個の
アミノ酸残基から成り、同じくヒト膵臓腫瘍から分離さ
れたｈｕｍａｎ　ｐａｎｃｒｅａｓ　ｇｒｏｗｔｈ　ｈ
ｏｒｍｏｎｅ　−ｒｅｌｅａｇｉｎｇ　ｆｏｃｔｏｒ　
（ｈ　ｐ　ＧＲＦ　）　（Ｓｃｉｅｎｃｅ。

２１Ｂ　、　５　、　Ｎｏｖ　、　５８５　、１９８２
）と同様、強い成長ホルモン分泌促進作用を有する。本
ペプチドは小人症等・種々の成長ホルモン欠乏症に有効
であるばかりか、抗潰瘍剤、創傷の治療剤等としての利
用も考えられ、医薬品として極めて有用である。

本ペプチドの製造法については上記の文献に記載されて
いる面相を用いる方法が既に知られている。しかしなが
ら一般に固相法の場合、得られるペプチドの純度は低く
、最終工程での精製は容易ではなく多くの困難を伴う。

また、大量合成が必要であるペプチドの工業的製法とし
ても固相法は適当でない。

一方液相法には、ステップワイズ法とフラグメント縮合
法があるが、ステップワイズ法は生成物の精製が困難で
ある等固相法と同様の欠点を有することからフラグメン
ト縮合法が最も望ましい。しかしながらフラグメント縮
合を行なう場合、多くのフラグメントの組合せの中から
どのようにフラグメント選択するかが重要な課題となる
。

本発明者らはペプチドフラグメントの溶媒に対する溶解
性、ペプチドフラグメントの反応性および生成物の精製
法等について種々検討し、ポリペプチド（ＩＸ）を下記
の８個のペプチドフラグメント（Ｉ）〜（ＩＩ）に分け
て合成し、その後ペプチドフラグメント（Ｉ）から順次
縮合させることが最も効率的であることを見出し、本発
明を完成したのである。

ペプチドフラグメント（１１ Ｇｌｕ−８ｅｒ−Ａｓｎ−Ｇｉｎ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｇ
ｌｙ−Ａｌａペプチドフラグメント（Ｉ［） Ｓ　ｅ　ｒ−Ａｒ　ｇ−Ｇｌ　ｎ−Ｇ１　ｎ−Ｇ１　ｙ
ペプチドフラグメント傳） Ｌｅｕ−Ｇｉｎ−Ａｓｐ−ＩＩ　ｅＴ−Ｍｅｔペプチド
フラグメント剃 Ａｌ　ａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ ペプチドフラグメント（ＶＩ Ｇｌ　ｙ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−５ｅｔ ペプチドフラグメント（５） Ａｒｇ−Ｌｙｓ７Ｖａｌ−Ｌｅｕ ペプチドフラグメント（■） Ｔｈｒ−Ａｓｎ−８ｅｒ−Ｔｙｒ ペプチドフラグメント（■） Ｔｙ　ｒ−Ａｌ　ａ−Ａｓ　ｐ−Ａｌ　ａ−１１ｅ−Ｐ
ｈｅ（式中、すべてのアミノ酸はＬ一体を表わす） 即ち本発明は保護基を有するペプチドフラグメント（Ｉ
ｌと保護基を有するペプチドフラグメント（■）を縮合
させ、縮合物を得、次いでこの縮合物と保護基を有する
ペプチドフラグメント餌）と縮合させる、以下順次保護
基を有するペプチドフラグメントＩＶ）　、　（Ｖ）　
、（ロ）、（■）および（■）を縮合させた後、脱保護
することを特徴とする高純度ポリペプチド（ＩＸ）の製
造法である。

本発明では縮合方法としてはアジド法、酸化還元法、ジ
フェニルホスホリルアジド法、ＤＣＣ十添加物（Ｎ−ヒ
ドロキシコノ１り酸イミド、１−ヒドロキシベンゾトリ
アゾール、Ｎ−ヒドロキシ−５−ノルボルネン−２，３
−ジカルボキシイミド等）法等、ラセミ化を起こさない
方法が用いられるが、アジド法が最も好ましい。

保護基の除去法としては通常ペプチド合成分野で使用さ
れるトリフルオロ酢酸法、メタンスルホン酸法、トリフ
ルオロメタンスルホン酸法、フッ化水素法、液体アンモ
ニア−ナトリウム法等が適用されるが、好ましくはトリ
フルオロメタンスルホン酸を用いる方法が最適である。

本発明において用いられる保護基としてはアミノ酸のア
ミノ基には例えばトシル基、ベンジルオキシカルボニル
基、第３級プチルオキシカルボニル基、トリチル基、Ｐ
−メトキシベンジルオキシカルボニル基、ホルミル基、
トリフルオロアセチル基等、またアミノ酸のカルボキシ
ル基の保護には例えばメチルエステル、エチルエステル
、イソプロピルエステル、第３級ブチルエステル等のＣ
□〜、［Ｍアルキルエステルおよびベンジルエステル、
Ｐ−メトキシベンジルエステル、Ｐ−ニトロベンジルエ
ステル等のアラルキルエステル等、ペプチド合成分野で
通常使用されている保護基をあげることができる。

また、セリン、スレオニン、チロシンなと゛の水酸基の
保護は必ずしも必須ではないが、要すればア°セチル基
、ベンジル基、ベンジルオキシカルボニル基、第３級ブ
チル基等、通常の水酸基保護基による保護がなされる。

アルギニンのグアニド基の保護にはニトロ基、トシル基
、ベンジルオキシカルボニル基、アダマンチルオキシカ
ルボニル基、イソボニルオキシカルボニル基、メシチレ
ンスルホニル基等が用いられる。

メチオニンは要すればスルホキシドとして保護すること
も可能である。

本発明によって製造されるポリペプチド（■）の精製は
イオン交換樹脂、分配クロマトグラフィー、ゲルクロマ
トグラフィー等ペプチド化学の分野で通常用いられる方
法を単独に、または組合わせて用いることによって行わ
れる。

上記のごとく製造された高純度ポリペプチド（ＩＸ）は
ラットを用いたｉｎ　ｖｉｖｏ試験およびラットの下垂
体細胞を用いた　ｉｎ　ｖｉｃｒｏ試験において強い成
長ホルモン放出作用を示し、文献記載（Ｎａｔｕｒｅ　
ｔ　３００１１８　Ｔ　”ｖ、２７’　＋　１９８２）
の天然の成長ホルモン放出因子と同等の活性を示すこと
が認められた。

なお、本発明におけるペプチドフラグメント（Ｉ）〜（
■）の合成については通常のペプチドの合成法に従って
行なうことができる。

以下に実施例をあげて本発明をさらに具体的れもＬ型の
ものであり、アミノ酸の略号は一般の用法に従い、英文
名のはじめの３字で表わしく例外としてＡｓｎ＋＝アス
パラギン、Ｇ１ｎ＝グルタミン）、その他の略号は次に
よる。

ＰＭＺ：Ｐ−メトキシベンジルオキシカルボニルＭｔｓ
　；　メシチレン−２−スルフォニルＯＮｐ　：　Ｐ−
二トロフェノールエステルＢｚｌ　：ベンジル ２　：ペンジルオキシ力ルボニル ＴＦＡ　：　トリフロロ酢酸 Ａｃ０Ｅｔ　：酢酸エチル Ｅ　ｔ　３Ｎ　；　）リエチルアミン ＩＡＮ　：亜硝酸イソアミル ＤＭ）”　−：　ジメチルホルムアミドＬＡＰ　：　ロ
イシンアミノペプチダーゼＤＭＳＯ：　ジメチルスルホ
キシド Ｍｅａｎ　：　メチルアルコール ＥｔＯＨ：　エチルアルコール Ｔ）ＩＦ　：　テトラヒドロフラン また、Ｒｆ値はシリカゲル（メルク社　キーゼルゲル６
０　Ｆ　２５４　）上の薄層クロマトグラフィー（ＴＬ
Ｃ）ｌこて下記混合溶媒を用いて測定したものである。

Ｒｆｌ　：　クロロホルム−メタノール−水＝８　：　
３　：　ＩＲｆｆ２　＝　クロロホルム−メタノール→
詐酸＝９　：　１　：　０．５Ｒｆ３　：　ｎ−ブタノ
ール−酢酸−ビリジン−水＝４：１：１：２実施例 Ｈ−Ｔｙｒ−Ａｌ　ａ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｉ　１　ｅ−
Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−３ｅｒ−Ｔｙ　ｒ−Ａｒ　ｇ
−Ｌｙ　５−Ｖａ　１−Ｌｅ　ｕ−Ｇｌ　ｙ−Ｇｌ　ｎ
−Ｌｅ　ｕ−８ｅ　ｒ−Ａ１　ａ−Ａｒ　ｇ−Ｌｙ　＠
−Ｌｅ　ｕ−Ｌｅ　ｕ−Ｇｌ　ｎ−Ａ　ｓ　ｐ−Ｉ　ｌ
　ｅ−Ｍｅ　ｔ−５ｅ　ｒ−Ａｒ　ｇ−Ｇ　ｌ　ｎ−Ｇ
１　ｎ−Ｇ１　ｙ−Ｇｌ　ｕ−５ｅ　ｒ−Ａｓ　ｎ−Ｇ
１　ｎ−Ｇ１　ｕ−Ａｒ　ｇ−Ｇｌ　ｙ−Ａｌ　ａ−Ｏ
Ｈ（ｈｐ　ＧＲＦ　（１−４Ｑ　）　−ＯＲ）合物Ｇ）
の製法 （１１ｐＭＺ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−ＯＢＺＩ　（化合物Ａ
）１７）製造ｐＭＺ−Ｇｌ　ｙ−ＯＨ３−５７ＰとＥｔ
ｇＮ　２−２９　ｔｎｌをＤＭＦ３０−に溶かし、−１
５℃にてクロル炭酸イソブチル２．１３−を加える。

この溶液にＨ−ＡＩ　ａ−ＯＢｚ　１のｐ−）／ＬＪ−
７スルホン酸塩５．ＯＦとＥｔ３Ｎ　２．０８　ｍｌに
より調製したＨ−Ａ１　ａ−ＯＢｚ　１　のＤＭＦ溶液
を加え、０℃にて３時間攪拌する。析出した結晶を枦去
後、ｒ液を減圧乾固する。

残渣をＡｃ０Ｆ、ｔ　５０　ｍ／に溶かし、５％クエン
酸水、５％炭酸水素ナトリウム水、飽和食塩水の順に洗
浄する。ＡｃｏＥｔ層を硫酸ナトリウーｉで乾燥後、減
圧乾固する。

残渣にエーテルを加え、結晶を計数し、ＴＨＦ−エーテ
ルより再結晶する。収量４．３５　Ｆ　（７２，９％）
、融点７０〜７１℃、Ｒｆ工＝　０．７５　、　Ｒｆ２
＝　０．８９　。

〔α）：’　＝−２０，３°（ｃ＝ｔ、３　、ＤＭＦ）
元素分析値　Ｃ２□Ｈ２４Ｎ２０６としてＣＨＮ 計算値　６２．９９　６．０４　７．００実測値　６２
．７４　６，１８　６．８８ＭＱＩ ｆ２１　、、Ａｒｇ（Ｍｔｓ）−Ｇｌｙ−Ａｌａ−ＯＢ
ＺＩ　（化合物Ｂ）の製造 化合物Ａ　７．７Ｏｆをアニソール４．１５　ｔｄ存在
下、水冷下６０分間ＴＦＡ１６．６ｍ７にて処理し、エ
ーテルで粉末とした後、計数乾燥し脱ＰＭＺ化物を得る
。次にこの粉末をＤＭＦ　３Ｑ一に溶かし、Ｅｔ３Ｎ２
．６８ｍ７テ中和する。一方、ｐＭＺ−Ａｒｇ（Ｍｔｓ
）−ＯＨのシクロヘキシルアミン塩１３゜１０　Ｆと１
規定塩酸２１．２−より調製したｐＭＺ−Ａｒｇ（Ｍｔ
ｓ）−ＯＨとＥｔ３Ｎ　３．２４−をＤＭＦ５０−に溶
かし一１５℃　にてクロル炭酸イソブチル３．０２ｆｆ
＋／を加え、混合酸無水物を作る。この溶液に前記の脱
ＰＭＺ化物を含むＤＭＦ溶液を加え、０℃にて３時間攪
拌する。析出した結晶を枦去後、ｒ液を減圧乾固する。

残渣を Ａｃ０Ｅｔ　１５０−に溶かし、５チクエン酸水、５％
炭酸水素ナトリウム水、飽和食塩水で洗浄す名。Ａｃｏ
Ｅｔ層を硫酸ナトリウムで乾燥後減圧乾固する。残渣に
エーテルを加え、１４．５２　Ｆの粉末を得る。この粉
末をシリカゲルクロマトグラフィー（シリカゲル２５０
Ｆ、展開溶媒クロロホルム−メタノール＝２０　：　１
　）により精製を行う。Ｒｆ□＝　０．６４　に相当す
る画分を集め、減圧乾固する。残渣にエーテルを加え、
粉末とし沖取する。　収量１２．２０　Ｆ（８６，５チ
）、融点８１〜８３℃、Ｒｆ、＝＝０．６４　、　Ｒｆ
、＝　０．５１ ［α）、　＝−５，８°（Ｃ＝２．１　、　ＤＭＦ　）
元素分析値Ｃ３６Ｈ４６Ｎ６０．ＳとしてＨＮ 計算値　５８，５２　６．２８　１１．３８実測値　５
８．３１　６．２５　１１．２２ｆ３１　ｐＭＺ−Ｇｌ
ｕ（ＯＢｚｌ）−Ａｒｇ（Ｍｔｓ）−Ｇｌｙ−Ａｌａ−
ＯＢｚｌ　（化合物Ｃ） 化合物Ｂ　５．００　Ｆをアニソール２．１９ｔｄ存在
下、水冷下６０分間’Ｉ’　Ｆ　Ａ　８．７７　ｄで処
理し、脱ＰＮＺ化する。エーテルを加え粉末とした後戸
数し乾燥する。次にこの粉末をＥ　ｔ　ｓＮ　Ｏ−９４
３−を含むＤＭＦ２０−に溶かし、ｐＭＺ−Ｇｌｕ（Ｏ
Ｂｚ　ｌ　）　−０Ｎｐ　３．５４　ｆを加え、室温に
て１４時間攪拌する。反応終了後、溶媒を減圧乾固し、
残渣に５チ炭酸水素ナトリウム水を加え、粉末とする。

この粉末を５チクエン酸水、水の順に乳鉢を用いて洗浄
後、ＤＭＦ−イソプロパツールより再沈澱する。収量４
．５０　Ｆ　（６９，４％）、融点１００〜１０１℃、
　Ｒｆ□＝　０．７３　、　Ｒｆ、＝　０．６０　。

〔α〕Ｄ−５，４°（Ｃ＝１゜８．　ＤＭＦ）元素分析
値　Ｃ４８Ｈ５４Ｎ７０□２ＳとしてＨＮ 計算値　６０．１７　６．２１　１０．２３実測値　５
９，９７　６．０４　１０．０９（４１ｐＭＺ−Ｇｌｎ
−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−、八ｒｇ（Ｍｔ　＊　）−Ｇｌ
　ｙ−Ａｌａ−ＯＢｚｌ　（化合物Ｄ）の製造化合物Ｃ
５，５０Ｆをアニソール２．４８ｍ／存在下、水冷下６
０分間Ｔ　Ｆ　Ａ　９．９２　ｍ／で処理し、脱ＰＭＺ
化する。エーテルを加え粉末とした後、沖取し乾燥する
。

次にこの粉末をＥ　ｔ　ａＮ　Ｏ−８０−を含むＤＭＦ
　２０−に溶かし、ｐＭＺ−Ｇｌｎ−ＯＮｐ２．４８ｆ
を加え、室温にて１４時間攪拌する。

反応終了後、溶媒を減圧乾固し、残渣に５チ炭酸水素ナ
トリウム水を加え、粉末とする。この粉末を５チクエン
酸水、水の順に乳鉢を用いて洗浄後、ＤＭＦ−イソプロ
パツールより再沈澱する。収量 ５．４５　ｆ　（８７，３％）、融点　１２６〜１２７
℃、Ｒｆｌ　＝　０．６０　、　Ｒｆ、　＝　０．４１
〔α）　＝−６，０’（Ｃ＝１．３．ＤＭＦ）元素分析
値　Ｃ６３Ｈ６７Ｎ、０□４ｓトシテＣＨＮ 計算値　５８゜６０　６．２２　１１．６１実測値　５
８．４０　６．２８　１１．４８ｆ５１　ｐＭＺ−Ａｓ
ｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ａｒｇ（Ｍｔｓ）−
Ｇｌ　ｙ−Ａｌ　ａ−ＯＢ　ｚ　１　（化合物Ｅ）（ｙ
）製造化合物Ｄ５．４５Ｆをアニソール２．７１１ｎｔ
存在下、水冷下６０分間Ｔ　Ｆ　Ａ　１０．８　ｍＺで
処理し、脱ＰＭＺ化する。エーテルを加え粉末とした後
、計数し乾燥する。

次にこの粉末をＥｔｚＮ　Ｏ，６９９ｍ／を含むＤＭＦ
３Ｑｒｎｌに溶かし、ｐＭＺ−Ａｓｎ−ＯＮｐ２．５１
　Ｐを加え、室温にて１４時間撹拌する。反応終了後、
溶媒を減圧乾固し、残渣に５チ炭酸水素ナトリウム水を
加え粉末とする。この粉末を５％クエン酸水、水の順に
乳鉢を用いて洗浄後、ＤＭＦ−ＥｔＯＨより再沈澱する
。

収量　５．２１９　（８６，４％） 融点　１９７〜１９９℃、　Ｒｆよ＝　０．６９〔α：
、　２０　＝＝　、　、７°（ｃ　＝Ｑ、（３、ＤＭＳ
Ｏ）元素分析値　０６７馬ｔ５Ｎ１１°１６ｓとしてＣ
ＨＮ 計算値　δ７．０３　６．１３　１２．８４実測値　５
７．１１　６．１３　１３．０３アミノ酸分析値（６規
定塩酸加水分解）Ａｓｐ　１．０２（１）　、　Ｇｌｕ
　２．０２（２）　。

Ｇｌｙ　１．００（１）　、　Ａｌａ　Ｏ，９９（ｔ）
　。

Ａｒｇ　Ｏ，９６（１）　平均回収率　７５％　（カッ
コ内は理論値） ｆ６１　ｐＭＺ−３ｅｒ−、Ａｓｎ−Ｇｉｎ−Ｇｌｕ（
ＯＢｚｌ）−、Ａｒｇ（Ｍｔｓ）−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｏ
Ｂｚｌ　（化合物Ｆ）の製造 化合物Ｅ　３．５０　Ｆをアニソール１．５７ｉ存在下
、水冷下６０分間Ｔ、ＦＡ６．３ｍ７ｉごて処理し、エ
ーテルで粉末とした後、ｒ取乾燥し、脱ＰＭＺ化物を得
る。次にこの粉末をＤＭＦ−ＤＭＳＯ（１：　１　）　
２０　ｍＺ　Ｋ溶かし、Ｅ　ｔ　３Ｎ　Ｏ−４１−で中
和する。一方、ｐＭＺ−５ｅｔ−Ｎ（ＮＨ４Ｉ　、２４
　ＰのＤＭＦ溶液２−に−１０℃にて４，３９６規定塩
酸−ＤＭＦ溶液２．３９　ｍＺ　トＩＡＮ　０．７０　
ｍＺ　’ｉｌ−加エルコと−こよりアジドとし、Ｅｌ、
Ｎｌ、４（ｉ−で中和する。この溶液に前記脱ＰＭＺ化
物を含むＤＭＦ−ＤＭＳＯ溶液を加え、液性を弱アルカ
リ（ｐＨ７〜８）として４℃６ごて１４時間攪拌する。

反応後、液性を中性とした後、溶媒を濃縮する。残渣に
水を加えると粉末が得られる。得られた粉末を５チクエ
ン酸水、水の順に乳鉢を用いて洗浄後、Ｄ　Ｍ　Ｆ　−
ＥｔＯＨより再沈澱する。　収量　３．４Ｏｆ　（９０
，４％）融点　１９４〜１９７℃。

〔α）、＝−９，７°（Ｃ＝２．７　、　ＤＭＳＯ）　
。

Ｒｆ工＝０゜５５ 元素分析値　Ｃ６０Ｈ７８Ｎ１２０１８Ｓ１としてＣＨ
Ｎ 計算値　５５．９７　６．１１　１３．０６実測値　５
６，０１　６．１３　１３．１０アミノ酸分析値（６規
定塩酸加水分解）ＡＳＰ　Ｏ，９７（１）　、　Ｓｅｒ
　Ｏ，８８（１）　。

Ｇｌｕ　１．９５（２）　、　Ｇｌｙ　１．００（１）
　。

Ａｌａ　Ｏ，９３（１）　、　Ａｒｇ　Ｏ，８９（１）
平均回収率３３％（カッコ内は理論値）（７）　ｐＭＺ
−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−８ｅｒ−Ａｓｎ−Ｇｉｎ−Ｇｌ
ｕ（ＯＢｚｌ）−Ａｒｇ（Ｍｔｓ）−Ｇｌｙ−Ａｌａ−
ＯＢｚｌ　（化合物Ｇ）の製造 化合物Ｆ　３．４０　Ｆをアニソール１．７１ｍｊ存在
下、水冷下６０分間Ｔ　Ｆ　Ａ　６．８５　ｍｇで処理
し、脱ＰＭＺ化する。エーテルを加え、粉末とした後、
戸数し乾燥する。

次にこの粉末をＥｔ３Ｎ　Ｏ，３８８−を含むＤＭＳＯ
−ＤＭＦ（１：　１　）２０−に溶かし、ｐＭＺ−Ｇｌ
ｕ（ＯＢｚｌ）−ＯＮｐ　１，５２９−を加え、室温に
て１４時間攪拌する。反応終了後、溶媒を濃縮し、残渣
に５チ炭酸水素ナトリウム水を加え、粉末とする。この
粉末を５％クエン酸水、水の順番と乳鉢を用いて洗浄後
、Ｄ　Ｍ　Ｆ　−ＥｔＯＨより再沈澱する。　収量　３
．３５　Ｆ　（８４，１チ）、融点　２０７〜２１０℃
、　Ｒｆ、　＝　０．７０１〔α）８°＝−１，９°（
Ｃ＝０．５　、ＤＭＳＯ）元素分析値　Ｃ７２Ｈ９１Ｎ
１３０２１ＳとしてＣＨＮ 計算値　５７．３９　６．０９　１２．０９実測値　５
７．２２　６．０７　１１．９０アミノ酸分析値（６規
定塩酸加水分解）Ａｓｐ　１．０１（１）　、　５ｅｒ
　Ｏ，９４（１）　＃Ｇｌｕ　３．０１（３）　＋　Ｇ
ｌｙ　１．００（１）　ｒＡＩ＠１．０２（１）　、　
Ａｒｇ　Ｏ，９９（１）平均回収率８５％（カッコ内は
理論値）（２）　ＰＭＺ　−８ｅ　ｒ−Ａｒ　ｇ　（Ｍ
ｔ　ｓ　）−Ｇｌ　ｎ−Ｇ１　ｎ−Ｇ１　ｙ−Ｇｌ　ｕ
（ＯＢ　ｚ　ｌ　）−８ｅ　ｒ−＋Ａｓｎ−Ｇ１　ｎ−
Ｇ１　ｕ（ＯＢ　ｚ　ｌ　）−Ａｒｇ（Ｍｔ　ｓ　）−
Ｇｌ　ｙ−ＡＩ　＠−〇Ｂ　ｚ　１　（化合物Ｈ）＜７
）製造化合物Ｇ　１．００９をアニソール０．５−存在
下、水冷下６０分間ＴＦＡ２−にて処理し、脱ＰＭＺ化
する。エーテルを加え、粉末とした後、戸数し乾燥する
。次にこの粉末をＤＭＳＯ−ＤＭＦ　（１：　１　）１
０−に溶かし、Ｅｔ３Ｎ　Ｏ，０９３−で中和する。一
方、ｐ　ＭＺ−５ｅ　ｒ−Ａｒ　ｇ　（Ｍｔ　ｓ　）−
〇Ｉ　ｎ−Ｇ１　ｎ−Ｇ１　ｙ−ＮＨＮＨ２（融点　２
０７〜２０８℃。

〔＜ｏ　＝　ａ、ａｏ（Ｃ＝１．２　、ＤＭＳＯ）　）
　９３１■のＤＭＳＯ＝ＤＭＦ　（１：　ｌ　）溶液１
５−に−１０℃にて４，３９６規定塩酸−〇ＭＦ溶液０
．５４４−とＩ　Ａ　Ｎ　Ｏ，１５９−を加えることに
よりアジドとし、”３ＮＯ，３３３−で中和する。この
溶液に前記の脱ＰＭＺ化物を含むＤＭＳＯ−ＤＭＦ溶液
を加え、液性を弱アルカリ（ｐＨ７〜８）として４℃に
て１４時間攪拌する。反応後、液性を中性とした後、溶
媒を濃縮する。残渣に５チクエン酸水を加えると粉末が
得られる。得られた粉末を５チクエン酸水、水の順に乳
鉢を用いて洗浄後、Ｄ　Ｍ　Ｓ　Ｏ−ＭｅＯＨより再沈
澱する。　収量　１．４（１（９４，０％）、融点　２
４５℃（分解）、　〔α弓０＝＋２．１゜（ｃ　エＯ−
５ｅ　Ｄ　Ｍ　Ｓ　Ｏ）　、　Ｒｆｓ　ユ０．７１元素
分析値　Ｃ１０２Ｈ１３７Ｎ２　ｉｓ°３１Ｓ２°Ｈ２
０としてＣＨＮ 計算値　５４，１２　６．１９　１４．２３実測値　５
４．１５　６．２２　１３．９５アミノ酸分析値（６規
定塩酸加水分解）ＡＩＰ　０．９９（１）　、　Ｓｅｔ
　１．７８（２）　。

Ｇｌｕ　４．８８（５）　、　Ｇｌｙ　２．００（２）
　。

Ａｌａ　Ｏ，９６（１）　、　Ａｒｇ　１．９１（２）
平均回収率　８５％（カッコ内は理論値）（３）　ｐＭ
Ｚ−Ｌｅｕ−Ｇｌ　ｎ−Ａｓ　ｐ　（ＯＢｚ　ｌ　）−
１１ｅ−Ｍｅ　ｔ　（０）−８ｅ　ｒ−Ａｒｇ（Ｍｔ　
ｓ　）−Ｇｌ　ｎ−Ｇ１　ｎ−Ｇ１　ｙ−Ｇｌ　ｕ（Ｏ
Ｂｚ　Ｉ　）−５ｅ　ｒ−Ａｓｎ−Ｇｌ　ｎ−Ｇ１　ｕ
　（ＯＢ　ｚ　ｌ　）−Ａｒ　ｇ　（Ｍｔ　ｓ　）−Ｇ
ｌ　ｙ＝Ａｌａ−ＯＢｚｌ　（化合物■）の製造化合物
Ｈ１，４０Ｆをアニソール０．６７３１ｎｌ存在下、水
冷下６０分間Ｔ　Ｆ　Ａ　２．６９　ｔｎｔにて処理し
、脱ＰＭＺ化する。エーテルを加え、粉末とした後、戸
数し乾燥する。次にこの粉末をＤＭＳＯ−ＤＭＦ　（１
：　ｌ　）ＩＱ−に溶かしＥ　ｔ　ｓＮ　Ｏ−０８７−
で中和する。一方、ｐＭＺ−Ｌｅｕ−Ｇｉｎ−Ａｓｐ（
ＯＢｚｌ　）−４１ｅ−Ｍｅｃ（０）−ＮＨＮＨ２（融
点　２１３〜２１５℃、〔α）、　＝−２２，１°（Ｃ
＝１．２　、　ＤＭＦ）　１．１３　ＰのＤＭＳＯ−Ｄ
ＭＦ（１：　ｌ　）溶液３０−に−１０℃にて４．９８
規定塩酸−ＤＭＦ溶液０．８０３−とＩ　Ａ　Ｎ　Ｏ，
２ｍｌを加えることによりアジドとし°、Ｅｔ３Ｎ　Ｏ
，４１７−で中和する。

この溶液に前記の脱ＰＭＺ化物を含む ＤＭＳＯＤＭＦ　溶液を加え、液性を弱アルカリ（ｐＨ
７〜８）として４℃にて１４時間攪拌する。反応後、液
性を中性とした後、溶媒を濃縮する。残渣に５チクエン
酸水を加えると粉末が得られる。得られた粉末を５％ク
エン酸水、水の順に乳鉢を用いて洗浄後、Ｄ　Ｍ　Ｓ　
Ｏ−ＭｅＯＨより再沈澱する。　収量１．５６　ｆ　（
８４，８チ）、融点　２６５℃（分解）、Ｒｆ３＝０．
９０（α：ｌ　２０　＝−９，ａｏ（ｃ＝ｌ、５．ＤＭ
ＳＯ）元素分析値　０１３１５Ｈ１８９Ｎ２９０４０Ｓ
３Ｈ２０としてＣＨＮ 計算値　５４，５９　６．４１　１３．６８実測値　５
４．３７　６．３８　１３．８６アミノ酸分析値（６規
定塩酸加水分解）Ａｓｐ　１．９０（２）　、　Ｓｅｒ
　１．７６（２）　。

Ｇｌｕ　５．７７（６）　、　Ｇｌｙ　２．００（２）
　。

Ａｌａ　Ｏ，９７（１）、Ｍｅｔ　０．６１（１）。

ｒｌｅ　Ｏ，９０（１）　、　Ｌｅｕ　０．９２（１）
　。

Ａｒｇ　１．９８（２） 平均回収率８３チ（カッコ内は理論値）（４）　ｐＭＺ
−Ａｌａ−Ａｒｇ（Ｍｔｓ）−Ｌｙｓ（Ｚ）シｅｕ−Ｌ
ｅｕ−Ｇｌ　ｎ−Ａｓ　ｐ　（ＯＢｚ　１　）−Ｉ　１
　ｅ−Ｍｅ　ｔ　（０）、−５ｅ　ｒ−Ａｒｇ（Ｍｔ　
ｓ　）−Ｇ　１　ｎ−Ｇ１　ｎ−Ｇ１　ｙ−Ｇｌ　ｕ　
（ＯＢ　ｚ　１　）−５ｅ　ｒ−、Ａ、ｇ　ｎ−Ｇ１　
ｎ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ａｒｇ（Ｍｔｓ）−Ｇｌｙ−
Ａｌｚ−ＯＢｚｌ　（化合物Ｊ）の製造 化合物１１．５６Ｆをアニソール０゜８５４−存在下、
水冷下６０分間Ｔ　Ｆ　Ａ　３．４２　ｄにて処理し、
脱ＰＭＺ化する。エーテルを加え、粉末とした後、戸数
し、乾燥する。

次にこの粉末をＤＭＳＯＤＭＦ（１：　１　）１５一に
溶かしＥ１３Ｎ　Ｏ，０７３−で中和する。

一方、ｐＭＺ−Ａｌ　ａ−Ａｒｇ（Ｍｔ　ｓ　）−Ｌｙ
ｓ　（Ｚ）−Ｌｅｕ−ＮＨＮＨ３（融点１９９〜２００
　℃、〔α〕。＝−１１，２°（ｃ＝１．２　、ＤＭＳ
Ｏ）　）　１．０３９（１）ＤＭＦ溶液５−に−１０℃
にて４．９７規定塩酸−ＤＭＦ溶液０．５０７−とＩ　
ＡＮ　Ｏ，１６Ｂ−を加えることによりアジドとし、Ｅ
　ｔ　５ＮＯ１３５−で中和する。この溶液に前記の脱
ＰＭＺ化物を含ｔｒＤＭＳＯ−ＤＭＦ溶液を加え、液性
を弱アルカリ（ｐＨ７〜８）として４℃にて１４時間攪
拌する。反応後、液性を中性とした後、溶媒を濃縮する
。残渣に５チクエン酸水を加えると粉末が得られる。

得られた粉末を５１クエン酸水、水の順に乳鉢を用いて
洗浄後、ＤＭＳＯ−ＭｅＯＨより再沈澱する。収量１．
１４２（５７，９チ）、融点　２７０℃（分解）、ｉｔ
ｆ、＝０．３６〔α）　Ｄ＝−１４，０’　（Ｃ＝１．
４　、　ＤＭＳＯ）元素分析値　Ｃエフ５Ｈ２４３Ｎ３
７０４１３５４としてＣＨＮ 計算値　５５．６０　６．５５　１３．８７実測値　５
５，５２　６．６９　１４．０３アミノ酸分析値（６規
定塩酸加水分解）Ａｓｐ　１．８９（２）　、　Ｓｅｔ
、１．７８（２）　。

Ｇｌｕ　５．８９（６）　、　Ｇｌｙ　２．００（２）
　。

Ａｌａ　１．９５（２）　、　Ｍｅｔ　０．６０　（１
）。

’Ｈｅ　Ｏ，８１（１）　、　Ｌｅｕ　１．８１（２）
　。

Ｌｙｓ　０．８８（１）　、　Ａｒｇ　２．９４（３）
平均回収率　９６％Ｃ６％Ｃカッコ論値）ｒ５１　ＰＭ
Ｚ−Ｇｌｖ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−８ｅｒ−ＡｌｇＬ−Ａｖ
ｔｔＭｔｍ）−Ｌｙ　ｓ　（Ｚ）−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇ
ｌ　ｎ−Ａｓｐ　（ＯＲｚ　１　）−Ｉ　１　ｅ−Ｍｅ
　ｔ　（Ｏン、　Ｓｅｒ−Ａｒｇ（Ｍｔｓ）−Ｇｌｎ−
Ｇｉｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ（ＯＢ　ｚｌ　）−８ｅｒ−Ａ
ａｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ（ＯＲｚｌ　）−Ａｒｇ（Ｍｃ　
ｓ　）−Ｇｌ　ｙ−Ａｌ　ａ−ＯＢ　ｔ　１　（化合物
Ｋ）の製造化合物Ｊ　１．１４９をアニソール５９３−
存在下、水冷下６０分間ＴＦＡ２，３７−にて処理し、
脱ＰＭＺ化する。エーテルを加え、粉末とした後、沖取
し乾燥する。次にこのｐＭＺ−Ｇｌｙ−Ｇｉｎ−Ｌｅｕ
−ｓｅｒ−ＮＨＮＨ２（融点２３５〜２３７℃、〔α］
、＝−１．５４°（Ｃ＝０．５８　。

ＤＭＳＯ）４４４ηのＤＭＦ−ＤＭＳＯ（１：１）溶液
２０−に−１０℃にて４．９７規定塩酸−’Ｄ　Ｍ　Ｆ
溶液０．３６８−とＩ　Ａ　Ｎ　Ｏ，１２２ｒｎｌを加
えることによりアジドとし、Ｅ　ｔ　３Ｎ　Ｏ−２５４
−で中和する。この溶液に前記の脱Ｐ　Ｍ　Ｚ化物を含
むＤＭＦ−ＤＭＳＯ溶液を加え、液性を弱アルカリ（ｐ
Ｈ７〜８）として４℃にて１４時間攪拌する。反応後、
液性を中性とした後、溶媒を濃縮する。残渣に水を加え
ると粉末が得られる。この粉末をセフ７デソクスＬＨ−
６０（３Ｘ　１２８α）クロマトグラフィーにより精製
する。溶出液はＤＭＦを用い１フラク′シテン１１−ず
つ分画し、’　２８０　ｎｍの吸収を測定する。最大ピ
ーク（Ｎａ４５〜６１）を集め、溶媒を留去する。残渣
にエーテルを加え、粉末とし、沖取する。収量１゜０８
９　（８６％）、融点　２６０℃（分解）、”ｌ　＝　
０．４０　、　Ｒｆ、　＝０．８４　、　Ｃｄ）、　−
−２４，３°（ｃ　＝　Ｑ　、７　、　ＤＭＳＯ）元素
分析値　Ｃ１８９Ｈ２７ＯＮ４２０５４Ｓ４　・７Ｈ２
０としてＣＨＮ 計算値　５３，４２　６．７４　１３．８５実測値　５
３．２Ｂ　６．７１　１４．０９アミノ酸分析値（６規
定塩酸加水分解）Ａｓｐ　１．９６（２）　、　Ｓｅｒ
　２ｆ５６（３）　。

Ｇｌｕ　６．８８（７）　、”１３．００（３）　＊Ａ
ｌａ　２．００（２）　、　Ｍｅｔ　０．５４（１）　
。

１１ｅ　Ｏ，９７（１）　、　Ｌｅｕ　Ｌ９６（３）　
。

Ｌｙｓ　０．９６（１）　、　Ａｒｇ　３．００（３）
　。

平均回収率７５チ　（カッコ内は理論値）（６）　ｐＭ
Ｚ　−Ａｒ　ｇ　（Ｍｔ　ｓ　）−Ｌｙ　ｓ　（Ｚ　）
−Ｖａ　ｌ　−Ｌｅ　ｕ−Ｇｌ　７＝Ｇｌ　ｎ−Ｌｅ　
ｕ−５ｅ　ｒ−Ａｌ　ａ−Ａｍ　ｇ　（ＭＥ　８　）−
Ｌ　７　Ｓ　（Ｚ　）−Ｌｅ　ｕ−Ｌｅ　ｕ−Ｇｌ　ｎ
−Ａｓ　ｐ　（ＯＢｚ　ｌ　）−１１ｅ−Ｍｅ　ｔ　（
０）−５ｅ　ｒ−Ａｒ　ｇ　（Ｍｔ　ｓ　）−ＧＩ　ｎ
−Ｇ１　ｎ−Ｇ１　ｙ−Ｇｌ　ｕ　（ＯＢ　ｚ　ｌ　）
−５ｅｒ　−Ａｓ　ｎ−Ｇ１　ｎ−Ｇ１　ｕ　（ＯＢ　
ｚ　１　）−、Ａｒ　ｇ　（ＭＥ　ｓ　）−Ｇｌ　ｙ−
、Ａｌ　ａ　−０Ｂｚｌ　（化合物Ｌ）の製造 化合物に１．０８Ｆを７　＝　ソー　ル０．５０９　＋
ｎ／存在下、水冷下６０分間ＴＦＡ２．０４−にて処理
し、脱ＰＭＺ化する。エーテルを加え、粉末とした後、
沖取し乾燥する。次にｐＭＺ　−Ａｒ　ｇ　（Ｍｔ　ｓ
　）−Ｌｙ　ｓ　（Ｚ　）−Ｖａ　ｌ　−Ｌｅ　ｕ−Ｎ
ＨＮＨ２（融点　２０４〜２０５°Ｃ１〔α）、＝−１
０，３゜（ｃ＝１．４　、Ｄ、ＭＳＯ）　）　７９３■
のＤＭＦ溶液２−に−１０℃にて４．９７規定塩酸−Ｄ
ＭＦ溶液０．３７９−とＩＡＮＱ。１２５ｍ１を加える
ことによりアジドとし、Ｅｔ３Ｎ　□。２６２ｍ１で中
和する。この溶液に前記の脱ＰＭＺ化物を含むＤＭＳＯ
−ＤＭＦ　溶液を加え、液性を弱アルカリ（ＰＨ７〜８
）として４℃にて１４時間攪拌する。反応後、液性を中
性とした後、溶媒を濃縮する。残渣に水を加えると粉末
が得られる。この粉末をセファデックスＬＨ−６０（３
Ｘ　１２８ＱＩ）り０７トグラフイ一により精製する。

溶出液はＤＭＦを用い、１フラクシヨン１１ｒｎｌずつ
分画し、２８０　ｎｍの吸収を測定する。最大ピーク（
Ｎ１３３〜４８）を集めて濃縮する。残渣にエーテルを
加え、粉末として沖取する。

収量　０．９８０２（７６チ）、融点２８０℃（分解）
、灯、−０，４７、（α〕、　＝−１２，９°（Ｃ＝１
．２　。

ＤＭＳＯ） 元素分析値　Ｃ２２９馬３ＯＮ６００６２Ｓ６°４Ｈ２
０としてＣＨＮ 計算値　５４．９２　６．８０　１３．９９実測値　５
４，６３　６．８６　１４．２３アミノ酸分析値（６規
定塩酸加水分解）Ａｓｐ　１．９６（２）　、　Ｓｅｒ
　２．６２（３）　。

Ｇｌｕ　６．９８（７）　、　Ｇｌｙ　３．００（３）
　。

Ａｌａ　２＠００（２）　、　Ｖａｌ　Ｏ，９７（１）
　。

Ｍｅｔ　０．６２（１）、ｌｉｅ　Ｏ，９３（１）。

Ｌｅｕ　３．８７（４）、Ｌｙｓ　１．８３（２）。

Ａｒｇ　４．１２（４） 平均回収率７３チ（カッコ内は理論値）（７）　ｐＭＺ
　−Ｔｈ　ｒ−Ａ　＊　ｎ−８ｅ　ｒ−Ｔｙ　ｒ−Ａｒ
　ｇ　（Ｍｔ　ｓ　）−Ｌｙ　ｓ　（Ｚ）−Ｖａ　ｌ　
−Ｌｅ　ｕ−Ｇ　ｌ　ｙ−ＧＩ　ｎ−Ｌｅ　ｕ−３ｅ　
ｔ−＋Ａ　ｌ　ａ−Ａｒ　ｇ　（ｌｖｉｔ　ｓ　）−Ｌ
ｙ　ｓ　（Ｚ）−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌ　ｎ−Ａｓｐ（
ＯＢ　ｚ　１　）−Ｉ　Ｉ　ｅ−Ｍｅ　ｔ（０）−８ｅ
　ｒ−、Ａｒ　ｇ（Ｍｔ　ｓ　）−Ｇｌ　ｎ−Ｇ１　ｎ
−Ｇ１　ｙ−Ｇ　ｌ　ｕ　（ＯＢ　ｚ　］　）−］５ｅ
ｒ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ（ＯＢ　ｚｌ　）−Ａｒｇ
（Ｍ【リ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｃ）Ｂｚｌ　（化合物Ｍ）
の製造化合物Ｌ　Ｏ，９ＢＯｆをアニソール０．４７３
　、、／存在下、水冷下６０分間ＴＦＡ５．Ｑ−にて処
理し、脱ＰＭＺ化する。エーテルを加え、粉末とした後
、沖取し乾燥する。次にこの粉末をＤＭＳＯ−ＤＭＦ（
１：１）　１０−に溶かしＥｔ、Ｎ　Ｏ，０２８−で中
和する。一方、ｐＭＺ−Ｔｈｒ−、Ａｓｎ−３ｅｒ−Ｔ
ｙｒ−ＮＨＮＨ２（融点２２３〜２２５℃、〔α）、＝
−１５，３°（ｃ＝ｌ、７．ＤＭＳｏ））Ｑ。３９５グ
のＤＭＳＯ−ＤＭＦ（１：１）溶液５ｒｎｌに一１０℃
にて４．９７規定塩酸−ＤＭＦ溶液０．２８８−とＩ　
Ａ　Ｎ　Ｏ，０９５−を加えることによりアジドとし　
Ｅ　ｔ　３Ｎ　Ｏ−１９９Ｍで中和する。この溶液に前
記の脱ＰＭＺ化物を含むＤＭＳＯ−ＤＭＦ溶液を加え、
液性を弱アルカリ（ｐＨ７〜８）として４℃にて１４時
間攪拌する。反応後、液性を中性とした後、溶媒を濃縮
する。残渣に水を加えると粉末が得られる。この粉末を
セファデックスＬＨ−６０（３Ｘ１２８０ｍ）クロマト
グラフィーにより精製する。溶出液はＤＭＦを用い、１
フラクシツン１１１ｎ１ずつ分画し、２Ｂ００１１１の
吸収を測定する。最大ピーク（ＮＩＬ３３〜４６）を集
めて濃縮する。

残渣にエーテルを加え、粉末とし沖取する。

収量　０．８０６２（７５％）、融点２６０℃（分解）
Ｒｔ、　＝　０．５５　、　（σ］、　＝−１２，２°
（Ｃ＝０．９　。

ＤＭＳＯ） 元素分析値　Ｃ２４９Ｈ３５□Ｎ５６０□ｏＳ６・４Ｈ
２０としてＣＨＮ 計算値　５４，６４　６．７２　１４．０８実測値　５
４，４６　６．７０　１４．１７アミノ酸分析値（６規
定塩酸加水分解）Ａｍｐ　２．９２（３）　、　Ｔｈｒ
　０．９７（１）　。

Ｓｅｔ　３．４６（４）　、　Ｇｌｕ　６．７１（７）
　。

Ｇｌｙ　３．００（３）　、　Ａｌａ　１．９９（２）
　。

Ｖａｌ　Ｏ，９４（１）　、　Ｍｅｔ　０．７５（１）
　。

１１ｅ　Ｏ，９４（１）　、　Ｌｅｕ　３．８６（４）
　。

ＴＹｒ　０．９５（１）　、　ＬＹＳ　１．８８（２）
　。

Ａｒｇ　４．００（４） 平均回収率８５チ（カッコ内は理論値）（３）　ｐＭＺ
−Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ａｓｐ−、Ａｌａ−１ｉｅ−Ｐｈｅ
−Ｔｈｒ−Ａｓ　ｎ−５ｅ　ｒ−Ｔｙ　ｒ−Ａｒ　ｇ　
（Ｍｔ　ｓ　）−Ｌｙ　ｓ　（Ｚ　）−Ｖａ　１−Ｌｅ
　Ｌｌ−Ｇｌ　ｙ−Ｇｌ　ｎ−Ｌｅ　ｕ−５ｅ　ｒ−Ａ
ｌ　ａ−、Ａｒ　ｇ　（Ｍｔ　ｓ　）−Ｌｙ　ｓ　（Ｚ
　）−Ｌｅ　ｕ−Ｌｅ　ｕ−Ｇｌ　ｎ−Ａｓ　ｐ　（Ｏ
Ｒｚ　Ｉ　）−１１ｅ−Ｍｅ　ｔ　（０）−８ｅ　ｒ−
Ａｒ　ｇ　（Ｍｔ　ｓ　）−Ｇｌ　ｎ−Ｇ１　ｎ−Ｇ１
　ｙ−Ｇｌ　ｕ　（ＯＢ　ｚ　ｌ　）−８ｅ　ｒ−Ａｓ
　ｎ−Ｇ１　ｎ−Ｇ１　ｕ　（ＯＢｚ　１　）−Ａｔ　
ｇ　（Ｍｔ　ｓ　）−Ｇｌ　ｙ　−Ａｌａ−ＯＢｚｌ　
（化合物Ｎ）の製造化合物Ｍ　Ｏ，８０６Ｆをアニソー
ル０．４０２１ｎｌ存在下、水冷下６０分間ＴＦＡ５−
にて処理し、脱ＰＭＺ化する。エーテルを加え、粉末と
した後、戸数し乾燥する。次善ここの粉末をＤＭＳＯ−
ＤＭＦ（１：１）ＩＱ−に溶かし”３ＮＯ，０２１−で
中和する。一方、ｐＭＺ　−Ｔｙ　ｒ−Ａｌ　ａ−、Ａ
ｓ　ｐ−、Ａｌ　ｔ−１１ｅ−Ｐｈ　ｅ−ＮＨＮＨ２（
融点２２２〜２２４℃、〔σ）Ｄ−１４，８°（Ｃ＝０
．５　、ＤＭＳＯ）　）　０．３９２　ｆのＤＭＳＯ−
ＤＭＦ（１：１）溶液５−に−１０℃にて４．９７規定
塩酸−ＤＭＦ溶液０．２７０−とＩ　Ａ　Ｎ　Ｏ，０７
１−を加えることによりアジドとし　Ｅ　ｔ　ｚＮＯ，
１８６−で中和する。この溶液に゛前記の脱Ｐ　Ｍ　Ｚ
　化物を含むＤＭｓＯ−ＤＭＦ溶液ヲ加え、液性を弱ア
ルカリ（ｐＨ７〜Ｂ）として４℃にて１４時間攪拌する
。反応後、液性を中性とした後、溶媒を濃縮する。残渣
に水を加えると粉末が得られる。この粉末をセファデッ
クスＬＨ−６０（３Ｘ１２８ｃｍ）クロマトグラフィー
により精製する。

溶出液はＤＭＦを用い、１フラクシッン１１−ずつ分画
し、２８０　ｎｍの吸収を測定する。最大ピーク（Ｎ１
３２〜４６）を集めて濃縮する。残渣にエーテルを加え
、粉末とし沖取する。収量０．７４０　Ｆ　（８２チ）
。

融点１６２〜１６６℃、　Ｒｆ、　＝　０．２５１（ａ
）：０＝−９，１°（ｃ＝１．１　、ＤＭＳＯ）元素分
析値　Ｃ２８３Ｈ４０１Ｎ６１０７９Ｓ５としてＣＨＮ 計算値　５５．８Ｂ　６．６５　１４．０５実測値　５
５，４０　６．６４　１３．９６アミノ酸分析値　（６
規定塩酸加水分解）ＡＳＰ　３−９７（４）　、Ｔｈｒ
Ｏ−９５（１）　＋Ｓｅｔ　３．５４（４）　、　Ｇｌ
ｕ　６．６Ｂ（７）　。

”　３’　３−００　（３）　ｒ　Ａ　１　ａ　４−３
４　（４）　。

”ｌｏ−９０（１）Ｔ　ＭｅｔＯ−６４（１）−１１ｅ
　１．９４（２）　、Ｌｅｕ　３．８０（４）　。

ＴＹｒ　２．１４（２）　、　ｐｈｅ　１．０５（１）
　。

１４８１．９８（２）　、　Ａｒｇ　３．６８（４）平
均回収率８６％（カッコ内は理論値）（９）　Ｈ−Ｔｙ
　ｒ−Ａ　ｌ　ａ−、Ａｓ　ｐ−Ａｌ　ａ−Ｉ　１　ｅ
−Ｐｈ　ｅ−Ｔｈ　ｒ−Ａｓ　ｎ−５ｅ　ｒ−Ｔｙ　ｒ
−Ａｒ　ｇ−Ｌｙ　５−Ｖａ　ｌ　−Ｌｅ　ｕ−Ｇ　ｌ
　ｙ−Ｇ　Ｉ　ｎ−Ｌｅ　ｕ−５ｅ　ｒ−Ａ　ｌ　ａ−
Ａ　ｒ　ｇ−Ｌｙ　ｓ−Ｌ　ｅ　ｕ−Ｌｅ　ｕ−Ｇｌ　
ｎ−Ａｓ　ｐ−Ｉ　１　ｅ−Ｍｅ　ｔ−３ｅ　ｒ−Ａ　
ｒ　ｇ−Ｇ　１　ｎ−Ｇ　ｌ　ｎ−Ｇ１　ｙ−Ｇ　ｌ　
ｕ−５ｅ　ｒ−Ａｓ　ｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｇ
ｌｙ−ＡＩａ−ＯＨ（ｈｐＧＲＦ　（１−４Ｑ）−ＯＲ
）の製造 化合物Ｎ　１００ｗ９ニｍ−クレゾール０．０９４−存
在下、１Ｍトリフロロメタンスルホン酸−チオアニソー
ルーＴＦＡ溶液３．６２ｄを加え、０℃にて６０分間攪
拌する。反応終了後、反応液に乾燥エーテルを加えて粉
末にする。この粉末をジチオスレイトール１２６■を含
む水２−に溶かし、アンバーライトＣＧ−４Ｂ（酢酸型
）約ＩＰを加え、０℃にて３０分間攪拌する。樹脂を枦
去後、Ｅ液を３チアンモニア水にてｐＨ８とし、０℃に
て３０分間攪拌した後、１規定酢酸水でｐＨ６，５とし
凍結乾燥する。この凍結乾燥品を水２−に溶かし、ジチ
オスレイトール２５２■を加え、アルゴン存在下３７℃
にて１２時間インキュベートした後、セファデックスＧ
−２５（１，８Ｘ　６　ＢＣｌｌ　）カラムクロマトグ
ラフィーにかけ、０．５規定酢酸水にて溶出する。１フ
ラクシロン３−ずつ分画し、２８０　ｎｍの吸収を測定
する。

ＮＬＩＯ〜１７を集め、凍結乾燥し、羽毛状の白色粉末
７１．９０■を得る。次にこの粉末７１．９０ηを０．
０１　Ｍ酢酸アンモニウム（ｐＨ４，８０）水溶液２−
に溶かし、カルボキシメチルバイオゲル八カラムクロマ
トグラフィー　（１，ＯＸ　１２．５　ａｉ　）にかけ
、酢酸アンモニウム水溶液の０．０１　Ｍ　（ｐＨ４，
８０）から０．２Ｍ　（ｐＨ６，５０）の直線濃度勾配
で溶出する。

１フラクシッン４．８−ずつ分画し、２８０　ｎｍの吸
収を測定する。最大ピーク（Ｎ１１２２〜２９）を集め
凍結乾燥し、羽毛状の白色粉末３４．１９　ｗｉを得る
。さらにこの粉末を高速液体クロマトグラフィー（コス
モシル ５Ｃ，８，１０Ｘ　２５０餌）により精製する。

溶出はアセトニトリル、／Ｑ、１％ＴＦＡ水溶液（３／
７）からアセトニトリル１０．１チＴＦＡ水溶液（３・
’／６．．）　の直線濃度勾配で行い２８００ｍの吸収
を測定する。最大ピークを分集し、凍結乾燥することに
より目的とするｈｐ　ＧＲＦ　（１−４０）　−ＯＨ１
８，５８■を得る。融点　２８０℃（分解）、１ｆ３＝
　０．３２　。

〔α）　”　＝−６４，６°（Ｃ＝０．４．０．２規定
酢酸水）元素分析値 Ｃ１９４Ｈ３１７Ｎ６□０６３Ｓ・６ＣＨ３Ｃα旧・２
０Ｈ２０としてＨＮ 計算値　４６．９９　７．２９　１６．２３実測値　４
５．６８　６．９３　１６．５１アミノ酸分析値 ０６規定塩酸加水分解 Ａｓｐ　３．９２（４）　、　Ｔｈｒ　Ｏ，９９（１）
　。

Ｓｅｔ　３．５８（４）　、　Ｇｌｕ　６．９３（７）
　。

Ｇｌｙ　ａ、ｏｏ（ａ）　、　Ａｌａ　４．２４（４）
　。

Ｖａｌ　Ｏ，９７（１）　、　Ｍｅｔ　０．６９（１）
　。

ン ｌｉｅ　１．９０（２）　、　Ｌｅｕ　３．９３（４）
　。

Ｔｙｒ　１．６３（２）、Ｐｈｅ　Ｏ，９３（１）。

Ｌｙｓ　１．９９（２）　、　Ａｒｇ　３．８Ｂ（４）
平均回収率７８チ（カッコ内は理論値）ｏＬＡＰ消化 Ａｓｐ　２，１９（２）　、　Ｔｈｒ＋ＧＩｎ　５．５
５（６）　。

Ｓｅｔ　３．４６（４）　、　Ｇｌｕ　２．５５（２）
　。

ＧＩＹ　３．００（３）　、　Ａｌａ　４．６６（４）
　。

Ｖａｌ　１．１５（１）　、　Ｍｅｔ　１．０７（１）
　。

１１ｅ　２．１５（２）　、　Ｌｅｕ　４．４５（４）
　。

Ｔ７ｒ１−７９（２）　、Ｐｈｅ　Ｏ，９４（１）　＊
Ｌｙｉ　２．２１（２）　、　Ａｒｇ　４．３２（４）
　。

Ａｓｎ　（２）未検出 平均回収率７３チ（カッコ内は理論値）手続補正書（自
発） 昭和５８年１λ月　６日 １、事件の表示 昭和５８年　特許願第　１２８８９９　号２、発明の名
称 ポリペプチドの製法 ８、補正をする者 事件との関係　特許出願人 住　所　大阪市東区北駄５丁目１５番地名称　（２０９
）住友化学工業株式会社代表者　土　方　武 ４、代理人 住　所　大阪市東区北浜５丁目１５番地明細書の「発明
の詳細な説明」の欄 補正の内容 ｌ）明細書第２３頁第９行に「４」とあるを、［Ｈ，Ｏ
Ｊ　と訂正する。

２）同第２６頁第５行に「コ」とあるを「・μＩ」と訂
正する。

８）同第２８頁第４行に［Ａｌｇ（ｍｔｓ）Ｊとあるを
［Ａｒｇ（Ｍｔｓ）Ｊと訂正する。

ンん九

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 保護基を有するペプチドフラグメント（Ｉｌと保護基を
   有するペプチドフラグメント（ＩＩ）を縮合させ、縮合
   物を得、次いでこの縮合物と保護基を有するペプチドフ
   ラグメント四）とを縮合させる、以下順次保護基を有す
   るペプチドフラグメントｔ［Ｖｌ　、　（Ｖｌ　、　（
   Ｖｌ）　、（ロ）および（ロ）を縮合させた後、脱保護
   することを特徴とする次のアミノ酸配列を有するポリペ
   プチド−の製造法。 Ｈ−Ｔｙ　ｒ−Ａｌ　ａ−Ａ　ｓ　ｐ−Ａｌ　ａ−１１
   ｅ−Ｐｈ　ｅ−Ｔｈ　ｒ−Ａｓ　ｎ−８ｅ　ｒ−Ｔｙ　
   ｒ−Ａｒ　ｇ７ｔ７５−Ｖａ　ｌ　−Ｌ　ｅ　ｕ−Ｇｌ
   　ｙ−Ｇｌ　ｎ−Ｌｅ　ｕ−３ｅ　ｒ−Ａｌ　ａ−Ａｒ
   　ｇ−Ｌｙ　ｓシｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇｉｎ−Ａｓｐ−Ｉ　
   ｌ　ｅ−Ｍｅｔ−５ｅｒ−Ａｒ　ｇ−Ｇ　ｌ　ｎ−Ｇ１
   　ｎ−Ｇ１　ｙ−Ｇｌ　ｕ−Ｊ　ｅ　ｒ−Ａｓ　ｎ−Ｇ
   １　ｎ−Ｇ１　ｕ−Ａ　ｒ　ｇ−Ｇｌ　ｙ−Ａｌ　ａ−
   Ｇ１ （ＩＸ） ペプチドフラグメント（Ｉｌ〜（ロ）は次の式で表わ　
   ３される。 ペプチドフラグメント（Ｉ） Ｇｌ　ｕ−５ｅ　ｒ−Ａｓ　ｎ−Ｇ１　ｎ−Ｇ１　ｕ−
   、Ａｒ　ｇ−Ｇｌ　ｙ−Ａｌ　ａペプチドフラグメント
   ｆｎ） Ｓ　ｅ　ｒ−、Ａｒ　ｇ−Ｇｌ　ｎ−Ｇ１　ｎ−Ｇ１　
   ｙペプチドフラグメント（０１１ Ｌｅ　ｕ−Ｇｌ　ｎ−Ａｓ　ｐ−Ｉ　１　ｅ−Ｍｅ　ｔ
   ペプチドフラグメント剃 Ａｌ　ｓｉ−、Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕペプチドフラグ
   メント■） Ｇｌ　ｙ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−５ｅｒ ペプチドフラグメント（ロ） Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ ペプチドフラグメント（至） Ｔｈ　ｒ−Ａｓ　ｎ−８ｅ　ｒ−Ｔｙ　ｒペプチドフラ
   グメント（■） Ｔｙｒ−、Ａｌ　ａ−Ａｓｐ−Ａｌ　ａ−Ｉ　ｌ　ｅ−
   Ｐｈｅ（式中、すべてのアミノ酸はＬ一体を表わす）