JPS6033477B2 - 還元型ｎａｄの製造法 - Google Patents
還元型ｎａｄの製造法Info
- Publication number
- JPS6033477B2 JPS6033477B2 JP617078A JP617078A JPS6033477B2 JP S6033477 B2 JPS6033477 B2 JP S6033477B2 JP 617078 A JP617078 A JP 617078A JP 617078 A JP617078 A JP 617078A JP S6033477 B2 JPS6033477 B2 JP S6033477B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- nad
- reaction
- reduced nad
- reduced
- production method
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は還元型州ＡＤを簡易にかつ正確に製造する方法
に関するものである。
に関するものである。
一般に還元型ＮＡＤ（ジヒドロニコチン酸アミドァデニ
ンジヌクレオチド）は生理活性反応上かわめて重要な物
質であるとともに、生体内各種物質の酵素分析における
補酵素としても欠くべからギるものである。
ンジヌクレオチド）は生理活性反応上かわめて重要な物
質であるとともに、生体内各種物質の酵素分析における
補酵素としても欠くべからギるものである。
即ち、この還元型ＮＡＤは３４瓜ｍにおける顕著な吸収
を示し、その酸化型のＮＡＤは全く吸収を示さないため
に、酸化反応に還元型ＮＡＤを用いることによって生体
内各種物質の酵素分析における明確な指標とすることが
できるものである。従来、還元型ＮＡＤを製造する方法
としては、ＮＡＤとエチルアルコールをアルコールデヒ
ドロゲナーゼで反応させ、アセトアルデヒドを生成させ
ると同時に還元型ＮＡＤを生成させていた。
を示し、その酸化型のＮＡＤは全く吸収を示さないため
に、酸化反応に還元型ＮＡＤを用いることによって生体
内各種物質の酵素分析における明確な指標とすることが
できるものである。従来、還元型ＮＡＤを製造する方法
としては、ＮＡＤとエチルアルコールをアルコールデヒ
ドロゲナーゼで反応させ、アセトアルデヒドを生成させ
ると同時に還元型ＮＡＤを生成させていた。
しかし、この方法は生成するアセトアルデヒドの捕獲剤
を必要とし、酵素量を多く必要とし、しかも反応ｐＨが
高いために生成した還元型ＮＡＤにアイソマーが混在し
てしまうというきわめて重大な欠点をもっていたのであ
る。本発明者らは、このような重大な欠点を改善するた
めに研究を行ったところ、ＮＡＤと蟻酸をホルメートデ
ヒドロゲナーゼで反応させて還元型ＮＡＤを生成させる
ことによって解決することができた。
を必要とし、酵素量を多く必要とし、しかも反応ｐＨが
高いために生成した還元型ＮＡＤにアイソマーが混在し
てしまうというきわめて重大な欠点をもっていたのであ
る。本発明者らは、このような重大な欠点を改善するた
めに研究を行ったところ、ＮＡＤと蟻酸をホルメートデ
ヒドロゲナーゼで反応させて還元型ＮＡＤを生成させる
ことによって解決することができた。
本発明はＮＡＤと蟻酸をホルメートデヒドロゲナーゼで
反応せしめるのを大きな特色としている。
反応せしめるのを大きな特色としている。
この反応は母＝７．５前後でほとんど中性域で進行する
ので酵素量は少なくてすみ、還元型ＮＡＤのァィソマー
の生成も抑制される。また、この反応において反応系を
減圧下におき、生成する炭酸ガスを反応城から除去すれ
ば、反応城の生成物質は還元型ＮＡＤのみとなり、反応
はきわめて円滑に進行する。また、この反応は少量の酵
素によってよく進行するので、使用するホルメートデヒ
ドロゲナーゼは固定化させたものでよく、きわめて経済
的に還元型ＮＡＤを製造することが可能となる。本発明
の反応は、水又は緩衝液（トリス−塩酸緩衝液、トリス
−酢酸緩衝液など）中でｐＨ７．５前後で行なわれる。
ので酵素量は少なくてすみ、還元型ＮＡＤのァィソマー
の生成も抑制される。また、この反応において反応系を
減圧下におき、生成する炭酸ガスを反応城から除去すれ
ば、反応城の生成物質は還元型ＮＡＤのみとなり、反応
はきわめて円滑に進行する。また、この反応は少量の酵
素によってよく進行するので、使用するホルメートデヒ
ドロゲナーゼは固定化させたものでよく、きわめて経済
的に還元型ＮＡＤを製造することが可能となる。本発明
の反応は、水又は緩衝液（トリス−塩酸緩衝液、トリス
−酢酸緩衝液など）中でｐＨ７．５前後で行なわれる。
反応液にはＮＡＤを０．５％、蟻酸０．１４％が添加さ
れ、これにホルメートデヒドロゲナーゼが粉末酵素また
は溶液として１００血／そ添加される。ホルメートデヒ
ドロゲナーゼが固定化される場合は、グルタールアルデ
ヒドと反応剤などにより周知の方法によって固定化され
る。粒状に固定化されたホルメートデヒドロゲナーゼは
そのまま反応城に添加される。反応城は生成する炭酸ガ
スを除去すれば反応がよく進行するので、密閉減圧系と
して炭酸ガスを除去するのがよい。
れ、これにホルメートデヒドロゲナーゼが粉末酵素また
は溶液として１００血／そ添加される。ホルメートデヒ
ドロゲナーゼが固定化される場合は、グルタールアルデ
ヒドと反応剤などにより周知の方法によって固定化され
る。粒状に固定化されたホルメートデヒドロゲナーゼは
そのまま反応城に添加される。反応城は生成する炭酸ガ
スを除去すれば反応がよく進行するので、密閉減圧系と
して炭酸ガスを除去するのがよい。
反応は２０〜５０ｑＣで、ゆるやかに燈拝しつつ行なわ
れる。
れる。
反応時間は上記条件で１〜２時間程度で十分である。反
応終了後は、２倍容量のアルコールを加えて生じるホル
メートデヒドロゲナーゼの沈澱をロ紙ロ過または遠心分
離で除去する。
応終了後は、２倍容量のアルコールを加えて生じるホル
メートデヒドロゲナーゼの沈澱をロ紙ロ過または遠心分
離で除去する。
（固定化ホルメートデヒドロゲナーゼを用いた場合は反
応終了液を直援ロ過することによって除去することがで
きる。）得られた炉過液にアルコール濃度が９０〜９３
％になるようにアルコールを添加して還元型ＮＡＤを沈
澱させる。還元型ＮＡＤの沈澱はエチルエーテル、アセ
トン等によって洗浄した後直空乾燥する。
応終了液を直援ロ過することによって除去することがで
きる。）得られた炉過液にアルコール濃度が９０〜９３
％になるようにアルコールを添加して還元型ＮＡＤを沈
澱させる。還元型ＮＡＤの沈澱はエチルエーテル、アセ
トン等によって洗浄した後直空乾燥する。
ここにおいて還元型ＮＡＤは９５％の収率で得られる。
本発明の方法は反応が中性城であるために還元型ＮＡＤ
のアィソマーはほとんど生成することなく、また還元型
ＮＡＤの収率もきわめてよく、かつ簡便であり、すぐれ
た還元型ＮＡＤの製造方法である。次に本発明の実施例
を示す。
のアィソマーはほとんど生成することなく、また還元型
ＮＡＤの収率もきわめてよく、かつ簡便であり、すぐれ
た還元型ＮＡＤの製造方法である。次に本発明の実施例
を示す。
実施例 １
１その減圧反応槽に水０．２〆を入れ、これにＮＡＤＩ
夕及び蟻酸ソーダ２８０の９を添加し、ＩＮＮａＯＨで
ｐＨを７．５に調整する。
夕及び蟻酸ソーダ２８０の９を添加し、ＩＮＮａＯＨで
ｐＨを７．５に調整する。
更に酵母ホルメートデヒドロゲナーゼｌｕ／の９（Ｅ．
Ｃ１．２．１．２オリエンタル酵母工業製）１５０ｍ９
を添加し、３０℃でゆるやかに燈拝しつつ、減圧（２功
舷Ｈｇ）下において１時間反応させた。反応終了時のｐ
Ｈは７．３であった。
Ｃ１．２．１．２オリエンタル酵母工業製）１５０ｍ９
を添加し、３０℃でゆるやかに燈拝しつつ、減圧（２功
舷Ｈｇ）下において１時間反応させた。反応終了時のｐ
Ｈは７．３であった。
Ａ側／ん４ｏ＝２．３４であり計算上９９％のＮＡＤ＋
が還元された。
が還元された。
（ん６ｏ＝２６仇ｍの紫外線吸収度、３４。＝３４肌ｍ
の紫外線吸収度）得られた反応液にエタノールを４００
の‘を添加し、ロ紙でロ過して酵素を除去した後、炉液
にさらにエタノール６００の‘を添加し１時間放置する
。
の紫外線吸収度）得られた反応液にエタノールを４００
の‘を添加し、ロ紙でロ過して酵素を除去した後、炉液
にさらにエタノール６００の‘を添加し１時間放置する
。
生じた還元型ＮＡＤの沈澱を遠心分離して、９７．９％
エチルアルコールで２回、エチルエーテルで２回洗浄し
た後、直空下で乾燥し、還元型ＮＡＤＯ．９８夕を得た
。
エチルアルコールで２回、エチルエーテルで２回洗浄し
た後、直空下で乾燥し、還元型ＮＡＤＯ．９８夕を得た
。
この還元型ＮＡＤの純度はアルコール脱水素酵素による
分析で９６％であった。
分析で９６％であった。
Claims (1)
- １ ＮＡＤと蟻酸をホルメートデヒドロゲナーゼによつ
て反応せしめるに際し、反応を減圧下で行い、生成する
炭酸ガスを除去しつつ還元型ＮＡＤを生成せしめること
を特徴とする還元型ＮＡＤの製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP617078A JPS6033477B2 (ja) | 1978-01-25 | 1978-01-25 | 還元型ｎａｄの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP617078A JPS6033477B2 (ja) | 1978-01-25 | 1978-01-25 | 還元型ｎａｄの製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS54101491A JPS54101491A (en) | 1979-08-10 |
| JPS6033477B2 true JPS6033477B2 (ja) | 1985-08-02 |
Family
ID=11631063
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP617078A Expired JPS6033477B2 (ja) | 1978-01-25 | 1978-01-25 | 還元型ｎａｄの製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6033477B2 (ja) |
-
1978
- 1978-01-25 JP JP617078A patent/JPS6033477B2/ja not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS54101491A (en) | 1979-08-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPS58190394A (ja) | Ｄ−グルコ−ソンの製造方法 | |
| NO159393C (no) | Fremgangsmaate for fremstilling av butanol ved fermentering | |
| CA1163221A (en) | Production of 2-keto-d-gluconic acid and hydrogen peroxide | |
| CN101857601B (zh) | 一种高纯度的拉氧头孢钠化合物 | |
| JPS6033477B2 (ja) | 還元型ｎａｄの製造法 | |
| CN117164539B (zh) | 一种降龙涎香醚的合成方法 | |
| JP4962016B2 (ja) | 含硫ヒドロキシカルボン酸の製造法 | |
| JPS5923794B2 (ja) | ジヒドロキシアセトンの製造法 | |
| RU2261915C2 (ru) | Способ получения цитрата кальция | |
| JPH01168292A (ja) | Ｄ−グリセリン酸の製造法 | |
| JPS60145095A (ja) | 固定化微生物によるキシリト−ルの製造法 | |
| CN106381316B (zh) | 一种α-酮戊二酸钠的制备方法及提纯方法 | |
| JP2721536B2 (ja) | Ｄ―β―ヒドロキシアミノ酸を取得する方法 | |
| JPS63251098A (ja) | （ｒ）−３−ハロゲノ−１，２−プロパンジオ−ルの製造法 | |
| JPS6336754B2 (ja) | ||
| JPS6336789A (ja) | 補酵素ｑ↓１↓０の製造法 | |
| US2973305A (en) | Process for preparing flavinadenine dinucleotide and reduced-form thereof | |
| JP3092865B2 (ja) | 光学活性［３］（１，１’）フェロセノファン類の製造方法 | |
| JPS606634B2 (ja) | サイクリツク−３′，５′−グアニル酸の製造法 | |
| CN106520898A (zh) | 一种新型薄荷脑的精制方法 | |
| JPH0690788A (ja) | プロスタグランジンｅの製造方法 | |
| KR810001104B1 (ko) | N-메틸모라노린의 제조법 | |
| JPS6261587A (ja) | 光学活性（ｒ）−ヒドロキシマンデル酸エステル中間体の製造法 | |
| JP4929700B2 (ja) | カルボン酸の製造法 | |
| KR810000818B1 (ko) | 모라노린의 제조법 |