JPH01168292A - Ｄ−グリセリン酸の製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明はＤ−グリセリン酸の製造法に関するものである
。さらに具体的には、グルコノバクタ−（Ｇｌｕｃｏｎ
ｏｂａｃｔｅｒ　）属に属する微生物を用いるＤ−グリ
セリン酸の製造法に関する。

Ｄ−グリセリン酸はセリン等のアミノ酸及び医薬、農薬
の中間体、さらには、樹脂あるいは潤滑剤等への添加剤
あるいはその中間原料等として用いられる有用な化合物
である。

（従来技術およυその問題点） グリセリン酸の製造法としては、従来よりアクリル酸お
よびその誘導体、あるいは、アクロレインを酸化する化
学合成法が知られている（特開昭６０−２２６８４２号
公報、特開昭５１−２３２０９号公報、米国特許第２，
７５２，３９１号、米国特許第２．７３１，５０２号、
　Ｊ、　Ｃｈｅｍ、Ｓｏｃ、　ｒ　１９５７　、４３２
１　＋Ｊ、Ａｍ、Ｃｈｅｍ、、７６．３４８６（１９５
４）。

しかしながら光学活性グリセリン酸の製造法にか望まれ
ていた。

（問題点を解決する為の手段） 本発明者等は、光学活性なグリセリン酸全生成する能力
を有する微生物を得る為に研究を行った。

その結果、グルコノバクタ−属に属する微生物がグリセ
リンをＤ−グリセリン酸に転換する能力を有することを
見出し、本研究を完成した。

ヅ下に本発明の詳細な説明する。

本発明は、グルコノバクタ−属に属し、グリセリンをＤ
−グリセリン酸に転換する能力を有する微生物を、グリ
セリンを含有した培地に培養することにより、または、
培地に培養して得られる菌体またはその処理物をグリセ
リンを含有する水溶液中で反応させることによシ、培養
物または、水溶液中にＤ−グリセリン酸を生成させこれ
を採取することを特徴とするＤ−グリセリン酸の製造法
を提供するものである。

本発明に用いる微生物としては、グルコノバクタ−属に
属し、グリセリンをグリセリン酸に転換する能力を有す
る微生物であれば、いずれも用いることができる。具体
的な例としては、グルコノバクタ−サブオキシダンス（
Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒｓｕｂｏｘｙｄａｎｓ）　
ＩＦｏ　３１７２株、グルコノバクターメラノジーナス
（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ　ｍｅｌａｎｏｇｅｎｕ
ｓ　）ＩＦｏ　３２９２株、３２９４株、グルコノバク
タ−セリナス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ　ｃｅｒｉ
ｎｕｓ　）　ＩＦＯ３２６２株等が上げられる。本発明
で用いられる微生物としては上記の菌株のみならすこれ
らから、人工的あるいは自然に得られる変異株であって
も、Ｄ−グリセリン酸生産能を有するグルコノバクタ−
属の菌株であれば、すべて本発明に使用することができ
る。

これらの微生物を培養する培地としては、炭素源、窒素
源、無機物などを、程よく含有するものであれば、天然
培地、人工培地のいずれでも良い。

例えば、炭素源としてはグルコース、フラクトース、ソ
ルビトール、マンニトール、デキストリン、澱粉、グリ
セリン等が利用できる。窒素源としては、肉エキス、酵
母エキス、コーンステイープリカー等が利用できる。そ
の他、必要に応じて、炭酸カルシウム、塩化カリウム、
リン酸塩等の無機塩類を添加する。また、使用する菌株
の増殖を促進し、グリセリンからＤ−グリセリン酸への
転換能を促進するような有機物および無機物を適当に添
加することもできる。

培養法としては、液体培養法、特に深部通気攪拌培養法
が最も適している。培養に適当な温度は２５〜３７℃で
あるが、通常３０℃付近で培養する。−は一般的に中性
から微酸性（ｐＨ４〜７）が望ましい。

本発明では、通常、培養に用いられる培地に、グリセリ
ン’！ｒ　０．５〜２０％の濃度になるように添加しま
たは添加しながら１〜７日間培養する。この様にして培
養物中にＤ−グリセリン酸が生成する。

一方、微生物菌体またはその処理物とグリセリン全作用
させてＤ−グリセリン酸を得る場合にも、微生物の培養
には前記組成と同様の培地および培養条件が用いられる
。

又、この場合、得られる微生物菌体はそのまま反応に使
用できるし、さらに、該菌体を種々処理して得られる処
理物全反応に用いても良い。

微生物菌体としては、菌体そのものまたは、菌体を含む
培養液が用いられる。菌体処理物としては、菌体の機械
的摩砕処理物、超音波処理物、凍結乾燥処理物酵素処理
物、乾燥処理物、界面活性＼ 剤処理物、菌体の蛋白質分画、菌体および菌体処理物の
固定化物などが用いられる。

反応は水溶液中、前記で得られる菌体またはその処理物
を、グリセリンに作用させることによシ行われる。菌体
またはその処理物をグリセリン１〜２０％水溶液、また
は、さらに無機塩類を添加した反応溶液に懸濁して、好
気的条件下で反応させる。反応の適する温度は、２０〜
３７℃であるが、通常３０℃付近で反応させる。

このようにして、水溶液中にＤ−グリセリン酸が生成す
る。

培養物中あるいは水溶液中に生成蓄積されたＤ−グリセ
リン酸を単離精製するには濾過、遠心分離等の方法によ
り菌体を分離した後通常の有機酸の分離精製法即ち、イ
オン交換樹脂による方法、カルシウムイオン等との金属
塩を作る方法、エステル体にして蒸溜による方法等が用
いられる。

（発明の効果） 本発明により、微生物を利用した工業的なり一グリセリ
ン酸の製造法が提供された。

以下実施例を上げて本発明を具体的に説明する。

実施例中Ｄ−グリセリン酸の定量にはイオン交換樹脂カ
ラムを用いる高速液体クロマトグラフイー法を用いた。

実施例１ グルコノバクタ−サブオキシダンスＩＦ０３１７２株、
グルコノパクターメラノノーナスＩＦ０３２９２株、３
２９４株、グルコノバクタ−セリナスＩＦ０３２６２株
の４菌株をグルコース１チ、酵母エキス０．５％、コー
ンステイープリカー１％、炭酸カルシウム１％の組成を
有する前培養培地（１００ｒｎ１．／坂ロフラスコ）に
植菌し３０℃で２日間往復振盪培養した。次いで下記組
成の生産培地１ｔを入れた２、６を容ミニツヤ−に上記
種培養液２０−ずつ全植菌した。

生産培地組成；グリセリン５チ、コーンステイーグリカ
ー３％、炭酸カルシウム１％ 培養条件は、温度３０℃１通気量ｏ、　５　ｖｖｍ　＋
攪拌４００　ｒｐｍで行った。４８時間後の培養液につ
いて生成したＤ−グリセリン酸の量を定量したところ下
記の表１の通シであった。

表　　１ 実施例２ 実施例１で用いた４菌株について実施例１と同様に前培
養、本培養を行なった。本培養開始後２４時間目の培養
液を遠心分離にかけ菌体を得た。

この菌体を１０％グリセリン水溶液１ｔに懸濁し２．６
を容ミニジャーに入れ３０℃、通気量０．５ＶＶｍ　＋
攪拌４００　ｒｐｍの条件下４８時間反応させた。生成
したＤ−グリセリン酸の量を定量したところ表２の通シ
であった。

表　　２ 実施例３ 実施例２で得られ−た４菌株についての反応液１０−づ
つを遠心分離にかけ上澄液を得た。この４種のサンプル
をそれぞれダウエソクヌ１−Ｘ８（Ｃｔ型）（ダウケミ
カル社製）のカラム（ＩＸ］０ｃＩｎ）にチャージした
後２０−の蒸留水で洗浄した。しかる後０．　Ｉ　Ｎ−
ＨＣ６Ｉ　ＯｒｎｌでＤ−グリセリン酸全溶出した。

この溶出成金それぞれ光学異性体分割用カラム、キラル
・ぐツクＷＨ（ダイセル化学工業製）を装着した高速液
体クロマトグラフィーにかけ分析した。

その結果４種のサンプルについていずれも、Ｄ−グリセ
リン酸の標準品（シグマ社より市販）とピークは完全に
一致し光学純度もほぼ１００％であった。

実施例４ 実施例２で得られたグルコノバクタ−セリナスの反応液
１００ｍ１を遠心分離にかけ上澄液９０ゴを得た。

この上澄液上ダウエックス１−Ｘ、８　（Ｃｔ型）のカ
ラム（２，５ｘ３０ｃＩｎ）にチャージした後蒸留水３
００ｒｎｌで洗浄した。

しかる後０．　Ｉ　Ｎ・ＨＣｌ２００−でＤ−グリセリ
ン酸を溶出しまた この溶出液をローターリ−エバポレーターにて濃縮し４
２１のＤ−グリセリン酸を得た。このサンプルを高速液
体クロストグラフィー法により分析したところ純度９５
チでちった。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. グルコノバクター属に属しグリセリンからＤ−グリセリ
   ン酸を生成する能力を有する微生物をグリセリンを含む
   培地に培養することにより、または培地に培養して得ら
   れる菌体またはその処理物をグリセリンを含有する水溶
   液中で反応させることにより、培養物または水溶液中に
   Ｄ−グリセリン酸を生成せしめ、これを採取することを
   特徴とするＤ−グリセリン酸の製造法。