JPS6034193A - Ｌ−グルタミン酸の製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はＬ−グルタミン酸の製造法に関する。

従来、ビオチン要求性微生物を用いるＬ−グルタミン酸
の発酵法による生産において線、培地に添加するビオチ
ン量を菌体最大増殖必要量以下の一定の範囲に定める必
要があシ、その範囲を越えて過剰に添加した場合には、
Ｌ−グルタミン酸の生成量が著しく低下する〔近代工業
化学２３巻生物工業化学、１３５頁、昭和４４年、朝倉
書店六日木農芸化学会誌、第３４巻、５９３頁。

１９６０年参照〕。この過剰ビオチンによるＬ−グルタ
ミン酸生成量低下は、培養中に充分な酸素を供給するこ
とによって、ある程度回復することが知られている〔ア
ゲリカμチュラμ・アンド・パイオロジカ／ｌ／・ケミ
ストリー（Ａｇｒｉ　ｃｕｌｔｕｒａｌａｎｄ　Ｂｉｏ
ｌｏｇｉｃａｌ　Ｃｈａｍｌｓｔｒｙ）　、第３２巻、
８５５頁、１９６８年〕が、ビオチン添加量の増加に伴
なって、その効果は次第に認められなくなる。したがっ
て、伏素源として糖蜜などの大過剰のビオチンを含有す
る物質を用いる場合には、たとえ充分量の酸素を供給し
ても、工業的に満足できる結果は側底期待できない。

とのような情況に鑑み、本発明者らは、新しい型のＬ−
グルタミン酸発酵法を確立する目的で鋭意研究を進めた
ところ、生育にオレイン酸を要求するがビオチンを要求
しないＬ−グμタミン酸生成能を有する微生物を過剰の
オレイン酸源を含む培地に、空気よシも酸素濃度の高い
気体を通気しながら培養することによシ、Ｌ−グルタミ
ン酸の生成量を飛躍的に増大させることができることを
発見し、この知見に基づいてさらに研究を重ねた結果、
本発明を完成した。

本発明は、生育にオレイン酸を要求するがビオチンを要
求しないＬ−グルタミン酸生産能を有する微生物を培地
に培養し培養物中にＬ−グルタミン酸を生成蓄積せしめ
培養物からＬ−グルタミン酸を採取する方法において、
Ｌ−グルタミン酸の蓄積量が通常の空気による通気培養
下で極大値を示すオレイン酸量を越える過剰のオレイン
酸源を培地中に存在せしめ、かつ通常の空気よシ酸素濃
度を高めて酸素を培地に供給しながら培養することを特
徴とするＬ−グルタミン酸の製造法である。

本発明方法において用いられるオレイン酸源は、オレイ
ン酸そのものでもよいし、その塩類、そのエステ／ｌ’
頬またはオレイン酸含有物でもよい。該オレイン酸塩類
としては、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩
などが挙げられる。該オレイン酸ｏｒ−、ｚテ／Ｌ［と
しては、ソルビタンモノオレエート、ホリオキシエチレ
ンソルビタンモノオレエート、ポリオキＶエチレングリ
コーμモノオレエートあるいはこれらのセスキオレエー
ト、）リオレエートなどが挙げられる。また、オレイン
酸含有物としてはラードオイル、油脂などが挙げられる
。

通常の空気による通気培養下でＬ−グルタミン酸の蓄積
量が極大値を示すオレイン酸量とは、通常の通気培養条
件下でＬ−グルタミン酸の蓄積量が最も多くなるような
オレイン酸源の量をいう。

その量は使用する菌株、炭素源などによって多少相違す
るが、オレイン酸に換算して９０〜１５０り／　１ｉｔ
ｅｒ−ｉｔ’歌ある。

本発明において培地に添加する好ましいオレイン酸源の
量は、オレイン酸に換算して約１８０ないし６００り／
１ｉｔｅｒ・培地であシ、さらに好ましくは約２４０な
いし４８０　ｊｌｖ／１ｉｔｅｒ・培地である。

本発明方法におけるオレイン酸の添加方法としては、た
とえば、あらかじめ、その全量を培地中に添加しておい
て培養を開始してもよいし、あるいはその半量を培養前
に添加し培養途中に残りの量を添加してもよい。

本発明の方法において用いられる微生物を培養するに際
しては、通常の通気攪拌深部培養などの方法が採用され
る。

本発明の方法においては、通常の空気よシも酸素濃度の
高い気体が通気（ｂｕｂｂｌｅ　）　される。

本発明の方法に用いられる気体としては、純酸素ガスは
もとより、それに空気を混合した気体や、モレキュラー
シープ法もしくは膜分離法等による酸素発生装置より発
生した高濃度酸素含有気体などでもよい。

空気よりも酸素濃度の高い気体を供給する方法としては
、発酵期間中、終始一定の速度で供給し続けてもよいし
、培養液中の溶存酸素を測定しながら、必要な量を自動
的に供給するようにしてもよい。

また、酸素濃度の高い気体を供給する場合に、たとえば
通常の空気と酸素とをそれぞれ別のノズルから培地に供
給するようにしてもよい。

本発明の方法において、発酵期間中、培地へ供給される
空気および酸素の量は、従来法における通常の空気の供
給量をＱｔ３（Ｊ／ｌ１ｉｉｎ）とすると、次式に従っ
てめることができる。

０Ｏ−Ｃ ＱＡＩＲ−ｙｇ　＝・Ｑ、。

ＱＯＸＹＧＲ：ＩＪ　＝　−ｇ−”−’−”−−Ｑ。

９ ここでＱＡＩＲおよびＱｃ＋ｘｙｏＥｕはそれぞれ培地
への空気および酸素の供給量（Ｊ／ｍｉｎ　）を表わし
、Ｃは両者を混合して得られる混合気体の酸素濃度（９
６）を表わす。なお、Ｃは培地中のオレイン酸の量から
、次式によって容易に知ることができる。

Ｃ≧ＯＡ×１０３＋９ ただし、ＯＡはオレイン酸源のオレイン酸換算濃度（重
量／容量、９６）を表わす。

本発明の方法に用いられる微生物は、その生育にオレイ
ン酸を要求するがビオチンを要求しないＬ−グルタミン
酸生産能を有する微生物（以下、本発明のＬ−グルタミ
ン酸生産菌と称することもある。）であればいずれでも
よい。該微生物の具体例としては、たとえばブレビバク
テリウム（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ　）属菌、コ
リネバクテリウム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ　
）属菌などが挙げられる。該ブレビバクテリウム属菌と
しては、たとえばブレビバクテリウム・チオゲニタリス
（Ｂｒｅｖ、ｔｈｉｏ−ｇｅｎｉｔａ、１１ｓ　）　Ｄ
　−２４８、ブレビバクテリウム・フツプム（Ｂｒｅｖ
、　ｆｌａｖｕｍ　）　Ｂ　Ｎ　−１１などが、また該
コリネバクテリウム属菌としては、たとえばコリネバク
テリウム・グルタミクム（Ｃｏｒｙ。

ｇｌｕｔａｍｉｃｕｍ　）　Ａ　５３４−　Ｍ　Ｓ　−
０２３などが本発明のＬ−グルタミン酸生産菌の代表的
なものとして挙げられる。

上記ブレビバクテリウム・チオゲニタリスＤ−２４８株
は昭和４０年１２月２５日から、またブレビバクテリウ
ム・７フプムＢＮ−１１株およびコリネバクテリウム・
グルタミクム７１１ＩＬ５３４−ＭＳ−０２３株は昭和
４２年４月１２日から財団法人発酵研究所（工ＦＯ）に
受託番号工１’０　１２３３１、ＩＦＯ１２５２５およ
び：［ｒＯ１２５２３としてそれぞれ寄託されており、
また上記ブレビバクテリウム・チオゲニタリスＤ−２４
８株、ブレビバクテリウム・フラブムＢＮ−１１株およ
びコリネバクテリウム・グルタミクムＡ　５３４−ＭＳ
−０２３株は、昭和５８年３月１０日から通商産業省工
業技術院嶽生物工業技術研究所（Ｆ’ＲＩ）に受託番号
’ＦＥＲＭ　Ｐ−６９８９，Ｆ’ＩＲＭ　Ｐ−６９９１
およびＦＥＲＭ　Ｐ−６９９０としてそれぞれ寄託され
ている。

上記微生物において、ブレビバクテリウム・チオゲニタ
リスの菌学的性質は、生育にオレイン酸を要求しビオチ
ンを要求しない点を除き、特公昭４５−９４２号公報に
記載のそれと同じである。

ブレビバクテリウム・ブフプムの菌学的性質は、生育に
オレイン酸を要求しビオチンを要求しない点を除き、特
公昭３９−１７３４８号公報に記載のそれと同じである
。コリネバクテリウム・グルタミクムの菌学的性質は、
生育にオレイン酸を要求しビオチンを要求しない点を除
き、日本農芸化学会誌第３９巻３２８頁（１９６５年）
に記載のそれと同じである。

一般に、ブレビバクテリウム属菌およびコリネバクテリ
ウム属菌は、その性状が変化しやすく、たとえば、自然
的にあるいはＸｌｌ照射、紫外線照射、放射線照射９人
工変異剤を用いる人工変異手段などで容易に変異し得る
。このような変異株であっても、生育にオレイン酸を要
求するがビオチンを要求せず、Ｌ−グルタミン酸生産能
を有するものはいずれも本発明の方法に使用し得る。

本発明の方法において、本発明のＬ−グルタミン酸生産
菌を培養する培地としては、通常のＬ−グルタミン酸発
酵に用いられる培地が利用される。

たとえば、炭素源としては、ぶどう糖、果糖、蔗糖、粗
糖、糖蜜（例、甜菜糖蜜、甘蔗糖蜜）、各種殿粉（例、
タピオカ、サゴヤシ、甘藷、馬鈴壱、玉蜀黍など）の糖
化物、酢酸およびエタノ−μなどがそれぞれ単独もしく
は混合して用いられる。

培地に添加される窒素源としては、ペプトン。

大豆粉、コーンステイープリカー、酵母エキス。

肉エキス、尿素などの有機窒素源のほか、硫酸。

硝酸、塩酸、＊酸などのアンモニウム塩、アンモニアガ
ス、アンモニア水などの無ｍ窒素源が、それぞれ単独も
しくは混合して用いられる。その他該菌の生育に必要な
各種の無機塩類、たとえば力μシウム、カリウム、ナト
リウム、マグネシラふ、マンガン、鉄ｔ　Ｍ　＊亜鉛な
どの硫酸塩、塩酸塩、炭酸塩、硝酸塩、リン酸塩、酢酸
塩などを、また該菌の生育に必要なアミノ酸類、ビタミ
ン類などを適宜選択して、それらを単独または組合せて
添加して用いられる。さらに必要に応じて、シリコンオ
イルなどの消泡剤を添加してもよい。

また培地のｐＩ！は通常約６．５ないし８．５の範囲か
ら選定されるが、好ましくはｐＨ約７ないし８の範囲で
培養される。培養中に培地のｐＨの変動が観測されれば
、これを望ましい範囲に修正するタメ、タトエばアンモ
ニアガス、アンモニア水。

尿棄、水酸化アρカリなどを適宜補添すればよい。

培養の温度は、使用される微生物の生育に適した温度を
選択すればよく、通常的２５℃ないし３７℃の範囲で培
養する。培養の時間は、Ｌ−グルタミン酸の蓄積景が最
大に達するまで培養すればよく、通常２０時間ないし４
８時間培養すれば、その目的を達成することができる。

本発明の方法で発酵液中に生成されたＬ−グルタミン酸
は、すでに公知にされている通常の手段を適用すること
によシ容易に採取することができる。

本発明の方法によれば、Ｌ−グルタミン酸が培養物中に
著Ｍ蓄積される。したがって、本発明方法を用いると、
一定量の設備を用いる場合であっても、目的物Ｌ−グル
タミン酸の生産量が増大される。また、得られる培養物
はＬ−グルタミン酸の含量が高いので、目的物の採取が
容易である。

上記等の点で、本発明は工業上有利な方法である。

以下に参考例および実施例を掲げて本発明をさらに具体
的に説明する。なお、バーセン）　（＊）は特にことわ
らないかぎり、〔重量／容量、パーセント〕を示す。

参考例／ ブレビバクテリウム・チオゲニタリスＤ　−２４８（Ｆ
ＥＢＭ　Ｐ−６９８９，４Ｆ０　１２３３１）の斜面培
養物をグμコー７２％、尿素０．４％。

ＫＨ２ＰＯ４０，１Ｎ　、　ＭｇＳＯ４−７Ｈ２００，
０４％。

ＣａＣＯ３ｏ、　ｉ’　９６　、　ＦｅＳＯ４４Ｈ２’
Ｏｏ、　０１５％。

ＣｕＳＯ４・５Ｈ２００，００１％、コーンステイープ
リカー２９６およびオレイン酸ナトリウム（オレイン酸
含有率６０％）　０．０３％からなる滅菌種培地２゜ｗ
ｔを含む２００＋＋＋を容三角フラスコ１ｏ本に接種し
、１８時間、２８ｔＥで振とり培養した。この種培養液
の全量を、グ〃コース２％、尿素０．２９６．ＫＨ２Ｐ
Ｏ４０，１５％　、　ＭｇＳＯ４−７Ｈ２０ｏ、ｏ　６
９６　、　ＣａＣｌ２”２Ｈ２００，０６９６、Ｍｎ３
Ｏ４・４”（ｉＨ２０５’ｆ／１ｉｔｅｒ　＊チアミン
塩酸１１７．．　ｌ　５０　／ｌ／１ｉｔｅｒ　、　ヒ
ａｔチン３００μｇ／１ｉｔｅｒおよびコーンステイー
プリカー〇、２＊からなる培地にオレイン酸ナトリウム
（オレイン酸含有率６０％）を第１表に示す濃度に加え
て滅菌した主発酵培地４１１ｔｅ？を含む１゜１１ｔｅ
ｒ容ジャーファーメンタ−に移植して、温度３２℃１回
転数６０Ｏｒｐｍで主発酵を開始した。

培養は全期間を通じて空気（ｏ、３ｖｖｕ）だけを通気
した場合と、６時間口から空気（０，２ＶＶＭ）と純酸
素（ｏ、ｔｖｖＭ）を同時に通気した場合の２通シにつ
いて実施した。８時間口からは発酵液中のグμコース濃
度がＯ，Ｓ　＊以下に保持されるように、別に滅菌した
７０％グ〃コース液を連続的に添加しながら３６時間ま
で発酵を継続した。発酵液のＰＨは２５％アンモニア水
を自動的に添加して７４から７６の範囲に推持した。こ
うして得た発酵終了液のＬ−グルタミン酸をワーμプμ
グ検圧法によって測定し、第１表に示す結果を得た。

第１表 オ・イΔ竣す　通気したガ１グ茅＝−ス　発酵終了ＩＩ
　Ｌ−１’ｌＬ’１トリウム渥度　スの種類　ツイード
量　液量　酸蓄積；（＠　（ｌｉｔｅｒ）　（ｌｉｔｅ
ｒ）　（ｇＡｉｔｅｏ、０２　空気　０．７４３　５．
１９　６２゜０．０２　空気＋酸素　０．７４３　５．
２０　６２゜Ｏ，０６空９Ｃ１，４４ｉ　５．９４１２
６゜八　八ｅ　カ信↓醋書　１−ｇｏ　Ｉ　ａ４ｓ　ｌ
　９７゜参考例λ 参考例／の比較対照として、生育にビオチンを要求しＬ
−グルタミン酸生産能を有する微生物を用いて以下の実
験を行った。すなわち、プレビパクテリウふ・チオゲニ
タリスＡ５９４（ＦＩＲＭ−７ＡＩＤ、５０９６．ＩＦ
Ｏ１２１１５，ＡＴＣＣ１９２４０）の斜面培養物をグ
ルコース２％、尿ｇｏ、　４９６　、　ＫＨ２ＰＯ４０
，１９６、ＭｇＳＯ４４Ｈ２００，０４％、　ＦｅＥ！
０４−７Ｈ２００，０１５９６、Ｃｕ８０４−５Ｈ２０
α００１％およびコーンステイープリカー１％からなる
波菌種培地２０ｍ１を含む２００Ｍｔ容三角フヲスコ１
０本に接種し、１８時間、２８℃で振とう＠養した。こ
の種培養液の全量を、グルコース２１１１Ｆ、尿素０．
２９６　、　ＫＨ２ＰＯ４０，２９６、Ｍｇ８０４　・
７ミン　Ｈ２Ｏ０，０８％　、ＭｒｌＳＯ４・４〜６Ｈ
２０５１！Ｊｙ／１ｉｔｅｒ。

政 ｒ）　チアミン塩酸塩３００μす／１ｉｔｅｒ　および
コーン１　ステイープリカー０．２％からなる培地にビ
オチン３　を第２表に示す濃度に加えて滅菌した主発酵
培地５　４１ｉｔｅｒを含む１０１ｉｔｅｒ容ジヤーフ
アーメンタｒ　−に移植して、温度３２Ｃ２回転数６０
Ｏｒｐｍで主発酵を開始した。＠養は全期間を通じて空
気（０，３ＶＶＭ）だけを通気した場合と、６時間口か
ら空気（０，ｚｖｖｕ）と純酸素（０，１Ｖ　Ｖ　Ｍ　
）を同時に通気した場合の２通シについて実施した。

以下参考例１と同様の方法により３６時間まで発酵を継
続したところ、第２表に示す結果が得られた。

参考例／と参考例λを比較すれば明らかなように、生育
にビオチンを要求する通常のＬ−グルタミン酸生産菌を
ビオチン過剰供与下で培養した場合には、酸素濃度を高
めた気体を通気しても、その効果がほとんど認められな
いのに対し、本発明のＬ−グルタミン酸生産菌の場合は
、オレイン酸過剰供与下で酸素濃度を高めた気体を通気
することにより、Ｌ−グルタミン酸の蓄積量は顕著に増
加する。

第２表 実施例／ ブレビバクテリウム・チオゲニタリスＤ　−２４８（Ｆ
ＥＲＭ　Ｐ−６９８９，ＩＦｏ　１２３３１）の斜面培
養物をグμコース２％、尿素０．４９６゜ＫＨ２ＰＯ４
０，１Ｎ　、　ＭｇＳＯ４−７Ｈ２００，０４％。

ＣａＣＯ３ｏ、　１９６　、　ＦｅＳＯ４７Ｈ２００，
０１５％。

ＣｕＳＯ４・５Ｈ２００，ＯＯ１％、コーンステイープ
リカー２％およびオレイン酸ナトリウム（オレイン酸含
有率６０％）Ｏ，Ｏａ＊からなる滅菌種培地２０ｅｘｔ
を含む２００ｔｔｌ容三角フラスコ１ｏ本に接種し、１
８時間、２８℃で振とり培養した。この種培養液の全量
を、せＪ＠糖蜜５ｇ６（アンスロン−硫酸法で測定した
全糖として）、尿素０．２　ｍ　、　ＫＨ２ＰＯ４０、
１５９６、ＭｇＳＯ４４Ｈ２００，０４９６、チアミン
塩酸４１００μ９／１ｉｔｅｒ　からなる培地にオレイ
ン酸ナトリウム（オレイン酸含有率６０％）を第３表に
示す濃度に加えて滅菌した主発酵培地４１１ｔｅｒｔ含
ｔｒ　１０１ｉｔｅｒ容ジャーファーメンタ−に移植し
て、温度３２℃１回転数６００ｒｐｍで主発酵を開始し
た。培養は全期間を通じて空気（０，３ＶＶＭ）だけを
通気した場合と、５時間口から空気（０，２ＶＶＭ）と
純酸素（０，１４ＶＭ）を同時に通気した場合の２通シ
について実施した。６ないし８時間口からは発酵液中の
全糖濃度が０．５４以下に保持されるように、別に滅菌
した６０％（全糖として）せＭ糖蜜液を連続的に添加し
ながら２８時間まで発酵を継続した。発酵液のＰＨは２
５％アンモニア水を自動的に添加して７４から７６の範
囲に推持した。こうして得た発酵終了液のＬ−グルタミ
ン酸をワーμグ！グ検圧法によって測定し、第３表に示
す結果を得た。

第３表区分４の発酵終了液から常法にしたがってＬ−グ
ルタミン酸を回収したところ、粗結晶６３１ｇが得られ
た。

第３表 実施例２ 実施例／と同様の培地、操作を用いて得られ九ブレビバ
クテリウム・チオゲニタリスＤ−２４８（ＦＥＲＭ　Ｐ
−６９８９，ＩＦｏ　１２３３１）の種培養液約２００
ゴを、酢酸アンモニウム１％（酢酸として）　、　ＫＨ
２ＰＯ４０，１５９６、ＭｇＳＯ４−７Ｈ２Ｏ０１０６
％、チアミ７１４１８４１００　μｆ／１ｉｔｅｒ、ビ
オチン２０μｇ／１ｉｔｅｒ　＞よびコーンスティープ
リカー０２９６からなる培地にオレイン酸ナトリウム（
オレイン酸含有率６０％）を第４表に示す濃度に加えて
滅菌した主発酵培地４１ｉｔｅｒを含む１０１ｉｔｅｒ
容ジャーファーメンタ−に移１ｆｆｌして、温度３２Ｃ
１回転数６０Ｏｒｐｍで主発酵を開始した。培養は全期
間を通じて空気（０，２５ＶＶＭ）だけを通気した場合
と、６時間口から空気（０，２ｖｖＭ）と純酸素（０，
０５ＶＶＭ）を同時に通気した場合の２通シについて実
施した。８時間口からは発酵液中の酢酸濃度が０．５％
以下に保持されるように、あらかじめ２５％アンモニア
水でｐ！（４，０に調整したのち滅菌した７０ｇ６酢酸
溶液を間欠的に添加しながら、４６時間まで発酵を継続
した。発酵液のｐＨは３０％水酸化ナトリウム溶液を自
動的に添加して７．４から７６の範囲に推持した。こう
して得た発酵終了液のＬ−グルタミン酸をワーμプルグ
検圧法によって測定し、９４表に示す結果を得た。

第４表区分４の発酵終了液から常法にしたがってＬ−グ
ルタミン酸を回収したところ、粗結晶５９５ｇが得られ
た。

実施例３ ブレビバクテリウム・フヲプムＢＮ−１１（ＦｚＲＭ　
Ｐ−６９９１，ＩＦＯ１２５２５）の斜面培養物を用い
て、実施例／の方法においてオレイン酸ナトリウム濃度
をＱ、９４％とし、５時間口から空気（０，２ＶＹＭ）
と純酸素（０，１ＴＶ）Ｊ　）とを同時に通気し、甘蔗
糖蜜液のフィード量は２、３３１ｉｔｅｒ　とし、他は
実施例／と同様の操作を行なったところ、発酵終了時の
液量は７２７１ｉｔｅｒ　で奈シ、Ｌ−グルタミン酸の
蓄積量は９６、１９／　１ｉｔｅｒであった。

実施例グ コリネバクテリウム・グルタミクムＡ　５３４−ＭＳ−
０２３（ＦＥＲＭ　Ｐ−６９９０，工Ｆ０１２５２３）
の斜面培養物を用いて、実施例１１゜ の方法においてオレイン酸ナトリウム濃度を０．０６％
とし、５時間口から空気（０，２Ｖ　Ｖ　Ｍ　）と純酸
素（αＩＶＶＭ）とを同時に通気し・甘蔗糖蜜液　。。

のフィード量は２．３３１ｉｔｅｒとし、他は、実施例
１と同様の操作を行な９たところ・発酵終了時０液　、
。

量は７．３　Ｑ　１ｉｔｅｒであり、Ｌ−グルタミン酸
の蓄積量は９６．５９　／　１ｉｔｅｒ　であった。

ン（η ｌ団 ］叩 −４゜ 手　続　補　正　書　（自発） 事件の表示 昭和５８年特許願第１４１７０５号 発明の名称 Ｌ−グルタミン酸の製造法 補正をする者 事件との関係　１．＋Ｆ許出願人 住　所　大阪市東区道修町２丁目２７番地名　称（２９
３）武Ｉ’１１薬品工業株式会社代表者　倉　林　育　
四　部 代理人 東京３１１！絡先（特許法規課）１１１話２７８−２２
１９・２２１８６、補正の内容 （１）明細書第８頁第１２行の「寄託されている。」を
下記のとおり訂正する。

「寄託され、該寄託はブダペスト条約に基づく寄託に切
換えられて、下記の受託番号で同研究所（ＦＲ工）に保
管されている。

」 以上 受託番号変更届 昭和５９年１り／、７日 特許庁長官　殿 ／事件の表示 昭和５８年特許願第１４１７０５号 λ発明の名称 Ｌ−グルタミン酸の製造法 ３　手続をした者 事件との関係　特許出願人 住所　大阪市東区道修町２丁目２７番地名称　（２９３
）武田薬品工業株式会社代表者　倉　林　育　四　部 り代理人 住　所　大阪市淀用区十三本町２丁目１７番８５号！　
旧寄託機関の名称 工業技術院微生物工業技術研究所 ・　−＼１． １”＋’　、ｔ）：″Ｊコニゝ・ ７　：）０．１．７３　ｊ −一中、。

６旧受託番号 別紙のとおり ７　新寄託機関の名称 工業技術院微生物工業技術研究所 ざ新受託番号 別紙のとおり Ｚ　添付書類の目録 （１）新受託番号を証明する書面　３通（２）別　紙　
１通 以上 別　紙

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 生育にオレイン酸を要求するがビオチンを要求しないＬ
   −グルタミン酸生産能を有する微生物を培地に培養し培
   養物中にＬ−グルタミン酸を生成蓄積せしめ培養物から
   Ｌ−グルタミン酸を採取する方法において、Ｌ−グルタ
   ミン酸の蓄ｆｉ！！量が通常の空気による通気培養下で
   極大値を示すオレイン酸量を越える過剰のオレイン酸源
   を培地中に存在せしめ、かつ通常の空気よシ酸素濃度を
   高めて酸素を培地に供給しながら培養することを特徴と
   するＬ−グルタミン酸の製造法。