JPS603826B2 - 植物組識または細胞の培養方法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 この発明は植物組織または細胞の培養方法、特に植物の
個体から取出した組織あるし、は継代培養を行った組織
または細胞を効率的に培養する方法に関するものである
。

植物体から切出した組織片、例えば未分化の茎頂部ある
いは根の形成層等の比較的生長の早い組織片を人工塔地
中で培養すると、未分化の細胞増殖であるカルス形成、
あるいは分化した藁状物質や根の形成が、単独ないし同
時に発生し成長する。

このような植物の組織培養においては、ココナツトミル
クや酵母抽出液などを加えて成長を促進させることがい
まいま行われるが、この場合の成長促進はカルスの増殖
促進作用のみであり、それだけでは分化を起こさせて植
物体を生成させることはできない場合が多い。このため
従来は分化促進のために紫外線を照射したり、あるいは
インドール酢酸、ベンジルアデニンなどの植物ホルモン
を相互に種々の割合で添加していた。ところがこれらの
分化促進方法は制御が困難であり、特に合成植物ホルモ
ンは添加量によって分化を促進したり、あるいは阻害す
るなどの問題があった。この発明は従来法におけるこの
ような問題点を緩和するものであり、増殖を促進させる
とともに、分化をも促進させることのできる植物組織ま
たは細胞の培養方法を提供することを目的としている。
この発明は微細藻類抽出物を含む培地により植物組織ま
たは細胞を培養することを特徴とする植物組織または細
胞の培養方法である。

微細藻類とはクロレラ、セネデスムス、スピルリナ等の
単細胞またはそれに近に藻類であり、天然に棲息するも
のならびに培養されたものが含まれる。

本発明における微細藻類抽出物とは、上記微細藻類の薮
体を適当な溶媒で抽出した抽出物であり、溶媒としては
特に水性溶媒がよい。

水性溶媒としては例えば水単独、あるいは酸、塩基、も
しくは有機溶媒が熔解された溶液などがある。抽出方法
は藻体を常温または加熱した溶媒と接触させ抽出を行う
。本発明において使用できる抽出物はこのような方法に
より得られた抽出液、またはこれら抽出液を分子分画し
た高分子画分、あるいはこれらの濃縮物または凍結もし
くは頃霧乾燥等により乾燥した抽出物粉末などがあり、
特に核酸様物質、糠たんぱく、多糖体などを含む高分子
画分またはその乾燥粉末が望ましい。本発明では微細藻
類抽出物を含む培地により植物組織または細胞を培養す
るのであるが、基本塔地、培養方法などは通常の植物の
組織培養におけるものと同一である。

すなわち基本培地としては無機塩、徴量要素およびビタ
ミン等を含む合成塔地で、それぞれの植物組織あるいは
細胞を培養するのに最も良いものを使用し、これに前記
微細藻類抽出物を添加し、植物組織または細胞を培養す
る。培養の対象となる植物組織としては植物体から取出
されるあらゆる組織が含まれるが、特に茎頂部、形成層
、若い腔軸等の組織が好ましい。

また植物体に発生したカルス等の未分化増殖細胞や、継
代培養した組織または細胞もそのまま培養可能である。
本発明における微細藻類抽出物の基本塔地への添加量は
、抽出物の乾燥重量としては１〜５００の９／そとする
。

微細藻類抽出物を添加した培地はそのまま培養に供しう
る。さらに通常の培養に使用されるココナツトミルク等
の成長促進剤または合成植物ホルモン等の分化促進剤を
目的に応じて添加することはさしつかえない。以上のよ
うに微細藻類抽出物を含む培地により、植物の茎頂部等
の細胞を培養すると、カルスの増殖が促進されるととも
に分化が促進され、カルスから植物体もしくは茎、葉ま
たは根が発生して成長し、あるいはカルスを経ることな
く植物体ミ分化し成長する。

このようにして成長した増殖細胞群をそのまま収穫した
り、または分化した植物体を苗として移植したりするこ
とができるとともにカルスから有用物質を抽出したり、
あるいは茎葵部だけ分化したものをそのまま利用するこ
とができる。実施例 １ カーネーションの茎頂（生長点を含む組織で、植物体の
中で最も生長の早い組織の１つ）を切り出し、下記培地
を入れた多数の試験管内の培地上にそれぞれ層床し、１
日のうち９時間照明（２０００１ｘ）、１虫時間暗黒と
し、２５００の条件下で培養した。

培地は基本培地としてＭｍａｓｈｉｇｅ ＆Ｓｋｏｏｇ
塔地（表１に示す。但しＦｅＳ０４は添加せず。）を使
用し、これにＳｕｃｒｏｓｅ２．０％、寒天０．８％お
よびクロレラ抽出物を添加した舟５．５〜６．０のもの
である。クロレラ抽出物はクロレラ粉末３０夕を水１そ
に懸濁させ、１００つ０で３０分間熱水抽出し、遠心分
離してその上澄液を凍結乾燥（乾燥重量で４．５夕）し
たものであり、培地への添加量は、２の９′夕、６雌′
夕、２０雌／その３通りとし、無添加のものと比較した
。２ケ月培養した結果、クロレラ抽出物を２０の９′〆
添加したものが、最も増殖および分化促進効果が顕著で
あり、■：全体が分化することなくカルス化したもの、
‘Ｂ’：茎部カルス化して茎および葉を形成したもの、
‘Ｃ｝：茎部カルス化して茎、葉および根を形成したも
の、■：カルス化しないで茎、葉および根を形成したも
の、ならびに‘Ｅ｝：全く増殖、分化しなかったものに
別れた。

クロレラ抽出物を２０の９／そ添加のものおよび無添加
のものの、それぞれ１００本の試験管について、上記■
〜【Ｅ｝の数を計数した結果を表２に示す。表Ｉ 表２ 以上の結果より、クロレラ抽出物添加の場合は無添加の
場合に比べて｛功および｛Ｅ｝が少ないことから増殖促
進効果が認められ、また凶が少なく｛ＢＸｑが多いこと
から分化促進効果が認められる。

実施例 ２ィネの裸種子を、合成生長ホルモンである２
・４−Ｄを２．０の９／そ含む寒天培地上で培養すると
、カルス形成を起こすが、そのカルス形成に与えるクロ
レラ抽出物の影響を調べた。

培地は基本塔地としてＢ−５培地（表３に示す）を使用
し、これにＳｕｃｒｏｓｅ２．０％、２・４一Ｄ２．０
の夕／夕、クロレラ熱水抽出物０．１〜５００の９′夕
、寒天０．８％を添加したＰＨ６．０のものであり、培
養条件は実施例１と同様である。暦床後３０日目に、実
施例１の凶〜‘Ｅに相当するフラスコの数を計数した結
果、クロレラ熱水抽出物１０の９′〆添加の場合の結果
を表４に示す。表３ 以上の結果より、クロレラ抽出物添加の場合は、無添加
の場合に比べて【Ｂー、‘Ｃ’が多いことから分化促進
効果が認められ、クロレラ抽出物１〜１００の９／そで
顕著な効果のあることがわかった。

また風、‘Ｂ｝、‘Ｃーの合計から細胞増殖をした個体
数は大差がなかったが、増殖個体はクロレラエキス抽出
群の方が重量増加を示し、細胞増殖促進効果を認めた。
以上のとおり、本発明によれば植物組織または細胞の培
養において、微細藻類の抽出物を添加することにより、
細胞の増殖および分化を促進し、効率よく培養を行うこ
とができる。

このため有用植物を一定の条件下での培養を行い、その
組織または細胞をそのまま収穫し、また有効成分を抽出
することができる。さらに均一かつ理想的な育苗、種の
保存等も可能となる。表４

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 微細藻類抽出物を含む培地により植物組織または細
   胞を培養することを特徴とする植物組織または細胞の培
   養方法。 ２ 微細藻類はクロレラ、セネデスムスまたはスピルリ
   ナである特許請求の範囲第１項記載の植物組織または細
   胞の培養方法。 ３ 抽出物は水性溶媒抽出物である特許請求の範囲第１
   項または第２項記載の植物組織または細胞の培養方法。 ４ 組織または細胞は植物体から取出した初代培養の組
   織もしくはそれらを継代培養して得られ組織または細胞
   である特許請求の範囲第１項ないし第３項のいずれかに
   記載の植物組織または細胞の培養方法。