JPS6038653A - 流体試料の粒子の分析方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は流体試料中の粒子を分析する方法、特に尿の如
き稀薄な生物学的流体試料を、分析用に製編試料を物理
的に作る必要なくして、分析する方法に関する。

本出願は１９８０年９月１２日付出願中の米国特Ｉｌｉ
第１８６，４１８号の追加特許の出願である。

従来尿の沈殿物慣畳の方法は次の段階を必要とする。す
なわち、（１）尿を試験管に入れて遠心分離器で振廻し
て沈殿物を懸濁液から分離する、（１１）きれいになっ
た懸濁液の大部分を捨てる、ｌｌｉ＋残りの液に沈殿物
を再び懸濁させる、０■）懸濁ｒＬを顕微鏡スライド上
に移して拡げる、（■）スライド上の懸濁液の上にカバ
ーカラスをかぶせる、（ｖｉ）顕微鏡の焦点をスライド
に合わせる、（ｖｉＤ幾つ乃）の視域を調べて、病気の
存在により異る種々の割合で尿の沈殿物を構成する赤血
球、白血球、上皮細胞、円柱、細菌、イースト、寄生虫
、ムコイド、結晶体などの異常な数の存在を横歪する。

遠心分離（広傾瀉（けいしや）　（ｉＨｌおよび再懸濁
（ｉｉｉ）の段階は、流体試料が稀薄なために１吏用さ
れる。こｎらの段階は現在、全て手で行われる。そのた
めに必要な操作のため、この方法はしばしば不潔で不快
なものとなる。沈殿物の懸濁液を顕微鏡スライド上に拡
げることも、粒子が相互に亜り合って不均等になること
がよくある。数多い沈殿物を見る時、顕微鏡の接眼レン
ズを長時間覗くことは疲わさせる。こイｔらの要素は全
て不正確な結果を導く。

生物学的沈殿物を扱う他の装置には、いわゆる」−ルク
ー計数器（Ｃｏｕｌｔｅｒ　ｃ６ｕｎｉｅｒ　）が苫才
ｎる０こ０）計数器では、血球を１列にしてオリフィス
に通し、オリフィスの所で電気特性が変わる様子により
検知し計数する。しかしコールタ−計数器力）らの情報
は一種類の計測の分析に限らｌ’Ｌる。Ｍ数のパラメー
タの清報が必要な場合、そ７１．を得る標準的な商業的
方法は映像面に網目を固定させて顕微鏡スライドを調製
し、顕微鏡を通してスライド上の網目を一度に１個ずつ
観察しながら、統計的に有意な数の網目を作業者または
パターン認識機ｈｉｍ　＆こ＝ｔ　ａさせることである
。

最近、流体流の中で流れる粒子の光学的分析を与える池
の試みがなされた。たとえばケー（Ｋａｙ　）他、ジャ
ーナル・オブ・ヒストケミストリ・アンド・シトケミス
トリ（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ｌ（ｉｓｔｏｃｈｅｍｉ
ｓｔｒｙａｎｄ　Ｃｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　）、Ｖ
ｏｌ　２７　、ｐ３２９（１９７９：）に、ピッコン上
に拡大させて細胞を１列に動かすコールタ−型オリフィ
スが開示さイｔている０たとえば、フロー・シトメトリ
・アン１−′・ソーティング（Ｆｌｏｗ　Ｃｙｔｏｍｅ
ｔｒｙ　ａｎｄ　’Ｓｏｒｔｉｎｇ　）、メラント（Ｍ
ｅｌａｎｅｄ　）　他、ジョン・ウイリ・アント・ノン
ズ（Ｊｏｈｎ　’Ｗｉｌｅｙ　＆　８ｏｎｓ　）　１９
７９　、　Ｃｈａｐｔｅｒ　１も参照されたい。

１９８２年７月６日登録米国特許第４，３３８，０２４
号は粒子情報の定量分析の装置および方法を開示する。

しかし、上記に引用された文献のどれ一つとして、最初
に遠心分離、傾瀉および再懸濁により濃縮試料を作る必
要なしに粒子を分析する問題の解答を教示または示唆し
ていない。

本発明による、粒子を含む流体試料から粒子を分析する
方法は試料を拡大区域に分布させることを含む。その区
域にわたって複数の試料の光学的スチール映像を撮影し
、各映像はその区域の異る部分を表わすようにする。各
光学的映像を電子的映像に変換し、粒子の映像を電子的
映像にする。

電子的映像から粒子の映像を抜き出し、目で識別し得る
性質の階級に従って順序付けられた配列にして表示する
。

本発明の方法は尿の如く、粒子を言む流体試料を拡大区
域に分布することを言む。たとえば粒子が実質的に重な
り合わないように顕微鏡スライドの上に試料をこすり付
けて分布させることができる。各画像がスライドの異る
部分を表イつすようにして、試料の複数の光学的スチー
ル画像を撮る。

たとえば、スライドｆｍかしつつスライドの一部分を映
像区域に入れるように試料付きのスライドを顕微鏡にの
せることができる。各画像はスライＩ・の異る部分であ
る。光学的画像の各々は電子的両鍔に変換さ２％る。粒
子の画像は電子的画像の中に現われる。粒子の画像は電
子的画像から抽出され合成される。つぎに粒子の画像は
目視識別性の階級に従って順序付けさｆ’した配列で表
示さ？’Ｌる。

本発明の方法は第１図に示す装置（１０）を用いて実施
されることができる。装置α０）は顕微鏡スライド−〇
）の観察区域αυ上に焦点を合わせらイする顕微鏡（３
０）を含む。観察区域ｕ引ま下からストロボ灯＋３２１
．望むらくは米国のサイエンテイフイツ・インストルメ
ント・コーポレーション（５ｃｉｅｎｔｉｆｉｃ　Ｉｎ
ｓｒｒｕｍｅｎｔＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ　）モデル３
０１８　（２ＵＰ　１．５ランプ付き月こより照らされ
る。灯（３のはスライド（２０）の厚さにほぼ平行な方
向に顕微鏡（３０＋に向けらイする。

望むらくは、ストロボ灯（３湯は１６分の１秒間隔て働
いて一連の光学的スチール画像７ｉ−顕微鏡（３０）に
形成させる。顕微４００）の出力は、ＪＶＣ社製カメラ
モデル番号ＫＹ１９００であることが望ましいヒシコン
・カメラ（２）に焦点を合わせられる。カメラＣ３釘ま
各光学的画像を電子的画像に変換する。カメラ（２）と
連合するアナログ−デジタル変換器は各電子画像を分割
して複数のピクセル（ｐｉｘｅｌ　）とし、各ピクセル
が各画像の一つの画成部分に対応するようにする。複数
の゛電子画像（各光学画像が一つずつの電子画像に変換
されている）が粒子の画像ｆＧむ。生物学的流体は稀薄
である７１１）ら、すべての電子画像が粒子の画像を含
むとは限らない。

つぎに電子画像はカメラｔ３４）からプロセッサ（３６
）に送らｆ’Ｌる。プロセッサ（３Ｇ）は各電子画像か
ら粒子の画像を抽出する。粒子の画像は目視識別特性の
階級に従って順序付けされた配列でディスプレー（５２
）−にに表示さイする。

本発明の方法は第１Ａ図ζこ示ずフローセル（Ｎｏｗ　
ｃｅｌｌ　）　（２０ａ）を用いて実施されることもで
きる。フローセル（２０ａ）は米国特許第４，３３８，
０２４号に充分に記載された型式のものである。尿の如
き試料液を第１の入口（１７ａ）からフローセル（２０
ａ）の中に送る。包囲液を第２の入口（１９ａ）乃）ら
フローセル（２０ａ）に人イする。試料液は矢印Ａが示
す方向にフローセル（２０ａ）を通って流Ｖ’Ｌる。そ
イｔぞｎ流れの方向に垂直に測って、厚さの多数倍の幅
を有する拡大区域（１８ａ））こわたって試料液を分布
させる。拡大区域（１８ａ）で粒子が実質的に重なり合
わないように試料液を分布させる。フローセル（２０ａ
）内の試料ｒｉを顕１　鏡（３０）の下に入れ、拡大区
域（１８ａ）に顕微鏡ｆ３０＋の焦点を合せる。試料液
がフローセル（２０ａ）を通って流Ｉする間に顕微鏡（
３０）は観察区域（１８ａ）の敵の光学画像を撮る。液
は動いているから、装置（１０）は固定される。よって
顕ｅ　ａ　ｔ３ｏ＋に形成される画像は試料液の異る部
分である。

プロセッサ（至）は第２図のブロック説明図に、より詳
細に示さイする。

プロセッサ（至）はカメラ（３４）の）ら電子画Ｉ８！
を受取るフレーム・グラバ−／メモリー（ｆｒａｍｅ　
ｇｒａｂｂｅｒ＆ｍｅｍｏｒｙ　）　（４０）を言む。

フレームグラバ−（４０）はモントリオール市Ｍａ　ｔ
ｒｏｘ　ＣｏｒｐｏｒａＬｉｏｎ社から入手し得るモジ
ュールであることもてきる。望むらくは、フレームグラ
バ−（４０１はカリホルニャ州チャツノワース（Ｃｈａ
ｔｓｗｏｒＬｈ　）のＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｒ
ＩｃｍｏｔｅＩｍａｇｉｎｇ　Ｓｙｓｔｅｍｓ　、　Ｉ
ｎｃ、社のモテル１０１−０００９ＣＲＴ／ＩＯモジユ
ールである。フレームグラバ−／メモリー（４０）の出
力は補足のりフレッシュ・ビデオ・メモリ（ｒｅｆｒｅ
ｓｈ　ｖｉｄｅｏ　ｍｅｍｏｒｙ　）　（４３に供給さ
れる。該メモリー（４２）は６４にデュアル・ポーテッ
ド・ルミナンス・メモリー（ｄｕａｌ　ｐｏｒｔｅｄ　
Ｉｕｍｉ−ｎａｎＣｅ　ＩｎｅｌｎＯ＋７　）および３
２にデュアルポーテッド１ｔ−Ｙ／Ｂ−Ｙメモリー（ｄ
ｕａｌ　ｐｏｒｅｅｄ　）Ｌ−Ｙ　ａｎｄ１３７　Ｙ　
ｍｅｍｏｒｙ　）を含む。リフレッシュ・ビデオ・メモ
ＩＪ−ｔ４ａの出力はカラー・モニター（５２）に接続
さ７７、た１）／Ａ変換器（４阻こ接続さｎる。

フレームグラバ−／メモリー（４１は、Ｔｅ１ｅｓｏｆ
ｔＴ６８中央処理装置（ＣＰＵ）であることが望まわる
中央処理装置（ＣＰＵ）＋４６）のＱ母線（旬にも接続
さイＬる。Ｃｂｒｉｓｌｉｎ　ＩｎｄｕｓＬｒｉｅｓ　
Ｉｎｃ＋社の２５６にメモリー（４印もＱ母瞭（４４）
に接続される。その他、フロッピー・ディスク・トンイ
ブ（６２）の付いたディスク・コントローラ（６０）も
Ｑ母雌（伺）に接続さイする。プロセッサ（至）はＱ母
線（４４）に接続さｎたクロック／カレンダ（６４）を
も含む。プリンタ（６８）付きのシリアルポート（５ｅ
ｒｉａｌ　ｐｏｒｔ　）　（６６）もＱ母勝に接続され
る。メモリー・ノー・メモリー１）ＭＡ（７０）が補足
ビデオメモ’）−＋４２をＱ母線＋４４）に接続する。

最後にフ”ライムメモリー（７４）付きのプライム・ゼ
不レーク（７２）モＱ母線（４４１に接続される。プラ
イム・セ不レータ（７２）はストロボ（３つをも働ＩＪ
）せる。

カメラＧ４Ｉからの各電子画像はフレームグラバ−／メ
モリー（４０）に記憶されるＣＰＵｆ４６）はブロセソ
→ノ′（至）が受取った電子画像について動作する。処
理された画像はメモリー（４つに記１意さイル１デイス
プレー表示のためにモニター（５２）に送られる。長期
間の記憶きして、画像はフロッピーディスク（６２）に
記憶されることができる。プライム・ゼ不し−’／　（
７２）は電子画像内の粒子の縁を検知する。プライム・
セ不レーク（７つの動作は１９８３年２月２８日付出願
中の米国特願第４７０，２０８号の主題である。

本発明の方法の一変形は複数の粒子画像を會む一つの合
成画像を電子画像から形成させることによる。粒子の画
像は順序付けされた配列に並べらイする。そして合成画
像がディスプレー表示される。

利用者が実行したい特定のタスクに応じて、第２図の装
置を用いて広く異るプログラミングを使用して各電子画
像または一つの合成電子−１＃！をさらに処理すること
もできる。

たとえば尿の場貧、従来の方法では非晶質の瞬酸温のＩ
ＪＤき（ヒ学物貫が映像区域にあって生物学的粒子の視
界をぼかしている時に、塩１１！２を添加して１１１Ｉ
ｆ、ｄ塩粒子を化学的に除去する。しかし本発明の方法
ごは化学的粒子を電子的に、すなわち画像処理技法を用
いて除去することができる。特定の寸法、色または形大
の粒子を視野から除去したいならば、その都度、試料を
再調製することなく電子的にそれを行うことができる。

そのうえ、本発明の方法によれば、こｎまで化学的に除
去し得なかった生物学的粒子も同様に電子的に画像から
排除することができる。かくて本発明により大幅な融通
性が可能となる。

さらに加えて、粒子の両鍔ヲ合成する前に各電子画像か
ら背景の画像を除去することができる。

その代りに、合成画像を形成させた後で、合成画像を形
成する粒子の各画像から背景画像を除去することもでき
る。

粒子の画像はある順序の配列でティスプレー（５２）上
に表示される。ある順序の配列とは、各階級が他の階級
とは異る視覚特性を持つように階級別に粒子の画像をデ
ィスプレー表示することである。

たとえば、画像を大きさ別にディスプレー表示すること
ができる。すなわち同じ大きさの粒子の画像を（同じ種
類の粒子を表わすと仮定して）、同じ列または行に表示
する。異る階級である、テイスプレー（５２）の隣りの
列または行には異る大きさの粒子の画像が表示される。

ある順序の配列にした粒子画像の表示は利用者による粒
子の種類の識別を容易にする。大きさ以外にも、色彩、
形状または組織（すなわち粒子の内部の詳細）、もしく
は他のどの様な目視識別特性によっても粒子の画像の表
示を行うことができる。乃）力）るティスプレーの一例
が第３図に示される。

合成画ｉ象はまたある階級の粒子の画像のみからなる複
数の粒子画像を含むことができる。たとえば、成る範囲
の大きさの粒子に限定される特性を有する粒子の複数画
像で合成画像を形成させることができる。代りに、合成
画像を形成するように甘酸されない先験的に決められる
階級の粒子の画像を残して、複数の粒子画像から合成画
像を形成することもできる。換言すれば、たとえば特定
の大きさの粒子の如く先験的に決められる粒子の階級は
合成画像を形成させるのに使用しないようにして、ある
順序の配列で複数の粒子画像から一つの合成画像を合成
することができる。

目視および識別をさらに容易にするために、粒子の画像
にマット（つや消し）をかけることができる。

本発明の方法のいま一つの実施例で、ティスプレーをＥ
ｌｏ−Ｇｒａｐｈｉｃｓ、　Ｉｎｃ、社製作θ）ユニッ
トとすることができる。このディスプレー・ユニット（
５カは夕゛ノチ・スクリーンを有する、すなイつちティ
スプレー・スクリーンは利用者からの接触フィートバン
ク信号を受入イすることがてきる。粒子の画像がある順
序の配列でディスプレー表示される時、利用者は蝙果（
エディツト）することができる。

すなイつち特定階級に属さない粒子の画像をティスプレ
ー７１）ら削除することができる。こイｌは粒子の画像
を削除すべき特定区域のタッチスクリーンに触れて行わ
ｎる。プロセッサ藝６）は利用者によるスクリーン（５
２）の励起を認識して、利用者がスクリーンに触ｎたデ
ィスプレーの部分から粒子画像を削除する。このように
して誤って階級別けされた粒子を整理することができる
。

さらにティスプレー（５２）は各階級の粒子の数の計数
を記憶しているプロセッサ（３６）に接続されているの
で、ディスプレー（５２）のスクリーン上での画像の編
集で、プロセッサ（至）に記憶さイｔた各階級の粒子数
を編集することもできる。たとえば、尿の試料を顕微鏡
（瑚の下で観察する。複数の光学画像が形成されて、各
光学画像が電子画像に変換される。ある粒子の画像を含
む各電子画像の部分が抽出されてディスク（６２）に記
憶さイする。プロセッサ（、刑は他に混って３２０個の
サイズへの粒子があると判定する。ディスプレー（５２
）の視野は限られているので、プロセッサ（ト）はサイ
ズＡの粒子画像を１６個しか表示しない。１６個の画１
象はサイズＡの粒子の３２０個の画像を統計的に代表し
ていると仮定する。ディスプレー（５２）に１６個の画
像が表示されている際、利用者はサイズＡの粒子の画像
を編集することができる。たとえば、もしもサイズＡの
粒子の画像２個を上記の如く削除したとすると、プロセ
ッサ（３６）はこの係数を用いて全体θ〕計数に乗する
。従って、サイズＡの粒子の新しい計数は（１４／□６
Ｘ　３２０＝）２８０となるであろう。よって、本発明
の方法を用いイｔば、目視のために表示された粒子画像
の人手による編集が行われると同時に、人手編集に基づ
いて粒子数の全体計数の機械編集が行われる。

本発明の方法には多くの利点があることを評価すべきで
ある。第一の、そして最大の利点は、最初に物理的に濃
縮試料を作ることなく、すなイつちそれに伴う遠心分離
、傾瀉、および杓懸濁の問題を生ずることなく、稀薄試
料の粒子の分析を行うことができることである。従来の
再懸濁の方法は種々の粒子の重なり、すなわち偏った画
像を生ずる。本発明の方法によれば、液体は統計的に、
より良く粒子を代表するものとなり、同時に粒子の貞な
りの可能性も少なく、画像の偏りもない。次に見かけの
濃縮の度合を電子的に変えることもできることを評画す
べきである。そのうえ、人手による操作の段階が除去さ
れたことで、時間が節約さイ１７、誤差の溜在源が無く
なり、生物学的な安全翻も与えられる（浦在的に感染性
のある試料を最少の手による取扱いてもって分析する）
。また試暎雷、ピペットおよび顕微鏡スライドの如き消
費材を１吏用しないことは経済的な節約につながる。

最淡に、電子的な形式の画像により、特定の化学的およ
び生物学的粒子の電子的な除去または蓄積を言めて、画
像をさらに処理するのに数多くの映隊技法を用いること
もできる。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明の方法と共に使用することのできる装置
の斜視図、 第１Ａ図は本発明の方法のために第１図の装置と共に使
用するのに適したフロー・チャンバの斜視図、 第２図は第１図の装置に使用されるプロ七゛ノ→ノーの
説明ブロック図、 第３図は目視識別特性の階級によりある順序の配列に並
べらｎた粒子の画１象を示すティスプレーの見本である
。 １８ａ　・・・・・　拡大区域 ３４・・・・・・・・・　ヒジコンカメラ３６・・・・
・・・・・　プロセッサ ５２・・・・・・・・　ディスプレー 手続補正古 昭和５９年　８月／乙日 特許庁長官　殿 １１Ｊ）イ′１の表示 昭和５９年持具′Ｆ願第１４１５７７号２　発明の名称 流体試料の粒子の分析方法 ３　補正をする者 事イ′１との関係　特ｒ１出願人 名　称　インターナショナル・リモート・イメージング
・システムズ、インコーボレーテッド ４代理人 イ１　所　東宗都千代田区永口１町１丁目１１番２８号
６　補正の対象 願；ｊ１面中１ｈ訂出願人の代表者の欄、１弐図面、及
び委任状。 ７　補正の内容 別紙のどおり（内容に変更なし） 尚、委任状住所中Ｉ’Ｊ１３１１Ｊとあるのはアメリカ
合衆国にお第１頁の続き ■発明者　ガンナー・ポルッ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 ＋１１　粒子を含む流体試料から該粒子を分析する方法
   であって、 粒子が他の粒子と実質的に重なることなく拡大１区域に
   わたって前記粒子を分布させることと、各光学的１象が
   前記区域の異る部分を表わすように創記区域にわたって
   前記試料の複数の光学的スチール画１象を形成させるこ
   とと、前記粒子の画像を電子画像とするように前記光学
   的スチール画像の各々を電子画像に変換することと、 ［］ＩＩ記粒子の画像を抽出して前記電子画像を合成す
   ることと、 目視識別特性の階級によっである順序の配列で前記粒子
   の前記画像をディスプレー表示することと、を含む方法
   。 （２）前記目視識別特性の一つがサイズ（大きさ）であ
   る、特許請求の範囲第１項に記載の方法。 （３）前記目視識別特性υ）一つが色彩である、特許請
   求の範囲第１項に記載の方法。 （４）前記目視識別特性の一つが形状である、特許請求
   の範囲第１項に記載の方法。 （５）前記目視識別特性の一つが組織である、特許請求
   の範囲第１項に記載の方法。 （６）　さらに、前記粒子の前記画像のＡｉｌ記ディス
   プレーを編集する段階を言む、特許請求の範囲第１項ｌ
   と記載の方法。 （７）さらに、目視識別特性の各階級における粒子数を
   計数する段階と、前記編集段階に基づき、目視識別特性
   の各階級における粒子数を再計数する段階と、を含む特
   許請求の範囲第６項ζこ記載の方法。 （８）さらに、分母が表示された粒子の画１家数であり
   、分子が編集段階後に依然として表示される粒子の画像
   数である分数を粒子数の計数に乗する段階を前記再計数
   段階が含む、特許請求の範囲第７項に記載の方法。 （９）　さらに、前記合成段階に先立って前記電子画像
   の各々を処理する段階を含む、特許請求の範囲第１項に
   記載の方法。 （１０）　さらに、前記合成段階の後で前記粒子の画像
   の各々を処理する段階を言む、特許請求の範囲ｇ１項に
   記載の方法。 （１１）　さらに、前記合成段階が、目視識別特性の階
   級によりある順序の配列でｍＪ記粒子の複数画像から成
   る合成１ＩｌＩＩ鍼を形成することを言み、さらにｍｌ
   Ｉ記テ記入イスプレー表示段階記合成画像を表示するこ
   とを言んでいる、特許請求の範囲第１項に記載の方法。 ｕ２）前記合成画慮が前記粒子のある階級の置数の画像
   を含んでいる、特許請求の範囲第１１項に記載の方法。 賭　前記形成段階７１）ら画Ｉ象が除外される、先験的
   に決めらイする粒子の階級を有し、前記合成画像が複数
   の粒子画像を含んでいる、特許請求の範囲第１１項に記
   載の方法。 １１４１　粒子を言む流体試料から粒子を分析する方法
   であって、 前記試料をある流動方向に動かすことと、共に流動方向
   に垂直に測定した幅が１厚さの多数倍であり、実質的に
   相互に重なり合う粒子が無いような拡大区域にわたって
   前記流体試料を分布することと、 流動方向の既定位置にて前記流体を照明し、前記照明は
   前記流動方向にほぼ垂直な方向に向けらイすることと、 前記の位置にて前記流体試料の複数の光学的スチール画
   像を形成させることと、 前記粒子の画像を前記′電子画像にして前記光学的スチ
   ール画像の各々を電子画像に変換することと、 目視識別特性の階級によりある順序の配列で前記粒子の
   前記画像をディスプレー表示することと、を言む方法。 １１５）　前記目視識別特性の一つ力はイズである、特
   許請求の範囲第１４項に記載の方法。 （１０前記目視識別特性の一つが色彩である、特許請求
   の範囲第１４項に記載の方法。 （１７）前記目視識別特性の一つが形状である、特許請
   求の範囲第４４項に記載の方法。 ｔ１８１　前記目視識別特性の一つが組織である、特許
   請求の範囲第１４項に記載の方法。 、１呻　さらに、前記粒子の前記ｌＩ！ｌｌ像の的記デ
   ィスプレー８編集（エディツト）する段階を言む、特許
   請求の範囲第１４項に記載の方法。 （ｌＯ）ざらに、目視識別特性の各階級における粒子数
   を計数する段階と、前記編集段階に基つき、目視識別特
   性の各階級における粒子数を再計数する段階と、を含む
   、特許請求の範囲第１９項に記載の方法。 Ｃ？］）　前記再計数の段階がさらに、表示さ２１．た
   粒子画像の数を分母とし、前記編集段階の後に依然とし
   て表示されている粒子画像の数を分子とする分数を粒子
   数の計数に乗することを言む、特許請求の範囲第２０項
   に記載の方法。 （２り　さらに、前記合成段階に先立って前記電子画像
   の各々を処理する段階を言む、特許請求の範囲第１４項
   に記載の方法。 （ハ）さらに、前記合成手順の後で前記粒子の画像の各
   々を処理する段階を言む、特許請求の範囲第１４項に記
   載の方法。 弼　前記合成段階がさらに、目視識別特性の階級に従っ
   である順序の配列で前記粒子の複数の画像を含む合成画
   像を形成させることを言み、Ｋｌ記表示段階が前記合成
   画像を表示することを含んでいる、特許請求の範囲第１
   ４項に記載の方法。 シ５）前記合成画像が前記粒子のある階級の複数画像を
   営んでいる、特許請求の範囲第２４項に記載の方法。 シロ）前記形成段階から画像が除外される少くとも一つ
   の先験的に決めらイする粒子の階級を有して、前記合成
   画像が４ｉ数の粒子画像を営んでいる、特許請求の範囲
   第２４項に記載の方法。