JPS606360B2 - 安定化生化学的調整品及びその製法 - Google Patents
安定化生化学的調整品及びその製法Info
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明は担体上のケイ酸へテロポリ縮合物の被覆物から
なり「 この被覆物層に抗体、ホルモン等の生化学物質
を共有結合で結合させてなる安定化生化学的調整品とそ
の製法に関する。
なり「 この被覆物層に抗体、ホルモン等の生化学物質
を共有結合で結合させてなる安定化生化学的調整品とそ
の製法に関する。
固体に固定させた生化学物質はすでに公知であり「 こ
のように生化学物質を固体に固定させることは若干の利
点がある。
のように生化学物質を固体に固定させることは若干の利
点がある。
例えば酵素をこのような方法で固定させ安定にすること
も可能であり、この方法により、酵素の活性を長期にわ
たって保つことができる。一方、溶液中では酵素の活性
は比較的急速に喪失する。さらに酵素は溶液中にあるよ
りも広いｐＨ範囲及び温度範囲にわたって安定である。
同じことが免疫化学的方法に使用される抗原や抗体に対
しても応用された。他の利点として、この方法を用いる
と猿過、遠心分離、又はデカンテーションにより、反応
混合物から試薬を簡単に除去することができ、このため
、反応時間をかなり正確に制御することができる。さら
に固定物質を使用して親和力クロマトグラフィにより物
質を容易に分離することができる。生化学物質を固定す
る方法として、たとえばキヤツ（Ｃａｔｔ）らはネエイ
チヤ（雌ｔｍｅ）２１入 ８２５頁（１９６７年）の発
表論文に抗体がポリスチレンチューブに吸着される方法
を記載しており、アクセン（Ａｘｅｎ）らはネェイチヤ
２１４、１３０２頁（１９６７年）にべプチドや蛋白質
を多糖類に化学的に結合することに関する論文を公表し
ている。
も可能であり、この方法により、酵素の活性を長期にわ
たって保つことができる。一方、溶液中では酵素の活性
は比較的急速に喪失する。さらに酵素は溶液中にあるよ
りも広いｐＨ範囲及び温度範囲にわたって安定である。
同じことが免疫化学的方法に使用される抗原や抗体に対
しても応用された。他の利点として、この方法を用いる
と猿過、遠心分離、又はデカンテーションにより、反応
混合物から試薬を簡単に除去することができ、このため
、反応時間をかなり正確に制御することができる。さら
に固定物質を使用して親和力クロマトグラフィにより物
質を容易に分離することができる。生化学物質を固定す
る方法として、たとえばキヤツ（Ｃａｔｔ）らはネエイ
チヤ（雌ｔｍｅ）２１入 ８２５頁（１９６７年）の発
表論文に抗体がポリスチレンチューブに吸着される方法
を記載しており、アクセン（Ａｘｅｎ）らはネェイチヤ
２１４、１３０２頁（１９６７年）にべプチドや蛋白質
を多糖類に化学的に結合することに関する論文を公表し
ている。
１９７０主にはカゲダール（ｋａｇｅ舷１）とアカース
トローム（Ａｋｅｒｓｔｒｏｍ）はアクタケミスカンド
（ＡｃｔａＣｈｅｍＳｃａｎｄ）２も１６０１頁（１９
７０王）の分献に、生化学的に重要な分子を多糖類に生
化学的に結合させる方法を記載している。
トローム（Ａｋｅｒｓｔｒｏｍ）はアクタケミスカンド
（ＡｃｔａＣｈｅｍＳｃａｎｄ）２も１６０１頁（１９
７０王）の分献に、生化学的に重要な分子を多糖類に生
化学的に結合させる方法を記載している。
この方法で結合された分子は共有結合である。さらに米
国特許第３６５２７６１号には抗原や抗体が結合剤を介
して無機担体に共有結合する方法が記載されている。し
かしながら、これらの方法はいくつかの欠点を有してい
た。たとえばキヤツらの方法は、一旦吸着した物質が再
び脱看してしまうという欠点を有し、アクセンらの方法
やカゲダール及びアカーストロームの方法では臭化シア
ンのような毒性物質の使用を必要とした。さらに米国特
許第３６５２７６１号の方法では６２５ｑｏの高温度で
実施しなければならず、さらに使用するガラス製品は硝
酸を用いて洗浄しなければならない。
国特許第３６５２７６１号には抗原や抗体が結合剤を介
して無機担体に共有結合する方法が記載されている。し
かしながら、これらの方法はいくつかの欠点を有してい
た。たとえばキヤツらの方法は、一旦吸着した物質が再
び脱看してしまうという欠点を有し、アクセンらの方法
やカゲダール及びアカーストロームの方法では臭化シア
ンのような毒性物質の使用を必要とした。さらに米国特
許第３６５２７６１号の方法では６２５ｑｏの高温度で
実施しなければならず、さらに使用するガラス製品は硝
酸を用いて洗浄しなければならない。
本発明の目的は上記欠点を解消することにあり、特に固
体に固定させた安定性の高い生化学物質を提供すること
である。
体に固定させた安定性の高い生化学物質を提供すること
である。
このような物質は従釆のように毒性物質を用いずに容易
に製造できるものである。本発明によれば、この目的は
官能基を有するケイ酸へテロ多縮合物の有機溶剤の溶液
から機械的に安定な担体に被覆してケイ酸へテロ多縮合
物の被覆層を形成し、ケイ酸へテロ多縮合物の被覆層の
官能基と生化学物質とを反応させて固定することにより
達成される。
に製造できるものである。本発明によれば、この目的は
官能基を有するケイ酸へテロ多縮合物の有機溶剤の溶液
から機械的に安定な担体に被覆してケイ酸へテロ多縮合
物の被覆層を形成し、ケイ酸へテロ多縮合物の被覆層の
官能基と生化学物質とを反応させて固定することにより
達成される。
生化学物質として、例えば血清成分、蛋白質、酵素、抗
原、抗体及びパプテン及びホルモン、とくにアルブミン
、グロブリン、アミノ酸及び適当な置換ステロイド、免
疫グロブリン、抗体及び特に関０のあるホルモンである
。 ‐本発明は安定な不溶性の生化学調整
品に関し、生化学物質、たとえば抗原、抗体、ホルモン
、アミノ酸、パプテン、蛋白質及び酵素が機械的に安定
な挺体に被覆されたケイ酸へテロ多縮合物質に共有結合
しているものである。
原、抗体及びパプテン及びホルモン、とくにアルブミン
、グロブリン、アミノ酸及び適当な置換ステロイド、免
疫グロブリン、抗体及び特に関０のあるホルモンである
。 ‐本発明は安定な不溶性の生化学調整
品に関し、生化学物質、たとえば抗原、抗体、ホルモン
、アミノ酸、パプテン、蛋白質及び酵素が機械的に安定
な挺体に被覆されたケイ酸へテロ多縮合物質に共有結合
しているものである。
本発明はこのような生化学調整品の製造法に関し、ケイ
酸へテロ多縮合物を形成し、これを恒体に被覆してケイ
酸へテロ多縮合物の被覆層を形成し、ついでケイ酸へテ
ロ多縮合物の被覆層に生化学物質を共有結合させ、必要
により後処理することを特徴としている。
酸へテロ多縮合物を形成し、これを恒体に被覆してケイ
酸へテロ多縮合物の被覆層を形成し、ついでケイ酸へテ
ロ多縮合物の被覆層に生化学物質を共有結合させ、必要
により後処理することを特徴としている。
さらに本発明はこのような安定化生化学調整品を放射（
同位元素）標識免疫検定法又は親和力クロマトグラフイ
のような免疫化学的方法において分離剤又は吸着剤のよ
うな試薬して使用することに関するものである。
同位元素）標識免疫検定法又は親和力クロマトグラフイ
のような免疫化学的方法において分離剤又は吸着剤のよ
うな試薬して使用することに関するものである。
本発明はその具体化が技術的に簡単であり、さらに使用
する担体の性質や組成にほとんど無関係であるという利
点を有するものである。
する担体の性質や組成にほとんど無関係であるという利
点を有するものである。
本発明のケイ酸へテロ多縮合物は次に示す２成分又は３
成分を縮合することにより得ることができる。
成分を縮合することにより得ることができる。
【ａー 少なくとも１つの次の一般式に示される６０〜
９の重量％の置換シランとＳＩＲ２Ｒ′２・・・・・・
｛１１ ここでＲはエトキシ、フエニル、Ｒ′はメチル、塩素を
示す【ｂ｝ 少なくとも１つの次の一般式に示される１
〜１５重量％の官能性シランとＳＩＲ″３（Ｒ″′Ｙ）
・・・…ＯＵ ここでＲ″はメトキシ、エトキシ、Ｒ′′′はプロピル
、Ｙは−Ｎ比、一ＮＨ・Ｃ○（Ｃ６日５）ＮＨ２を示す
‘ｃ）０〜３の重量％のテトラェトキシシランとを含み
、加水分解に必要な化学量論的の水をもって縮合したケ
イ酸へテロ多額合物である。
９の重量％の置換シランとＳＩＲ２Ｒ′２・・・・・・
｛１１ ここでＲはエトキシ、フエニル、Ｒ′はメチル、塩素を
示す【ｂ｝ 少なくとも１つの次の一般式に示される１
〜１５重量％の官能性シランとＳＩＲ″３（Ｒ″′Ｙ）
・・・…ＯＵ ここでＲ″はメトキシ、エトキシ、Ｒ′′′はプロピル
、Ｙは−Ｎ比、一ＮＨ・Ｃ○（Ｃ６日５）ＮＨ２を示す
‘ｃ）０〜３の重量％のテトラェトキシシランとを含み
、加水分解に必要な化学量論的の水をもって縮合したケ
イ酸へテロ多額合物である。
適当な原料化合物としてテトラェトキシシラン（Ｃ２日
５０）４Ｓｉのほかに、ＳＩＣ１４、（ＣＨ８０）４Ｓ
ｉ、Ｓｉ（ＮＨ２）４、（ＣＨ３）２ＳＩＣ１２、（Ｃ
Ｈ３）２Ｓｉ（ ＯＣＨ３ ）２ 、（ ＣＨ３ ）２
Ｓｊ （ ＯＣ２は ）２ 、（Ｃ６日５）２ＳＩＣ１
２、（Ｃ２氏○）３Ｓｉ（ＣＨ２）３ＮＨ２、（Ｃ２Ｋ
Ｏ）３Ｓｉ（ＣＨ２）３ＣＮが使用できる。
５０）４Ｓｉのほかに、ＳＩＣ１４、（ＣＨ８０）４Ｓ
ｉ、Ｓｉ（ＮＨ２）４、（ＣＨ３）２ＳＩＣ１２、（Ｃ
Ｈ３）２Ｓｉ（ ＯＣＨ３ ）２ 、（ ＣＨ３ ）２
Ｓｊ （ ＯＣ２は ）２ 、（Ｃ６日５）２ＳＩＣ１
２、（Ｃ２氏○）３Ｓｉ（ＣＨ２）３ＮＨ２、（Ｃ２Ｋ
Ｏ）３Ｓｉ（ＣＨ２）３ＣＮが使用できる。
これら１の化合物はダブリュ、ノルのシリコーンの化学
と技術へルラーグシェミ（ＶｅｒｌａｇＣｈｅｍｉｅ．
）１９６８により製造できる。本発明によれば、各成分
を湿気のない状態で必要によりアルコール類、とくに１
から４個の炭素原子を有する低級アルコール、このまし
くはメタノールやエタノール、ケトン類とくにアルキル
ケトン、このましくはアセトン、エーテル類、とくにア
ルキルエーテル、このましくはジエチルエーテル、アミ
ド類、このまし〈はジメチルホルムアミド、これらの混
合物の有機溶剤中で混合して縮合物を製造する。
と技術へルラーグシェミ（ＶｅｒｌａｇＣｈｅｍｉｅ．
）１９６８により製造できる。本発明によれば、各成分
を湿気のない状態で必要によりアルコール類、とくに１
から４個の炭素原子を有する低級アルコール、このまし
くはメタノールやエタノール、ケトン類とくにアルキル
ケトン、このましくはアセトン、エーテル類、とくにア
ルキルエーテル、このましくはジエチルエーテル、アミ
ド類、このまし〈はジメチルホルムアミド、これらの混
合物の有機溶剤中で混合して縮合物を製造する。
プロトンもしくは水酸イオンを放出することのできる触
媒又はアミン類を含んでいる触媒を必要により同時に又
は後で加えることができる。各成分の縮合は１工程又は
数工程で行われるが、このましくは１なし、し２工程で
行われる。
媒又はアミン類を含んでいる触媒を必要により同時に又
は後で加えることができる。各成分の縮合は１工程又は
数工程で行われるが、このましくは１なし、し２工程で
行われる。
第１の場合には、各成分は１工程で完全に縮合される。
本発明の方法の具体例によれば一定量の水が必要であり
〜 また必要により触媒が最初の段階でこの反応混合物
に加えられる。第２の場合において、各成分がまづ初め
に予め縮合される。
本発明の方法の具体例によれば一定量の水が必要であり
〜 また必要により触媒が最初の段階でこの反応混合物
に加えられる。第２の場合において、各成分がまづ初め
に予め縮合される。
この縮合物はついで〜一定量の水を加えて完全に縮合さ
れる。縮合は−２０００から１３０ｏｏの温度「 この
まし〈は零度から６５００の温度、特に室温で行われる
。
れる。縮合は−２０００から１３０ｏｏの温度「 この
まし〈は零度から６５００の温度、特に室温で行われる
。
縮合反応は１分から２独特間である。縮合の時間又はむ
しろ予備縮合反応の時間は得られるケイ酸へテロ多縮合
物の層の機械的性質に影響を与える。予備縮合物又は完
全に縮合した生成物は有機溶剤に溶かした溶液をもって
担体に被覆して被覆層を形成する。このものは溶剤を揮
発させるため必要ならば真空にして単離して、残留物を
担体に被覆することもでき、縮合のために化学量論的に
必要な水を加えることができる。この縮合反応に適する
触媒は酸と〈に揮発性の酸、このましくは塩酸、水、塩
基、とくにアルカリ金属の水酸化物このましくは水酸化
ナトリウム又はァミン類、このましくは低級アルキルア
ミン類である。
しろ予備縮合反応の時間は得られるケイ酸へテロ多縮合
物の層の機械的性質に影響を与える。予備縮合物又は完
全に縮合した生成物は有機溶剤に溶かした溶液をもって
担体に被覆して被覆層を形成する。このものは溶剤を揮
発させるため必要ならば真空にして単離して、残留物を
担体に被覆することもでき、縮合のために化学量論的に
必要な水を加えることができる。この縮合反応に適する
触媒は酸と〈に揮発性の酸、このましくは塩酸、水、塩
基、とくにアルカリ金属の水酸化物このましくは水酸化
ナトリウム又はァミン類、このましくは低級アルキルア
ミン類である。
触媒の量は３％が適当である。酸触媒が用いられるとき
には縮合時間が短い方が良い。予備縮合反応は一方では
シランのトランスアルコキシレーションを伴ない、他方
ではエーテルの同時的脱離を伴い選択された反応条件に
より制御されたオリゴメリゼーションを生じる。たとえ
ば本発明の方法の具体例として予め決められた予備縮合
時間の経過後に有機溶剤に溶解されたケイ酸へテロ多縮
合物を加温して担体に被覆し、またはこの縮合物を化学
暴論量の水によるかして、担体に加溢して被覆すること
ができる。溶剤を蒸発させるとケイ酸へテロ多縮合物の
ＳｉＯＨと担体の反応性の基との間に共有結合が生じる
。被覆層は必要により水で後処理してから高い温度に加
熱するか、水で後処理しないでそのまま高い温度に加熱
することもできる。生化学物質は有機化学及び生化学の
分野で公知な方法により被覆層の官能基に結合させるこ
とができる。各成分の比率および縮合条件は得られる縮
合物の層の諸性質を決定する。加水分解性のケイ酸議導
体の比率はこの層の表面の性状、たとえば比表面積に影
響を与えるし、また置換基を有するシラン（成分‘ａ｝
）の比率は接着性に影響を与える。また官能基を有する
シラン（成分【ｂ｝）の比率は表面での結合位置の数に
影響を与えている。ケイ酸へテロ多縮合物は酸化物を基
準にして成分‘ａ｝を６０〜９の重量％「 このましく
は６５〜８５重量％よりこのまし〈は７５〜８５重量％
ト成分‘ｂ｝を１〜１５重量％、このまし〈は２〜１０
重量％〜よりこのましくは４〜８重量％及び成分‘ｃ｝
を０〜３の重量％、このまし〈は５〜２の重量、よりこ
のましくは８〜１５重量％を含んでいる。有機溶剤中の
縮合物の濃度は５〜４０％、このまし〈は１０〜３５％
、よりこのまし〈は２５〜３０％である。触媒として用
いられる水又は酸は３％までの濃度が用いられる。機械
的に安定な担体として適当なものは、強固な材料のガラ
ス、鉱石、たとえば水酸化リン灰石、又は石英、セラミ
ック、たとえば磁器、又は白色陶磁器、セラミック材料
、たとえばシャモット、金属酸化物、たとえば酸化アル
ミニウム又は酸化鉄、金属、たとえばアルミニウム、又
は鉄、木材、紙、カーボン、プラスチック、たとえばポ
リ塩化ビニル又はポリエチレン、及び有機高分子たとえ
ば繊維秦又は多糖類であり、そのなかでこのましくはガ
ラスたとえばしンズ担体、ポリケィ酸ガラス類の４・円
筒状びん（たとえば、内容積が５羽のもの）、可融性ガ
ラス（たとえば８側×７０帆）、セラミックス、金属酸
化物、金属及びプラスチックたとえばポリプロピレン及
びアクリル酸とエチレンとの英重合体である。
には縮合時間が短い方が良い。予備縮合反応は一方では
シランのトランスアルコキシレーションを伴ない、他方
ではエーテルの同時的脱離を伴い選択された反応条件に
より制御されたオリゴメリゼーションを生じる。たとえ
ば本発明の方法の具体例として予め決められた予備縮合
時間の経過後に有機溶剤に溶解されたケイ酸へテロ多縮
合物を加温して担体に被覆し、またはこの縮合物を化学
暴論量の水によるかして、担体に加溢して被覆すること
ができる。溶剤を蒸発させるとケイ酸へテロ多縮合物の
ＳｉＯＨと担体の反応性の基との間に共有結合が生じる
。被覆層は必要により水で後処理してから高い温度に加
熱するか、水で後処理しないでそのまま高い温度に加熱
することもできる。生化学物質は有機化学及び生化学の
分野で公知な方法により被覆層の官能基に結合させるこ
とができる。各成分の比率および縮合条件は得られる縮
合物の層の諸性質を決定する。加水分解性のケイ酸議導
体の比率はこの層の表面の性状、たとえば比表面積に影
響を与えるし、また置換基を有するシラン（成分‘ａ｝
）の比率は接着性に影響を与える。また官能基を有する
シラン（成分【ｂ｝）の比率は表面での結合位置の数に
影響を与えている。ケイ酸へテロ多縮合物は酸化物を基
準にして成分‘ａ｝を６０〜９の重量％「 このましく
は６５〜８５重量％よりこのまし〈は７５〜８５重量％
ト成分‘ｂ｝を１〜１５重量％、このまし〈は２〜１０
重量％〜よりこのましくは４〜８重量％及び成分‘ｃ｝
を０〜３の重量％、このまし〈は５〜２の重量、よりこ
のましくは８〜１５重量％を含んでいる。有機溶剤中の
縮合物の濃度は５〜４０％、このまし〈は１０〜３５％
、よりこのまし〈は２５〜３０％である。触媒として用
いられる水又は酸は３％までの濃度が用いられる。機械
的に安定な担体として適当なものは、強固な材料のガラ
ス、鉱石、たとえば水酸化リン灰石、又は石英、セラミ
ック、たとえば磁器、又は白色陶磁器、セラミック材料
、たとえばシャモット、金属酸化物、たとえば酸化アル
ミニウム又は酸化鉄、金属、たとえばアルミニウム、又
は鉄、木材、紙、カーボン、プラスチック、たとえばポ
リ塩化ビニル又はポリエチレン、及び有機高分子たとえ
ば繊維秦又は多糖類であり、そのなかでこのましくはガ
ラスたとえばしンズ担体、ポリケィ酸ガラス類の４・円
筒状びん（たとえば、内容積が５羽のもの）、可融性ガ
ラス（たとえば８側×７０帆）、セラミックス、金属酸
化物、金属及びプラスチックたとえばポリプロピレン及
びアクリル酸とエチレンとの英重合体である。
被覆された担体は、これを予め処理したり、化学的にき
れいにする必要がないことがわかった。
れいにする必要がないことがわかった。
このため本発明の方法は従来の方法に比較するとその工
程が一層単純になっている。縮合物を含む溶液はそのま
ま挺体に被覆されるか、この溶液に化学量論的の水を加
えた後に担体に被覆される。一般に７５力）ら１５０ｏ
ｏ、このましくは１００から１２０ｑ０に加溢して、１
８分から４８分、このましくは２０分から４０分かけて
溶剤を蒸発させると、シリコン層が架橋し担体と共有結
合する。次に示す方法は一般に適用し得る塗布法の適当
な例である：｛ａ’被覆すべき担体をケイ酸へテロ多縮
合物の有機溶剤の溶液又は予備縮合物のなかに浸し、溶
剤を蒸発させる；｛ｂ｝ ケイ酸へテロ多縮合物を含有
している有機溶剤の溶液を被覆すべき坦体に頃露し、溶
剤を蒸発する；｛ｃ｝ 容器のような担体に、ケイ酸へ
テロ多縮合物を入れて溶剤を蒸発する。
程が一層単純になっている。縮合物を含む溶液はそのま
ま挺体に被覆されるか、この溶液に化学量論的の水を加
えた後に担体に被覆される。一般に７５力）ら１５０ｏ
ｏ、このましくは１００から１２０ｑ０に加溢して、１
８分から４８分、このましくは２０分から４０分かけて
溶剤を蒸発させると、シリコン層が架橋し担体と共有結
合する。次に示す方法は一般に適用し得る塗布法の適当
な例である：｛ａ’被覆すべき担体をケイ酸へテロ多縮
合物の有機溶剤の溶液又は予備縮合物のなかに浸し、溶
剤を蒸発させる；｛ｂ｝ ケイ酸へテロ多縮合物を含有
している有機溶剤の溶液を被覆すべき坦体に頃露し、溶
剤を蒸発する；｛ｃ｝ 容器のような担体に、ケイ酸へ
テロ多縮合物を入れて溶剤を蒸発する。
ケイ酸へテロ多縮合物の被覆層を有する坦体はケイ酸へ
テロ多縮合物を完全に架橋させるために水又は水蒸気で
もつて有利に後処理される。
テロ多縮合物を完全に架橋させるために水又は水蒸気で
もつて有利に後処理される。
この水又は水蒸気の温度は４から１５０ｑｏであり、こ
の層の安定性は温度が高くなるにつれて増加する。また
後処理時間は２分から３び分がよい。沸騰水を用いて行
なう後処理ではＩＱ分から２粉ごで十分に効果がある。
この層はつぎに１００から１５０つ○の温度で５分から
３０分間（このましくは１１０から１３０ｏｏの温度で
１８分から２８分間）温度をあげて加熱しても良い。層
の厚さはその有用性に関し何ら影響を与えない。生化学
物質は有機化学及び生化学分野における公知の方法（た
とえば米国特許第３６５２７６１号に記載されている方
法）により官能基を有するケイ酸へテロ縮合物の被覆層
に共有結合することができる。
の層の安定性は温度が高くなるにつれて増加する。また
後処理時間は２分から３び分がよい。沸騰水を用いて行
なう後処理ではＩＱ分から２粉ごで十分に効果がある。
この層はつぎに１００から１５０つ○の温度で５分から
３０分間（このましくは１１０から１３０ｏｏの温度で
１８分から２８分間）温度をあげて加熱しても良い。層
の厚さはその有用性に関し何ら影響を与えない。生化学
物質は有機化学及び生化学分野における公知の方法（た
とえば米国特許第３６５２７６１号に記載されている方
法）により官能基を有するケイ酸へテロ縮合物の被覆層
に共有結合することができる。
共有結合される生化学物質とケイ酸へテロ多縮合物の層
の官能基の反応性との、ケイ酸へテロ多縮合物の層の官
能基は有機化学の公知の方法によりさらに変性される。
一般に、このケイ酸へテロ多縮合物の層を最初に誘導体
にすることが必要であり、そこで必要な物質と結合させ
る。たとえばアミン、カルボン酸、酸塩化物、チオカル
バメート、チオカルバミン酸クロリド、ジアゾ化合物、
ェステル又は硫化物のような試薬が適切に譲導体にする
のに使用できる。変性は結合反応に必要な条件により異
なり、この観劇こおいて、温度範囲、ＰＨ範囲、煤質に
ついて検討が必要である。そこでは生化学物質の活性の
不可逆的な変更又は喪失が大きく阻害され、またこれら
の物質の必要な性質がほとんど変化しないからである。
それ故、一般に生化学物質はｐＨ３から１１の水溶性媒
質のなかで室温で結合する。他方、生化学物質を非生理
的条件に余りにも長いあいださらさないために結合反応
を充分な速度で行わせるように確保することが重要であ
る。考慮すべき他の因子は固定する生化学物質の活性が
いよいよその物質の表面で結合するところのものを通し
てスベーサの長さに依存していることである。
の官能基の反応性との、ケイ酸へテロ多縮合物の層の官
能基は有機化学の公知の方法によりさらに変性される。
一般に、このケイ酸へテロ多縮合物の層を最初に誘導体
にすることが必要であり、そこで必要な物質と結合させ
る。たとえばアミン、カルボン酸、酸塩化物、チオカル
バメート、チオカルバミン酸クロリド、ジアゾ化合物、
ェステル又は硫化物のような試薬が適切に譲導体にする
のに使用できる。変性は結合反応に必要な条件により異
なり、この観劇こおいて、温度範囲、ＰＨ範囲、煤質に
ついて検討が必要である。そこでは生化学物質の活性の
不可逆的な変更又は喪失が大きく阻害され、またこれら
の物質の必要な性質がほとんど変化しないからである。
それ故、一般に生化学物質はｐＨ３から１１の水溶性媒
質のなかで室温で結合する。他方、生化学物質を非生理
的条件に余りにも長いあいださらさないために結合反応
を充分な速度で行わせるように確保することが重要であ
る。考慮すべき他の因子は固定する生化学物質の活性が
いよいよその物質の表面で結合するところのものを通し
てスベーサの長さに依存していることである。
この点から、生化学物質を被覆してのち最適の結果を与
えるケイ酸へテロ多縮合物の層を製造し、変性すること
ができる。
えるケイ酸へテロ多縮合物の層を製造し、変性すること
ができる。
ガンマーアミノプロピル基を含有している層はたとえば
約２．５％のブチルアルデヒド溶液をもって室温で３０
分から６０分間処理することにより変性できる。上記の
層のジアゾ誘導体はたとえばＰーニトロベンゾィルクロ
ラィドをその層に反応させ、さらにニトロ基を還元して
アミノ基を形成し、これを亜硝酸でジアゾ化してつくる
ことができる。ケイ酸へテロ多縮合物の被覆層が出発物
質として適当な官能基を有するシランの使用によりアニ
リノ基を含む場合にはこのものは亜硝酸を用いてただち
にジアゾ化することができる。ケイ酸へテロ多縮合物の
被覆層のアミノ基はチオホスゲンとの反応によりチオィ
ソシアネート誘導体を生じる。安定な担体に被覆したケ
イ酸へテロ多縮合物の譲導体を充分に洗浄してから、つ
づいて生化学物質を用い、適当な緩衝液たとえば酢酸塩
（ｐＨ４．０）、燐酸塩（ｐＨ７．０）、重炭酸塩（ｐ
Ｈ９．５）又はホウ酸（ｐＨ８．０）で培養する。
約２．５％のブチルアルデヒド溶液をもって室温で３０
分から６０分間処理することにより変性できる。上記の
層のジアゾ誘導体はたとえばＰーニトロベンゾィルクロ
ラィドをその層に反応させ、さらにニトロ基を還元して
アミノ基を形成し、これを亜硝酸でジアゾ化してつくる
ことができる。ケイ酸へテロ多縮合物の被覆層が出発物
質として適当な官能基を有するシランの使用によりアニ
リノ基を含む場合にはこのものは亜硝酸を用いてただち
にジアゾ化することができる。ケイ酸へテロ多縮合物の
被覆層のアミノ基はチオホスゲンとの反応によりチオィ
ソシアネート誘導体を生じる。安定な担体に被覆したケ
イ酸へテロ多縮合物の譲導体を充分に洗浄してから、つ
づいて生化学物質を用い、適当な緩衝液たとえば酢酸塩
（ｐＨ４．０）、燐酸塩（ｐＨ７．０）、重炭酸塩（ｐ
Ｈ９．５）又はホウ酸（ｐＨ８．０）で培養する。
この培養中にケイ酸へテロ多縮合物の誘導体と生化学物
質との間に共有結合ができる。この培養時間は一般に室
温で１時間から７加時間である。過剰の生化学物質を除
去したのち得られた安定な生化学物質を空気中又は真空
中で乾燥するか、初めに０．５から２％のポリビニルア
ルコール（ＰＶＡ）溶液で処理してから乾燥する。乾燥
調整品は５０ｑ０までの温度で保存することができる。
次に本発明の実施例を示す。実施例 １７．５の‘のア
セトン（純粋試薬）及び０．６の【のテトラェトキシシ
ラン（純粋試薬）を混合し、得られた混合物を空気のな
いところで保存した（溶液Ａ）。
質との間に共有結合ができる。この培養時間は一般に室
温で１時間から７加時間である。過剰の生化学物質を除
去したのち得られた安定な生化学物質を空気中又は真空
中で乾燥するか、初めに０．５から２％のポリビニルア
ルコール（ＰＶＡ）溶液で処理してから乾燥する。乾燥
調整品は５０ｑ０までの温度で保存することができる。
次に本発明の実施例を示す。実施例 １７．５の‘のア
セトン（純粋試薬）及び０．６の【のテトラェトキシシ
ラン（純粋試薬）を混合し、得られた混合物を空気のな
いところで保存した（溶液Ａ）。
同様に７．５の‘のアセトン、７．５の‘のェタノ−ル
及び０．３５の【のガンマーアミノプロピルトリェトキ
シシランを混合し、得られた混合物を空気のないところ
で保存した（溶液Ｂ）。２．５泌のアセトント２．５の
‘のエタノール及び１０の上のジメチルジェトキシシラ
ンを混合して溶液Ｃをつくり、これを空気のないところ
で保存した。
及び０．３５の【のガンマーアミノプロピルトリェトキ
シシランを混合し、得られた混合物を空気のないところ
で保存した（溶液Ｂ）。２．５泌のアセトント２．５の
‘のエタノール及び１０の上のジメチルジェトキシシラ
ンを混合して溶液Ｃをつくり、これを空気のないところ
で保存した。
予備縮合のために、等容量の溶液Ａ、Ｂ及びＣを混合し
（溶液Ｍと称す）、空気のないところで室温で２．斑時
間反応した。
（溶液Ｍと称す）、空気のないところで室温で２．斑時
間反応した。
０．２肌の量の予備縮合物を小さなガラス製のびん（「
フイオラツクス」（Ｆｉｏｌａｘ）透明ガラス４０×１
５肌）に入れ、１５仏その蒸留水を加えた。
フイオラツクス」（Ｆｉｏｌａｘ）透明ガラス４０×１
５肌）に入れ、１５仏その蒸留水を加えた。
びんは反応器のなかで、１２０午○、３０分間（＆ｐｍ
）回転した。このようにして被覆したびんはそこで蒸留
水を使用して１５分間ゆすぎ１５０ｑ０で乾燥した。室
温に１幼時間静遣した被覆びんに２の‘の２．５％のグ
ルタルアルデヒド水溶液を入れて、そこで水で洗浄した
。グルタルアルデヒドは、生化学物質をケイ酸へテロ多
縮合物層に固定するために加えられる。アル、ディ．へ
シェ（Ｒ．Ｄ．Ｈｅａｃｈ）及びェム。フープネ（Ｍ．
Ｈｕｂｎｅ）によるＡｃｔａｂｉｏｌ．ｍｅｄ．鉾ｒｍ
２８８６１（１９７２）にしたがってつくられたトリョ
ードチロニン（Ｔ３）に対するラビット抗血清を燐酸塩
緩衝液（ｐＨ７．７）（希釈度１：５００００）のなか
に加え、つづいて室温で１独特間培養した。溶液は吸引
猿過し、燐酸塩緩衝液（ｐＨ７．７）（希釈度１；２５
０００）のなかの正規のラビット血清で置換し、室温で
１時間培養した。溶液は除去され、つづいて水で洗浄し
た。トリョードチロニン抗体で被覆されたびんは放射（
同位元素）標識検定を行った。標準血清１００の【のな
かに０、５０、１００「２００、４００、８０仇夕のト
リョードチロニンを含有するところの標準血清の１００
一その量と１柵の１２５１ートリョードチロニンとがそ
れぞれ別々のびんのなかに加えられた。室温で２時間静
贋後、溶液は吸引猿過し、個々のびんの残存放射能が測
定された。標準血清１００の‘のなかに仇夕のトリョー
ドチロニンを含んだびんは１２５１−トリョードチロニ
ンに対する結合レベルとして劫／Ｔ３４．２％を有する
ことがわかった。ここで軌はゼロ状態の場合の残存放射
能、Ｂは本願の血清又は標準の場合の残存放射能、Ｔは
各ガラスびんのなかの全一放射能を示す。さらに残存放
射能はｃｐｍ（ｃｏ血はｐｅｒｍｉｎｕｔｅ）としてガ
ラスびんの表面の抗体に結合している部分の免疫反応の
完結及び分離後に決定されるものである。上記標準液を
含有するびんの残存はゼロの標準液の残存放射能を基準
にして次の通りであった；５仇夕／１００叫についてＢ
／Ｂｏ＝７４．７％、１０仇夕／１００似についてＢ／
Ｂｏ＝斑．５％、２０仇タノ１００の‘についてＢ／Ｂ
ｏ＝５２．７％、４０皿夕／１００叫についてＢ／Ｂｏ
＝３７．０％、８０仇夕／１００舷についてＢ／Ｂｏ＝
２６．４％。
）回転した。このようにして被覆したびんはそこで蒸留
水を使用して１５分間ゆすぎ１５０ｑ０で乾燥した。室
温に１幼時間静遣した被覆びんに２の‘の２．５％のグ
ルタルアルデヒド水溶液を入れて、そこで水で洗浄した
。グルタルアルデヒドは、生化学物質をケイ酸へテロ多
縮合物層に固定するために加えられる。アル、ディ．へ
シェ（Ｒ．Ｄ．Ｈｅａｃｈ）及びェム。フープネ（Ｍ．
Ｈｕｂｎｅ）によるＡｃｔａｂｉｏｌ．ｍｅｄ．鉾ｒｍ
２８８６１（１９７２）にしたがってつくられたトリョ
ードチロニン（Ｔ３）に対するラビット抗血清を燐酸塩
緩衝液（ｐＨ７．７）（希釈度１：５００００）のなか
に加え、つづいて室温で１独特間培養した。溶液は吸引
猿過し、燐酸塩緩衝液（ｐＨ７．７）（希釈度１；２５
０００）のなかの正規のラビット血清で置換し、室温で
１時間培養した。溶液は除去され、つづいて水で洗浄し
た。トリョードチロニン抗体で被覆されたびんは放射（
同位元素）標識検定を行った。標準血清１００の【のな
かに０、５０、１００「２００、４００、８０仇夕のト
リョードチロニンを含有するところの標準血清の１００
一その量と１柵の１２５１ートリョードチロニンとがそ
れぞれ別々のびんのなかに加えられた。室温で２時間静
贋後、溶液は吸引猿過し、個々のびんの残存放射能が測
定された。標準血清１００の‘のなかに仇夕のトリョー
ドチロニンを含んだびんは１２５１−トリョードチロニ
ンに対する結合レベルとして劫／Ｔ３４．２％を有する
ことがわかった。ここで軌はゼロ状態の場合の残存放射
能、Ｂは本願の血清又は標準の場合の残存放射能、Ｔは
各ガラスびんのなかの全一放射能を示す。さらに残存放
射能はｃｐｍ（ｃｏ血はｐｅｒｍｉｎｕｔｅ）としてガ
ラスびんの表面の抗体に結合している部分の免疫反応の
完結及び分離後に決定されるものである。上記標準液を
含有するびんの残存はゼロの標準液の残存放射能を基準
にして次の通りであった；５仇夕／１００叫についてＢ
／Ｂｏ＝７４．７％、１０仇夕／１００似についてＢ／
Ｂｏ＝斑．５％、２０仇タノ１００の‘についてＢ／Ｂ
ｏ＝５２．７％、４０皿夕／１００叫についてＢ／Ｂｏ
＝３７．０％、８０仇夕／１００舷についてＢ／Ｂｏ＝
２６．４％。
実施例 ２溶液Ａ、Ｂ、Ｃ及び混合溶液Ｍは実施例１と
同様にしてつくった。
同様にしてつくった。
しかし、０．１の【の０．１ＮのＨＣＩを５の‘の溶液
Ｍに加え、つついて室温で、７分間予備縮合した。被覆
は０．２凧【の量を小さいガラスびん０フイオラツクス
」透明ガラス）に加え、さらに１５仏その水を加えた。
被覆層は実施例１の場合と同機にして行なった。このよ
うにして処理したびんを２．５％のグルタルアルデヒド
溶液を用い、０．１Ｍの酢酸塩緩衝液（ｐＨ４．０）の
なかで１２時間処理し、ついで抗血清Ｔ３（希釈度１；
５００００）を用い、０．１Ｍの酢酸塩緩衝液（ｐＨ４
．０）のなかで処理し、最後にラビット血清（希釈度１
；２５０００）を用い酢酸塩緩衝液（ｐＨ４．０）のな
かで処理した。
Ｍに加え、つついて室温で、７分間予備縮合した。被覆
は０．２凧【の量を小さいガラスびん０フイオラツクス
」透明ガラス）に加え、さらに１５仏その水を加えた。
被覆層は実施例１の場合と同機にして行なった。このよ
うにして処理したびんを２．５％のグルタルアルデヒド
溶液を用い、０．１Ｍの酢酸塩緩衝液（ｐＨ４．０）の
なかで１２時間処理し、ついで抗血清Ｔ３（希釈度１；
５００００）を用い、０．１Ｍの酢酸塩緩衝液（ｐＨ４
．０）のなかで処理し、最後にラビット血清（希釈度１
；２５０００）を用い酢酸塩緩衝液（ｐＨ４．０）のな
かで処理した。
機能テストを実施例１と同様にして実施したところ結合
レベルＢｏ／Ｔは２７％の値を示した。実施例 ３ 各成分を混合して次の出発溶液をつくり、湿気のないと
ころで貯蔵した。
レベルＢｏ／Ｔは２７％の値を示した。実施例 ３ 各成分を混合して次の出発溶液をつくり、湿気のないと
ころで貯蔵した。
溶液Ｄ：７．５の‘のアセトン、７．５の‘のエタノー
ル及び１．２叫のテトラヱトキシシラン：溶液Ｅ：７．
５机のアセトン、７．５の‘のエタノール及び０．７机
上のガンマーアミノプロピルトリエトキシシラン：溶液
Ｃ：２．５の【のアセトン、２．５の‘のエタノール及
び１０の【のジメチルジエトキシシラン等容量の溶液Ｃ
、Ｄ及びＥを混合し（溶液Ｎと称す）、これを室温で２
時間予備縮合した。
ル及び１．２叫のテトラヱトキシシラン：溶液Ｅ：７．
５机のアセトン、７．５の‘のエタノール及び０．７机
上のガンマーアミノプロピルトリエトキシシラン：溶液
Ｃ：２．５の【のアセトン、２．５の‘のエタノール及
び１０の【のジメチルジエトキシシラン等容量の溶液Ｃ
、Ｄ及びＥを混合し（溶液Ｎと称す）、これを室温で２
時間予備縮合した。
０．２の‘の予備縮合物をＭｅｓｓｎ．Ｓｃｈｏｔｔ＆
戊ｎにより製造された可融性ガラス容器（８×７仇松）
のなかに加えた。
戊ｎにより製造された可融性ガラス容器（８×７仇松）
のなかに加えた。
処理は実施例１に示したように行った。この容器を２．
５％のグルタルアルデヒド水溶液を用いて１時間処理し
てから洗浄し、抗血清Ｔ３（希釈度１：５００００）を
用い、０．１Ｍ燐酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）のなかで室
温で１幼時間培養して、洗浄し「１％の牛肉血清ァルブ
ミン（既Ａ）を用い、０．１Ｍの燐酸塩緩衝液（冊７．
４）のなかで３０分間処理してから洗浄し、実施例１と
同じ方法で１２５１−トリョードチロニン（１歯１−Ｔ
３）を用いて試験した。結合レベルＢｏノＴが２９．５
％の値を得た。実施例 ４ 実施例３の予備縮合物の０．２の上を可融性ガラス容器
（８×７仇肋）に入れ、ついで２０Ａその水を加えた。
５％のグルタルアルデヒド水溶液を用いて１時間処理し
てから洗浄し、抗血清Ｔ３（希釈度１：５００００）を
用い、０．１Ｍ燐酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）のなかで室
温で１幼時間培養して、洗浄し「１％の牛肉血清ァルブ
ミン（既Ａ）を用い、０．１Ｍの燐酸塩緩衝液（冊７．
４）のなかで３０分間処理してから洗浄し、実施例１と
同じ方法で１２５１−トリョードチロニン（１歯１−Ｔ
３）を用いて試験した。結合レベルＢｏノＴが２９．５
％の値を得た。実施例 ４ 実施例３の予備縮合物の０．２の上を可融性ガラス容器
（８×７仇肋）に入れ、ついで２０Ａその水を加えた。
実施例１と同じように被覆した。この容器を２．５％の
グルタルアルデヒド溶液を用い室温で３雌ご間培養し、
洗浄した。ついで抗血清Ｔ３（希釈度１：５００００）
を用い、０．１Ｍの燐酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）のなか
で室温で４時間処理して洗浄した。ついで１％のＢＳＡ
を用い０．１Ｍの燐酸塩緩衝液（ＰＨ７．４）のなかで
３雌｝間静直し、その後洗浄し、実施例１と同じ方法で
放射（同位元素）標織免疫検定に用いた。結合レベル＆
／Ｔの２１％が得られた。実施例 ５ ０．１の上の０．１Ｎ塩酸を５泌の溶液Ｎ（実施例３）
に加え、ついで空気のないところで室温で７分間予備縮
合した。
グルタルアルデヒド溶液を用い室温で３雌ご間培養し、
洗浄した。ついで抗血清Ｔ３（希釈度１：５００００）
を用い、０．１Ｍの燐酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）のなか
で室温で４時間処理して洗浄した。ついで１％のＢＳＡ
を用い０．１Ｍの燐酸塩緩衝液（ＰＨ７．４）のなかで
３雌｝間静直し、その後洗浄し、実施例１と同じ方法で
放射（同位元素）標織免疫検定に用いた。結合レベル＆
／Ｔの２１％が得られた。実施例 ５ ０．１の上の０．１Ｎ塩酸を５泌の溶液Ｎ（実施例３）
に加え、ついで空気のないところで室温で７分間予備縮
合した。
ついで、０．２柵の予備縮合物を小さなガラスびん（「
フィオラツクス」透明ガラス４０×１５肋）に入れた。
実施例１と同様にして被覆した。このびんを２．５％の
グルタルアルデヒドを用い室温で１時間処理したのち洗
浄し、抗血清Ｔ３（希釈度１：５００００）を用い、０
．１Ｍの燐酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）のなかで室温で１
幼時間培養し、洗浄した。
フィオラツクス」透明ガラス４０×１５肋）に入れた。
実施例１と同様にして被覆した。このびんを２．５％の
グルタルアルデヒドを用い室温で１時間処理したのち洗
浄し、抗血清Ｔ３（希釈度１：５００００）を用い、０
．１Ｍの燐酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）のなかで室温で１
幼時間培養し、洗浄した。
ついで０．０１％の既Ａを用い０．１Ｍの燐酸塩緩衝液
（ｐＨ７．４）のなかで３０分間処理してから洗浄し、
空気中で乾燥した。被覆物を実施例１と同じようにして
試験し、結合レベル軌／Ｔ３１％を得た。
（ｐＨ７．４）のなかで３０分間処理してから洗浄し、
空気中で乾燥した。被覆物を実施例１と同じようにして
試験し、結合レベル軌／Ｔ３１％を得た。
実施例 ６
実施例５に用いたガラスびんをトリプチルアミンとパラ
ーニトロベンジルクロライドの１０％クロルホルム溶液
を用い６０００で２時間培養し、クロロホルムで洗浄し
、５％の亜ジチオン酸ナトリウム（Ｓｏｄｉｕｍｄｉｔ
ｈｉｏｎｉｔｅ）水溶液で１時間沸騰し、水で洗浄し、
州の塩酸のなかで１％の亜硝酸ナトリウム溶液を用いて
０℃で１０分間処理し、ついで氷冷水を用いて充分に洗
浄した。
ーニトロベンジルクロライドの１０％クロルホルム溶液
を用い６０００で２時間培養し、クロロホルムで洗浄し
、５％の亜ジチオン酸ナトリウム（Ｓｏｄｉｕｍｄｉｔ
ｈｉｏｎｉｔｅ）水溶液で１時間沸騰し、水で洗浄し、
州の塩酸のなかで１％の亜硝酸ナトリウム溶液を用いて
０℃で１０分間処理し、ついで氷冷水を用いて充分に洗
浄した。
抗血清Ｔ３（希釈度１：５００００）はケイ酸へテロ多
縮合物の層のジアゾ基に０．０９ Ｍの重炭酸ナトリウ
ム緩衝液（ｐＨ９．６）のなかで室温で１幼時間培養す
ることにより結合させた。これを次いで０．１Ｍの燐酸
塩緩衝液（ＰＨ７．４）のなかで０．０１％の斑Ａを用
い３０分間処理した。びんを実施例１に従って放射（同
位元素）標識免疫検定に使用した。結合レベルＢｏ／Ｔ
が４７．８％の値を得た。各標準液の試験結果は次の通
りであった。５仇夕／１００机についてはＢ／Ｂｏ値は
７９．０％であり、１０仇タノ１００の‘についてはＢ
／則値は６０．３％、２０仇夕／１００机‘については
Ｂ／Ｂｏ値は３７．５％、４０血タ／１００机‘につい
てはＢ／耽値は２５７％、８０仇夕／１００の‘につい
てはＢ／Ｂｏ値は１４．１％であった。
縮合物の層のジアゾ基に０．０９ Ｍの重炭酸ナトリウ
ム緩衝液（ｐＨ９．６）のなかで室温で１幼時間培養す
ることにより結合させた。これを次いで０．１Ｍの燐酸
塩緩衝液（ＰＨ７．４）のなかで０．０１％の斑Ａを用
い３０分間処理した。びんを実施例１に従って放射（同
位元素）標識免疫検定に使用した。結合レベルＢｏ／Ｔ
が４７．８％の値を得た。各標準液の試験結果は次の通
りであった。５仇夕／１００机についてはＢ／Ｂｏ値は
７９．０％であり、１０仇タノ１００の‘についてはＢ
／則値は６０．３％、２０仇夕／１００机‘については
Ｂ／Ｂｏ値は３７．５％、４０血タ／１００机‘につい
てはＢ／耽値は２５７％、８０仇夕／１００の‘につい
てはＢ／Ｂｏ値は１４．１％であった。
実施例 ７
実施例５のガラスびんを１％のテレフタルアルデヒド（
ｔｅｒｅｐｈｔｈａｌａｉｄｅｈｙｄｅ）水溶液を用い
、６０〜８０００で水浴中で２時間処理し、水で洗浄し
た。
ｔｅｒｅｐｈｔｈａｌａｉｄｅｈｙｄｅ）水溶液を用い
、６０〜８０００で水浴中で２時間処理し、水で洗浄し
た。
抗血清Ｔ３（希釈度１；５００００）を用い燐酸塩緩衝
液（ｐＨ６．４）のなかで室温で１幼時間培養し、洗浄
した。０．０１％のＢＳＡを用い０．１Ｍの燐酸塩緩衝
液のなかで３０分間処理し、０．０１％のナトリウムア
ジドと１％のポリビニルアルコール（ＰＶＡ）を含有す
る０．０１Ｍの燐酸塩緩衝液を用いてゆすぎ、真空中室
温で乾燥した。
液（ｐＨ６．４）のなかで室温で１幼時間培養し、洗浄
した。０．０１％のＢＳＡを用い０．１Ｍの燐酸塩緩衝
液のなかで３０分間処理し、０．０１％のナトリウムア
ジドと１％のポリビニルアルコール（ＰＶＡ）を含有す
る０．０１Ｍの燐酸塩緩衝液を用いてゆすぎ、真空中室
温で乾燥した。
実施例１と同様な機能試験を行ない結合レベルの則ノＴ
３３．９％の値を得た。実施例 ８グルタルアルデヒド
の２．５％水溶液を用いて実施例５のガラスびんを室温
で４時間処理し、洗浄した。
３３．９％の値を得た。実施例 ８グルタルアルデヒド
の２．５％水溶液を用いて実施例５のガラスびんを室温
で４時間処理し、洗浄した。
Ｊ．Ｌ．Ｖａｉｔ血ａｉｔｉｓらのＪ．ＣＩｉｎ．Ｅｎ
ｄｏｃｒ．Ｍｅｔａｂ、３３１０４９（１９７１）によ
り製造され、Ｊ．Ｓ．ＢａｕｍｓｔａｒｋらのＡｒｃｈ
．Ｂｊｏｃｈｅｍ．Ｂｊｏｐｈｙｓ、１０８、５１４（
１９６４）の方法により濃縮したヒトの甲状線刺戟 ホ
ル モ ン（ｈＴＳＨ ｈｍｍａｎ ｔｈｙｒｏｉｄ
ｓｔｉｍ山ａｔｉｎｇｈｏｒｍｏｎｅ以下省略してＴＳ
Ｈと称す）に対する免疫グロプリンを０．１Ｍの燐酸塩
緩衝液のなかで１幼時間培養し、洗浄した。０．０１％
のＢＳＡを０．１Ｍの燐酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）のな
かに用いて３０分間処理した。
ｄｏｃｒ．Ｍｅｔａｂ、３３１０４９（１９７１）によ
り製造され、Ｊ．Ｓ．ＢａｕｍｓｔａｒｋらのＡｒｃｈ
．Ｂｊｏｃｈｅｍ．Ｂｊｏｐｈｙｓ、１０８、５１４（
１９６４）の方法により濃縮したヒトの甲状線刺戟 ホ
ル モ ン（ｈＴＳＨ ｈｍｍａｎ ｔｈｙｒｏｉｄ
ｓｔｉｍ山ａｔｉｎｇｈｏｒｍｏｎｅ以下省略してＴＳ
Ｈと称す）に対する免疫グロプリンを０．１Ｍの燐酸塩
緩衝液のなかで１幼時間培養し、洗浄した。０．０１％
のＢＳＡを０．１Ｍの燐酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）のな
かに用いて３０分間処理した。
ついで０．０１％のナトリウムアジドと１％のＰＶＡを
用いて０．０１Ｍの燐酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）のなか
でゆすぎ乾燥した。抗体ＴＳＨで被覆したガラスびんを
１２５１−ＴＳＨを用いて放射（同位元素）標識免疫検
定を行い結合レベルＢｏ／Ｔの値５６．８％を得た。実
施例 ９ 実施例６によりジアゾ化したガラスぴんをＴＳＨ（希釈
度１：１００００）に対する免疫グロプリンを０．１Ｍ
の炭酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．４）のなかで用いて
１幼時間培養し、洗浄し０．０１％の牛肉血清ァルブミ
ン（ＲＳＡ）を燐酸塩緩衝液（母７．４）のなかに加え
たものを用いて３０分間処理した。
用いて０．０１Ｍの燐酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）のなか
でゆすぎ乾燥した。抗体ＴＳＨで被覆したガラスびんを
１２５１−ＴＳＨを用いて放射（同位元素）標識免疫検
定を行い結合レベルＢｏ／Ｔの値５６．８％を得た。実
施例 ９ 実施例６によりジアゾ化したガラスぴんをＴＳＨ（希釈
度１：１００００）に対する免疫グロプリンを０．１Ｍ
の炭酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．４）のなかで用いて
１幼時間培養し、洗浄し０．０１％の牛肉血清ァルブミ
ン（ＲＳＡ）を燐酸塩緩衝液（母７．４）のなかに加え
たものを用いて３０分間処理した。
つづいて０．０１％のナトリウムアジドと１％のＰＶＡ
と０．０１Ｍの燐酸塩緩衝液（ｐＨ７。４）とのなかで
ゆすぎ、乾燥した。
と０．０１Ｍの燐酸塩緩衝液（ｐＨ７。４）とのなかで
ゆすぎ、乾燥した。
実施例８と同じ方法で機能試験をして結合レベル＆／Ｔ
の６４．４％の値を得た。実施例 １０１．５Ｍのジフ
エニルジクロロシランを３．５泌のエタノールと混合し
た（溶液Ｆと称す）。
の６４．４％の値を得た。実施例 １０１．５Ｍのジフ
エニルジクロロシランを３．５泌のエタノールと混合し
た（溶液Ｆと称す）。
等容量の実施例３で示した溶液Ｄ、Ｅ及び溶液Ｆとを混
合した（これを溶液Ｇと称す）。ついで空気のないとこ
ろで室温で２時間予備縮合した。０．２の‘の予備縮合
物を小さなガラスぴんびフィオラックス」透明ガラス）
に入れ、ついで１５山その水を加えた。
合した（これを溶液Ｇと称す）。ついで空気のないとこ
ろで室温で２時間予備縮合した。０．２の‘の予備縮合
物を小さなガラスぴんびフィオラックス」透明ガラス）
に入れ、ついで１５山その水を加えた。
実施例１と同じ方法で被覆した。実施例６によりジアゾ
化したガラスびんを抗血清Ｔ３（希釈度１：５００００
）の０．１Ｍ炭酸ナトリウム緩衝液を用いて１錨時間培
養し、洗浄し、つづいて燐酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）の
なかの０．０１％のＢＳＡを用いて３び分間処理し、０
．０１Ｍの燐酸塩（ｐＨ７．４）のなかの０．０１％の
ナトリウムアジドと１％のＰＶＡを用いてゆすぎ、乾燥
した。実施例１の機能試験を行ない結合レベル舷／Ｔの
３４．３％の値を得た。実施例 １１実施例３のテトラ
ェトキシシランーアセトン−エタノールの溶液Ｄ、ガン
マーアミノプロピルトリェトキシシランーアセトンーェ
タノールの溶液Ｅと実施例１０のジフェニルジクロロシ
ランーェタノールの溶液Ｆを混合し、空気のないところ
で室温で２４時間予備縮合した。
化したガラスびんを抗血清Ｔ３（希釈度１：５００００
）の０．１Ｍ炭酸ナトリウム緩衝液を用いて１錨時間培
養し、洗浄し、つづいて燐酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）の
なかの０．０１％のＢＳＡを用いて３び分間処理し、０
．０１Ｍの燐酸塩（ｐＨ７．４）のなかの０．０１％の
ナトリウムアジドと１％のＰＶＡを用いてゆすぎ、乾燥
した。実施例１の機能試験を行ない結合レベル舷／Ｔの
３４．３％の値を得た。実施例 １１実施例３のテトラ
ェトキシシランーアセトン−エタノールの溶液Ｄ、ガン
マーアミノプロピルトリェトキシシランーアセトンーェ
タノールの溶液Ｅと実施例１０のジフェニルジクロロシ
ランーェタノールの溶液Ｆを混合し、空気のないところ
で室温で２４時間予備縮合した。
ついで実施例１０に記載した方法でこのびんの表面に抗
血清Ｔ３を結合させた。さらに機能試験を行なって結合
レベル欧／Ｔの２４．１％の値を得た。実施例 １２ 実施例１０に示した５ｍ‘の混合溶液Ｇに１の‘の水を
加えて２時間予備縮合を行った。
血清Ｔ３を結合させた。さらに機能試験を行なって結合
レベル欧／Ｔの２４．１％の値を得た。実施例 １２ 実施例１０に示した５ｍ‘の混合溶液Ｇに１の‘の水を
加えて２時間予備縮合を行った。
実施例１１の場合よりも水を加えた点が異なる。沈澱し
た高分子を猿過して除去し、溶剤を真空蒸留により除去
した。残った白色粉末を空気のないところで保存した。
０．１夕のこの高分子を５０机のアセトンに溶かした。
た高分子を猿過して除去し、溶剤を真空蒸留により除去
した。残った白色粉末を空気のないところで保存した。
０．１夕のこの高分子を５０机のアセトンに溶かした。
このアセトン溶液０．１私を小さなガラスびん（「フィ
オラツクス」透明ガラス）に入れた。実施例１に記載し
た方法で被覆物をつくった。実施例１０に記載した方法
でこのびんの表面に抗血清Ｔ３を結合させた。実施例１
に記載した機能試験を行ない、結合レベル敗／Ｔ３０％
の値を得た。実施例 １３実施例１２の高分子アセトン
溶液の１叫をエチレンとアクリル酸との共重合体（９２
：８）からつくられたプラスチック容器のなかに入れ、
２現砂後この溶液を再び外にだし、プラスチック容器を
乾燥した。
オラツクス」透明ガラス）に入れた。実施例１に記載し
た方法で被覆物をつくった。実施例１０に記載した方法
でこのびんの表面に抗血清Ｔ３を結合させた。実施例１
に記載した機能試験を行ない、結合レベル敗／Ｔ３０％
の値を得た。実施例 １３実施例１２の高分子アセトン
溶液の１叫をエチレンとアクリル酸との共重合体（９２
：８）からつくられたプラスチック容器のなかに入れ、
２現砂後この溶液を再び外にだし、プラスチック容器を
乾燥した。
これらの容器を０．１Ｍの燐酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）
のなかの１％のグルタルアルデヒドを用いて３０分間処
理し、洗い０．１Ｍの燐酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）のな
かの抗血清Ｔ３（希釈度１；１００００）を用いて２時
間処理し、０．１Ｍの燐酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）のな
かの０．１％のＢＳＡを用いて３０分間ゆすぎ乾燥した
。
のなかの１％のグルタルアルデヒドを用いて３０分間処
理し、洗い０．１Ｍの燐酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）のな
かの抗血清Ｔ３（希釈度１；１００００）を用いて２時
間処理し、０．１Ｍの燐酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）のな
かの０．１％のＢＳＡを用いて３０分間ゆすぎ乾燥した
。
実施例１の方法で機能試験を行ない、結合レベル故／Ｔ
の２７％の値を得た。実施例 １４ 実施例１２の高分子アセトン溶液１肌を小さなガラスび
んびフイオラツクス」透明ガラス４０×１５肋）に入れ
た。
の２７％の値を得た。実施例 １４ 実施例１２の高分子アセトン溶液１肌を小さなガラスび
んびフイオラツクス」透明ガラス４０×１５肋）に入れ
た。
２鼠砂後にこの溶液を外に出し、ガラス壁に付着してい
る層を１５０００で１５分間加熱して乾燥した。
る層を１５０００で１５分間加熱して乾燥した。
実施例１０と同様にしてこのびんの表面に抗血清Ｔ３を
結合させた。実施例１と同じ機能試験を行ない結合レベ
ルＢｏノＴの３０％の値を得た。実施例 １５ エタノールーアセトンのなかの（ＣＨ３０）３Ｓｉ−Ｃ
比ＣＨ２一ＣＨ２−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ６は）ＮＨ２の０
．０１Ｍ溶液を実施例３の溶液Ｃのジメチルジェトキシ
シランの代りに用いた。
結合させた。実施例１と同じ機能試験を行ない結合レベ
ルＢｏノＴの３０％の値を得た。実施例 １５ エタノールーアセトンのなかの（ＣＨ３０）３Ｓｉ−Ｃ
比ＣＨ２一ＣＨ２−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ６は）ＮＨ２の０
．０１Ｍ溶液を実施例３の溶液Ｃのジメチルジェトキシ
シランの代りに用いた。
これとアセトンーェタノール一テトラェトキシシランの
溶液Ｄとアセトンーエタノール−ガンマーアミノプロピ
ルトリエノキシシランの溶液Ｅとを混合し、室温で２時
間予備縮合した。小さなガラスびん０フィオラックス」
透明ガラス）に予備縮合物を加えてガラスびんの内壁に
予備縮合物の層を被覆した。このガラスびんを小の塩酸
のなかで１％の函硝酸ナトリウムを用いて０℃で１０分
間処理し、そののち充分に洗浄し、ついで０．１Ｍの重
炭酸ナトリウム緩衝液（ＦＨ８．４）のなかの抗血清Ｔ
３（希釈度１；５００００）を用いて１幼時間培養した
。洗浄し、０．１Ｍの燐酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）のな
かの０．０１％のＢＳＡで３０分間処理し、０．０１Ｍ
の燐酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）のなかの０．０１％のナ
トリウムアジドと１％のＰＶＡを用いてゆすぎ乾燥した
。実施例１の機能試験を行ない結合レベル＆／Ｔ２４．
８％の値を得た。実施例 １６ アセトン−エタノール一テトラエトキシシランの溶液Ｄ
、アセトンーェタノールーガンマーアミノプロピルトリ
ェトキシシランの溶液Ｅ、アセトンーェタノール−ジメ
チルジェトキシシランの溶液Ｃとを混合し、０．１の‘
の０．１Ｎの塩酸を５泌加えて空気のないところで７分
間予備縮合した。
溶液Ｄとアセトンーエタノール−ガンマーアミノプロピ
ルトリエノキシシランの溶液Ｅとを混合し、室温で２時
間予備縮合した。小さなガラスびん０フィオラックス」
透明ガラス）に予備縮合物を加えてガラスびんの内壁に
予備縮合物の層を被覆した。このガラスびんを小の塩酸
のなかで１％の函硝酸ナトリウムを用いて０℃で１０分
間処理し、そののち充分に洗浄し、ついで０．１Ｍの重
炭酸ナトリウム緩衝液（ＦＨ８．４）のなかの抗血清Ｔ
３（希釈度１；５００００）を用いて１幼時間培養した
。洗浄し、０．１Ｍの燐酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）のな
かの０．０１％のＢＳＡで３０分間処理し、０．０１Ｍ
の燐酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）のなかの０．０１％のナ
トリウムアジドと１％のＰＶＡを用いてゆすぎ乾燥した
。実施例１の機能試験を行ない結合レベル＆／Ｔ２４．
８％の値を得た。実施例 １６ アセトン−エタノール一テトラエトキシシランの溶液Ｄ
、アセトンーェタノールーガンマーアミノプロピルトリ
ェトキシシランの溶液Ｅ、アセトンーェタノール−ジメ
チルジェトキシシランの溶液Ｃとを混合し、０．１の‘
の０．１Ｎの塩酸を５泌加えて空気のないところで７分
間予備縮合した。
この予備縮合物を小さなガラスびんに入れてガラスびん
の内壁に予備縮合物の層を被覆した。そののちトリブチ
ルアミンとＰ−ニトロベンジルクロイドのクロルホルム
溶液を用いて実施例６のように処理した。２．５％のグ
ルタルアルデヒド水溶液を用いてガラスびんを１時間処
理したのち水で２回洗浄した。
の内壁に予備縮合物の層を被覆した。そののちトリブチ
ルアミンとＰ−ニトロベンジルクロイドのクロルホルム
溶液を用いて実施例６のように処理した。２．５％のグ
ルタルアルデヒド水溶液を用いてガラスびんを１時間処
理したのち水で２回洗浄した。
これらのびんについて、１の‘の燐酸塩緩衝液（ｐＨ７
．４）のなかに６．別夕の１２５１−トリョードチロニ
ン（６６９６４６比ｐｍ、スベシフイツクアクテイビテ
イ１１１３ｍＣｉ／雌；ここでＣｐｍはＣｏｕｎｔｐｅ
ｒｍｉｎｉにであり、ｍＣｉはマイクロキュリーである
。）を用いて培養した。トリョードチロニン（Ｔ３）の
７７％が２時間後に結合した。３時間後に７９％が、４
時間後に８１％が、１被時間後に９７％が結合した。
．４）のなかに６．別夕の１２５１−トリョードチロニ
ン（６６９６４６比ｐｍ、スベシフイツクアクテイビテ
イ１１１３ｍＣｉ／雌；ここでＣｐｍはＣｏｕｎｔｐｅ
ｒｍｉｎｉにであり、ｍＣｉはマイクロキュリーである
。）を用いて培養した。トリョードチロニン（Ｔ３）の
７７％が２時間後に結合した。３時間後に７９％が、４
時間後に８１％が、１被時間後に９７％が結合した。
０．１Ｍのグリシン緩衝液（ｐＨ２．３）を用いて３０
分間洗浄し、吸着結合したホルモンを除去したトリョー
ドチロニン（Ｔ３）５．別のこ相当する８４％のホルモ
ンがびんに共有結合した。
分間洗浄し、吸着結合したホルモンを除去したトリョー
ドチロニン（Ｔ３）５．別のこ相当する８４％のホルモ
ンがびんに共有結合した。
実施例 １７
実施例１６により処理したびんを８の９の１医１ーチロ
キシン（Ｔ４）（６３１２７０比ｐｍ、スベシフイクア
クティビティ９２７ｍＣｉ′の９）を用いて培養した。
キシン（Ｔ４）（６３１２７０比ｐｍ、スベシフイクア
クティビティ９２７ｍＣｉ′の９）を用いて培養した。
２時間後の結合レベルは５５％にまた４時間後の結合レ
ベルは６０％に、１幼時間後の結合レベルは６９％に達
した。洗浄ののちチロキシン（Ｔ４）の４．５の２に相
当する５６％、３１５８４１比ｐｍがびんに共有結合し
て残った。実施例 １８ 実施例１６により処理したびんを１７の９の位５１一ｈ
ＴＳＨ（１９４３１１１ｃｐｍスベシフイクアクテイビ
ティ１１７ｍＣｉ′のｃ）を用いて培養した。
ベルは６０％に、１幼時間後の結合レベルは６９％に達
した。洗浄ののちチロキシン（Ｔ４）の４．５の２に相
当する５６％、３１５８４１比ｐｍがびんに共有結合し
て残った。実施例 １８ 実施例１６により処理したびんを１７の９の位５１一ｈ
ＴＳＨ（１９４３１１１ｃｐｍスベシフイクアクテイビ
ティ１１７ｍＣｉ′のｃ）を用いて培養した。
３時間後に結合レベルは１０％に達し、４時間後には１
１％に、１２時間後には１４％にそれぞれ達した。
１％に、１２時間後には１４％にそれぞれ達した。
グリシン緩衝液を用いて洗浄したのちに１３％又は幼ぷ
のｈＴＳＨが共有結合として残った。実施例 １９ 実施例１６により処理したびんを２９のｏの１る１−牛
肉ガンマーグロブリン（ＢＯＧ）を用いて培養した。
のｈＴＳＨが共有結合として残った。実施例 １９ 実施例１６により処理したびんを２９のｏの１る１−牛
肉ガンマーグロブリン（ＢＯＧ）を用いて培養した。
２時間後に結合レベルは５％に達して、１幼時間後には
結合レベルは６％に達した。
結合レベルは６％に達した。
グリシン緩衝液を用いて洗浄したあとにびんに４．５％
又は１．紬夕のＢＧＧが共有結合して残った。実施例
２０ 実施例６によりジアゾ化したガラスぴんを０．１Ｍ重炭
酸塩緩衝液（ｐＨ８．０）のなかで１２５１ートリョー
ドチロニン（Ｔ３）の６則夕を用いて培養した。
又は１．紬夕のＢＧＧが共有結合して残った。実施例
２０ 実施例６によりジアゾ化したガラスぴんを０．１Ｍ重炭
酸塩緩衝液（ｐＨ８．０）のなかで１２５１ートリョー
ドチロニン（Ｔ３）の６則夕を用いて培養した。
２時間後に結合レベルは３６％に達し４時間後には４１
％に、１２時間後には７８％にそれぞれ達した。
％に、１２時間後には７８％にそれぞれ達した。
グリシン緩衝液を用いて洗った後に６１％又は４ｎ夕の
ハプテンが共有結合として残った。実施例 ２１実施例
２０の方法を繰返した。
ハプテンが共有結合として残った。実施例 ２１実施例
２０の方法を繰返した。
しかし、実施例１７に使用した１２５１−チロキシン（
Ｔ４）の紬夕を用いて培養した。２時間後の結合レベル
は４５％に、１２時間後には結合レベルは４９％に達し
た。
Ｔ４）の紬夕を用いて培養した。２時間後の結合レベル
は４５％に、１２時間後には結合レベルは４９％に達し
た。
グリシン緩衝液を用いて洗浄したのち４２％又は３．紬
夕のアミノ酸Ｔ４の共有結合が残った。実施例 ２２ 実施例２０の方法を続けた。
夕のアミノ酸Ｔ４の共有結合が残った。実施例 ２２ 実施例２０の方法を続けた。
ただしびんを実施例１８の１２５１−チロトロビン（ｈ
ＴＳＨ）１７ｎ夕を用いて培養した。２時間後の結合レ
ベルは１３％に達し、１幼時間後には２４％に達した。
ＴＳＨ）１７ｎ夕を用いて培養した。２時間後の結合レ
ベルは１３％に達し、１幼時間後には２４％に達した。
グリシン緩衝液を用いて洗浄したのちに１７％又は２桝
夕の蛋白質ホルモンがガラスびんに共有結合して残った
。実施例 ２３ 実施例２０と同じ処理をつづけた。
夕の蛋白質ホルモンがガラスびんに共有結合して残った
。実施例 ２３ 実施例２０と同じ処理をつづけた。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ （ａ）少なくとも１つの次の一般式に示される６０
〜９０重量％の置換シランと、ＳｉＲ＿２Ｒ′＿２……
（１） ここでＲはエトキシ、フエニル、Ｒ′はメチル、塩素を
示す（ｂ）少なくとも１つの次の一般式に示される１〜
１５重量％の官能性シランと、ＳｉＲ″＿３（Ｒ′″Ｙ
）……（１１） ここでＲ″はメトキシ、エトキシ、Ｒ′″はプロピル、
Ｙは−ＮＨ＿２、−ＮＨ・ＣＯ（Ｃ＿６Ｈ＿５）ＮＨ＿
２を示す（ｃ）０〜３０重量％のテトラエトキシシラン
とを含み、加水分解に必要な化学量論的の水をもって縮
合したケイ酸ヘテロ多縮合物をガラス、プラスチツクよ
りなる群より選ばれた担体に被覆し、さらに上記ケイ酸
ヘテロ多縮合物は、抗体、ホルモンからなる群より選ば
れた生化学物質と共有結合してなることを特徴とする安
定化生化学的調整品。 ２ （ａ）少なくとも１つの次の一般式に示される６０
〜９０重量％の置換シランとＳｉＲ＿２Ｒ′＿２……（
１） ここでＲはエトキシ、フエニル、Ｒ′はメチル、塩素を
示し、（ｂ）少なくとも１つの次の一般式に示される１
〜１５重量％の官能性シランとＳｉＲ″＿３（Ｒ′″Ｙ
）……II ここでＲ″はメトキシ、エトキシ、Ｒ′″はプロピル、
Ｙは−ＮＨ＿２、−ＮＨ・ＣＯ（Ｃ＿６Ｈ＿５）ＮＨ＿
２を示し、（ｃ）０〜３０重量％のテトラエトキシシラ
ンとを含み、加水分解に必要な化学量論的の水をもって
縮合したケイ酸ヘテロ多縮合物を製造し上記ケイ酸ヘテ
ロ多縮合物の有機溶剤溶液をもってガラス、プラスチツ
クからなる群より選ばれた担体上に被覆し、さらに上記
ケイ酸ヘテロ多縮合物を抗体、ホルモンからなる群より
選ばれた生化学物質と共有結合をもって結合させること
を特徴とする安定化学的調整品の製法。 ３ 前記出発成分（ａ）、（ｂ）及び（ｃ）を有機溶剤
を用い１工程または数工程で−２０から１３０℃の温度
で必要によりプロトン放出触媒又は水酸イオン放出触媒
及び必要により水の存在下で縮合して上記ケイ酸ヘテロ
多縮合物を製造することを特徴とする特許請求の範囲第
２項記載の方法。 ４ 前記出発成分（ａ）、（ｂ）及び（ｃ）を１分から
２４時間で予備縮合し、ついで少なくとも加水分解に必
要な化学量論的の水の存在下で充分に縮合することを特
徴とする特許請求の範囲第３項記載の方法。 ５ 前記出発成分（ａ）、（ｂ）及び（ｃ）を少なくと
も加水分解に必要な化学量論的の水の存在下で、単一工
程で完全に縮合することを特徴とする特許請求の範囲第
３項記載の方法。 ６ 前記出発成分（ａ）、（ｂ）及び（ｃ）を予備縮合
し、得られた縮合物をそのまま又は有機溶剤に溶かした
溶液にして担体に被覆し、被覆層を形成し、ついで加水
分解に必要な化学量論的の水を加えて前記被覆層を処理
し、高い温度で加熱することを特徴とする特許請求の範
囲第２項から第４項記載のいずれか１つによる方法。 ７ 前記出発成分（ａ）、（ｂ）及び（ｃ）を完全に縮
合し、得られた縮合物をそのまま又は有機溶剤に溶かし
た溶液にして担体に被覆し、被覆層を形成し、ついで前
記被覆層を必要に応じて水で処理し、高い温度で加熱す
ることを特徴とする特許請求の範囲第２項からか５項記
載のいずれか１つによる方法。 ８ 前記ケイ酸ヘテロ多縮合物を有機溶媒相から分離し
、加水分解に必要な化学量論的の水を加え、その後に担
体に被覆し被覆層を形成し、もし必要ならば有機溶剤に
溶かしたのち前記被覆層を必要に応じて水で処理し、高
い温度で加熱することを特徴とする特許請求の範囲第２
項から第７項記載のいずれか１つによる方法。 ９ 前記有機溶剤がアルコール、ケトン、エーテルアミ
ド及びその混合物からなる群より選ばれる１つであるこ
とを特徴とする特許請求の範囲第２項から第８項記載の
いずれか１つによる方法。 １０ 前記縮合用触媒が３％までの水、酸、塩基、アミ
ンからなる群より選ばれた１つであることを特徴とする
特許請求の範囲第２項から第９項記載のいずれか１つに
よる方法。 １１ 前記ケイ酸ヘテロ多縮合物がそのまま又は有機溶
剤に溶かした溶液にして担体に被覆し、被覆物を形成し
、７５から１５０℃の温度で１０から４５分間加熱して
上記担体に結合させることを特徴とする特許請求の範囲
第２項から第１０項のいずれか１つによる方法。 １２ 前記ケイ酸ヘテロ多縮合物の被覆層が水又は水蒸
気を用いて４から１４０℃の温度で２から３０分間処理
されることを特徴とする特許請求の範囲第２項から第１
１項記載のいずれか１つによる方法。 １３ 前記ケイ酸ヘテロ多縮合物の被覆層が１００から
１５０℃の温度で５から３０分間加熱することを特徴と
する特許請求の範囲第２項から第１２項記載のいずれか
の１つによる方法。
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