JPS6067497A - アスパルテ−ムの製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はアスパルテームすなわちＬ−α−アスノ９ルチ
ルーＬ−フェニルアラニンメチルエステルの新規合成法
に関する。アスパルテームはサトウキビやテンサイ糖の
ような甘味性を有し、米国特許第３，４９２，１３１号
明細書に記載のように食物および飲物のだめの甘味剤と
して使用される。

アスパルテームはジペフ０テドであシ、それ自体では１
つのアミノ酸の活性化カルボキシル基と別のアミノ酸の
アミノ基との間に１個のアミド結合をもって生成されて
いる。この縮合の速度および収率を増加させるには活性
化が必袂である。所望の純粋方ペゾチドを得るには−く
プチド結合生成に関係のないすべての他の官能基を置設
する必要がある。最後にそれら保睡基は除去される。

アス・やルテームはＮ−置換されたー・Ｌ−アスハルチ
ンｅ無水物とＬ−フェニルアラニン　メチルエステルと
の反応により製造されうる。ここではＬ−α−アヌパル
チルーＬ−フェニルアラニンメチルエステルおよびし一
β−アスノクルチルーＬ−フェニルアラニンメチルエス
テルの混合物が得られ、これら異性体の分備が必要とさ
れる。使用されるＮ−保護基はたとえはベンジルオキシ
カルボニル基およびホルミル基のようなペプチド化学に
おける普通のＮ−保膜基である。Ｎ−説保獲は従来強酸
の、？（−圧下で（米１、（ｉ１特許第４０７１５１１
号明細書）また（はヒ下ロギシルアミンの存在下で（米
国特許第４　（１２１４１８号明細書）実施される。こ
ｉＬら既知の脱ホルミル化法にはたとえば低収率、高価
な試薬、β−カルボキシル基エステル化およびニステー
ル凍たはペプチドの結合の加水分解のような工業」二に
おける不利点が若干存在する。さらに、α−異性体とβ
−異性体（β−異性体には甘味性はない）を分子１させ
るためにさらに別の工程を必要とし、これがコスト増加
をもたらすことになる。

本発明はＮ−ホルミル−Ｌ−α−アスノ♀ルチルーＬ−
フェニルアラニンメチルエステルお、１：　０：　ｘｑ
−ホルミル−Ｌ−β−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラ
ニンメチルエステルを含有する反応混合物に過酸化水系
および有機酸および揚台によシ鉱酸を加えることからな
る上記反応混合物からのアスパルテームの単離法を提供
する。

本発明による脱ホルミル化から生成される所望のＬ−α
−アス／ぐルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステ
ルは一旦、反応が完了すれば常套手段で容易に分離され
うる。Ｎ−ホルミルアスパルテームを含有する反応混合
物に１０〜９０φ過酸化水素水溶液、有機酸および好ま
しくは鉱酸水溶液を加えるならば脱ホルミルはたとえば
エステルまたはペプチドの結合の加水分解のような副反
応を．伴わずに選ルく的になされる。

用いることのできる有機酸の例としては弐Ｒ−ＣＯＯ）
ｌ　（式中、Ｒは水素原子、Ｃ，〜Ｃ，アルキル基、フ
ェニル基または置換フェニル基である）のカルボン酸が
あげられる。好ましい酸はぎ酸およびｍ−クロロ安息香
酸である。

適当な鉱酸は２５℃で１．５ｘ１０−２より小恣くない
第１解離定数を有する。かかる酸の例としては以下に限
定されるわけではないが、たとえばシん酸、塩酸および
硫酸のような慣例上の鉱酸があげられる。

過酸化水系は通常ホルミル基のモル当たり１〜６モルの
量で使用される。有機酸およびＣ１酸は反応混合物中Ｎ
−ホルミル−アスパルテームのモル当た。Ｄｏ、５−１
０モルの量で使用されるのが菫ましい。反応温度は１０
℃から混合物の沸点までであシ、そして反応は２〜４０
時間であるのがよい。

脱ホルミル化剤の添加される縮合混合物はたとえば酢酸
エチル、ジクロロエタン、メチルエチルケトンおよび酢
酸のような溶媒を含有する。

所望のアスパルテームを分離させるためには反応混合物
を冷却後に水で希釈し、そしてその水性相を分離しつい
でたとえは炭酸ナトリウムまたは炭酸水素ナトリウムの
ような弱アルカリあるいは水酸化アンモニウムまたは水
酸化ナトリウムの添加によｐｐ＋（４，５〜５に調整す
るのがよい。

沈殿するアスパルテームは漣過によシ集めることができ
る。

本発明による方法はいくつかの利点全提供する。

脱ホルミル化前に製造されるＮ−ホルミル−Ｌ−α−ア
スノ臂ルチルーＬ−ジェニルアラニンメチルエステルｋ
　よ（ＪＮ−ホルミル−し−β−アスＡ’ルチルーし一
フェニルアラニン　メチル　エステルＶ−ソ。

の反応混合物から単離させる必要はない。両異性体の分
離は、アス・ぐルテームのみが沈１殺し、β−異性体が
沈殿しないので上記脱ポルミル化と同じ工程で達成され
る。特定の反応条件の故にペプチド結合の分裂、β−カ
ルボニル基のニスデル化、エステル化メチル基の脱離ま
たシ」、望オしくない副生成物ジケトピペラジンの生成
が避けられる。良好な単離収量が礼られる。

実施例　１ １６０づのジクロロエタンおよび４０ｍｅの酢酸中にお
ける１００１の、Ｎ−ホルミル−（χ−Ｔ、　−７スパ
ルチルーＬ−フェニルアラニン　メチルエステルお、よ
びＮ−ホルミル−β−Ｌ−アスパルチルーＬ−フェニル
アラニンメチルエステル（α：βの異性体比８：２）の
溶液に室温で４０　ｍｅの４０係過酸化水素水溶液、２
　ｏｒｍのぎ酸および４ｏゴの６７チ塩酸水溶液を加え
た。この混合物を８時間４５℃で加熱しついで冷却した
。反応混合物の内容物を）ＩＰＬＣ（高圧液体クロマト
グラフィー）にょシ分析したところ以下の結果が得られ
た。

α−Ｌ−７スノやルチル−Ｌ−フェニルアラニンメｆル
エｙ、チル（αＡＰＭ）　２３１ｍｙ／ｍ／！β−Ｌ−
アス／’？ルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステ
ル（βＡＰＭ）　５６．６　ｍＷ／ｍｌ■く一ホルミル
ーα−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニン　メチ
ルエステル（αＦＡＰＭ）１８Ｔｎｙ／ｆｎｌ。

Ｎ−ホルミル−β−Ｌ−アスパルチルーＬ−フェニルア
ラニン　メチルエステル（βＦＡＰＭ）４．６■／− 分析条件は以下のとおルであった。

カラム：リクロソルブ（Ｌｉｃｈｒｏｓｏｒｂ　）　Ｒ
Ｐ　１．８　（メルク社製）５μｍ（フナウェル社にょ
シ販売）長さ＝２５０順 内径２４．６間 溶離剤二ホスフェート　バッファー（ｐｉｌ　３．　Ｑ
±０．１）およびアセトニトリルの混合物（８７：１３
　ｖ／ｖ）、流量：　１．５ｍｌ／分 カラム温度二６５℃ バッファーの組成：　１！の水に溶解さｈかつＨ３ＰＯ
４で上記−に調整されたｉ４ｆのＫ１ｌ２Ｐｏ４゜α−
Ｌ−アスパルチル−し一フェニルアラニンメチルエステ
ルの保持時間は約８００秒で４５つだ。

α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエ
ステルの収量（収率）は６８ｆ（９３％）でβった。こ
の反応混合物を５００ｍ１の水で希釈し、その水性相を
分離し、その−を２０％水酸化ナトリウム水溶液を加え
ることによシ４．５に調整し、その混合物を室温で１時
間攪拌しついで冷却した。遊離アスパルテームが沈殿し
、これを？７５過によシ集めた。４５．５ｆの純粋な化
合物が７０％収率、融点２６６〜２６５℃（分解を伴う
）で得られた。

〔α発２．＝＋３３．２　（Ｃ＝１　、酢酸）タイター
ＥＰＬＣ）　９９襲 実施例　２ ３０Ｄｄの酢酸エチルおよび４０ｙｒｆの酢酸中におけ
る１００７の、Ｎ−ホルミル−α−Ｌ−アスノＲ）ｂチ
ル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステルおよびＮ−ホ
ルミル−β−Ｌ〜アスパルチルーＬ−フェニルアラニン
メチルエステル（α：βの異性体比８：２）の溶液に１
０℃でＢ　Ｏｍｇの４０％過酸化水素水溶液、６０　ｒ
ｒｔのぎ酸および２０ｒｎｔの９−６チ硫酸を加えた。

１０℃で２４時間経過後に反応混合物の内容物をＢＩＰ
ＬＣ分析したところ結果は以下のとおりであった。

αＡＰＭ　１２６．９　Ｔｎｇ／ｎｔ βＡＰＭ　３１．５　巧／　ｍｅ αＦＡＰＭ　２　Ｃ１，６Ｔｎｇ／ｍｌβＦＡＰＭ　５
．２ｍｙ／ｌｎｉ α−Ｌ−７スノクルチルーＬ−フェニルアラニンメチル
エステルの収量は／＞５．５９（ｆ３６．９％）であっ
た。実施例１のように後処理した後に純粋なアス・やル
テームが６５係収率で得られた。

実施例　６ ぎ酸の代わシに４０　ｍｇの酢酸を使用する以外は実施
例１のように操作して（６０℃で８時間）純粋なアスパ
ルテームを６８％収率で得たＯ実施例　４ ３７グ塩酸水溶液の代わりに６０−の８５係りん酸水溶
液を使用する以外は実施例１のように操作して（４５℃
で８時間）純粋なアスパルテームを７２％収率で得た。

実施例　５ ４０ｙｄの過酸化水素水ｆｓ液の代わりに６０　ｍｌｌ
の４０チ過酸化水素水溶液を使用する以外は実施例４の
ように操作して（２５℃で２０時間）純粋なアスノぐル
テームを７０チ収率で得た。

実施例　６ １６０　ｒａｅのジクロロエタンおよび４０ｍ１の酢酸
中における１００グの、Ｎ−ホルミル−α−Ｌ−アスパ
ルチル−し一フェニルアラニン　メチル　エステルおよ
びＮ−ホルミル−β−Ｌ−アスノ’？ルチルーし一フェ
ニルアラニン　メチルエステル（α：β異性体比８：２
）の溶液に２０℃で４０ゴの６０％過酸化水素水溶液お
よび７５９の５−クロロ−安息香酸を加えた。反応混合
物を２０℃で２４時間攪拌した。実施例１のように後処
理した後に純粋なアスノソルブーームを６４チ収率で得
た。

１１？４＋出願人　ファーミタリア・カル口・エルレノ
・・ソシエタ・ベル・アツイオー二 第１頁の続き ０発　明　者　ビニトロ・ジャルデイ　イーノ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、Ｎ−ホルミル−し−α−アス／’？ルチルーＬ−フ
   ェニルアラニンメチルエステルおよびＮ−ホルミル〜Ｌ
   −β−アスノぐルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエ
   ステルの混合物を過酸化水素および有機酸と混合するこ
   とにより脱ホルミル化および分離を行うことを特徴とす
   るし一α−アスパルチルーＬ−フェニルアラニン　メチ
   ルエステルの製法。 ２、有機酸が式 ％式％ Ｃ式中ＲはＪＪ　、低級アルキル、フェニルまたは直換
   フェニルからなる群よシ選択される）を有する前記第１
   項に記載の製法。 ６、　過酸化水素がポルミル基のモル当た９１〜６モル
   の量で存在する前記第１項に記載の製法。 ４、混合物がさらに２５℃で１．５Ｘ１０　よシも小さ
   くない第１解離定数を有する鉱酸とも混合される前記第
   １項に記載の製法。 ５、　鉱酸および有機酸の総計がＮ−ホルミルーアスノ
   ９ルテームのモル当＊、９０．５〜１０モルの量で存在
   する前記第４項に記載の製法。 ６、　反応時間が１０℃からその混合物の沸点までの温
   度において２〜４０時間である前記第１項に記載の製法
   。 Ｚ　脱ホルミル化反応後にその反応混合物を水で希釈し
   、それよシ４水性相を分離し１、そのＰＩＩを僅かに酸
   性状態に調整しついでそれよシ沈殿したアスノぐルテー
   ムを集めることによシα−異性体が分離される前記第１
   項に記載の方法。