JPS6094092A - 補酵素ｑ↓１↓０の抽出法 - Google Patents
補酵素ｑ↓１↓０の抽出法Info
- Publication number
- JPS6094092A JPS6094092A JP58202840A JP20284083A JPS6094092A JP S6094092 A JPS6094092 A JP S6094092A JP 58202840 A JP58202840 A JP 58202840A JP 20284083 A JP20284083 A JP 20284083A JP S6094092 A JPS6094092 A JP S6094092A
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- coenzyme
- extraction
- hexane
- acetone
- pseudomonas
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明はシュードモナス属に属する補酵素Ｑ１０生産菌
を培養して得た培養菌体から心臓代謝改善剤として広く
使用されている補酵素Ｑ、１０を抽出する方法に関する
。
を培養して得た培養菌体から心臓代謝改善剤として広く
使用されている補酵素Ｑ、１０を抽出する方法に関する
。
従来、シュードモナス属にハする補酵素Ｑｔ’。
生産菌を培養して得た培養菌体から補酵素Ｑ、１゜加熱
抽出する方法があるが、この方法は操作において加熱す
る手間がかかる他、抽出を３回繰返すとそれ以上同じ操
作を行なっても培養菌体中になお残る補酵素Ｑ１０を抽
出できない欠点がある。
抽出する方法があるが、この方法は操作において加熱す
る手間がかかる他、抽出を３回繰返すとそれ以上同じ操
作を行なっても培養菌体中になお残る補酵素Ｑ１０を抽
出できない欠点がある。
本発明者らは加熱工程を必要としない簡単な操作で、し
かも培養菌体からアセトンでは抽出し切れない部分の補
酵素Ｑ１０をも抽出する方法について鋭意研究の結果、
本発明を完成させるに至った。
かも培養菌体からアセトンでは抽出し切れない部分の補
酵素Ｑ１０をも抽出する方法について鋭意研究の結果、
本発明を完成させるに至った。
本発明はシュードモナス属に属する補酵素ＱＩＯ生産菌
を培養して得た培養菌体から補酵素Ｑ１゜を抽出する方
法において、前記培養菌体に硫酸ドブフルナトリウムを
混合した後低級アルコールの存在下にＴＩ−ヘキサンで
処理して抽出物を得る方法である。
を培養して得た培養菌体から補酵素Ｑ１゜を抽出する方
法において、前記培養菌体に硫酸ドブフルナトリウムを
混合した後低級アルコールの存在下にＴＩ−ヘキサンで
処理して抽出物を得る方法である。
本発明において用いるンユードモナス居に属する補酵素
Ｑ１ｏ生産菌としては補酵素Ｑ１０を生成する能力を有
するものであればいかなるものでもよく、例えばシュー
ドモナスＣｌ−３６（微工研菌寄第５２０９号、ＩＰ＃
開昭５６−５１９８６号参照〕、ンユードモナスＮ８４
２−Ｍ１５７ （微工研菌寄第３１５３号、特開昭５７
−６８７９２号参照〕、シュードモナスＮ８４２（微工
研菌寄第３１５４号、特開昭５２−４７９９０号参照）
、シュードモナスＭ１５７−Ｂ３（微工研菌寄第５７０
６号、特開昭５７−６８７９２号参照〕およびシュード
モナスＡＭＩ（微工研菌寄第６８８５号、特開昭５２−
４４２９０号参照）が挙けられる。かかる菌を培養して
得たｍ体を生菌体としてかあるいは乾燥菌体として使用
する。なお乾燥菌体には適量の水を添加して使用するこ
とができる。
Ｑ１ｏ生産菌としては補酵素Ｑ１０を生成する能力を有
するものであればいかなるものでもよく、例えばシュー
ドモナスＣｌ−３６（微工研菌寄第５２０９号、ＩＰ＃
開昭５６−５１９８６号参照〕、ンユードモナスＮ８４
２−Ｍ１５７ （微工研菌寄第３１５３号、特開昭５７
−６８７９２号参照〕、シュードモナスＮ８４２（微工
研菌寄第３１５４号、特開昭５２−４７９９０号参照）
、シュードモナスＭ１５７−Ｂ３（微工研菌寄第５７０
６号、特開昭５７−６８７９２号参照〕およびシュード
モナスＡＭＩ（微工研菌寄第６８８５号、特開昭５２−
４４２９０号参照）が挙けられる。かかる菌を培養して
得たｍ体を生菌体としてかあるいは乾燥菌体として使用
する。なお乾燥菌体には適量の水を添加して使用するこ
とができる。
このようにして得られたシュードモナス属菌の培養菌体
に硫酸ドデシルナトリウムを混合して懸濁液とする。硫
酸ドデシルナトリウムの添加量は乾燥菌体１ｑ当り８０
〜１２０■が適当であり、この範囲の量を１−の水に混
合して使用すればよい。硫酸ドデフルナ）ＩＪウムの使
用量が前記範囲に満たない場合には補酵素Ｑ、 ｆ Ｑ
の抽出が不充分となシ、また前記範囲を越えても抽出効
果の改善は期待できない。
に硫酸ドデシルナトリウムを混合して懸濁液とする。硫
酸ドデシルナトリウムの添加量は乾燥菌体１ｑ当り８０
〜１２０■が適当であり、この範囲の量を１−の水に混
合して使用すればよい。硫酸ドデフルナ）ＩＪウムの使
用量が前記範囲に満たない場合には補酵素Ｑ、 ｆ Ｑ
の抽出が不充分となシ、また前記範囲を越えても抽出効
果の改善は期待できない。
次に前記硫酸ドデシルナトリウムの懸濁液に低級アルコ
ールを混合して懸濁液の泡立ちおよび乳濁化を防止する
。低級アルコールの使用量は硫酸ドデシルナトリウム１
２０Ｐｇに対して０．５〜３ｍ程度で充分である〇 このように処理して得たものにｎ−ヘキサ／を乾燥菌体
１ｑ当り２〜１０−の割合で添加し、約２０分間振とう
した後、ｎ−ヘキサン層を採取する。なお、乾燥菌体１
り当りのｎ−ヘキサンの使用量が２−未満では補酵素Ｑ
１ｏの抽出が不充分になり、逆に１０−を越えて使用し
ても抽出効果の改善は期待できない。
ールを混合して懸濁液の泡立ちおよび乳濁化を防止する
。低級アルコールの使用量は硫酸ドデシルナトリウム１
２０Ｐｇに対して０．５〜３ｍ程度で充分である〇 このように処理して得たものにｎ−ヘキサ／を乾燥菌体
１ｑ当り２〜１０−の割合で添加し、約２０分間振とう
した後、ｎ−ヘキサン層を採取する。なお、乾燥菌体１
り当りのｎ−ヘキサンの使用量が２−未満では補酵素Ｑ
１ｏの抽出が不充分になり、逆に１０−を越えて使用し
ても抽出効果の改善は期待できない。
次に得られたｎ−へキサ７層から溶媒を留去する。
溶媒を留去して得た残渣を常法により、すなわちエタノ
ールを添加し、７０℃で約５秒間処理した後遠心分離し
、得られた上澄液に酸化剤例えばに５Ｆθ（ＣＮ）６を
添加し、次いで液体クロマトグラフィー処理して補酵素
９．１０を得る。
ールを添加し、７０℃で約５秒間処理した後遠心分離し
、得られた上澄液に酸化剤例えばに５Ｆθ（ＣＮ）６を
添加し、次いで液体クロマトグラフィー処理して補酵素
９．１０を得る。
なお、本発明の抽出法を予めアセトン抽出法により培養
菌体から補酵素ＱＩＯを抽出した後に菌体中になお残る
補酵素Ｑ１０を抽出する目的で使用してもよい。
菌体から補酵素ＱＩＯを抽出した後に菌体中になお残る
補酵素Ｑ１０を抽出する目的で使用してもよい。
本発明によれば、アセトン抽出法では抽出できない部分
の補酵素Ｑ１０をも抽出できる他、抽出操作も加熱の手
間が省略できるなど簡単且つｆｔＥ Ｍ 酌 ｆ Ｒプ
シ ＾ ン′ ム 端け 番 ヱ リ一 ÷、 →ヒ
！！ ロロ −−法はとくにアセトン抽出法と併用する
と補酵素ＪＤの収率を高めることができる。
の補酵素Ｑ１０をも抽出できる他、抽出操作も加熱の手
間が省略できるなど簡単且つｆｔＥ Ｍ 酌 ｆ Ｒプ
シ ＾ ン′ ム 端け 番 ヱ リ一 ÷、 →ヒ
！！ ロロ −−法はとくにアセトン抽出法と併用する
と補酵素ＪＤの収率を高めることができる。
本発明を更に具体的に示すために以下に実施例を挙げて
説明する。
説明する。
実施例 １
シュードモナスＣｌ−３６菌の培養菌体をスプレードラ
イ法により乾燥して得た菌体５■およびこれに水０．０
５ ｍｇを加えたもののそれぞれに、水１−に溶解した
硫酸ドデシルナトリウム１２０りを混合した。次いでメ
タノール３ ｔｎｔを添加しａｉ、ｎ−ヘキサン５−で
処理してｎ−ヘギサン抽出液４．ローを得た。
イ法により乾燥して得た菌体５■およびこれに水０．０
５ ｍｇを加えたもののそれぞれに、水１−に溶解した
硫酸ドデシルナトリウム１２０りを混合した。次いでメ
タノール３ ｔｎｔを添加しａｉ、ｎ−ヘキサン５−で
処理してｎ−ヘギサン抽出液４．ローを得た。
得られたｎ−へキサン抽出液を蒸発させて溶媒を留去し
、残液を得た。仁の残渣をエタノール２ゴを用い、７０
ｃの温度で５秒間処理してエタノール抽出液を得た。こ
のエタノール抽出液を今後３０００ ｒｐｍで３分間遠
心分離し、得られた上澄液Ｋ Ｋ５Ｆθ（ＣＮ）６を添
加した後、液体クロマトグラフィー処理した。
、残液を得た。仁の残渣をエタノール２ゴを用い、７０
ｃの温度で５秒間処理してエタノール抽出液を得た。こ
のエタノール抽出液を今後３０００ ｒｐｍで３分間遠
心分離し、得られた上澄液Ｋ Ｋ５Ｆθ（ＣＮ）６を添
加した後、液体クロマトグラフィー処理した。
対照として前記と同様に処理して得た菌体５キにアセト
ン１−を添加し、６０℃で１時間加熱処理してアセトン
抽出液を得た。抽出残渣に同様の操作を更に２回繰返し
た後、得られた各アセトン抽出液を合して蒸発せしめ、
以後前記と同様に処理した。
ン１−を添加し、６０℃で１時間加熱処理してアセトン
抽出液を得た。抽出残渣に同様の操作を更に２回繰返し
た後、得られた各アセトン抽出液を合して蒸発せしめ、
以後前記と同様に処理した。
前記の処理による乾燥菌体１．０ｑ当りの補酵素９，１
０抽出景（μ２〕は表１に示すとおりであり、対照方法
と同等以上の効果を示し几。
０抽出景（μ２〕は表１に示すとおりであり、対照方法
と同等以上の効果を示し几。
表 １
ｎ−ヘキサン袖山 ４．６４ ４．４９アセトン３回仙
出 ４，２７ 五９９ 実施例 ２ シュードモナスＣｌ−３６菌の培養菌体２０岬（乾燥菌
体として５〜）を実施例１の対照方法と同様にアセトン
処理し、第１．２および６回目の各アセトン抽出液より
それぞれ１２．５５ ／１９゜２．０５μ２および０．
７μＶの袖酊累Ｊｏを得た。さらに３回目のアセトン抽
出残渣を実施例１と同様に処理して補酵素Ｊｏ０．９５
μ２を得た。
出 ４，２７ 五９９ 実施例 ２ シュードモナスＣｌ−３６菌の培養菌体２０岬（乾燥菌
体として５〜）を実施例１の対照方法と同様にアセトン
処理し、第１．２および６回目の各アセトン抽出液より
それぞれ１２．５５ ／１９゜２．０５μ２および０．
７μＶの袖酊累Ｊｏを得た。さらに３回目のアセトン抽
出残渣を実施例１と同様に処理して補酵素Ｊｏ０．９５
μ２を得た。
実施例 ３
シュードモナスＣｌ−３６苗の培養菌体２０即を用い、
宇治で１時間のアセトン抽出を２＠１行なう以外は実施
例１の対照方法と同様に処理して第１および２回目の各
アセトン抽出液よりそれぞれ１０．８μｆおよび１．７
μりの袖醇累ＪＯを得た。さらに２回目のアセトン抽出
残渣を実施例１と同様に処理して補酵素Ｑ１ｏ１．４μ
Ｖを得た。
宇治で１時間のアセトン抽出を２＠１行なう以外は実施
例１の対照方法と同様に処理して第１および２回目の各
アセトン抽出液よりそれぞれ１０．８μｆおよび１．７
μりの袖醇累ＪＯを得た。さらに２回目のアセトン抽出
残渣を実施例１と同様に処理して補酵素Ｑ１ｏ１．４μ
Ｖを得た。
実施例 ４
ンユードモナス０１−３６菌の培養菌体２０ｑを用い、
室温で１時間のアセトン抽出を１回行なう以外は実施例
２と同様に処理してアセトン抽出液より補酵素Ｊｏ ａ
ｓｏμｆを得た。そしてアセトン抽出残渣を実施例１と
同様に処理して補酵素Ｊｏ６．０５μＶを得た。
室温で１時間のアセトン抽出を１回行なう以外は実施例
２と同様に処理してアセトン抽出液より補酵素Ｊｏ ａ
ｓｏμｆを得た。そしてアセトン抽出残渣を実施例１と
同様に処理して補酵素Ｊｏ６．０５μＶを得た。
実施例 ５
実施例１で用いたシュードモナスＣｌ−３６菌の乾燥菌
体５ｖ９に硫酸ドデシルナトリウム（ｓｉｓ）を乾燥菌
体１η当りそれぞれ０．１０．２０．４０．６０．８０
．１００および１２０η／水１ｍｌにする以外は実施例
１と同様にして補酵素昧１０を抽出した。
体５ｖ９に硫酸ドデシルナトリウム（ｓｉｓ）を乾燥菌
体１η当りそれぞれ０．１０．２０．４０．６０．８０
．１００および１２０η／水１ｍｌにする以外は実施例
１と同様にして補酵素昧１０を抽出した。
表２に乾燥菌体１． ＯＱ当りの補酵素ＪＯ抽出１ｔ（
ｐｒ）を示す。
ｐｒ）を示す。
表 ２
補酵素ｕｌ。
抽出量（ｐ、０．８８ １・３２１・６９２・７２ ５
．６ＣＪ ４・１０４・４６４・２８実施例 ６ 実施例１で用いたシュードモナスＣｌ−３６菌の乾燥菌
体５りおよび実施例２で用いｒｃシュードモナスＣｌ−
３６菌の培養菌体２０■（乾燥自体として５ ｒｒｖ
）を用いｎ−ヘキサンの使用」をそれぞれ２．５．５．
０、Ｚ５および１０．０ｆｆｉｇにする以外は実施例１
と同様圧して補酵素Ｑ１ｏを抽出した。
．６ＣＪ ４・１０４・４６４・２８実施例 ６ 実施例１で用いたシュードモナスＣｌ−３６菌の乾燥菌
体５りおよび実施例２で用いｒｃシュードモナスＣｌ−
３６菌の培養菌体２０■（乾燥自体として５ ｒｒｖ
）を用いｎ−ヘキサンの使用」をそれぞれ２．５．５．
０、Ｚ５および１０．０ｆｆｉｇにする以外は実施例１
と同様圧して補酵素Ｑ１ｏを抽出した。
表３に乾燥菌体１，０■当りの補酵素’Ｊ＝ｊＯ抽出量
（Ｉｔ旬を示す。
（Ｉｔ旬を示す。
表 ３
Claims (1)
- シュードモナス属に属する補酵素Ｑ１０生産菌を培養し
て得た培養菌体から補酵素ＪＯを抽出するにあたり、前
記培養菌体に硫酸ドデシルナトリウムを混合した後、低
級アルコールの存在下においてｎ−ヘキサンで処理して
抽出物を（％ることを特徴とする、補酵素Ｑ１０の抽出
法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58202840A JPS6094092A (ja) | 1983-10-31 | 1983-10-31 | 補酵素ｑ↓１↓０の抽出法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58202840A JPS6094092A (ja) | 1983-10-31 | 1983-10-31 | 補酵素ｑ↓１↓０の抽出法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6094092A true JPS6094092A (ja) | 1985-05-27 |
| JPH0412115B2 JPH0412115B2 (ja) | 1992-03-03 |
Family
ID=16464056
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP58202840A Granted JPS6094092A (ja) | 1983-10-31 | 1983-10-31 | 補酵素ｑ↓１↓０の抽出法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6094092A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007020402A (ja) * | 2005-07-12 | 2007-02-01 | Nitto Shokuhin Kk | 納豆の製造方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5651986A (en) * | 1979-09-29 | 1981-05-09 | Nisshin Flour Milling Co Ltd | Preparation of coenzyme q10 |
-
1983
- 1983-10-31 JP JP58202840A patent/JPS6094092A/ja active Granted
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5651986A (en) * | 1979-09-29 | 1981-05-09 | Nisshin Flour Milling Co Ltd | Preparation of coenzyme q10 |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007020402A (ja) * | 2005-07-12 | 2007-02-01 | Nitto Shokuhin Kk | 納豆の製造方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0412115B2 (ja) | 1992-03-03 |
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