JPS61109799A - α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニンアルキルエステルの分離方法 - Google Patents
α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニンアルキルエステルの分離方法Info
- Publication number
- JPS61109799A JPS61109799A JP22885684A JP22885684A JPS61109799A JP S61109799 A JPS61109799 A JP S61109799A JP 22885684 A JP22885684 A JP 22885684A JP 22885684 A JP22885684 A JP 22885684A JP S61109799 A JPS61109799 A JP S61109799A
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- Japan
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〈産業上の利用分野〉
本発明はα−Ｌ−アスパルチル−ーーフェニルアラ二／
アル中ルエステル（以下％Ｌ−Ｌ−ＡＰＭと略す。）を
その光学異性体であるα−Ｌ−アスバルメチルーＤ−フ
ェニルアラニンアルキルエステル（以下、Ｌ−Ｄ−ムＰ
Ｍと略す。）とその他共存する不純物から分離する方法
に関するものでアル。Ｌ−Ｉ＋−ムＰＭは一−アスノシ
ラギン酸とＬ−７エニルアラニンの二個の必須アミノ酸
が結合して出来たジペプチドで強い庶塘様の甘味を呈す
る。
アル中ルエステル（以下％Ｌ−Ｌ−ＡＰＭと略す。）を
その光学異性体であるα−Ｌ−アスバルメチルーＤ−フ
ェニルアラニンアルキルエステル（以下、Ｌ−Ｄ−ムＰ
Ｍと略す。）とその他共存する不純物から分離する方法
に関するものでアル。Ｌ−Ｉ＋−ムＰＭは一−アスノシ
ラギン酸とＬ−７エニルアラニンの二個の必須アミノ酸
が結合して出来たジペプチドで強い庶塘様の甘味を呈す
る。
新甘味剤として食卓用、アイスクリーム等冷菓用。
炭酸飲料用その他、数多くの用途に使われている有用な
化合物である。
化合物である。
この様に有用なＬ−Ｌ−ムＰＭも合成の段階で目的とす
るＬ −Ｌ −Ａ ＰＭの他にその光学異性体であるＬ
−Ｄ−ムＰＭとその他不純物としてアスノ（ラギン酸誘
導体やフェニルアラニン誘導体や副反応物が生成する。
るＬ −Ｌ −Ａ ＰＭの他にその光学異性体であるＬ
−Ｄ−ムＰＭとその他不純物としてアスノ（ラギン酸誘
導体やフェニルアラニン誘導体や副反応物が生成する。
この光学異性体Ｌ−Ｄ−ＡＰＭは甘味も低くその存在は
Ｌ−Ｌ−ＡＰＭの商品価値を低下させるため必ずその有
無を確認することが必要である。
Ｌ−Ｌ−ＡＰＭの商品価値を低下させるため必ずその有
無を確認することが必要である。
〈従来の技術〉
従来、このＬ−Ｌ−ＡＰＭ中に共存する光学異性体Ｌ−
Ｄ−ムＰＭ及び不純物を分離する方法として次のような
方法が知られているがこれらの方法はいずれも複雑な反
応過程を経て分離も２時間以上の長時間要し検出に至る
。（１）反応型液体クロマトグラフィーのひとつである
アミノ酸分析計を用いオルトフタルアルデヒドで発色さ
せケイ光検出器を用い分離、検出する方法。その他、一
般に光学異性体の分離方法としてλ５の方法も考えられ
る。
Ｄ−ムＰＭ及び不純物を分離する方法として次のような
方法が知られているがこれらの方法はいずれも複雑な反
応過程を経て分離も２時間以上の長時間要し検出に至る
。（１）反応型液体クロマトグラフィーのひとつである
アミノ酸分析計を用いオルトフタルアルデヒドで発色さ
せケイ光検出器を用い分離、検出する方法。その他、一
般に光学異性体の分離方法としてλ５の方法も考えられ
る。
〈発明が解決しようとする問題点〉
本発明の目的はこのような従来の方法よりも簡便に迅速
ＫＩ、−Ｌ−ＡＰＭとその光学異性体であるＬ−Ｄ−Ａ
ＰＭ及び共存成分とを分離検出することができる方法を
提供するととくある。
ＫＩ、−Ｌ−ＡＰＭとその光学異性体であるＬ−Ｄ−Ａ
ＰＭ及び共存成分とを分離検出することができる方法を
提供するととくある。
く問題を解決するための手段〉
本発明の要旨はＬ−Ｌ−ＡＰＭとその光学異性体である
Ｌ−Ｄ−ＡＰＭ及び共存成分を反応する過程は用いずに
直接的に高速液体クロマトグラフィーにより上記各成分
を分離し紫外線検出器により検出することであり以下そ
の詳細について説明する。
Ｌ−Ｄ−ＡＰＭ及び共存成分を反応する過程は用いずに
直接的に高速液体クロマトグラフィーにより上記各成分
を分離し紫外線検出器により検出することであり以下そ
の詳細について説明する。
く作用〉
本発明は、高速液体クロマトグラフィーのひとつの分離
機構であるイオン交換作用を利用しＬ−Ｌ−ＡＰＭとＬ
−Ｄ−ＡＰＭ、その他共存成分の解離定数、引いては等
電点の違いにより分離が達成されると推定される。
機構であるイオン交換作用を利用しＬ−Ｌ−ＡＰＭとＬ
−Ｄ−ＡＰＭ、その他共存成分の解離定数、引いては等
電点の違いにより分離が達成されると推定される。
すなわち、本発明は交換容量が充填剤１ｇ当り１ｌＬ１
ミリ当号以上のイオン交換容量を持つイオン交換体を充
填したカラムに、１）Ｈ３Ｎ２の水溶液または非水溶媒
を２５容量チ以下含む水との混合溶液を通液している溶
離液中に試料を導入した後、分離溶出した各成分を紫外
部で検出することにより、’Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ、Ｌ−Ｄ−
ＡＰＭの光学異性体等を３０分以内に分離する方法であ
る。
ミリ当号以上のイオン交換容量を持つイオン交換体を充
填したカラムに、１）Ｈ３Ｎ２の水溶液または非水溶媒
を２５容量チ以下含む水との混合溶液を通液している溶
離液中に試料を導入した後、分離溶出した各成分を紫外
部で検出することにより、’Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ、Ｌ−Ｄ−
ＡＰＭの光学異性体等を３０分以内に分離する方法であ
る。
本発明において用いる充填剤は陽イオン交換体で、その
交換容量が充填剤１ｇ当り［１１ミリ当量以上、特に１
ｌＬ５〜１０ミリ当量の陽イオン交換体が好ましい。交
換容量がｌ１１ミリ当ｔ／１１未満では、イオン交換体
の交換能力が下ｌ３ｕＱ、％それにともなって溶離液の
濃度を下げれば、分離が可能となるが、交換作用の差が
ある程度ある試料ならば、それでも分離できる。しかし
ｓ ＩＩ−Ｌ ＡＰＭおよびＩ、−Ｄ−ムＰＭの光学
異性体はごくわずかな差しかないと推定しているのであ
まり、イオン交換体の交換容量を下げすぎると分離し難
くなるため好ましくない。
交換容量が充填剤１ｇ当り［１１ミリ当量以上、特に１
ｌＬ５〜１０ミリ当量の陽イオン交換体が好ましい。交
換容量がｌ１１ミリ当ｔ／１１未満では、イオン交換体
の交換能力が下ｌ３ｕＱ、％それにともなって溶離液の
濃度を下げれば、分離が可能となるが、交換作用の差が
ある程度ある試料ならば、それでも分離できる。しかし
ｓ ＩＩ−Ｌ ＡＰＭおよびＩ、−Ｄ−ムＰＭの光学
異性体はごくわずかな差しかないと推定しているのであ
まり、イオン交換体の交換容量を下げすぎると分離し難
くなるため好ましくない。
陽イオン変換体としては、スルホン酸基を有スる強酸性
陽イオン交換体あるいはカルボキシル基を有する弱酸性
陽イオン交換体を挙げることができるが、特にスチレン
・ジビニルベンゼン樹脂にスルホン酸基を導入したスチ
レン型または多孔性体の表面を直接化学処理した後、ス
ルホン酸基を含む官能基を導入した化学結合型の強酸性
陽イオン交換体が好ましい。
陽イオン交換体あるいはカルボキシル基を有する弱酸性
陽イオン交換体を挙げることができるが、特にスチレン
・ジビニルベンゼン樹脂にスルホン酸基を導入したスチ
レン型または多孔性体の表面を直接化学処理した後、ス
ルホン酸基を含む官能基を導入した化学結合型の強酸性
陽イオン交換体が好ましい。
溶離液としては、ｐＦＩ４〜８、好ましくはｐＨｓ〜７
の水溶液または非水溶媒を２５係以下含む水との混合溶
液を用いるものである。ｐＨが４未満または８を越える
と、また、非水溶媒の含有量が２５１を越えるトＬ−Ｉ
、−ＡＰＭトＬ−Ｄ −ＡＰＭとの分離ができ難く好ま
しくない。
の水溶液または非水溶媒を２５係以下含む水との混合溶
液を用いるものである。ｐＨが４未満または８を越える
と、また、非水溶媒の含有量が２５１を越えるトＬ−Ｉ
、−ＡＰＭトＬ−Ｄ −ＡＰＭとの分離ができ難く好ま
しくない。
溶離液のｐＨＡｍ１整には通常用いられる酸、アルカリ
を挙げることができる。具体的な酸としては、塩酸、酢
酸、ギ酸、リン酸、クエン酸など。アルカリとしては水
酸化ナトリウム、水酸化カリウム。
を挙げることができる。具体的な酸としては、塩酸、酢
酸、ギ酸、リン酸、クエン酸など。アルカリとしては水
酸化ナトリウム、水酸化カリウム。
水酸化アンモニウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素ア
ンモニウムなどが挙げられる。
ンモニウムなどが挙げられる。
このとき用いられる緩衝剤としては、通常用いられる緩
衝剤であればなんらさしつかえないが、特に塩類として
酢酸ナトリウム、リン酸ナトリウム、リン酸アンモニウ
ム、クエン酸ナトリクム。
衝剤であればなんらさしつかえないが、特に塩類として
酢酸ナトリウム、リン酸ナトリウム、リン酸アンモニウ
ム、クエン酸ナトリクム。
クエン酸アンそニウム、塩化ナトリウム、塩化アンモニ
ウム、ホウ酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水
素アンモニウムなどが好ましい。
ウム、ホウ酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水
素アンモニウムなどが好ましい。
なお、末端あるいは側鎖に非極性基を持つＬ−Ｌ−ＡＰ
Ｍとその光学異性体であるＬ−Ｄ−ＡＢＭの分離におい
ては充填剤への吸着もあるので、溶離液として非水溶媒
の添加による混合水溶液を用いた方が溶出を迅速に行な
う効果がある。
Ｍとその光学異性体であるＬ−Ｄ−ＡＢＭの分離におい
ては充填剤への吸着もあるので、溶離液として非水溶媒
の添加による混合水溶液を用いた方が溶出を迅速に行な
う効果がある。
非水溶媒としては水とよく混合する有機溶媒であれば特
に限定されるものではないが炭素数１から４のアルコー
ル類、アセトニトリル、アセトン。
に限定されるものではないが炭素数１から４のアルコー
ル類、アセトニトリル、アセトン。
ジオキサン、テトラヒドロフラン、ジメチルホルムアミ
ド等が好ましい。また上記水に添加する塩類、酸、アル
カリ、または非水溶媒としては検出方法として紫外線検
出器を用いるので紫外領域に吸収のないものまたはあっ
ても吸収の少ないものを用いるのが特に好ましい。
ド等が好ましい。また上記水に添加する塩類、酸、アル
カリ、または非水溶媒としては検出方法として紫外線検
出器を用いるので紫外領域に吸収のないものまたはあっ
ても吸収の少ないものを用いるのが特に好ましい。
以上の説明から明らかなように本発明によればこれまで
の反応過穆を用いる分離検出方法に比較してはるかく簡
便、迅速ＫＬ−Ｌ−ムＰＭとその光学異性体であるＬ−
Ｄ−ＡＰＭその他共存成分を分離検出することができる
ところに特徴がある。
の反応過穆を用いる分離検出方法に比較してはるかく簡
便、迅速ＫＬ−Ｌ−ムＰＭとその光学異性体であるＬ−
Ｄ−ＡＰＭその他共存成分を分離検出することができる
ところに特徴がある。
〈発明の効果〉
以上の説明から明らかなように本発明によれば（１１簡
便、迅速にＬ−Ｌ−ＡＰＭ合成における製造工程の正常
化を確認することができ、（２１Ｌ−Ｌ−ムＰＭの商品
制置を高めることができる。
便、迅速にＬ−Ｌ−ＡＰＭ合成における製造工程の正常
化を確認することができ、（２１Ｌ−Ｌ−ムＰＭの商品
制置を高めることができる。
以下、実施例によって本発明を説明する。
実権例１
１、−Ｉ、−ムＰＭ、Ｌ−Ｄ−ＡＰＭ及びＬ−７エニル
アラニン（以下ｐｈ・と略す）の混合液５ｄを試料液と
する。次に高速液体クロマトグラフィーの装置としてポ
ンプ部、注入部を構成する東洋可違工業株式会社製ＨＬ
、Ｏ−８０５Ｄ０検出器には東洋１達工業株式会社製紫
外可視分光検出器ＴＩ Ｖ −８ｍｏｄｅｌ １１を用
い、測定波長をｔｒｖ２５４ｎｍＫ設定し、カラム充填
剤として、東洋曹達工業株式会社製高速イオン交換クロ
マトグラフィー用充填カラムＴＥｉＫｇｅ１８ＣＫ（強
力チオンゲル、交換容量４２ ｍｅｑ／ｇ以上 粒径５
μｍ、内径６鴫 長さ１５倒）とし、溶離液に１２Ｍク
エン酸緩衝液を使用しｐＨ値をａ２８に設定し、非水溶
媒としてメタノールを２００ｄ／ｌの割合で添加し、流
速１ ｓｄ／ ｍ１ｎｅ圧力５Ｏｋｐ／ｃｄで通液しツ
ツ該試料液を高速液体クロマトグラフィーの装置に注入
し分離、検出を行なったところＰｈｅは１０分の時間帯
に溶出しＩ、−Ｌ−ムＰＭ２７分、Ｌ−Ｄ−ＡＰＭは２
０分く溶出し、分離、検出された。
アラニン（以下ｐｈ・と略す）の混合液５ｄを試料液と
する。次に高速液体クロマトグラフィーの装置としてポ
ンプ部、注入部を構成する東洋可違工業株式会社製ＨＬ
、Ｏ−８０５Ｄ０検出器には東洋１達工業株式会社製紫
外可視分光検出器ＴＩ Ｖ −８ｍｏｄｅｌ １１を用
い、測定波長をｔｒｖ２５４ｎｍＫ設定し、カラム充填
剤として、東洋曹達工業株式会社製高速イオン交換クロ
マトグラフィー用充填カラムＴＥｉＫｇｅ１８ＣＫ（強
力チオンゲル、交換容量４２ ｍｅｑ／ｇ以上 粒径５
μｍ、内径６鴫 長さ１５倒）とし、溶離液に１２Ｍク
エン酸緩衝液を使用しｐＨ値をａ２８に設定し、非水溶
媒としてメタノールを２００ｄ／ｌの割合で添加し、流
速１ ｓｄ／ ｍ１ｎｅ圧力５Ｏｋｐ／ｃｄで通液しツ
ツ該試料液を高速液体クロマトグラフィーの装置に注入
し分離、検出を行なったところＰｈｅは１０分の時間帯
に溶出しＩ、−Ｌ−ムＰＭ２７分、Ｌ−Ｄ−ＡＰＭは２
０分く溶出し、分離、検出された。
実施例２
実施例１で使用した同様な装置を使用し、カラム充填剤
として東洋曹達工業株式会社製高速イオン交換クロマト
グラフィー用充填カラムＴ８Ｋｇｅ１８Ｃｘ（強力チオ
ンゲル、交換容量４、２ ｍｅｑ／９以上、粒径５μｍ
、内径６鵡よりＸ１５Ｑ１１）を用い、溶離液ＫｌｌＬ
２Ｍクエン酸緩衝液を使用しｐＨ値をａ２８に設定し、
非水溶媒としてアセトニトリルを１００ｓｄ／４の割合
で添加し実施例１で使用したと同様な試料液を流速１ｒ
ｒｔ／ｍｉｎ、圧力５ Ｇ １ｃｐ／ｃｄで通液してい
る該クロマトグラフ装置に注入して分離、検出を行なっ
た結果、Ｐｈｏは７分の時間帯に溶出し、Ｉ、−！Ｊ−
ＡＰＭは２０分。
として東洋曹達工業株式会社製高速イオン交換クロマト
グラフィー用充填カラムＴ８Ｋｇｅ１８Ｃｘ（強力チオ
ンゲル、交換容量４、２ ｍｅｑ／９以上、粒径５μｍ
、内径６鵡よりＸ１５Ｑ１１）を用い、溶離液ＫｌｌＬ
２Ｍクエン酸緩衝液を使用しｐＨ値をａ２８に設定し、
非水溶媒としてアセトニトリルを１００ｓｄ／４の割合
で添加し実施例１で使用したと同様な試料液を流速１ｒ
ｒｔ／ｍｉｎ、圧力５ Ｇ １ｃｐ／ｃｄで通液してい
る該クロマトグラフ装置に注入して分離、検出を行なっ
た結果、Ｐｈｏは７分の時間帯に溶出し、Ｉ、−！Ｊ−
ＡＰＭは２０分。
Ｌ−Ｄ−ムＰＭは２２分に溶出し分離検出された。
実施例５
実施例１で使用したと同様な装置を使用し、実施例２で
使用したと同様な充填カラムを用いて溶離液Ｋ１２Ｍク
エン酸緩衝液を使用し、ｐＦＬをに６５に設定しアセト
ニトリルをｓ ａ −／Ｌｆ）割合で添加し流速１ ｄ
／ ｍｉｎ 、圧カフ ５１９／ｃ＋ｄで通液してお
き実施例１で使用したと同様な試料液を注入して分離検
出を行なった。この結果のクロットゲラムを第１図に示
す。第１図から明らかなように該試料液のＬ−Ｉｔ−Ａ
ＰＭとＬ−Ｄ−ＡＰＭ及びｒｈｏが２Ｓ分以内と短時間
かつ簡単に分離検出することができた。
使用したと同様な充填カラムを用いて溶離液Ｋ１２Ｍク
エン酸緩衝液を使用し、ｐＦＬをに６５に設定しアセト
ニトリルをｓ ａ −／Ｌｆ）割合で添加し流速１ ｄ
／ ｍｉｎ 、圧カフ ５１９／ｃ＋ｄで通液してお
き実施例１で使用したと同様な試料液を注入して分離検
出を行なった。この結果のクロットゲラムを第１図に示
す。第１図から明らかなように該試料液のＬ−Ｉｔ−Ａ
ＰＭとＬ−Ｄ−ＡＰＭ及びｒｈｏが２Ｓ分以内と短時間
かつ簡単に分離検出することができた。
実施例４
Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ、Ｌ−Ｄ−ムＰＭ及びジケトビヘラシン
（以下ＤＫＰ ト略ｆ ）アスパルチルフエニルアラニ
ン（以下ＡＰと略す）Ｌ−アスパラギン酸（以下Ａ１１
ｌ）と略す）Ｌ−７エニルアラニン（以下Ｐｈｅと略す
）の混合液５−を試料液とする。
（以下ＤＫＰ ト略ｆ ）アスパルチルフエニルアラニ
ン（以下ＡＰと略す）Ｌ−アスパラギン酸（以下Ａ１１
ｌ）と略す）Ｌ−７エニルアラニン（以下Ｐｈｅと略す
）の混合液５−を試料液とする。
実施例１で使用したと同様な装置を使用し紫外線検出器
の波長を２１０ｎｍ設定し、同様な充填カラムを用いて
溶離液ｉ（（Ｌ ２ Ｍ ＩＪン酸緩衝液を使用し、ｐ
Ｈ値を４０１（設定し、非水溶媒としてアセトニトリル
を１０（ｌｄ／４の割合で添加し、流速１ｇｔ／ｍｉｎ
、圧カフ０ｋｑ／ｄｔで通液しておき該試料液を該ク
ロマトグラム装置に注入し分離、検出を行なった。その
結果Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ、 Ｌ−Ｄ−ＡＰＭはそれぞれ８分
、１１分の時間帯に溶出し２分の時間帯ＶｃＤＫＰ、Ａ
ｓｊ及びＡＰが溶出し６分の時間帯にＰｈｓが溶出し良
好なりロマトグラムが得られた。
の波長を２１０ｎｍ設定し、同様な充填カラムを用いて
溶離液ｉ（（Ｌ ２ Ｍ ＩＪン酸緩衝液を使用し、ｐ
Ｈ値を４０１（設定し、非水溶媒としてアセトニトリル
を１０（ｌｄ／４の割合で添加し、流速１ｇｔ／ｍｉｎ
、圧カフ０ｋｑ／ｄｔで通液しておき該試料液を該ク
ロマトグラム装置に注入し分離、検出を行なった。その
結果Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ、 Ｌ−Ｄ−ＡＰＭはそれぞれ８分
、１１分の時間帯に溶出し２分の時間帯ＶｃＤＫＰ、Ａ
ｓｊ及びＡＰが溶出し６分の時間帯にＰｈｓが溶出し良
好なりロマトグラムが得られた。
実施例５
実施例１で使用したと同様な装置が使用し、高速液体ク
ロマトグラフィーの充填カラムとして、交換容量が１５
ミリ当量／ｇのシリカベースの充填剤を内径４６謡、長
さ２５３のステンレスカラムに充填した充てんカラムを
用いて溶離液に（ＬＯ２Ｍクエン酸緩衝を使用し％ｐａ
’＆ｔｓに設定し流速１ ａｔ ／ ｍｉｎ 、圧カフ
５Ｉ１９／ｃＩｉで通液しておき実施例１で使用したと
同様な試料液を注入して分離、検出を行なった。その結
果Ｐｈｅは１０分の時間帯に溶出し、Ｉ、−Ｌ−ＡＰＭ
、 Ｌ−Ｄ−ＡＰＭはそれぞれ１５分、１９分の時間帯
に溶出し分離。
ロマトグラフィーの充填カラムとして、交換容量が１５
ミリ当量／ｇのシリカベースの充填剤を内径４６謡、長
さ２５３のステンレスカラムに充填した充てんカラムを
用いて溶離液に（ＬＯ２Ｍクエン酸緩衝を使用し％ｐａ
’＆ｔｓに設定し流速１ ａｔ ／ ｍｉｎ 、圧カフ
５Ｉ１９／ｃＩｉで通液しておき実施例１で使用したと
同様な試料液を注入して分離、検出を行なった。その結
果Ｐｈｅは１０分の時間帯に溶出し、Ｉ、−Ｌ−ＡＰＭ
、 Ｌ−Ｄ−ＡＰＭはそれぞれ１５分、１９分の時間帯
に溶出し分離。
検出することができた。
比較例１
高速液体クロマトグラフィーの溶離液のクエン酸緩衝液
のｐＨ′ｔｔ五９にする以外は実施例３と同様な操作を
行なった結果、Ｐｈｓが４０分の時間帯に溶出しＬ−Ｌ
−ムＰＭとＬ−Ｄ−ムＰＭは充填カラムに吸着し溶出し
なかりた。
のｐＨ′ｔｔ五９にする以外は実施例３と同様な操作を
行なった結果、Ｐｈｓが４０分の時間帯に溶出しＬ−Ｌ
−ムＰＭとＬ−Ｄ−ムＰＭは充填カラムに吸着し溶出し
なかりた。
比較例２
高速液体クロマトグラフィーの充填カラムとして交換容
量が１１０８ミリ当ｔ／ｇのポリスチレンペースの充填
剤を内径４．６ ｍｓ 、長さ１５ｃｍのステンレスカ
ラムに充填した充填カラムを使用した以外は実施例５と
同様な操作を行なった結果、該試料液の３成分はいずれ
も溶出が早すぎて、分離できなかつたつ 比較例３ 高速液体クロマトグラフィーの溶離液としてアセトニト
リルの添加量を３００ｍ／ｌの割合とする以外は実施例
４と同様な操作を行なった結果、Ｌ−Ｌ−ＡＰＭとＩ’
ｈｅが同一の時間帯に溶出し分離できなかった。
量が１１０８ミリ当ｔ／ｇのポリスチレンペースの充填
剤を内径４．６ ｍｓ 、長さ１５ｃｍのステンレスカ
ラムに充填した充填カラムを使用した以外は実施例５と
同様な操作を行なった結果、該試料液の３成分はいずれ
も溶出が早すぎて、分離できなかつたつ 比較例３ 高速液体クロマトグラフィーの溶離液としてアセトニト
リルの添加量を３００ｍ／ｌの割合とする以外は実施例
４と同様な操作を行なった結果、Ｌ−Ｌ−ＡＰＭとＩ’
ｈｅが同一の時間帯に溶出し分離できなかった。
比較例４
高速液体クロマトグラフィーの溶離液として（Ｌ ２
Ｍ ＩＪン酸緩衝液のｐＨａ２にする以外は実施例４と
同様な操作を行なったところ該試料液の各成分は早く溶
出し分離できなかった。
Ｍ ＩＪン酸緩衝液のｐＨａ２にする以外は実施例４と
同様な操作を行なったところ該試料液の各成分は早く溶
出し分離できなかった。
第１図は本発明の実施例３よりＬ−Ｌ−ＡＰｊＭとその
光学異性体であるＬ−Ｄ−ＡＦＭ及びＰｈｅとを分離、
検出して得られたクロマトグラムを示す図面である。 １、 ＴＪ−フェニルアラニン ２ α−も一アスパルチルーＤ−フェニルアラニンメチ
ルエステル 五 α−も一アスパルチルーＬ−フェニルアラニンメチ
ルエステル 特許出顕人 東洋１達工業株式会社 図面の浄書（内容に変更なし） 第１図 ６補正の対象 手続補正書 昭和６０年 １月２８日 特許庁長官 志 賀 学 殿 １事件の表示 昭和５９年特許願第２２８８５６号 ２発明の名称 α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンアルキル
エステルの分離方法 ３補正をする者 事件との関係 特許出願人 東洋曹達工業株式会社 特許情、報部 電話番号（５８５）３３１１ ４補正命令の日付 自 発 ７補正の内容 明細書の浄書および適正な図面 （内容に変更なし）
光学異性体であるＬ−Ｄ−ＡＦＭ及びＰｈｅとを分離、
検出して得られたクロマトグラムを示す図面である。 １、 ＴＪ−フェニルアラニン ２ α−も一アスパルチルーＤ−フェニルアラニンメチ
ルエステル 五 α−も一アスパルチルーＬ−フェニルアラニンメチ
ルエステル 特許出顕人 東洋１達工業株式会社 図面の浄書（内容に変更なし） 第１図 ６補正の対象 手続補正書 昭和６０年 １月２８日 特許庁長官 志 賀 学 殿 １事件の表示 昭和５９年特許願第２２８８５６号 ２発明の名称 α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンアルキル
エステルの分離方法 ３補正をする者 事件との関係 特許出願人 東洋曹達工業株式会社 特許情、報部 電話番号（５８５）３３１１ ４補正命令の日付 自 発 ７補正の内容 明細書の浄書および適正な図面 （内容に変更なし）
Claims (1)
- １、液体クロマトグラフィーにおいて、α−Ｌ−アスパ
ルチル−Ｌ−フェニルアラニンアルキルエステル含有液
中の光学異性体およびその他の共存成分を分離するに際
し、充填剤として交換容量が充填剤１ｇ当り０．１ミリ
当量以上のイオン交換容量を持つイオン交換体、溶離液
として、ｐＨ４〜８の水溶液または非水溶媒を２５容量
％以下含む水との混合溶液を用いることを特徴とするα
−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンアルキルエ
ステルの分離方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP22885684A JPS61109799A (ja) | 1984-11-01 | 1984-11-01 | α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニンアルキルエステルの分離方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP22885684A JPS61109799A (ja) | 1984-11-01 | 1984-11-01 | α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニンアルキルエステルの分離方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61109799A true JPS61109799A (ja) | 1986-05-28 |
| JPH0572399B2 JPH0572399B2 (ja) | 1993-10-12 |
Family
ID=16882949
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP22885684A Granted JPS61109799A (ja) | 1984-11-01 | 1984-11-01 | α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニンアルキルエステルの分離方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS61109799A (ja) |
-
1984
- 1984-11-01 JP JP22885684A patent/JPS61109799A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0572399B2 (ja) | 1993-10-12 |
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