JPS6114798B2 - - Google Patents
Info
- Publication number
- JPS6114798B2 JPS6114798B2 JP9108583A JP9108583A JPS6114798B2 JP S6114798 B2 JPS6114798 B2 JP S6114798B2 JP 9108583 A JP9108583 A JP 9108583A JP 9108583 A JP9108583 A JP 9108583A JP S6114798 B2 JPS6114798 B2 JP S6114798B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- epoxide
- reaction
- raw material
- halogenated
- olefin
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
産業上の利用分野
本発明は微生物を利用してハロゲン化オレフイ
ンから相当するハロゲン化エポキシドを製造する
方法に関するものである。 従来技術 エポキシド化合物は合成樹脂、界面活性剤、医
薬、農薬をはじめとする種々の有機化学製品の製
造原料或は中間体として広範囲に利用されてい
る。 微生物を利用してエポキシドを製造する方法と
しては、Nocardia属、Mycobacterium属、
Methylococcus属、Methylosinus属、
Pseudomonas属、Corynebacterium属、
Methylobacterium属、Candida属、に属する微生
物による直鎖状オレフインからのエポキシドの生
成が知られているが、ハロゲン化エポキシドの生
産については報告がみられない。 発明の目的 本発明は上掲の微生物のうちノカルデイア属に
属するエポキシド生産菌がハロゲン化オレフイン
からも相当するハロゲン化エポキシドを生産し得
ることの知見に基いてなされたものであつて、ノ
カルデイア属に属するエポキシド生産能を有する
微生物を利用して、ハロゲン化オレフインから相
当するハロゲン化エポキシドを製造する方法を提
供することを目的とする。以下本発明を詳しく説
明する。 発明の構成と効果 本発明の構成上の特徴は、ノカルデイア属に属
するエポキシド生産能を有する微生物を、ハロゲ
ン化オレフインに好気的条件下で作用させて、生
成するハロゲン化エポキシドを分離、採取するこ
とにある。 本発明で用いられる微生物はノカルデイア属に
属するものであつて、Nocardia corallinaを例示
し得る。此の菌は工業技術院微生物工業技術研究
所にFERA−Ｐ−4094号の受理番号で、昭和52年
６月15日付けで保管されており、其の菌学的性質
については特公昭56−40号公報に詳記されてい
る。 本発明において上記微生物を利用してエポキシ
ドを生産するための反応基質に用いられるハロゲ
ン化オレフイン（以下原料オレフインと称する）
としてはハロゲン化された直鎖状又は分枝状オレ
フイン（但し二重結合の位置がいづれかの未端炭
素原子からα、β、またはγ位のオレフイン）を
含み、例えばアリルクロライド、アリルブロマイ
ド、アリルイオダイド、３−クロロ−１−ブテ
ン、３−クロロ−２メチル−プロペン、１−クロ
ロ−２−ブテン、２−フルオロプロペン、３・
３・３−トリフルオロ−プロペン等を例示し得
る。 本発明ではこれらの原料オレフインは、単独ま
たは二種以上の混合物として、或いは飽和炭化水
素や芳香族炭化水素のようなオレフイン以外の炭
化水素との混合物として反応基質に用いられる。 本発明において上記原料オレフインに前記微生
物を作用させるには、例えば、(a)該微生物を予め
培養増殖して得られる菌体に原料オレフインを好
気的条件下で接触させて反応させる方法、(b)上記
微生物を原料オレフインもしくは原料オレフイン
と他の炭素源に窒素源、無機塩類、更には必要に
応じて生長促進物質を添加してなる栄養培地中で
好気的条件下で培養させる方法を適用し得る。 上記(a)の増殖菌体に原料オレフインを接触させ
て反応させる方法では、まず炭素源として糖質例
えばグルコース、シユクロース、糖蜜、澱粉加水
分解物、セルロース加水分解物、炭化水素例えば
プロパン、ブタン、ドデカン、テトラデカン及び
そのほか酢酸の如き菌体増殖作用の高いものを用
い、これに塩化アンモニウム、硫酸アンモニウ
ム、燐酸アンモニウム、硝酸アンモニウム、尿
素、アンモニア水、アミノ酸及びその他の資化性
有機窒素化合物のような窒素源、燐酸カリウム、
燐酸ナトリウム、硫酸マグネシウム、硫酸マンガ
ン、硫酸第１鉄、塩化第２鉄、塩化カルシウム、
塩化マンガンのごとき無機塩類、更には必要に応
じてビタミン類、酵母エキス、コーンステイープ
リカーのごとき生長促進物質を添加した培地に、
ノカルデイア属に属するエポキシド生産菌の種菌
を接種し、好気的条件下で培養して菌体を増殖さ
せる。このようにして得られた菌体培養物に直接
か、又は該培養物から分離した菌体の懸濁液もし
くは菌体を固定化したものに、原料オレフイン及
び空気、酸素、酸素富化ガスのような酸素含有ガ
スを供給して反応させる。 反応はPH５〜９、好ましくは６〜８のPH領域で
20〜50℃、好ましくは25〜45℃の温度下で１〜６
日間行う。反応は通常常圧下で行われるが、加圧
化で行うことによりエポキシドの生産性を向上さ
せることも出来る。なお反応中に菌体増殖に用い
た炭素源、窒素源、更にはその他の成分を適宜添
加することにより、菌体と原料オレフインとの反
応の活性を維持し或いは高めることが出来る。反
応は回分方式又は連続方式のいずれでも実施し得
る。原料オレフインの供給は回分反応方式の場
合、全量を反応開始時に添加するほか反応中に連
続的に又は間掲的に供給することも可能である。 上記反応により反応液中に生成したエポキシド
は相分離、抽出、蒸溜等の公知の手法を適用して
分離、採取する。 次ぎに前記(b)の培養による方法は、上記(a)の方
法における菌体増殖時に原料オレフインを添加し
一段階でエポキシドの生産を図るものである。培
養条件（PH、温度、圧力等）培養方式及び生成し
たエポキシドの分離、採取は前記(a)の反応条件、
反応方式及び分離、採取方法が同様に用い得る。 本発明により得られるエポキシドはさきに言及
した従来知られている種々の用途に供することが
出来る。 以下実施例により本発明を更に具体的に説明す
る。 実施例 １ Nocardia corallina Ｂ−276（工業技術院微生
物工業技術研究所寄託番号FERM−Ｐ−4094）
の３白金耳をNBG培地（オキソイド社製、“ラブ
レンコ”パウダー、コードL29を10ｇ、バクテリ
オロジカルペプトン、コードL37を10ｇ、グルコ
ース10ｇ、塩化ナトリウム５ｇに脱イオン水を加
えて1000mlとし、1N苛性ソーダ水溶液でPH7.5と
した後、オートクレーブ中で120℃、15分加熱殺
菌した液体培地）100mlを収容した500ml容積の坂
口フラスコに接種し、30℃で48時間振盪培養
（150回／分）した。この培養により生成した菌体
を0.01モル濃度の燐酸緩衝液（PH7.5）で１回洗
浄し、次いで下記に示す反応培地で１回洗浄後、
乾燥菌体濃度として3.8mg/mlとなる様に、下記の
反応培地に再懸濁して菌懸濁液を調製した。 反応培地 K2HPO4 1.74ｇ MgSO4・7H2O 1.50ｇ FeSO4・7H2O 50 mg 脱イオン水 １ PH 8.0 （PHは2N硫酸水溶液で調整した） 該菌懸濁液20ml、グルコース１ml（100mg/ml水
溶液）を内容500mlの坂口フラスコに入れて密栓
した後、ゴムパッキンをつけた注入口より第１表
に示される各原料オレフインを添加した。なお、
室温で液体の原料オレフインの場合は100μ１宛
を、室温で気体の場合は40ml（常温、常圧下）宛
を上記フラスコ内にそれぞれ圧入した。次いで30
℃、150回／分で往復振盪培養して24時間後、フ
ラスコ内の反応液上の気相１ml、反応液から１μ
及び残りの反応液を50mlジエチルエーテルで抽
出したエーテル層から１μをサンプリングして
分析した。分析にはPorapakQ（ウオーターズ・
アソシエーツ社製）80〜100メツシユを充填した
内径３mm、長さ２ｍのガラスカラムを備えた、日
立163型イオン化炎ガスクロマトグラフを使用し
た。反応により生成した生成物はガスクロマトグ
ラフで測定し、保持時間及びガスクロマトグラフ
に連結した質量分析計で測定した質量スペクトル
を、標準試料の保持時間及び質量スペクトルと比
較し、更に生成物を塩酸酸性下で加水分解される
ことを調べて相当するエポキシドであることを確
認した。 第１表に原料オレフインの種類と相当するエポ
キシドの生成量を示す。エポキシドの生成量はガ
スクロマトグラフイーにより定量し反応液中の濃
度として表示した。 【表】
ンから相当するハロゲン化エポキシドを製造する
方法に関するものである。 従来技術 エポキシド化合物は合成樹脂、界面活性剤、医
薬、農薬をはじめとする種々の有機化学製品の製
造原料或は中間体として広範囲に利用されてい
る。 微生物を利用してエポキシドを製造する方法と
しては、Nocardia属、Mycobacterium属、
Methylococcus属、Methylosinus属、
Pseudomonas属、Corynebacterium属、
Methylobacterium属、Candida属、に属する微生
物による直鎖状オレフインからのエポキシドの生
成が知られているが、ハロゲン化エポキシドの生
産については報告がみられない。 発明の目的 本発明は上掲の微生物のうちノカルデイア属に
属するエポキシド生産菌がハロゲン化オレフイン
からも相当するハロゲン化エポキシドを生産し得
ることの知見に基いてなされたものであつて、ノ
カルデイア属に属するエポキシド生産能を有する
微生物を利用して、ハロゲン化オレフインから相
当するハロゲン化エポキシドを製造する方法を提
供することを目的とする。以下本発明を詳しく説
明する。 発明の構成と効果 本発明の構成上の特徴は、ノカルデイア属に属
するエポキシド生産能を有する微生物を、ハロゲ
ン化オレフインに好気的条件下で作用させて、生
成するハロゲン化エポキシドを分離、採取するこ
とにある。 本発明で用いられる微生物はノカルデイア属に
属するものであつて、Nocardia corallinaを例示
し得る。此の菌は工業技術院微生物工業技術研究
所にFERA−Ｐ−4094号の受理番号で、昭和52年
６月15日付けで保管されており、其の菌学的性質
については特公昭56−40号公報に詳記されてい
る。 本発明において上記微生物を利用してエポキシ
ドを生産するための反応基質に用いられるハロゲ
ン化オレフイン（以下原料オレフインと称する）
としてはハロゲン化された直鎖状又は分枝状オレ
フイン（但し二重結合の位置がいづれかの未端炭
素原子からα、β、またはγ位のオレフイン）を
含み、例えばアリルクロライド、アリルブロマイ
ド、アリルイオダイド、３−クロロ−１−ブテ
ン、３−クロロ−２メチル−プロペン、１−クロ
ロ−２−ブテン、２−フルオロプロペン、３・
３・３−トリフルオロ−プロペン等を例示し得
る。 本発明ではこれらの原料オレフインは、単独ま
たは二種以上の混合物として、或いは飽和炭化水
素や芳香族炭化水素のようなオレフイン以外の炭
化水素との混合物として反応基質に用いられる。 本発明において上記原料オレフインに前記微生
物を作用させるには、例えば、(a)該微生物を予め
培養増殖して得られる菌体に原料オレフインを好
気的条件下で接触させて反応させる方法、(b)上記
微生物を原料オレフインもしくは原料オレフイン
と他の炭素源に窒素源、無機塩類、更には必要に
応じて生長促進物質を添加してなる栄養培地中で
好気的条件下で培養させる方法を適用し得る。 上記(a)の増殖菌体に原料オレフインを接触させ
て反応させる方法では、まず炭素源として糖質例
えばグルコース、シユクロース、糖蜜、澱粉加水
分解物、セルロース加水分解物、炭化水素例えば
プロパン、ブタン、ドデカン、テトラデカン及び
そのほか酢酸の如き菌体増殖作用の高いものを用
い、これに塩化アンモニウム、硫酸アンモニウ
ム、燐酸アンモニウム、硝酸アンモニウム、尿
素、アンモニア水、アミノ酸及びその他の資化性
有機窒素化合物のような窒素源、燐酸カリウム、
燐酸ナトリウム、硫酸マグネシウム、硫酸マンガ
ン、硫酸第１鉄、塩化第２鉄、塩化カルシウム、
塩化マンガンのごとき無機塩類、更には必要に応
じてビタミン類、酵母エキス、コーンステイープ
リカーのごとき生長促進物質を添加した培地に、
ノカルデイア属に属するエポキシド生産菌の種菌
を接種し、好気的条件下で培養して菌体を増殖さ
せる。このようにして得られた菌体培養物に直接
か、又は該培養物から分離した菌体の懸濁液もし
くは菌体を固定化したものに、原料オレフイン及
び空気、酸素、酸素富化ガスのような酸素含有ガ
スを供給して反応させる。 反応はPH５〜９、好ましくは６〜８のPH領域で
20〜50℃、好ましくは25〜45℃の温度下で１〜６
日間行う。反応は通常常圧下で行われるが、加圧
化で行うことによりエポキシドの生産性を向上さ
せることも出来る。なお反応中に菌体増殖に用い
た炭素源、窒素源、更にはその他の成分を適宜添
加することにより、菌体と原料オレフインとの反
応の活性を維持し或いは高めることが出来る。反
応は回分方式又は連続方式のいずれでも実施し得
る。原料オレフインの供給は回分反応方式の場
合、全量を反応開始時に添加するほか反応中に連
続的に又は間掲的に供給することも可能である。 上記反応により反応液中に生成したエポキシド
は相分離、抽出、蒸溜等の公知の手法を適用して
分離、採取する。 次ぎに前記(b)の培養による方法は、上記(a)の方
法における菌体増殖時に原料オレフインを添加し
一段階でエポキシドの生産を図るものである。培
養条件（PH、温度、圧力等）培養方式及び生成し
たエポキシドの分離、採取は前記(a)の反応条件、
反応方式及び分離、採取方法が同様に用い得る。 本発明により得られるエポキシドはさきに言及
した従来知られている種々の用途に供することが
出来る。 以下実施例により本発明を更に具体的に説明す
る。 実施例 １ Nocardia corallina Ｂ−276（工業技術院微生
物工業技術研究所寄託番号FERM−Ｐ−4094）
の３白金耳をNBG培地（オキソイド社製、“ラブ
レンコ”パウダー、コードL29を10ｇ、バクテリ
オロジカルペプトン、コードL37を10ｇ、グルコ
ース10ｇ、塩化ナトリウム５ｇに脱イオン水を加
えて1000mlとし、1N苛性ソーダ水溶液でPH7.5と
した後、オートクレーブ中で120℃、15分加熱殺
菌した液体培地）100mlを収容した500ml容積の坂
口フラスコに接種し、30℃で48時間振盪培養
（150回／分）した。この培養により生成した菌体
を0.01モル濃度の燐酸緩衝液（PH7.5）で１回洗
浄し、次いで下記に示す反応培地で１回洗浄後、
乾燥菌体濃度として3.8mg/mlとなる様に、下記の
反応培地に再懸濁して菌懸濁液を調製した。 反応培地 K2HPO4 1.74ｇ MgSO4・7H2O 1.50ｇ FeSO4・7H2O 50 mg 脱イオン水 １ PH 8.0 （PHは2N硫酸水溶液で調整した） 該菌懸濁液20ml、グルコース１ml（100mg/ml水
溶液）を内容500mlの坂口フラスコに入れて密栓
した後、ゴムパッキンをつけた注入口より第１表
に示される各原料オレフインを添加した。なお、
室温で液体の原料オレフインの場合は100μ１宛
を、室温で気体の場合は40ml（常温、常圧下）宛
を上記フラスコ内にそれぞれ圧入した。次いで30
℃、150回／分で往復振盪培養して24時間後、フ
ラスコ内の反応液上の気相１ml、反応液から１μ
及び残りの反応液を50mlジエチルエーテルで抽
出したエーテル層から１μをサンプリングして
分析した。分析にはPorapakQ（ウオーターズ・
アソシエーツ社製）80〜100メツシユを充填した
内径３mm、長さ２ｍのガラスカラムを備えた、日
立163型イオン化炎ガスクロマトグラフを使用し
た。反応により生成した生成物はガスクロマトグ
ラフで測定し、保持時間及びガスクロマトグラフ
に連結した質量分析計で測定した質量スペクトル
を、標準試料の保持時間及び質量スペクトルと比
較し、更に生成物を塩酸酸性下で加水分解される
ことを調べて相当するエポキシドであることを確
認した。 第１表に原料オレフインの種類と相当するエポ
キシドの生成量を示す。エポキシドの生成量はガ
スクロマトグラフイーにより定量し反応液中の濃
度として表示した。 【表】
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ ノカルデイア属に属するエポキシド生産能を
有する微生物をハロゲン化オレフインに好気的条
件下で作用させ、生成するハロゲン化エポキシド
を分離、採取することを特徴とするエポキシドの
製造方法。 ２ ノカルデイア属に属するエポキシド生産能を
有する微生物がNocardia corallinaである特許請
求の範囲第１項記載の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9108583A JPS59216594A (ja) | 1983-05-24 | 1983-05-24 | 微生物によるエポキシドの製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9108583A JPS59216594A (ja) | 1983-05-24 | 1983-05-24 | 微生物によるエポキシドの製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS59216594A JPS59216594A (ja) | 1984-12-06 |
| JPS6114798B2 true JPS6114798B2 (ja) | 1986-04-21 |
Family
ID=14016677
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9108583A Granted JPS59216594A (ja) | 1983-05-24 | 1983-05-24 | 微生物によるエポキシドの製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS59216594A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH03194198A (ja) * | 1989-12-21 | 1991-08-23 | Mitsui Miike Mach Co Ltd | 軸流ファン |
-
1983
- 1983-05-24 JP JP9108583A patent/JPS59216594A/ja active Granted
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH03194198A (ja) * | 1989-12-21 | 1991-08-23 | Mitsui Miike Mach Co Ltd | 軸流ファン |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS59216594A (ja) | 1984-12-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Weijers et al. | Enantiomeric composition of lower epoxyalkanes produced by methane-, alkane-, and alkene-utilizing bacteria | |
| USRE30872E (en) | Process for producing 2-keto-L-gulonic acid | |
| JPH0440994B2 (ja) | ||
| JPS6114799B2 (ja) | ||
| JPS6114798B2 (ja) | ||
| DE3785537T2 (de) | Mikroorganismus und verfahren zur herstellung von oxydationsverbindungen mit diesem mikroorganismus. | |
| JPS6121078B2 (ja) | ||
| JPS6350996B2 (ja) | ||
| KR20050072066A (ko) | 미생물을 이용한 광학 활성 3－클로로－2－메틸－1,2－프로판디올의 제조 방법 | |
| JP4475407B2 (ja) | 微生物を利用した光学活性３−クロロ−２−メチル−１，２−プロパンジオールの製造方法 | |
| EP0380689B1 (en) | Process for preparing optically active 2-hydroxy-4-phenyl-3-butenoic acid | |
| JPS6269993A (ja) | 微生物処理による光学活性なα−モノクロルヒドリンの製法 | |
| JPH06303967A (ja) | 新規微生物及びこれを用いるヌートカトンの製造法 | |
| JPH0151999B2 (ja) | ||
| JPS6023839B2 (ja) | 微生物によるエポキシドの製造法 | |
| JPH067798B2 (ja) | 微生物によるエチレンの製造法 | |
| JPS6342518B2 (ja) | ||
| JP2563074B2 (ja) | 天然型β−フェネチルアルコールの製造法 | |
| JPS6314951B2 (ja) | ||
| JPS6262158B2 (ja) | ||
| JPS6350995B2 (ja) | ||
| JPS6122958B2 (ja) | ||
| JPS6337632B2 (ja) | ||
| JPS6350997B2 (ja) | ||
| JPH07184671A (ja) | ３−ヒドロキシ安息香酸の製造方法 |